Cistanche Tubulosa vizes kivonat bélbetegségben szenvedő egerek bélmikrobiótáján

1. Bevezetés

A bélmikroorganizmusok főként a bél lumenét és a nyálkahártya rétegét kolonizálják, és anyag- és energiacserén, átalakuláson és egyéb folyamatokon keresztül kölcsönösen kapcsolatba kerülnek a gazdaszervezettel [1]. Ezek olyan jelzőközpontok, amelyek integrálják a környezeti üzeneteket, például az étrendet, a genetikai és immunjelekkel, következésképpen befolyásolják a gazdaszervezet anyagcseréjét, immunitását, idegrendszerét és a fertőzésekre adott válaszát [2]. Normális esetben dinamikus egyensúly van a bélflóra és a gazdaszervezetek között; azonban a bél dysbiosis az egészség/betegség egyensúly megváltozását, immunrendszeri zavarokat és számos betegséget eredményezhet [3]. A bélmikrobióta mérsékelt változásai elfogadhatók a gazdaszervezet számára; ez azonban továbbra is lehetőséget biztosíthat más súlyosbító tényezők, például bakteriofágok, bakteriocinok és oxidatív stressz változásainak felerősítésére [4].

CISTANCHE TUBULOSA A BÉL MIKROBIÓTA JAVÍTÁSÁRA PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Korábbi tanulmányok kimutattáka Cistanche tubulosa etanolos kivonataA (CT), egy hagyományos kínai gyógynövény-formula, képes szabályozni a bélmikrobiális összetételt patkányokban [5], a CT összes glikozidja pedig a rendezetlen bélmikrobiótát [6]. A főként a Tamarix fajok gyökerén élősködő Cistanche fajokat "sivatagi ginzengnek" is nevezik, és a Cistanche deserticola (CD) és a Cistanche tubulosa (CT) szárából álló tonik gyógynövényként használatos [7 ]. A CT-fenil-etanol-glikozidok (PHG-k) fő kémiai összetevői, amelyek antioxidáns anyagok [8, 9], javítják a reproduktív diszfunkciót [10], elnyomják a májcsillagsejtek aktivációját, blokkolják a jelátviteli útvonalak vezetését a TGF-ben{{6} }/SMAD [11], és megakadályozza a szarvasmarha-szérum albumin által kiváltott májfibrózist patkányokban [12]. A CT több mint 100 komponense közül a poliszacharid is az egyik fontos, bőséges tartalmú anyag [13, 14]. Korábbi vizsgálatok kimutatták, hogy a C. deserticola poliszacharidok melanogenezist indukálnak a melanocitákban, csökkentik az oxidatív stresszt [15], enyhítik a kognitív diszfunkciókat az antioxidáns és gyulladáscsökkentő folyamatok szabályozásával patkányokban [16], védik a PC12 sejteket az OGD/RP által kiváltott sérülésekkel szemben [17] ],fokozza az echinakozid felszívódását in vivo, és hatással vannak a bél mikrobiotára [18].

A probiotikumok élő, nem patogén mikroorganizmusok, amelyek megfelelő mennyiségben alkalmazva jótékony hatással vannak az egészségre, és a mikrobiális egyensúlyt biztosítják a gyomor-bél traktusban [19]. Fokozhatják a nem specifikus celluláris immunválaszt, amelyet makrofágok, természetes gyilkos (NK) sejtek és antigén-specifikus citotoxikus T-limfociták aktiválása, valamint különféle citokinek felszabadulása jellemez, törzs-specifikus és dózisfüggő módon [20]. A probiotikus törzsek a TJ moduláció révén javítják a bélhám tulajdonságait, a specifikus probiotikus törzsekről pedig kimutatták, hogy szabályozzák a mucin expressziót, ezáltal befolyásolják a nyálkaréteg tulajdonságait, és közvetetten szabályozzák a bél immunrendszerét [21]. A tejsavbaktériumok (LAB) és a Bifidobacterium törzsei a fő probiotikumok, amelyeket számos területen használnak [22–26]. Számos egészségügyi előnyük van, és antioxidáns kapacitásuk fontos tényező az egészséggel kapcsolatos funkcióikban [27]. A probiotikumok kelátot képezhetnek fémionokkal, hogy megakadályozzák az oxidáció katalizálását [28, 29]; fokozhatják az antioxidáns enzimek expresszióját [30, 31], különféle antioxidáns aktivitású metabolitokat termelnek [32, 33], közvetíthetik az antioxidáns jelátviteli útvonalakat [34–36], valamint szabályozhatják a reaktív oxigénfajtákat (ROS) termelő enzimeket és a a bél mikroorganizmusainak válasza az oxidatív stresszre [37].

