A fenil-etanol-glikozidok különbsége a táblázatban található cistancsokban Herba és a 2 gazdaszervezet között. A fenil-etanol-glikozidok különbsége a táblázatban található cistancsokban, a Herba a 2 gazdában található UPLC-QQQ-MS és PLS-DA-elemzés alapján, UPLC-QQQ-MS és PLS-elemzés alapján
May 30, 2025
Cistanche deserticolaaz Orobanchaceae családjába tartozó évelő holoparazita növény. Ez a szárított, húsos szár, amelyet pikkelyszerű levelek borítanakCistanche deserticola YC Ma[1-2]. Ezt a növényt elsősorban Belső-Mongóliában, Hszincsiangban és Gansuban terjesztik, ahol élősködik.Haloxylon ammodendron (CA Mey.) Bunge, a Chenopodiaceae xerofita sivatagi növény [3-4]. Az elsődleges aktív komponensekCistanche deserticolaide tartoznak a fenil-etanoid glikozidok, iridoidok és poliszacharidok [5-7], amelyek olyan tulajdonságokkal rendelkeznek, mint a reproduktív funkció védelme, antioxidáns és májvédelem [8-10]. Kínában több mint 2000 éves használatának köszönhetően az első helyen áll a vitalitás erősítését célzó hagyományos kínai orvoslás receptjeiben, és a második az öregedésgátló készítményekben [11]. A túlzott betakarítás és a környezet pusztítása miatt azonban a vadon élő erőforrásokCistanche deserticolaa kihalás szélén állnak, ami azt eredményezi, hogy országosan védett növényré (II. kategória) és aA vadon élő növények védelmének nemzetközi listája[12]. A gyógyszerpiacon a kereslet-kínálat egyensúlyhiányának kezelése érdekében a mesterséges termesztés elengedhetetlenné vált a gyógyszerpiac fenntartható fejlődéséhez.Cistanche deserticolaipar.
Cistanche deserticola kivonat eladó
A legújabb tanulmányok sikeres oltásról számoltak beCistanche deserticola-onAtriplex canescens[13], a Chenopodiaceae család örökzöld cserje. Általában "biológiai sótalanítónak" nevezik.Atriplex canescensszikes-lúgos talajjavításra kiváló minőségű fafaj [14]. MűvelésCistanche deserticola-onAtriplex canescensjelentős előnyökkel jár, mint például a magas hozam és a kiváló minőség. Ennek eredményeként a minőség értékeléseAtriplex canescens-Cistanche deserticolakutatási hotspottá vált [15-16]. A korábbi kutatások főként a szárított termékek gyógyászati tulajdonságaira összpontosítottakCistanche deserticola, míg a friss formájú aktív komponensekről kevés tanulmány marad. Különösen a felvételét követőenCistanche deserticolamint élelmiszer- és gyógyhatású anyag a kísérletirányítási rendszerben (Notice No. 9 of the National Health Commission, 2023), fejlesztése és hasznosítása kettős célú gyógynövényként jelentős figyelmet kapott a hagyományos kínai orvoslás területén [17]. FrissCistanche deserticolakitűnő íze és kényelme miatt kedvelt, így nagyon ígéretes a fejlesztés szempontjából. A friss gyógyászati anyagok olyan feldolgozatlan friss növényi, állati vagy gombás anyagokat jelentenek, amelyek terápiás vagy egészségjavító tulajdonságokkal rendelkeznek. A 2000 általánosan használt kínai gyógynövény közül 486 friss fajta [18].
