A terápiás hipotermia hatása a vesesérülésre egy patkánymodellben asphyxiás szívmegállás esetén: Α Fókuszban a túlélési arány, a patofiziológia és az antioxidáns enzimek
Mar 25, 2022
SO EUN KIM1*, HA-YOUNG SHIN2*, EUI-YONG LEE2, YEO-JIN YOO2, RYUN-HEE KIM2, ET AL
Absztrakt.
Bár a többszervi diszfunkció összefüggésbe hozható a szívmegállást követő túlélési aránnyal (ca), az eddigi vizsgálatok többsége a szívre és az agyra összpontosított, és kevés tanulmány foglalkozott veseelégtelenséggel. Jelen tanulmány célja ezért az volt, hogy megvizsgálja a terápiás hipotermia hatását a túlélési arányra, a patofiziológiára és az antioxidáns enzimekre patkányvesékben fulladásos CA után. A patkányokat a CA után egy nappal leöltük. A túlélési arány, amelyet Kaplan-Meier analízissel becsültek meg, 42,9 százalék volt egy nappal kb. A kb. után indukált hipotermia azonban jelentősen növelte a túlélési arányt (71,4 százalék). normotermiás patkányokban kb. a szérum vér karbamid nitrogén szintje szignifikánsan megemelkedett egy nappal a kb. emellett a szérum kreatinin szintje szignifikánsan megemelkedett egy nappal a CA után. Hipotermiának kitett CA-patkányokban azonban a karbamid-nitrogén és a kreatinin szintje szignifikánsan csökkent kb. A hisztokémiai festés a vesekárosodás szignifikáns időbeli növekedését mutatta ki, miután a normotermiás csoportot kb. A vesekárosodás azonban szignifikánsan csökkent a hipotermia csoportban. A vese immunhisztokémiai analízise az antioxidáns enzimek (réz-cink szuperoxid-diszmutáz, mangán-szuperoxid-diszmutáz, glutation-peroxidáz és kataláz) idővel szignifikáns csökkenését mutatta ki a normotermiás csoportban. A hipotermia csoportban azonban ezek az enzimek szignifikánsan emelkedtek kb. összességében az eredmények azt mutatták, hogy a fulladást követő veseműködési zavar erősen összefügg a korai túlélési aránnyal, és a terápiás hipotermia hatékony antioxidáns mechanizmusok révén csökkentette a vesekárosodást.
Kulcsszavak: fulladásos szívmegállás, szívmegállás utáni szindróma, hipotermia kezelése, vese, kórszövettan, antioxidáns enzimek
Kapcsolatba lépni:joanna.jia@wecistanche.com
Bevezetés
A szívmegállás (ca), más néven kardiopulmonális leállás vagy keringési leállás, a normális vérkeringés hirtelen leállásával jár, ami a szív nem megfelelően pumpálja a vért (1). az egész testre kiterjedő ischaemiát idézhet elő, amely számos szerv károsodását okozza, beleértve az agyat, a szívet, a veséket és a májat. Az elmúlt fél évszázadban végzett kutatások többsége a spontán keringés (roSc) sikeres visszatérésének arányának javítására összpontosított, jelentős előrelépéssel (2-4). Bár az azonnali újraélesztés javíthatja a roSc-t, a túlélési arány rossz prognózis mellett aggodalomra ad okot (5-7). A szívmegállás utáni szindróma (PcaS) a roSc kórélettani következményeire utal a sikeres kardiopulmonális újraélesztést (cPr) követően (8). A PcaS a fő oka a roSc utáni csökkent túlélésnek (9). A korai periódus PcaS túlélési aránya a betegeknél mindössze 30 százalék (5). Kétségtelen, hogy a szív és az agy fontos szervek a PcaS-ben. Mindeközben a vizsgálatok ritkán vizsgáltak veseelégtelenséget kb. (1,10,11). Átmeneti vesekárosodás gyakori a kb. túlélő betegeknél (12). A kb. utáni veseműködési zavarok előfordulási gyakorisága és hatása nincs megfelelően leírva (13). emellett korábbi tanulmányunk azt sugallta, hogy a kísérleti vizsgálatokban (14) a roSc-t követő alacsony korai túlélési arány erősen összefügghet a veseelégtelenséggel, például az akut vesekárosodással. az akut vesekárosodás egyik leggyakoribb oka a kb (15). Az akut vesekárosodás gyakori PcaS, amely a kórházi betegek kb. 30 százalékánál alakul ki (16).
