Cistanche Deserticola tartalmú szérum által irányított csontmezenchimális őssejtek (BMSC-k) oszteoblasztokba történő irányított differenciálódásának kísérleti vizsgálata

ZENG Jian chun, FAN Yue guang＊, LIU Jian ren, ZENG Yi rong, YI Chun zhi, YAN Liang. ＊

A Guangzhou Hagyományos Kínai Orvostudományi Egyetem első társkórháza, Guangzhou 510405, Guangdong, Kína

Kapcsolatba lépni:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Cistanchemegakadályozhatjacsontritkulásésnépszerűsítcsontsejt növekedés

ABSZTRAKT

Cél: A Desertliving által irányított BMSC-k iránydifferenciálásának tanulmányozásaCistanche(Herba Cistanches), amely élénkíti a vesét. Módszerek: Az elsődleges BMSC-ket teljes csontvelő-tenyésztéssel nyertük ki, és tripszin emésztéssel a negyedik generációig tenyésztettük, majd két hatlyukú lemezre oltottuk be 5×106 sejt/ml mennyiségben. Az összes lemezt felosztottuk három csoport üres csoportként, a Dexamethasone (DXM) csoport és a Herba Cistanches csoport, mindegyik csoportban három lyuk, a táptalajt a 2. napon cseréltük. Az üres csoportot 10% FBS-t tartalmazó L-DMEM-re cseréltük. A DXM csoportot 10 mmol ／ L nátrium-glicerofoszfátot, 0．1 µmol ／ L DXM-et és 50 mg ／ L C-vitamint tartalmazó táptalajra cseréltük. A HerbaCistanchescsoportot 10% Herba Cistanches-t és L-DMEM-et tartalmazó vérszérumot tartalmazó táptalajra cseréltük. A hatlyukú lemezek egyikét alkalikus foszfatázzal (AKP) festették meg a tizedik napon, a másikat alizarin Bordeaux-val a huszadik napon. Eredmények: A tizedik napon a DXM csoport és a Herba Cistanches csoport ALKP festése pozitív volt; a 12. naptól fehér kalciumcsomó volt látható a kutak felszínén; amely alizarin a huszadik napon pozitívan festődött.

Következtetés: A Herbát tartalmazó táptalajCistanchesképes irányítani a BMSC-ket az oszteoblasztokká való differenciálódásra, ami kedvező kilátásokkal kecsegtet az oszteoporózis és a csonttörések szétválásában.

KULCSSZAVAKCistanchedeserticola; Csontvelő; mezenchimális őssejtek; Osteoblasztok; Sejtdifferenciálódás

A mesenchymális őssejtek (MSC) egyfajta pluripotens felnőtt őssejtek, amelyek főként a csontvelőben, de az embrionális időszakban a mesenchymális eredetű extraosseous szövetekben is megtalálhatók, például bőrfibroblasztokban, zsíros őssejtekben, vázizomzati szatellitsejtekben és vérerek Endothelsejtek és így tovább. A csontvelői MSC-k (BM SC) a csontvelő-sztróma összetevői. Izolálásuk és in vitro tenyésztésük után bizonyos indukáló körülmények között képesek oszteoblasztokká, chondrocytákká, idegsejtekké, zsírsejtekké, kardiomiocitákká stb. differenciálódni. A csontszövetsebészetben a magsejtek fő forrásai az oszteoblasztok és a BMSC-k. Bár az oszteoblasztok jó oszteogén aktivitással rendelkeznek, korlátozott forrásaik vannak, nehéz elkülöníteni és nagy mennyiségben beszerezni, és nem rendelkeznek elegendő potenciállal az in vitro nagy léptékű terjeszkedésre, ami nehéz kielégíteni a csontszövet-mérnöki alkalmazások klinikai igényeit. A BMSC-k nemcsak jó oszteoblaszt differenciálódási potenciállal rendelkeznek, hanem magas növekedési potenciállal is rendelkeznek. A csontaktivitás, az erős proliferációs potenciál és a kényelmes forrás kielégítheti az autológ szövetsebészetet, és a kutatás fókuszába kerülhet.

A kínai orvoslás úgy véli, hogy a vese szabályozza a csontokat és csontvelőt termel. A modern farmakológiai vizsgálatok kimutatták, hogy a vese-tonizáló gyógyszerek különböző mértékű izgalmat okoznak az agyalapi mirigy-mellékvese-ivarmirigy rendszerben, és szorosan kapcsolódnak a csontanyagcseréhez. Az ösztrogénnek az oszteogenezist fokozó hatása van.

A kínai orvoslás úgy véli, hogy a vese szabályozza a csontokat és csontvelőt termel. A modern farmakológiai vizsgálatok kimutatták, hogy a vese-tonizáló gyógyszerek különböző mértékű izgalmat okoznak az agyalapi mirigy-mellékvese-ivarmirigy rendszerben, és szorosan kapcsolódnak a csontanyagcseréhez. Az ösztrogén fokozhatja a csontképződést, az androgén pedig elősegítheti a fehérjeszintézist, elősegítheti a csontmátrix növekedését, valamint a kalcium és foszfor lerakódását. hatás.Cistanches(HerbaCistanches) tartalmaznak fenetil-alkohol összglikozidokat, ergot glikozidokat és a betaint mind androgénszerű hatással. Ez a kísérlet a hagyományos kínai orvoslás vese-tonizáló hatását kívánja tanulmányozniCistanche- szérumot tartalmazó szérum a BMSC-k oszteoblasztokká történő differenciálódásáról.