Egy nemrégiben végzett tanulmány kimutatta, hogy a CD poliszacharidjai képesekserkentik egyes tejsavbaktériumok szaporodását, ami jótékony hatással lehet az emberi egészségre [38]. A CD poliszacharid tartalma azonban eltér a CT-től [7, 39], és ez a különbség eltérő hatásokhoz vezethet a bél mikroorganizmusaira. Ezen túlmenően, bár a CD poliszacharidok csökkenthetik az oxidatív stresszt az NRF2/HO-1 útvonal aktiválásával [15], egyetlen poliszacharid hatása eltérhet több kompozíció összhatásától CT-ben. Ezért pontosan meg kell határozni a CT vizes kivonatok bélmikroorganizmusokra gyakorolt ​​hatását. Ezenkívül a PHG-k ellenállhatnak az oxidatív stressznek [40] és elnyomhatják a lipopoliszacharidok által közvetített gyulladásos válaszokat a Keap1/Nrf2/HO-1 útvonal aktiválásával [41]. Ezért a CT vizes kivonat hatásának meghatározása nagy értékű. Ezenkívül a vizes CD-kivonat egyes összetevőinek az oxidatív stresszre és a bélflórára gyakorolt ​​hatása arra utal, hogy az oxidatív stresszel szembeni rezisztencia összefüggésbe hozható a bélflóra változásaival.

A fent említett témakörök ismereteinek hiányosságainak pótlására a CT vizes kivonat hatását vizsgáltuk bélflóra-zavarral küzdő egerek bélmikrobiótájára.ThEzek az eredmények értékes információkkal szolgálnak azokról a lehetséges mechanizmusokról, amelyeken keresztül a CT megváltoztatja a bélflórát, és oxidatív stresszel szembeni rezisztenciát biztosít a bélben.

2. Anyagok és módszerek

2.1. Kísérleti állatok.

Összesen 18 SPF-osztályú, 18–22 g tömegű hím C57BL/6J egeret vásároltunk a Hszincsiangi Orvostudományi Egyetem Kísérleti Állatközpontjától SCXK (új) 2018-0003 licencszámmal. Ketrecekben helyezték el őket szabványos körülmények között: 12 órás világos/sötét fényperiódus, 23 ± 2 fok hőmérséklet és 55 ± 5% páratartalom. Az állatokat kereskedelmi forgalomban kapható takarmány (51% nitrogénmentes kivonat, 25% nyersfehérje, 4,6% nyers zsír, 6,5% nyershamu, 4{20}}% nyersrost és 8,9% nedvesség) és csapvízzel etették. Az állatokat a National Institutes of Health Laboratóriumi Állatok gondozási és használati útmutatójában leírt ajánlások szerint kezelték.

