A Kalmia Angustifolia kivonat antioxidáns, gyulladáscsökkentő és öregedésgátló hatása, valamint néhány fontosabb vegyület azonosítása 2. rész

Kérlek keress feloscar.xiao@wecistanche.comtovábbi információért

3. Eredmények

3.1. Sejtéletképesség értékelése

A kivonat biztonságosságát a sejt metabolikus aktivitását értékelő MTT-teszttel értékelték [27,28]. Ezért betekintést nyújt a sejtek életképességébe, pontosabban az elsődleges humán keratinociták életképességébe ebben a tanulmányban. Az eredmények azt mutatták, hogy 48 órás kezelés után a K. Angustifolia kivonat 200 ug/ml-ig biztonságos, 88±12 százalékos sejtéletképességgel (1. ábra). A K. Angustifolia 400 ug/ml koncentrációban citotoxicitást okozott, a sejt életképessége 51 ± 8 százalék volt. Röviden, a K.angustifolia kivonat megőrzi a sejtek életképességének magas szintjét 0 és 200 ug/ml közötti koncentrációban.

1. ábra: A K. Angustifolia kivonat citotoxicitásának értékelése primer humán keratinocitákon a metabolikus aktivitás mérésével MTT vizsgálattal történt. Minden kísérletet legalább három párhuzamosban végeztünk, és a bemutatott eredmények legalább két különböző kísérletet reprezentálnak (N=2, n{2}}). Az adatokat a három párhuzamos mérés átlagaként mutatjuk be ± SD. A vízszintes vonal 50 százalékos sejtéletképességre van beállítva. A statisztikai szignifikanciát egyutas ANOVA-val, majd Dunnett-féle post hoc teszttel határoztuk meg (p-érték<0.05 compared="" to=""><>

További információért kattintson ide

3.2. Antioxidáns kapacitás

Az antioxidáns potenciált két különböző teszttel, az ORAC-teszttel és egy sejtalapú DCFH-DA-t alkalmazó vizsgálattal értékeltük. Az első a peroxilgyökök gátlását mérte a vizsgált kivonattal. Az eredmények azt mutatják, hogy a K.angustifolia kivonat erős antioxidáns kapacitással rendelkezik, ORAC-értéke 16±3 μmol TE/mg (1. táblázat).cistanche wirkungEz az eredmény összevethető az erős antioxidáns vegyületként ismert kvercetin és katechin pozitív kontrolljaival, amelyek 21±2, illetve 20±2 μmol TE/mg ORAC-értéket mutattak, ezzel megerősítve a vizsgált kivonat antioxidáns képességét.

1. táblázat: Antioxidáns aktivitás a K.angustifolia kivonat ORAC vizsgálatával mérve. Az adatokat a három párhuzamos mérés átlagaként mutatjuk be ± SD Minden kísérletet három párhuzamosban végeztünk, és a bemutatott eredmények legalább két különböző kísérletet reprezentálnak (N=2, n =3). Pozitív kontrollként kvercetint és katechint használtunk.

A K.angustifolia antioxidáns potenciálját tovább igazoltuk a DCFH-DA sejtalapú vizsgálattal WS1 humán bőrfibroblasztokon (2. ábra). Az eredmények azt mutatták, hogy a K. Angustifolia kivonat már 3,13 ug/ml koncentrációban erős antioxidáns hatású, a DCFH oxidációt 83,7±0,8%-kal gátolta. Ez az eredmény összehasonlítható az 1,56 ug/ml koncentrációjú pozitív kontroll kvercetinnel, amely 87,41±0-os gátlási százalékot mutatott a DCFH oxidációjában.{19}}3 százalék. A fele-maximális gátlókoncentráció (IC50) meghatározása azonban azt mutatta, hogy a kvercetin körülbelül 2-szer hatékonyabb a K. Angustifolia kivonathoz képest 0,168±{ ICso értékekkel. {25}},009 ug/ml és 0,37±0,02 ug/ml.

