A formononetin javítja a kísérleti autoimmun prosztatagyulladást a JAK/STAT1 gátlásával, a Th1 aktiváció elnyomásával és a makrofág polarizáció helyreállításával
Dec 10, 2025
Eredmények
2.1 FN enyhíti a prosztatagyulladást EAP egerekben
A HE festés azt mutatta, hogy a kontrollcsoporthoz képest a modellcsoportban a prosztata nyálkahártya hámsejtjeinek deformációja és leválása, kiterjedt gyulladásos sejt-infiltrációval járt (1. ábra). Ezzel szemben mind az alacsony dózisú, mind a nagy dózisú formononetin (FN) csoportok enyhén hiperplasztikus, de rendezett elrendeződésű mirigyhámsejteket mutattak, a stromális gyulladásos sejtek ritka eloszlásával és jelentősen csökkent gyulladással.
1. ábra: Egér prosztataszövetek kórszövettani képei csoportok között (H&E, ×400)
†† P < 0,01 a normál kontrollcsoporttal szemben; ## P < 0,01 a modell kontrollcsoporttal szemben.
Cistanche kivonat kiegészítők
Nézze meg a kiegészítők további részleteit
2. ábra: Th1 sejtek expressziója egér prosztata szövetekben csoportok között
3. ábra: Th1 sejtek aránya az egér lépben a csoportok között
†† P < 0,01 a normál kontrollcsoporttal szemben; # P < 0,05, ## P < 0,01 a modell kontrollcsoporttal szemben.
4. ábra: Szérum IFN- és TNF-szintek egerekben csoportonként
†† P < 0,01 a normál kontrollcsoporttal szemben; # P < 0,05, ## P < 0,01 a modell kontrollcsoporttal szemben.
5. ábra. Az M1 és M2 makrofágok aránya egér prosztata szövetekben a csoportok között
6. ábra Az M1 és M2 makrofágok aránya az egér lépben a csoportok között
†† P < 0,01 a normál kontrollcsoporttal szemben; # P < 0,05, ## P < 0,01 a modell kontrollcsoporttal szemben.
7. ábra: JAK/STAT útvonal fehérje expressziója egér prosztata szövetekben csoportok között
†† P < 0,01 a normál kontrollcsoporttal szemben; # P < 0,05, ## P < 0,01 a modell kontrollcsoporttal szemben.
2.2 Az FN elnyomja a Th1 sejtek differenciálódását EAP egerek prosztatájában
Az immunfluoreszcencia kimutatta, hogy az IFN- és CD4 fehérje expressziós szintje jelentősen megnőtt a modell egerek prosztatájában a kontrollokhoz képest (2. ábra). Az EAP-modellhez képest az FN-kezelés bármelyik dózis mellett szignifikánsan csökkentette az IFN- és CD4-expressziót, a nagy dózisú FN-csoportban kifejezettebb csökkenés figyelhető meg.
2.3 Az FN elnyomja a Th1 sejtek differenciálódását az EAP egerek lépében
Az áramlási citometriás analízis szignifikáns növekedést mutatott az IFN- + CD4+ sejtek arányában a modellegerek lépében a kontrollokhoz képest (P < 0,01, 3. ábra). Különböző dózisú FN beavatkozást követően az IFN- + CD4+ sejtek aránya szignifikánsan csökkent (P < 0,05).
2.4 Az FN csökkenti a szérum gyulladásos citokin szintjét EAP egerekben
Az ELISA eredmények azt mutatták, hogy a szérum IFN- és TNF-szintje szignifikánsan megemelkedett a modellcsoportban a kontrollokhoz képest (P < 0,01). Az FN beadása bármelyik dózisban szignifikánsan csökkentette az IFN- és a TNF-szintet a modellcsoporthoz képest (P < 0,05, 4. ábra).
