Kapcsolatfelvétel: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

Yu Lixin Chen Xueqiang Wu Qunfeng Dong Weiqin Guo Songhua Yu Jian Feng Wei Yang Lei Fu Yifeng Li Junjie Luo Cheng

1 A Kínai Népi Felszabadító Hadsereg 98. kórháza, Huzhou, Zhejiang 313000

2 Zhejiang Hagyományos Kínai Orvostudományi Egyetem, Hangzhou, Zhejiang 310053

3 Fuyang Hagyományos Kínai Ortopédiai Ortopédiai Kórház, Hangzhou város, Zhejiang tartomány, Hangzhou 311400, Zhejiang, Kína

Absztrakt

Cél: A hatás megfigyeléseCistanchevíz kivonata gyógyulásárólcsontritkulásospatkányok töréseit, és feltárja annak mechanizmusát. Módszerek: Az SPF-minőségű SD nőstény patkányokat véletlenszerűen kontrollcsoportra, modellcsoportra és kezelt csoportra osztottuk, és a kapcsolódó módszerek szerint modelleztük. 24 órával a törés modellezése után a kontrollcsoport és a modellcsoport normál sóoldattal, a kezelt csoport pedig szondát kapott.Cistanchevízkivonat naponta egyszer. 2 hét és 6 hét beavatkozás után vért vettünk a hasi aortából az interleukin kimutatására. TP (IL-1 B) és transzformáló növekedési faktor-B l (TGF-8 1) szintje, törési minták egyidejű gyűjtése, rögzítés után mikro-CT vizsgálat, R0 mérés I kalluszcsont térfogatfrakció (BV/TV) és egyéb kapcsolódó paraméterek Mészmentesítés, víztelenítés és beágyazódás után viasztömbökké készült a felhasználásra. Eredmények: 6 héttel az oszteoporózis modell létrehozása után a modellcsoportban és a kezelt csoportban a patkányok csontsűrűsége alacsonyabb volt, mint a kontrollcsoporté (P<0.05), but="" there="" is="" no="" significant="" difference="" between="" the="" treatment="" group="" and="" the="" model="" group.="" although="" the="" bone="" density="" of="" the="" treatment="" group="" is="" still="" lower="" than="" that="" of="" the="" control="" group="" after="" 2="" weeks="" and="" 6="" weeks="" of="" intervention,="" it="" is="" significantly="" higher="" than="" that="" of="" the="" model="" group=""><0.05). micro-ct="" scan="" shows="" the="" treatment="" group="" bv/tv,="" tb.="" sp,="" tb.="" n,="" tb.="" th,="" smi="" was="" better="" than="" the="" model="" group="" at="" 2="" and="" 6="" weeks="" after="" the="" intervention,="" and="" the="" bv/tv,="" tb.="" sp,="" smi="" parameters="" of="" the="" control="" group="" and="" the="" treatment="" group="" were="" not="" different="" from="" those="" of="" the="" treatment="" group.="" obviously,="" the="" micro-ct="" parameters="" of="" the="" model="" group="" at="" 2-time="" points="" were="" inferior="" to="" the="" control="" group.="" after="" 2="" weeks="" and="" 6="" weeks="" of="" intervention,="" comparing="" the="" serum="" ilt="" b="" and="" tgf-p="" 1="" levels="" of="" the="" 3="" groups,="" it="" was="" found="" that="" the="" il-1="" p="" levels="" of="" the="" treatment="" group="" were="" lower="" than="" those="" of="" the="" other="" two="" groups="" at="" 2="" weeks.="" at="" 6="" weeks,="" the="" il-1="" p="" levels="" of="" the="" treatment="" group="" were="" higher="" than="" those="" of="" the="" other="" two="" groups.="" the="" control="" group,="" but="" still="" significantly="" lower="" than="" the="" model="" group=""><0.05); in="" terms="" of="" tgf-b="" 1="" level,="" the="" treatment="" group="" was="" higher="" than="" the="" model="" group="" and="" the="" control="" group="" at="" 2="" and="" 6="" weeks,="" and="" there="" was="" no="" statistical="" difference="" between="" the="" control="" group="" and="" the="" control="" group.="" significance.="" conclusion:="" according="" to="" the="" analysis="" of="" bone="" mineral="" density,="" micro-ct="" scan="" parameters,="" and="" serum="" il-1="" b="" and="" tgf-b="" 1="" levels,="" it="" is="" found="" that="" the="" aqueous="" extract="" of="">Cistancheelősegítheti a gyógyulástcsontritkulásostörések, és mechanizmusa összefüggésben lehet annak gátlásávalcsontritkulásostörések. A patkányszérum után IL{0}} B és elősegíti a TGF-8 1 szekrécióját, ami javíthatja a csontritkulást és elősegítheti a törések gyógyulását.