2. ábra: A K. Angustifolia kivonatok antioxidáns aktivitása a terc-butil-hidroperoxiddal (t-BuOOH) kezelt humán bőrfibroblaszt WS1 sejtvonalon, DCFH-DA-t használó sejtalapú vizsgálattal meghatározva. Minden kísérletet legalább három párhuzamosban végeztünk, és a bemutatott eredmények legalább két különböző kísérletet reprezentálnak (N=2, n=3). Az adatokat a három párhuzamos mérés átlagaként mutatjuk be±SD. A vízszintes vonal 50 százalékos gátlásra van beállítva. A statisztikai szignifikanciát egyutas ANOVA-val, majd Dunnett-féle post hoc teszttel határoztuk meg (p-érték<0.05 compared="" to="" control="" of="" cells="" treated="" with="" only="" t-buooh（200μm）;*=""><0.05）or bonferroni's="" post="" hoc="" test=""><0.05 compared="" to="" positive="" control="" quercetin="" （1.56="" μg/ml）;#="" p-value=""><>

3.3. Gyulladáscsökkentő potenciál

A K.angustifolia kivonat gyulladásgátló hatását az LPS-sel aktivált makrofágok nitrittermelését csökkentő képessége alapján értékeltük (3. ábra).citrusfélék bioflavonoidjaiA 3. ábrán bemutatott eredmények azt mutatták, hogy a K.angustifolia kivonat szignifikánsan gátolta a NO-túltermelést már 20 ug/ml koncentrációban is. Nagyobb gátlást figyeltek meg 40 és 80 ug/ml koncentrációknál, az NO-termelés gátlási százaléka 25 ± 3 százalék, illetve 49 ± 2 százalék. Ez összehasonlítható a 250 uM (67 ug/ml) koncentrációjú L-NAME pozitív kontrolléval, amely 37±2 százalékkal gátolta a NO túltermelését.

3.4. Szövettani elemzések

A K. Angustifolia kivonat öregedésgátló potenciálját önszerveződő módszerrel előállított rekonstruált bőrhelyettesítők segítségével értékeltük.cynomorium előnyeiA Masson-féle trikrómmal festett metszetek szövettani analízise (4A. ábra) megerősítette a bőrhelyettesítők integritását minden egyes állapot esetén, mivel minden bőrhelyettesítő dermális lavórral és differenciált felhámmal rendelkezik. Ezekből a szövettani metszetekből megmértük az élő epidermisz és irha vastagságát (4B. ábra). Az élő epidermisz esetében a K.angustifolia kivonatnál nem figyeltek meg szignifikáns növekedést, 1-szeres változással.0(a kezelt helyettesítő vastagságának és a kezelés nélküli kontroll vastagságának arányaként definiálva). Ami a dermist illeti, a K.angustifolia kivonat esetében 25 ug/ml-nél a dermális vastagság szignifikáns növekedését (1,36-os hajtásváltozással) figyelték meg, ami arra utal, hogy a kivonat hatással van a dermális rétegre, pontosabban a fibroblasztokra. és még az extracelluláris mátrix komponensek szintézisét is elősegítheti.

Minden kísérletben egy {{0}},2 százalékos (u/o) DMSO-kontrollt teszteltünk, mivel a kivonatot 0,2 százalékos DMSO-ban oldottuk, de nem figyeltünk meg különbséget a kezelés nélküli kontrollhoz képest (az adatok nem Látható). Ezenkívül a K. Angustifolia 50 ug/ml-es és 100 ug/ml-es koncentrációit bőrhelyettesítőkön is tesztelték, és a bőrvastagság ugyanazt a növekedést figyelte meg, mint 25 ug/ml-nél, 1,3 és 1,2-es hajtásváltozásokkal (az adatok nem Látható). Így 25 ug/ml volt az optimális koncentráció, és ezzel a koncentrációval végeztünk további elemzéseket.

