Absztrakt:A Salvia L. nemzetséget (Lamiaceae) széles körben használják a gyógyszer- és élelmiszeriparban. Számos biológiai jelentőségű fajt széles körben alkalmaznak a hagyományos orvoslásban, köztük a Salvia aurea L.-t (syn. S. africana-lutea L.), amelyet hagyományos bőrfertőtlenítőként és sebek gyógyítására használnak; mindazonáltal ezeket a tulajdonságokat még nem validálták. Jelen tanulmány célja a S. aureus illóolaj (EO) jellemzése, kémiai összetételének feltárása és biológiai tulajdonságainak validálása. Az EO-t hidrodesztillációval nyertük, majd GC-FID-vel és GC-MS-sel analizáltuk. Különböző biológiai aktivitásokat értékeltek: a dermatofitákra és élesztőgombákra kifejtett gombaellenes hatást, valamint a gyulladáscsökkentő potenciált a nitrogén-monoxid (NO) termelés, valamint a COX-2 és az iNOS fehérjeszintek értékelésével. A sebgyógyulási tulajdonságokat a karcolás-gyógyulási teszttel értékelték, az öregedésgátló képességet pedig az öregedéssel összefüggő béta-galaktozidáz aktivitás alapján. A S. aurea EO-t főként 1,8-cineol (16,7 százalék), -pinén (11,9 százalék), cisz-tujon (10,5 százalék), kámfor (9,5 százalék) és (E)-kariofilén (9,3 százalék) jellemzi. százalék ). Az eredmények a dermatofiták növekedésének hatékony gátlását mutatták ki. Ezenkívül jelentősen csökkentette az iNOS/COX-2 fehérjeszintjét és ezzel egyidejűleg az NO felszabadulását. Ezenkívül az EO öregedésgátló potenciált és fokozott sebgyógyulást mutatott. Összességében ez a tanulmány kiemeli a Salvia aurea EO figyelemre méltó farmakológiai tulajdonságait, amelyeket tovább kell vizsgálni az innovatív, fenntartható és környezetbarát bőrtermékek kifejlesztése érdekében.

A cisztanche glikozidja növelheti az SOD aktivitását a szív- és májszövetekben, és jelentősen csökkentheti az egyes szövetek lipofuscin- és MDA-tartalmát, hatékonyan megkötve a különböző reaktív oxigéngyököket (OH-, H2O₂ stb.) és megvédheti a DNS-károsodást. OH-gyökök által. A Cistanche feniletanoid glikozidok erős szabad gyökfogó képességgel rendelkeznek, nagyobb redukáló képességgel rendelkeznek, mint a C-vitamin, javítják a SOD aktivitását a spermiumszuszpenzióban, csökkentik az MDA-tartalmat, és bizonyos védő hatást fejtenek ki a spermium membrán működésére. A cistanche poliszacharidok fokozhatják a SOD és a GSH-Px aktivitását a D-galaktóz által okozott kísérletileg öregedő egerek eritrocitáiban és tüdőszöveteiben, valamint csökkenthetik a tüdő és a plazma MDA- és kollagéntartalmát, valamint növelhetik az elasztintartalmat. jó eltávolító hatás a DPPH-ra, meghosszabbítja a hipoxia idejét öregedő egerekben, javítja a SOD aktivitását a szérumban, és késlelteti a tüdő fiziológiás degenerációját kísérletileg öregedő egerekben A sejtmorfológiai degenerációval a kísérletek kimutatták, hogy a Cistanche jó antioxidáns képességgel rendelkezik és potenciálisan gyógyszer lehet a bőröregedési betegségek megelőzésére és kezelésére. Ugyanakkor a Cistanche-ban található echinakozid jelentős mértékben képes megkötni a DPPH szabad gyököket, és képes megkötni a reaktív oxigénfajtákat és megakadályozza a szabad gyökök által kiváltott kollagén lebomlását, valamint jó helyreállító hatással van a timin szabad gyökök anionjainak károsodására.