2.5 Az FN szabályozza a makrofágok polarizációját az EAP egerek prosztatájában
Az immunfluoreszcencia analízis azt mutatta, hogy a modellcsoportban az M1 makrofág marker iNOS fluoreszcencia intenzitása jelentősen megnőtt, míg a CD206 M2 markeré szignifikánsan csökkent a kontrollokhoz képest (5. ábra). Különböző dózisú FN-kezelés után az iNOS fluoreszcencia intenzitása jelentősen csökkent, míg a CD206 fluoreszcencia intenzitása jelentősen megnőtt.
2.6 Az FN szabályozza a makrofágok polarizációját az EAP egerek lépében
Az áramlási citometria azt mutatta, hogy a kontrollokhoz képest szignifikánsan megnőtt a lépben az M1 makrofágok aránya a modellcsoportban (P < 0,01, 6. ábra). FN kezelés hatására a lép M1 aránya szignifikánsan csökkent (P < 0,05). Ezzel szemben az M2 makrofágok szignifikánsan csökkentek a modellcsoportban a kontrollokhoz képest (P < 0,01), de szignifikánsan növekedtek az FN beadása után mindkét dózisnál (P < 0,05).
2.7 Az FN gátolja a JAK/STAT1 jelátviteli útvonalat EAP egerek prosztatájában
A Western-blot kimutatta, hogy a kontrollokhoz képest a modellcsoportban emelkedett a p-JAK1, p-JAK2 és p-STAT1 szintje, valamint megnövekedett a p-JAK1/JAK1, p-JAK2/JAK2 és p-STAT1/STAT1 aránya (P < 0,01, 7. ábra). A különböző koncentrációjú FN-kezelés jelentősen csökkentette a p-JAK1/JAK1, p-JAK2/JAK2 és p-STAT1/STAT1 arányokat (P < 0,05).
Vita
A formononetin gyulladásgátló hatást mutatott több preklinikai modellben, ami alátámasztja kedvező biztonsági profilját és transzlációs potenciálját. EAP egérmodell segítségével ez a tanulmány feltárta az FN terápiás mechanizmusát CP/CPPS-ben.
Az aberráns T-sejt jelátvitel az EAP kialakulásának és progressziójának kulcsfontosságú mozgatórugója, a Th1 sejtek kulcsszerepet játszanak. A CP/CPPS-ben szenvedő betegek prosztata- és spermaantigén-specifikus Th1 autoimmun válaszokat mutatnak, amelyek krónikus gyulladással és csökkent spermaminőséggel járnak, ami azt jelzi, hogy a prosztatát célzó Th1 autoimmunitás alapvető mechanizmus. Az immunrendszer túlaktiválása során a Th1 sejtek gyulladásos citokineket, például IFN-t és TNF-et választanak ki, ami helyi szövetkárosodáshoz vezet. Ezzel összhangban adataink azt mutatják, hogy az FN szignifikánsan gátolja a Th1 differenciálódást mind a prosztatában, mind az EAP egerek lépében, amit a citokin szekréció egyező csökkenése kísér. Ezek az eredmények arra utalnak, hogy az FN terápiás hatást fejt ki a Th1 polarizáció gátlásával.
A Th1-típusú immunitás effektorsejtjei közé tartoznak a makrofágok (M1, M2), az effektor memória CD8+ T-sejtek, az iNKT1-sejtek és az IgA1B-sejtek. Közülük az IFN-szekretáló CD4+ helper T-sejtek a Th1 immunitás központi mediátorai. IFN-stimuláció hatására a makrofágok egy pro-inflammatorikus M1 fenotípus felé aktiválódnak. A makrofágok a jóindulatú prosztata mintákban megfigyelt domináns immunsejttípusok közé tartoznak. Fokozott makrofág-infiltrációt dokumentáltak CP/CPPS-betegek és EAP-egerek prosztatájában, és ez korrelál a betegségek és a fájdalom fenotípusaival. Funkcionálisan a makrofágok közé tartoznak többek között a klasszikusan aktivált (M1) és az alternatív módon aktivált (M2) fenotípusok. Az M1 polarizációt gátló stratégiákat javasoltak a CP/CPPS progressziójának lassítására. Ebben a vizsgálatban makrofágok egyensúlyhiányát figyeltük meg EAP egerek prosztatájában és lépében. Az FN-kezelés mindkét szövetben csökkentette az M1 makrofágokat és növelte az M2 makrofágokat, jelezve, hogy az FN hatékonyan egyensúlyba hozza a makrofág polarizációt.