TERMÉSZETES CISTANCHE TUBULOSA AZ IMUNITÁS JAVÍTÁSÁRA PHGS75% ECH 30% ACT 12%

2.2. A vizes kivonat kivonása.

A Hotan Dichen Pharmaceutical Biotechnology Co., Ltd. által biztosított szárított C. tubulosa szeleteket porrá őrölték, és 2{{10}} és 40 lyukméretű szemcséket őröltek. kiválasztott. Az extrakció körülményei a következők voltak: szilárd folyadék arány 1:19, hőmérséklet 80 fok, mikrohullámú idő 6 perc, ultrahangos idő 16 perc, mikrohullámú teljesítmény 400 W és ultrahang teljesítmény 400 W. a vizes kivonat fő komponenseinek tartalmát HPLC-vel (Agilent 1260 Infinity II, California, USA) mértük. Röviden, az echinakozidot (0,2 mg/ml) és az akteozidot (0,2 mg/ml) 50%-os metanolban oldottuk fel referenciaanyag-oldatként. Ezután 1 g CT vizes kivonatot feloldunk 100 ml 50%-os metanolban, és 30 percig állni hagyjuk. Az extraktumoldatot ultrahanggal kezeltük 250 W-on és 35 kHz-en 10 percig, majd 12, 000 fordulat/perc sebességgel centrifugáltuk. A felülúszót 0,45 μm-es mikroporózus szűrőmembránnal szűrtük. A referenciaanyag-oldatot és a szűrletet ezután HPLC-vel detektáltuk a következő körülmények között: oktadecil-szilánnal kötött szilikagél töltőanyagként, metanol mint A-mozgófázis és 0,1%-os hangyasav mint B-mozgófázis. Az oszlop hőmérsékletét 30 °C-ra állítottuk be. fokon, a detektálási hullámhosszt 330 nm-re állítottuk be, és az injekció térfogata 10 μL volt.

2.3. Kísérletek.

Egy hét adaptáció után a 18 egeret véletlenszerűen hat csoportra osztották: A (normál, közepes dózisú CT vizes kivonat hozzáadásával), B (normál CT vizes kivonat nélkül), C (modell vizes kivonat nélkül), D ( modell nagy dózisú CT vizes kivonattal), E (modell közepes dózisú CT vizes kivonattal) és F (modell alacsony dózisú CT vizes kivonattal). A csoportokat a következőképpen kezeltük: a normál csoportot normál sóoldattal, a modellcsoportot cefiximmel (30 mg/kg, Shiyao Group Ouyi Pharmaceutical Co., Ltd., Shijiazhuang, Kína) és normál sóoldattal, magas. -dózisú csoportot cefiximmel és 221,14 mg/kg CT vizes kivonattal, a közepes dózisú csoportot cefiximmel és 165,54 mg/kg vizes kivonattal, az alacsony dózisú csoportot cefiximmel és 110,57 mg/kg-mal áztattuk át. a vizes kivonatból. Az A csoportot 165,54 mg/kg vizes kivonattal áztattuk, és nem adtunk hozzá cefiximot. A cefiximet naponta délben, más anyagokat pedig naponta 15:00 órakor adták be. A kísérletek során a C, D, E és F csoportokat a bélbetegségek modellállapotában tartottuk. Az ürüléket hétnaponként gyűjtöttük egy steril műtőasztalon, és -20 fokon tároltuk.

2.4. Az egerek vastagbél kórszövettani megfigyelése.

A kísérlet végén az egereket nyaki diszlokációval leölték, vastagbéltartalmukat steril, műtőasztalra gyűjtöttük, és -80 C-on tároltuk; ugyanakkor a vastagbél szövetmintákat 10%-os semleges formalinban fixáltuk. Ezután a mintákat gradiens koncentrációjú etanollal dehidratáltuk, xilollal hialinizáltuk, paraffinba ágyaztuk, metszetekre vágtuk és hematoxilin-eozinnal festettük. A vastagbél nyálkahártyájának morfológiai változásait optikai mikroszkóppal figyelték meg és hasonlították össze. Megmértük a bolyhok hosszát és a kripta mélységét a vastagbélben, és kiszámítottuk a bolyhok hosszának a kripta mélységéhez viszonyított arányát (V/C érték) (51).

2.5. DNS-kinyerés és könyvtárépítés.

A DNS-t a székletből az EZNA®Soil DNA Kit (Omega Bio-Tek, Norcross, GA, USA) segítségével a gyártó protokollja szerint extraháltuk. A DNS minőségét fluorométerrel határoztuk meg (QuantiFluor™-ST, Promega Corporation, USA). A 16s rDNS V3-V4 régiójában lévő páros primereket úgy tervezték, hogy amplifikálják a régiót és 466 bp DNS-fragmenseket állítsanak elő. A forward primer a 341F (-5- CCTACGGGNGGCWGCAG-3-), a fordított primer pedig a 806R (-5-GGACTACHVGGGTATCTAAT-3-) volt. Mindegyik PCR-térfogat 25 µl volt, amely 2,5 µl 10 × PCR puffert, 2 µl dNTP-t, 1 µl primert és 20-30 ng templát DNS-t tartalmazott. Ezután az indexelt adaptereket az amplikonok végéhez csatolták a szekvenálási könyvtárak létrehozásához. A könyvtárakat QuantiFluor™ fluorométerrel validáltuk, és 10 nmol-ra határoztuk meg.

