A Laminaria Japonica és a Cistanche Tubulosa kivonatok kombinált kezelésének hatékonysága a hajnövekedésben

Kapcsolatfelvétel: emily.li@wecistanche.com

Kyungha Shin1# et al

Mivel a fejbőr hajhullása a közelmúltban még fiataloknál is megnövekedett, súlyosan befolyásolva az egyének életminőségét, ahajnövekedés-Laminaria japonica kivonat (LJE) stimuláló hatásai ésCistanche tubulosakivonatot (CTE) vizsgálták. Miután megerősítették a tüszők anagén fázisát borotválkozás közben, a hím C57BL/6 egereket bőrön keresztül 3% minoxidillal vagy orálisan LJE és CTE kombinációval adtuk be.Cistanche tubulosakivonat)21 napig. A minoxidil elősegítette a haj növekedését, és fokozta a -glutamil-transzpeptidáz (-GTP) és az alkalikus foszfatáz (ALP) aktivitását. Ezenkívül a minoxidil növelte az epidermális növekedési faktor (EGF) és a vascularis endothelialis növekedési faktor (VEGF) szintjét. Az LJE és a CTE együttes adminisztrációja（Cistanche tubulosakivonat)54 mg/kg LJE plusz 162 mg/kg, CTE (Cistanche tubulosakivonat)szinergikus, serkentő hatást fejtett ki a hajnövekedésben, ami a 3 százalékos minoxidilhoz hasonlítható. Az LJE előnyben részesítette az ALP aktivitást, míg a CTE（Cistanche tubulosakivonat)növelte a -GTP és az ALP aktivitást, valamint az EGF és VEGF expressziót. Az in vivo levegőtasak gyulladásos modellje, a karragenán által kiváltott vaszkuláris váladék, valamint a megnövekedett nitrogén-monoxid és prosztaglandin E2 koncentrációk a váladékokban szinergikusan elnyomták az LJE és a CTE együttes adagolását.（Cistanche tubulosakivonat). Ezenkívül a gyulladásos sejtek beszűrődését lényegesen gátolta a kombinált kezelés. Az eredmények arra utalnak, hogy a kombinált orális kezelés LJE-vel és CTE-vel（Cistanche tubulosakivonat)A nem megfelelő adagok és arányok megakadályozzák a hajhullást és javítják az alopeciát, amit részben gyulladáscsökkentő hatásuk közvetíthet.

Kulcsszavak Hajnövekedés, gyulladás, Laminaria japonica,Cistanche tubulosa, kombinált kezelés

Cistanche tubulosakivonatnak számos funkciója van

Az utóbbi időben a fejbőr hajhullása még a fiatalok körében is fokozódik, ami súlyosan befolyásolja az egyén életminőségét. Bár a kopaszság nem tartozik az egészségügyi problémák közé, mély pszichológiai-kényelmetlen szociális stresszt okozhat. Ezért rendkívül érdekes új megelőző és/vagy terápiás anyagok kifejlesztése a hajhullás és a hajnövekedés ellen. A milliárd dolláros piac ellenére van néhány jelenleg is hatékony termék [1].
A szőrtüszők a növekedés (anagén), regresszió (katagén), pihenés (telogén) és hullás (exogén) ciklusos periódusai során alakítják át magukat [2]. A katagén során sok follikuláris sejt programozott sejthalálon (apoptózison) megy keresztül [3], ami csökkenti a tüszők méretét, ahogy a tüszők belépnek a telogénbe. A tüszők kidudorodó régiójában elhelyezkedő, ritkán ciklikus epiteliális őssejtek aktiválása a következő anagén fázis kezdetén tüszőregenerációt eredményez [4]. Az őssejtek utódjai a korai anagén során új follikuláris mátrixot képeznek, és a szőrszál és a belső gyökérhüvely ezekből a viszonylag differenciálatlan mátrixsejtekből származik [5]. Köztudott, hogy a szőrtüsző mérete és az anagén fázis időtartama szabályozza a hajszál méretét (átmérőjét), illetve hosszát. A hajnak ezt a ciklikus növekedését különféle növekedési tényezők szabályozzák.

A minoxidil, a finaszterid és a Propecia kereskedelmi forgalomban kapható a hajhullás lassítására és a hajnövekedés elősegítésére. A minoxidil értágító, amely mellékhatásokat fejtett ki, hogy megkönnyítsehajnövekedés[6], ami tápanyag-ellátó és káliumcsatorna-nyitó tevékenységének köszönhető [7,8]. A minoxidil hatásos az androgén alopecia kezelésére, többek között a kopaszodás kezelésére, bár hatékonysága a kezelés abbahagyása után hónapokon belül eltűnik. Összehasonlításképpen, a finasteridet és a Propecia-t, a jóindulatú prosztata-megnagyobbodás és a prosztatarák terápiáját számos országban regisztrálták androgén alopecia (férfias kopaszság) kezelésére. A Finasteride és a Propecia szintetikus antiandrogének, amelyek gátolják a II-es típusú 5- reduktázt, egy olyan enzimet, amely a tesztoszteront dihidrotesztoszteronná (DHT) alakítja át a hajhagymák alján lévő papilla sejtekben [9].