4. ábra. A K.angustijolia kivonat hatása a rekonstruált bőrhelyettesítők szövettanára. (A) Masson trikrómmal festett bőrpótló metszeteinek szövettani elemzése. A stratum corneum sötétkék, az élő epidermisz lila, a dermis pedig világoskék. Objektív 10×, méretarány: 100 um. (B) Az élő epidermisz és irha vastagságának hajtásváltozása. A hajtásváltozást a kezelt helyettesítő anyagok vastagságának és a kontroll (kezelés nélküli) vastagsági értéknek az arányaként határozzuk meg. Mindegyik állapot két helyettesítőjét elemeztük, és három különböző sejtpopulációval igazoltuk (N =3, n =6). Az adatokat a három különböző sejtpopuláció átlagaként mutatjuk be ± SDS A statisztikai szignifikanciát t-teszttel határoztuk meg,**p-érték<>

3.5. Immunfluoreszcens festés

Négy fehérjét figyeltek meg, amelyek mennyisége általában csökken a bőröregedés során az immunfluoreszcens festéssel: elasztin, I-es típusú kollagén (kollagén-1), teljes típusú kollagén (kollagén-3) és akvaporin-3 （ 5. ábra) Úgy tűnt, hogy a K. Angustifolia kivonat 25 ug/ml koncentrációban növeli az elasztin expressziót (5E. ábra) a bőrrekeszben a kontrollhoz képest (5A. ábra). A kontroll állapotban (kezelés nélkül) az elasztin fehérje gyengén expresszálódott. Az immunfluoreszcenciával festett metszeteken fluoreszcens intenzitás félkvantifikációt végeztünk, hogy betekintést nyerjünk a kezelések utáni fluoreszcencia növekedésébe.sivatagi jácintA pixelintenzitás-elemzés megerősítette az 5. ábrán látható eredményeket. A K. Angustifolia kivonattal 25 ug/ml koncentrációban kezelt bőrhelyettesítőknél az elasztin pixelintenzitása 18%-kal nőtt a kezelés nélküli kontrollhoz képest. A kollagén-1 tekintetében a K. Angustifolia kezelés fokozta annak expresszióját (5F. ábra), összehasonlítva a kontrollal (5B. ábra). Valójában a 25 ug/ml koncentrációjú kivonattal végzett kezelés eredményezte a kollagén pixelintenzitásának legnagyobb növekedését-1, 46 százalékos növekedéssel. A kollagén-3 esetében azonban a kifejezés hasonló maradt (5G. ábra), összehasonlítva megfelelőjével (5C. ábra). Végül, az aquaporin-3, az epidermális keratinocitákon található membránfehérje expressziója szintén hasonlónak tűnt a 25 ug/ml-es kezelést követően (5H. ábra), összehasonlítva a kontrollal (5D. ábra). Nem volt szignifikáns pixelintenzitásnövekedés a kollagén-3 és az akvaporin-3 expressziójában a K. Angustifolia kivonattal 25 ug/ml-es kezelést követően.

5. ábra. Az öregedési markereket immunfluoreszcens festéssel tettük láthatóvá. Elasztin(A,E),kollagén-1(B,F), kollagén-3(C,G) és akvaporin-3(D,H)expresszió, ami általában csökken a bőr alatt öregedés, az egészséges bőrhelyettesítőknél látható, kezeletlen (AD) és K.angustifolia kivonattal kezelve 25 ug/mL (EH). A sejtmagokat DAPI-val (kék) festettük. A pontozott vonal az epidermisz és a dermis közötti elválasztást jelenti. Mindegyik állapot két helyettesítőjét elemeztük, és három különböző sejtpopulációval igazoltuk (N= 3, n= 2; skála: 100 um).