2.6. 16s rRNS génszekvenálás és mikrobiális közösség elemzés.

Az Illumina platformot (Illumina MiSeq) használták a 2 × 250 bp-os páros végű adatok beszerzésére. Az operatív taxonómiai egységeket (OTU-k) Uparse szoftverrel kaptuk meg szabványos klaszterezéssel, 97%-os hasonlósággal. Az RDP osztályozó naiv Bayes-féle hozzárendelési algoritmusát használták az OTU-k és a Greengene Release 13.5 adatbázishoz való igazítására és a fajok annotáció végrehajtására. A bélmikrobióta alfa-diverzitását Shannon és Simpson indexekkel, a csoportok közötti különbségeket Lineáris diszkriminancia analízis Effect Size (LEfSe) segítségével elemeztük. A béta diverzitást a Bray–Curtis eltérések főkoordináta-analízisével (PCoA) elemeztük. A PICRUSt2-t a bélmikrobióma mikrobiális metabolikus kapacitásának becslésére használták [42].

2.7. Statisztikai adatelemzés.

Az egyirányú ANOVA-hoz SPSS 20-at használtunk, és a kísérleti adatokat X ± S-ben fejeztük ki; X az átlagértéket, S a szórást jelöli.

TERMÉSZETES CISTANCHE TUBULOSA AZ anyagcsere-változások mérsékléséhez PHGS75% ECH 30% ACT 12%

3. Eredmények

3.1. 8e A CT vizes kivonat hatása a vastagbél morfológiájára.

A reprezentatív vegyületek (echinakozid és akteozid) és a CT-kivonat koncentrációit HPLC-vel validáltuk (S1. ábra). A vizes kivonat bélre gyakorolt ​​hatásának meghatározásához a CT vizes kivonattal végzett kezelést követően a vastagbélbolyhok hosszát és a mélyedések mélységét vizsgáltuk. A normál és a nagy dózisú csoportban (A, B és D) a vastagbélbolyhok hosszabbak és ujjszerűek voltak, míg a modellben és az alacsony dózisú csoportban (C és F) a vastagbélbolyhok rövidek, a vastagbélvégek pedig bolyhok eltörtek (1. ábra). Ennek megfelelően a nagy dózisú CT vizes kivonat szignifikánsan megnövelte a vastagbélbolyhok hosszát és csökkentette a recessus mélységét a bélbetegségben szenvedő egerekben a modellcsoport egereihez képest (P < 0.01). Ezzel szemben a recessus mélysége nem különbözött szignifikánsan a nagy dózisú csoport és a normál csoport között (P > 0,05) (S1 táblázat). Ezek az eredmények azt mutatták, hogy a CT vizes kivonat nagy dózisa javíthatja a bélrendszeri rendellenességekkel küzdő egerek vastagbelének morfológiáját.

3.2. 8e A CT vizes kivonat hatása a bélmikrobióta sokféleségére.

