Cistanche Lacerata micélium táptalaj, mint új öregedésgátló mikrobiális anyag kozmetikai alkalmazásra Ⅱ
Mar 27, 2023
3. Eredmények és megbeszélés
3.1. Az antioxidáns aktivitás mérése
Aantioxidáns aktivitásAz oldatok mennyiségét DPPH és ABTS tesztekkel értékeltük. Tekintettel arra a tényre, hogy a legtöbb természetes antioxidáns reaktív hidrogéneket tartalmaz, amelyek redukálószerként szolgálnak, mind a DPPH, mind az ABTS teszt a standard antioxidáns profil hasznos mércéje. ábrán látható módon2A CLEPS-oldat (5 mg/ml) körülbelül 81% DPPH (a) és ~85% ABTS (b) szabad gyököket (aktív oxigén) képes megkötni, ami megegyezik az aszkorbinsavval (AA, 1 mg/ml).
3.2. Sejtéletképességi vizsgálat
ábrán látható módon3, nem figyeltek meg toxicitást az NHDF (a) és B16 melanoma sejtek (b) életképességére, amikor a CLEPS-t széles koncentrációtartományban (0,05–7 mg/ml) tesztelték. Ezenkívül megállapították, hogy a CLEPS-kezelés indukálhatfibroblaszt sejtproliferációdózisfüggő módon, 1-7 mg/ml között. Ez a megállapítás jó egyezést mutatottegy másik tanulmányéval, amely a sejtproliferációs hatásról számolt be abioaktív poliszacharidkivonat a Cistanche Tubulosa-ból [21].
3.3. Filaggrin kifejezési szintje
A filagrinek olyan ragasztók, amelyek összetartják a keratint, fokozatosan ellaposítják a keratinociták alakját, növelik a bőrgát erejét, és erősítik a sejtek közötti kohéziót a bőr felszínén.22]. ábrán látható módon3c, amikor a HaCaT sejteket CLEPS-sel (30-300 µg/ml) kezelték, a filaggrin expresszió szintje 300 µg/ml-nél szignifikánsan, 36%-kal nőtt a kezeletlen csoporthoz képest, ami megerősíti, hogy a CLEPS fokozhatja vagy megőrzi a védi a bőrt és hidratálja a filaggrin felszabályozása révén. A bőrszárazság elleni hatékony működés értékeléséhez a filaggrin upreguláció révén, növényi kivonatokból származnakArtemisia princeps[23], Rhodiola crenulate[24], vagy ezek keverékeActinidia argutaésPerilla frutescens[25] vizsgálták, míg egy gombás metabolitot, mint például a GFF [26] vizsgálták. Ebben a tekintetben a CLEPS egy új, gombás metaboliton alapuló filaggrin-fokozó összetevő lenne, ha továbbfejlesztik.
Kattintson ide, hogy megismerje a Cistanche-t az öregedésgátlóért
3.4. B16 melanomasejtek melanogenezisgátlási tesztje
Amikor CLEPS-t (0.5, 1,5 mg/ml) adtunk az -MSH-indukált melanocitákhoz, a melaninszintézis hatékonyan 43, 54 és 57 százalékkal gátolt, koncentrációfüggő módon. (Ábra3d). Megerősítették, hogy a CLEPS hatékonyabban képes leszabályozni a melaninszintézist, mint 50 µg/ml arbutin (41 százalék). A medveszőlő növényből kivont hatóanyagként inArctostaphylos, az arbutin jól ismert melanin-szuppresszor tenyésztett humán melanocitákban vagy B16 egér melanocitákban [27]. Noha ezért széles körben alkalmazzák bőrvilágosító szerként a kozmetikai piacon, sok bizonytalanság maradt még, azaz az arbutin egy glikozilezett hidrokinon, amely rákkockázatot okozhat.28]. Tekintettel arra, hogy az arbutin egy elismert fehérítő vegyület, nagyon biztató, hogy a CLEPS nemcsak bőrfehérítő hatást fejtett ki a melanin szintézisének gátlásával, hanem jobb fehérítő funkciót is mutatott az arbutinnál, annak ellenére, hogy ez egy azonosítatlan összetett vegyület.
3.5. NO, iNOS, COX2 és TNF gyulladásgátló vizsgálata
Amikor CLEPS 500 µg/ml-rel kezelték, a gyulladással összefüggő faktorok, az NO (a), iNOS (b), COX2 (c) és TNF (d) szintje jelentősen, ~75%-kal, ~85%-kal csökkent, 62 százalék, illetve 55 százalék (ábra4). Megerősítették, hogy a CLEPS gyulladásgátló hatást fejt ki azáltal, hogy szabályozza a gyulladásos jelátviteli útvonalat az NO termelődésének és a gyulladással kapcsolatos gének expressziójának elnyomásán keresztül. Az NO és a TNF-aktivitás erős gátlása hasonló volt a kereskedelemben kapható ehető gombákéhoz, mint például az Enoki, a Shiitake és az Oyster, amelyek a gombák közül a legerősebb gyulladásgátló fajok (IC50 < 0,1 mg/ml). ) [29].