A reaktív oxigéngyökök (roS) egy sor oxigén intermedierből állnak, beleértve a szabad gyökös szuperoxid aniont (o2•-), a nem gyökös hidrogén-peroxidot (H2o2), a nagyon reaktív hidroxil-szabadgyököt (OH•), a peroxinitritet (onoo ). és szingulett oxigén (1o2) (17). A roS-ről kimutatták, hogy számos kísérleti vesebetegségben alapvető szerepet játszik, például akut ischaemiás veseelégtelenségben, vesegraft kilökődésben, akut glomerulonephritisben és toxikus vesebetegségekben (18). Jelentős bizonyítékok állnak rendelkezésre az roS szintézisére közvetlenül az akut ischaemiás stroke (19) és az akut myocardialis infarktus (20) után. Az roS fontos szerepet játszik az ischaemiás betegségekben, mint például a stroke és a miokardiális infarktus. Például Hackenhaar és munkatársai (21) arról számoltak be, hogy a PcaS-ben szenvedő betegek vérében roS termelődik; a tanulmányok azonban ritkán vizsgálták a vesében a korai poszt-PcaS periódus utáni roS képződését (22,23).
Emiatt feltételezték, hogy az roS fontos szerepet játszik a kb. stádiumot követő vesekárosodásban, és hozzájárul az alacsony túlélési arányhoz a PcaS korai szakaszában. Ennek a hipotézisnek a vizsgálatához patkányokban fulladásos ca-t indukáltak, és megfigyelték a túlélési arányt a PcaS korai szakaszában. Ezen túlmenően azonnali és késleltetett hipotermiát végeztek, hogy növeljék a PcaS-hez kapcsolódó alacsony túlélési arányt roSc után. Ezenkívül a veseműködési zavarokat kórszövettanilag elemezték, és értékelték az roS által kiváltott változásokat, mint például a réz-cink szuperoxid-diszmutáz (Sod-1), a mangán-szuperoxid-diszmutáz (Sod-2), a kataláz (caT) és a glutation-peroxidáz (GPX). roSc-t követő immunhisztokémiai analízissel.
cistanche pharma special
Anyagok és metódusok
Kísérleti állatok és csoportok.Összesen 62 hím Sprague-Dawley (Sd) patkányt (tömeg, 270-300 g; életkor, 10 hetes) szereztünk be a Jeonbuk National University (iksan, Koreai Köztársaság) kísérleti állatközpontjából. 23±2˚C hőmérsékleten és 60±10 százalékos páratartalom mellett helyezték el őket 12 órás világos/sötét ciklus mellett. Ingyenes hozzáférést kaptak élelemhez és vízhez. az összes kísérleti protokollt etikai eljárások és tudományos gondoskodás alapján jóváhagyta a Jeonbuk Nemzeti Egyetem intézményi állatgondozási és -használati bizottsága (jóváhagyási szám: JBnu 2020-084).
A kísérleti állatokat három kategóriába soroltuk [álműtétes csoport, ca normotermia alatt, valamint ca és hipotermia kezelés (HT)] a következőképpen: i) I. csoport, egy ál-csoport (n=5) normotermiás körülmények között maradt fenn. ca nélkül; ii) ii. csoport, normotermiás csoport hipotermia (33˚C) kezelés nélkül CA-t követően (n=17); és iii) iii. csoport (n=40), egy olyan csoport, amely normotermia alatt kb. átesett, és kb. 2 óra (n=17), 4 óra (n=13) után HT-vel kezelték. és 6 órával (n=10) az roSc után, ahol az összes patkányt normotermiára melegítettük.
CA indukció és CPR.A Ca-t és a cPr-t a korábban leírtak szerint végeztük (24,25), kisebb módosításokkal (1. ábra). Röviden, a patkányokat 2–3 százalékos izofluránnal érzéstelenítettük, és mechanikusan lélegeztették, hogy fenntartsák a légzést rágcsálólélegeztetőgép segítségével (Harvard készülék). A perifériás oxigénszaturáció (Spo2) monitorozására egy pulzoximetriás oxigénszaturációs szondát (Nonin Medical, Inc.) csatlakoztattak a bal lábhoz. A testhőmérsékletet 37±0.5˚C-on tartottuk a ca műtét alatt és azt követően. Az elektrokardiogram (ecG) változásainak nyomon követésére elektrokardiográfiás szondákat (cytiva) helyeztek a végtagokra, hogy három elvezetéses adatokat kapjanak, amelyeket folyamatosan figyeltek. A bal femoralis artériát és a jobb femorális vénát külön kanüláltuk az átlagos artériás nyomás (MaP) (MLT 1050/d; ADInstruments, Ltd.) és az intravénás injekció monitorozására.
5 perces stabilizációs időszakot követően vekurónium-bromidot (2 mg/kg; Gensia Sicor Pharmaceuticals, inc.) intravénásan adtunk be, az érzéstelenítést leállítottuk, és a gépi lélegeztetést megszakították. 25 Hgmm alatti MaP-t és ezt követő impulzusmentes elektromos aktivitást használtak a CA meghatározásához (25,26). A CA-t 3-4 perccel igazolták a vekurónium-bromid injekció után. kb. 5 perccel a cPr-t adrenalin bolus injekciójának intravénás beadásával indítottuk el (0,005 mg/kg; Sigma-Aldrich;
Merck KGaa) és nátrium-hidrogén-karbonát (1 mekv/kg; Sigma-Aldrich; Merck KGaa), majd mechanikus lélegeztetés 100%-os oxigénnel és kézi mellkaskompresszió 300/perc sebességgel, amíg a MaP el nem érte a 60 Hgmm-t, és elektrokardiográfiás aktivitást figyeltek meg. . Miután az állat hemodinamikailag stabil és spontán lélegzett (általában a roSc után 1 órával), a katétereket eltávolítottuk, és az állatot extubáltuk.