16s rRNS gén szekvenálást végeztünk, hogy megvizsgáljuk a vastagbélen belüli morfológiai változások lehetséges okát, és megvizsgáljuk a CT vizes kivonattal végzett kezelést követően a bélmikrobióta változásait. A nyers adatokból átlagosan 100 553 hatékony címkét kaptunk, 77 734 és 125 144 között (S2 táblázat). Ezeket a címkéket 4932 OTU-ba csoportosították (S3 táblázat). Ezután az OTU-k alapján elemeztük a bél mikrobióta sokféleségét. A Shannon- és Simpson-index nem mutatott különbséget az A csoport (normál a CT vizes kivonattal) és a B csoport (normál a CT vizes kivonat nélkül) között (2(a) ábra). Ez arra utalt, hogy a cefixim-kezelés nélküli egerekben a CT vizes kivonatnak nem lehetett további jótékony vagy káros hatása a bél mikrobiota diverzitására. A (C) modellcsoport -diverzitása azonban csökkenő tendenciát mutatott a normál csoportokhoz képest. A nagy és közepes dózisú CT vizes kivonattal kezelt egerek a diverzitás felépülésének jeleit mutatták, míg ilyen jelenséget nem figyeltek meg az alacsony dózisú CT vizes kivonattal kezelt egereknél (2(a) ábra). Eközben a PCoA feltárta, hogy a normál csoportok (A és B) és a bélrendszeri betegségekben szenvedő csoportok, amelyek nagy dózisú (D) és közepes dózisú (E) CT vizes kivonatokat kaptak, általában rövidebbek voltak a minták közötti távolságban, mint a modellcsoportban és a alacsony dózisú CT vizes kivonat-kiegészítő csoport (F) (2(b) ábra). Ezek az eredmények azt mutatták, hogy a CT vizes kivonat segíthetjavítja a bél mikrobióta sokféleségétbélbetegségben szenvedő egereknél.

3.3. Változások a CT vizes kivonattal kezelt bélmikrobióta összetételében.

A mikrobiota összetételi profiljait összehasonlítottuk a különböző csoportok között. A törzs szintjén a Proteobaktériumok relatív abundanciája a modellcsoportban magasabb volt, mint a többi csoportban (3(a) ábra). A proteobaktériumok számának növekedése arra utalt, hogy a modell egerek mikrobiomáját megváltoztatta a cefixim, és hogy a CT vizes kivonat előnyös lehet a bélmikrobióta számára, mivel a Proteobaktériumok megnövekedett prevalenciája a rendezetlen bélflóra központi markere [43–45]. Ezenkívül nemzetség szintjén a Lactobacillus relatív abundanciája a modellcsoportban csökkent a normál és a nagy dózisú csoportokhoz képest; azonban nőtt a közepes és alacsony dózisú csoporthoz képest (3(b) ábra). Ezek az eredmények azt mutatták, hogy a nagy dózisú CT vizes kivonat elősegítheti a Lactobacillus nemzetségbe tartozó egyes baktériumok növekedését.

A vizsgált csoportok közötti differenciált mikrobiótát a LEfSe analízis alapján tovább határoztuk meg. Ez az elemzés azt mutatta, hogy a cefixim-kezelést követően a Turicibacter, Alphaproteobacteria, Acidobacteria, Betaproteobacteriales és Chloroflexi relatív abundanciája jelentősen megnőtt, míg a Lactobacillus, Eubacterium{0}}nodatum{1}}cardial csoport relatív abundanciája, , és a Christensenellaceae_R-7_ csoport szignifikánsan csökkent a normál csoporthoz képest (4(a) ábra). Meglepő módon, amikor a modellcsoportot kiegészítettük a nagy dózisú CT vizes kivonattal, a Muribaculaceae, Lactobacillus, Kineosporiaceae, Eubacterium nodatum csoport és Pedobacter relatív abundanciája szignifikánsan megnőtt a modellcsoporthoz képest. Eközben a Rhodobacter, a Ruminococcaceae UCG_013, a Roseburia, a Ruminiclostridium_9 és a Candidatus Stoquefichus relatív abundanciája jelentősen csökkent a modellcsoporthoz képest (4(b) ábra).

3.4. A bélmikrobióta funkciói a CT vizes kivonattal történő kezeléssel kapcsolatban.

A PICRUSt2 szoftvert használtuk a bélmikrobióta metabolikus útvonalainak előrejelzésére, a normál csoportot pedig referenciaként használtuk a többi csoportban bekövetkezett változások elemzéséhez. A cefiximes kezelés hatására az etil-benzol lebomlása, a szideroforcsoportba tartozó nem riboszómális peptidek bioszintézise és a xenobiotikumok metabolizmusa citokróm P450 útvonalon megnövekedett; a nagy és közepes dózisú CT vizes kivonatokkal végzett kezelés után relatív bőségük visszatért a normál szintre. Mindeközben a cianoaminosav metabolizmus relatív bősége csökkent a cefixim kezelés alatt; a nagy dózisú CT vizes kivonattal végzett kezelés után azonban megemelkedett. Ezen túlmenően, a különböző metabolit-útvonalakban bekövetkezett változások a cefixim-kezelést követően általában szignifikánsak voltak a normál csoportban tapasztaltakhoz képest; a CT vizes kivonat hozzáadásával azonban sikerült megakadályozni a túlzott elváltozásokat (5. ábra).

