A krónikus magzati hipoxiára adott dichotóm válaszok előre meghatározott öregedési fenotípushoz vezetnek Ⅱ
Nov 29, 2023
Hipoxiás
Magzati vesék
Deregulált fehérjeexpressziós profil bemutatása A hipoxia által vezérelt IUGR mögött meghúzódó molekuláris útvonalak tisztázása érdekében a hipoxiás vagy normoxiás E18.5 magzatok frissen izolált veséit nano-LC rendszerrel (Dionex UltiMate 3{{9) vetettük alá alulról felfelé irányuló proteomprofilozásnak. }}00 RSLC) egy nagy felbontású orbitrap tömegspektrométerhez (Thermo QExactive) kapcsolva. A főkomponens-analízis szembetűnő különbségeket mutatott a hipoxiás és normoxiás vesék között (2A. ábra). Összesen 6307 fehérjét azonosítottak (FDR < 0,01, kiegészítő S2 táblázat), amelyek közül 436 szignifikánsan deregulált (FDR < 0,05); 284 megnövekedett abundanciával és 152 csökkent abundanciával. A génontológiát használó funkcionális annotációs klaszterezés (18–20) specifikus mitokondriális, lizoszómális, RNS- és DNS-kötő fehérjék, valamint specifikus anyagcsere-folyamatokban vagy veleszületett immunválaszokban részt vevő fehérjék feldúsulását mutatta ki (2. ábra, B–D) . Ezeket a fehérjéket kategorizáltuk (1) nefronképződés, (2) metabolikus adaptáció és (3) felgyorsult öregedés szempontjából, amint azt a következő bekezdésekben bemutatjuk és tárgyaljuk.
Az elfojtott DNS-replikáció és fehérjeszintézis hozzájárul az új nefronok korlátozott képződéséhez krónikus hipoxiában
A fejlődés során fellépő nemkívánatos események, mint például a krónikus magzati hipoxia, gyakran a nephronszám csökkenésével járnak együtt (27, 29–32). Mégis ritkán sikerült kimutatni egy mögöttes mechanizmust, amely meggyőzően magyarázza ezt a megállapítást. A "DNS-kötő" és az "RNS-kötő" GO-kifejezésekhez tartozó mind a 64 deregulált fehérje csoportosítása (a hőtérkép a kiegészítő S2 ábrán látható) a STRING adatbázis segítségével (22) több alhálózatot mutatott ki, beleértve a DNS-javítást, a DNS-replikációt, mRNS splicing és riboszomális fehérjék (3A. ábra). A dúsított folyamatok vagy útvonalak átfogóbb listája a 3B. ábrán látható (FDR < 0.05). Ezek közül a "riboszóma" és a "DNS-replikáció" az elnyomott fehérjék legfontosabb feltételei közé tartozott, míg az mRNS-splicing és az "RNS-lebomlás" az indukált fehérjék legfontosabb feltételei közé tartozott. A DNS-javító folyamatok kétoldalú expressziós mintázatot mutattak. Itt a nukleotid-kivágásban vagy a hibás illeszkedés javításában részt vevő fehérjéket elnyomták, de a "báziskivágás javítását" közvetítő fehérjéket indukálták. Ezenkívül a p27Kip1 sejtciklus-inhibitor abundanciaszintje kétszeresére nőtt (3C. ábra), a Ki67 proliferációs markeré pedig 3-szorosára csökkent (3D. ábra), ami együttesen a sejt lassulását jelzi. felosztási folyamat. Pontosabban, az Mki67, a Ki67-et kódoló gén mRNS expressziós szintje szignifikánsan visszaszorult a hipoxiás körülmények között tenyésztett egér primer proximális tubuláris sejtekben (3E. ábra). Ezt az elnyomást az Mki67 promoter régió hipermetilációja közvetítette hipoxiás magzati vesékben (3F. ábra). Így a magzati hipoxiás vesékben a DNS-szintézis, az mRNS-transzláció és a legtöbb DNS-javító folyamat lelassul, ami csökkenti a sejtek növekedési és szaporodási képességét. Összességében itt először a proteomprofilozási adatok olyan molekuláris bizonyítékot szolgáltatnak, amely potenciálisan megmagyarázza a nefronok csökkent képződését.
