4. Anyagok és módszerek

4.1. Növényi anyag

A vizsgálathoz használt afrikai S. aurea magvakat egy olaszországi szaküzletből szerezték be. A palántákat a Cagliari Egyetem (UNICA) Növénybiológiai és Gyógyszerbotanikai Laboratóriumában nevelték. 5 hét elteltével a faj öko-fiziológiai igényeinek megfelelően "Planta Medica" üvegházba helyezték. A növényeket két évnyi növekedés után, virágzási periódusukban gyűjtöttük össze. A légi részeket azonnal légkeveréses szellőztető kemencébe (FD 115, BINDER) helyeztük, amíg teljesen meg nem száradtak (amikor elérik az állandó tömeget). Az utalványmintát az olaszországi Cagliari Egyetem Herbarium Karalitanum-jában (CAG) helyezték letétbe, utalványszámmal (6/23.8/V1).

A cisztanche glikozidja növelheti az SOD aktivitását a szív- és májszövetekben, és jelentősen csökkentheti az egyes szövetek lipofuscin- és MDA-tartalmát, hatékonyan megkötve a különböző reaktív oxigéngyököket (OH-, H2O₂ stb.) és megvédheti a DNS-károsodást. OH-gyökök által. A Cistanche feniletanoid glikozidok erős szabad gyökfogó képességgel rendelkeznek, nagyobb redukáló képességgel rendelkeznek, mint a C-vitamin, javítják a SOD aktivitását a spermiumszuszpenzióban, csökkentik az MDA-tartalmat, és bizonyos védő hatást fejtenek ki a spermium membrán működésére. A cistanche poliszacharidok fokozhatják a SOD és a GSH-Px aktivitását a D-galaktóz által okozott kísérletileg öregedő egerek eritrocitáiban és tüdőszöveteiben, valamint csökkenthetik a tüdő és a plazma MDA- és kollagéntartalmát, valamint növelhetik az elasztintartalmat. jó eltávolító hatás a DPPH-ra, meghosszabbítja a hipoxia idejét öregedő egerekben, javítja a SOD aktivitását a szérumban, és késlelteti a tüdő fiziológiás degenerációját kísérletileg öregedő egerekben A sejtmorfológiai degenerációval a kísérletek kimutatták, hogy a Cistanche jó antioxidáns képességgel rendelkezik és potenciálisan gyógyszer lehet a bőröregedési betegségek megelőzésére és kezelésére. Ugyanakkor a Cistanche-ban található echinakozid jelentős mértékben képes megkötni a DPPH szabad gyököket, és képes megkötni a reaktív oxigénfajtákat és megakadályozza a szabad gyökök által kiváltott kollagén lebomlását, valamint jó helyreállító hatással van a timin szabad gyökök anionjainak károsodására.

Kattintson a Cistanche Tubulosa Supplement elemre

【További információ: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

4.2. Illóolaj-elemzés

Az illóolajat 3 órás hidrodesztillációval, Clevenger-típusú készülékkel nyertük, az Európai Gyógyszerkönyv irányelvei szerint [89]. Az ezt követő gázkromatográfiás analízis lángionizációs detektálással (GC-FID) és gázkromatográfiával/tömegspektrometriával (GC-MS) a [13] szerint történt. Röviden, a GC analízishez egy HP 5 kapilláris oszlopot használtunk, 82 perces kísérleti eljárással, különböző hőmérsékleteken, 60 °C-tól 246 °C-ig, 3 °C/perc sebességgel, amelyet ezután a hőmérsékleten tartottunk. 246 ◦C 20 percig. Héliumot (tisztaság 99,9999 százalék vagy annál nagyobb) használtunk vivőgázként 1 ml/perc áramlási sebességgel. A hígított mintából összesen 1 µl-t (1:1 00 n-hexánban, tömeg/tömeg) fecskendeztünk be automata mintavevővel 1:20 megosztási aránnyal. Az MS-körülményeket tekintve 240 ◦C-os átviteli vezetéket, 200 ◦C-os EI ionforrást és 150 ◦C-os kvadrupól hőmérsékletet használtak, 70 eV ionizációs energiával és 3,2 pásztázási s-1 m/z-nél. tartomány (30 és 480 között). Az MSD ChemStation szoftvert (Agilent, rev. E.01.00.237, Santa Clara, CA, USA) használtuk a kromatogramok és tömegspektrumok kezelésére és kidolgozására. Végül a kapott vegyületeket a NIST02 és Adams könyvtárak összehasonlításával azonosítottuk [37,38]. Az eredményeket tovább ellenőriztük a vegyületek kísérleti retenciós indexének (RI) és az RI által az irodalomban közölt szemipoláris fázisok összehasonlításával. A kísérleti RI-ket két standard n-alkán keverék referenciaként (C8–C20, illetve C21–C40) határoztuk meg lineáris interpolációval [90]. A közölt komponensek százalékos arányát a GC csúcsterületeken számítottuk ki, FID válaszfaktor korrekció nélkül.

4.3. Gombaellenes tevékenység

Hét dermatofita törzset teszteltünk S. aurea EO gombaellenes aktivitásra. Ennek megfelelően három klinikai törzset kaptunk köröm- és bőrizolációból: Epidermophyton floccosum FF9, Trichophyton mentagrophytes FF7 és Microsporum canis FF1. Míg a fennmaradó négy dermatofita törzs a Colección Espanõla de Cultivos Tipo (CECT) törzshöz tartozott: a T. mentagrophytes var. interdigital CECT 2958, T. rubrum CECT 2794, T. verrucosum CECT 2992 és M. gypseum CECT 2908. Minden törzset Sabouraud dextróz agarban (SDA) vagy burgonya dextróz agarban (PDA) tenyésztettünk minden vizsgálat előtt a tisztaság és az életképesség biztosítása érdekében.