Hőmérséklet szabályozás a csoportok között.A normotermiás csoport testhőmérsékletét 37±0,5°C-on tartottuk a CA-műtét alatt és azt követően, és addig tartottuk, amíg a patkányokat az ütemterv szerint le nem öltük. a hipotermia csoportban normál hőmérsékleten kb. majd a testhőmérsékletet jégakkukkal és ventilátorokkal 33±0,5˚C-on tartottuk közvetlenül az újraélesztést követően 2, 4 és 6 órán keresztül, és gyorsan felmelegítettük a fűtőbetéttel a kívánt hőmérsékletig ( 37±0.5˚C) érték el. A patkányokat ezután visszahelyeztük ketrecükbe, amíg a CPR/roSc után egy nappal le nem ölték őket. A testhőmérsékletet rektális hőmérséklet-érzékelővel (27) követtük.
Szérum biokémiai elemzés.30 mg/kg pentobarbitál-nátrium (JW Pharm Co., Ltd.) intraperitoneális injekcióját alkalmaztuk az összes állat érzéstelenítésére. Minden csoportban minden állat hasi vénáiból vért vettünk. A szérumot vércentrifugálással gyűjtöttük össze (2774 xg, 15 perc, 4 °C), és -80 °C-on tároltuk az elemzésig. A vér karbamid-nitrogén (Bun) és kreatinin szintjét a szérumban a Nemzetközi Klinikai Kémiai Szövetség (28) által felvázolt módszerekkel határozták meg egy Hitachi 2070 (Hitachi, ltd.) automata kémiai analizátor segítségével. minden vizsgálatot három párhuzamosban végeztünk friss szérum felhasználásával.
Szövetfeldolgozás.A patkányokat 200 mg/kg pentobarbitál-nátrium (JW Pharm co., Ltd.) intraperitoneális injekciójával mélyen érzéstelenítettük, és transzkardiálisan perfundáltuk őket 0,1 M-dal. foszfáttal pufferolt sóoldat (PBS; pH 7,4), majd 4% paraformaldehid 0,1 M foszfátpufferben (PB; pH 7,4). A veséket minden állatból izoláltuk, és 4 százalékos paraformaldehiddel fixáltuk 0,1 M PB-ben (pH 7,4) szobahőmérsékleten 1 hét alatt, majd sagittálisan felszeleteltük, paraffinba ágyaztuk, és metszetekre vágtuk (6 µm).
Hematoxilin és eozin (H&E), Periodic Acid-Schiff (PAS) és Masson-féle trikróm festés.H&e festést végeztünk a vesék patológiás elváltozásainak vizsgálatára egy korábban leírt eljárás szerint (29). PaS festést végeztünk a glomerulusok változásainak vizsgálatára a korábban leírt eljárások szerint (30-32). A Masson-féle trikróm festési módszert alkalmazták a tubuláris sérülés meghatározására, figyelembe véve a tubulus dilatációt, tubuláris atrófiát, tubuláris gipszképződést, vakuolizációt, degenerációt, intersticiális fibrózist és a tubuláris epiteliális sejtek leválását, vagy a tubuláris alapmembrán megvastagodását (33 a korábban leírt eljárások szerint). ,34).
összesen 2 tapasztalt patológus kettős vak módszerrel értékelte a kórszövettani elváltozásokat. patkányonként 10 festett metszet képét 400-szoros nagyítással rögzítettük Leica dM 2500 fénymikroszkóppal (Leica Microsystems GmbH). Minden szekcióban összesen 10 mezőt elemeztünk. A veseelváltozások hisztopatológiai elemzését a korábban leírt eljárások szerint végeztük (35,36). Röviden, a léziókat a szignifikáns mikroszkopikus elváltozások (nSMl), minimális, enyhe, közepes vagy markáns elváltozások kategóriába soroltuk, a vakteszttel a következő skála szerint osztályozva: normál, 0 pont;<25% damage,="" 1="" point;="" 26‑50%="" damage,="" 2="" points;="" 51‑75%="" damage,="" 3="" points;="" and="" 76‑100%="" damage,="" 4="">
A glomeruláris elváltozásokat sejtelemek elvesztésével, a kapilláris lumen összeomlásával, amorf hialin anyaggal, a Bowman-kapszulához tapadással vagy anélkül határozták meg (30-32), és a következő numerikus skálákkal értékelték: nincs károsodás, { {7}} pont; nagyon enyhe, 1 pont; enyhe, 2 pont; közepes, 3 pont; és súlyos, 4 pont. A tubuláris sérülést a következő pontozási rendszer szerint értékelték: nincs tubulus sérülés, 0 pont; a tubulusok 1-9 százaléka sérült, 1 pont; a tubulusok 10-25 százaléka sérült, 2 pont; a tubulusok 26-50 százaléka sérült, 3 pont; a tubulusok 51-75 százaléka sérült, 4 pont; és a tubulusok legalább 76 százaléka sérült, 5 pont (33,34).