Az ultra-teljesítményű folyadékkromatográfiás-hármas kvadrupólusos tandem tömegspektrometriás (UPLC-QQQ-MS) módszer rendkívül érzékeny, így alkalmas alacsony koncentrációjú és összetett komponensek kimutatására [19]. A magas víztartalom problémájának megoldása érdekébenCistanche deserticola, ahol a fenil-etanoid-glikozidok enzimatikus hidrolízisre hajlamosak, aminek következtében csökken a tartalom, az enziminaktivációs szárítási módszer hatékonyan megőrzi a fenil-etanoid-glikozid-tartalmat [20]. Ez a tanulmány az UPLC-QQQ-MS segítségével 8 fenil-etanol-glikozidot, köztük az echinakozidot és az akteozidot értékeli, mint kulcsfontosságú aktív összetevőket frissen.Cistanche deserticolakét gazdanövényből [21-22]. A tanulmány azt vizsgálja, hogy a gyümölcslé és a friss gyümölcslé összetevőtartalma milyen különbségeket mutatCistanche deserticolakét gazdán nőtt fel. Ezenkívül a maradékot enziminaktiváló kezelésnek vetettük alá 80 fokon 5 percig, majd szárítottuk, hogy tovább hasonlítsuk az aktív komponensek retencióját.Cistanche deserticola. Az eredmények célja, hogy tudományos bizonyítékokat és technikai támogatást nyújtsanak a friss kettős célú értékéhezCistanche deserticolaés feldolgozási technikáinak optimalizálása.
1 Eszközök és anyagok
1.1 Műszerek
1290-6460 ultra-teljesítményű folyadékkromatográfiás-hármas kvadrupól tandem tömegspektrométer (Agilent Technologies, USA).
AL104 elektronikus analitikai mérleg (Mettler-Toledo, Svájc).
H-2050R centrifuga (Changsha Xiangyi Centrifuge Instrument Co., Ltd.).
SB25-12DTD ultrahangos tisztító (Ningbo Xinzhi Biological Technology Co., Ltd.).
1.2 Anyagok
AAtriplex canescens-Cistanche deserticolaésHaloxylon ammodendron-Cistanche deserticolamintákat gyűjtöttek 2024 márciusában, áprilisában és májusábanCistanche deserticolatermesztési bázis Xiquan városában, Jingtai megyében, Gansu tartományban. A mintákat Sun Xuegang professzor, a Gansu Mezőgazdasági Egyetemről azonosította a minták húsos száraiként.Cistanche deserticola YC Mapikkelylevelekkel.
Referencia szabványok:
Echinakozid (tételszám: 23031605; tisztaság: 99,74%).
Akteozid (gyártási szám: 21102103; tisztaság: 98,83%).
Cisztanozid A (tételszám: 23041703; tisztaság: 98,30%).
Izoakteozid (tételszám: 23052508; tisztaság: 99,90%).
2'-acetil-lakteozid (gyártási szám: 210053102; tisztaság: 97,12%).
Salidrosid (tételszám: 22051208; tisztaság: 98,43%).
Cisztanozid B (tételszám: 20120903; tisztaság: 98,57%).
Tubulozid A (tételszám: 21060302; tisztaság: 93,24%).
Mindegyiket a Chengdu Pfeide Biotechnology Co., Ltd.-től vásárolták.
Reagensek:
Metanol (gyártási szám: O1140576, kromatográfiailag tiszta).
Acetonitril (gyártási szám: S3641440, kromatográfiailag tiszta). Mindkettőt a Shanghai Anpu Experimental Technology Co., Ltd.-től vásárolták.
A hangyasavat (gyártási szám: 20230710, kromatográfiailag tiszta) a Tianjin Kermio Chemical Reagent Co., Ltd.-től vásároltuk.
Tisztított víz (Hangzhou Wahaha Group Co., Ltd.).
2 Módszerek és eredmények
2.1 Módszerek
2.1.1 Minta-előkészítés
Három tételAtriplex canescens-Cistanche deserticola(tételszámok: 20240330-1, 20240420-1, 20240510-1) és három tételHaloxylon ammodendron-Cistanche deserticola(tételszámok: 20240330-2, 20240420-2, 20240510-2), összesen hat tételt, tételenként öt növényt gyűjtöttek. A növényeket vízzel lemostuk.
Feldolgozás:
A mintákat összezúzták és levét préseltek, ami a két gazdaszervezetből származó levet és maradékot eredményezett.Cistanche deserticola.
A maradékokat két körülmény között szárítottuk:
Enzim inaktiválás nélkül.