A veleszületett immunrendszer és az oxidatív stressz aktiválódik krónikus hipoxiás állapotokban
Az egyik leggazdagabb kifejezés, amely mind a 436 fehérje funkcionális annotációjának elemzésében, és az indukált fehérjék legfelső része a "neutrofil degranuláció" volt (2. ábra, B és C), ami a veleszületett immunrendszer folyamatos aktiválódását jelzihipoxiás magzati vesék. A 34 asszociált fehérje közül 29 indukált, öt pedig elnyomott (rózsaszín a 4A. ábrán). Az indukált fehérjék között számos glikolitikus és lizoszómával rokon enzim, számos S100A fehérjecsaládtag, a gyulladásos citokin makrofág migrációt gátló faktor (MIF), valamint az elsődleges és másodlagos granulátum fehérjék a neutrofil granulátum fehérje (NGP), a mieloperoxidáz (MPO) szerepelt. , katelicidin (CAMP), peptidoglikán felismerő fehérje 1 (PGLYRP1) és laktoferrin (LTF). A hipoxiás magzati vesékben a neutrofilek várható inváziójának igazolására és a szöveten belüli elhelyezkedésük feltárására vesemetszeteket festettek MPO-ra. Az MPO-pozitív sejtek a vesekéreg nefrogén zónájában, az erek közelében, a proximális tubulus mellett alkottak klasztereket, és esetenként hipoxiás minták medulláris régióiban is megtalálhatók voltak (4D ábra és kiegészítő S3, A ábra). –C). Ezzel szemben a normoxikus magzati vesék nem mutattak infiltrációt vagy neutrofilek felhalmozódását (4C. ábra). Kimutatták, hogy a caveolin-1 (CAV1) fokozza az immunsejtek transzcelluláris migrációját (33). Ennek megfelelően a CAV1-et hipoxiás magzati vesékben indukálták (kiegészítő S3D ábra), ami a vese vérereinek fokozott festődését mutatja, beleértve a magzati vese kérgi régióját áthaladó ereket (4. ábra, E és F). A neutrofilek degranulációja reaktív oxigénfajták lokális kitörését idézi elő, ami fokozott oxidatív stresszhez és szövetkárosodáshoz vezet, beleértve a DNS-oxidációt is. A DNS-oxidáció fontos markere a 8-hidroxi-2′-dezoxiguanozin (8-OHdG), amely a proximális tubulusokban és a hipoxiás magzati vesék nefrogén zónájában fokozódott (4. ábra, G és H), a neutrofil klaszterek közelében. Az 8-OHdG károsodott DNS mennyiségének növekedése annak ellenére következett be, hogy az MGMT és az OGG1 egyidejű indukciója (4. ábra, I és J), két enzim, amelyek felelősek az 8-OHdG eltávolításáért. Ezek az eredmények a veleszületett immunrendszer folyamatos aktiválódását mutatják a fejlődő vesében, ami a hipoxiás stressz mellett még több szövetkárosodást okoz. E szöveti elváltozások nem hatékony helyreállításával egy ördögi kör indulhat be, amely tovább rontja a nefrogenezist.
ÁBRA. 2. A proteomikus profilalkotás számos, a hipoxiával kapcsolatos változást tár fel. A proteomikai adatok főkomponens-analízise egyértelmű elkülönülést mutatott a normoxiás és hipoxiás magzati vesék között. B–D, az összes jelentősen deregulált fehérje (B), indukált fehérje (C) és redukált fehérje (D) funkcionális annotációs klaszterezése Egy útvonal jelentősen megváltozott frakcióját (x tengely) ábrázoljuk a feldúsulás jelentőségének függvényében (y- tengely). Az egyes pontok mérete az adott útvonalon lévő tagok teljes számát kódolja. Az indukált fehérjék az anyagcsere folyamatok (glikolízis), a mitokondriális vagy lizoszómális fehérjék, valamint az immunrendszer válaszában (neutrofil degranuláció) részt vevő fehérjék feldúsulását mutatták, míg a redukált fehérjék a DNS- és RNS-kötő utakban gazdagodnak (a riboszóma szerkezeti alkotórésze).