4. Megbeszélés

A vastagbél morfológiáját megváltoztathatja a növekedés, az emésztés és a felszívódás, az immunszabályozás és a bélsérülések helyreállítása [46–50]. A V/C arány átfogóan tükrözheti a bélrendszer emésztési állapotát, és egyenesen arányos a bélrendszer emésztési és abszorpciós kapacitásával [51, 52]. A jelen tanulmányban a bolyhok és mélyedések biopsziája és statisztikai adatok azt mutatták, hogy a nagy dózisú vizes kivonat részben javíthatja a vastagbélben lévő hibás morfológiát.

Annak vizsgálatára, hogy a vizes kivonat hogyan változtatja meg a bél morfológiáját és hogyan befolyásolja a bélmikrobiótát, a bélflóra változásaitól visszafelé dolgoztunk. Megállapítottuk, hogy a Proteobaktériumok, a rendezetlen bélflóra csomóponti markere, relatív abundanciája nőtt a cefiximes kezelés alatt, mint a cefixim kezelés nélküli kezelés alatt. A többi hub marker, a Bacteroidetes és Firmicutes relatív abundanciája nem változott jelentős mértékben, bár ezek

csoportok dominálnak az emberi bélben; azt találták, hogy a Bacteroidetes/Firmicutes aránya csökkent az elhízott emberekben, mint a sovány emberekben, és ez az arány nő a súlycsökkenéssel azoknál az embereknél, akik kétféle alacsony kalóriatartalmú étrendet követnek [38, 41, 43–45, 48, 53, 54]. Eközben az elhízással összefüggő Turicibacter [55] szignifikánsan megemelkedett a modellcsoportban a többi csoporthoz képest. Nevezetesen, a CT vizes kivonat hozzáadásával javult a bélmikrobióta változatossága a modellegerekben. Megfigyeltünk néhány specifikus bélbaktériumot egerekben különböző kezelések alatt; például a Lactobacillus és a Muribaculaceae volt a két fő baktériumnemzetség, amely a nagy dózisú CT vizes kivonattal kezelt csoportban növekedett a modellcsoporthoz képest (4. ábra). A legújabb tanulmányok kimutatták, hogy a CT vizes kivonatokban lévő poliszacharidok jelentős mértékben rendelkeznek

egyes tejsavbaktériumok szaporodását, ami jótékony hatással lehet a gazdaszervezet egészségére [43]. Ezzel párhuzamosan a Muribaculaceae probiotikus organizmusok, amelyek a hosszú élettartamhoz kapcsolódnak [57].ThEzek szerint az a mechanizmus, amellyel a CT vizes kivonat javítja a bél mikrobiotáját, a probiotikus organizmusok növekedésének elősegítése vagy védelme lehet. Egy másik figyelemre méltó baktérium a YE57 baktérium volt. Bár a nagy dózisú CT vizes kivonat elősegítette a YE57 baktérium relatív elterjedését a jelen tanulmányban (4. ábra), korábbi tanulmányok azt találták, hogy a bősége magasabb volt a normál bélben, mint a nagy koncentrációjú gyógytea-maradékkal kezelt bélben. [58], és a mennyisége csökkent a Bacillus licheniformis XOS-sel (xilooligoszacharidokkal) kombinált beavatkozása után [59].ThEnnek a baktériumnak a bélmikrobiótában betöltött szerepe további tanulmányozást érdemel. Ezen túlmenően, a viszonylag kis mintaszám ebben a vizsgálatban álpozitív és álnegatív értékeket okozhat, és a jövőben nagyobb mintákon történő vizsgálatot javasolnak az azonosított bakteriális markerek validálására.