Kulcsszavak: csontritkulásos törés, Cistanche, törésgyógyulás, patkány

A csontritkulás egy olyan betegség, amelyben a csontsűrűség csökken, a csontszövet finom szerkezete megsemmisül, és a csontok törékenysége megnő. A betegek mindennapi életük során enyhe külső erő hatására töréseket okozhatnak. Ez egy gyakori klinikai és gyakran előforduló betegség. Ezen túlmenően az ilyen típusú törések többnyire idős betegeknél fordulnak elő, gyakran más betegségekkel is társulnak, és a törések többsége aprított, rossz stabilitású, és néha a törések lassú vagy nem egyesült gyógyulása következik be, valamint magas a rokkantság és a halálozási arány. Kezelése jelenleg főként műtéttel, kézi helyreállítással és csontritkulás elleni kezeléssel történik. Hiányoznak a célzott kezelési gyógyszerek a betegek számáracsontritkulásostörések. A hagyományos kínai orvoslás nagy múltra tekint vissza a csontritkulás kezelésében, és pozitív hatással bír. Számos hagyományos kínai gyógyszerről bebizonyosodott, hogy javítja a csontokat. A szegénység elősegítheti a törések gyógyulását is. A Rongrongot általában a vese yang táplálására szolgáló reprezentatív gyógyszerként használják, és a májat és a vesét is táplálja. A hagyományos kínai orvoslás úgy véli, hogy a vese irányítja a csontot, és a törések kezelése is elválaszthatatlan a vesétől és az esszenciától. A modern farmakológia azt találta, hogy a húshamu bizonyos ösztrogén hatással is rendelkezik. Ez a tanulmány csontsűrűség mérést, mikro-CT-t és szérum interleukin-13 (IL-10), transzformáló növekedési faktor-P KTGF-P 1) szintjének megfigyelését és a hússérvpaszta vízkivonatát kívánja használni a gyógyulásacsontritkulásostörések patkányokban

Cistanche

1 Anyagok és módszerek

1.1 Kísérleti állatok és reagens berendezések: 52 SPF nőstény SD patkányt, amelyek súlya 21{13}}~250 g, a Zhejiang Hagyományos Kínai Orvostudományi Egyetem Állatkísérleti Központjában nevelnek. Komplex jód, Hangzhou Lonzo Medical Disinfectant Co., Ltd., tételszám: 20160720; Penicillin, North China Pharmaceutical Co., Ltd., tételszám: F3117217; IL-18 készlet (tételszám: 20160715), TGF-8 1 készlet (tételszám: 20160722); Kettős energiás röntgen csontsűrűség-szkenner, 0STE0C0RE2; Micro-CT, Skyscan1176O

1.2 KitermeléseCistanchevízkivonat: áztassa be a földetcistanche(Zsejiangi Hagyományos Kínai Orvostudományi Egyetem Gyógyszergyár) 10-szer ultratiszta víz 0,5 órán át, serpenyős főzet 1,5 órán keresztül, ismételje meg az extrakciót 2-szer, és a kevert gyógyászati ​​folyékony forgógőzölő koncentrátum 1,5 g-os koncentrációig /ml és hűtőszekrényben tároljuk 4 fokon későbbi felhasználásra.

1.3 Modellezés előkészítése: A pontok a következők.

1.3. 1 Csontritkulás modell: A patkányokat adaptívan neveltük 1 hétig a modellezés előtt, és véletlenszerűen kontrollcsoportra, modellcsoportra és kezelt csoportra osztották, 16 patkányból, 18 patkányból és 18 patkányból, és mindegyik csoport a vizsgálat időpontja alapján történt. 2 hét és 6 hét. Mindegyiket két csoportra osztották. Mind a kezelt csoportot, mind a modellcsoportot 1 százalékos pentobarbitál-nátriummal (0,4 ml/100 g) érzéstelenítettük, a bőrt elaltattuk, fertőtlenítettük, leterítettük, majd a bőrt levágtuk. A patkány kétoldali petefészkét eltávolítottuk. A kontrollcsoportnak csak egy bemetszése volt. Nem