3.6. A K. Angustifolia kivonat néhány főbb vegyületének izolálása és azonosítása

Az extraktum tisztítását nyitott Diaion9 oszlopon, MeOH/HO-val eluálva, növekvő százalékos metanollal (0-100 százalék) végeztük. Ez az első tisztítás négy frakció (AD frakció) kinyeréséhez vezetett. A B frakciót szilikagél oszlopkromatográfiának vetettük alá, és ez a katechin és az epikatekin izolálásához vezetett (B1 frakció). A vegyületek azonosságát NMR-analízissel és kereskedelmi standardokkal való összehasonlítással határoztuk meg. A katechint és az epikatechint már azonosították a K. Angustifolia-ban [9]. A C frakciót szintén szilikagél oszlopkromatográfiával tisztítottuk, és ez az eljárás 7 különálló frakciót eredményezett (C1-C7). A C3 frakció oktadecil-szilán kromatográfiás oszlopon végzett tisztítása halványsárga vegyület izolálásához vezetett. Ennek a vegyületnek a molekulaképletét (C20Hj8O) a HR-ESI-MS spektrumából határoztuk meg egy kvázimolekuláris ioncsúcs alapján, m/z 434,3511 [M plusz H]t. Az NMR'H és13C spektrumok alapján az izolált vegyületet aviculariaként azonosítottuk (C3B frakció). Legjobb tudomásunk szerint ezt a vegyületet először a K. Angustifolia-ban jelentették, de számos növényben gyakori [29]. A C4-es frakciót szintén oktadecil-szilán-kromatográfiás oszlopos tisztításnak vetettük alá, és ez a proantocianidin A2 (epikatechin-dimer; C4A-frakció) és egy másik epikatekin-dimer izolálásához vezetett, amelyet epikatekinként azonosítottak (2 -O-7, {{). 25}})-ent-epikatechin (proantocianidin Ax; C4C frakció). Ezt a két vegyületet az NMR adatok alapján azonosították [30,31]. Legjobb tudomásunk szerint ez az első alkalom, hogy a proantocianidin Ax-t azonosították K. Angustifolia-ban, de a proantocianidin A2-t már azonosították [9].flavonoid extrakciós módszer pdfA Don szilikagél-frakció egymást követő tisztítása egy vegyületet eredményezett fehér kristályok formájában (D4 frakció). Az NMR adatok minden tekintetben megfeleltek a biotinra vonatkozóan az irodalomban közölt adatoknak [32]. Az asotint a Kalmia nemzetségben azonosították [33].

3.7. A K.angustifolia kivonat azonosított vegyületeinek biológiai aktivitása

A K.angustifolia hatóanyagainak vizsgálatát az egyes azonosított vegyületek antioxidáns és gyulladásgátló potenciáljának felmérésével végeztük (2. táblázat). Az antioxidáns aktivitás és az ORAC vizsgálatot és egy sejtalapú vizsgálatot DCFH-DA alkalmazásával végeztünk. E tesztek szerint a katechin, az avicularia, a proantocianidin A2 és a proantocianidin Ax erős antioxidáns hatást mutatott, míg az epikatekin mérsékelt antioxidáns aktivitást mutatott. Az ORAC értékek rendre 6,7±0,3, 4,1±0,3, 4,5±0,8, 5,3±0,6 és 4,6±{{ 23}},6 μmolTE/μmol, míg a sejtalapú vizsgálat IC-értékei0 rendre 0,8±0,3, 0,4{{ 33}} ± 0.03,0.30 ± 0.03,0.24 ±0.02 és 1,22± 0.06 uM A pozitív kontrollok, a kvercetin és a Trolox 7,6 ±0,7 és 0,91±0,11 mol ORAC-értékeket mutattak TE/mol, és az ICso 0,21±0,024±0,002μM.

2. táblázat: A K. Angustifolia azonosított vegyületek antioxidáns és gyulladásgátló hatásai. Az adatokat a három párhuzamos mérés átlagaként mutatjuk be ±S.ID. Minden kísérletet három párhuzamosban végeztünk, és a bemutatott eredmények legalább két különböző kísérletet reprezentálnak (N=2, n=3). Pozitív kontrollként Quercetint és Troloxot használtunk.