Kattintson a Hol vásárolhatok Cistanche-ra

【További információ: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

1. Bemutatkozás

A gyógynövények számos érzékszervi tulajdonsággal rendelkeznek, amelyek hozzájárulnak a gyógyszer-, táplálkozás-, kozmetikai- és élelmiszeriparban elért magas értékükhöz. Másodlagos metabolitjaik új gyulladás- és gombaellenes szerek potenciális jelöltjeként jelennek meg [1–3]. Többek között a Lamiaceae családba tartozó aromás fajok illóolajokban való gazdagságukról ismertek, amelyek biológiai hatások széles skáláját mutatják, beleértve különösen a gyulladáscsökkentő és gombaellenes hatásokat [4–8]. Ennek a családnak az egyik legnagyobb és legfontosabb nemzetsége a Salvia L. nemzetség, amely közel 1000 fajt foglal magában [9]. Ezek egy részét világszerte termesztik kulináris és gyógyászati ​​célokra; valójában a népi gyógyászatban régóta alkalmazzák [10,11]. Sok faj fontos biológiai tulajdonságokkal rendelkezik, beleértve az antibakteriális, gombaellenes, antioxidáns, gyulladáscsökkentő, rákellenes, hipoglikémiás és antidemencia hatásokat [12,13].

Noha ezt a nemzetséget alaposan tanulmányozták, még mindig nagy az érdeklődés azon fajok iránt, amelyek termeszthetők (háziasíthatók) és egészségvédő tulajdonságokra használhatók. Köztudott, hogy a másodlagos metabolitok növényi/környezeti kölcsönhatások eredményei. Ezért a háziasított populáción végzett vizsgálatok releváns információkkal szolgálhatnak arról, hogy a másodlagos metabolitok és a hozzájuk kapcsolódó biológiai tulajdonságaik eltérnek-e a natív populációtól. Ezek közül a Salvia aurea L. (syn. S. africana-lutea L.) fontos aromás faj, amelyet gyógyászati ​​célokra használnak Nyugat-Fokföldön (Dél-Afrika), és a világ számos részén termesztik aromás/ gyógynövény, valamint dísznövény (városi bútor). Ez a faj egy szürkés-zöld elágazó, aromás cserje, amely körülbelül 2 méteresre nő meg, levélnyelei, illóolaját mirigyhártyákban halmozzák fel, és jellegzetesen nagy és aranybarna virágokat mutatnak [14]. Dél-Afrikában őshonos, ahol földrajzi elterjedése nyugat felé a Cape-félszigettől Namaqualand felé, valamint a Fok-foktól keletre a Port Alfred irányába, Kelet-Fok tartományban. Gyakran nevezik vagy "strandzsályának, homokos zsályának", ami a dűne környezetére jellemző, vagy "barna dűnezsályának" virágainak jellegzetes színe miatt [15,16].

A S. aurea a hagyományos gyógyászatban számos felhasználásáról ismert, nevezetesen gyulladáscsökkentő és gyógyhatású lemosószerként sebek és bőrelváltozások kezelésére. Ezenkívül ezt a fajt hörghurut és egyéb légúti megbetegedések gyógyítására is használják, megerősítve antimikrobiális tulajdonságait [17,18].

A dermatofiták, különösen a Trichophyton, Epidermophyton és Microsporum, gyakran társulnak felületes mikózisokhoz [19]; azonban az immunhiányos egyéneket érinthetik az invazív fertőzések [20].

E fertőzések során a gomba epitópok [21,22] a Toll-szerű receptorokhoz (TLR-ekhez) kötődnek, kiváltva egy pro-inflammatorikus állapot aktiválódását. Az ehhez az állapothoz kapcsolódó egyik legjelentősebb út a nukleáris faktor kappa B (NF-κB) útvonala, amely magában foglalja a gyulladásos citokinek szekrécióját és a gyulladást elősegítő enzimek, például az indukálható nitrogén-oxid-szintáz (iNOS) szintézisét. és a cikloxigenáz- 2 (COX-2) [23]. Ezek az enzimek felelősek a nitrogén-monoxid (NO) és prosztanoid termelésért [24,25].

Ezenkívül a dermatofiták gyakran bőrelváltozásokhoz vezetnek [26]. Ezért a sérült szövet regenerálásához sebgyógyulásra van szükség; ellenkező esetben a seb krónikussá válik [27].

A gombás fertőzések továbbra is kielégítetlen klinikai igényt jelentenek, mivel az etiológiai ágensek gyakran összefüggésbe hozhatók a terápiával szembeni rezisztenciával és relapszusokhoz vezetnek, míg a hagyományos gyógyszerek széles körben társulnak mellékhatásokkal [28]. Ezenkívül számos gombatörzsről ismert, hogy rezisztens a jelenlegi gombaellenes szerekkel szemben [29,30]. A gyulladáscsökkentő gyógyszereket számos mellékhatással is összefüggésbe hozták [31]. Ezért kulcsfontosságú olyan új stratégiák kidolgozása, amelyek a gombás fertőzések kezelésén túl a fertőzés során kiváltott gyulladáskeltő állapotot is képesek gátolni.

