A Boschniakia Rossica és Herba Cistanches összes szaponintartalmának meghatározása spektrofotometriával Ⅰ

Absztrakt:

Célkitűzés Ezt a kvantitatív módszert a Boschniakia rossica és az összes szaponin mennyiségére határozták megHerba ciszternákés a tartalmaaz összes szaponint határozzuk meg． Módszerek A szalidrozidot választották referenciaanyagnak, a színreakciót vanillinnel és perklórsavval alkalmazták. Ezután spektrofotometriás módszerrel 523 nm-en határoztuk meg a Boschniakia rossica és Herba cistanches összes szaponin tartalmát. Ｒeredmények A salidrosid görbe lineáris volt a 0 tartományban. 05133 - 0. 2567mg·ml– 1 a következő korrelációval: 0． 9992, a lineáris regressziós egyenlet pedig Y=1. 611X + 0. 0573. A Boschniakia rossica esetében a salidrozid átlagos visszanyerése 99 volt. 68% 1-es SD-vel. 68% (n=6); és a Herba távolságok esetében a salidrosid átlagos visszanyerése 101 volt. 18% 0 ＲSD-vel. 94% (n=6)). Következtetés A módszer pontos, egyszerű és megbízható. Így felhasználható a Boschniakia rossica és a Herba cistanches összes szaponintartalmának meghatározására.

Kulcsszavak:Boschniakia rossica;Herba ciszternák; Összes szaponin; Meghatározás; Spektrofotometria; Salidroside

MENNYI IDEIG TELJES, HOGY MŰKÖDIK A CISTANCHE?

Cistanche deserticola Y. A C. Ma és a Bosehniakia rossica Fedtseh et Flerov az Orobanchiaceae családba tartozó parazita gyógynövények. A Cistanche deserticola egy parazita növény, amely a Haloxylon ammodendron, egy sivatagi fa gyökerein él. Főleg Xinjiangban és az Alxa League-ben, Belső-Mongóliában gyártják. Alacsony hozama és magas gyógyászati ​​értéke miatt "sivatagi ginzeng" néven ismert. A szöcskét [1] országom északkeleti részén termesztik [2]. A néphit szerint a halhatatlanság hatása van, ezért nevezik északkeleti "örökkori fűnek". Veseelégtelenségből eredő impotencia, derék- és térdfájdalom, bélszárazság, székrekedés esetén alkalmazzák. Táplálhatja és erősítheti a testet, késlelteti az öregedést, és autentikus gyógyászati ​​erőforrás északkeleten [3]. A kettőnek hasonló a hatása, és mindkettő tonizálja a vesét, erősíti a jangot, nedvesíti a beleket és hashajtó [4]. A Cistanche deserticola-ról szóló feljegyzések szerint Li Shizhen Ming-dinasztia "Compendium of Materia Medica" című művében: "Ez az anyag tónusos, de nem durva, ezért nyugodtnak nevezik. Ritkán kapják meg Congrongtól, ezért tele van Cistanche deserticola." Vagyis a Cistanche deserticolát egykor a Cistanche deserticola alternatív gyógyászati ​​anyagaként használták. , A modern kutatások kimutatták, hogy mind a Cistanche deserticola, mind az Estuary deserticola olyan farmakológiai hatásokkal rendelkezik, mint például öregedésgátló [5, 6], fáradtsággátló [7, 8], javítja az immunrendszer működését [9, 10] és javítja a memóriát [{{ 12}}].

A Grasshopper és a Cistanche deserticola összes glikozidtartalma egy mélyreható tanulmány értékével bír. Mindkettő szaponint, illóolajat, cukrot, aminosavakat és egyéb összetevőket tartalmaz. A tudósok összehasonlító vizsgálatokról számoltak be az illóolajok, cukrok, aminosavak és a kettő egyéb összetevőiről [4, 14, 15], de a kettő teljes glikozidtartalmának meghatározása Az irodalomban nem érkezett jelentés. . A Cistanche deserticola fő összetevői a fenilpropanoid glikozidok (A, B, C, D, E, F, G, H, I, J, K glükozidok sorozata) [16], a Cistanche deserticola pedig fenil-etanol glikozidok (Cistanche deserticola sorozata) )[17,18] szerint a kettő szaponinjai hasonlóak, és hasonló komponenst, a szalidrozidot tartalmaznak. Meggyőződésünk, hogy a glikozidok mindkettőnek fontos hatóanyagai, és vizsgáljuk a spektrofotometria alkalmazását az összes glikozidtartalom meghatározására. , hogy elméleti alapot nyújtson az Echinacea deserticola és Cistanche deserticola erőforrások további fejlesztéséhez és hasznosításához.

1 Anyagok és eszközök

1. 1 Anyag és reagensek: Amaranth officinale, a Changbai-hegy környékéről gyűjtött, az Orobanaceae családba tartozó növényként azonosították

Az Orobanche coerulescens szárított egész növényét mossa meg a mintát, és engedje le a vizet

Szétválasztjuk, állandó hőmérsékletű, 40 fokos szárítódobozba helyezzük, tömegállandóságig szárítjuk, összetörjük, 40 mesh-es szitán átpasszírozzuk és előkészítjük

[19]; Cistanche deserticola, Hohhot Enhe Trading Co., Ltd., a listán szereplőként azonosították

Cistanche deserticola Y. C. Ma szárított húsa

Szára, mosva, levegőn szárítva, tömegállandóságig szárítva, összetörve, 40-hálós szitán átpasszírozva, félretéve; piros

Crassuside referenciaanyag (a Kínai Gyógyszerészeti és Biológiai Termékek Intézete, gyártási szám: 110818

- 200404, a tartalom meghatározásához); minden felhasznált kísérleti reagens hazai analitikai minőségű.

1. 2 Instruments 752N UV-látható spektrofotométer (Shanghai Jingke); Tu-1901 pár

Beam UV spektrofotométer (Beijing Puxi General Co., Ltd.); elektronikus analitikai mérleg

AL104 1/100,000 (Mettler-Toledo Instrument Shanghai Co., Ltd.); FW-80

Nagy sebességű univerzális zúzógép (Shandong Hualu Electric Heating Instrument Co., Ltd.).

2 módszer

2. 1. Összehasonlító oldat készítése

Használjon analitikai mérleget a 15. 40mg szalidrozid pontos mérésére, oldja fel metanolban, töltse át egy 25-mérőlombikba, és állítsa be a térfogatot a jelre. Készítse elő, hogy ml-enként 0,0% salidrozidot tartalmazzon. A 616 mg-os oldatot használjuk referenciaoldatként, és a későbbi felhasználásra hűtőszekrénybe zárjuk.

2. 2 Vizsgálati oldat elkészítése

Használjon analitikai mérleget a Grasshopper és a Cistanche deserticola gyógyporának pontos leméréséhez. 2. 0g, helyezze egy gömblombikba, adjon hozzá 40 ml 90%-os etanolt, melegítse és forralja vissza a Grasshopper-t egyszer, majd melegítse és forralja vissza kétszer Cistanche deserticola-t, mindegyik extrakciós idő 1,5 óra. szívószűrés, egyesítjük a szűrletet, szárazra töményítjük vízfürdőben, adjunk hozzá 25 ml vizet, hogy feloldódjon, háromszor extraháljuk petroléterrel, minden alkalommal 25 ml-t, öntsük el a petroléter folyadékot a felső rétegben, majd folytassuk az extrahálást háromszor vízzel telített n-butanollal. 25 ml-t minden alkalommal, egyesítsen három n-butanol-kivonatot, párologtassa el az n-butanol-folyadékot vízfürdőben egy elszívófülkében, hígítsa fel metanollal egy 10 ml-es mérőlombikba, jól keverje össze, majd pontosan mérjen ki 1 ml-t az oldatból és hígítsa fel metanolt 25 ml térfogatra. palackba, jól keverjük össze, és későbbi felhasználáshoz használjuk tesztoldatként.

