A Cistanche-glikozidok hatása a D-galaktóz által kiváltott öregedő modellegerek immunműködésére

Kapcsolatfelvétel: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

〔Absztrakt〕 Célkitűzés:

A Cistanche-glikozidok öregedésgátló hatásának immunológiai mechanizmusának tanulmányozása D-galaktóz által kiváltott öregedő egereken.Mód: A limfocita transzformációs képesség meghatározására a 3 H-TdR beépülési módszert, az egér peritoneális makrofágok fagocita funkcióját a neutrális vörös teszttel, a limfocita alcsoportok kimutatására immunfluoreszcens módszerrel, a radioimmunoassay módszerrel határoztuk meg. az IL-2 szintje a perifériás vérben. , Trace NAG enzim felszabadulási módszer az NK sejtaktivitás mérésére.Eredmények: A D-galaktóz indukálta öregedő egerek immunműködése szignifikánsan csökkent, ami limfocita transzformációs képességben, a perifériás vér IL-2 tartalmában, CD4 plusz T sejt és CD8 plusz T sejt tartalomban nyilvánult meg, egy fagocita a peritoneális makrofágok funkciója és az NK-sejtek aktivitása. Csökkentse (P<>a glikozid-cisztanchejavíthatja a limfocita transzformációs képességet, a perifériás vér IL-2 tartalmát, a peritoneális makrofágok fagocita funkcióját, az NK sejt aktivitást, a CD4 plusz T és CD8 plusz T sejt tartalmat (P<0.05). 0.="" 05).="">Következtetés: a glikozid cisztanche jelentősen javíthatja a D-galaktóz által kiváltott öregedő egerek immunfunkcióját, helyreállíthatja vagy megközelítheti a fiatal egerek állapotát, és késlelteti az öregedést.

[Kulcsszavak]: Cisztanche összglikozidok; D-galaktóz; öregedési modell; immunitás

A glikozid cistanche:öregedésgátló

Cistanchea leggyakrabban használt gyógyszer az öregedésgátló és a hosszú élettartamú formulákban. A cistanche összglikozidok (GCS) a cisztanchában található fenil-etanol-glikozidok egy osztályának általános elnevezése, és ez a fő biológiai aktivitás, amelyet az északi hszincsiangi komponens sótermelő cisztánjából nyernek ki [1], a GCS-ről bebizonyosodott, hogy lipidellenes hatással rendelkezik. peroxidációs hatás [2], de erről kevés kutatási jelentés áll rendelkezésreöregedésgátló immunmechanizmus.

1. Anyagok és módszerek

1. 1 Állatcsoportosítás és gyógyászat

60 Kunming egér, hím és nőstény, 3 hónapos, súlya 18-21 g, az Egészségügyi Minisztérium Biológiai Termékek Intézetének Állatszobája által biztosított. Az egyes csoportok egereit ugyanabban a szobában, külön ketrecekben helyezték el, és szabadon ehettek és ihattak. Az állatokat véletlenszerűen három csoportra osztották: a fiatalok kontrollcsoportjába, az öregedési modellcsoportba és a modellkezelési csoportba, minden csoportban 20 állattal. A GCS-t a Jiamusi Egyetem Gyógyszerészeti Iskola Fitokémiai Tanszéke vonta ki és azonosította a szakirodalom szerint [1].

Az immunitás javításaCistanche kiegészítő

1.2 Módszer

A fiatal csoportnak normál sóoldatot fecskendeztek szubkután a nyakba 30 napon keresztül, és a 15. naptól kezdve 15 napig meleg vizet kaptak. Az idősödő modellcsoportba tartozó egerek 100 mg/kg D-galaktózt (autoklávozott) injekcióztak szubkután a tarkójukon minden nap. Testtömeg 30 egymást követő napon. A modellkezelési csoportban 100 mg/ttkg D-galaktózt fecskendeztek be szubkután a tarkóba minden nap, és 125 mg·kg-1·d{10}} GCS-t ugyanabban az időben. 15. naptól kezdődően, és az adagolást 15 napon keresztül folyamatosan adtuk. A 30. napon minden állatot egy időben leöltünk, és különböző megfigyelési indexeket határoztunk meg.

