A Cistanche glikozidjainak hatása a mitokondriális prekurzor fehérje és a keratin II-es típusú citoszkeletális 6A expressziójára vaszkuláris demencia patkánymodelljében

További információért forduljon:Joanna.jia@wecistanche.com

Absztrakt

Bevezetés

Érelmebaja demencia második leggyakoribb típusa (Neltner és mtsai, 2014; Sachdev és mtsai, 2014; Tatlisumak és mtsai, 2014; Sinclair et al., 2015; Thomas és mtsai, 2015; Reijmer és mtsai, 2016 ). A vaszkuláris demenciában szenvedő betegeknél fellépő lankadatlan és visszafordíthatatlan memóriakárosodás az életminőség súlyos romlásához vezet, és súlyos gazdasági terhet ró a beteg családjára (Barker és mtsai, 2014; Burke et al., 2014; Chen et al. al., 2014; Brandenburg et al., 2016). A betegség megelőzése és kezelése egyre fontosabb az öregedő népességgel rendelkező országokban. Ezért egyre nagyobb a kutatási érdeklődés a vaszkuláris demencia kezelésére szolgáló hatékony gyógyszerek keresése iránt.

Cistanchea hagyományos kínai orvostudományban nootrópként használt növény (Chen et al., 2014; Szalárdy et al., 2015; You et al., 2015). A glikozidokCistanche(GC) olyan készítmény, amelyből kivonjákCistanche. Számos bizonyíték támasztja alá azt az elképzelést, hogy a GC javíthatja az axonok regenerálódását (Procaccio et al., 2014; Love et al., 2015; Brandenburg és mtsai, 2016; Gu és mtsai, 2016). Számos állatkísérlet kimutatta, hogy a GC javítja a kognitív funkciókat (Procaccio és mtsai, 2014; Talarowska és mtsai, 2014; Fischer és Maier, 2015).

Korábban kétoldali közös nyaki artéria elzáródást alkalmaztunk patkánymodellek létrehozásáraér-elmebaj. Ebben a modellben a térbeli tanulás és a memória jelentősen javul a GC-vel végzett beavatkozás után (Chen et al., 2015). A GC szabályozhatja és javíthatja isimmunitásde leginkább idegerősítőként és memóriajavítóként ismert (Chen és mtsai, 2014; Procaccio et al., 2014; Szalárdy et al., 2015; You et al., 2015; Brandenburg et al., 2016).

Azonban kevés tanulmány vizsgálta a GC hatásának hátterében álló molekuláris mechanizmusokatér-elmebaj. Itt proteomika segítségével vizsgáljuk a fehérjék és a vaszkuláris demencia közötti kapcsolatot, hogy meghatározzuk a GC neuroprotektív hatásának hátterében álló mechanizmust.

CistancheA deserticolának számos hatása van, kattintson ide, ha többet szeretne megtudni

Anyagok és metódusok

Állatok

A hathetes, felnőtt hím, specifikus kórokozótól mentes Wistar patkányokat (n=37), 230–270 g tömegű, a Hubei tartomány, Kína Kísérleti Állatközpontja biztosította (engedélyszám: SYXK (E) { {7}}). A kísérlet a laboratóriumi állatok gondozására és használatára vonatkozó nemzeti irányelveket, valamint a Nemzetközi Állatorvosi Szerkesztők Szövetsége által kiadott Állategészségügyi Szerkesztők Nemzetközi Szövetsége által kiadott, a Consensus Author Guidelines on Animal Ethics and Welfare című dokumentumot követte. A kézirat az Animal Research: Reporting of In Vivo Experiments (ARRIVE) irányelveinek megfelelően készült.

A patkányokat ketrecenként három fős csoportokban tartottuk 25 fokos hőmérsékleten, 12 -órás fény/sötét ciklussal, valamint szabad hozzáféréssel az élelemhez és a vízhez. A patkányokat (n=37) véletlenszerűen besoroltuk egy kontrollcsoportba (n=10), egy vaszkuláris demenciás csoportba (n=12), valamint egy vaszkuláris demenciával és GC-vel kezelt csoportba (GC-vel kezelt, n=15).

A vaszkuláris demencia patkánymodelljeinek felállítása

10 százalékos klorálhidráttal végzett mély érzéstelenítésben a vaszkuláris demenciában szenvedő és a GC-vel kezelt csoportokban lévő patkányok kétoldali közös nyaki artériáit gondosan elválasztottuk a környező szövetektől, majd szorosan lekötöttük mindkét végén 10-0 varrócérnával és a közös nyaki verőérrel. az artériákat elvágták. A kontrollcsoport patkányait ugyanilyen sebészeti eljárásnak vetettük alá, kivéve, hogy a közös nyaki artériákat szabaddá tettük, de nem kötöttük le. A Morris-vízlabirintus a korábban leírt módszerek szerint történt annak ellenőrzésére, hogy az állatmodellt sikerült-e létrehozni (Chen et al., 2015).