3.6. A kollagén szintézise és a kollagenáz gátlása
A kollagén nemcsak a bőr szerkezetét támogató kulcsfontosságú komponens, hanem közvetlenül is szabályozhatja a seb mikrokörnyezetét, vázként szolgálhat a sejtek adhéziójához és működéséhez, vagy biológiailag aktív összetevőket szállíthat a sebgyógyulás elősegítésére.1]. Ha a bőr sérült vagy hiányos, ráncosodhat, deformálódhat vagy bőrbetegséget okozhat. A ránctalanító megerősítéséreA CLEPS hatékonyságának, a kollagén szintézisének és a kollagenáz gátlásának vizsgálatát az ábrán látható módon végeztük.5. A kontrollcsoportokhoz képest az 10 ng/ml TGF-vel kezelt csoportok pozitív kontrollként a kollagénszintézis jelentős, ~52%-os növekedését mutatták. A kollagénszintézis 27,4%-ra, 31,9%-ra és 65,4%-ra nőtt a 0,5, 1 és 5 mg/ml koncentrációjú CLEPS-sel kezelt csoportokban, koncentrációfüggő módon. A PMA egy jelentős ROS-képző anyag, és rutinszerűen használják a szuperoxid-termelés endogén indukálójaként, ami növelheti az MMP aktivitást a dermális fibroblasztokban, ami az extracelluláris mátrix (ECM) fehérje lebomlásához és a bőr idő előtti öregedéséhez vezet.30]. Ebben a munkában az MMP{0}} fehérjék 50 nM PMA-val történő kezelés után jelentősen megnövekedtek, míg CLEPS (5 mg/ml) jelenlétében koncentrációfüggő módon lényegesen 93,4%-ra csökkent, ami azt jelzi, hogy hogy a CLEPS elnyomta a kollagenáz aktivitást azáltal, hogy gátolta a PMA-indukált oxidatív stresszt, hogy az NHDF sejtpusztuljon. Így bebizonyosodott, hogy a CLEPS hatékony lehet a ráncok javításában a kollagénszintézis és a bőr ECM kollagenáz csökkentése révén.
5. ábra: A CLEPS hatása a kollagén szintézisére (a) (p > 0.05 vs. kontroll) és a kollagenáz gátlására (b) (p > 0,05 vs. PMA nélkül).
3.7. In vitro sebgyógyulási vizsgálat
A 6. ábra 0 órától 48 óráig tartva a CLEPS (0-1 mg/ml) hatásának elemzésére HaCaT sejtekben Skálasáv=100 um (a). A CLEPS-kezeléssel végzett sebgyógyulást az egyes nulla dózisú csoportokhoz képest számszerűsítettük (* p < 0,05) (b).
Így a CLEPS tartalmazhat bioaktív összetevőket az öregedésgátló, antioxidáns és gyulladásgátló tulajdonságokkal kapcsolatban. Az előző kezdeti vizsgálatban a micélium biomasszája és az EPS-termelés víz alatti tenyésztési feltételeC. szakadttanulmányozták [33]. A HPLC, FT-IR és NMR alkalmazásával végzett EPS-elemzések eredményeként kiderült, hogy poliszacharidokból áll, beleértve a mannózt (83,36 százalék), a galaktózt (12,54 százalék) és a glükózt (4,10 százalék). Egyes flavonoidokat (pl. dimetil-kalkon) és tremuláns szeszkviterpenoidokat (pl. trifenil) is izoláltak, mint erős bioaktív komponenseket.34,35]. Ezeknek a hatóanyagoknak a tisztázásához azonban további kutatásokra van szükség.
Eredményeink összességében azt mutatták, hogy a CLEPS új bőrápoló megoldáspotenciális kozmetikai hatást fejt ki az emberi bőrsejtek öregedésérekeresztülantioxidáns, gyulladáscsökkentő,a bőrgát lebomlásának megakadályozása, éssebgyógyulás. Különösen a CLEPS nemcsak jelentősen növelte a kollagén és a filaggrin szintézist, hanem jelentősen gátolta a kollagenáz aktivitását is, ami valószínűleg azt jelzi, hogy a CLEPS megakadályozhatja a bőr védőrétegének károsodását vagy a bőr ráncait. Bár az ilyen hatásokat kiváltó vegyületek pontosak nem ismertek, a CLEPS, mint új, természetes öregedésgátló összetevő innovatív funkcionális kozmetikumként használható. Továbbá a CLEPS gyártási folyamata nem főként szerves kémiai oldószereket használó vagy állatkísérleteket végző extrakciós eljárás, hanem bio-, környezetbarát, zöld mikrobiális tenyésztési eljárás, amely jól illeszkedik a "vegán" legújabb szépségtrendjeihez. "kozmetikai piac.