Malondialdehid (MDA).Az Mda-koncentrációt a vesekéregben egy korábban leírt protokoll szerint értékeltük (23,37,38). röviden, a veseszövetek homogenizálását és centrifugálását 8832 xg-vel 10 percig 4 °C-on végeztük, majd a felülúszót összegyűjtöttük és -80 °C-on tároltuk az MDA elemzéshez. Az MDA-tartalmat a TBarS assay kit (kat. sz. 10009055; Cayman Chemical Company) utasításai szerint határoztuk meg.
Immunhisztokémia (IHC) az antioxidáns enzimekhez. Az iHc-t Sod-1-gyel, Sod-2-vel, caT-vel és GPX-szel végezték el, hogy tanulmányozzák az antioxidáns immunreaktivitás változásait a vesében. Az iHc-t a korábban leírt módszerünk szerint (22) végeztük. Röviden, a metszeteket (6 µm) elsődleges kecske anti-Sod1-gyel (1:500; katalógusszám: SaB2500976; Sigma-Aldrich; Merck KGaa), kecske anti-Sod2-vel (1:1) inkubáltuk. ,000; kat. sz. SaB2501676; Sigma-Aldrich; Merck KGaa), nyúl anti-caT (1:1, 000; kat. sz. ab16731; Abcam) és nyúl anti-GPX ( 1:1,000; kat. sz. ab22604; Abcam) egy éjszakán át 4°C-on, majd a biotinilezett-konjugált antinyúl (1:250; kat. sz. Ba-1000-1.5; Vector laboratóriumok) , inc.) és a biotinilált-konjugált anti-kecske (1:250; katalógusszám: Ba-5000-1,5; Vector Laboratories, Inc.) másodlagos antitestek 2 órán át 24 °C-on, és a Vectastain aBc (Vector laboratories) felhasználásával fejlesztették ki. , inc.). Ezután 3,3'-diaminobenzidin oldattal (0,1 M Tris-HCl pufferben) tettük láthatóvá.
Leica dM 2500 mikroszkópot használtunk a metszetek 400-szoros nagyítású képalkotásához. Összesen 10 metszetet/patkányt választottunk ki, és 10 területet fogtunk be. A relatív optikai sűrűség (rúd) százalékos ( százalékos ) mérésére a képküszöbelemző szoftver 1.52a verzióját (Országos Egészségügyi Intézet) használtuk.
Statisztikai analízis.Minden kísérletet megismételtünk három párhuzamosban. A Graph Pad Prism 5.{1}} verzióját (GraphPad Software, inc.) használtuk az adatok elemzésére, amelyeket az átlagértékek (SeM) átlag ± standard hibájaként fejeztünk ki. A túlélést Kaplan-Meier statisztikák és a log-rank teszt segítségével elemezték. A MaP-t és a perifériás oxigént egy- és kétirányú ismételt varianciaanalízissel hasonlították össze az idő hatásának felmérésére. A különbségek szignifikanciájának meghatározására post hoc elemzéseket végeztünk Tukey-teszttel minden páronkénti többszörös összehasonlításnál. P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">
Eredmények
Fiziológiai változások, a túlélési arány és a szérum biokémiai változói. Nem volt statisztikailag szignifikáns különbség a csoportok között a kiindulási jellemzőket illetően, beleértve a testsúlyt, a MaP-t és a Spo2-t (i. táblázat és 2. ábra). A ca indukciója a vekurónium-bromid (2 mg/kg) intravénás injekcióját követően 3-4 perccel következett be. A CA-t izoelektromos ecG-vel, Spo2-vel és MaP-vel igazolták, és ezek a kísérleti protokollnak megfelelően változtak (2a-c. ábra). Amint a 2d. ábrán látható, a testhőmérséklet eltérő volt az összes roSc-t követő csoportban, amint az a 3. ábrán látható, az egyes csoportok túlélési arányát egy nappal azután, hogy kb. A II. csoport aránya 42,9 százalék volt.
A iii. csoportban a 2 óra HT utáni arány 42,9 százalék, a 4 óra HT utáni arány 57,1 százalék és a 6 óra HT utáni arány 71,4 százalék volt. ebben a kísérletben nem volt különbség a ii. csoportba tartozó patkányok és a iii. csoport 2 órás HT-vel rendelkező patkányai között.
Amint a 4B. ábra mutatja, a szérum Bun szint az i. csoportban 13,8 mg/dl volt egy nappal a kb. a ii. csoportban a Bun szint szignifikánsan 35,3 mg/dl-re emelkedett. a iii. csoportban a zsemle szintje 3{{10}},7 mg/dl volt 2 óra HT után, 25.0 mg/dl 4 óra HT után és 22,7 mg/ dl 6 h-HT után. továbbá, amint a 4c. ábrán látható, a szérum kreatinin szintje az I. csoportban {{20}},23 mg/dl volt. a ii. csoportban a kreatininszint szignifikánsan megemelkedett, 0,43 mg/dl-re. a iii. csoportban a kreatininszint alacsonyabb volt, mint a ii. csoportban megfigyeltnél: 0,39 mg/dl 2 óra HT után, 0,37 mg/dl 4 óra HT után és 0,36 mg/dl 6 óra HT után.