(PGLYRP1) és laktoferrin (LTF). A hipoxiás magzati vesékben a neutrofilek várható inváziójának igazolására és a szöveten belüli elhelyezkedésük feltárására vesemetszeteket festettek MPO-ra. Az MPO-pozitív sejtek a vesekéreg nefrogén zónájában, az erek közelében, a proximális tubulus mellett alkottak klasztereket, és esetenként hipoxiás minták medulláris régióiban is megtalálhatók voltak (4D ábra és kiegészítő S3, A ábra). –C). Ezzel szemben a normoxikus magzati vesék nem mutattak infiltrációt vagy neutrofilek felhalmozódását (4C. ábra). Kimutatták, hogy a caveolin-1 (CAV1) fokozza az immunsejtek transzcelluláris migrációját (33). Ennek megfelelően a CAV1-et hipoxiás magzati vesékben indukálták (kiegészítő S3D ábra), ami a vese vérereinek fokozott festődését mutatja, beleértve a magzati vese kérgi régióját áthaladó ereket (4. ábra, E és F). A neutrofilek degranulációja reaktív oxigénfajták lokális kitörését idézi elő, ami fokozott oxidatív stresszhez és szövetkárosodáshoz vezet, beleértve a DNS-oxidációt is. A DNS-oxidáció fontos markere a 8-hidroxi-2′-dezoxiguanozin (8-OHdG), amely a proximális tubulusokban és a hipoxiás magzati vesék nefrogén zónájában fokozódott (4. ábra, G és H), a neutrofil klaszterek közelében. Az 8-OHdG károsodott DNS-ének ez a növekedése annak ellenére következett be, hogy az MGMT és az OGG1 egyidejű indukciója (4. ábra, I és J), két enzim, amelyek felelősek az 8-OHdG eltávolításáért. Ezek az eredmények a veleszületett immunrendszer folyamatos aktiválódását mutatják a fejlődő vesében, ami a hipoxiás stressz mellett még több szövetkárosodást okoz. E szöveti elváltozások nem hatékony helyreállításával egy ördögi kör indulhat be, amely tovább rontja a nefrogenezist.
A hipoxiához való metabolikus alkalmazkodás kifejezett glikolízist eredményez a magzati vesében
A krónikus hipoxia olyan súlyos állapot, amelyhez a sejteknek metabolikus változásokon keresztül kell alkalmazkodniuk a túléléshez. Ennek elsõsorban a celluláris ATP-termelés fenntartása áll, amely megfelelõ oxigénellátás hiányában az oxidatív foszforilációról a glikolízisre való átállást igényel. A funkcionális annotációból eredő összes kifejezés közül a "glikolitikus folyamat" volt a legjelentősebb (2B. ábra). Mind a tíz enzimet (piros ①–⑩ az 5A. ábrán), amelyek a glükóz piruváttá történő átalakulásához szükségesek indukáltákmagzati hipoxiás veséka normoxikus kontrollokhoz képest (a hőtérkép az 5C. ábrán látható). Ezen túlmenően a glükóz transzporter 1 (SLC2A1, narancssárga a 4A. ábrán) és a laktát-dehidrogenáz A (LDHA, sötétvörös az 5A. ábrán) expressziója is fokozódott, ami elősegíti a glükóz sejtbe történő fokozott felvételét és a piruvátból laktátba, ill. Úgy tűnt, hogy a piruvát alternatív felhasználását a citromsavciklusban akadályozza (1) a piruvát-dehidrogenáz-kináz 1 (PDK1, sötétvörös az 5A. ábrán) fokozott expressziója, amely inaktiválja a piruvát-dehidrogenáz komplexet a mitokondriumokban, és ezáltal a piruvát oxidációját. acetil-CoA-hoz; és (2) a piruvát karboxiláz (PC) csökkent szintje révén, amely katalizálja a piruvát oxál-acetáttá való átalakulását. Másrészt a fruktóz-1,6-biszfoszfatáz 1 (FBP1, kék az 5A. ábrán) csökkent, tovább növelve a glükóz piruvát felé irányuló potenciális áramlását. Mindezek az enzimatikus változások kedveznek a laktáttermelésnek, és valóban, a laktátkoncentráció megnövekedett hipoxiás magzati vesékben (5B. ábra). A fokozott laktáttermelés kedvezőtlen savasodáshoz vezethet. Mégis, a dúsított fehérjék között találtuk az SLC16A3 és SLC5A8 monokarboxilát transzportereket (narancs az 5A. ábrán), amelyekről ismert, hogy laktátot választanak ki az extracelluláris térbe, hogy elkerüljék a citoplazmatikus savasodás toxikus hatását. Így modellünk bemutatja a magzati vesék figyelemre méltó képességét a krónikus hipoxiához való alkalmazkodásra a glikolitikus aktivitás növelésével,
