Antinociceptív és gyulladáscsökkentő hatás, amelyet a Cistanche Deserticola okoz rágcsálókban

Kapcsolatba lépni:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Li-Wei Lin és mtsai

Absztrakt

Jelen tanulmányban a rizómák aCistanchedeserticola(Orobanchaceae, rövidítve CD) 50%-os etanollal extraháltuk, majd etil-acetáttal, n-butanollal és vízzel rendesen izoláltuk. A fájdalomcsillapító ésanti-gyulladásosA CD kivonat és három réteg hatásait számos állatmodellben értékelték. CD(Cistanchedeserticola)A kivonatok hatékonyan gátolták az 1 százalékos ecetsav által kiváltott vonaglásos választ és az 1 százalék formalin által kiváltott kétfázisú nyalogatást, valamint csökkentették az 1 százalék karragén, de nem a zimozán által kiváltott ödémát. Továbbá a CD butános és vizes rétegei(Cistanchedeserticola)A kivonat nemcsak az ecetsav és a formalin által kiváltott fájdalmat csökkentette, hanem a karragenán által kiváltott ödémát is. A CD butánrétegének hatásai(Cistanchedeserticola)kivonat jobb, mint a vizes rétegé. Ezen kívül a CD butánrétegének hatása(Cistanchedeserticola)a kivonatot a naloxon nem szüntette meg. Ezek az eredmények azt mutatták, hogy van fájdalomcsillapító ésanti-gyulladásoshatások, a butános és vizes rétegek pedig főként aktív összetevők. Továbbá a fájdalomcsillapító ésanti-gyulladásosa CD butánrétegének hatásai(Cistanchedeserticola)A kivonat nem áll kapcsolatban az opioid receptorokkal és az immunrendszerrel.

Kulcsszavak:Cistanche deserticola; Fájdalomcsillapító aktivitás; Gyulladáscsökkentő aktivitás

1. Bemutatkozás

CistanchedeserticolaMa. (Orobanchaceae, rövidítve CD), egy őshonos gyógynövény Kínában, amelyet széles körben alkalmaznak a hagyományos orvoslásban különféle terápiás kezelésekre, beleértve a nyugtató, fájdalomcsillapító és immunerősítő indikációkat (Lee, 1986). A modern farmakológiai vizsgálatok rámutattak a CD-re(Cistanchedeserticola)a kivonat immunerősítő (Chin és Su, 1993), szabadgyökfogó hatás (Hsu és mtsai, 1995), valamint az SOD aktivitás növekedése (Chang és mtsai, 1995) rendelkezett. Egy közelmúltbeli tanulmányban a szabadgyök-reakció jelentős szerepet játszott a gyulladásos folyamatokban (Arrigoni-Martelli, 1985). Ezért jelen tanulmányban a CD feltételezett fájdalomcsillapító hatásait próbáltuk megvizsgálni(Cistanchedeserticola)kivonat egerekben ecetsavval kiváltott vonaglási teszttel (Taber és mtsai, 1969) és formalin-indukált nyalási teszttel (Shibata et al., 1989). Másodsorban a lehetségest is tanulmányoztukanti-gyulladásosCD tevékenységei(Cistanchedeserticola)kivonat a klasszikus gyulladásos folyamatról karragenánnal kiváltott ödéma teszttel (Winter et al., 1962) és alternatív gyulladásos folyamatról zimozánnal kiváltott ödéma teszttel (Tarayre és mtsai, 1989). Végül a CD-kivonat aktív rétegeit kutattuk különböző oldószerekkel elválasztva. '

2. Anyagok és módszerek

2.1. Növényi anyagok és kivonatok

A CD rizómái(Cistanchedeserticola)a tajvani piacról vásárolták, és MT Hsieh professzor megerősítette. Az utalványmintát (szám: CMC-ICPS-000626) a Kínai Orvostudományi Főiskola Kínai Gyógyszertudományi Intézetének herbáriumában őrizték meg későbbi felhasználás céljából. CD kinyerése és izolálása(Cistanchedeserticola)a korábbi jelentésekhez hasonlóan követték (Lu, 1998). CD(Cistanchedeserticola)kivonat (34,2 százalékos kitermelés) és három réteg*/etil-acetátos réteg, butanolos réteg és vizes réteg (kitermelésük 3,4, 10,2, 30,6 százalék) (CDE, CDB és CDW rövidítése)*/ kivonatok elkészítése.