A CT vizes kivonat összetétele fontos lehet a bélbetegségben szenvedő egerek összetételére és a bélmikrobióta funkcionális változásaira gyakorolt ​​hatásai miatt. A PHG-k gyakori aktív komponensek a CD-ben és a CT-ben, és az echinakozidot azonosították a CT fő PHG-jeként [60]. Az elmúlt évtizedekben az echinakozidról kimutatták, hogy számos farmakológiai hatással rendelkezik, például öregedésgátló és neuroprotektív hatással, javítja a szívműködést, csökkenti a hiperlipidémia és hiperglikémia előfordulását, valamint megelőzi az elhízás által kiváltott cukorbetegséget és metabolikus szindrómát [53, 61–65]. . Változásokat észleltünk a bélmikrobióta anyagcsereútjaiban.ThA cefixim kezelése az etil-benzol lebomlásával és a szideroforcsoportba tartozó, nem riboszómális peptidek bioszintézisével kapcsolatos baktériumok feldúsulásához vezetett, míg a nagy és közepes dózisú CT vizes kivonattal végzett kezelések enyhítették ezeket a változásokat, jelezve, hogy ez a kivonat mérsékelte a baktériumközösséggel kapcsolatos ezekhez a funkciókhoz. Ezenkívül a nagy dózisú vizes kivonattal végzett kezelés során a ciano-aminosav-anyagcsere-útvonalhoz kapcsolódó megnövekedett bakteriális dúsulás és modellegerekben csökkent dúsulása azt jelezte, hogy a CT vizes kivonat elősegítheti a ciano-aminosav metabolizmusát.ThA releváns metabolitokban bekövetkező változások farmakológiai aktivitást biztosíthatnak ennek a vizes kivonatnak.

Bár az a mechanizmus, amellyel a CT vizes kivonat megváltoztatja a bélmikrobióta összetételét és funkcióját, összetett, van néhány tipp, ami alapján feltételezhető a lehetséges mechanizmus. Beszámoltak arról, hogy mind a tejsavbaktériumok, mind a CT vizes kivonatok antagonizálhatják az oxidatív stresszt. A gyulladás során fellépő oxidatív stressz gyakori tényező, amely súlyosbítja a bélrendszeri rendellenességeket azáltal, hogy erőteljesen csökkenti a bélmikrobiális sokféleséget és elősegíti a specifikus baktériumok felszaporodását (4). Ellenkezőleg, a reaktív oxigénfajták a baktériumcsoportok szelektív növekedését is elősegítik a nitrát és tetrationát légzés révén [66–68]; Például az Enterobacteriaceae családba tartozó baktériumok gyorsan szaporodhatnak a bélflóra összetételének változása következtében oxidatív körülmények között a gyulladás során [69, 70]. A legtöbb élő szervezet enzimatikus védekezést, nem enzimatikus antioxidáns védelmet és javító mechanizmusokat fejleszt ki az oxigéngyökök megkötésére [71]. Ezek a natív antioxidáns rendszerek azonban általában nem elegendőek az élő szervezetek oxidatív károsodásának megelőzésére. Számos további szintetikus antioxidánst, köztük a butilezett hidroxi-anizolt és a butilezett hidroxitoluolt, széles körben alkalmaztak az oxidáció csökkentésére, de biztonságosságukat megkérdőjelezték [72, 73]. Ezért a kutatók a természetben előforduló anyagokból nyert biztonságosabb és természetesebb antioxidánsok megtalálása felé fordultak. Mind a poliszacharidok, mind a tejsavbaktériumok oxidatív stresszt kiküszöbölő képessége miatt a CT vizes kivonatok bélmikrobióta precíz antioxidáns mechanizmusának meghatározása a jövőben további vizsgálatokat igényel.

Összefoglalva azt találtuk, hogy a CT vizes kivonat képes voltjavítja a bél mikrobiotájátbélbetegségben szenvedő egereknél a diverzitás elősegítésével,az anyagcsere-változások mérséklése, valamint a bél mikrobiota szerkezetének átalakítását, és ezek az eredmények referenciaként szolgálhatnak a kapcsolódó gyógyszerek jövőbeni fejlesztéséhez.

TERMÉSZETES CISTANCHE TUBULOSA A BÉLMIKROBÓTA SZERKEZETÉNEK ÁTALAKÍTÁSÁHOZ PHGS75% ECH 30% ACT 12%