Hisztopatológiai leletek. az I. csoportban (hamis) ép szövettani struktúrákat tártunk fel H&e, PaS és Masson-féle trikróm festéssel (5A. ábra). Az intersticiális fibrózist nem minden csoportban mutatták ki, míg a ii. csoportban a ca-indukált vese szövettani vizsgálatát a roSc után egy nappal H&e, PaS és Masson-féle trikróm festéssel végezték. A súlyos CA által kiváltott vesekárosodás szignifikánsan megnövekedett a proximális tubulusokban és glomerulusokban; különösen a vese tubuláris epiteliális sejtjeinek kefeszegélyei súlyosan erodálódtak (5a. és B. ábra). ezen túlmenően ebben a csoportban a glomeruláris kapillárisok gyulladásos sejtekkel kitágultak, és az intersticiális ödéma és az akut vese tubuláris nekrózis súlyosak voltak az I. csoportban megfigyeltekhez képest (5a. ábra).
a iii. csoportban a vesekárosodás az roSc után egy nappal gyengült (5a. és B. ábra). különösen a proximális tubulusokban a ca-indukált sérülés szignifikánsan csökkent 6 óra HT után a ii. csoportban megfigyelthez képest. emellett a proximális tubulusok lokális kiterjedése csökkent a ii. csoportban észlelthez képest (5A. ábra). A glomerulusok esetében a 6 h-HT szignifikánsan gyengítette a glomeruláris sérülést a ii. csoporthoz képest (5a. és B. ábra).
MDA szint. Amint a 4a. ábra mutatja, az Mda szintje a vesekéregben szignifikánsan megemelkedett a kb. után egy nappal a ii. csoportban az i. csoporthoz képest. A III. csoportban azonban az MDA szintje szignifikánsan csökkent 4 óra és 6 óra HT után. a 2 órás HT-ban is csökkent, de nem volt statisztikailag szignifikáns különbség a ii. csoporthoz képest.
Az antioxidáns enzimek immunreaktivitásának megállapításai.
Az I. csoportban a normál Sod-1, Sod-2, GPX és caT immunreaktivitásokat értékelték, és kiderült, hogy ezek elsősorban a tubulusokban helyezkedtek el (6a. ábra). a ii. csoportban a Sod-1, Sod-2, GPX és CAT immunreaktivitások szignifikánsan csökkentek egy nappal a roSc után, összehasonlítva az i. csoportban észleltekkel (6a és B ábra).
a iii. csoportban a Sod-1, Sod-2, GPX és a caT immunreaktivitás 2 óra HT után nem különbözött szignifikánsan a ii. csoportban megfigyeltektől (6a és B ábra). a 4 h-HT esetében a négy immunreaktivitás szignifikánsan magasabb volt, mint a ii. csoportban kimutatottak (6a. és B. ábra), ami azt mutatja, hogy különösen a GPX immunreaktivitás volt szignifikánsan magasabb a többi immunreaktivitáshoz képest. a 6 órás HT esetében az összes immunreaktivitás magasabb volt, mint a 4 órás HT-t kapott patkányoknál, ami azt mutatja, hogy az egyes Sod-1, Sod-2, GPX és caT immunreaktivitások rúdja 78,4, 67,4 volt, 86.5, illetve 79,5 százalék az i. csoporthoz képest (6a. és B. ábra).
herba epimedium sagittatum
Vita
Állatkísérletekben a szív és az agy a leginkább érintett szervek az ischaemia/reperfúziós (i/r) sérülések után kb. (39,40). ennek ellenére bizonyos tanulmányok arról számoltak be, hogy az akut vesekárosodás hatással van a neurológiai gyógyulásra (41,42). Ezért fontos a ca és cPr utáni akut vesekárosodás vizsgálata. a jelen vizsgálatban felnőtt hím Sd patkányokat használtunk a fulladásos ca. vekurónium-bromid injekcióval. A CA-t 3-4 perccel a fulladás kiváltása után igazoltuk, a cPr-t pedig kb. A MaP, az ecG és a Spo2 a várt módon módosult a kb. és azt követő roSc alatt. jelen vizsgálatunkban a iii. csoport túlélési aránya 42,9 százalék volt a roSc után egy nappal a 2 óra HT-vel kezelt patkányokban, 57,1 százalék a 4 óra HT-vel kezelt patkányokban és 71,4 százalék a 6 óra HT-vel kezelt patkányokban. che és munkatársai (26) arról számoltak be, hogy a túlélési arány 40 százalék volt két nappal a roSc után egy kb. asphyxiás patkánymodellben. emellett Wang és munkatársai (43) arról számoltak be, hogy patkányoknál a hipotermia és a levosimendan (kalcium-érzékenyítő és káliumcsatorna-nyitó) kombinációja az roSc-t követően jelentősen megnövelte a túlélést. Ezen eredmények alapján a HT ca patkányokban növelheti a túlélési arányt néhány nappal a roSc után. Emberben azonban a ca utáni HT alig növeli a túlélési arányt roSc után (44).