Enzim inaktiválással (5 perc 80 fokon sütőben).
A szárított maradékokat további elemzés céljából tároltuk. A gyógyászati anyagok mindegyik tételét négy csoportra osztották, az 1. táblázat szerint.
Tab. 1 Minta csoportosítási információ
| Csoport | Írja be | Atriplex canescens-Cistanche deserticola | Haloxylon ammodendron-Cistanche deserticola |
|---|---|---|---|
| ① | Maradék | C1 | S1 |
| ② | Lé | C2 | S2 |
| ③ | Enzimmel inaktivált maradék (5 perc szárítás, zúzott) | C3 | S3 |
| ④ | Enzimmel nem inaktivált maradék (szárított és zúzott) | C4 | S4 |
2.1.2 Kromatográfiai körülmények
Oszlop: Agilent Zorbax Eclipse Plus C18 oszlop (2,1 mm × 150 mm, 1,8 μm).
Áramlási sebesség0,3 ml/perc.
Injekciós térfogat: 1 μL.
Oszlop hőmérséklet: 35 fok.
Mobil fázis0,1% hangyasav vízben (A) és acetonitrilben (B).
Elemzési idő: 12 perc.
Elúciós gradiens:
0–1,5 perc: 10% → 20% B.
1,5–3 perc: 20% → 30% B.
3–5 perc: 30% → 32% B.
5–8 perc: 32% → 38% B.
8–9,6 perc: 38% → 10% B.
9,6–12 perc: 10% B.
A vegyes referenciastandardok és vizsgálati minták kromatogramja az 1. ábrán látható.(Kérjük, ellenőrizze, hogy a mozgófázis 0,01% hangyasav vízben (A) és acetonitrilben (B) van-e.)
ábra. 1 A referenciaanyagok (A) és a (B) minta kromatogramja 1-szalidrozid; 2-echinakozid; 3-cisztanozidA; 4-tubulozidA; 5-akteozid; 6-izoakteozid; 7-2'-acetil-lakteozid; 8-tubulozid B.
2.1.3 Tömegspektrometriai feltételek
Ionforrás típusa: Elektrospray ionization (ESI).
Mód: Többszörös reakciófigyelés (MRM) negatív ion üzemmódban.
Az ionforrás hőmérséklete: 350 fok.
Porlasztó nyomás: 35 psi.
Ütközésgáz: Nitrogén, közepes szintre állítva.
Az elemzendő komponensek tömegspektrometriás paramétereit a 2. táblázat tartalmazza.
2.1.4 Vegyes standard oldat elkészítése
Pontosan mérje le a referenciastandardok megfelelő mennyiségétechinakozid, akteozid, cisztanozid A, izoakteozid, 2'-acetil-lakteozid, szalidrozid, cisztanozid B, éstubulozid A, és helyezze őket 10 ml-es borostyánsárga reagensüvegekbe. Adjunk hozzá 50%-os metanolt, hogy 0,2 mg·mL⁻¹ koncentrációjú vegyes standardoldatot készítsünk, és tároljuk későbbi felhasználásra.
2.1.5 Tesztoldatok elkészítése
Mérjünk le pontosan 0,2 g frissetAtriplex canescens-Cistanche deserticolamaradék (C1), frissHaloxylon ammodendron-Cistanche deserticolamaradékot (S1), szárítjukAtriplex canescens-Cistanche deserticolamaradékot (C3, C4), majd szárítjukHaloxylon ammodendron-Cistanche deserticolamaradékok (S3, S4). Helyezze a mintákat 10 ml-es borostyánszínű mérőlombikokba, adjon hozzá 50%-os metanolt, töltse fel térfogatra, és jegyezze fel a tömeget. Áztassuk 0,5 órán át, ultrahangos kezelést végezzünk 40 percig (250 W, 35 kHz), hűtsük le szobahőmérsékletre, és rögzítsük újra a masszát. Használjon 50%-os metanolt a súlyvesztés kompenzálására, jól keverje össze, centrifugálja meg, és hagyja leülepedni az oldatot. Szűrjük át a felülúszót egy 0,22 μm-es mikroporózus membránon, hogy megkapjuk a szűrletet.