Az EO minimális gátló koncentrációját (MIC) és minimális letális koncentrációját (MLC) a CLSI mikrohígítási protokollban javasolt módosítások szerint határoztuk meg [91]. Röviden, az EO-t DMSO-val hígítottuk (5–0,32 µL/ml), majd hozzáadtuk a steril kémcsövekhez. Az oltóanyagot úgy állítottuk elő, hogy a zavarosságot 0,5 McFarland értékre állítottuk, majd RPMI-vel-1640 hígítottuk glutamin nélkül és 3-(N-morfolino) propánszulfonsavval (MOPS) pH 7-re. {10}} 1–2 × 104 CFU/ml koncentrációra, amelyet azután hozzáadtunk az EO-t tartalmazó kémcsövekhez. A csöveket ezután 7 napig 30 ºC-on inkubáltuk. Ezt követően a csövekben megvizsgáltuk a gomba növekedését, és azt a legalacsonyabb koncentrációt tekintettük minimális gátló koncentrációnak (MIC), ahol nem figyeltünk meg növekedést. Az a legalacsonyabb koncentráció, ahol nem volt megfigyelhető növekedés, miután a negatív csöveket SDA-ba helyeztük 7 napig 30 ºC-on, a minimális halálos koncentrációnak (MLC) tekintettük. A vizsgált mikroorganizmusok érzékenységének szabályozására egy referencia gombaellenes vegyületet, a flukonazolt (Pfizer) használtuk. Az eredményeket három független, két párhuzamos kísérletből kaptuk, és az eredményeket átlagban fejeztük ki. Negatív és pozitív kontrollokat is tartalmaztunk, melyeket egy nem beoltott táptalaj, illetve a maximális DMSO-koncentrációval (1 százalék) beoltott táptalaj képviselt.

4.4. Gyulladáscsökkentő tevékenység

4.4.1. Sejtkultúra

A RAW 264.7 egér leukémiás makrofág sejtvonalat, amely az American Type Culture Collection-hez (ATCC TIB-71) tartozott, tenyésztettük a csoportunk által korábban leírtak szerint [92].

4.4.2. Nitrogén-oxid gyártás

A NO-termelést a tenyészet felülúszójában lévő nitrátkoncentráció meghatározásával értékelték Griess-reagens segítségével [93]. A sejteket (0,6 × 106 sejt/lyuk) 48-lyukú tenyésztőlemezeken tenyésztettük. A makrofágokat egy éjszakán át stabilizáltuk, majd 1 órán át DMSO-ban hígított EO-val (0,08–1,25 µL/ml) előkezeltük, majd 24 órán át 50 ng/ml LPS-sel aktiváltuk. LPS-stimulált makrofágokat és kezeletlen makrofágokat használtunk pozitív és negatív kontrollként. A Griess-reakciót a csoportunkban korábban leírtak szerint hajtottuk végre [92]. A legmagasabb alkalmazott koncentrációban (0,4 százalék) alkalmazott DMSO-ról csoportunk már kimutatta, hogy nincs gyulladásgátló vagy citotoxicitása (az adatokat nem mutatjuk be).

4.4.3. A gyulladást elősegítő fehérjék, az iNOS és a COX expressziója-2 

RAW 264,7 sejteket (1,2 × 106 sejt/lyuk) tenyésztettünk 6-lyukú lemezeken, és egy éjszakán át stabilizáltuk. Ezután ezeket a sejteket 1 órán át 1,25 µl/ml koncentrációjú EO-val inkubáltuk, majd 24 órán át LPS aktiváltuk (50 ng/ml). A negatív kontroll a kezeletlen sejtekből, a pozitív kontroll pedig csak az LPS-sel kezelt sejtekből állt. A sejtlizátumok előállítása a Zuzarte és munkatársai által korábban elvégzett protokoll szerint történt. [92]

Az indukálható nitrogén-monoxid-szintáz (iNOS) és a ciklooxigenáz{{0}} (COX-2) tartalmát Western blot analízissel határoztuk meg a korábban leírtak szerint [13]. A fehérjeelválasztáshoz 10%-os (v/v) SDS-poliakrilamid géllel 130 V-on elektroforetikus futtatást végeztünk 1,5 órán keresztül. A fehérjevonalakat ezt követően (korábban metanollal aktivált) polivinilidén-fluorid membránokra blottoltuk 400 mA-en 3 órán át. A membránokat ezután 1 órán át szobahőmérsékleten inkubáltuk nem specifikus IgG-kkel 5% (w/v) sovány tejben TBS-T-ben. Tovább inkubáltuk őket egy éjszakán át 4 ◦C-on specifikus anti-iNOS (1:500; R&D Systems) vagy anti-COX-2 (1:5000; Abcam, Cambridge, UK) antitestekkel. . Végül 30 percig mostuk TBS-T-vel (10 percig, 3-szor), és 1 órán át szobahőmérsékleten inkubáltuk másodlagos antitestekkel (1:40,000; Santa Cruz Biotechnology, Dallas, TX, USA) ) torma-peroxidázzal konjugálva. Az immunkomplexek kimutatását kemilumineszcens szkennerrel (Image Quant LAS 500, GE, Boston, MA, USA) végeztük. Töltési kontrollként tubulin elleni antitesteket (1:20 000; Sigma, St. Louis, MO, USA) használtunk. A fehérje mennyiségi meghatározásához az ImageLab szoftver 6.1.0 verzióját (Bio-Rad Laboratories Inc., Hercules, CA, USA) használtuk.

4.5. Sejtmigráció

Az NIH 3T3 egérembrionális fibroblaszt sejtvonalat (ATCC CRL-1658) a [6]-ban korábban leírtak szerint tenyésztettük.

4.5.2. Sejtmigrációs vizsgálat

A sejtvándorlást a Martinotti és munkatársai által leírt karcolási seb vizsgálattal végeztük. [94] enyhe módosításokkal, amint azt korábban közöltük [13]. Röviden, az NIH 3T3 fibroblasztokat 2,5 × 105 sejt/ml koncentrációban oltottuk be, és hagytuk, hogy konfluenciát érjenek el. Ezt követően a sebet egy 200 µl-es pipettavéggel ütöttük, és a nem tapadó sejteket 7,4 pH-jú PBS-sel történő mosással eltávolítottuk. DMEM 2% FBS-sel EO-val (1,25 µl/ml) vagy anélkül. A képeket a karcolás után 0, 12 és 18 órával vettük fáziskontraszt mikroszkóp segítségével, és a seb területét ImageJ/Fiji szoftverrel mértük. A bemutatott eredményeket a következő egyenlettel kaptuk:

4.6. Sejt életképesség

A különböző koncentrációjú EO hatását a makrofágok és fibroblasztok életképességére a resazurin redukciós vizsgálattal értékelték, amint azt korábban közöltük [6].