Ami a gyulladásgátló potenciált illeti, amelyet az LPS-stimulált RAW 264.7 makrofágok NO-túltermelésének gátlásával értékelünk, az izolált vegyületek egyike sem mutatott olyan gyulladásgátló potenciált, amely felelős lehetne a K.anqustifolia gyulladásgátló aktivitásáért.

4. Megbeszélés

Kevés természetes hatóanyag bizonyította hatásosságát a bőr öregedésének csökkentésében kimerítő hatékonysági vizsgálatokkal, ami korlátozza a bőröregedést jelentősen csökkentő bőrápoló termékek tudományos bizonyítékokon alapuló fejlesztését. Az in vitro modellek nagyszerű eszközök a termékek biztonságosságának és hatékonyságának megállapítására a kozmetikai területen, lehetővé téve az állatmodellek alkalmazásának elkerülését, amelyek nagyon ellentmondásosak, sőt bizonyos országokban vagy államokban, például az Európai Unióban, Kanadában, Indiában tiltottak vagy korlátozottak. , Brazília (hét állam), Új-Zéland, Ausztrália és az Egyesült Államok (Kalifornia, Nevada, Illinois)[34-37]. A tanulmány célja egy K.angustifolia kivonat biztonságosságának és hatékonyságának értékelése volt rekonstruált bőrhelyettesítők felhasználásával, hogy megállapítsuk a K, Angustifolia lehetséges felhasználását a kozmetikumokban. Ez a tanulmány rávilágít a K. Angustifolia kivonat öregedésgátló potenciáljára.

A bőrápoló termékekben való felhasználáshoz először bizonyítani kell, hogy az összetevők biztonságosak a bőrre, így a bőrsejtekre nézve. A készítmény minden egyes kozmetikai összetevőjének toxicitási értékelése a kozmetikai termékek biztonságosságának értékelésének alapja. Ebben a vizsgálatban a kivonat biztonságosnak bizonyult keratinocitákon való felhasználásra 200 ug/ml koncentrációig. A K.angustifolia kivonat 25 ug/ml-es biztonságosságát a rekonstruált bőrhelyettesítők szövettani analízise is alátámasztotta. Ezek az elemzések azt mutatták, hogy az összes rekonstruált bőrréteg (epidermisz és irha) integritása 25 ug/ml koncentrációban megmaradt. Az élő epidermisz vastagsága még a kivonattal való kezelés után is hasonló volt a kezeletlen bőrhelyettesítőkéhez (kontroll), és a bőr vastagsága megnőtt. A bőrhelyettesítőket háromszor kezelték egy héten keresztül, ami arra utal, hogy a K.angustifolia kivonat ismételt kezelésekkel biztonságos. Így a K Angustifolia felhasználható dermokozmetikában, mivel úgy tűnik, hogy megőrzi a sejtek életképességét. További kísérleteket, például perkután abszorpciót is el kell végezni annak igazolására, hogy a kivonat felhasználható-e a megfelelő példákra vonatkozó irányelvek szerint [38].