Vita

Cistanchegyógyszeres szérum BMSC-ket indukál. A Cistanche táplálja a közepét, élénkíti a májat, táplálja a vesét, erősíti a jangot, hidratálja a beleket és hashajtó. A modern farmakológiai vizsgálatok kimutatták, hogy a vese-tonizáló gyógyszerek különböző mértékű izgalmat okoznak az agyalapi mirigy-mellékvese-ivarmirigy rendszerben, és szorosan kapcsolódnak a csontanyagcseréhez. Az ösztrogén fokozhatja a csontképződést, az androgén pedig elősegítheti a fehérjeszintézist, elősegítheti a csontmátrix növekedését, valamint a kalcium és foszfor lerakódását. Szerep [1]. A Cistanche-ban található összes fenil-etanol-glikozid, ergoszterozid és betain androgénszerű hatást fejt ki. Ez a kísérlet azt találta, hogy a gyógyszeres szérum aCistancheA BMSC-k oszteoblasztokká történő differenciálódását indukálhatják. Bár egyetlen kínai orvoslást vagy összetett kínai orvoslást alkalmaztak a BMSC-k oszteoblasztokká történő differenciálódásának indukálására, a specifikus molekuláris mechanizmusról még nem számoltak be. A proteomikai kutatások e folyamatban elemezhetik a kapcsolódó proteomikai különbségeket, és létrehozhatják a funkcionális proteomikát, a vesét szabályozó csont elméletének új értelmezése céljából.

A sejtsűrűség fontos szerepet játszik a BMSC-k oszteoblasztokká történő differenciálódási folyamatában. A csontcsomók kialakulásához nemcsak oszteoinduktív szerek szükségesek, hanem a beoltott sejtek sűrűségétől is függ. A sejtsűrűségnek el kell érnie egy bizonyos sűrűséget, és a sejtek összeolvadhatnak. Osteoblasztok differenciálódása. Ebben a kísérletben, amikor a 4. generációs sejtek több mint 90 százalékos összefolyásig szaporodnak, az induktort hozzáadjuk a tenyésztéshez. Ha a sejtsűrűség túl alacsony, a sejtek lassan szaporodnak, és nincs hajlam az aggregációra és növekedésre. Ugyanabban az egyenetlen sejtsűrűségű tenyészetben a sejtsűrű terület tisztázatlan sejthatárokkal és elmosódott szerkezettel rendelkezik, és a sejtek csomókká aggregálódnak. Az AKP festődés és az alizarin vörös festődés pozitív, de az alacsonyabb sejtsűrűségű területen nincs sejtsűrűség. A sejtek csomókká aggregálódtak, és az AKP festés és az Alizarin Red festés negatív volt. Ezért a mikrohordozók alkalmazása a csontszövet-technológiában hatékonyabb in vitro tenyésztési módszerekkel, mint például a háromdimenziós tenyésztéssel (RCCS), több sejt nyerése érdekében, jelentős hatással van a sejttranszplantáció sikerére.

A klinikai jelentőségeCistanchegyógyszeres szérum a BMSC-k kiváltására A csontszövet-sebészet széles klinikai alkalmazási lehetőségekkel rendelkezik, és a modern ortopédia kutatási központjává vált. A BMSC-k jelenleg a legideálisabb magsejtek a csontszövet-fejlesztéshez. A hatásukkal kapcsolatos kutatások központi feladata az, hogy a lehető legegyszerűbb körülmények között hogyan lehet őket oszteoblasztokká differenciálni, majd érett csontsejtekké alakítani.

Jelenleg a BMSC-k irányított differenciálódására általánosan használt induktorok dexametazonból, C-vitaminból és nátrium-glicerofoszfátból állnak. Az in vitro tenyészetben a dexametazon gátló hatással van a sejtproliferációra [2], amint az ebben a kísérletben látható, klinikailag a dexametazonnak olyan mellékhatásai vannak, mint a fertőzés, az oszteonekrózis és a csontritkulás, ami korlátozza a BMSC-k átültetését. A szervezetben induktorként történő alkalmazás után. A Cistanche élénkíti a vesét, erősíti a csontokat és az izmokat. Ez a kísérlet azt találta, hogy a Cistanche elősegíti a BMSC-k proliferációját, és indukálja a BMSC-k oszteogénké történő differenciálódását. A hosszú távú klinikai alkalmazás során a Cistanche nemkívánatos reakcióját nem észlelték, és in vivo induktorként történő alkalmazásának széles körű klinikai alkalmazási lehetőségei vannak.

Röviden, a BMSC-kkel, mint a csontszövet-fejlesztéshez szükséges magsejtekkel kapcsolatos jelenlegi kutatások többsége még mindig kísérleti stádiumban van. A jelenlegi kutatások középpontjában az áll, hogy viszonylag rövid időn belül elegendő mennyiségű BMSC-t nyerjünk, és egyszerű módszerekkel ösztönözzük őket osteogénsá történő differenciálódásra. Bár a Cistanche cistanche mechanizmusa, amelynek feladata a vese élénkítése, valamint a csontok és izmok erősítése, a BMSC-k oszteogén differenciálódásának indukálásában, még további tanulmányozásra szorul, a BMSC-k differenciálódási indukálójaként való felhasználása késleltetett egyesülés, nem egyesülés kezelésére. , és az MSC-transzplantációval járó törések oszteonekrózisának fényes jövője van.

Cistanchemegakadályozhatjacsontritkulásés előmozdítanicsontsejtnövekedés