veseműködési zavart a sikeres újraélesztést követően ca-ban szenvedő betegek 12-28 százalékánál jelentettek (13). emellett akut vesekárosodás a kb. után újraélesztett betegek 43 százalékánál alakult ki, és ezen epizódok több mint 75 százaléka kb. után három napon belül következett be (45). állatmodellekben az i/R által kiváltott akut vesekárosodást (azaz CA-t követő ROSC) szignifikánsan gyengítette a HT (43,46,47). Például Tissier és munkatársai (47) a veseléziók szignifikáns gyengüléséről számoltak be HT által ca nyúlmodellben, hisztopatológiai és elektronmikroszkópos vizsgálat alapján, összehasonlítva a kontrollcsoporttal. jelen vizsgálatunkban a ii. csoport veséinek hisztopatológiai glomeruláris és tubuláris elváltozási pontszáma láthatóan javult egy nappal a roSc után. ebben a csoportban a szérum Bun- és kreatininszintek szignifikánsan megemelkedtek a ROSC-t követően, összehasonlítva az ál-csoporttal (i. csoport). Ezek az eredmények hasonlóak voltak a korábbi vizsgálatok eredményeihez, amelyekben kutya, nyúl és malac ca modelleket vontak be (47-49). Így a vesekárosodás súlyosan megnövekedett a korai fázisban, kb. kísérleti állatokban. Jelen vizsgálatunkban a vese glomeruláris és tubuláris elváltozásai és a kórszövettani pontszámok a iii. csoportban szignifikánsan csökkentek a roSc után egy nappal 4 óra és 6 óra HT után a ii. csoporthoz képest. Ribeiro és munkatársai (46), valamint Souza és munkatársai (50) arról számoltak be, hogy a HT hatékony volt a vese i/r sérülésének állatmodelljeiben. Islam és munkatársai (23) és Jawad és munkatársai (22) megállapították, hogy a HT csökkentette a vesekárosodás súlyosságát és növelte a túlélési arányt egy asphyxiás ca modellben. Az eredmények azt sugallták, hogy a HT jelentős vesevédő hatással bír, ami a megnövekedett túlélési arányhoz kapcsolódik.
Az endogén antioxidáns enzimek közé elsősorban a Sods, a CAT és a GPX tartozik. Ezek az enzimek biztosítják az első védelmi vonalat az o2•– és OH• ellen. A SOD-1 és a SOD-2 védelmet nyújt az oxidatív stressz ellen azáltal, hogy katalizálja az o2•- o2-vé és H2o2-vé való átalakulását (51). Az oxidatív stressz döntő tényező a szervi sérülésekben és a hemodinamikai diszfunkcióban a PcaS során, valamint az roS képződésében az i/r sérülés során. Az antioxidáns enzimek aktivitását kb. (21) követő i/r sérülés megváltoztatja. vizsgálatunk kimutatta, hogy a Sod-1, Sod-2, GPX és caT szintek csökkentek a roSc után a ii. csoportban az i. csoporthoz képest. Ezen antioxidáns enzimek szintje csökken az i/r hatására, ami sejtkárosodást és elhalást okoz az endogén antioxidánsok fogyasztása miatt az roS felszabadulása következtében (52).
Xia és munkatársai (53) megnövekedett antioxidáns aktivitásról számoltak be a HT-nak kitett egerek veseszövetében vese-i/r sérülés esetén. Hackenhaar és munkatársai (21) szignifikáns növekedést figyeltek meg a Sod-1, Sod-2, GPX és a caT aktivitásában 6, 12, 36 és 72 órás HT után emberekben roSc-t követően. korábbi tanulmányokban, amelyekben a asphyxiás ca patkánymodelljét alkalmazták, Islam és munkatársai (23) arról számoltak be, hogy a ca utáni HT csökkenti a vese oxidatív stresszét, Jawad és munkatársai (22) pedig arról számoltak be, hogy a ca utáni HT megvédi a vesét a ca. bizonyítja, hogy az nrf2/Ho‑1 megnövekedett a vesében. jelen tanulmányunkban a Sod-1, Sod-2, GPX és a caT immunreaktivitása szignifikánsan megnőtt a 3. csoportban 4 h-HT és 6 h-HT után a ii. csoporthoz képest, ami arra utal, hogy a HT aktiválta az antioxidáns enzimeket és csökkentette az oxidatív stressz.