A bőrápoló termékek fejlesztésének másik fontos paramétere vitathatatlanul a hatóanyagok tudományos bizonyítékokkal alátámasztott hatékonysága. Ennek a szempontnak a kiértékelésére többféle kísérlet és elemzés végezhető. A növényi kivonatoknál általában felmérik antioxidáns potenciáljukat a hatékonyságuk megállapítása érdekében39-41]. A bőr öregedése összetett jelenség, amely különböző mechanizmusokat foglal magában, és számos elméletet javasoltak a molekuláris alap magyarázatára[1]. Az egyik ilyen magyarázat az oxidatív stressz. A bőr öregedéséhez vezető számos környezeti tényező, mint például a napsugárzás, a levegőszennyezés és a cigarettafüst, reaktív oxigénfajtákat (ROS) hoz létre, amelyek hozzáadódnak a sejtekben természetesen termelődő ROS-hoz [42-44]. A ROS szintjének ez a növekedése egyensúlyhiányt okoz a szabad gyökök és a természetes antioxidánsok között, így oxidatív stresszhez és szövetkárosodáshoz vezet, ebből fakad az antioxidáns vegyületek fontossága a bőr öregedésgátló termékeiben [45]. A bőrápoló termékekben található antioxidánsok segítenek megerősíteni a bőr antioxidáns kapacitását, hogy ellenálljanak az oxidatív stressz káros hatásainak. A K. Angustifolia kivonat antioxidáns aktivitásának értékelése, amelyet az ORAC assay-vel értékeltek, azt mutatta, hogy a kivonat hasonló antioxidáns potenciállal rendelkezik, mint a pozitív kontrollok kvercetinje és katechinje, két erős antioxidáns vegyület, ami kiváló antioxidáns kapacitásra utal. A pozitív kontrollokra kapott eredmények összhangban vannak Ou és munkatársai korábbi tanulmányával, amely azt mutatja, hogy a teszt megbízható [24]. Egy másik növény az Ericaceae családból, amely szintén megtalálható a boreális erdőben, és antioxidáns potenciálja miatt használatos, a Rhododendron groenlandicum. Az R.groenlandicum antioxidáns kapacitását Dufour és munkatársai egy korábbi tanulmányában értékelték. és a vizsgált kivonatok antioxidáns kapacitást mutattak a K. Angustifolia kivonat ORAC értékéhez képest, ami ismét megerősíti ennek a kivonatnak a nagy antioxidáns potenciálját és a növényi kivonat kozmetikai felhasználásának érdeklődését [39]. A K. Angustifolia kivonat ORAC teszttel mért antioxidáns aktivitását a biológiai környezetet jobban reprezentáló DCFH-DA assay igazolta. A DCFH-DA-t használó sejtalapú vizsgálat eredményei összhangban voltak az ORACeredményekkel. Ezen eredmények fényében a K. Angustifolia kivonat antioxidáns vegyületként a kozmetikumok kiváló hatóanyaga lehet. Legalább 3,13 ug/mL koncentrációban kell használni, ha az antioxidáns potenciált keresik, a kivonat biztonsági szintjének tiszteletben tartása mellett.

A K.angustifolia kivonat antioxidáns aktivitása az összetevőiben található fenolos vegyületeknek köszönhető, mint a(plus)-katekin, (-)-epikatechin és a proantocianidin A2, amelyeket a kivonatból izoláltak, valamint a p-kumárium. sav, kvercetin 3-O-galaktozid (peroxid), kvercetin 3-O-ramnozid (kvercitrin) és miricetin, amelyeket más tanulmányok is azonosítottak, de további vizsgálatokra lenne szükség a hipotézis megerősítéséhez [9 ,10,39, A6]. Ebben a vizsgálatban először azonosítottak két olyan vegyületet a K.angustifolia-ban, amelyek szintén felelősek lehetnek a kivonat antioxidáns aktivitásáért. Az Avicularia, egy flavonoid és a proantocianidin Ax, egy A-típusú proantocianidin, mindkettő a K. Angustifolia kivonatban található, érdekes antioxidáns potenciált mutatott ORAC-értékük és a sejtalapú vizsgálat alapján.