Gyógyszeres kezelés

Cistanche por(Tanúsítvány száma: Z20050216, Sinphar Tian-Li Pharmaceutical Co., Ltd., Hangzhou, Kína) ultratiszta vízzel kevertük össze, és TF-2000C Ultrasonicator (Tuofen, Shanghai, Kína) segítségével extraháltuk (teljesítmény 100 százalék, 30 fok, 40 perc). A GC-koncentrációt fenil-etanol-glikozidok meghatározásával mértük. A sérülés után a GC-vel kezelt csoportban minden patkány kapott GC-t (10 mg/kg/nap, 1 ml, intraperitoneálisan, naponta egyszer) 14 egymást követő napon. A kontroll és a vaszkuláris demencia csoportba tartozó patkányok sóoldatot kaptak (1 ml, intraperitoneálisan).

Immunhisztokémia

14 napos GC (vagy sóoldat) beadás után minden csoportból hét patkányt lefejeztünk, és az agyat extraháltuk. Az agykéregeket eltávolítottuk, a hippocampális szövetet óvatosan kivágtuk, és fagyasztó mikrotom segítségével 3-μm vastagságú metszetekre vágtuk. A hippocampális szövet metszeteit 4 százalékos paraformaldehiddel fixáltuk 30-60 percig, mostuk PBS-sel, és 3 százalékos H2O2-ban inkubáltuk 10 percig, majd kecskeszérummal 15 percig, mindezt szobahőmérsékleten.

A metszeteket ezután nyúl anti-patkány foszforilált p-tau primer antitestben inkubáltuk

(1:1, 000 PBS-ben; Bioworld Technology, Inc., TX, USA) és nyúl anti-patkány amiloid-béta (A ) elsődleges antitest (1:1,000); Bioworld Technology, Inc.) nedves dobozban 37 fokon 2-3 órán át, majd a másodlagos antitestben (kecske anti-egér IgG; Bioworld Technology, Inc.) 15 percig szobahőmérsékleten inkubáljuk. A mintákat 3,3′-diaminobenzidin-tetrahidrokloriddal (Dako, Tokió, Japán) tettük láthatóvá. A képeket fénymikroszkóppal (Olympus, Tokió, Japán) rögzítettük, és Photoshoppal (7-es verzió.{17}}; Adobe, San Jose, CA, USA) dolgoztuk fel.

Az immunpozitív részecskék barnák voltak, ezért pozitív reakcióként a citoplazmában barna festődést választottuk, és a félkvantifikálást HMIAS-2000 képelemző rendszerrel (Qianpin Co., Wuhan, Kína) végeztük. Minden mintában véletlenszerűen öt látómezőt választottunk ki, és mindegyik nézetben öt pozitív sejtet választottunk ki, és az átlagos szürkeértéket relatív értékek halmazaként mértük.

Cistanchefokozhatjaimmunitásés megakadályozzákszív- és érrendszeriéscerebrovaszkulárisbetegségek

Kétdimenziós gélelektroforézis (2-DE)

14 napos GC vagy sóoldat beadása után minden csoportból nyolc patkányt elaltattunk és lefejeztünk, majd a hippocampális szöveteket gyorsan összegyűjtöttük és azonnal folyékony nitrogénben lefagyasztottuk. Minden szövetet folyékony nitrogénben homogenizáltunk mozsártörővel, és lízispufferben (7 M karbamid, 2 M tiokarbamid, 2% CHAPS, 20 mM Tris) gyűjtöttük össze. Az oldhatatlan részecskéket centrifugálással távolítottuk el 13,000 × g-vel 20 percig 4 fokon. A szennyezett nukleinsavat 5 percig szaggatott hangoszcilláció zavarta meg. A mintákat azonos körülmények között ismét centrifugáltuk, és a felülúszókat összegyűjtöttük. A fehérjekoncentrációt Bradford assay-vel (Beyotime Inc., Kína) mértük, és a mintákat felhasználásig -80 fokon tároltuk.

A fehérje expressziós profiljának vizsgálata a hippocampusban a 2-DE-t a gyártó utasításai szerint végeztük (GE Healthcare, Pittsburgh, PA, USA). A fehérjeoldatot (120 ug/minta) rehidratációs pufferrel 350 µl végtérfogatra állítjuk be. Az izoelektromos fókuszálást IPG csíkokkal (pH 4–7, 22 cm méretű) végeztük Ettan IPG vagy II rendszeren (mind a GE Ettan IPGphor3, GE Healthcare cégtől). Ezt követően a csíkokat 15 percig egyensúlyba hoztuk.

A {{0}}A DE-t 12,5%-os nátrium-dodecil-szulfát (SDS) poliakrilamid gélekkel (24 cm × 19,5 cm × 1,{8}} mm) 0,5% agaróz tömítőragasztóval végeztük Ettan DALTSix elektroforézisben. rendszer (GE, Ettan DALTSix, GE Healthcare).

Az elektroforézist 2 W-on 45 percig végeztük, majd 17 W-on 4 órán át elválasztottuk, amíg a bróm-fenolkék majdnem elérte a 2-DE gél alját.

A géleket ezüst-nitráttal festették meg (Damao Chemical Reagent Factory, Tianjin, Kína), és a képeket 2-DE képszkennelő rendszerrel (VT, USA) rögzítették.

Az Image Master 2D Platinum 5.{2}} szoftvert (GE, Inc., PA, USA) használtuk a 2-DE kép beolvasására és elemzésére.

Az információt egy 4700 MALDI TOF/TOF tömegspektrométer (GE, Inc.) segítségével nyertük.