A Laminaria japonica, az Undaria pinnatifida és a Cladosiphon okamuranus számos országban széles körben elterjedt, a keleti gyógyászatban régóta használják gyógyászati ​​​​készítményekként. Korábbi vizsgálatokban a fukoidánt, egy szulfát poliszacharid komplexet vonták ki és azonosították a hínárokból, és megerősítették, hogy antioxidáns, véralvadásgátló, rákellenes és gyulladásgátló hatással rendelkezik [10,11]. Ezt követően a fukoidán jótékony hatásait gyulladásos betegségekre, ischaemiára, immunrendszeri diszfunkciókra és daganatokra mutatták ki [12,13]. Másrészről,Cistanche tubulosaA kivonatot (CTE) széles körben használják hagyományos gyógyszeres kezelésre Kínában. CTE（Cistanche tubulosakivonat)javítja a véráramlást a vér koleszterinszintjének csökkentésével [14]. A közelmúltban arról számoltak be, hogy a CTE csökkentette a tumornekrózis faktor (TNF-) és az interleukin-4 (IL-4) termelődését, amelyek a gyulladásos folyamatban a nitrogén-monoxid (NO) termelés fő tényezői. [15]. Azt is kimutattuk, hogy a Laminaria japonica kivonatból (LJE) és a CTE-ből származó fukoidán（Cistanche tubulosakivonat)szinergikusan gyengítette a gyulladást in vitro és in vivo [16]. Nevezetesen kimutatták, hogy szoros összefüggés volt a bőr (különösen a könnymirigy) gyulladása és az alopecia között [17]. Így az alopecia kezelésének gyulladáscsökkentő vonatkozásai is kialakulóban vannak [18].
A véráramlást és a gyulladást javító tevékenységek alapján vizsgáljuk az LJE és a CTE kombinációs hatékonyságát.（Cistanche tubulosa kivonat)továbbhajnövekedésés a mögöttes mechanizmus(ok), összehasonlítva a 3 százalékos minoxidillal (Hyundai Pharmaceutical, Szöul, Korea), egy jól ismerthajnövekedésfokozó.

Cistanche tubulosaa kivonat jóHajnövekedés

Anyagok és metódusok

Anyagok

LJE és CTE (Cistanche tubulosakivonat)a Misuba RTech Co., Ltd.-től (Asan, Korea) szereztük be. A Laminaria japonica szárított port 60oC-os tisztított vízben 24 órán át extraháltuk, 0,45 μm-es membránon átszűrtük, fertőtlenítettük és porlasztva szárítottuk.Cistanche tubulosa80%-os etanollal extraháltuk, fertőtlenítettük, betöményítettük és szárítottuk. LJE és CTE (Cistanche tubulosakivonat)4oC-on tartottuk, összekevertük (1:3) és felhasználás előtt tisztított vízben feloldottuk, és szájon át 5 ml/kg mennyiségben adtuk be.
Állatok
Hím C57BL/6 egerek számárahajnövekedésA vizsgálatot és a gyulladásos vizsgálathoz használt hím ICR egereket a Daehan Biolink-től (Eumseong, Korea) vásároltuk, és állandó környezeti feltételek mellett (23±2ºC; 45-65 százalékos relatív páratartalom; 12-órányi fény) tartottuk őket. -sötét ciklus; 150-300 lux fényerő). A pellet takarmány és a tisztított víz ad libitum volt elérhető. Az összes állatkísérletet jóváhagyta a koreai Chungbuk Nemzeti Egyetem (CBNU) Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC), és a CBNU Laboratóriumi Állatkutató Központ szabványos működési eljárásai (SOP) szerint hajtották végre.

Hajnövekedés elleni kezelés

Miután a telogén fázisban lenyírt C57BL/6 egerek (6 hetes, n=8/csoport) hátbőrében homogén rózsaszínű bőrszínt figyeltünk meg az anagén fázis meglétével, a szőrt leborotváltuk [1,19 ,20]. A következő naptól kezdve szemmel látható karcolások nélküli egereket választottunk ki, és szájon át
LJE-vel (18 vagy 54 mg/kg), CTE-vel (54 vagy 162 mg/kg) vagy ezek keverékével (18 plusz 54 vagy 54 plusz 162 mg/kg) kezeltek naponta egyszer 21 napon keresztül. Az alacsony dózisú LJE (18 mg/kg) és CTE (54 mg/kg) 100 mg/test (70 kg) és 300 mg/test becsült humán dózisból származott a testtömeg felszíni transzlációja után (Km{14}). } ember/Km{15}} egér esetén). Nagy dózisú LJE és CTE（Cistanche tubulosakivonat)3-szorosra állítottuk, önmagában vagy kombinációban a maximális szinergikus hatások felmérése érdekében [16]. Minoxidilt (3 százalék, 0,2 ml) naponta egyszer helyileg alkalmaztunk a borotvált bőrre, ugyanabban az ütemezésben, LJE/CTE kezeléssel.

A haj növekedésének durva megfigyelése

A borotválkozás utáni napokon 3-napos időközönként és a kezelés alatt az egereket dietil-éterrel enyhén érzéstelenítettük, és a hátoldalukon fényképeket készítettek. A fényképeken a szőrnövekedés arányát (visszanőtt terület/borotvált terület) számítógépes képelemző rendszerrel (Imageinside, Daejeon, Korea) elemeztük.