1. 2. 1 Limfocita transzformációs kísérlet

Az egér lépsejt-szuszpenziót 2×106 sejtkoncentrációra állítottuk be, és Con A-t használtunk in vitro tenyésztésre ösztönzőként 5 napig, transzformációs képességét pedig 3 H-Td R beépülési módszerrel teszteltük. Az eredményeket az SI ingerindex (SI=ConA stimulációs csoport/kontrollcsoport) formájában fejezzük ki.

1. 2. 2 Egér peritoneális makrofág fagocita funkciója (semleges vörös teszt [3])

Gyűjtsük össze az egér peritoneális folyadékátmakrofágszuszpenziót aszeptikusan. Centrifugálás után a csapadékot lebegtetjük a sejttenyésztő tápközegben. Használjon hemocitométert a számláláshoz, és állítsa be az oldat sejtkoncentrációját 2×106-ra. Tedd 37 fokos inkubátorba 2 órára. , Dobja el a felülúszót és a nem tapadó sejteket. Vegyük a falmakrofágokat, adjunk hozzá 0,1 százalék semleges vörös fiziológiás sóoldatot 37 fokra, és folytassuk a tenyésztést 30 percig, dobjuk ki a semleges vöröset, és többször mossuk át a makrofágokat 37 fokos PBS-sel, hígítsuk fel 50 százalékos ecetsavval és 50 százalékos etanollal, állítsuk be 722-re. Spektrofotométer kolorimetriás 540 nm hullámhosszon, mért abszorbancia A érték.

1. 2. 3 Limfocita alcsoportok kimutatása

Vegyünk 0,1 ml 1×107/ml-tlimfocita szuszpenzió, adjunk hozzá 10 ul egér anti-egér CD3, CD4 és CD8 monoklonális antitesteket, jól keverjük össze, inkubáljuk 4 fokon 30 percig, 1% FC S PBS-ben (0,2 M, pH 7,4) Mossuk 3 alkalommal, áramlási citometriás detektálás: lézeres áramlási citométer (FACScan, USA BD cég), argon lézer, gerjesztési hullámhossz 488 nm, FITC detektálási spektrum 480-630 nm, sejtszám 800/s, 200,000 sejt összesen. Az eredményeket HP340 számítógéppel és LYSI SⅡ professzionális szoftverrel elemeztük és rögzítettük.

1. 2. 4 IL-2 meghatározása perifériás vérben radioimmunoassay segítségével

Vegyünk 1 ml vért az egér szemgolyóiból egy kémcsőbe. Alvadás után a szérum elválik. A készlet működésének megfelelően a CPM-számot a számlálón mérik.

1. 2. 5 NK sejt aktivitás

Vegyünk aszeptikusan az egérszem vérét, és adjunk hozzá heparint az antikoagulánshoz. A részletekért lásd a szakirodalmat [4]. 1.3 Statisztikai feldolgozás A kísérleti adatokat x±s-ben fejezzük ki, az S AS szoftverrel dolgozzuk fel, és varianciaanalízissel, F-próbával és t-próbával elemezzük.

a cistanche előnyei: javítja az immunitást

2. eredmények

2.1 A GCS hatásait a limfociták és T-sejt-alcsoportok transzformációs képességére az egyes egércsoportokban az 1. táblázat mutatja be.

Asztal 1. A GCS hatása a limfociták és T-sejt-alcsoportok transzformációs képességére az egyes egércsoportokban (n= 16,x±s)

Ⅰ-hez képest: 1) P<0.05, 2)="" p.="" 05;="" compared="" with="" ⅱ:="" 2)="" p=""><0.05; the="" same="" as="" the="" table="">

2.2 A GC-k hatását a peritoneális makrofágok fagocita funkciójára, IL-2-tartalmára és NK-sejt-aktivitására az egyes egércsoportokban a 2. táblázat mutatja be.