2.2. Kivonatok és gyógyszer készítése

CD(Cistanchedeserticola)kivonat ({{0}}.1, 0,3, 1 g/kg) és három réteg CD(Cistanchedeserticola)a kivonatokat ({{0}}.03, 0,1, 0,3 g/kg) 0,5%-os karboxi-metil-cellulózban oldottuk, és 60 perccel korábban szájon át adtuk be. induktor befecskendezésére. Acetilszalicilsavat (ASA) (100, 300 mg/kg) és indometacint (IN DOL) (10 mg/kg) 0,5% karboxi-metil-cellulózzal készített szuszpenzió formájában, és intraperitoneálisan adtuk be az induktor injekciója előtt. Naloxont ​​(1 mg/kg) normál sóoldatban oldottunk.

2.3. Állatok

A vizsgálathoz hím Sprague-Dawley patkányokat (200-250 g) használtunkanti-gyulladásostevékenységek. Hím ICR egereket (20-25 g) használtunk a fájdalomcsillapító hatások tesztelésére. A kísérletekben minden állatot a Laboratóriumi állatok gondozására és használatára vonatkozó vezérelvek szerint használtunk. A kísérlet megkezdése előtt legalább 1 hétig 239/1 8C hőmérsékletű és 60 százalékos páratartalom mellett szabályozott környezetben tartották őket, szabad hozzáférést biztosítva a pelletben lévő standard élelmiszerekhez (a Fwusow Industry Co. LTD., Tajvan szállítja és tervezte). ) és csapvíz, amelyben 12-12 h világos/sötét ciklus (világos fázis: 08:00-20:00 h) megmaradt. Ezután gyógyszereket adtak be és a fájdalomcsillapítót illanti-gyulladásosa vizsgálatokat kettős vak módszerrel végeztük. A viselkedés mérése után az összes állatot szén-dioxiddal leölték.

2.4. Antinociceptív vizsgálat

2.4.1. Ecetsav által kiváltott hasi vonaglási válasz egerekben

Az egereket véletlenszerűen több csoportra osztották. Minden egérnek intraperitoneálisan 1%-os ecetsavoldatot (10 ml/testtömeg-kg) adtunk. Az egereket az egyes megfigyelődobozokba helyeztük. Az ecetsav által kiváltott hasi vonaglás tünetei hasonlóak voltak a Taber és munkatársai által leírtakhoz. (1969). A kontroll állatok vivőanyag-oldatot kaptak ugyanezekben a kísérletekben. Öt perccel az ecetsav befecskendezése után az egerenkénti vonaglási reakciók számát 10 percig számoltuk az ecetsav által kiváltott hasi vonaglás során. Végül a vonagló válaszok száma lehetővé tette, hogy a védelem százalékos arányát a következő arányban fejezzük ki: (kontroll átlag-kezelt átlag) /100/ kontroll átlag.

2.4.2. Formalin által kiváltott nyalási válasz egerekben

Ez a módszer a Shibata és mtsai. (1989). Mindegyik egeret a megfigyelő kamrába helyeztük átlátszó akrillemez padlóra 5 percre a formalin injekció beadása előtt. A padló alatt egy nagy tükröt 458°-os szögben megdöntöttek, hogy lehetővé tegyék az állat mancsainak egyértelmű megfigyelését. Az állatoknak 25 ml 1%-os formalint adtunk be a jobb lábszárba. Ezután minden állatot visszahelyeztünk a kamrába, és megfigyeltük az intenzív nyalási reakció két különálló időszakát. Az első időszakot (korai fázis) 0 /5 perccel a formalin injekció beadása után, a második időszakot (késői fázis) 10 /35 perccel az injekció beadása után rögzítettük. Az injektált mancs nyalogatásával eltöltött időt (időket) mértük a fájdalomreakció indikátoraként.