FrissnekAtriplex canescens-Cistanche deserticolagyümölcslé (C2) és frissenHaloxylon ammodendron-Cistanche deserticolalé (S2), vegyen mindegyikből 10 ml-t, mérje le pontosan, keverje jól össze, centrifugálja meg, és hagyja leülepedni. Szűrjük át a felülúszót egy 0,22 μm-es mikroporózus membránon, hogy megkapjuk a szűrletet.
2.1.6 Linearitási vizsgálat
A 2.1.4. szakaszban elkészített kevert standard oldat megfelelő mennyiségét hígítottuk, hogy koncentrációgradiens jöjjön létre.51,2, 128,0, 320,0, 800,0, 4000,0 és 20 000,0 ug·L⁻¹. A mintákat a 2.1.2. és a 2.1.3. szakaszban leírt feltételek szerint egymás után injektálták az alacsony koncentrációtól a magasig. Lineáris regressziót hajtottunk végre, az injekciós koncentrációt X-tengelyként és a csúcsterületet Y-tengelyként használva. A nyolc komponens lineáris összefüggéseit a 3. táblázat mutatja.
Tab. 3 8 komponens lineáris kapcsolatvizsgálatának eredménye a Cistanches Herba táblázatban
| Összetevő | Regressziós egyenlet | r | Lineáris tartomány (ug·L⁻¹) |
|---|---|---|---|
| Echinakozid | Y = 16.410 × X − 0.804 | 0.9996 | 51.2–20,000.0 |
| Acteozid | Y = 102.794 × X − 55.793 | 0.9998 | 51.2–20,000.0 |
| Izoakteozid | Y = 31.007 × X − 45.169 | 0.9999 | 51.2–20,000.0 |
| 2'-acetil-lakteozid | Y = 110.235 × X − 8.953 | 0.9992 | 51.2–20,000.0 |
| Salidroside | Y = 19.678 × X − 0.557 | 0.9993 | 51.2–20,000.0 |
| Tubulozid A | Y = 26.785 × X − 13.630 | 0.9997 | 51.2–20,000.0 |
| Tubulozid B | Y = 71.810 × X − 0.993 | 0.9998 | 51.2–20,000.0 |
| Cisztanozid A | Y = 0.578 × X + 1.531 | 0.9994 | 51.2–20,000.0 |
2.1.7 Precíziós teszt
A 2.1.4. szakaszban leírt körülmények között elkészített kevert standardoldatot 50%-os metanollal hígítottuk, és hatszor egymás után injektáltuk a 2.1.2. és 2.1.3. szakasz feltételei szerint. A csúcsterületek relatív szórása (RSD)echinakozid, akteozid, izoakteozid, 2'-acetil-lakteozid, szalidrozid, cisztanozid B, tubulozid A, éscisztanozid A0,95%, 1,47%, 0,56%, 1,05%, 0,93%, 1,08%, 1,19% és 0,91% volt, ami jó pontosságot jelez.
2.1.8 Stabilitási teszt
Egyetlen mintaCistanche deserticola(S4) a 2.1.5. szakaszban leírt körülmények között készült. A vizsgálati oldatot 0, 2, 4, 8, 12 és 24 óra elteltével fecskendezzük be, és elemezzük a 2.1.2. és 2.1.3. szakaszban leírt körülmények között. A csúcsterületek RSD-i aechinakozid, akteozid, izoakteozid, 2'-acetil-lakteozid, szalidrozid, cisztanozid B, tubulozid A, éscisztanozid A1,46%, 0,79%, 0,95%, 1,29%, 1,22%, 0,56%, 0,49% és 1,18%, ami azt jelzi, hogy a mintaoldat 24 órán belül stabil volt.