ÁBRA. 3. Új nefronok képződése hipoxiában a DNS-replikáció és a fehérjeszintézis elfojtásával jár. A STRING adatbázisból származó, jelentősen megváltozott DNS- és RNS-kötő fehérjék fehérje-kölcsönhatási hálózata számos fehérjeklasztert mutat: riboszómális fehérjék (kék), DNS-replikációban részt vevő fehérjék (zöld), DNS-javítás (lila) és mRNS-splicing ( piros). A Ki67 (Mki67) proliferációs marker feketével van jelölve, kiemelve szoros kapcsolatát a DNS-javítással és a DNS-replikációval. B, szignifikánsan megváltozott DNS- és RNS-kötő fehérjék útvonalainak kiválasztása a KEGG és a Reactome adatbázisokból, amelyek a legjelentősebb változásokat mutattákhipoxiás vesék, csökkenő fontossági sorrendben ábrázolva. Az RNS splicing és RNS degradációs folyamatok feldúsultak (piros), míg az RNS transzláció, a DNS replikáció és a javítási útvonalak visszaszorultak (kék). Csak FDR-vel dolgoz fel<0.05 are shown. C and D, the cell cycle inhibitor p27Kip1 was enhanced (unpaired two-tailed t test, Welch's correction, p = 0.0095), whereas the expression of the proliferation marker Ki67 was reduced (unpaired two-tailed t test, Welch's correction, p = 0.0078) in hypoxic fetal kidneys. E, hypoxia reduced the mRNA expression level of Mki67 in mouse primary proximal tubular cells (unpaired two-tailed t test, p < 0.0001). F, this reduction was mediated by hypermethylation of the Mki67 promoter in hypoxic fetal kidneys. Open circle unmethylated, black circle methylated (Fisher's exact test, p = 0.0016; Mann–Whitney U-test, p = 0.0431)
ÁBRA. 4. A gyulladásos válaszban és az oxidatív stresszben szerepet játszó fehérjék feldúsulnak az újonnan képződő nefronokban hipoxia alatt. A, mind a 34 szignifikánsan megváltozott fehérje ábrázolása a neutrofil degranulációnak (rózsaszín körök) nevezett annotációhoz az adatkészletünk összes jelentős (nagyobb szürke körök) és nem szignifikáns (kisebb szürke körök) fehérje között. 29 magasabb volt, míg öt csökkent. B, egy hőtérkép, amely az (A)-ban szereplő összes rózsaszín fehérjét mutatja, és ezek indukcióját vagy elnyomását hipoxiában, a fehérjebőség csökkenő sorrendjében. C–H, reprezentatív immunhisztokémiai képek az E18.5 normoxikus illhipoxiás veséka neutrofilek beszivárgását és az oxidatív stresszt mutatja. C és D, a neutrofil marker mieloperoxidáz (MPO) immunhisztokémiája kimutatta, hogy ezek a sejtek csoportosulnak az újonnan képződő nefronok közelében (csillag) és a hipoxiás magzati vesék (D) vese ereinek szomszédságában (nyílhegy). A normoxikus kontrollokban (C) MPO-pozitív sejtek ritkán voltak jelen. (100 μm-es léptékrudak). E és F, immunhisztokémia, amely a caveolin -1 (CAV1) fokozott expresszióját mutatja hipoxiás magzati vesék veseereiben (F) a kontrollokhoz (E) képest (200 μm-es skála). A G és H, a 8-hidroxi-2′-deoxiguanozin (8-OHdG), az oxidatív DNS-károsodás markere, feltűnően megnövekedett az újonnan képződő nefronokban (csillag) a vesekéregben és a a hipoxiás vesék (H) proximális tubulusainak sejtjei (nyíl), míg a normoxiás szövetben (G) csak néhány sejt festődött (200 μm-es skála). I és J, ez a DNS-károsodás növekedése annak ellenére következett be, hogy az O-6-metilguanin-DNS-metiltranszferáz (MGMT; páratlan kétfarkú t-teszt, p=0.0002) egyidejű emelkedése (I) és {{ 15}}oxo-guanin-glikoziláz (OGG1; páratlan kétfarkú t-teszt, p=0.0063) (J), két enzim, amely az oxidált DNS helyreállításában vesz részt.