A szőrtüszők mikroszkópos vizsgálata

A 14. és 21. napon az egereket dietil-éterrel végzett mély érzéstelenítéssel leölték, és eltávolították a háti bőrüket [1]. A háti bőrt két részre vágták. A szőrtüszők számának és a szövettani leletnek az egyik részének formalin fixált, paraffinba ágyazott szövetmetszeteit (5 μm átmérőjű) hematoxilin-eozinnal megfestettük. A szövet másik részét folyékony nitrogénben lefagyasztottuk az enzimvizsgálathoz és az immunvizsgálathoz.

Az enzimaktivitás vizsgálata

A bőrszövetet 4 térfogatnyi foszfátpufferben (pH 7,4) homogenizáltuk. A homogenizátumot 3, 000 fordulat/perc sebességgel centrifugáltuk 20 percig, és a felülúszót a -glutamil-transzpeptidáz (-GTP) és az alkalikus foszfatáz (ALP) aktivitásának meghatározására használták fel p-nitro-fenil-foszfát (PNPP)-DEAV-val. szubsztrát [1,21].

Cistanche tubulosa

A növekedési faktorok számszerűsítése

Az epidermális növekedési faktort (EGF) és a vascularis endothelialis növekedési faktort (VEGF) enzim-linked immunosorbent assay (ELISA) kittel (R&D Systems, Minneapolis, USA) határoztuk meg a gyártó utasításai szerint [1,22].

Gyulladás kezelésére

Az ICR egereket (7 hetes, n=8/csoport) szájon át LJE-vel (18 vagy 54 mg/kg), CTE-vel kezelték.（Cistanche tubulosakivonat)(54 vagy 162 mg/kg), vagy ezek keveréke (18 plusz 54 vagy 54 plus 162 mg/kg) naponta egyszer 7 napon keresztül [16]. Az LJE és a CTE 1. napján（Cistanche tubulosakivonat)A kezelés során az egerek szubkután 10 ml steril levegőt fecskendeztek a hátoldalukba, hogy egy tasakot képezzenek [16,23,24]. 2 és 5 nap elteltével a tasakot újra befecskendeztük 5 ml levegővel. Egy órával az utolsó LJE és CTE után（Cistanche tubulosakivonat)A kezelés során 1 ml karragenánt (1 százalék sóoldatban; Sigma-Aldrich, St. Louis, USA) vagy vivőanyagát (sóoldat) fecskendeztük a tasakba.

A váladékok elemzése

A levegős tasakot 1 ml hideg sóoldattal mostuk 6 órával a karragenán injekció beadása után, és feljegyeztük az öblítőfolyadék nettó térfogatát [16]. A gyulladásos sejtek, köztük a neutrofilek, monociták és limfociták teljes számát Colter számláló segítségével határoztuk meg.

Az NO és a prosztaglandin E2 (PGE2) koncentrációját Griess-reagenssel (Sigma-Aldrich) és enzim immunoassay-vel (EIA) határoztuk meg Correlate-EIA kit (Assay Designs, Ann Arbor, USA) segítségével [16].

Statisztikai analízis

Az adatok átlag±standard hibaként jelennek meg. A statisztikai szignifikanciát egytényezős varianciaanalízissel, majd posthoc Tukey-féle többszörös összehasonlító teszttel határoztuk meg. P-értékek<0.05 were="" considered="" to="" be="" statistically="">

Eredmények

A Minoxidil (3 százalék), referenciaanyag alkalmazása jelentősen megkönnyítette ahajnövekedésA C57BL/6 egerek esetében a borotvált terület csaknem teljes lefedettsége (92,4 százalék) (1., 2B. ábra) a 21. napon a normál növekedés 29,2 százalékához képest (1., 2A. ábra). Bár kevésbé hatékony, mint a minoxidil alkalmazása , az LJE szájon át történő kezelése is megkönnyítette ahajnövekedés, ami 33,5 és 69,1 százalékos lefedettséget eredményezett 18, illetve 54 mg/kg mellett (1., 2C., 2D. ábra). CTE（Cistanche tubulosakivonat)fokozásában is hatékony volthajnövekedés73,6 és 80,4 százalékos lefedettséget 54, illetve 162 mg/kg-nál (1., 2E., 2F. ábra). Nevezetesen, kombinált terápia nagy dózisú LJE-vel (54 mg/kg) és CTE-vel（Cistanche tubulosakivonat)(162 mg/kg) jelentősen fokozta ahajnövekedésa 12. naptól, összehasonlítható a minoxidil hatásával (1. és 2H. ábra), bár alacsony dózisú LJE (18 mg/kg) és CTE（Cistanche tubulosakivonat)(54 mg/kg) csak a korai fázisban fejt ki szinergikus hatást (1., 2G. ábra).

1. ábra Minoxidillal vagy Laminaria japonica kivonattal (LJE) és/vagy kezelt egerek szőrnövekedésének időbeli lefutásaCistanche tubulosakivonat (CTE). ,

○ normál; ●, Minoxidil (3 százalék ) alkalmazás; △, 18 mg/kg LJE; ▼, 54 mg/kg LJE; □, 54 mg/kg CTE; ■ 162 mg/kg CTE; ◇, 18 mg/kg LJE plusz 54 mg/kg CTE; ◆, 54 mg/kg LJE plusz 162 mg/kg CTE（Cistanche tubulosakivonat).

2. ábra: Minoxidillal vagy Laminaria japonica kivonattal (LJE) és/vagy kezelt egerek szőrnövekedésének reprezentatív eredményeiCistanche tubulosakivonat (CTE) a 21. napon.

A, normál; B, Minoxidil (3 százalék) alkalmazás; C, 18 mg/kg LJE; D, 54 mg/kg LJE; E, 54 mg/kg CTE（Cistanche tubulosakivonat); F, 162 mg/kg CTE; G, 18 mg/kg LJE plusz 54 mg/kg CTE; H, 54 mg/kg LJE plusz 162 mg/kg CTE（Cistanche tubulosakivonat).

A normál szőrtüszőkkel összehasonlítva (3A. ábra) a Minoxidil alkalmazása javította a szőrtüszők integritását, nagyobb tüszőket és vastagabb hajszálakat mutatva (3B. ábra). Ilyen hatásokat találtak az LJE-vel és/vagy CTE-vel kezelt egerek bőrén is（Cistanche tubulosakivonat)(3C-3H. ábra). Különösen az LJE és CTE kombinált kezelésének szőrtüsző-erősítő hatékonysága (Cistanche tubulosakivonat)összehasonlítható volt a minoxidilével.

3. ábra Minoxidillal vagy Laminaria japonica kivonattal (LJE) és/vagy kezelt egerek szőrnövekedésének reprezentatív mikroszkópos eredményeiCistanche tubulosakivonat (CTE) a 21. napon.

A, normál; B, Minoxidil (3 százalék) alkalmazás; C, 18 mg/kg LJE; D, 54 mg/kg LJE; E, 54 mg/kg CTE（Cistanche tubulosakivonat); F, 162 mg/kg CTE（Cistanche tubulosakivonat); G, 18 mg/kg LJE plusz 54 mg/kg CTE; H, 54 mg/kg LJE plusz 162 mg/kg CTE

A minoxidil alkalmazása a normál bőr szintjéhez képest 90-120 százalékkal növelte a szőrtüszőket anagén fázisba indukáló -GTP aktivitását a 14. és 21. napon (4. ábra). Az LJE (54 mg/kg) szintén fokozta az enzimaktivitást, bár nagy eltérések voltak. A CTE hasonló hatásokat fejtett ki, jelentősen fokozva a -GTP aktivitást a 14. napon. Érdekes módon az LJE és a CTE kombinált kezelése（Cistanche tubulosakivonat)tovább növelte az enzimaktivitást, mint amikor a kivonatokat önmagában használták.
Az ALP-aktivitás, amely a csontnövekedés és az angiogenezis markere, szignifikánsan megnövekedett a bőrben a Minoxidil helyi alkalmazását követő 14. és 21. napon (5. ábra). LJE és CTE（Cistanche tubulosakivonat)dózisfüggő módon orális adagolás után is növelte az ALP aktivitást. Nevezetesen, az enzimaktivitás szinergikusan fokozódott az LJE-vel és CTE-vel kombinált kezeléssel.

4. ábra: A minoxidil (MXD, 3 százalék) vagy a Laminaria japonica kivonat (LJE) és/vagyCistanche tubulosakivonat (CTE) (mg/kg-ban) a -glutamil-transzpeptidáz (-GTP) aktivitására a kezelés 14. (A) és 21. (B) napján.

*Szignifikánsan eltér a normál (Nor) kontrolltól (P<>

5. ábra: A minoxidil (MXD, 3 százalék) vagy a Laminaria japonica kivonat (LJE) és/vagyCistanche tubulosakivonat (CTE) (mg/kg-ban) az alkalikus foszfatáz (ALP) aktivitására a kezelés 14. (A) és 21. (B) napján.

*Szignifikánsan eltér a normál (Nor) kontrolltól (P<>

Az EGF elemzésében egy jól ismerthajnövekedésfaktor, a Minoxidil alkalmazása a normál kontrollhoz képest 3,5-szeresére növelte az EGF szintjét mind a 14., mind a 21. napon (6. ábra). Az LJE (18 mg/kg) csak a 21. napon növelte az EGF-szintet, míg a CTE (162 mg/kg) a 14. és 21. napon jelentősen megnövelte a termelését. Érdekes megjegyezni, hogy az LJE és a CTE kombinált kezelése（Cistanche tubulosakivonat)még alacsony dózisok mellett is jelentős szinergikus hatásokat mutatott.

A minoxidil kezelés a VEGF szintjét is 50-80 százalékkal a kontrollérték fölé emelte (7. ábra). Bár az LJE nem volt hatékony, a CTE (Cistanche tubulosakivonat)figyelemre méltó javító hatást fejtett ki. Ezen kívül LJE és CTE kombinált terápiája（Cistanche tubulosakivonat)szinergikus aktivitást mutatott a korai fázisban, a 14. napon.

6. ábra: A minoxidil (MXD, 3 százalék) vagy a Laminaria japonica kivonat (LJE) és/vagyCistanche tubulosakivonat (CTE) (mg/kg-ban) az epidermális növekedési faktor (EGF) tartalmára a kezelés 14. (A) és 21. (B) napján.

*Szignifikánsan eltér a normál (Nor) kontrolltól (P<>

7. ábra: A minoxidil (MXD, 3 százalék), vagy a Laminaria japonica kivonat (LJE) és/vagyCistanche tubulosakivonat (CTE) (mg/kg-ban) a vaszkuláris endoteliális növekedési faktor (VEGF) tartalmára a kezelés 14. (A) és 21. (B) napján.

*Szignifikánsan eltér a normál (Nor) kontrolltól (P<>

A karragenán befecskendezése az ICR egér levegőtasakjába a kontroll szint hatszorosára növelte a tasakban lévő váladék mennyiségét (1. táblázat). Az ilyen fokozott váladékozást jelentősen csökkentette az LJE (18 és 54 mg/kg) vagy CTE kezelés（Cistanche tubulosakivonat)(54 és 162 mg/kg). Nevezetesen, az LJE-vel és CTE-vel kombinált kezelés tovább csökkentette a váladék mennyiségét az egyéni hatásokhoz képest. A gyulladásos sejtek száma drasztikusan megnőtt a karragenán injekció hatására: a neutrofilek, a monociták és a limfociták kontrollszintjének 34,6-szorosára, 4,2-szeresére és 24,9-szeresére (1. táblázat). Az LJE és a CTE azonban（Cistanche tubulosakivonat)szignifikánsan csökkentette a gyulladásos sejteket dózisfüggő módon, amelyben az LJE valamivel jobb volt, mint a CTE（Cistanche tubulosakivonat). A gyulladásos sejtek infiltrációjában várhatóan szinergikus hatást értek el LJE és CTE együttadásával（Cistanche tubulosakivonat).
A gyulladásos sejt infiltrációjával párhuzamosan a tasak NO és PGE2 tartalma is drasztikusan megemelkedett a karragenán injekciót követően (1. táblázat). Az LJE enyhe hatásához képest a CTE（Cistanche tubulosakivonat)jelentősen csökkentette az NO koncentrációt. LJE és CTE kombinált kezelése（Cistanche tubulosakivonat)dózisfüggő módon tovább csökkentette az NO szintet. Hasonló módon a megnövekedett PGE2 szintet szinergikusan elnyomta az LJE és a CTE kombinációs terápiája (1. táblázat).

Vita

Az emberi fejben átlagosan 100,{1}} szőrtüsző található. Egy élet során minden tüsző körülbelül 20-szor nő és hullik, napi 100 szál hajhullást mutatva [25]. A hajhullás, beleértve az alopeciát és a kopaszságot, a férfiak és a nők számára aggasztó állapot, különösen a modern társadalomban. Ezért nagyon fontos olyan új terápiák kidolgozása, amelyek megakadályozzák a hajhullást és elősegítik a haj növekedését. E tekintetben az alternatív gyógyászat felkeltette a nyomozók érdeklődését.

A hím mintájú kopaszság öregedéssel összefüggő morfológiai, hisztokémiai és biokémiai vonatkozásait tuskófarkú makákókon végzett tanulmányok sorozata tárta fel. A férfi mintájú kopaszságban a telogén fázis megnyúlt, míg az anagén fázis lerövidült. Ezért úgy vélik, hogy a hajhullás javítása érdekében nagyon fontos a szőrtüsző-megnyúlás fenntartása, amely a korai anagéntől a középső anagénig jelentkezik [26]. Jelen tanulmányunkban bemutattuk ahajnövekedés-Egy LJE és CTE kombinált kezelés tevékenységének elősegítése（Cistanche tubulosakivonat). A legfontosabb, hogy az LJE (54 mg/kg) és a CTE (162 mg/kg) kombinált felírása kiváló hajnövesztő aktivitást mutatott, a kivonatok orális adagolása ellenére. Figyelemre méltó, hogy a kombinált terápia hatása hasonló volt a tisztított minoxidil nagy koncentrációjú (3 százalékos) bőrön történő alkalmazásához, bár az LJE és a CTE hatóanyagainak koncentrációja.（Cistanche tubulosakivonat)orális beadás után a bőrön nem igazolták.
A kerékpározó egerek bőrében a -GTP aktivitás kifejezett az anagén alatt, de jelentősen csökken a telogén alatt [27]. A bőrben az enzim kizárólag a szőrtüszők külső és belső gyökérhüvelyében található a faggyúmirigyek szintje alatt, amelyekben a -GTP hiányzik [27]. Összehasonlításképpen, az ALP kiemelkedően expresszálódik a hámszövetekben, és az aktivitás növekszik a szőrnövekedés területén. Az ALP, mint angiogén faktor javítja a bőrpapillák tápanyagellátását, és ezáltal vastagságot indukál az anagén során [28]. Megerősítették azonban, hogy az alopeciás bőrben az ALP aktivitás csökkent [21]. A mechanikai vizsgálatban a minoxidil referenciavegyület jelentősen fokozta a -GTP és az ALP aktivitását, ami arra utal, hogy a minoxidil elősegíti ahajnövekedésnemcsak a szőrtüszők indukálásával
az anagén fázisba, hanem az angiogenezis révén a véráramlás javítása révén is. Mivel az LJE megnövelte az ALP aktivitást, feltételezhető, hogy az LJE jótékony hatást fejt ki ahajnövekedésangiogén potenciálján keresztül, amint azt egy korábbi tanulmányból arra a következtetésre jutottak, hogy a fukoidán, az LJE egyik hatóanyaga véráramlást javító hatással rendelkezik [29]. Összehasonlításképpen a CTE（Cistanche tubulosakivonat)fokozta mind a -GTP, mind az ALP aktivitást, ami az anagén fázis indukciójára, valamint a véráramlás javulására gyakorolt ​​hatására utal. A -GTP és ALP enzimekre kifejtett szinergikus hatások alapján úgy gondolják, hogy az LJE és a CTE együttadásával nagyobb szőrnövekedés érhető el.（Cistanche tubulosakivonat).
Jól ismert, hogy a különböző citokinek és növekedési faktorok, köztük az EGF és a VEGF, részt vesznek a haj morfogenezisének és növekedésének szabályozásában [30,31]. Érdekes megjegyezni, hogy a dermális papilla sejtekből származó faktorok kemotaktikus hatást fejtenek ki a környező sejteken, ami viszont ahajnövekedés[32]. Az EGF a szőrtüszők fejlődésével összefüggésben fejeződik ki [33,34]. Bár mind az EGF, mind a receptora (EGFR) expressziója a külső gyökérhüvelyben lefelé szabályozódik a tüszőnövekedés befejeződésével, expressziójuk helyreáll, amikor a follikuláris sejtek belépnek az anagén fázisba. A VEGF fontos szerepet játszik az angiogenezisben a gyulladásos reakció és a tumor kialakulásában [35]. Különösen az érhálózat szorosan kapcsolódik a haj növekedési ciklusához [36-38]. Ezért megerősítést nyert, hogy a VEGF génexpressziója az emberi haj ciklusától függően változik [39].