A szerző hozzájárulásai:Conceptualization, J.-HK és YSK; adatok kezelése és elemzése, CA és J.-HK; projekt adminisztráció, J.-HK és YSK; finanszírozás megszerzése, YSK; írás – eredeti tervezet, J.-HK; írás – áttekintés és szerkesztés, J.-HK, CA és SDH Minden szerző elolvasta és elfogadta a kézirat közzétett változatát.
Finanszírozás:Ezt a kutatást részben a Koreai Nemzeti Élelmiszeripari Klaszter (FOODPOLIS) Promóciós Ügynökség finanszírozta, amely a Koreai Mezőgazdasági, Élelmiszerügyi és Vidéki Minisztérium alá tartozik. A támogatás neve: "Élelmiszerünk a világnak (Biztonsági és Hatékonysági Értékelés)".
Az intézményi felülvizsgálati bizottság nyilatkozata:Nem alkalmazható.
Tájékozott beleegyező nyilatkozat: Nem alkalmazható.
Összeférhetetlenség: Nincs ismert összeférhetetlenség ehhez a kiadványhoz, és nem kapott jelentős pénzügyi támogatást ehhez a munkához, amely befolyásolhatta volna annak eredményét.
Rövidítések
UV Ultraibolya
Hivatkozások
1. Parrado, C.; Mercado-Saenz, S.; Perez-Davo, A.; Gilaberte, Y.; Gonzalez, S.; Juarranz, A. Környezeti stresszorok a bőr öregedésére. Mechanistic Insights. Elülső. Pharmacol. 2019, 10, 759. [CrossRef] [PubMed]
2. Rinnerthaler, M.; Bischof, J.; Streubel, MK; Trost, A.; Richter, K. Oxidatív stressz az öregedő emberi bőrben. Biomolecules 2015, 5, 545–589. [CrossRef]
3. Sies, H.; Jones, DP Reaktív oxigénfajták (ROS) mint pleiotróp fiziológiai jelátviteli szerek. Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 2020, 21, 363–383. [CrossRef]
4. Gupta, PL; Rajput, M.; Oza, T.; Trivedi, U.; Sanghvi, G. A mikrobiális termékek kiemelkedősége a kozmetikai iparban. Nat. Prod. Bioprospect. 2019, 9, 267–278. [CrossRef] [PubMed]
5. Martel, J.; Ojcius, DM; Ko, YF; Chang, CJ; Fiatal, JD Növényekből és gombákból izolált bioaktív molekulák öregedésgátló hatásai. Med. Res. Rev. 2019, 39, 1515–1552. [CrossRef]
6. Keller, NP Gombás másodlagos anyagcsere: szabályozás, funkció és gyógyszerkutatás. Nat. Rev. Microbiol. 2019, 17, 167–180. [CrossRef] [PubMed]
7. Meyer, V.; Basenko, EY; Philipp Benz, J.; Braus, GH; Caddick, MX; Csukai, M.; Vries, RP; Endy, D.; Frisvad, JC; Gunde-Cimerman, N.; et al. Körkörös gazdaság fejlesztése gombás biotechnológiával: fehér könyv. Fungal Biol. Biotechnol. 2020, 7, 1–23. [CrossRef]
8. Dufossé, L.; Fouillaud, M.; Caro, Y. Gombák és gombás metabolitok az emberi és állati táplálkozás és egészség javítására. J. Fungi 2021, 7, 274. [CrossRef] [PubMed]
9. Takahashi, JA; Barbosa, B.; Martins, BAP; Guirlanda, CAF; Moura, M. A gombás anyagcsere sokoldalúságának felhasználása az egészséges öregedés, a funkcionális élelmiszerek és a fenntarthatóság modern igényeinek kielégítésére. J. Fungi 2020, 6, 223. [CrossRef] [PubMed]
10. Kumari, M.; Survase, SA; Singhal, RS Schizophyllan előállítása Schizophyllum commune NRCM felhasználásával. Bioresour. Technol. 2008, 99, 1036–1043. [CrossRef]
11. Miyamoto, K.; Dissanayake, B.; Omotezako, T.; Takemura, M.; Tsuji, G.; Furue, M. Az arc pórusainak napi fluktuációja, érdessége és vörössége fiatal japán nők körében; A Galactomyces fermentfifiltrátum jótékony hatásai, amelyek antioxidáns bőrápoló formulát tartalmaznak. J. Clin. Med. 2021, 10, 2502. [CrossRef]
12. Suhara, H.; Maekawa, N.; Kaneko, S.; Hattori, T.; Sakai, K.; Kondo, R. Egy új faj, a Ceriporia lacerata, fehérre korhadt fából izolálva. Mycotaxon 2003, 86, 335–347.