Az öregedési folyamat másik magyarázata a krónikus gyulladás. A bőr öregedési folyamatának tanulmányozása során felhalmozódó bizonyítékok az öregedéssel járó molekuláris gyulladás hipotéziséhez vezettek. Az egyik magyarázat az, hogy a sejtkárosodást, amelyet például a ROS feleslege okoz, az immunrendszer felismeri, ami az immunsejtek, például a makrofágok beszivárgását és aktiválását okozza [1]. A gyulladást elősegítő citokinek, például az IL-1, az IL-6 és a TNF-szint növekedését általában a bőr öregedésével figyelik meg [46]. Így a gyulladáscsökkentő potenciál érdekes tulajdonsága az öregedésgátló hatóanyagnak. A NO-termelés szintjével értékelt gyulladásgátló aktivitás a K.angustifolia kivonat jó gyulladáscsökkentő potenciálját mutatta 40 és 80 ug/ml koncentrációban, összehasonlítva a pozitív kontroll, az L-NAME alacsonyabb koncentrációjával. Mivel a kivonat magasabb koncentrációja a 250 μM L-NAME-hez hasonlítható, ez arra utal, hogy a K. Angustifolia a kozmetikumokban is használható gyulladáscsökkentő összetevőként. Sikerült a termelés egy részét gátolni, így gyulladáscsökkentő hatást fejt ki. A K. Angustifolia kivonatban azonosított vegyületek egyike sem mutatott olyan gyulladáscsökkentő hatást, amely megmagyarázhatná a kivonatét. A kivonat összetételének további vizsgálata szükséges a gyulladásgátló vegyületek értékeléséhez.

Az antioxidáns vegyületek érdekes tulajdonságokkal rendelkeznek a dermokozmetikai termékekben. Valójában ismert, hogy a bőr öregedését okozó számos környezeti tényező által generált reaktív oxigénfajták (ROS) a dermális extracelluláris mátrix fontos összetevőinek, például a kollagénnek és az elasztinnak a lebomlásához vezethetnek [47-49]. Mennyiségük csökkenését általában a mátrix metalloproteinázok (MMP) növekedése és szintézisük csökkenése okozza [48,50]. Az antioxidánsok és oxidánsok endogén termelése közötti jó egyensúly lehetővé teszi a bőr homeosztázisának fenntartását. A bőr öregedésével azonban egyensúlyhiány lép fel, így az exogén antioxidánsok használata releváns. Így a K. Angustifolia kivonat antioxidáns potenciálja az öregedésgátló potenciál vizsgálatához vezetett.

A bőr öregedésével gyakran megfigyelhető az élő epidermisz és irha vastagságának csökkenése. Az előbbit a keratinocita proliferáció csökkenése, míg az utóbbit az extracelluláris mátrix degradációja és szintézisének csökkenése okozza [4751-53]. Így a megfelelő vastagság növelése az öregedésgátló termékekkel történik. Nem figyeltek meg szignifikáns növekedést az élő epidermális vastagságban a K, Angustifolia kivonatnál 25 ug/ml-nél. Azonban jelentős növekedés (p-érték).<0.05） in="" the="" dermal="" thickness="" was="" observed.="" an="" increase="" could="" suggest="" matrix="" reorganization,="" or="" even="" an="" increase="" in="" the="" synthesis="" of="" dermal="" extracellular="" matrix="" components,="" such="" as="" elastin="" or="" collagens,="" which="" is="" an="" interesting="" property="" for="" an="" anti-aging="" extract.="" the="" immunofluorescence="" staining="" of="" several="" proteins="" was="" performed="" to="" further="" investigate="" the="" effect="" of="" the="" extract="" on="" the="" extracellular="">