2.5. Gyulladásgátló vizsgálat patkányokon

Azanti-gyulladásosAz aktivitást patkányokban úgy határoztuk meg, hogy megmértük a hátsó mancs térfogatának átlagos növekedését gyulladásos szerek, például karragenán (Winter és mtsai, 1962) vagy zimozán (Tarayre és mtsai, 1989) sub plantáris injekciója után. Az állatokat 0,1 ml 1%-os karragénnel vagy 2%-os zimozánnal fecskendezték be a jobb hátsó lábba a talpi aponeurosis alatt. A gyulladás mennyiségét milliliterben, pletizmométerrel (7150 Ugo Basile) határoztuk meg, amely a térfogat elmozdulása miatti kis vízszintkülönbségeket rögzítette. Bármilyen kezelés előtt meghatároztuk az állatok hátsó mancsának átlagos térfogatát (Vo) három olyan méréssel, amely nem tért el 4 százaléknál nagyobb értéktől (a berendezés pontossága). Ezután 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 240 perccel a gyulladást okozó szerek beadása után három méréssel meghatároztuk az egyes állatok hátsó mancsának átlagos térfogatát (Vt), amelyek nem tértek el több mint 4 százalék.

Az ödéma százalékos arányát minden rekordnál úgy számítottuk ki, hogy összehasonlították az egyes állatok hátsó mancsainak átlagos térfogatát (Vt) a gyulladásos szerek injekciója után az egyes állatok hátsó mancsainak átlagos térfogatával (Vo) bármilyen kezelés előtt (Palanichamy). és Nagarajan, 1990). A gátlás százalékos arányát minden csoportra a következő arány alkalmazásával határoztuk meg: [(Vt-Vo)kontroll /(Vt-Vo)kezelt]-100/(Vt-Vo)kontroll.

2.6. Statisztikai analízis

Minden adat, amelyet a fájdalomcsillapító ésanti-gyulladásosAz aktivitást átlagos és standard hibákkal fejeztük ki, és tovább elemeztük ANOVA egytényezős varianciaanalízissel, majd Scheff-teszttel. Ha a valószínűség (P) kisebb volt, mint 0,05, a különbséget szignifikánsnak tekintettük.

3. Eredmények és megbeszélés

Az előkezelt állatok orális dózisú CD-vel(Cistanchedeserticola)kivonat (0.1-1 g/kg) dózisfüggő és szignifikáns gátlást eredményezett az ecetsav által kiváltott vonaglási reakcióban (1. táblázat), valamint a formalin által kiváltott nyalogatás kétfázisú fázisában egerekben ( 1(A) ábra). A CD okozta gátlás(Cistanchedeserticola)Az ecetsav által kiváltott vonagló válaszreakció és a formalin által kiváltott nyalási reakció körülbelül 54, illetve 45 százaléka volt. A pozitív kontroll acetilszalicilsav 0.1-0,3 g/kg-nál szintén csökkentette az ecetsav által kiváltott vonaglási választ 45-64 százalékos gátlás mellett (1. táblázat). Azonban a másik pozitív kontroll indometacin 10 mg/kg-ban csak a formalin által kiváltott nyalogatás késői, de nem korai fázisát gátolta egerekben, 32%-os maximális gátlás mellett (1(A) ábra). Továbbá csak butanolos és vizes réteg a CD három rétege között(Cistanchedeserticola)A kivonat 0.1-0.3 g/kg szintén jelentős antinocicepciót produkált, és a butanolos réteg fájdalomcsillapító hatása jobb volt, mint a vizes rétegé (1. táblázat és 1(B) ábra). . Másodszor felmértük aanti-gyulladásosCD aktivitása(Cistanchedeserticola)kivonat és három réteg a klasszikus (karragén indukálta) és alternatív (zimozán által kiváltott) ödémaképződés ellen. Megtaláltuk azt a CD-t(Cistanchedeserticola)A kivonat 0.1-1g/kg dózisfüggő módon szintén szignifikánsan gátolta a karragenán által kiváltott ödéma kialakulását, és az indometacin 10 mg/kg dózisban szintén hatékonyan gátolta a karragenán által kiváltott ödéma kialakulását patkányokban (1. ábra). 2). A zimozán által kiváltott ödéma kialakulását azonban a CD nem gátolta(Cistanchedeserticola)kivonat 0.1-1 g/kg patkányokban (az adatok nem láthatók). Továbbá a CD három rétege közül csak a butanolos réteg(Cistanchedeserticola)A kivonat 0.1-0.3 g/kg szignifikánsan gátolta a karragenán által kiváltott ödéma kialakulását patkányokban (2. ábra). Fitokémiai jelentések szerint a CD butanolos rétegének összetevőihez tartozó akteozid és borostyánkősav(Cistanchedeserticola)kivonat (Hsu et al., 1994, 1995), rendelkezett aanti-gyulladásoshatás a vegyszerek által kiváltott ödéma kialakulására (Murai et al., 1995; Kabachnyi és mtsai, 1987). Jelenlegi adataink és más korábbi jelentéseink alapján a CD rizómáit javasoltuk(Cistanchedeserticola)birtokolt fájdalomcsillapító ésanti-gyulladásosrágcsálókban, az aktív összetevők pedig főként a CD butanolos rétegében távoznak(Cistanchedeserticola)kivonat. Hogy az akteozid és a borostyánkősav a CD hatóanyagai-e(Cistanchedeserticola), elkülönítjük és értékeljük fájdalomcsillapítójukat ésanti-gyulladásostevékenység a jövőben.