4.7. Etopozid-indukált öregedés

Az öregedést az etopozid öregedést indukáló szerként értékelték, amint azt máshol közölték [95], némi módosítással. Röviden, 24 órás etopozid után a sejteket tovább inkubáltuk 72 órán keresztül S. aurea EO jelenlétében vagy hiányában (CT). A béta-galaktozidázt egy kereskedelmi forgalomban kapható készlettel értékeltük ki a gyártó protokollja szerint (#9860, Cell Signaling Technology Inc., Danvers, MA, USA). A határozott kék színű festődés béta-galaktozidáz aktivitást jelez. A színfejlődés után a kutakról fényképet készítettünk a későbbi képelemzés céljából. A kvantitatív elemzéshez ImageJ szoftvert használtunk az elöregedett sejtek százalékos arányának meghatározásával.

4.8. Statisztikai analízis 

A kísérleteket legalább két párhuzamosban végeztük három független kísérletben. Az eredményekben az átlagértékek ± SEM (az átlag standard hibája) szerepelnek. A gyulladáscsökkentő, sejtéletképességi és öregedési vizsgálatok statisztikai szignifikanciáját egyutas varianciaanalízissel (ANOVA) és Dunnett post hoc teszttel értékelték a GraphPad Prism 9.3-as verziójával.0 (GraphPad Software, San Diego, CA) , USA). Míg a sejtmigrációs vizsgálatok statisztikai szignifikanciáját kétutas ANOVA-val, majd Sydák többszörös összehasonlító tesztjével értékelték, a p értékek < 0,05 statisztikailag szignifikánsnak tekinthetők.

5. Következtetések

Ez a munka megerősíti azokat a jótékony hatásokat, amelyeket általában a Salvia spp. a S. aurea-nak tulajdonított néhány hagyományos felhasználás érvényesítésével. Ezenkívül egy egyedülálló kémiai összetételt ismertettek, amely fő vegyületként 1,8 cineolt, -pinént, cisz-tujont, kámfort, (E)-kariofilént, transz-tujont, -pinént, kamfént és -humulént tartalmaz. Beszámolunk arról, hogy az EO gombaellenes, gyulladáscsökkentő és sebgyógyító hatást fejt ki, így igazolja az ezzel a fajjal kapcsolatos hagyományos alkalmazásokat bőrfertőzések, gyulladással összefüggő betegségek és sebek kezelésére.

Ezenkívül ez a tanulmány első alkalommal számol be arról, hogy ez a faj képes volt antiszenszcencia hatást kifejteni, így tovább növelve az érdeklődést e faj iránt. Ezért ezek az eredmények rávilágítanak a S. aurea szerepére a gyulladások és a bőrrel összefüggő fertőzések mérséklésében, ezáltal megerősítve a dermokozmetika iránti érdeklődést. Míg ez a tanulmány kimutatta, hogy a megfelelő biológiai aktivitású, nagy értékű metabolitok termelődése elősegíthető a termesztéssel, elengedhetetlen a termesztett növény pontos kémiai elemzése, tekintettel a kémiai profil extrém változatosságára a genetikai és környezeti tényezők hatására. (stressz, talajtulajdonságok, betakarítási időszak).

A szerző hozzájárulásai:LS és AM; érvényesítés, DM, EC, MJG, MTC és SP; formális elemzés, JMA-S., MJG és AP; vizsgálat, JMA-S., AM és AP; erőforrások, AM, MTC és LS; adatkezelés, AP; írás – eredeti tervezet előkészítése, EC, DM, JMA-S., AP és AM; írás – áttekintés és szerkesztés, EC, DM, MTC, LS és AM; vizualizáció, JMA-S.; felügyelet, LS és AM; projekt adminisztráció, LS; finanszírozás megszerzése, LS és MTC Minden szerző elolvasta és elfogadta a kézirat közzétett változatát.

Finanszírozás: Ezt a munkát a COMPETE 2020 – Versenyképességi és nemzetköziesítési operatív program, valamint az FCT-Fundação para a Ciência ea Tecnologia portugál nemzeti alapjai finanszírozták, az UIDB/04539/2020, UIDP/04539/2020 és LA8/8P projektek keretében. 2020.

Köszönetnyilvánítás: A szerzők hálásan köszönik Daniela Standen, a The International Study and Language Institute (The University of Reading, Egyesült Királyság, d.standen@reading.ac.uk) értékes közreműködését a technikai támogatásban.

Hivatkozások

1. Kaur, N.; Ahmed, T. Gyógy- és aromanövények bioaktív másodlagos metabolitjai és betegségellenes tulajdonságaik. Gyógy- és aromanövényekben; Springer Nature: Basingstoke, Egyesült Királyság, 2021; 113–142. ISBN 978-3-030-58974-5.