Mátrix-asszisztált lézeres deszorpciós/ionizációs repülési idő tömegspektrometria

A peptidtömeg ujjlenyomat-vételéhez és az azt követő elemzéshez a géleket felszeleteltük, és a gyártó utasításaiban leírtak szerint kissé módosított in-gél protokollnak vetettük alá. Volt benne metanol (Fisher M/4056/17), acetonitril (Fisher A/0626/17), tripszin (Promega V5280), tripszin rezolváló oldat (Promega V530), ammónium-hidrogén-karbonát (Sigma A6141), C-18 ZipTip (Millipore ZTC18M096) és trifluor-ecetsav (GE HealthCare).

Röviden, a fehérjefoltokat színtelenítő oldattal (30 mM K3Fe(CN)6:100 mM NaS2O3=1:1) eltávolítottuk, majd 100 mm ammónium-hidrogén-karbonáttal és acetonitrillel dehidratáltuk, majd szobahőmérsékleten 20 percig triklór-metil-foszfáttal redukáltuk. majd jódecetsavban alkilezzük 30 percig sötétben. A gélt 50 μl 12 ng/μl módosított tripszin oldatban 25 mM ammónium-hidrogén-karbonátban (pH 8,6) inkubáltuk 37 fokon egy éjszakán át. A peptideket 1% hangyasav/2% acetonitril eleggyel extraháltuk a géldugóból, és C-18 Zip-Tips segítségével betöményítettük. Ezt követően a mintákat egy Prespotted AnchorChip (PAC96) célpont segítségével készítettük elő alfa-ciano-4-hidroxifahéjsav mátrixszal 96 mintafolthoz és 24 kalibrációs folthoz. A tömegspektrum peptidinformációkat 4700 MALDI TOF/TOF tömegspektrométerrel nyertük. Az eredményül kapott adatokat GPS Explorer (Applied Biosystems Inc., NY, USA) segítségével elemeztük, amely MASCOT adatbázis-keresést (Matrix Science, London, Egyesült Királyság) indított a National Center for Biotechnology Information adatbázis egér-alkészletének felhasználásával.

Cistancheantibakteriális és megelőzhető lehetér-elmebaj

Western blot vizsgálat

A hippokampuszt előkészítettük, és a fehérjekoncentrációt a fent leírtak szerint mértük. A fehérjemintákat SDS poliakrilamid gélre töltöttük, elektroforetizáltuk, és polivinilidén-difluorid membránra vittük át. A membránt Tris-pufferes sóoldatban és Tween 20-ben mostuk, 10 százalékos zsírmentes tejben és 0,05 százalékos Tweenben foszfáttal pufferolt sóoldatban blokkoltuk. A membránokat egy éjszakán át 4 fokon nyúl anti-mitokondriális prekurzor fehérje poliklonális antitesttel (1:2,000; Proteintech Inc., Chicago, IL, USA) és nyúl anti-keratin II típusú citoszkeletális 6A-val (KRT6A) inkubáltuk. poliklonális antitest (1:1,000; Proteintech Inc.) 10 százalékos zsírmentes tejben. A másodlagos antitestet, a torma-peroxidázzal konjugált kecske antinyúl (Google Biotechnology Inc., Wuhan, Hubei tartomány, Kína) 10 százalékos zsírmentes tejben hígítottuk (1:2,{24}}) és 25 fokon inkubáltuk. 1 órán keresztül. Belső referenciaként egér anti-patkány-aktin monoklonális antitestet (1:2, 000; Google Biotechnology Inc.) használtunk. Western blot szkennelő rendszert (V300; EPSON, Nagano-ken, Japán) és AlphaEaseFC Adobe PhotoShop-ot (Alpha Innotech, CA, USA) használtunk a mitokondriális prekurzor fehérje és a KRT6A expressziós szintjének meghatározására, integrált optikai sűrűségben kifejezve -aktinra normalizálva.

Statisztikai analízis

A kvantitatív adatokat átlag ± SD-ben fejeztük ki. Az ImageMaster 2D Platinum 5.{2}} szoftvert (GE, Inc.) használtuk a 2-DE információk beolvasására és elemzésére. A kétirányú varianciaanalízist GraphPad Prism 6 segítségével végeztük.0 (GraphPad Software, Inc., La Jolla, CA, USA). P < 0,05="" statisztikailag="" szignifikánsnak="">

Eredmények

A GC hatása a p-tau és A immunreaktivitásra vaszkuláris demencia patkánymodelljei hippocampusában

Az immunhisztokémia azt mutatta, hogy a p-tau és az A expresszió nagyobb volt 14 napos GC-kezelés után, mint a kontrollcsoportban. Azonban ezeknek a fehérjéknek az expressziója a GC-vel kezelt csoportban szignifikánsan alacsonyabb volt, mint a vaszkuláris demenciás csoportban (P < 0,05;="" 1.="">

A mitokondriális prekurzor fehérje és a KRT6A GC által szabályozott expressziója a vaszkuláris demencia patkánymodelljeinek hippocampusában

A két fehérje expressziója szignifikánsan különbözött a GC-vel kezelt csoportban, mint a vaszkuláris demenciás csoportban: a mitokondriális prekurzor fehérje (más néven hősokk-fehérje (HSP) 75 kDa) felfelé, a KRT6A pedig alulszabályozott volt (22., 33. ábra). ). A fehérjeinformációkat az 1. táblázat tartalmazza.