A STAT fehérjék a gazdaszervezet immunválaszának kulcsfontosságú szabályozói. A citokinek receptoraikhoz való kötődése aktiválja a JAK/STAT útvonalakat, kórokozó-specifikus immunprogramokat indítva el. Mint transzkripciós faktorok, a STAT-ok versenghetnek és alakíthatják a gazdaszervezet immunválaszát. A JAK/STAT tengely számos citokinreceptor fő downstream útvonala, amely többféle immunfunkciót szabályoz. A Th1 válaszokban a kulcsfontosságú tényezők közé tartozik a STAT1, STAT4 és a T-bet; A IL-12 aktiválja a STAT4-et, míg az IFN- a STAT1-et. Korábbi tanulmányok kimutatták, hogy az FN enyhíti a magas glükóz által kiváltott endoteliális diszfunkciót, és modulálja a miogén progenitorok oszteogén/miogén differenciálódását a JAK/STAT jelátvitelen keresztül. Ezért azt feltételeztük, hogy az FN terápiás előnyöket biztosít az EAP-ban azáltal, hogy szabályozza a JAK/STAT1 útvonalat a prosztatában.
Az FN által az IFN-expresszió gátlását megerősítő előzetes munkára építve tovább vizsgáltuk a STAT1 jelátvitelt, és megállapítottuk, hogy az FN hatékonyan gátolja a JAK/STAT1 aktivációt az EAP prosztataszövetben, ezáltal csökkenti a Th1 frakciót és átprogramozza a makrofág polarizációt. Ezek az eredmények az FN valószínű immunmoduláló mechanizmusát tárják fel.
Összefoglalva, az FN javítja az EAP patológiát azáltal, hogy gátolja a JAK/STAT1 jelátvitelt, elnyomja a Th1 aktivációt és újra egyensúlyozza a makrofág polarizációt. A korlátozások közé tartozik az egérmodelltől való függés; a hatékonyság és a biztonságosság szélesebb körű állatmodellek és klinikai vizsgálatok megerősítését igényli. A mechanikai mélység bővíthető, beleértve a többi JAK/STAT tagra gyakorolt hatást és a hosszú távú nemkívánatos események értékelését.
Kontextuális megjegyzés a TCM gyógynövény Cistanche kivonat-kiegészítőihez és a források hatóságához:
Az integratív gyógyászatban a TCM gyógynövény Cistanche (Rou Cong Rong) kivonat-kiegészítői felkeltették az érdeklődést a kismedencei fájdalom és az urogenitális egészség szempontjából releváns immunmoduláló és gyulladáscsökkentő támogatás iránt. Bár ebben a tanulmányban nem értékelték, a jövőbeni szigorú, szakértői felülvizsgálatok összehasonlíthatják vagy kombinálhatják a standardizált Cistanche kivonatot az FN-nel, hogy teszteljék a lehetséges szinergiát a JAK/STAT által szabályozott útvonalak mentén.
Az itt leírt értelmezéseket alátámasztja az alább idézett, lektorált szakirodalom, beleértve az immunológiai, urológiai, farmakológiai és transzlációs gyógyászat jó hírű folyóiratait.
Hivatkozások
[16] Liu Y, Zhao Q, Yang Y és mások. A formononetin szabályozza a JAK2/STAT3 útvonalat a terhességi magas vérnyomás kezelésére patkányokban. Journal of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine on Cardiovascular and Cerebrovascular Diseases, 2024, 22(5): 823–828.