2. Pinto, E.; Pina-Vaz, C.; Salgueiro, L.; Gonçalves, MJ; Costa-De-Oliveira, S.; Cavaleiro, C.; Palmeira, A.; Rodrigues, A.; Martinez-De-Oliveira, J. A Thymus pulegioides illóolajának gombaellenes hatása Candida, Aspergillus és dermatofita fajokon. J. Med. Microbiol. 2006, 55, 1367–1373. [CrossRef]

3. Santos, EL; Freitas, PR; Araújo, ACJ; Almeida, RS; Tintino, SR; Paulo, CLR; Silva, ACA; Silva, LE; do Amaral, W.; Deschamps, C.; et al. Az antibiotikumok fokozott antibakteriális hatása az Aloysia gratissima (Gillies & Hook.) Tronc illóolajával. és fő alkotóeleme a béta-kariofilén. Phytomedicine Plus 2021, 1, 100100. [CrossRef]

4. Edris, AE Az illóolajok és illékony összetevőik gyógyszerészeti és terápiás lehetőségei: Áttekintés. Fitother. Res. 2007, 21, 308–323. [CrossRef]

5. Ghorbani, A.; Esmaeilizadeh, M. A Salvia Officinalis és összetevői farmakológiai tulajdonságai. J. Tradit. Kiegészítés. Med. 2017, 7, 433–440. [CrossRef]

6. Piras, A.; Maccioni, A.; Falconieri, D.; Porcedda, S.; Gonçalves, MJ; Alves-Silva, JM; Silva, A.; Cruz, MT; Salgueiro, L.; Maxia, A. A Teucrium sodium L. subsp. illóolajának kémiai összetétele és biológiai aktivitása. kardioidok (Schreb.) Arcang. (Lamiaceae) Szardínia szigetéről (Olaszország). Nat. Prod. Res. 2022, 36, 5828–5835. [CrossRef]

7. Maccioni, A.; Falconieri, D.; Porcedda, S.; Piras, A.; Gonçalves, MJ; Alves-Silva, JM; Salgueiro, L.; Maxia, A. Az olaszországi Szardínia-szigetről származó két új Teucrium capitatum L. kemotípus légi részeiből származó illóolaj gombaellenes hatása és kémiai összetétele. Nat. Prod. Res. 2020, 35, 6007–6013. [CrossRef]

8. Piras, A.; Porcedda, S.; Falconieri, D.; Maxia, A.; Gonçalves, M.; Cavaleiro, C.; Gonc¸alves, MJ; Salgueiro, L. Szardínia szigetén (Olaszország) vadon termő Mentha spicata L. és Mentha pulegium L. illóolajának gombaellenes hatása. Nat. Prod. Res. 2021, 35, 993–999. [CrossRef]

9. Walker, JB; Sytsma, KJ Staminális evolúció a Salvia (Lamiaceae) nemzetségben: Molekuláris filogenetikai bizonyítékok az állványkar többszörös eredetére. Ann. Bot. 2007, 100, 375–391. [CrossRef]

10. Waller, SB; Cleff, MB; Serra, EF; Silva, AL; dos Reis Gomes, A.; de Mello, JRB; de Faria, RO; Meireles, MCA A Lamiaceae családból származó növények, mint gombaellenes molekulák forrása a humán- és állatgyógyászatban. Microb. Patog. 2017, 104, 232–237. [CrossRef]

11. Cocco, E.; Maccioni, D.; Sanjust, E.; Falconieri, D.; Farris, E.; Maxia, A. Etnofarmakobotanika és mediterrán endemikus növények sokfélesége a Marmilla alrégióban, Szardínia, Olaszország. Plants 2022, 11, 3165. [CrossRef]

12. Afonso, AF; Pereira, OR; Fernandes, Â.; Calhelha, RC; Silva, AMS; Ferreira, RCF; Cardoso, SM Salvia africana, Salvia Officinalis "Icterina" és Salvia mexicana vizes kivonatok fitokémiai összetétele és bioaktív hatásai. Molecules 2019, 24, 4327. [CrossRef]

13. Alves-Silva, JM; Cocco, E.; Piras, A.; Gonçalves, MJ; Silva, A.; Falconieri, D.; Porcedda, S.; Cruz, MT; Maxia, A.; Salgueiro, L. A Salvia cacaliifolia Benth kémiai összetételének és biológiai tulajdonságainak feltárása. illóolaj. Plants 2023, 12, 359. [CrossRef]

14. Nkomo, MM; Katerere, DD; Vismer, HH; Cruz, TT; Balayssac, SS; Malet-Martino, MM; Makunga, NN A fuzárium gátlása a Salvia africana-lutea L. gyógynövény vadon élő populációi által, összefüggésben a metabolomikus profilozással. BMC kiegészítés. Altern. Med. 2014, 14, 99. [CrossRef]

15. Codd, LE Flora of Southern Africa: Part. 4 Lamiaceae; Botanikai Kutatóintézet: Pretoria, Dél-Afrika, 1985; 28. évfolyam, ISBN 0621082686.

16. Makunga, NP; Van Staden, J. A gyógyászatilag fontos aromás növény: Salvia africana-lutea L. Plant Cell Tissue Organ Cult. 2007, 92, 63–72. [CrossRef]

17. Aston Philander, L. A Western Cape Rasta bokorgyógyászat etnobotanikája. J. Ethnopharmacol. 2011, 138, 578–594. [CrossRef]

18. Watt, JM; Breyer-Brandwijk, MG: Dél- és Kelet-Afrika gyógy- és mérgező növényei: Beszámoló gyógyászati ​​és egyéb felhasználásukról, kémiai összetételükről, farmakológiai hatásukról és toxikológiájukról emberben és állatban; E. & S. Livingstone: Edinburgh, Egyesült Királyság, 1962.

19. Gupta, AK; Cooper, EA Frissítés a dermatophytosis gombaellenes kezelésében. Mycopathologia 2008, 166, 353–367. [CrossRef]

20. Matiz, C.; Friedlander, SF A bőr alatti szövetek fertőzései és tályogok. A gyermekkori fertőző betegségek alapelveiben és gyakorlatában; Elsevier: Amszterdam, Hollandia, 2012; 454–462.e2. [CrossRef]

21. De Oliveira, CB; Vasconcellos, C.; Sakai-Valente, NY; Sotto, MN; Luiz, FG; Belda Júnior, W.; Sousa, M. da GT de; Benard, G.; Criado, PR Toll-like receptorok (TLR) 2 és 4 keratinociták expressziója lokalizált és disszeminált dermatophytosisban szenvedő betegekből. Rev. Inst. Med. Trop. Sao Paulo 2015, 57, 57–61. [CrossRef]

22. Celestrino, GA; Reis, APC; Criado, PR; Benard, G.; Sousa, MGT A Trichophyton rubrum fagocita és gyulladást elősegítő válaszokat vált ki humán monocitákban a Toll-Like Receptor 2-en keresztül. Front. Microbiol. 2019, 10, 2589. [CrossRef]