amely elegendő ATP-termelést és túlélést biztosít ebben a kedvezőtlen állapotban.
A magzati hipoxia elősegíti a kompenzáló mitokondriális fehérjeimportot és a légzőlánc összeállítását
A fokozott glikolízis mellett több változást is találtunk a mitokondriális fehérje bőség szintjében (a hőtérkép a kiegészítő S4 ábrán látható). A fehérjehálózatok STRING segítségével történő létrehozása során számos olyan klasztert találtunk, amelyek a fehérjék mitochon.dria-ba történő transzlokációjában, oxidatív foszforilációban és mitokondriális riboszómális fehérjékben vesznek részt (5. ábra, D és E). Megjegyzendő, hogy több, a belső mitokondriális membránhoz kapcsolódó fehérje indukálódott, ahol az oxidatív foszforiláció (OXPHOS) megy végbe. Az OXPHOS öt multiprotein komplexet foglal magában, amelyek a belső mitokondriális membrán mentén helyezkednek el. Az indukált fehérjék között szerepeltek az OXPHOS-komplexek (NDUSF6), III (UQCR10), IV (COX6B1, COXC és COX7A2) és V (ATP5J, MTATP8), de az UQCC3 és SCO2 komponensei is, amelyek szükségesek a megfelelő összeállításhoz és működéshez. komplex és IV (5D ábra és kiegészítő S4 ábra). Az SDHC és az SDHD, a ll-es komplex alegységei szintén felszabályozottak voltak (1.{15}} és 2.{17}}szeresére), de nem értek el statisztikai szignifikanciát. Ráadásul nem csak a légzőlánc komponensei gazdagodtak a magzatbanhipoxiás vesék, hanem számos fehérje is közvetíti a mitokondriumokba való behozatalukat. Ez magában foglalta a külső membrán transzlokáz (TOM - TOMM22) és a belső membrán transzlokáz komplex, a TIM22 (TIMM22, TIMM9 és TIMM10, valamint a kapcsolódó TIMM8-TIMM13- komplex tagjait (5D. ábra és kiegészítő ábra). S4) A 21 csökkent mennyiségben előforduló mitokondriális fehérje között négy mitokondriális riboszómális fehérje, valamint az aminosav-katabolizmusban, a vitaminok bioszintézisében vagy a zsírsav-béta-oxidációban részt vevő fehérjék találhatók (5. ábra, D és E, valamint a kiegészítő ábra). S4.) Ezek az eredmények a lehetséges mitokondriális diszfunkció és a sérült fehérjék regenerálására irányuló látszólagos erőfeszítésekre utalnak (34), a fokozott glikolízis és az összességében csökkent fehérjeszintézis ellenére.