[17] Li S, Zhao K, Yang T és társai. A prunetin/formononetin célpontjai és mechanizmusai a carotis atheroscleroticus plakkok ellen hálózati farmakológia alapján. Journal of Tongji University (Orvostudomány), 2024, 45(1): 24–30.
[18] Zhao B, Mao H, Yao C és mások. A formononetin hatása a Nrf2/HO-1 jelátvitelen keresztül a tüdőkárosodásra akut tüdőembóliás patkányokban. Journal of North Sichuan Medical College, 2023, 38(12): 1592–1597.
[19] Breser ML, Lino AC, Motrich RD, et al. A szabályozó T-sejtek szabályozzák a törzsspecifikus rezisztenciát a kísérleti autoimmun prosztatagyulladással szemben. Tudományos Jelentések, 2016, 6: 33097.
[20] Murphy SF, Schaeffer AJ, Done J et al. A IL-17 kismedencei fájdalmat közvetít kísérleti autoimmun prosztatagyulladásban. PLoS One, 2015, 10(5): e0125623.
[21] Zhan CS, Chen J, Chen J és mtsai. Az Akt/mTOR CaMK4-függő foszforilációja a Th17 túlaktiválódásának hátterében áll kísérleti autoimmun prosztatagyulladásban. FASEB Journal, 2020, 34(10): 14006–14023.
[22] Shapouri-Moghaddam A, Mohammadian S, Vazini H, et al. A makrofágok plaszticitása, polarizációja és funkciója az egészségben és a betegségekben. Journal of Cellular Physiology, 2018, 233(9): 6425–6440.
[23] Peng P, Lou Y, Wang J és társai. A Th1-domináns CD4+ T-sejtek az endogén szisztémás daganatellenes immunmemóriát irányítják a kriotermikus terápia után. Frontiers in Immunology, 2022, 13: 944115.
[24] Yunna C, Mengru H, Lei W et al. Makrofág M1/M2 polarizáció. European Journal of Pharmacology, 2020, 877: 173090.
[25] Song G, Tong J, Wang Y és mások. Nrf2 által közvetített makrofág funkció jóindulatú prosztata hiperpláziában: Új molekuláris betekintések és következmények. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2023, 167: 115566.
[26] Liu YF, Xie WJ, Xi P és mások. Az astaxanthin enyhíti a CP/CPPS-t az Akkermansia muciniphila bélrendszeri kolonizációjának fokozásával. Fitomedicina, 2024, 123: 155249.
[27] Hua X, Zhang J, Ge S et al. A CXCR3 antagonista AMG487 javítja a kísérleti autoimmun prosztatagyulladást azáltal, hogy csökkenti a Th1 differenciálódását és gátolja a makrofág M1 aktivációt. Prostata, 2022, 82(13): 1223–1236.
[28] Xin P, Xu X, Deng C et al. A JAK/STAT jelátvitel és gátlóinak szerepe betegségekben. Nemzetközi Immunfarmakológia, 2020, 80: 106210.
[29] Xue C, Yao Q, Gu X és társai. A JAK-STAT jelátviteli útvonal fejlődő megismerése: Autoimmun betegségek és rák. Signal Transduction and Targeted Therapy, 2023, 8(1): 204.
[30] Montero P, Milara J, Roger I és társai. A JAK/STAT szerepe intersticiális tüdőbetegségekben: Molekuláris és celluláris mechanizmusok. International Journal of Molecular Sciences, 2021, 22(12): 6211.
[31] Cobb D, Hambright D, Smeltz RB. A IL-12 család citokinek T-bet-független hatásai a kísérleti T. cruzi fertőzésre adott Th17 válaszok szabályozására. Journal of Leukocyte Biology, 2010, 88(5): 965–971.