2.1.9 Ismételhetőségi teszt
Egy adagCistanche deserticolaAz (S4) mintát (tételszám: 20240420-2) hat párhuzamos vizsgálati oldatban állítottuk elő a 2.1.5. szakaszban leírt körülmények között. A mintákat a 2.1.2. és 2.1.3. szakaszban leírt körülmények között injektáltuk és elemeztük. A tartalom RSD-jeiechinakozid, akteozid, izoakteozid, 2'-acetil-lakteozid, szalidrozid, cisztanozid B, tubulozid A, éscisztanozid Arendre 1,26%, 0,98%, 1,55%, 1,06%, 1,33%, 0,99%, 1,65%, illetve 0,95%, ami jó ismételhetőséget mutatott.
2.1.10 Helyreállítási teszt
Kilenc minta ugyanabból a tételbőlCistanche deserticola(S4, tételszám: 20240420-2) készültek, mintánként 0,1 g mennyiségben. A mintákat három csoportra osztottuk, csoportonként három ismétléssel. Mindegyik csoportot a referencia standard tartalom 80%-ával, 100%-ával és 120%-ával növelték.Cistanche deserticolaminta. A vizsgálati oldatokat a 2.1.5. szakaszban leírt módszer szerint készítették el, és a 2.1.2. és 2.1.3. szakaszban leírt feltételek szerint elemezték. A nyolc fenil-etanol-glikozid visszanyerését kiszámítottuk, és az eredményeket a 4. táblázat mutatja.
Tab. 4 A Cistanches Herba 8 tesztelt komponensének helyreállítási arányát mutatja be
| Összetevő | Mintatartalom (mg) | Tüskés (mg) | Mért (mg) | Átlagos megtérülés (%) | RSD (%) |
|---|---|---|---|---|---|
| Echinakozid | 0.513 8 | 0.410 1 | 0.911 2 | 99.85 | 1.37 |
| Echinakozid | 0.513 8 | 0.513 8 | 1.015 2 | 99.88 | 0.95 |
| Echinakozid | 0.513 8 | 0.616 5 | 1.129 4 | 99.85 | 1.06 |
| Acteozid | 0.421 5 | 0.337 2 | 0.759 6 | 99.90 | 1.02 |
| Acteozid | 0.421 5 | 0.421 5 | 0.843 5 | 99.87 | 1.18 |
| Acteozid | 0.421 5 | 0.505 8 | 0.926 7 | 99.84 | 1.24 |
| Izoakteozid | 0.327 1 | 0.261 7 | 0.588 6 | 99.85 | 0.86 |
| Izoakteozid | 0.327 1 | 0.327 1 | 0.654 2 | 99.86 | 1.05 |
| Izoakteozid | 0.327 1 | 0.392 5 | 0.719 1 | 99.84 | 1.13 |
| 2'-acetil-lakteozid | 0.110 2 | 0.088 2 | 0.198 3 | 99.87 | 1.15 |
| 2'-acetil-lakteozid | 0.110 2 | 0.110 2 | 0.220 1 | 99.86 | 1.09 |
| 2'-acetil-lakteozid | 0.110 2 | 0.132 2 | 0.242 4 | 99.85 | 1.21 |
| Salidroside | 0.081 6 | 0.065 3 | 0.146 7 | 99.84 | 1.18 |
| Salidroside | 0.081 6 | 0.081 6 | 0.163 1 | 99.85 | 1.02 |
| Salidroside | 0.081 6 | 0.097 9 | 0.179 7 | 99.84 | 1.17 |
| Tubulozid B | 0.072 3 | 0.057 9 | 0.130 0 | 99.86 | 1.09 |
| Tubulozid B | 0.072 3 | 0.072 3 | 0.144 1 | 99.86 | 1.05 |
| Tubulozid B | 0.072 3 | 0.086 8 | 0.159 2 | 99.84 | 1.24 |
| Tubulozid A | 0.043 8 | 0.035 0 | 0.078 5 | 99.86 | 1.16 |
| Tubulozid A | 0.043 8 | 0.043 8 | 0.087 5 | 99.86 | 1.02 |
| Tubulozid A | 0.043 8 | 0.052 5 | 0.096 2 | 99.84 | 1.15 |