A lizoszómális biogenezis és az autofágia fokozódikHipoxiás magzati vesékA lizoszóma volt a második olyan organellum, amely hipoxiás körülmények között feldúsult. Azonban a mitokondriumokhoz képest, ahol a fehérjék 36%-a csökkent, szinte az összes lizoszómához kapcsolódó fehérje felszabályozott (6. ábra, A és B). Köztük kilenc lizoszómális savhidroláz volt, amelyek a lizoszómák KEGG-útvonalában annotált lizoszómális savas hidrolázok közel 20%-át képviselik: négy pro tease (CTSA, CTSF, CTSZ, TPP1), három glikozidáz (GAA, NAGA, NEUosomal), a savas foszfatáz 2 (ACP2) és a lizoszomális savas lipáz A (LIPA). Ezenkívül bizonyítékot találtunk a lizoszómák és a kapcsolódó organellumok fokozott biogenezisére. A nyolc BLOC1 (a lizoszómával kapcsolatos organellum komplex 1 biogenezise) komponense közül három szignifikánsan indukálódott (6. ábra, C–E), valamint a H/Cl cseretranszporter 5 (CLCN5), amely döntő szerepet játszik a az endoszómák savasodása (6F. ábra). Megjegyzendő, hogy a Snapin (BLOC1 7. alegység) szerepet játszik a lizoszómális savasodásban és az autofagoszóma érésében és működésében is. Egyéb indukált fehérjék, amelyekről ismert, hogy szerepet játszanak az autofágiában, az Atg7 és a Bnip3 (6. ábra, G és H). Az autofág fluxus másik követelménye a lizoszómák perinukleáris klasztereződése, amelyet a lizoszómális Ragulator komplex (35, 36) és két egymással ellentétes motoros fehérjecsalád közvetít. Meglepő módon a Regulator állványzati alegységeinek öt tagja közül négy (LAMTOR1, 2, 3 és 5) szignifikánsan indukált (6. ábra, A és B); A LAMTOR4 szintén 1.{29}}szeres volt, de nem érte el a statisztikai szignifikanciát. Továbbá, a kinezinek, amelyek az organellumok kifelé irányuló mozgását közvetítik, tendenciát mutattak az elnyomottságra, míg a befelé irányuló mozgást elősegítő dynein családtagok indukáltak, bár statisztikailag nem szignifikánsak (kiegészítő S5 ábra). Ezek az eredmények együttesen erős bizonyítékot szolgáltatnak arra, hogy a lizoszómák háztartási funkciója fokozódikmagzati hipoxiás vesék, teljes mértékben kompatibilis a sérült mitokondriumok megújításának várható szükségletével.
Koraszülött
Az öregedés a hipoxiás alkalmazkodás Janus-arcú aspektusait szemlélteti A kompenzációs helyreállító és fiatalító mechanizmusokkal szemben a deregulált fehérjék közül 15-öt találtunk az „öregedés” kifejezéshez (7A. ábra), amely a hipoxiás adaptáció harmadik kategóriáját jelenti: a felgyorsult öregedést. . Míg ezeknek a fehérjéknek a többsége szerepet játszik a fent leírt neutrofil degranulációs és lizosomák (MIF, MPO, PSEN1), mitokondriumok (NDUFS6, FADS1, MTCO1, CYP27B1), glikolízis (ALDOC) és DNS-javítás (OGG1) folyamatában. ; némelyikről leírták, hogy közvetlenül befolyásolják az egerek élettartamát. Különösen a klotho és a sirtuin 6 fehérjebősége csökkent E18.5 hipoxiás betegekben.magzati vesék(7. ábra, B és C). A Sirtuin 6 egy mindenütt expresszálódó enzim, amely protein-deacetiláz és mono-ADP ribozil-transzferáz aktivitással rendelkezik, és részt vesz számos sejtfunkció szabályozásában, beleértve a gyulladást, a glikolízist és a DNS-javítást. Kiütése súlyos progériához vezet egerekben, amelyek élettartama 1-3 hónapra csökkent (37, 38). A vese a klotho szintézis fő helye (azaz a disztális, csavarodott tubulus – a DCT a fehérje nagy részét további szintézissel járul hozzá a proximális tekercses tubulusokban), ahol lokálisan membránhoz kötött béta-glükuronidázként működik. A klotho mennyiségének csökkenése specifikus folyamatnak