Hagyományos felhasználása miatt valószínű, hogy a S. aurea egyidejűleg gombaellenes és gyulladásgátló hatással is rendelkezik. Ezeket a tulajdonságokat azonban korlátozott számú tanulmány tesztelte a mikroorganizmusok szűk körén [32–34]. Továbbá tudomásunk szerint eddig egyetlen tanulmány sem számolt be a S. aureus sebgyógyító tulajdonságairól. Ezért ennek a munkának az a célja, hogy jellemezze a S. aureus (sandsalie) illóolaját, amikor Szardínia szigetének tengerparti részén háziasították. Figyelembe véve az olaj évszakonkénti és lokális változásait, ezt a területet a dél-afrikai Fynbos ökorégióval, a S. aurea őshonos területével való hasonlósága miatt választották ki [35,36]. Ezen túlmenően validáltunk néhány, ennek a fajnak tulajdonított hagyományos felhasználást, különösen azokat, amelyek az antimikrobiális, gyulladáscsökkentő és sebgyógyító felhasználásokhoz kapcsolódnak. Az öregedést gátló hatásokat is nyilvánosságra hozták, hogy tovább növeljék a növény iránti érdeklődést.

2. Eredmények

2.1. A S. aurea illóolaj kémiai összetétele

A S. aurea leveleit hidrodesztillációnak vetettük alá, így az illóolajat (EO) 0,54 tömegszázalékos (w/w) hozammal kaptuk. Az 1. táblázatban az EO-val azonosított vegyületeket és relatív százalékos arányukat elúciós sorrendjük szerint soroljuk fel. Harminchat vegyületet azonosítottak, összesen 98,8 százalékot.

Ezenkívül a vegyületek 47,4 százaléka oxigéntartalmú monoterpének, 28,8 százaléka szénhidrogén-monoterpének, 19,8 százaléka szénhidrogén-szeszkviterpének és 2,8 százaléka oxigénezett szeszkviterpének.

A kémiai elemzés kimutatta, hogy a S. aurea olaj legreprezentatívabb összetevői az 1,8 cineol (16,7 százalék), -pinén (11,9 százalék), cisz-tujon (10,5 százalék), kámfor (9,5 százalék), ( E)-kariofilén (9,3 százalék), transz-tujon (6,9 százalék), -pinén (4,7 százalék), kamfén (3,9 százalék) és -humulén (3,0 százalék).

2.2. A Salvia aurea gombaellenes hatása

A mikrohígításos húsleves módszert alkalmaztuk a gombaellenes aktivitás értékelésére, amint azt a 2. táblázat ismerteti. A Trichophyton mentagrophytes, a T. rubrum és az Epidermophyton floccosum a legérzékenyebb törzsek az EO aktivitásra. Pontosabban, az EO fungicid hatást mutatott a T. mentagrophytes és az E. floccosum esetében.

2.3. A S. aurea gyulladáscsökkentő hatása

A S. aurea gyulladáscsökkentő potenciáljának felmérésére a lipopoliszacharid (LPS) stimulált makrofág modellt alkalmaztuk. Ahogy az várható volt, LPS jelenlétében a makrofágok NO-t bocsátottak ki a táptalajba, ahol azt nitrátként ([NO]=43,03 ± 7,74 µM) mutatták ki. Érdekes módon az S. aurea EO dózisfüggően csökkentette az LPS által kiváltott NO-felszabadulást (1A. ábra, IC50=1.07 µL/mL). Az 1,25 µl/ml dózist a mögöttes mechanizmusok feltárására választották, mivel több mint 50 százalékkal gátolta az NO-termelést, nem volt toxicitása (1B. ábra), és olyan dózis volt, amely gátolta a dermatofiták növekedését.

Az LPS kötődése a Toll-like receptor 4-hez (TLR4) NF-κB nukleáris transzlokációt vált ki, ami következésképpen indukálható nitrogén-monoxid-szintáz (Nos2) és cikloxigenáz-2 (Ptgs2) expresszióját okozza [39]. Ezután értékeltük, hogy az EO potenciálisan szabályozhatja-e ezeknek a fehérjéknek a szintjét. Ahogy az várható volt, az LPS-sel kezelt makrofágokban mind az iNOS, mind a COX-2 fehérjeszintjének növekedését figyelték meg (2A–C. ábra). A S. aurea illóolaj jelenléte 1,25 µL/ml dózisban mindkét fehérje, különösen az iNOS fehérjeszintjének jelentős csökkenéséhez vezethet. Ezek az eredmények arra utalnak, hogy az illóolaj módosíthatja az NF-κB útvonalat.

2.4. A S. aurea illóolaj sebgyógyító tulajdonságai

Figyelembe véve a S. aurea sebkezelési felhasználását [18], azt feltételeztük, hogy az illóolaj fokozhatja a sebgyógyulást. Eredményeink valóban azt mutatják, hogy az EO elősegítette a sejtmigrációt (3A, B ábra), anélkül, hogy befolyásolta volna a sejtek életképességét (3C. ábra).

2.5. Az S. aurea esszenciális olaj öregedésgátló hatása

Figyelembe véve, hogy a S. aurea hagyományos felhasználása az életkorral összefüggő betegségek kezeléséhez kapcsolódik [40], megvizsgáltuk a sejtek öregedésére gyakorolt ​​hatását. Az etopozid-indukált sejt öregedésére támaszkodva megfigyeltük az öregedéssel összefüggő -galaktozidáz aktivitást (4A, B ábra). Érdekes módon, amikor az illóolajat a helyreállítási fázisban adták hozzá, ez a tulajdonság csökkent, ami arra utal, hogy az illóolaj megakadályozza a sejtek öregedését.

3. Megbeszélés

Ez a tanulmány a Szardínia szigetén háziasított S. aurea illóolaj profilját mutatja be. Beszámoltunk arról, hogy EO-ját 47,4 százalék oxigéntartalmú monoterpének, főként 1,8-cineol, cisz/transz-tujon és kámfor, 28,8 százalék szénhidrogén-monoterpének, főleg -pinén, és 19,8 százalék szénhidrogén-szeszkviterpének jellemezték. (E)-kariofilénnel és -humulénnel, míg az oxigéntartalmú szeszkviterpéneknek csak 2,8 százaléka.

Az irodalommal összehasonlítva egyértelmű minőségi és mennyiségi különbségek mutatkoznak a natív S. aurea EO-k összetételében. A jelentett főbb összetevők a -pinén, mircén, o-cimén, spatulenol és -eudesmol [32]. Ezen túlmenően ezek a változások tükröződnek a fő vegyületosztályok relatív százalékában. Itt jelentős csökkenést találtunk az oxigéntartalmú szeszkviterpénekben (2,8 százalék), míg a Western Cape régióban végzett két különböző tanulmányban 18,9 százalékot és 41,7 százalékot értek el[33,41].

Ez a kémiai különbség azonban nem volt váratlan, mivel egyes szerzők szerint ez a kémiai különbség nem volt váratlan, mivel egyes szerzők szerint nem csak a genetikai jellemzőktől függ, hanem a növény életciklusától, tenyészidejétől, betakarítási időszakától is. , a talaj tulajdonságai és a stresszt okozó anyagok[32, 41]

Különösen a S. aurea esetében találtunk következetes kémiai diverzitást a szezonalitás és a betakarítási terület szerint [32,41]. Lim Ah Tock és munkatársai, 2020, a Western Cape térség populációit vették figyelembe, és nagyfokú intraspecifikus variabilitást mutattak be, ami 47,8 százalékot tesz ki [32,33,41]. Ezen túlmenően elemezték ezen populációk HCA dendrogramját, ahol a S. aurea-ban egyértelmű klaszter-szeparáció jelent meg, amely felelős a jelentős kémiai eltérésekért [41].

Az említett, az EO kémiai összetételét befolyásoló tényezők mellett ismert, hogy a betakarítás utáni kezelés, a tárolási körülmények és az extrakciós módszerek is hozzájárulnak a kémiai változékonysághoz [42,43]. Ezt szem előtt tartva, az itt megfigyelt különbségek e tényezők bármelyikének tulajdoníthatók.

A közölt biológiai aktivitások megerősítik a S. aurea hagyományos felhasználási tulajdonságait, különösen a gyulladásos és mikrobiális fertőzésekkel kapcsolatosakat.

Beszámolunk arról, hogy az EO gátolta a dermatofiták szaporodását, ezzel igazolva a bőrbetegségek kezelésére való felhasználását [18]. A S. aurea illóolajról ismert, hogy hatásos a Brevibacterium [44], a Staphylococcus aureus, a Klebsiella pneumoniae, a Bacillus cereus és az Escherichia coli [32,33] ellen. Más tanulmányok a nem illékony kivonatok antimikrobiális hatásáról számoltak be [14,45,46]. A S. aurea EO-ban található főbb vegyületeket illetően azt számolták be, hogy az 1,8-cineol gyenge aktivitást mutatott a vizsgált dermatofiták ellen [47]. A növényi kórokozók gátlását az 1,8-cineol esetében is leírták [48–51]. A -pinén antimikrobiális potenciáljáról széles körben beszámoltak számos élesztő és fonalas gomba ellen is, beleértve a Trichophyton spp. [52–56]. A cisz-tujon, az illóolaj egyik releváns vegyülete, szintén antimikrobiális hatást fejtett ki [57,58]. Másrészt gyenge antimikrobiális aktivitásról számoltak be a kámfor esetében [59–61]. A szeszkviterpén-kariofilén antimikrobiális hatást fejtett ki különböző gombák és baktériumok ellen [3,62–64]. Ezek az eredmények azt sugallják, hogy a -pinén, a cisz-tujon és a -kariofilén jelentős mértékben hozzájárulhatnak a S. aurea esetében jelentett aktivitáshoz.