A jelen tanulmány eredményeiből kiderül, hogy ahajnövekedésA Minoxidil serkentő hatása a potenciális felszabályozó EGF-nek és VEGF-nek köszönhető, amelyek elősegítik a tüszők növekedését és az angiogenezist. Bár az LJE nem befolyásolta a VEGF expresszióját, orális adagolás után növelte az EGF-tartalmat a bőrben. Összehasonlításképpen a CTE（Cistanche tubulosakivonat)hatékony volt mind az EGF, mind a VEGF expressziójában. Nevezetesen az LJE és a CTE（Cistanche tubulosakivonat)additív hatást fejt ki a növekedési faktorok expressziójára.

A szőrszálak megnyúlása mellett a szőrtüszők integritása is jelentősen javult a minoxidillal, LJE-vel és/vagy CTE-vel végzett kezelést követően.（Cistanche tubulosakivonat)a mikroszkópos vizsgálatban. A hajhullás és kopaszodás korai szakaszában humán betegeknél és állatmodelleknél a tüszők integritása károsodott és a szőrszál vastagsága csökkent, míg a regenerálódó szőrszálaknál a tüsző integritása és szárvastagsága helyreállt. Érdekes módon az LJE plusz CTE szájon át történő beadásával ilyen pozitív hatást értek el a haj komponenseinek integritására és újranövekedésére.（Cistanche tubulosakivonat), amelyben a hatás hasonló volt a magas koncentrációjú minoxidil helyi alkalmazásához. Ezért várható, hogy az LJE és a CTE szájon át történő bevételére szolgáló kombináció（Cistanche tubulosakivonat)viszonylag kényelmes recept lehet a minoxidil bőrön keresztüli alkalmazásához képest.
Az egér alopecia modellben gyakori a szteroidérzékeny limfocita infiltráció a szőrtüszők körül, ami hasonló mintát mutat a könnymirigy-gyulladással járó humán alopecia immunterápiájához [17,40]. Jelen vizsgálatban a karragenán által kiváltott bőrgyulladást jelentősen enyhítette az LJE és a CTE（Cistanche tubulosakivonat)kezelés; azaz a vaszkuláris exudáció és a gyulladásos sejtek infiltrációja szinergikusan elnyomott. Kvantitatív analízis során a fő gyulladásos mediátorok, a NO és a PGE 2 lényegében kontrollált volt az LJE és a CTE orális együttadása után.Cistanche tubulosakivonat). Érdekes módon, mivel az LJE nagyobb gyulladáscsökkentő aktivitást mutatott, mint a félig tisztított fukoidán [16], feltételezhető, hogy a fukoidán mellett további hatóanyagok is lehetnek az LJE-ben.

Összességében az eredmények azt mutatják, hogy kombinált orális kezelés LJE-vel és CTE-vel（Cistanche tubulosakivonat)javítja a hajhullást a növekedési faktorok és a kapcsolódó enzimaktivitások fokozásával, részben pedig a gyulladáscsökkentő képesség révén. Ezért javasolt egy LJE-t és CTE-t tartalmazó kombináció（Cistanche tubulosakivonat)A nem megfelelő klinikai dózisok és arányok megfelelő receptek lehetnek a hajhullásban szenvedő betegek számára.

Cistanche tubulosakivonat termékek

Köszönetnyilvánítás

Ezt a kutatást a Chungcheong Vezető Ipari Iroda Gazdasági Régió Vezető Iparági Fejlesztése, a Koreai Technológiai Fejlesztési Intézet (KIAT) és a Tudásgazdasági Minisztérium (MKE), részben pedig a magas hozzáadott értékű élelmiszertechnológiai fejlesztési program támogatta. , Mezőgazdasági, Élelmiszerügyi és Vidéki Minisztérium (MAFRA; támogatási szám: 113034-3).