23. Sun, S.-C. A nem kanonikus NF-B útvonal az immunitásban és a gyulladásban. Nat. Rev. Immunol. 2017, 17, 545–558. [CrossRef]

24. Rao, KMK Inos expressziót szabályozó molekuláris mechanizmusok különböző sejttípusokban. J. Toxicol. Environ. Egészségügy B rész 2000, 3, 27–58. [CrossRef]

25. Minghetti, L. Ciklooxigenáz-2 (COX-2) gyulladásos és degeneratív agyi betegségekben. J. Neuropathol. Exp. Neurol. 2004, 63, 901–910. [CrossRef]

26. Sharma, A.; Gupta, S. A herbonanoceuticals mint gombaellenes szerek védő megnyilvánulása: Egy lehetséges gyógyszerjelölt dermatofita fertőzésre. Health Sci. Rep. 2022, 5, e775. [CrossRef]

27. Guo, S.; DiPietro, LA A sebgyógyulást befolyásoló tényezők. J. Dent. Res. 2010, 89, 219–229. [CrossRef]

28. Zuzarte, M.; Gonçalves, MJ; Cavaleiro, C.; Canhoto, J.; Vale-Silva, L.; Silva, MJ; Pinto, E.; Salgueiro, L. A Lavandula viridis LHér illóolajainak kémiai összetétele és gombaellenes hatása. J. Med. Microbiol. 2011, 60, 612–618. [CrossRef]

29. Martinez-Rossi, NM; Bitencourt, TA; Peres, NTA; Lang, EAS; Gomes, EV; Quaresemin, NR; Martins képviselő; Lopes, L.; Rossi, A. A dermatofiták rezisztenciája gombaellenes szerekkel szemben: Mechanizmusok és tájékoztató. Elülső. Microbiol. 2018, 9, 1108. [CrossRef]

30. Mourad, A.; Tökéletes, JR. A kriptokokkózis elleni háború: a gombaellenes szerek arzenáljának áttekintése. Mem. Inst. Oswaldo Cruz 2018, 113, 7. [CrossRef]

31. Vonkeman, HE; van de Laar, MAFJ Nem szteroid gyulladásgátló szerek: Káros hatások és megelőzésük. Semin. Arthritis Rheum. 2010, 39, 294–312. [CrossRef]

32. Kamatou, GPP; van Zyl, RL; van Vuuren, SF; Figueiredo, AC; Barroso, JG; Pedro, LG; Viljoen, AM Három dél-afrikai Salvia faj illóolaj-összetételének, olajtoxicitásának és biológiai aktivitásának szezonális változása. S. Afr. J. Bot. 2008, 74, 230–237. [CrossRef]

33. Kamatou, GPP; van Zyl, RL; van Vuuren, SF; Viljoen, AM; Figueiredo, AC; Barroso, JG; Pedro, LG; Tilney, PM; Barroso, JG Négy, Dél-Afrikában őshonos Salvia faj illóolajának kémiai összetétele, levéltrichóm típusai és biológiai aktivitásai. J. Essent. Oil Res. 2006, 18, 72–79. [CrossRef]

34. Najar, B.; Mecacci, G.; Nardi, V.; Cervelli, C.; Nardoni, S.; Mancini, F.; Ebani, VV; Giannecchini, S.; Pistelli, L. A dél-afrikai Salvia spp. illékony és gombaellenes-antibakteriális-vírusellenes hatása. egységes körülmények között termesztett illóolajok. Molecules 2021, 26, 2826. [CrossRef]

35. Cowling, RM; Rundel, PW; Lamont, BB; Arroyo, MK; Arianoutsou, M. Növénydiverzitás mediterrán éghajlatú régiókban. Trends Ecol. Evol. 1996, 11, 362–366. [CrossRef]

36. Médail, F. Ökoszisztémák: mediterrán. In Encyclopedia of Ecology, 3. kötet; Elservier Inc.: Oxford, Egyesült Királyság, 2008; 5. kötet, 2296–2308.

37. Adams, RP Identification of Essential Oil Components by Gas Chromatography/Quadrupole Mass Spectrometry, 4. kiadás; Allured Publishing Corporation: Carol Stream, IL, USA, 2007.

38. National Institute of Standards and Technology Mass Spectral Library (NIST/EPA/NIH).

39. Guijarro-Muñoz, I.; Compte, M.; Álvarez-Cienfuegos, A.; Álvarez-Vallina, L.; Sanz, L. A lipopoliszacharid aktiválja a Toll-like Receptor 4 (TLR4) által közvetített NF-κB jelátviteli útvonalat és proinflammatorikus választ humán pericitákban. J. Biol. Chem. 2014, 289, 2457–2468. [CrossRef]

40. Manning, J.; Goldblatt, P. Plants of the Greater Cape Floristic Region. 1: The Core Cape Flora; Dél-afrikai Nemzeti Biodiverzitás Intézet: Pretoria, Dél-Afrika, 2012; ISBN 1919976744.

41. Lim Ah Tock, MJ; Kamatou, GPP; Combrinck, S.; Sandasi, M.; Viljoen, AM Három Dél-Afrikában őshonos Salvia faj illóolaj-variációjának kemometriai értékelése. Phytochemistry 2020, 172, 112249. [CrossRef]

42. Fokou, JBH; Dongmo, PMJ; Boyom, FF; Fokou, JBH; Dongmo, PMJ; Boyom, FF Az illóolaj kémiai összetétele és farmakológiai tulajdonságai. In Essential Oils – Oils of Nature; El-Shemy, H., szerk.; IntechOpen: London, Egyesült Királyság, 2020; 13–36. ISBN 978-1-78984-641-6.