A vizsgálat túlélési, kórszövettani, biokémiai és immunhisztokémiai eredményei alapján megállapítottuk, hogy a veseműködési zavar gyakori és összefügg a mortalitással a roSc-t követő PcaS korai szakaszában, a asphyxiás kb. A ROSC-t követő 4 óra vagy 6 óra HT azonban jelentősen csökkentette a vesekárosodást, ami arra utal, hogy a HT olyan antioxidáns enzimek aktiválását idézi elő, mint a Sod-1, Sod-2, GPX és a caT, ami csökkenti a vesék oxidatív stresszét. Ennek eredményeként azt feltételezték, hogy a HT antioxidáns mechanizmus révén csökkenti a vesekárosodást és növeli a korai túlélési arányt. Azonban Western blot analízis szükséges a vesekárosodás és a HT mechanizmusának tisztázásához kb. roSc után. Ez a jelen tanulmány lehetséges korlátja, és aláhúzza a további vizsgálatok szükségességét.
miricetin
1 Sürgősségi Orvostudományi Tanszék, a Jeonbuk National University klinikai orvostudományi kutatóintézete, Jeonju, Jeollabuk-do 54907;
2 College of Veterinary Medicine and Biosafety Research Institute, Jeonbuk National University, San, Jeollabuk-do 54596;
3. Orvosbiológiai Tudományos Tanszék és Biotudományi és Biotechnológiai Kutatóintézet, Hallym Egyetem, chuncheon, Gangwon-do 24252;
4. Sebészeti Osztály, Kangwon Nemzeti Egyetemi Kórház,
School of Medicine, Kangwon National University, chuncheon, Gangwon-do 24289; 5. Neurobiológiai Tanszék, Orvostudományi Iskola, Kangwon National University, chuncheon, Gangwon-do 24341, Koreai Köztársaság
Köszönetnyilvánítás
nem alkalmazható.
Finanszírozás
A jelen tanulmányt az Alapvető Tudományos Kutatási Program támogatta a Koreai Nemzeti Kutatási Alapítványon keresztül, amelyet az Oktatási Minisztérium finanszírozott (nrF-2019r1c1c1002564, nrF-2019r1F1a1062696 és nrF{8}}r1F1a1059992 sz. támogatás).
Az adatok és anyagok elérhetősége
A jelenlegi vizsgálat során felhasznált és/vagy elemzett adatkészletek ésszerű kérésre elérhetők a megfelelő szerzőtől.
A szerzők hozzászólásai
A SeK, a HYS, az MHW és a HJT felelt a kísérleti tervezésért, az adatgyűjtésért, az adatelemzésért és a kéziratírásért. eYl, YJY, rHK, JHc és TKl végezte a kísérleteket és az adatok elemzését. A dca, a BYP, a JcY, az SKH és az iSK elvégezte az adatelemzést, és kritikai megjegyzéseket fogalmazott meg a vizsgálat teljes folyamatával kapcsolatban. minden szerző elolvasta és jóváhagyta a végleges kéziratot. A HYS és a HJT megerősíti az összes nyers adat hitelességét.
Etikai jóváhagyás és hozzájárulás a részvételhez
minden kísérleti protokollt etikai eljárások és tudományos gondoskodás alapján jóváhagyott a Jeonbuk National University Institutional Animal Care and Use Committee (JBnu 2020-084 jóváhagyási szám; Jeonju, Dél-Korea).
A beteg hozzájárulása a közzétételhez
nem alkalmazható.
Versengő érdekek
A szerzők kijelentik, hogy nincsenek egymással versengő érdekeik.
Hivatkozások
1. Girotra S, chan PS és Bradley SM: Újraélesztés utáni ellátás kórházon kívüli és kórházi szívmegállást követően. Szív 101: 1943–1949, 2015.
2. ROH Yi, Jung WJ, Hwang So, Kim S, Kim HS, Kim JH, Kim TY, Kang HS, Lee JS és Cha KC: A rövidebb defibrillációs intervallum elősegíti a sikeres defibrillálást és újraélesztést. újraélesztés 143: 100-105, 2019.
3. Xanthos T, iacovidou n, Pantazopoulos i, Vlachos I, Bassiakou e, Stroumpoulis K, Kouskouni e, Karabinis a és Papadimitriou l: Az ischaemia-módosított albumin előrejelzi a kardiopulmonális újraélesztés eredményét: kísérleti vizsgálat. újraélesztés 81: 591–595, 2010.
4. Yeh ST, Cawley RJ, aune Se és Angelos MG: oxigénigény a kardiopulmonális újraélesztés (cPr) során a spontán keringés helyreállításához. újraélesztés 80: 951-955, 2009.
5. lópez-Herce J, del castillo J, Matamoros M, canadas S, rodriguez-calvo a, cecchetti c, rodríguez-núnez a és carrillo Á; iberoamerikai Gyermekkori szívmegállás RiBePci tanulmányi hálózat: A halálozással összefüggő spontán keringési tényezők visszatérése gyermekkórházi szívmegállásban: prospektív multicentrikus, multinacionális megfigyeléses vizsgálat. crit care 18: 607, 2014.
6. Mongardon n, Dumas F, S, Grimaldi d, Hissem T, Pène F és cariou a: Szívleállás szindróma: Az azonnali újraélesztéstől a hosszú távú eredményig. ann intenzív terápia 1: 45, 2011.