A petefészkek eltávolítása

1.3. 2 Törési modell: 6 héttel az oszteoporózis modell elkészítése után a törésmodell készül. Miután az egyes csoportokban lévő patkányokat elaltattuk, megmérjük a középső combcsont csontsűrűségét. , Bemetszés, a középső combcsont haránttörésének modellezése, rögzítése 1 mm-es Kirschner dróttal, sterilizálva és varrva a bemetszés bőrét

1.4 Gyógyszeres beavatkozás: A modellezést követően a combcsont röntgensugaras kimutatását végeztük, a modell előkészítésben kudarcot szenvedő patkányokat elimináltuk, és a modellezés után 80,000 egység penicillint adtak intramuszkulárisan a fertőzés megelőzésére. A műtét után 24 órával a kezelt csoport hússérvpaszta vizes kivonatát kapta (koncentráció 1,5 g/ml, lg/kg, naponta egyszer). A kontrollcsoport és a modellcsoport azonos mennyiségű normál sóoldatot kapott.

1.5 Mintagyűjtés: Patkánymintákat gyűjtöttünk 2 és 6 héttel a beavatkozás után. 1 százalékos pentobarbitál-nátrium érzéstelenítés után 5-10ml vért vettünk a hasi aortából a szérum elkészítéséhez, és -20B hűtőszekrényben tároltuk. tartalék. Ezután a patkányokat leöltük, és a combcsonttörési mintákat összegyűjtöttük, és 72 órára 10%-os semleges formaldehidbe helyeztük.

1.6 Vizsgálati mutatók: A pontok a következők.

1.6. 1 Csont ásványianyag-sűrűség: A csontritkulás modellt követő összes patkányt elaltattuk a törésmodell előtt, majd megmértük a középső combcsont csontsűrűségét. A három patkánycsoport 2 és 6 hetes beavatkozás után mintát kapott, majd a mintákat 72 órán keresztül rögzítettük, majd ismét megmértük a csontsűrűséget.

1.6. 2 Mikro-CT: A mikro-CT-vizsgálatot a minta 72 órás rögzítése után hajtják végre, 200 képpel a törés vége felett és alatt, mint az érdeklődési terület (R01), szkennelési szög 360 fok, áram 555uA, feszültség 42kV, szűrő Al 0,2mm, felbontás 8,73um, a kallusz háromdimenziós képrekonstrukciója és elemzése után. A kimutatási paraméterek a következők: csonttérfogat frakció BV/TV, csont trabekuláris modell faktor (Tb. Pf); strukturális modell index (SMI), stb."

1.6.3 A szérum IL-1P és TGF-P1 meghatározása: Olvassa ki a patkányszérumot a hűtőszekrényből -20 fokon, és végezze el a kimutatást lépésről lépésre az IL-13 szerint. és a TGF" 1 készlet utasításait.

1.7 Statisztikai módszerek: a feldolgozáshoz használja az SPSS.19 statisztikai elemző szoftvert. A kísérleti adatokat átlag ± standard deviáció (G±s) és a három patkánycsoport csontsűrűségében fejeztük ki. Mikro-CT paraméterek JL-1 P A JGF- P 1 szinteket egyirányú varianciaanalízissel átlagoljuk, és a csoportok páronkénti összehasonlítását alkalmazzuk. Ellenőrzés, az ellenőrzési szint P<0.>

2 eredmény

2.1 A három csoport csontsűrűsége: lásd az 1. táblázatot.

1. táblázat Az egyes patkánycsoportok középső combcsontjának csontsűrűségére vonatkozó eredmények (x±s, g/cm²)

Megjegyzés: A modellcsoporthoz képest *P<0.05; compared="" with="" the="" control="" group.△=""><>

2.2 Mikro-CT kétdimenziós keresztmetszet: a szagittális kétdimenziós keresztmetszet minden csoportban minden időpontban kiválasztja a combcsont hossztengelyének képeit (lásd 1. ábra), és a vízszintes kétdimenziós keresztmetszet metszet a törésvonal alatti 100. képet választja ki az összehasonlításhoz (2. ábra) ), az ábráról látható, hogy az egyes csoportok kallusza az idő múlásával fokozatosan növekedett, de a törés után 6 héttel különböző mértékben képlékeny volt; ugyanakkor látható, hogy a kontrollcsoportban a kallusz nagy, a kalluszkéreg vastag volt és 6 hét után átkúszott a törésvonalon, míg a modellcsoportban a kallusz Kevesebb csont volt a kalluszban 2 hét, a kalluszkéreg pedig 6 hét után laza volt. Bár a kallusz térfogata a kezelt csoportban nem volt nagy 2 hét után, a kallusz csonttömege nagyobb volt, mint a modellcsoportban. A bőrkeményedés 6 hét után jobban formálódott. És a törésvonal nem nyilvánvaló.