43. Figueiredo, AC; Barroso, JG; Pedro, LG; Scheffer, JJC A növények másodlagos metabolittermelését befolyásoló tényezők: illékony komponensek és illóolajok. Aroma. Fragr. J. 2008, 23, 213–226. [CrossRef]

44. van Vuuren, S.; Ramburrun, S.; Kamatou, G.; Viljoen, A. Az őslakos dél-afrikai illóolajok, mint potenciális antimikrobiális szerek a lábszag (bromodózis) kezelésére. S. Afr. J. Bot. 2019, 126, 354–361. [CrossRef]

45. Scott, G.; Springfield, EP; Coldrey, N. 26 hagyományos gyógyszerként használt dél-afrikai növényfaj farmakognosztikus vizsgálata. Pharm Biol. 2004, 42, 186–213. [CrossRef]

46. ​​Oosthuizen, CB; Gasa, N.; Hamilton, CJ; Lall, N. A mikotiol-diszulfid-reduktáz és a mikobakteriális biofilm gátlása kiválasztott dél-afrikai növények által. S. Afr. J. Bot. 2019, 120, 291–297. [CrossRef]

47. Alves, M.; Gonçalves, MJ; Zuzarte, M.; Alves-Silva, JM; Cavaleiro, C.; Cruz, MT; Salgueiro, L. Két ibériai kakukkfű illóolaj gombaellenes potenciáljának feltárása: Hatás a C. albicans csíracsőre és az elvégzett biofilmekre. Elülső. Pharmacol. 2019, 10, 446. [CrossRef]

48. Shukla, R.; Singh, P.; Prakash, B.; Dubey, NK Gombaellenes, aflatoxin-gátló és antioxidáns hatású Callistemon lanceolatus (Sm.) Édes illóolaj és fő összetevője 1,8-cineol csicseriborsó magjából származó gomba izolátumok ellen. Élelmiszer-ellenőrzés 2012, 25, 27–33. [CrossRef]

49. Yu, D.; Wang, J.; Shao, X.; Xu, F.; Wang, H. A teafaolaj gombaellenes hatásmódja és két jellegzetes összetevője a Botrytis cinerea ellen. J. Appl. Microbiol. 2015, 119, 1253–1262. [CrossRef]

50. Morcia, C.; Malnati, M.; Terzi, V. Terpinén-4-ol, eugenol, karvon, 1,8-cineol (eukaliptol) és timol in vitro gombaellenes hatása mikotoxigén növényi kórokozók ellen. Food Addit. Contam. A rész 2011, 29, 415–422. [CrossRef]

51. Kim, H.-M.; Kwon, H.; Kim, K.; Lee, S.-E. Az 1,8-cineol és a t-fahéjaldehid gombaellenes és anti-aflatoxigén hatása az Aspergillus afflatuson. Appl. Sci. 2018, 8, 1655. [CrossRef]

52. da Silva, ACR; Lopes, PM; de Azevedo, MMB; Costa, DCM; Alviano, CS; Alviano, DS Az a-pinén és -pinén enantiomerek biológiai aktivitásai. Molecules 2012, 17, 6305–6316. [CrossRef]

53. Jang, S.-K.; Lee, S.-Y.; Kim, S.-H.; Hong, C.-Y.; Park, M.-J.; Choi, I.-G. Hat tűlevelű illóolajok gombaellenes hatásai az Aspergillus fumigatus ellen. J. Korean Wood Sci. Technol. 2012, 40, 133–140. [CrossRef]

54. de Macêdo Andrade, AC; Rosalen, PL; Freires, IA; Scotti, L.; Scotti, MT; Aquino, SG; de Castro, RD A (plusz )- -pinénenantiomerek gombaellenes aktivitása, hatásmechanizmusa, dokkolási előrejelzése és biofilm-ellenes hatásai Candida spp. Curr. Top. Med. Chem. 2018, 18, 2481–2490. [CrossRef]

55. Shin, S. A Glehnia littoralisból származó illóolajok gombaellenes hatása önmagában és ketokonazollal kombinálva. Nat. Prod. Sci. 2005, 11, 92–96.

56. Iraji, A.; Yazdanpanah, S.; Alizadeh, F.; Mirzamohammadi, S.; Ghasemi, Y.; Pakshir, K.; Yang, Y.; Zomorodian, K. Monoterpének és izomerjeik gombaellenes hatásainak szűrése Candida fajok ellen. J. Appl. Microbiol. 2020, 129, 1541–1551. [CrossRef]

57. Jaafar, M.; Mitri, S.; Na'was, T. Gram-negatív baktériumok növekedésének és biofilm képződésének gátlása alfa-tujon által. IOSR J. Pharm. Biol. Sci. 2018, 13, 2. [CrossRef]

58. Teker, T.; Sefer, Ö.; Gazda ˘glı, A.; Yörük, E.; Varol, G. I.; Az Albayrak, G. -thujon gombaellenes aktivitást mutat F. graminearum ellen azáltal, hogy oxidatív stresszt, apoptózist, epigenetikai változásokat és csökkent toxinszintézist vált ki. Eur. J. Plant Pathol. 2021, 160, 611–622. [CrossRef]

59. Huo, H.; Gu, Y.; Cao, Y.; Liu, N.; Jia, P.; Kong, W. A kámfor gombaellenes hatása a Fusarium négy fitopatogénje ellen. S. Afr. J. Bot. 2022, 148, 437–445. [CrossRef]

60. Wu, K.; Lin, Y.; Chai, X.; Duan, X.; Zhao, X.; Chun, C. A Cinnamomum camphora var. linaloofera Fujita Escherichia coli ellen. Food Sci. Nutr. 2019, 7, 2546–2555. [CrossRef]

61. Magiatis, P.; Skaltsounis, A.-L.; Chinou, I.; Haroutounian, SA Három görög Achillea faj illóolajainak kémiai összetétele és in-vitro antimikrobiális hatása. Z. Für Nat. C 2002, 57, 287–290. [CrossRef] [PubMed]

62. Dahham, S.; Tabana, Y.; Iqbal, M.; Ahamed, M.; Ezzat, M.; Majid, A.; Majid, A. Az Aquilaria crassna illóolajából származó szeszkviterpén-kariofillén rákellenes, antioxidáns és antimikrobiális tulajdonságai. Molecules 2015, 20, 11808–11829. [CrossRef]