2. 3. Mérési hullámhossz kiválasztása

1. Helyezzen 25 ml-t a referenciaoldatból és a vizsgálati oldatból dugókkal ellátott, beosztásos kémcsövekbe, párologtassa el a metanol oldószert állandó hőmérsékletű, 60 fokos vízfürdőben, és adjon hozzá 0-t. 2 ml 5%-os vanillin-jégecet-oldatot és 0,8 ml perklórsavoldatot 60 fokos vízfürdőben 15 percig reagáltatunk. Vegye ki a kémcsövet és azonnal hűtse le jeges vízzel 5 percig. Adjunk hozzá 5 ml jégecetet, és jól rázzuk fel [20]. A referenciaoldatot ugyanígy készítjük metanollal. A színfejlődés utáni oldatot hullámhossz-szkennelésnek vetettük alá, és az Escherichia coli és a Cistanche deserticola teljes glikozidjainak mérési hullámhosszaként a salidrozid színreakciója utáni 523 nm-es maximális abszorpciós hullámhosszt választottuk 400 és 800 nm között. A kontrollanyag és a vizsgált anyag pásztázási mintáit az 1. ábra mutatja.

2. 4. Lineáris összefüggés vizsgálata: Pipettával rajzolja meg pontosan a referenciaoldatot 0. 5,1. 0,

1. 5,2. 0,2. 5 ml-t helyeztünk az 1-től 5-ig számozott dugós kémcsövekbe, és a színreakciót a "2.3" lépések szerint hajtottuk végre. Vakkísérletet végeztünk metanollal párhuzamos körülmények között, és az abszorbanciát 523 nm hullámhosszon mértük. Az A (Y ) abszorbancia az ordináta, koncentráció mg·ml-1

(X) az abszcissza, lineáris regressziót hajtunk végre, a regressziós egyenlet pedig Y {0}}. 611X +0. 0573 (r=0. 9992), az eredmény azt mutatja, hogy a szalidrozid tömegkoncentrációja 0. A lineáris kapcsolat jó a 05133-0.2567mg·ml-1 tartományon belül. Az eredményeket a 2. ábra mutatja.

2. 5 Stabilitási vizsgálat

Pontosan mérjen ki megfelelő mennyiségű Grasshopper és Cistanche deserticola tesztoldatot, fejlessze ki a színt a "2.3" alatti módszer szerint, és mérje meg az abszorbancia értéket egyenletesen 6 alkalommal 30 percen belül. Ez azt mutatja, hogy a színfejlődés után 30 percen belül a Grasshopper és a Cistanche deserticola meg fog jelenni. A tesztoldat stabilitása viszonylag jó. Az eredményeket az 1. táblázat tartalmazza.

2. 6 Precíziós teszt

Pontosan mérjünk ki megfelelő mennyiségű referenciaoldatot, alakítsuk ki a színt a fenti „2.3” pontban leírt módszer szerint, és mérjük meg folyamatosan hatszor az abszorbanciát. Az eredményeket a 2. táblázat mutatja be. Az eredmények azt mutatják, hogy ennek a kísérleti műszernek a pontossága jó.

1. ábra A salidrosid referenciaanyag (A), a szöcske vizsgálati oldat (B) és a cistanche deserticola vizsgálati oldat (C) vékonyrétegű pásztázási mintái

2. 7. Ismételhetőségi vizsgálat.

Pontosan mérjen le 6 adag szöcske és cistanche deserticola port, mindegyik adag 2, 0 g-ot tartalmaz, melegítés és visszafolyató hűtő alatt történő extrahálás után a megállapított optimális extrakciós eljárással, kövesse a "2. 3" alatti lépéseket, és mérje meg a abszorbancia 523 nm hullámhosszon. A mérési eredményeket a 3. és 4. táblázat tartalmazza.

2. 8. Minta-visszanyerési arány teszt.

Pontosan mérjünk le 6 mintát a Grasshopper és Cistanche deserticola fajokból, amelyekben az összes glikozid tömegszázaléka ismert. Minden minta 12 mg. Pontosan adjunk hozzá 2 ml szalidrozid referenciaoldatot. Kövesse a "2. 2" pontot. Vegyük ki a mintát a tétel alatt, határozzuk meg a teljes glikozid-tartalmat a színfejlődés után a 2.3. pont szerint, és számítsuk ki a minta visszanyerési arányát. Az eredményeket az 5. és 6. táblázat tartalmazza.