Kontroll csoport Modell csoport Kezelési csoport

1. ábra Az egyes csoportok középső combcsontjának sagittalis keresztmetszete

2. ábra Az egyes csoportok középső combcsontjának vízszintes metszete

2.3 Mikro-CT háromdimenziós rekonstrukció: a combcsont törött végén lévő kallusz háromdimenziós rekonstrukciója a 3. ábrán látható. A 3. ábrán látható, hogy a kallusz a csonthártya mentén alakult ki a törés mindkét végén vonal 2 héttel a törés után minden csoportban a törési szálak mindegyik csoportban még tiszták voltak, különösen a modellcsoportban és a kezelt csoportban, míg a kontrollcsoportban a kallusz vastag és vastag volt, többnyire lemezekkel 6 héttel a törés után . A trabekuláris csontok voltak túlsúlyban és a törésvonal eltűnt, míg a modellcsoport laza csontok és a törésvonal elmosódott, de a kezelt csoportban több kalluszcsont, szabályos és vastag trabekuláris csont volt, és a törésvonal nem volt nyilvánvaló.

3. ábra: R0I kallusz háromdimenziós rekonstrukciója a törött végén

2.4 Mikro-CT paraméterek: Használjon szoftvert a törött végén lévő kallusz elemzéséhez. A kapcsolódó paramétereket lásd a 2. táblázatban.

2. táblázat Az egyes csoportok Micro-CT paramétereinek összehasonlítása (x±s)

Kontroll csoport Modell csoport Kezelési csoport

Megjegyzés: A modellcsoporthoz képest *P<0. 05;="" compared="" with="" the="" control="" group.=""><0.>

2.5 Szérum IL-1 P .TGF-P 1 szint: lásd a 3. táblázatot.

3. táblázat Az IL-1 P JGF-0 1 szintjének összehasonlítása az egyes csoportokban G±s, n=8)

Megjegyzés: A modellcsoporthoz képest *P<0.05; compared="" with="" the="" control="" group,=""><0.05 0="" 3="">

Az elmúlt években a hagyományos kínai gyógyszerek, a Yinyangdian, a Drynaria fortune és vegyületei (Qing's Pills, Liuwei Dihuang Pills stb.) a klinikai gyakorlatban bebizonyították, hogy jelentősen javítják a csontritkulást. Ezt a fajta kínai orvoslást és vegyületeket többnyire a máj és a vese táplálására használják. Ez összhangban van a vese táplálásának és az izmok megújításának elvével a törés középső és késői szakaszában. "Tíz nap. A húsos végtagpaszta először a "Shen Nong's Materia Medica"-ban jelent meg. , Meleg természetű, a vese táplálása és a yang erősítése, az esszencia és a csontvelő feltöltése, a vér táplálása és a szárazság hidratálása, valamint a kellemes szín és az élet meghosszabbítása.

Ebben a vizsgálatban a kezelt csoport csontsűrűsége magasabb volt, mint a modellcsoporté 2 és 6 hetes beavatkozás után (P<0.05). micro-ct="" scan="" bv/tv="" parameters="" showed="" the="" results="" and="" bone="" mineral="" density="" of="" the="" treatment="" group="" at="" two="" time="" points="" after="" the="" intervention="" the="" measurement="" results="" are="" consistent,="" and="" bv/tv="" is="" an="" important="" indicator="" for="" the="" evaluation="" of="">csontritkulásostörés gyógyulása. Közvetlenül tükrözi a kallusz csonttartalmát. Ez azt mutatja, hogy a Rouganrong hatással lehet az oszteogenezisre. Az elemzés hatékony lehet a hússérv pasztában. Az összetevők a BMP2-t fokozó hatást fejtenek ki, a BMP2 pedig a TGF-8 család egyik tagja. És ezt az eredményt a Micro-CT vizsgálat egyéb paraméterei is megerősítik (Tb. Spjb. N, Tb. Th. SMI). Tuberkulózis. Az Sp és SMI a kallusz biomechanikai tulajdonságait tükrözik, és a kezelt csoport értékei szignifikánsan jobbak, mint a modellcsoporté, ez is arra utal, hogy a Roudongrong javítja a csontvesztést, elősegíti az oszteogenezist és gyorsítja a törések gyógyulását.