13. Lee, JW; Gwak, KS; Park, JY; Park, MJ; Choi, DH; Kwon, M.; Choi, IG Pinus densiflflora puhafa biológiai előkezelése három fehér rothadás gombával. J. Microbiol. 2007, 45, 485–491.
14. Kim, JE; Kim, HJ; Lee, SP A Ceriporia lacerata alámerült tenyészoldatának hiperglikémiás hatása streptozotocinnal indukált cukorbeteg patkányokban. Food Sci. Biotechnol. 2012, 21, 1685–1693. [CrossRef]
15. Kim, JH; Park, YK; Kim, JE; Lee, SP; Kim, Kr. e. Jang, BC A Ceriporia lacerata nyers oldata védő hatást fejt ki a dexametazon által kiváltott citotoxicitásra INS-1 sejtekben a PI3K/PKB aktivitás modulációján keresztül. Int. J. Mol. Med. 2013, 32, 179–186. [CrossRef] [PubMed]
16. Shin, EJ; Kim, JE; Kim, JH; Park, YM; Yoon, SK; Jang, Kr. e.; Lee, SP; Kim, BC Ceriporia lacerata micélium víz alá merített kultúrájának hatása GLUT4 fehérjére db/db egérben. Koreai J. élelmiszer tartósítószer. 2015, 22, 893–900. [CrossRef]
17. Choi, JW; Shin, EJ; Lee, SJ; Kim, YH; Kim, SR; Ji, YM; Kim, NY; An, CH; Lee, IH; Kim, YS A Ceriporia lacerata micélium víz alá merített tenyészetének hatásai magas zsírtartalmú diéta által kiváltott, inzulinrezisztenciában szenvedő cukorbeteg egerekre. J. Korean Soc. Food Sci. 2017, 46, 1419–1426. [CrossRef]
18. Kedare, SB; Singh, RP Az antioxidáns vizsgálat DPPH módszerének keletkezése és fejlesztése. J. Food Sci. Technol. 2011, 48, 412–422. [CrossRef]
19. Kim, HJ; Suh, HJ; Kim, JH; Park, S.; Joo, YC; Kim, JS Az Aspergillus sojae által kiváltott szójából származó glicerolinek antioxidáns hatása. J. Agric. Food Chem. 2010, 58, 11633–11638. [CrossRef]
20. Goh, MJ; Lee, HK; Cheng, L.; Kong, DY; Yeon, JH; Ő, QQ; Cho, JC; Na, YJ A kadsuralignan F depigmentációs hatása a melan-a egér melanocitákra és az emberi bőr ekvivalenseire. Int. J. Mol. Sci. 2013, 15, 1655–1666. [CrossRef] [PubMed]
21. Mapoung, S.; Umsumarng, S.; Semarath, W.; Arjsri, P.; Thippraphan, P.; Yodkeeree, S.; Limtrakul, P. Az Auricularia auricula-judae gyógygombából (Bull.) származó poliszacharidok bőrsebgyógyító potenciálja. J. Fungi 2021, 7, 247. [CrossRef]
22. Brown, SJ; Mclean, WH Egy figyelemre méltó molekula: Filaggrin. J. Investig. Dermatol. 2012, 132, 751–762. [CrossRef] [PubMed]
23. Hirano, A.; Goto, M.; Mitsui, T.; Hashimoto-Hachiya, A.; Tsuji, G.; Furue, M. Antioxidáns Artemisia princeps kivonat Az AHR/OVOL1 útvonalon keresztül fokozza a filaggrin és loricrin expresszióját. Int. J. Mol. Sci. 2017, 18, 1948. [CrossRef] [PubMed]
24. Hashimoto-Hachiya, A.; Tsuji, G.; Murai, M.; Yan, X.; Furue, M. Az FLG, LOR és IVL expresszió felszabályozása Rho diola crenulata gyökérkivonat által aril szénhidrogén receptoron keresztül: az OVOL1 differenciális bevonása. Int. J. Mol. Sci. 2018, 19, 1654. [CrossRef] [PubMed]
Kérdezz többet:
E-mail:wallence.suen@wecistanche.com Whatsapp plus 86 15292862950