Vita

A vaszkuláris demencia egy olyan szindróma, amelyet a memória, a viselkedés és a megismerés károsodása jellemez, és amelyet főként cerebrovaszkuláris betegségek okoznak (Barker és mtsai, 2014; Burke és mtsai, 2014; Oliveira és mtsai, 2014; Szalárdy et al., 2015). A demencia minden típusára jellemző, és annak progressziójáért felelős patológia a neurodegeneráció (Foster és mtsai, 2014; Fischer és Maier, 2015; Kalaria et al., 2015;

Cistanchefokozhatja az immunitást ésmegakadályozniér-elmebaj

Chen et al., 2016; Pérez -Hernández et al., 2016). Számos növényi kivonat terápiás tulajdonságokkal rendelkezik. Ezen vegyületek neurodegeneráció elleni bioaktivitása elsősorban antioxidáns és anti-amiloidogén hatásuknak köszönhető (Fischer és Maier, 2015; You et al., 2015; Pérez -Hernández és mtsai, 2016).

Cistancheegy kínai gyógynövény, amelyet a hagyományos kínai gyógyászatban nootrópként használnak. A feltörekvő kutatások azt mutatjákCistanchejótékony hatású amnéziában, különösen a memóriavesztés progressziójának gátlásában (Procaccio és mtsai, 2014; You et al., 2015; Pérez -Hernández és mtsai, 2016). Jelentős bizonyíték van arra, hogy a GC elősegítheti az axonális regenerációt és idegnövekedés-modulátorként működhet (Talarowska és mtsai, 2014; Gu et al., 2016; Xu és mtsai, 2016). Korábbi, Morris vízi labirintussal végzett munkánk során azt találtuk, hogy a vaszkuláris demencia patkánymodelljeinek menekülési késleltetése csökkent a GC-kezelés után, jelezve, hogy a GC javítja a térbeli tanulási képességet. Bár a GC-t széles körben használták neuroprotektív hatása miatt (Chen et al., 2015), a hatás mögött meghúzódó mechanizmus továbbra is tisztázatlan.

Jól ismert, hogy az A-peptidek és a p-tau erősen expresszálódnak az öregkori plakkokban és a neurofibrilláris gubancokban. Az A és tau fehérjék kulcsszerepet játszanak a neuronok morfogenezisében, de bizonyos kóros helyzetekben rendellenes aggregátumokat hoznak létre, amelyek neurotoxikusak (Love et al., 2015; Sadigh-Eteghad et al., 2015; Sinclair et al., 2015; Thomas és mtsai, 2015; Wang és mtsai, 2015; Reijmer és mtsai, 2016). A jelen immunhisztokémiai eredmények azt mutatják, hogy a p-tau és A fehérje expressziója a vaszkuláris demencia GC-vel kezelt patkánymodelljében szignifikánsan nagyobb volt, mint a kontroll patkányokban, de alacsonyabb, mint a kezeletlen modellpatkányokban. Ezért a GC neuroprotektív hatása az A és a p-tau toxicitásának csökkentésével jelentkezhet.

A patkány hippokampuszban végzett proteomikai vizsgálatunk nagy különbségeket mutatott ki a mitokondriális prekurzor fehérje, a keratin és a KRT6A expressziójában. A funkció szempontjából feltételezzük, hogy a GC neuroprotektív hatása összefüggésbe hozható a dendrites gerinc szerkezetének átalakulásával.

A mitokondriális prekurzor fehérje a HSP70 családba tartozik (Rao et al., 2014; Gutiérrez -Aguilar és Baines, 2015; McGeer és McGeer, 2015). A HSP75 részt vesz a molekuláris chaperon aktiválásában és érésében, és fenntartja a sejtek stabilitását és normál működését (Booth és mtsai, 2014, 2016; Tavallai és mtsai, 2015).

Úgy gondolják, hogy a mitokondriális prekurzor fehérje fontos szerepet játszik bizonyos jelátviteli útvonalak transzdukciójában (Reid et al., 2014; Booth és mtsai, 2015a, b). A legújabb tanulmányok feltárták, hogy a HSP90 család szabályozza a mitokondriális fehérje feltekeredésének működési környezetét (An et al., 2014; Liu és Landgraf, 2015; Roberts és mtsai, 2015; Stary és Giffard, 2015). A HSP75 a mitokondriumokban lokalizálódik, és gátolja az oxigén szabad gyökök képződését (Radu et al., 2014; Holloway és mtsai, 2016). Eredményeink azt mutatják, hogy a HSP75 expressziója a GC-vel kezelt csoportban 2{13}}szeresére nőtt, ami arra utal, hogy a GC antioxidáns szerepet játszik, javítja a sejt oxidatív egyensúlyát és késlelteti az apoptózist. Ez a felfedezés érdekes támpontokat ad a mitokondriális chaperon fehérje és más fehérjék kölcsönhatásairól.