Összeférhetetlenség

A szerzők kijelentik, hogy ezen eredmények közzétételéhez nincs pénzügyi összeférhetetlenség.

Feladó: "A Laminaria japonica és a Cistanche tubulosa kivonatok kombinált kezelésének hatékonysága a hajnövekedésben"Kyungha Shin1# et al

--- Lab Anim Res 2015: 31 (1), 24-32http://dx.doi.org/10.5625/lar.2015.31.1.24

IRODALOM

1. Kim JS, Kang BS, Park HJ, Kim DY, Hwang SY, Nam SY, Yun YW, Lee BJ. A gyógynövénykivonatok keverékeinek elősegítő hatása a szőrnövekedésre C3H/HeJ egerekben. J Biomed Res 2009; 10. cikk (3): 99-108.
2. Paus R, Cotsarelis G. A szőrtüszők biológiája. N Engl J Med 1999; 341. cikk (7); 491-497.
3. Cotsarelis G. A szőrtüsző: haldoklik a figyelemért. Am J. Pathol 1997; 151. (6): 1505-1509.
4. Cotsarelis G, Sun TT, Lavker RM. A címkét megtartó sejtek a pilosebaceous egység kidudorodó területén találhatók: a follikuláris őssejtekre, a hajciklusra és a bőr karcinogenezisére gyakorolt ​​​​hatások. Cell 1990; 61. (7): 1329-1337.
5. Oshima H, Rochat A, Kedzia C, Kobayashi K, Barrandon Y. Morphogenesis and renewal of hajhagymák felnőtt multipotens őssejtekből. Cell 2001; 104. cikk (2): 233-245.
6. Burton JL, Marshall A. Minoxidil okozta hypertrichosis. Br J Dermatol 1979; 101. cikk (5): 593-595.
7. Meisheri KD, Cipkus LA, Taylor CJ. A minoxidil-szulfát által kiváltott értágulat hatásmechanizmusa: szerepe a megnövekedett K plusz permeabilitásban. J Pharmacol Exp Ther 1988; 245. (3): 751-760.
8. Buhl AE, Waldon DJ, Baker CA, Johnson GA. A minoxidil-szulfát az aktív metabolit, amely stimulálja a hajhagymákat. J Invest Dermatol 1990; 95. (5): 553-557.
9. Kaufman KD, Dawber RP. A finaszterid, egy 2 5 típusú alfa-reduktáz inhibitor, androgenetikus alopeciában szenvedő férfiak kezelésében. Expert Opin Investig Drugs 1999; 8. (4): 403-415.
10. Feldman SC, Reynaldi S, Stortz CA, Cerezo AS, Damont EB. A Leathesia difformis fukoidán frakcióinak vírusellenes tulajdonságai. Fitomedicina 1999; 6. cikk (5): 335-340.
11. Wang J, Zhang Q, Zhang Z, Song H, Li P. A Laminaria japonica-ból kivont alacsony molekulatömegű fukoidán frakciók potenciális antioxidáns és antikoaguláns kapacitása. Int J Biol Macromol 2010; 46. ​​(1): 6-12.
12. Bojakowski K, Abramczyk P, Bojakowska M, Zwoliñska A, Przybylski J, Gaciong Z. A Fucoidan javítja a vese véráramlását patkány vese ischaemia/reperfúziós sérülésének korai szakaszában. J Physiol Pharmacol 2001; 52. (1): 137-143.
13. Li N, Zhang Q, Song J. A Laminaria japonica-ból kivont fukoidán toxikológiai értékelése Wistar patkányokban. Food Chem Toxicol 2005; 43. (3): 421-426.
14. Shimoda H, Tanaka J, Takahara Y, Takemoto K, Shan SJ, Su MH. A Cistanche tubulosa kivonat, egy hagyományos kínai nyers gyógyszer hipokoleszterinémiás hatásai egerekben. Am J Chin Med 2009; 37. (6): 1125-1138.
15. Yamada P, Iijima R, Han J, Shigemori H, Yokota S, Isoda H. A Cistanche tubulosából izolált akteozid gátló hatása az RBL-2H3 és KU812 sejtek kémiai mediátor felszabadulására és gyulladásos citokin termelésére. Planta Med 2010; 76. (14): 1512-1518.
16. Kyung J, Kim D, Park D, Yang YH, Choi EK, Lee SP, Kim TS, Lee YB, Kim YB. A Laminaria japonica fukoidan és a Cistanche tubulosa kivonat szinergikus gyulladáscsökkentő hatása. Lab Anim Res 2012; 28. cikk (2): 91-97.
17. Chee E, Fong KS, Al Jajeh I, Nassiri N, Rootman J. A könnymirigygyulladás és az alopecia areata kapcsolata. Orbit 2015; 34. cikk (1): 45-50.
18. Brzezinska-Wcislo L, Bergler-Czop B, Wcislo-Dziadecka D, LisSwiety A. Az alopecia areata kezelésének új szempontjai. Postepy Dermatol Alergol 2014; 31. (4): 262-265.
19. Hattori M, Ogawa H. Biochemical analysis ofhajnövekedésaz öregedés és az enzimaktivitás szempontjaiból. J Dermatol 1983; 10. cikk (1): 45-54.
20. Lee SH, Lee HJ, Baek IJ, Yon JM, Nam SY, Lee BJ, Yun YW, Kim YB, Hwang SY, Hong JT. A DREAMMO® fejbőrápoló krém hatása ahajnövekedéspromóció C57BL/6 egerek alopecia modelljében. Lab Anim Res 2006; 22. cikk (1): 91-96.
21. Handjiski BK, Eichmüller S, Hofmann U, Czarnetzki BM, Paus R. Alkaline phosphatase activity and localization during the morine hair cycle. Br J Dermatol 1994; 131. cikk (3): 303-310.
22. Cross MJ, Dixelius J, Matsumoto T, Claesson-Welsh L. VEGF receptor jelátvitel. Trends Biochem Sci 2003; 28. (9): 488-494.
23. Shin S, Jeon JH, Park D, Jang JY, Joo SS, Hwang BY, Choe SY, Kim YB. Az Angelica gigas etanolos kivonatának gyulladáscsökkentő hatása a karragén-levegőtasak gyulladásos modelljében. Exp Anim 2009; 58. (4): 431-436.
24. Kim D, Park D, Kyung J, Yang YH, Choi EK, Lee YB, Kim HK, Hwang BY, Kim YB. A Houttuynia cordata szuperkritikus kivonat gyulladáscsökkentő hatása a karragén-levegő tasak gyulladásos modelljében. Lab Anim Res 2012; 28. (2): 137-140.
25. Rebora A. Az androgenetikus alopecia patogenezise. J Am Acad Dermatol 2004; 50. (5): 777-779.
26. Shirai A, Ikeda J, Kawashima S, Tamaoki T, Kamiya T. KF19418, egy új vegyülethajnövekedésin vitro és in vivo egérmodellek népszerűsítése. J. Dermatol Sci 2001; 25. cikk (3): 213-218.
27. Kawabe TT, Kubicek MF, Johnson GA, Buhl AE. A gamma-glutamil-transzpeptidáz aktivitás alkalmazása a szőrciklus és az anagén indukció markereként egér szőrtüszőkben. J Invest Dermatol 1994; 103. cikk (1): 122-126.
28. Hamada K, Suzuki K. Biokémiai indexek értékelése hajciklus markerként C3H egerekben. Exp Anim 1996; 45. cikk (3): 251-256.
29. Park SJ, Lee KW, Lim DS, Lee S. A szulfatált poliszacharid fukoidán stimulálja az emberi zsírból származó őssejtek oszteogén differenciálódását. Stem Cells Dev 2012; 21. cikk (12): 2204-2211.