A S. aurea gyulladásos betegségek kezelésében való hagyományos alkalmazása miatt [18] ezen hatások validálása volt a célunk. Eredményeink valóban azt mutatják, hogy az EO gátolta a NO termelődését az LPS-stimulált makrofágokban, és ezzel egyidejűleg csökkentette az iNOS és a COX-2 fehérjeszintjét: két, a gyulladásos válaszreakció szempontjából fontos gyulladáskeltő enzimet. Legjobb tudomásunk szerint csak egy tanulmány foglalkozott a S. aurea gyulladásgátló potenciáljával a lipoxigenáz-5 aktivitás gátló képességének kimutatásával [33]. Az izolált vegyületeket illetően számos tanulmány számolt be az 1,8-cineol gyulladásgátló hatásáról [65–70], beleértve a klinikai vizsgálatokat is [71]. Ismeretes továbbá, hogy ez a vegyület gátolja a COX-2 aktivitását [66], és megakadályozza az NF-κB nukleáris transzlokációját [65,72]. A -pinén szignifikánsan csökkentette az NO-termelést mind az LPS-stimulált makrofágokban [73], mind az IL-1 -aktivált kondrocitákban [74]. A kemotaxis gátlást is kimutatta a neutrofilekben [75]. A kámfor gyulladáscsökkentő potenciáljáról széles körben beszámoltak mind in vivo, mind in vitro modellek segítségével [76–78]. - A kariofillén gyulladáscsökkentő hatást fejtett ki vastagbélgyulladásban [79], bőrsebkivágásban [80] és szepszisben [81] állatmodellekben. Más in vitro és in vivo megközelítések kiemelik e szeszkviterpén gyulladásgátló hatását [82,83]. Az eredmények arra utalnak, hogy a S. aurea-ban megfigyelt aktivitás ezen vegyületek jelenlétének köszönhető, amelyek szinergikusan hatnak.

Beszámoltunk arról, hogy a S. aurea illóolaja elősegítette a sebgyógyulást, ami igazolta a nyílt sebek kezelésére való felhasználását. Legjobb tudomásunk szerint egyetlen tanulmány sem számolt be a S. aurea sebgyógyító tulajdonságairól. Ami az izolált vegyületeket illeti, az 1,8-cineol elősegíti a sejtmigrációt sebmodellekben mind in vivo, mind in vitro [70,84,85]. Továbbá arról számoltak be, hogy a Teucrium polium subsp. kapitalizmus, gazdag -pinénben, fokozott sebgyógyulás [86]. A szeszkviterpén-kariofillén a sebgyógyulást is elősegítette egy bőrsebkivágási modellben [80]. Mindazonáltal más, kisebb mennyiségben található vegyületek is hozzájárulhatnak a jelentett aktivitáshoz. Valójában a -pinén elősegíti a sebgyógyulást a nyílt seb állatmodelljében [84]. Tekintettel arra, hogy az illóolajok összetett keverékek, elképzelhető, hogy a közölt sebgyógyító tulajdonságok több vegyület szinergikus hatásának tulajdoníthatók.

Első alkalommal számolunk be a S. aurea illóolaj öregedésgátló hatásáról. Valójában az illóolajjal kezelt sejtek csökkentett számú öregedéssel összefüggő -galaktozidáz-pozitív sejtet mutattak. Az izolált vegyületeket illetően kevés volt a hatásukról szóló tanulmány. Valójában a kámfor megakadályozza az öregedéssel összefüggő -galaktozidáz fokozott aktivitását [87]. Másrészt az 1,8-cineol, ennek az illóolajnak a fő vegyülete, a sejtek öregedését idézte elő [88]. Tekintettel a vizsgálatok szűkösségére, csak feltételezhetjük, hogy a közölt aktivitás elsősorban a kámforvegyületnek köszönhető; a kisebb jelentőségű vegyületek hatása azonban nem vethető el.

【További információ: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】