Egy másik eltérően expresszált fehérje a KRT6A volt. A keratinok, más néven citokeratinok, köztes filamentum fehérjék, amelyek oldhatatlan, sűrű hálót hoznak létre a citoplazmán keresztül, strukturális támaszt adva a hámsejteknek (Haricharan és mtsai, 2014; Rorke és mtsai, 2015; Szymanski és mtsai, 2015). . A citokeratinek azonban aktív szerepet játszanak különböző sejttúlélési folyamatokban (proliferáció és apoptózis) is (Zhu és mtsai, 2013; Schwingshackl et al., 2015; Popov és Komianos, 2016). Ezek a fehérjék foszforiláción mennek keresztül, és részei a hámsejt és mikrokörnyezete közötti áthidaló kapcsolatnak (Lessard et al., 2013; Gil Lorenzo és mtsai, 2014; Zhou és mtsai, 2014; Chakrabarti és mtsai, 2015). . A CK6a a domináns izoforma az emlőmirigyben (Bramanti et al., 2015a, b, 2016), és a bőr gyógyuló sebszéleiben fokozottan szabályozott, jelezve, hogy a citokeratin részt vesz a sejtproliferációban és -vándorlásban. Azonban mi vagyunk az elsők, akik a KRT6A leszabályozását mutatják a hippocampusban; A KRT6A expresszió 1.{17}}szeresére csökkent a GC-vel kezelt csoportban a vaszkuláris demenciás csoporthoz képest.

Ezért a GC neuroprotektív hatása összefüggésbe hozható a neuroglia hiperplázia gátlásával az agyi ér ischaemia során.

Vizsgálatunk eredményei együttesen azt sugallják, hogy a GC tanulást és emlékezetet elősegítő hatását érrendszeri demencia patkánymodelljeiben az A és p-tau expressziójának csökkentésével fejti ki, ezáltal gyengíti e két toxikus fehérje felhalmozódását, és ezáltal csökkenti a neuronális toxicitás. Ezenkívül a GC szabályozhatja a mitokondriális prekurzor fehérje és a KRT6A expresszióját, amelyek a szinaptikus citoszkeleton morfogeneziséhez és a mitokondriális energia metabolizmushoz kapcsolódnak. Ezért adataink új betekintést nyújtanak a GC-k mögöttes mechanizmusaiba, rávilágítva annak lehetőségére, hogy a GC-k több célponttal is rendelkezzenek, ami ígéretes új terápiás lehetőséget kínál a vaszkuláris demencia kezelésére.

Lábjegyzetek

Finanszírozás:Ezt a tanulmányt a Kínai Nemzeti Természettudományi Alapítvány támogatta, 30960520. sz. a Kínai Belső-Mongólia Autonóm Régió Természettudományi Alapítványa, 2016MS0837.

Összeférhetetlenség: nincs bejelentett.

Kutatási etika:A vizsgálati protokollt a vuhani első kórház állatetikai bizottsága hagyta jóvá. A kísérleti eljárás a National Institutes of Health Guide for the Care and Use of Laboratory Animals (NIH Publications No. 8023, felülvizsgált 1978) és a "Consensus Author Guidelines on Animal Ethics and Welfare" (Állatorvosi Szerkesztők Nemzetközi Szövetsége (IAVE)) által kiadott „Consensus Author Guidelines on Animal Ethics and Welfare”. ). Minden erőfeszítést megtettek a kísérletekben használt állatok számának és szenvedésének minimalizálása érdekében. A tanulmány az „Állatokkutatás: In vivo kísérletek jelentése” (ARRIVE Guidelines) című dokumentumnak megfelelően készült.

Közreműködői megállapodás: A „Kiadói szerződés” nyilatkozatát egy felhatalmazott szerző minden szerző nevében aláírta a közzététel előtt.

Plágiumellenőrzés: Ezt a papírt kétszer ellenőriztük az iThenticate sokszorosítás-ellenőrző szoftverrel.

Szakértői értékelés:A dokumentum integritásának, minőségének és jelentőségének biztosítása érdekében kettős vak és szigorú szakértői értékelési eljárást hajtottak végre.

Másolta: Slone-Murphy J, Frenchman B, Yu J, Li CH, Qiu Y, Song LP, Zhao M

Hivatkozások

1. An J, Haile WB, Wu F, Torre E, Yepes M. Tissue-type plazminogén aktivátor közvetíti a neurogliális kapcsolást a központi idegrendszerben. Idegtudomány. 2014;257:41–48.

2. Barker R, Ashby EL, Wellington D, Barrow VM, Palmer JC, Kehoe PG, Esiri MM, Love S. A fehérállomány perfúzió patofiziológiája Alzheimer-kórban és vascularis dementiában. Agy. 2014;137:1524–1532.

3. Booth L, Roberts JL, Cruickshanks N, Grant S, Poklepovic A., Dent P. Az OSU-03012 toxicitás szabályozása ER stresszfehérjék és ER stresszt kiváltó gyógyszerek által. Mol Cancer Ther. 2014;13:2384–2398.

4. Booth L, Roberts JL, Tavallai M, Nourbakhsh A, Chuckalovcak J, Carter J, Poklepovic A, Dent P. OSU-03012 és a Viagra kezelés gátolja több chaperon fehérje aktivitását és megzavarja a vér-agy gátat : a rákellenes terápiákra vonatkozó következmények. J Cell Physiol. 2015a;230:1982–1998.

5. Booth L, Roberts JL, Cash DR, Tavallai S, Jean S, Fidanza A, Cruz-Luna T, Siembiba P, Cycon KA, Cornelissen CN, Dent P. A GRP78/BiP/HSPA5/Dna K univerzális terápiás célpont emberi betegségekre. J Cell Physiol. 2015b;230:1661–1676.