Ami a szérum IL-1B és JGF-P 1 szintet illeti, 2 hét és 6 hét beavatkozás után azt találták, hogy a kezelt csoport IL-1P szintje alacsonyabb volt, mint a másik kettőé. csoportok 2 hetesen és 6 hetesen. Bár a kezelt csoport IL-1 B szintje magasabb volt, mint a kontrollcsoporté, mégis szignifikánsan alacsonyabb volt, mint a modellcsoporté (『<0.05); while="" the="" tgf-p="" 1="" level="" of="" the="" treatment="" group="" was="" higher="" than="" the="" model="" group="" and="" the="" control="" group="" at="" 2="" and="" 6="" weeks,="" and="" there="" was="" no="" statistically="" significant="" difference="" from="" the="" control="" group="" the="" level="" of="" il-1="" p="" directly="" affects="" the="" differentiation="" and="" activity="" of="" osteoclasts.="" an="" increase="" in="" its="" level="" will="" promote="" bone="" resorption="" and="" inhibit="" the="" proliferation="" and="" differentiation="" of="" osteoblasts.="" jhtgf-p="" 1="" is="" closely="" related="" to="" the="" proliferation,="" differentiation,="" and="" migration="" of="" osteoclasts.="" it="" has="" the="" effect="" of="" promoting="" cartilage="" and="" bone="" callus="" formation="" ⑵="" and="" accelerating="" the="" shaping="" of="" bone="" callus.="" this="" suggests="" that="">Cistanchetudjavítja a csontvesztést, elősegítik az oszteogenezist és felgyorsítják a törések gyógyulását. Ez csökkentheti az IL-13 szintjétcsontritkulásoseltörik a patkányokat és gátolják a törést. Csontsejtek aktivitása megvalósul; emellett összefüggésben lehet azzal is, hogyCistanchenövelheti a TGF-B 1 szintjét törött patkányokban, elősegítheti az oszteogén differenciálódást és a kallusz érését és formálódását.

Összefoglalva, a csontsűrűség, a mikro-CT-vizsgálati paraméterek és a szérum IL-1 P, TGF"1 szintjének elemzése alapján azt találták, hogy a vizes kivonatCistanchetudjavítja a csontvesztéstéselősegíti a csontritkulás okozta törések gyógyulását. A mechanizmus összefügghet ezzel. Gátolja a szérum ILT 8 szekrécióját és elősegíti a TGF-B 1 szekrécióját patkányokbancsontritkulásostörések, ezáltal javítja a csontritkulást és elősegíti a törések gyógyulását.

4 Hivatkozások

[1] Ma Yuanzheng, Wang Yipeng, Liu Qiang és mások. Irányelvek a csontritkulás diagnosztizálására és kezelésére Kínában időskorban (2018) [J], Chinese Journal of Osteoporosis, 2018, 24(12): 1541-1567.

[2] Zhu Gang, Sun Haibin, Xu Gang és mások. A hússérv alkoholkivonatának terápiás hatása és mechanizmusa oszteoporózisban szenvedő petefészek-eltávolított patkányokon [J]. Journal of Jilin University (Medicine Edition), 2018, 44(1): 68-72.

[3] Karvande A, Khedgikar V, Kushwaha P, et al. A Dalbergia sissoo-ból származó szívfa kivonat elősegíti a törések gyógyulását és alkalmazását petefészek-eltávolítás által kiváltott csontritkulásos patkányokban [J]. Journal of Pharmacy and Pharmacology, 2017, 69(10): 1381-1397.

[4]Kevin 0'Neill, Christopher MS, Nicholas AM és mások. Mikro-számítógépes tomográfiás vizsgálat a törések gyógyulásának progressziójáról egerekben[j]. Bone, 2012, (6): 1357-1367.

[5] Yao Xinmiao, Shi Xiaolin, Wang Jian és mások. Szakértői konszenzus az elsődleges csontritkulás fokozatos diagnózisáról és kezeléséről a hagyományos kínai orvoslás segítségével Zhejiang tartományban (2017) [J], Zhejiang Journal of Traditional Chinese Medicine, 2018, 53(4): 237- 241.

[6] Ma Meng, Zhang Zhiguo, Ma Xiaohui. Kutatási előrehaladás a csontritkulás megelőzésében és kezelésében egyedi és összetett kínai gyógyszerekkel[J]. Kínai orvosi útmutató, 2018, 20(8) =477-481.

[7] Zhang Yuequan, Zheng Danhong, Xu Jianfeng és mások. A sivatagi húscsalád püré hatása a BMP-2 fehérje expressziójára gyorsan öregedő csontritkulásos egerekben[J]. Ningxia Medical Journal, 2014, 36(12): 1114-1116