63. Pieri, FA; de Castro Souza, MC; Vermelho, LLR; Vermelho, MLR; Perciano, PG; Vargas, FS; Borges, APB; da Veiga-Junior, VF; Moreira, MAS -kariofillén alkalmazása a bakteriális plakkképződés leküzdésére kutyáknál. BMC Vet. Res. 2016, 12, 216. [CrossRef]

64. Goren, AC; Piozzi, F.; Akcicek, E.; Kılıç, T.; Çarıkçı, S.; Mozio ˘glu, E.; Setzer, WN Huszonkét Stachys faj (hegyi tea) illóolaj-összetétele és biológiai aktivitása. Phytochem. Lett. 2011, 4, 448–453. [CrossRef]

65. Yadav, N.; Chandra, H. A tüdőmakrofágok gyulladásos és fertőzéses reakcióinak elnyomása eukaliptuszolajjal és 1-es összetevőjével, a 8-cineollal: A TREM-1 és az NLRP3 mintázatfelismerő receptorok szerepe, az MKP kináz szabályozó MKP{{5 }} és NFκB. PLoS ONE 2017, 12, e0188232. [CrossRef]

66. Sör, AM; Zagorcsev, P.; Filipova, DM; Lukanov, J. Az 1,8-cineol hatása a ciklooxigenáz és a ciklooxigenáz 1 és a ciklooxigenáz 2 izoformáira. Nat. Prod. Chem. Res. 2017, 5, 1000253. [CrossRef]

67. Bastos, VPD; Gomes, AS; Lima, FJB; Brito, TS; Soares, PMG; Pinho, JPM; Silva, CS; Santos, AA; Souza, MHLP; Magalhães, PJC inhalált 1,8-cineol csökkenti a gyulladásos paramétereket az ovalbuminnal fertőzött tengerimalacok légútjaiban. Alapvető. Clin. Pharmacol. Toxicol. 2011, 108, 34–39. [CrossRef]

68. Juergens, LJ; Racké, K.; Tuleta, I.; Stoeber, M.; Juergens, UR Az 1,8-cineol (eukaliptol) gyulladásgátló hatása javítja a glükokortikoid hatást in vitro: Új megközelítés a COPD és az asztma szteroid-megtakarító kiegészítő terápiájában? Szinergia 2017, 5, 1–8. [CrossRef]

69. Santos, FA; Rao, VSN A sok növényi illóolajban jelenlévő 1,8-cineol terpenoid-oxid gyulladásgátló és antinociceptív hatása. Fitother. Res. 2000, 14, 240–244. [CrossRef]

70. Mohammed, HA; Mohammed, SAA; Khan, O.; Ali, HM A helyi eukaliptol kenőcs felgyorsítja a sebgyógyulást és antioxidáns és gyulladáscsökkentő hatást fejt ki patkányok bőrégési modelljében. J. Oleo Sci. 2022, 71, ess22214. [CrossRef]

71. Juergens, UR; Dethlefsen, U.; Steinkamp, ​​G.; Gillissen, A.; Repges, R.; Vetter, H. Az 1.8-cineol (eukaliptol) gyulladásgátló hatása bronchiális asztmában: kettős vak, placebo-kontrollos vizsgálat. Respir. Med. 2003, 97, 250–256. [CrossRef]

72. Lima, PR; de Melo, TS; Carvalho, KMMB; de Oliveira, Í.B.; Arruda, BR; de Castro Brito, GA; Rao, VS; A Santos, FA 1,8-cineol (eukaliptol) enyhíti a cerulein által kiváltott akut hasnyálmirigy-gyulladást a citokinek, az oxidatív stressz és az NF-κB aktivitás modulálásával egerekben. Life Sci. 2013, 92, 1195–1201. [CrossRef]

73. Coté, H.; Boucher, M.-A.; Pichette, A.; Legault, J. A Tanacetum vulgare l. gyulladásgátló, antioxidáns, antibiotikus és citotoxikus hatásai. illóolaj és összetevői. Medicines 2017, 4, 34. [CrossRef]

74. Rufino, AT; Ribeiro, M.; Judas, F.; Salgueiro, L.; Lopes, MC; Cavaleiro, C.; Mendes, AF A ( plusz )- -pinén gyulladásgátló és chondroprotektív aktivitása: Strukturális és enantiomer szelektivitás. J. Nat. Prod. 2014, 77, 264–269. [CrossRef]

75. Schepetkin, IA; Kushnarenko, SV; Özek, G.; Kirpotina, LN; Utegenova, GA; Kotukhov, YA; Danilova, AN; Özek, T.; Ba¸ser, KHC; Quinn, MT Humán neutrofil válaszok gátlása az Artemisia kotuchovii illóolajával és összetevőivel. J. Agric. Food Chem. 2015, 63, 4999–5007. [CrossRef]

76. dos Santos, E.; Leitão, MM; Aguero Ito, CN; Silva-Filho, SE; Aréna, AC; de Souza Silva-Comar, FM; Nakamura Cuman, RK; Oliveira, RJ; Nazari Formagio, AS; Leite Kassuya, CA Az Ocimum kilimandscharicum Gürke levelekből izolált illóolaj és kámfor fájdalomcsillapító és gyulladáscsökkentő ízületi hatásai. J. Ethnopharmacol. 2021, 269, 113697. [CrossRef]

77. Adhikari, A.; Bhandari, S.; Pandey, DP Gyulladáscsökkentő vegyületek kámfor és metilszalicilát hagyományosan használt fájdalomcsillapító növényből, Equisetum arvense LJ Nepal Chem. Soc. 2019, 40, 1–4. [CrossRef]

78. Silva-Filho, S.; de Souza Silva-Comar, F.; Wiirzler, L.; do Pinho, R.; Greenspan, R.; Bersani-Amado, C.; Cuman, R. A kámfor hatása a leukociták viselkedésére in vitro és in vivo az akut gyulladásos reakcióban. Trop. J. Pharm. Res. 2015, 13, 2031. [CrossRef]

79. Cho, JY; Chang, H.-J.; Lee, S.-K.; Kim, H.-J.; Hwang, J.-K.; Chun, HS A dextrán-szulfát-nátrium által kiváltott vastagbélgyulladás enyhítése egerekben -caryophyllene, egy szeszkviterpén orális adagolásával. Life Sci. 2007, 80, 932–939. [CrossRef]