6. Booth L, Shuch B, Albers T, Roberts JL, Tavallai M, Proniuk S, Zukowski A, Wang D, Chen CS, Bottaro D, Ecroyd H, Lebedyeva IO, Dent P. A multi-kinase inhibitorok hősokkkal társulhatnak fehérjéket NH2-végükön keresztül, amellyel elnyomják a chaperon funkciót. Oncotarget. 2016;7:12975–12996.

7. Bramanti V, Grasso S, Tibullo D, Giallongo C, Raciti G, Viola M, Avola R. Az extracelluláris szignálhoz kapcsolódó kináz, ciklin D1, gliafibrilláris savas fehérje és vimentin expresszió modulálása ösztradiollal előkezelt asztrocita kultúrákban

a kompetencia és a fejlődés növekedési tényezői. J Neurosci Res. 2015a;93:1378–1387.

8. Bramanti V, Grasso S, Tomassoni D, Traini E, Raciti G, Viola M, Li Volti G, Campisi A, Amenta F, Avola R. A növekedési faktorok és a szteroid hormonok hatása a hem oxigenázra és a ciklin D1 expressziójára elsődleges asztrogliaban sejttenyészetek. J Neurosci Res. 2015b;93:521–529.

9. Bramanti V, Grasso S, Tibullo D, Giallongo C, Pappa R, Brundo MV, Tomassoni D, Viola M, Amenta F, Avola R. A neuroaktív molekulák és növekedési faktorok modulálják a citoszkeletális fehérje expresszióját az asztrogliasejtek proliferációja és differenciálódása során. J Neurosci Res. 2016;94:90–98.

10. Brandenburg S, Muller A, Turkowski K, Radev YT, Rot S, Schmidt C, Bungert AD, Acker G, Schorr A, Hippe A, Miller K, Heppner FL, Homey B, Vajkoczy P. Rezidens mikroglia, nem pedig perifériás makrofág elősegítik az agydaganatok vaszkularizációját, és alternatív pro-angiogén faktorok forrásai. Acta Neuropathol. 2016;131:365–378.

11. Burke MJ, Nelson L, Slade JY, Oakley AE, Khundakar AA, Kalaria RN. A hippocampalis mikrovaszkulatúra morfometriája stroke utáni és életkorral összefüggő demenciákban. Neuropathol Appl Neurobiol. 2014;40:284–295.

12. Chakrabarti KR, Whipple RA, Boggs AE, Hessler LK, Bhandary L, Vitolo MI, Thompson K, Martin SS. Az AMPK farmakológiai szabályozása emlőrákban befolyásolja a citoszkeletális tulajdonságokat, amelyek részt vesznek a mikrocsáp kialakulásában és újra

mellékletet. Oncotarget. 2015;6:36292–36307.

13. Chen A, Akinyemi RO, Hase Y, Firbank MJ, Ndung'u MN, Foster V, Craggs LJ, Washida K, Okamoto Y, Thomas AJ, Polvikoski TM, Allan LM, Oakley AE, O'Brien JT, Horsburgh K , Ihara M, Kalaria RN. Elülső fehérállomány hiperintenzitása, clasmatodendrosis és neovaszkuláris rendellenességek az öregedésben és a stroke utáni demenciában. Agy. 2016;139:242–258.

14. Chen J, Zhou SN, Zhang YM, Feng YL, Wang S. A Cistanche glikozidjai javítják a tanulást és a memóriát a vaszkuláris demencia patkánymodelljében. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 2015;19:1234–1240.

15. Chen S, Yin ZJ, Jiang C, Ma ZQ, Fu Q, Qu R, Ma SP. Az Asiaticosid gyulladáscsökkentő mechanizmuson keresztül gyengíti az átmeneti agyi ischaemia-reperfúzió által kiváltott memóriazavart egerekben. Pharmacol Biochem Behav. 2014; 122:7–

16. Fischer R, Maier O. Az oxidatív stressz és a gyulladás interrelációja neurodegeneratív betegségekben: a TNF szerepe. Oxid Med Cell Longev. 2015;2015:610813.

17. Foster V, Oakley AE, Slade JY, Hall R, Polvikoski TM, Burke M, Thomas AJ, Khundakar A, Allan LM, Kalaria RN. A prefrontális kéreg piramis neuronjai stroke utáni, vaszkuláris és egyéb öregedéssel összefüggő demenciákban. Agy. 2014; 137:2509–2521.

18. Gil Lorenzo AF, Bocanegra V, Benardon ME, Cacciamani V, Valles PG. A Nox4/p22phox és a citoszkeletális integritás Hsp70 szabályozása a lozartán hatásaként az érrendszeri simaizomsejtekben. Sejtstressz kísérők. 2014;19:115–134.

19. Gu C, Yang X, Huang L. Cistanches herba: a neurofarmakológiai áttekintés. Front Pharmacol. 2016;7:289.

20. Gutiérrez -Aguilar M, Baines CP. A mitokondriális permeabilitás átmeneti pórusának ciklofilin D-függő szabályozásának szerkezeti mechanizmusai. Biochim Biophys Acta. 2015;1850:2041–2047.