Az elasztin, a kollagén-1 és a kollagén-3 szintje általában csökken a bőr öregedésével, ami többek között ráncok kialakulásához, a szakítószilárdság csökkenéséhez, fokozott törékenységhez és a sebgyógyulás gyengüléséhez vezet [ 54]. A dermális extracelluláris mátrix komponenseinek csökkenése e fehérjék lebomlásának fokozódásának és génexpressziójuk, így szintézisük csökkenésének köszönhető [1,53-55]. Lebomlásukat főként elasztázok (például humán neutrofil elasztáz és neprilizin) és MMP-k (mint például MMP-1 és MMP-3) okozzák. Az MMP-indukció a bőr öregedésében játszódik le, különböző transzdukciós utak aktiválása révén. [46,56]. A bőr öregedési folyamatában számos termék, mint például a ROS és a tumor nekrózis faktor (TNF-), a nukleáris faktor-kappa B (NF-kB) útvonal vagy a mitogén-aktivált protein (MAP) kináz aktiválásához vezethet. utak, beleértve az extracelluláris szignál-szabályozott kinázokat (ERK), a p38 mitogén által aktivált protein kinázokat (p38) és a c-Jun N-terminális kinázokat (JNK) [57,58]. Ez az aktiválás azután az NF-kB transzkripciós faktor vagy a transzkripciós faktor aktivátor protein 1 (AP-1) expressziójához vezet, amely szerepet játszik az MMP-k transzkripciójában. Az NF-kB vagy AP-1 aktiválása növeli az MMP-k expresszióját, és ezáltal fokozza a dermális összetevők lebomlását. A jelen tanulmányban az elasztin és a kollagén -1 expressziójának növekedése a kezeléssel azt mutatja, hogy a K.angustifolia hatékonyan képes ellensúlyozni a bőr öregedésének néhány fő jellemzőjét. A K. Angustifolia kezelést követően regisztrált megnövekedett elasztinszintek különösen meggyőzőek, mivel viszonylag jól dokumentált, hogy ez a fehérje általában gyengén vagy egyáltalán nem szintetizálódik a rekonstruált dermiszben, aszkorbinsavval kiegészített tenyésztési körülmények között, ahogy az bőrmodellünkben történik. (amint a kezelés nélküli kontrollnál látható, az 5A. ábra). Valójában, bár az aszkorbát elősegíti az extracelluláris mátrix termelést, különösen a dermális fibroblasztok kollagénszintézisét, egyes tanulmányok kimutatták, hogy a blasztogenezis folyamatára is gátló hatással van, így az elasztin felhalmozódás csökkenését eredményezi [59,60]. Így, ha 25 ug/ml kivonat elegendő és elég erős ahhoz, hogy a mi bőrmodellünkben leküzdje az aszkorbát hatását, akkor a K. Angustifolia nagy potenciális jelölt a bőröregedés elleni küzdelemben ebben a koncentrációban. Hozzájárulhat a bőr erősségének, feszességének és rugalmasságának visszanyeréséhez, ezáltal csökkentheti a ráncok megjelenését, de további klinikai vizsgálatok szükségesek e feltételezések megerősítésére.

5. Következtetések

Ebben a tanulmányban bebizonyítottuk, hogy a kutatóközpontunkban kifejlesztett bőrhelyettesítő modell hasznos eszköz az öregedésgátló hatékonyság értékelésére a dermokozmetikai területen. Nemcsak azt mutattuk be, hogy a K.angustifolia kivonat biztonságosnak tűnik a kozmetikai felhasználásban, hanem azt is, hogy erős antioxidáns képességgel és jó gyulladáscsökkentő hatással rendelkezik. Ez a tanulmány azt sugallja, hogy a K.angustifolia kivonat 25 ug/ml koncentrációban potenciális öregedésgátló hatással bírhat a bőrre, mivel a kivonat megnövelte a bőr vastagságát, és fokozta az elasztin- és kollagénexpressziót. Érdekesek lennének további tanulmányok a kivonat öregedésgátló potenciáljában szerepet játszó mechanizmusokról. A K.angustifolia kivonatban található számos vegyület izolálása és jellemzése lehetővé tette számunkra, hogy megállapítsuk, hogy az öregedésgátló hatás részben ezeknek a vegyületeknek az antioxidáns potenciáljából eredhet. A K.angustifolia összetételét azonban nagyon kevéssé tanulmányozták, és alaposabban meg kell vizsgálni, hogy megértsük biológiai aktivitásának mértékét és azonosítsuk a hatóanyagokat. Így ez a tanulmány azt sugallja, hogy a K.angustifolia érdekes természetes hatóanyag lenne a dermokozmetikumok számára. A K. Angustifolia ígéretes antioxidáns és öregedésgátló hatással rendelkezik, különösen a dermális extracelluláris mátrixon.

Ez a cikk az Antioxidants 2021, 10, 1373 kiadványból származik. https://doi.org/10.3390/antiox10091373 https://www.mdpi.com/journal/antioxidants