7. Neymar RW, Nolan JP, Adrie c, Hibiki M, Berg RA, Böttiger BW, Callaway c, Clark rS, Geocadin RG, Jauch EC és munkatársai: Szívmegállás utáni szindróma: epidemiológia, patofiziológia, kezelés és prognózis. az újraélesztéssel foglalkozó nemzetközi összekötő bizottság (American Heart Association, Ausztrál és Új-Zélandi Újraélesztési Tanács, Európai Újraélesztési Tanács, Kanadai Heart and Stroke Foundation, Interamerican Heart Foundation, Ázsia Újraélesztési Tanácsa és Dél-Afrika Újraélesztési Tanácsa) konszenzusos nyilatkozata ); az Amerikai Szívszövetség sürgősségi kardiovaszkuláris ellátási bizottsága; a szív- és érrendszeri sebészet és érzéstelenítés tanácsa; a kardiopulmonális, perioperatív és kritikus ellátásról szóló tanács; a klinikai kardiológiai tanács; és a Stroke Council. 118. példány: 2452-2483, 2008.
8. Nolan JP, Neumann RW, Adrie c, Hibiki M, Berg RA, Böttiger BW, Callaway c, Clark rS, Geocadin rG és munkatársai: Szívmegállás utáni szindróma: epidemiológia, patofiziológia, kezelés és prognózis. Tudományos nyilatkozat a Nemzetközi Kapcsolattartó Bizottságtól az újraélesztésről; az Amerikai Szívszövetség sürgősségi kardiovaszkuláris ellátási bizottsága; a szív- és érrendszeri sebészet és érzéstelenítés tanácsa; a kardiopulmonális, perioperatív és kritikus ellátásról szóló tanács; a klinikai kardiológiai tanács; a Tanács Stroke-ról. újraélesztés 79: 350-79, 2008. DOI: 10.1016/j.resuscitation.2008.09.017
9. Jentzer Jc, változás Md és dezfulian c: Szívizom diszfunkció és sokk szívmegállás után. BioMed res int 2015: 314796, 2015.
10. Madl c és Holzer M: Agyműködés szívmegállás utáni újraélesztés után. curropin crit care 10: 213-217, 2004.
11. Roberts BW, Kilgannon JH, chansky Me, Mittal n, Wooden J, Parrillo Je és Trzeciak S: Többszervi diszfunkció a spontán keringés visszatérése után posztcardialis megállás szindrómában. crit care Med 41: 1492-1501, 2013.
12. Zeiner a, Sunder-Plassmann G, Sterz F, Holzer M, vesztesek H, laggier an és Müllner M: Az enyhe terápiás hipotermia hatása a vesefunkcióra kardiopulmonális újraélesztés után férfiaknál. újraélesztés 60: 253-261, 2004.
13. Yanta J, Guyette FX, Doshi a, Callaway CW és Rittenberg Jc; Szívmegállás utáni szolgáltatás: a veseműködési zavar gyakori a kórházon kívüli szívmegállás utáni újraélesztés után. újraélesztés 84: 1371-1374, 2013.
14. Lee JH, Lee TK, Kim iH, lee Jc, Won MH, Park JH, Ahn JH, Shin Mc, ohk TG, Moon JB és munkatársai: változások a kórszövettani és a tumor nekrózis faktor szintjében patkányok szívében asphyxiás szívmegállás. Clin Exp Emerg Med 4: 160-167, 2017.
15. Lucchino S, Kellum Ja, Bellomo r, Doig GS, Morimatsu H, Morgera S, Schetz M, Tan i, Bouman c, Macedo e és társai; A vese támogató terápia (BeST Kidney) kezdete és befejezése: akut veseelégtelenség kritikus állapotú betegeknél: egy multinacionális, többközpontú vizsgálat. JAMA 294: 813-818, 2005.
16. Mattana J és Singhal Pc: A kardiopulmonális újraélesztést követő akut veseelégtelenség prevalenciája és meghatározói. arch gyakornok Med 153: 235-239, 1993.
17. Sachse a és Wolf G: angiotenzin ii által kiváltott reaktív oxigénfajták és a vese. J am Soc Nephrol 18: 2439-2446, 2007.
18. Baud l és ardaillou r: reaktív oxigénfajták: termelés és szerep a vesében. am J Physiol 251: F765-F776, 1986.
19. rodrigo r, Fernández-Gajardo r, Gutiérrez r, Matamala JM, carrasco r, Miranda-Merchak a és Feuerhake W: oxidatív stressz és ischaemiás stroke patofiziológiája: újszerű terápiás lehetőségek. CNS Neurol Disord Drug Targets 12: 698-714, 2013.
20. Shahzad S, Hasan a, Faizy AF, Mateen S, Fatima n és Moin S: megemelkedett DNS-károsodás, oxidatív stressz és károsodott válaszvédelmi rendszer szívinfarktusban szenvedő betegeknél. Clin Appl Thromb Hemost 24: 780-789, 2018.