1. ábra CD hatása(Cistanchedeserticola)kivonat ({0}},1, 0,3 és 1 g/kg), etil-acetát, butanolos és vizes CD réteg(Cistanchedeserticola)kivonat (CDE, CDB és CDW) ({{0}}.03, 0.1 és 0.3 g/kg) és indometacin (INDOL, 10 mg/kg) a formalin által kiváltott nyalogatás korai (0/5 perc) és késői fázisában (10/35 perc) egerekben. Mindegyik érték átlag9/SE (N /7) formában van ábrázolva. *PB/0,05, *** PB/0,001, összehasonlítva a VEH csoporttal.

2. ábra A CD hatása(Cistanchedeserticola)kivonat ({0}},1, 0,3 és 1 g/kg), etil-acetát, butanolos és vizes CD réteg(Cistanchedeserticola)kivonat (CDE, CDB és CDW) ({0}}.03, {{10},1 és 0,3 g/kg) és indometacin (INDOL, 10 mg/kg) patkányok karragenánnal kiváltott mancsödémájára. Mindegyik érték átlag9/SE (N /6) formában van ábrázolva. *PB/0,05, ** PB/0,01, összehasonlítva a VEH csoporttal

Továbbá Shibata et al. (1989) azt sugallják, hogy a formalin által kiváltott nyalogatás korai fázisa a bradikininnel és a P-anyaggal, a késői fázisa pedig a bradikininnel, az autokrinnel és a prosztaglandinnal függött össze. Jelenlegi adataink szerint a naloxon nem szüntette meg aanti-gyulladásosa CD butanolrétegének aktivitása(Cistanchedeserticola)kivonat a formalin által kiváltott nyalási válasz mindkét fázisára (3. ábra), valamint az ecetsav által kiváltott vonaglási reakcióra kifejtett fájdalomcsillapító hatásra (1. táblázat). Ezért a fájdalomcsillapító ésanti-gyulladásosA CD-kivonat butanolrétegének hatásai nem feltétlenül függenek össze az opioid receptorokkal. Ráadásul CD(Cistanchedeserticola)kivonat és butanolrétege csak patkányokban gátolta a karragenán által kiváltott ödéma kialakulását. A polimorfonukleáris leukocita infiltráció és az aktivált kinin rendszer által kiváltott karragenán ödéma, különösen a bradikinin különbözik a zimozán által kiváltott ödémától a monocita beáramlás és az aktivált immunrendszer révén (Damas et al., 1990; Dawson és mtsai, 1991). A borostyánkősav, amely a CD-kivonat butanolos rétegének egyik összetevője, gátolta a polimorfonukleáris leukociták működését (Rotstein et al., 1985). Ezekből az eredményekből kiderült, hogy a fájdalomcsillapító ésanti-gyulladásosa CD butanolrétegének hatásai(Cistanchedeserticola)a kivonat kapcsolatban állhat a kinin rendszerrel, de nem az opioid receptorokkal és az immunrendszerrel, bár a CD(Cistanchedeserticola)immunerősítő hatással rendelkeztek (Chin és Su, 1993). A részletes mechanizmus fájdalomcsillapító ésanti-gyulladásosaktivitást, tovább vizsgáljuk a CD kivonat aktív rétegeivel vagy összetevőivel.