21. Haricharan S, Hein SM, Dong J, Toneff MJ, Aina OH, Rao PH, Cardiff RD, Li Y. Egy alveoláris eredetű sejt hozzájárulása a terhességgel összefüggő emlőrák magas fokú rosszindulatú fenotípusához. Onkogén. 2014;33:5729–5739. [

22. Holloway KR, Sinha VC, Bu W, Toneff M, Dong J, Peng Y, Li Y. Az onkogének megcélzása az emlősejtek meghatározott részhalmazába azt mutatja, hogy a kiinduló onkogén mutáció határozza meg a kialakuló tumor fenotípust. Int J Biol

Sci. 2016;12:381–388.

23. Kalaria RN, Ferrer I, Love S. Vascularis betegség, hipoxia és kapcsolódó állapotok. In: Love S, Perry A, Ironside J, Budka H, ​​szerkesztők. Greenfield neuropatológiája. London: CRC; 2015.

24. Lessard JC, Pina-Paz S, Rotty JD, Hickerson RP, Kaspar RL, Balmain A, Coulombe PA. A keratin 16 szabályozza a veleszületett immunitást válaszul az epidermális gát megsértésére. Proc Natl Acad Sci US A. 2013;110:19537–19542.

25. Liu W, Landgraf R. A CDC37 foszforilált és foszforilálatlan 13-as szerinje stabilizálja a kliens és a HSP90 kötő doménjei közötti eltérő kölcsönhatásokat. Biokémia. 2015;54:1493–1504.

26. Love S, Chalmers K, Ince P, Esiri M, Attems J, Kalaria R, Jellinger K, Yamada M, McCarron M, Minett T, Matthews F, Greenberg S, Mann D, Kehoe PG. Erratum: Egy konszenzusos protokoll kidolgozása, értékelése, validálása és végrehajtása az agyi amiloid angiopátia értékelésére post mortem agyszövetben. Am J Neurodegener Dis. 2015; 4:49.

27. McGeer PL, McGeer EG. Célzott mikroglia az Alzheimer-kór kezelésére. Szakértői véleménye a célpontokról. 2015;19:497–506.

28. Neltner JH, Abner EL, Baker S, Schmitt FA, Kryscio RJ, Jicha GA, Smith CD, Hammack E, Kukull WA, Brenowitz WD, Van Eldik LJ, Nelson PT. A több agyrégiót érintő arterioszklerózis összefüggésben áll az öregedés okozta hippocampalis szklerózissal. Agy. 2014;137:255–267.

29. Oliveira NR, Marques SO, Luciano TF, Pauli JR, Moura LP, Caperuto E, Pieri BL, Engelmann J, Scaini G, Streck EL, Lira FS, Pinho RA, Ropelle ER, Silva AS, De Souza CT. A futópadon végzett edzés intenzitásfüggő módon növeli a SIRT-1 és PGC-1 alfa fehérje szintjét, valamint az AMPK foszforilációját középkorú patkányok négyfejű izmában. Közvetítők Inflamm. 2014;2014:987017. [PMC ingyenes cikk]

30. Pérez -Hernández J, Zaldívar -Machorro VJ, Villanueva-Porras D, Vega-Ávila E, Chavarría A. Potenciális alternatíva neurodegeneratív betegségek ellen: phytodrugs. Oxid Med Cell Longev. 2016;2016:8378613. [PMC ingyenes

cikk] [PubMed] [Google Tudós]

31. Popov K, Komianos J. MEDIAN: A kontrakció és a polaritás összehangolásának mechanokémiai szimulációi aktomiozin hálózatokban. PLoS Comput

Biol. 2016;12:e1004877. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Google Scholar]

32. Procaccio V, Bris C, Chao de la Barca JM, Oca F, Chevallier A, Amati-Bonneau P, Bonneau D, Reynier P. Perspectives of drug-based neuroprotection targeting mitochondria. Rev Neurol (Párizs), 2014; 170:390–400. [PubMed] [Google Tudós]

33. Radu M, Semenova G, Kosoff R, Chernoff J. PAK signaling during the development and progression of cancer. Nat Rev Rák. 2014;14:13–25. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Google Scholar]

34. Rao VK, Carlson EA, Yan SS. A mitokondriális permeabilitás átmeneti pórusa a neurodegeneráció potenciális gyógyszercélpontja. Biochim Biophys Acta. 2014;1842:1267–1272. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Google Scholar]

35. Reid SP, Shurtleff AC, Costantino JA, Tritsch SR, Retterer C, Spurgers KB, Bavari S. A HSPA5 az Ebola vírusfertőzés elengedhetetlen gazdafaktora. Antiviral Res. 2014;109:171–174. [PubMed] [Google Tudós]

36. Reijmer YD, van Veluw SJ, Greenberg SM. Ischaemiás agysérülés agyi amiloid angiopátiában. J Cereb Blood Flow Metab. 2016;36:40–54. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Google Scholar]

37. Roberts JL, Tavallai M, Nourbakhsh A, Fidanza A, Cruz-Luna T, Smith E, Siembida P, Plamondon P, Cycon KA, Doern CD, Booth L, Dent P. GRP78/Dna K is a target for Nexavar/ stivarga/votrient humán rosszindulatú daganatok, vírusfertőzések és bakteriális betegségek kezelésében. J Cell Physiol. 2015;230:2552–2578. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Google Scholar]