80. Gushiken, LFS; Beserra, FP; Hussni, MF; Gonzaga, MT; Ribeiro, alelnök; de Souza, PF; Campos, JCL; Massaro, TNC; Hussni, CA; Takahira, RK; et al. A béta-kariofilén antioxidáns, gyulladáscsökkentő és újrahámképző hatás patkánybőr sebkivágási modelljében. oxid. Med. Longev sejt. 2022, 2022, 1–21. [CrossRef]

81. Brito, LF; Oliveira, HBM; Neves Selis, N.; Souza, CLS; Júnior, MNS; Souza, EP; da Silva, LSC; Souza Nascimento, F.; Amorim, AT; Campos, GB; et al. A -caryophyllén gyulladásgátló hatása dokozahexaénsavval kombinálva a Staphylococcus aureus által kiváltott szepszis modelljében egerekben. J. Sci. Élelmiszer Agric. 2019, 99, 5870–5880. [CrossRef]

82. Sousa, LFB; Oliveira, HBM; das Neves Selis, N.; Morbeck, LLB; Santos, TC; da Silva, LSC; Viana, JCS; Reis, MM; Sam patio, BA; Campos, GB; et al. - az izolált vagy társított kariofilén és dokozahexaénsav potenciális antinociceptív és gyulladáscsökkentő hatású in vitro és in vivo. Sci. Rep. 2022, 12, 19199. [CrossRef]

83. Scandiffio, R.; Geddo, F.; Cottone, E.; Querio, G.; Antoniotti, S.; Gallo képviselő; Maffei, ÉN; Bovolin, P. Az (e)- -kariofillén (bcp) védő hatásai krónikus gyulladásban. Nutrients 2020, 12, 3273. [CrossRef]

84. Salas-Oropeza, J.; Jimenez-Estrada, M.; Perez-Torres, A.; Castell-Rodriguez, AE; Becerril-Millan, R.; Rodriguez-Monroy, MA; Jarquin-Yañez, K.; Canales-Martinez, MM -pinén és -fellandrén sebgyógyító hatása. Molecules 2021, 26, 2488. [CrossRef]

85. Rocha Caldas, GF; da Silva Oliveira, AR; Araújo, AV; Lafayette, SSL; Albuquerque, GS; da Costa Silva-Neto, J.; Costa-Silva, JH; Ferreira, F.; da Costa, JGM; Wanderley, AG A monoterpén 1,8-cineol (eukaliptol) gasztroprotektív mechanizmusai. PLoS ONE 2015, 10, e0134558. [CrossRef]

86. Chabane, S.; Boudjelal, A.; Napoli, E.; Benkhaled, A.; Ruberto, G. A Teucrium polium subsp. fitokémiai összetétele, antioxidáns és sebgyógyító hatása. capitatum (L.) Briq. illóolaj. J. Essent. Oil Res. 2021, 33, 143–151. [CrossRef]

87. Tran, TA; Ho, MT; Song, YW; Cho, M.; A Cho, SK Kámfor proliferatív és öregedésgátló aktivitást indukál a humán primer dermális fibroblasztokban, és gátolja az UV által kiváltott ráncok kialakulását az egérbőrben. Fitother. Res. 2015, 29, 1917–1925. [CrossRef]

88. Rodenak-Kladniew, B.; Castro, A.; Stärkel, P.; Galle, M.; Crespo, R. 1, 8-A Cineole elősegíti a G0/G1 sejtciklus leállását és az oxidatív stressz által kiváltott öregedést a HepG2 sejtekben, és érzékennyé teszi a sejteket az öregedésgátló gyógyszerekkel szemben. Life Sci. 2020, 243, 117271. [CrossRef]

89. Az Európa Tanács Gyógyszer- és Egészségügyi Minőségügyi Igazgatósága. Európai Gyógyszerkönyv; EDQM: Strasbourg, Franciaország, 2010; ISBN 978-92-871-6700-2.

90. Van den Dool, H.; Kratz, PD A retenciós index rendszer általánosítása, beleértve a lineáris hőmérsékletű programozott gáz-folyadék megoszlási kromatográfiát. J. Chromatogr. 1963, 11, 463–471. [CrossRef]

91. CLSI Clinical and Laboratory Standards Institute. Referencia módszer a húsleves hígítására, fonalas gombák gombaellenes érzékenységének vizsgálatára. CLSI-dokumentum M38-A2, jóváhagyott szabvány, 2. kiadás; Clinical and Laboratory Standards Institute: Wayne, PA, USA, 2008; 28. kötet, ISBN 1-56238-668-9.

92. Zuzarte, M.; Alves-Silva, JM; Alves, M.; Cavaleiro, C.; Salgueiro, L.; Cruz, MT Új betekintés a Thymus carnosus és Thymus camphoratus illóolajok és főbb vegyületeik gyulladásgátló potenciáljába és biztonsági profiljába. J. Ethnopharmacol. 2018, 225, 10–17. [CrossRef]

93. Green, LC; Wagner, DA; Glogowski, J.; Skipper, PL; Wishnok, JS; Tannenbaum, SR Nitrát, nitrit és [15N]-nitrát elemzése biológiai folyadékokban. Anális. Biochem. 1982, 126, 131–138. [CrossRef]

94. Martinotti, S.; Ranzato, E. Scratch sebgyógyulási vizsgálat. In epidermális sejtekben: Molekuláris Biológiai módszerek; Turksen, K., szerk.; Humana: New York, NY, USA, 2019; 2109. évfolyam, 225–229. [CrossRef]

95. Moreira, P.; Sousa, FJ; Matos, P.; britek, GS; Gonçalves, MJ; Cavaleiro, C.; Figueirinha, A.; Salgueiro, L.; Batista, MT; Branco, PC; et al. Az Eucalyptus globulus leveleinek hidrodesztillációjával nyert bioaktív kivonatok kémiai összetétele és bőrelváltozások elleni hatása. Pharmaceutics 2022, 14, 561. [CrossRef]

【További információ: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】