Cistanchetubulosaszámos hatása van, kattintson ide, ha többet szeretne megtudni

Hivatkozások

Arrigoni-Martelli, E., 1985. Pharmacology of free radical scavenging in gyulladás. International Journal of Tissue Reactions 7, 513/519.
Chang, Y., Wu, H., Wang, SN, Cheng, HC, 1995. Tanulmány az erős hatásokrólCistanchedeserticolaMa., Cistanche salsa (CA Mey) G. Beck és Cistanche tubulosa (Schenk) R Wight. China Journal of Chinese Materials and Medicine 26, 143/146.
Chin, HL, Su, YC, 1993. Tanulmány a gyógyszer farmakológiai hatásairólCistanchedeserticolaMa. China Journal of Chinese Materials and Medicine 19, 143/146.
Damas, J., Bourdon, V., Remacle-Volon, G., Adam, A., 1990. Carragenin és zymosan által kiváltott kininek és peritoneális váladékok patkányokban. British Journal of Pharmacology 101, 418/422.

Dawson, J., Sedgwick, AD, Edwards, JC, Lees, P., 1991. A karragenánra, dextránra és zimozánra adott sejtes, exudatív és szövettani válaszok összehasonlító vizsgálata egérben. International Journal of Tissue Reactions 13, 171/185.

Hsu, WH, Chu, SH, Chao, CH, Hsu, Y., Yuan, KW, Yen, CH, Chi, CY, Chan, C., 1994. Tanulmány a kémiai összetevőkrőlCistanchedeserticolaMa. China Journal of Chinese Materials and Medicine 25, 509/513.
Hsu, WH, Chu, SH, Sheng, LC, Yuan, KW, Mao, CN, 1995. Tanulmány a kémiai összetevőkről és farmakológiai hatásairólCistanchedeserticolaMa. és Cistanche salsa (CA Mey) G. Beck. Hagyományos kínai gyógynövényes drogok 26, 143/146.
Kabachnyi, VI, Chernykh, VP, Drogovoz, SM, Golubenko, Iu.A., Bogutskaia, EE, 1987. Keresésanti-gyulladásosborostyánkősav-heteril-amidok származékai közül készült készítmények. Farmakologiia i Toksikologiia 50, 94/97.
Lee, SL, 1986. Pen-Tsao-Kun-Mu. National Research Institute of Chinese Medicine Publications, Taipei, p. 20.
Lu, MC, 1998. Tanulmányok a nyugtató hatásárólCistanchedeserticola. Etnofarmakológiai Közlöny 59, 161/165.
Murai, M., Tamayama, Y., Nishibe, S., 1995. Phenylethanoids in the herb of Plantago lanceolata and inhibitory effect on arachidonsav-induced mouse mouse oedema. Planta Medica 61, 479/480.
Palanichamy, S., Nagarajan, S., 1990. A Cassia alata leat kivonat és a kemp Eerol 3-0-Sophoroside fájdalomcsillapító hatása. Journal of Ethnopharmacology 29, 73/78.
Rotstein, OD, Pruett, TL, Fiegel, VD, Nelson, RD, Simmons, RL, 1985. A borostyánkősav, a Bacteroides fajok metabolikus mellékterméke, gátolja a polimorfonukleáris leukociták működését. Fertőzés és immunitás 48, 402/408.
Shibata, M., Ohkubo, T., Takahashi, H., Inoki, R., 1989. A módosított formalin teszt: jellegzetes kétfázisú fájdalomválasz. Fájdalom 38, 347/ 352.
Taber, RI, Greenhouse, DD, Rendell, JK, Irwin, S., 1969. Opioidok agonista és antagonista kölcsönhatásai az ecetsav által kiváltott hasi nyúláson egerekben. Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics 169, 29/38.
Tarayre, JP, Delhon, A., Aliaga, M., Barbara, M., Bruniquel, F., Caillol, V., Puech, L., Consul, N., Tisne-Versailles, J., 1989.
A zimozán-gyulladás farmakológiai vizsgálatai patkányokban és egerekben. 1: Zymosan által kiváltott mancsödéma patkányokban és egerekben. Farmakológiai Kutatás 21, 375/384.
Winter, CA, Risley, EA, Nuss, GW, 1962. Karragén által kiváltott ödéma patkány hátsó mancsában, mint vizsgálatanti-gyulladásosgyógyszerek. Proceedings Society of Experimental Biology and Medicine 111, 544/547.