2. táblázat: A GCS hatása a peritoneális makrofágok fagocita funkciójára, NK-sejt-aktivitására és IL-2-tartalmára az egyes egércsoportokban (n= 16,x±s)

3. Megbeszélés

Ebben a kísérletben a peritoneális makrofágok fagocita funkciója és az öregedő modell egerek NK-sejt aktivitása csökkent (P<0.05). gcs="" can="" increase="" the="" phagocytic="" function="" and="" nk="" cell="" activity="" of="" peritoneal="" macrophages="" in="" aging="" model="" mice=""><0.05), which="" is="" close="" to="" the="" youth="" model="" group.="" from="" this,="" it="" can="" be="" inferred="" that="" gcs="" can="">javítja a szervezet nem specifikus sejtes immunitását és immunszabályozási funkcióit, ésfokozza a daganatellenes és fertőzés elleni védekezéstAz öregedés egyik módja az öregedés késleltetésének [4]. Az IL-2 nélkülözhetetlen citokin a T-limfociták proliferációjához és differenciálódásához, és szabályozhatja a limfociták, monociták-makrofágok és NK-sejtek működését. Az IL-2 elősegítheti a T limfociták proliferációját és differenciálódását, szabályozhatja aimmunválasz, indukálják a Tc aktivitást, és elősegítik az antitestek és az interferon- termelést.Fontos szerepet játszik az immunrendszerben. Ebben a kísérletben az öregedő modellegerek IL{0}} tartalma csökkent (P<0.05). after="" gcs="" were="" given,="" the="" il-2="" content="" increased=""><0.05), which="" was="" close="" to="" the="" youth="" model="" group,="" indicating="" that="" gcs="" produced="" il="" by="" increasing="" t="" lymphocytes.="" -2,="" enhance="" the="" immune="" function="" of="" elderly="" mice="" and="" achieve="" the="" effect="" of="" delaying="" immune="" aging.="" the="" content="" of="" cd4+="" t="" cells="" and="" cd8+="" t="" cells="" decreased="" significantly="" with="" increasing="" age.="" the="" low="" t="" cell="" function="" was="" also="" manifested="" by="" the="" decline="" of="" specific="" antigen="" and="" mitogen="" con="" a,="" and="" the="" decline="" of="" the="" ability="" of="" t="" cells="" to="" divide="" repeatedly.="" in="" this="" experimental="" model,="" the="" lymphocyte="" transformation="" ability,="" cd4+="" t="" cell="" and="" cd8+="" t="" cell="" content="" of="" the="" mouse="" was="" reduced="" (p=""><0.05), and="" gcs="" increased="" the="" mouse="" lymphocyte="" transformation="" ability,="" cd4="" +="" t="" cell="" and="" cd8="" +="" t="" cell="" content="" (p=""><0.05). 05),="" close="" to="" the="" youth="" model="" group.="" it="" shows="" that="" gcs="" can="" make="" the="" body="" resist="" aging="" and="" tend="" to="" be="" younger="" by="" promoting="" the="" proliferation="" of="" lymphocytes="" and="">javítja az egerek specifikus sejtes immunfunkcióját.

Improve Immunity cistanche kiegészítő

4. Hivatkozások

1. Du Niansheng, Wang Hong. Fenoxietanol-glikozidok izolálása és azonosítása Cistanche-ból [J]. Természetes termékek kutatása és fejlesztése, 1993; 5. cikk (4): 7-8.

2. Li Linlin, Wang Xiaowen, Wang Xuefei és társai. A Cistanche 〔J〕 összes glikozidjának lipid-peroxidáció- és sugárzás-gátló hatása. Chinese Journal of Chinese Materia Medica, 1997; 22. (6): 364-367.

3. Xu Shuyun, Bian Rulian. A farmakológia kísérleti módszertana [M]. 2. kiadás. Peking: Népegészségügyi Kiadó, 1994: 1221.

4. Liu Xiongbo, Liu Caiyu, Yang Xiuyun és társai. NK-sejt aktivitás kimutatása mikro-NAG felszabadulási módszerrel [J]. Journal of Clinical Laboratory Science, 1996; 14. cikk (2): 66-67.