38. Rorke EA, Adhikary G, Young CA, Rice RH, Elias PM, Crumrine D, Meyer J, Blumenberg M, Eckert RL. Strukturális és biokémiai változások, amelyek a keratoderma-szerű fenotípus hátterében állnak olyan egerekben, amelyekben hiányzik a szuprabazális AP1 transzkripciós faktor funkciója. Cell Death Dis. 2015;6:e1647. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Google Scholar]

39. Sachdev P, Kalaria R, O'Brien J, Skoog I, Alladi S, Black SE, Blacker D, Blazer DG, Chen C, Chui H, Ganguli M, Jellinger K, Jeste DV, Pasquier F, Paulsen J, Prins N, Rockwood K, Roman G, Scheltens P. International Society for Vascular Behavioral and Cognitive Disorders (2014) Vaszkuláris kognitív zavarok diagnosztikai kritériumai: VASCOG nyilatkozat. Alzheimer Dis Assoc rendellenesség. 28:206–218.

40. Sadigh-Eteghad S, Sabermarouf B, Majdi A, Talebi M, Farhoudi M, Mahmoudi J. Amyloid-beta: a crucial factor in Alzheimer-kór. Med Prince Pract. 2015;24:1–10.

41. Schwingshackl A, Roan E, Teng B, Waters CM. A TREK-1 szabályozza a citokinszekréciót a tenyésztett humán alveoláris hámsejtekből, függetlenül a citoszkeletális átrendeződésektől. PLoS One. 2015;10:e0126781.

42. Sinclair LI, Tayler HM, Love S. A szinaptikus fehérjeszintek megváltoztak vascularis dementiában. Neuropathol Appl Neurobiol. 2015;41:533–543.

43. Stary CM, Giffard RG. Az asztrocita-célzott megközelítések fejlődése a stroke-terápia terén: a mitokondriumok és a mikroRNS-ek növekvő szerepe. Neurochem Res. 2015;40:301–307.

44. Szalárdy L, Z ádori D, Klivényi P, Toldi J, Vécsei L. Electron transport zavarok and neurodegeneration: from Albert Szent-Gyorgyi's Concept (Szeged) till novel approaches to boost mitochondrial bioenergetics. Oxid Med Cell

Longev. 2015;2015:498401.

45. Szymanski WG, Zauber H, Erban A, Gorka M, Wu XN, Schulze WX. A citoszkeletális komponensek határozzák meg a fehérje elhelyezkedését a membrán mikrodoménjein. Mol Cell Proteomics. 2015;14:2493–2509.

46. ​​Talarowska M, Bobinska K, Zajaczkowska M, Su KP, Maes M, Galecki P. Impact of oxidative/nitrozative stress and inflammator on cognitive functions in patients with recidive depressive disorders. Med Sci Monit. 2014;20:110–115.

47. Tatlisumak T, Putaala J, Debette S. A stroke kevésbé gyakori okai: diagnózis és kezelés. In: Norrving B, szerkesztő. A stroke és az agyi érbetegség oxfordi tankönyve. Oxford: Oxford University Press; 2014. 153–162. [Google ösztöndíjas]

48. Tavallai M, Hamed HA, Roberts JL, Cruickshanks N, Chuckalovcak J, Poklepovic A, Booth L, Dent P. A Nexavar/Stivarga és a viagra kölcsönhatásba lép a daganatsejtek elpusztítása érdekében. J Cell Physiol. 2015;230:2281–2298. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Google Scholar]

49. Thomas T, Miners S, Love S. Az agykéreg hipoperfúziójának post mortem értékelése Alzheimer-kórban és vaszkuláris demenciában. Agy. 2015;138:1059–1069. [PubMed] [Google Tudós]

50. Wang Y, Lin J, Chen QZ, Zhu N, Jiang DQ, Li MX, Wang Y. A mitokondriális Hsp75 túlzott expressziója megvédi az idegi őssejteket a mikroglia-eredetű oldható faktor által kiváltott neurotoxicitástól azáltal, hogy szabályozza a mitokondriális permeabilitás átmeneti pórusok megnyitását in vitro. Int J Mol Med. 2015;36:1487–1496.

51. Xu Q, Fan W, Ye SF, Cong YB, Qin W, Chen SY, Cai J. Cistanche tubulosa Az apoptózis és a gliasejtekből származó neurotróf faktor szabályozása révén védi a dopaminerg neuronokat: in vivo és in vitro. Elülső öregedés

Neurosci. 2016;8:295.

52. You SP, Zhao J, Ma L, Tudimat M, Zhang SL, Liu T. Preventive effects of phenylethanol glycosides from Cistanche tubulosa on bovine serum albumin induced hepatic fibrosis in patkány. Daru. 2015;23:52.

53. Zhou Q, Anderson C, Zhang H, Li X, Inglis F, Jayagopal A, Wang S. Repression of choroidalis neovascularization through actin cytoskeleton pathways by microRNA-24. Mol Ther. 2014;22:378–389.

54. Zhu M, Lu C, Li W. Az echinakozid átmeneti expozíciója elegendő a Trk jelátvitel aktiválásához és az idegsejtek rotenon elleni védelméhez. J Neurochem. 2013;124:571–580.