30. Danilenko DM, Ring BD, Pierce GF. Növekedési faktorok és citokinek a szőrtüsző-fejlődésben és a kerékpározásban: az állatmodellek legújabb meglátásai és a klinikai terápia lehetőségei. Mol Med Today 1996; 2. cikk (11): 460-467.
31. Ozeki M, Tabata Y. In vivo elősegítette az egerek szőrtüszőinek növekedését a növekedési faktorok szabályozott felszabadulásával. Bioanyagok 2003; 24. cikk (13): 2387-2394.
32. Fujie T, Katoh S, Oura H, Urano Y, Arase S. A dermális papilla sejtből származó faktor kemotaktikus hatása a külső gyökérhüvely sejtjein. J. Dermatol Sci 2001; 25. (3): 206-212.
33. Stenn KS, Paus R. A szőrtüsző-ciklus szabályozása. Physiol Rev 2001; 81. (1): 449-494.
34. Chapman RE, Hardy MH Az intradermálisan injekciózott és helyileg alkalmazott egér epidermális növekedési faktor hatása a merinójuhok gyapjúnövekedésére, bőrére és gyapjútüszőire. Aust J. Biol. Sci 1988; 41. (2): 261-268.
35. Dvorak HF, Brown LF, Detmar M, Dvorak AM. Vaszkuláris permeabilitási faktor/vaszkuláris endoteliális növekedési faktor, mikrovaszkuláris hiperpermeabilitás és angiogenezis. Am J. Pathol 1995; 146. (5): 1029-1039.
36. Ellis RA, Moretti G. Katagén szőrtüszőkkel kapcsolatos vascularis mintázatok az emberi fejbőrben. Ann NY Acad Sci 1959; 83: 448-457.
37. Stenn KS, Fernandez LA, Tirrell SJ. A patkány vibrissa szőrtüsző angiogén tulajdonságai a hagymához kapcsolódnak. J Invest Dermatol 1988; 90. cikk (3): 409-411.
38. Yano K, Brown LF, Detmar M. Control ofhajnövekedésés tüszőméretet VEGF-közvetített angiogenezis segítségével. J Clin Invest 2001; 107. (4): 409-417.
39. Lachgar S, Charveron M, Ceruti I. VEGF mRNS indifferens szőrtüszőstádiumok eloszlása ​​fluoreszcencia in situ hibridizációval konfokális lézermikroszkóppal kombinálva. In: Hair Research for the Next Millenium (Van Neste DJJ, szerk.), Elsevier, Amszterdam, 1996; pp 407-12.
40. Freyschmidt-Paul P, Sundberg JP, Happle R, McElwee KJ, Metz S, Boggess D, Hoffmann R. Alopecia areata-szerű hajhullás sikeres kezelése a kontaktérzékenyítő négyzetsav-dibutil-észterrel (SADBE) C3H/HeJ egerekben . J Invest Dermatol 1999; 113. cikk (1): 61-68.