tűnik, mivel a DCT más fehérjéi, beleértve a CALB1-et, nem változtak. A Klotho a keringésbe is kiválasztódik vagy a membránhoz kötött forma extracelluláris részének hasításával vagy egy alternatív splice-variáns transzlációjával. A keringő klotho (sKL) szintje az életkor előrehaladtával csökken (39, 40), ami arra késztetett bennünket, hogy felmérjük annak és a sirtuin 6 koncentrációját a hipoxiás vagy normoxiás E18.5 magzat törzsvérében. Valójában az sKL és a sirtuin 6 koncentrációja szignifikánsan csökkent hipoxiás E18.5 magzatokban (7. ábra, D és E). Ezenkívül és ami még fontosabb, a klotho és a sirtuin 6 szérumszintje még mindig jelentősen csökkent idős egerekben (7. ábra, F és G), ami e két fehérje állandó csökkenését jelzi az élet során. Klotho esetében úgy tűnik, hogy ez a 15-hónapos hipoxiás utódok veséjében tapasztalható jelentősen csökkent mRNS expressziós szintnek köszönhető (7H. ábra). A sirtuin 6 vese mRNS expressziós szintje azonban nem változott az idős normoxiás és hipoxiás egerek között (71. ábra). Továbbá a DNS-metiláció változásairól kimutatták, hogy nemcsak a nefron progenitorsejtek megújulásának és differenciálódásának (41), hanem a klotho expressziójának is az egyik legfontosabb mechanizmusa (42, 43). Azonban, ellentétben az Mki67 hipermetilációjával (3. F ábra), a klotho promoter hipometilált volt a krónikus hipoxia során (kiegészítő S6 ábra). A Sirt6 metilációs mintázatát nem lehetett meghatározni. Legjobb tudomásunk szerint az IUGR modellünk az első, amely felvázolja a korai öregedés fenotípusához vezető mechanizmust a gyulladásos károsodások szinergiáján, a nem hatékony helyreállításon, a megváltozott anyagcserén és az öregedésgátló fehérjék már születéskor bekövetkező csökkenő bőségén keresztül.
Az öregedésgátló fehérjék csökkentése a krónikus hipoxiára válaszul az egerek és a férfiak között konzerválódik. Egy utolsó kísérletsorozatban azt kérdeztük, hogy a krónikus hipoxia és az öregedésgátló fehérjék csökkent szérumszintje közötti kölcsönhatás evolúciósan konzervált jelenség-e. Ebből a célból egy kilenc egészséges önkéntesen (nyolc férfi, egy nő) végzett kontrollált vizsgálatból (10) szérummintákat gyűjtöttek 2 héttel korábban (tengerszint, SL), három időpontban, egy megszakítás nélküli 28-napon. A 3454 m-es tartózkodást (nagy magasság, HA3, HA9, HA28), valamint 1, 7 és 14 nappal az SL-be való visszatérés után (RSL1, RSL7, RSL14) elemeztük sKL és SIRT6 szempontjából (8. ábra). Az SL-ben kapott minták kontrollként szolgáltak minden résztvevő számára. Az sKL és a SIRT6 szérumszintek nagy magasságban csökkentek, és mindkettő statisztikai relevanciát ért el a H28-ban. A tengerszintre való visszatéréskor az sKL magasabb szintre emelkedett, mint a nagy magasságban való tartózkodás előtt az RSL7-nél, és visszatért a normál értékre az RSL14-nél (8A. ábra). Másrészt a SIRT6 tovább csökkent, amikor visszatért a tengerszintre, és csak az RSL14-nél kezdett újra dőlni (8B. ábra), ami e két öregedésgátló fehérje eltérő szabályozására utal. Összefoglalva, ezek az eredmények arra utalnak, hogy a csökkent szérum klotho és sirtuin 6 szintje általában krónikus hipoxiás állapotoknak való kitettséget igényelhet, és így evolúciósan erősen konzervált folyamatot jelenthet.
A Wecistanche támogató szolgáltatása – Kína legnagyobb ciszterna exportőre:
E-mail:wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/Tel.:+86 15292862950
Vásároljon további specifikációkért:
https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop
