Absztrakt

A poliszacharidok nagy értékű hasznosításának eléréséhezSivatagi cistanchemaradványokat, ez a tanulmány a fenil-etanol-glikozidok extrakciója után visszamaradt maradékot használta fel (a szabadalmaztatott membránszeparációs technológián alapuló ipari eljárás,ZL200710102756.7 számú szabadalom, held by Hotan Dichen Pharmaceutical Biotechnology Co., Ltd., https://www.xjcistanche.com/about-us) as the raw material. We systematically investigated the differences in chemical structural characteristics and antioxidant activities among various polysaccharide fractions obtained through membrane separation. The results indicated significant variations in chemical composition and activity among polysaccharide fractions with different molecular weights. Utilising ultrafiltration membranes of varying molecular weight cutoffs (300 kDa, 50 kDa, 10 kDa) combined with alcohol precipitation, four distinct polysaccharide fractions were successfully prepared: >300 kDa (CTP 1 néven), 50–300 kDa (CTP 2), 10–50 kDa (CTP 3) és<10 kDa (CTP 4). Monosaccharide composition analysis indicated that all four fractions primarily contained mannose, rhamnose, galacturonic acid, glucose, galactose, and arabinose, but their proportional ratios differed. Fourier-transform infrared spectroscopy confirmed that all fractions exhibited typical characteristic polysaccharide absorption peaks. Scanning electron microscopy results demonstrated that ultrafiltration membranes with different pore sizes significantly altered the aggregation state and surface roughness of the polysaccharides by retaining components of varying molecular weights. This morphological difference may be related to intermolecular interactions and the sieving effect during ultrafiltration. In antioxidant activity assays, CTP 1 showed the optimal performance, achieving DPPH radical scavenging rates exceeding 61% and ABTS⁺ radical scavenging rates surpassing 95% at 8 mg/mL. All four fractions demonstrated appreciable antioxidant activity. This study confirms that membrane separation technology can effectively fractionate polysaccharides from Cistanche deserticolamaradékot. A kutatás elméleti alapot és adatokat szolgáltat a gyógynövény-maradékok erőforrás-újrahasznosításához és a poliszacharid komponensek nagy értékű fejlesztéséhez.

Kulcsszavak: Sivatagi cistanche; poliszacharidok; antioxidáns aktivitás; membránszeparációs technológia; szerkezeti elemzés

 

Membránleválasztó technológiai szabadalom birtokában a Wecistanche központja

 

 

 

 

 

 

Bevezetés

Cistanches gyógyfű(Cistanche), a szárított húsos szár pikkelylevelekkel aSivatagi cistancheYC Ma (sivatagi cistanche) illCistanche tubulosa(Schenk) Wight (CTP), először rögzítettékShennong Bencao Jing (Shennong klasszikus Materia Medica). Mint a hagyományos kínai tónusos gyógymódok tipikus képviselője Kínában és élelmiszer-gyógyszer homológ anyag, főként az északnyugati sivatagokban és sivatagi területeken, mint például Hszincsiangban és Belső-Mongóliában termelik, kiérdemelve a "sivatagi ginzeng" hírnevét. Tonizálja a vese yangot, táplálja a vese jint, jótékony hatással van az esszenciára és a vérre, valamint nedvesíti a beleket a székrekedés enyhítésére [2-3]. A benne található feniletanoid-glikozidok jelentős biológiai aktivitással rendelkeznek, és a jelenlegi ipari termelésben a fő kivont anyagok. A kitermelés után azonban nagy mennyiségű hasznosítható anyag marad a maradékban, amelyet hulladékként selejteznek, ami nemcsak erőforrás pazarlást okoz, hanem potenciálisan környezeti terhelést is jelent. Ezért a szermaradványok nagy értékű újrahasznosításának elérése nagy jelentőséggel bír a kínai gyógyászati ​​erőforrások hatékony fejlesztése és a környezetbarát fejlesztés szempontjából.

Poliszacharidok, mint fő aktív komponensekCistanche, különféle farmakológiai hatásokat mutatnak, például antioxidáns, öregedésgátló, májvédő, gyulladásgátló, immunmoduláló és daganatellenes hatásokat [4-7], és széles körben alkalmazhatók gyógyszerfejlesztésben, valamint élelmiszer- és egészségügyi termékekben. A korábbi tanulmányok kiterjedten optimalizálták az extrakciós folyamatot, és előzetes tevékenységértékeléseket végeztekCistanchepoliszacharidok, de a fenil-etanol-glikozid extrakció utáni maradékban lévő poliszacharidok szisztematikus kutatása továbbra is szűkös, különösen hiányzik a maradék poliszacharidok hatékony elválasztási és frakcionálási technológiáinak mélyreható elemzése, valamint a különböző frakciók közötti aktivitási különbségek, ami nagymértékben korlátozza az átfogó hasznosulási érték javítását.Cistancheerőforrás.

A poliszacharidkutatás területén az osztályozatlan nyers poliszacharidok olyan problémákkal küzdenek, mint például a kevert komponensek, az aktivitási hozzájárulások nem egyértelműek és a kétértelmű célpontok, ami megnehezíti az antioxidáns, immunmoduláló és egyéb funkcióik anyagi alapjainak pontos feltárását. Mindeközben a nyers poliszacharidokban lévő szennyeződések, például fehérjék, pigmentek és szervetlen sók szintén megzavarják aktivitásuk értékelését és alkalmazásuk fejlesztését. A hagyományos módszerek, például az oszlopkromatográfia nagy felbontásúak, de nehezen skálázhatók, míg az alkoholos kicsapásos frakcionálás durva és környezeti kockázatokkal jár. A membránszeparációs technológia a nagy hatékonyság, a környezetbarát és a precíz frakcionálás előnyeivel nagy potenciált mutat a poliszacharidok elválasztásában és tisztításában. Lehetővé teszi a poliszacharid komponensek precíz frakcionálását különböző molekulatömegű membránokon keresztül, ideális technikai támogatást nyújtva a poliszacharidok "molekulatömeg-aktivitás" szerkezet-aktivitás kapcsolatának feltárásához [8]. Tang et al. [9] sikeresen tisztított három poliszacharid komponenst közvetlenülLentinus edodesvizes extraktumok 2,5 kDa, 5 kDa és 10 kDa ultraszűrő membránok kombinációjával. Nevezetesen, az ebben a tanulmányban alkalmazott membránelválasztó technológiát találmányi szabadalom védi (ZL200710102756.7 számú szabadalom), amelyet a Hotan Dichen Pharmaceutical Biotechnology Co., Ltd. (https://www.xjcistanche.com/about-us) birtokol, amely a fenil-etanol-glikozid-tartalmú alapanyagok előállítására összpontosít.Cistanchemembránszeparációt használva, amely szilárd ipari alapot biztosít kutatásainkhoz. Kutatócsoportunk által kifejlesztett termékek fenil-etanol-glikozidok szisztematikus vizsgálata alapjánCistanche tubulosa[10] kísérleti gyártási szakaszba léptek. Ennek alapján ez a tanulmány a maradékát használja felCistanchenyersanyagként fenil-etanoid-glikozidos extrakciót követően ultraszűrő membránokat alkalmaz alkoholos kicsapással kombinálva a maradékban lévő poliszacharidok frakcionálására és tisztítására, valamint szisztematikusan elemzi a különböző molekulatömegű poliszacharid frakciók kémiai szerkezeti jellemzőiben és antioxidáns aktivitásában mutatkozó különbségeket. A cél az, hogy új utakat nyisson meg az erőforrások újrahasznosításáraCistancheszermaradék, javítja az ipari láncot, és elméleti és kísérleti alapot teremt új funkcionális élelmiszerek vagy természetes poliszacharidokon alapuló antioxidánsok kifejlesztéséhez.

 

50% echinakozid 10% akteozid Cistanche kivonat kiegészítők membránelválasztó technológiával extrahálva

Ellenőrizze a listát

Wecistanche támogató szolgáltatása – További részletek az együttműködésről
E-mail:wallence.suen@wecistanche.com

 

 

1 Anyagok és módszerek

1.1 Anyagok és eszközök

Cistanche deserticolamaradékot biztosítottaHotan Dichen Pharmaceutical Biotechnology Co., Ltd. (Hotan, Kína)fenil-etanol-glikozidok szabadalmaztatott membránszeparációs technológiával történő ipari extrakciójából származik (ZL200710102756.7 számú szabadalom; https://www.xjcistanche.com/about-us). A glükóz standardot a Tianjin Guangfu Fine Chemical Research Institute-tól vásároltuk. m-hidroxi-bifenil (98%), Coomassie Brilliant Blue G-250, dialízistasakok (MD44), DPPH gyökfogó kapacitást vizsgáló készlet, ABTS gyökfogó kapacitást vizsgáló készlet, szuperoxid-anion-megkötő képességet vizsgáló készlet és teljes antioxidáns-kapacitást a Be & Co Ltd-től vásárolt Biotechnológia. A galakturonsavat (98%), a szarvasmarha-szérumalbumint (98%) és az aszkorbinsavat (Vc) a Shanghai Yuanye Bio-Technology Co., Ltd.-től vásároltuk. A többi kémiai reagens analitikai minőségű volt.

UV-19001 UV-Vis spektrofotométer (Shimadzu Instruments Co., Ltd.); YP10002 elektronikus mérleg (Shanghai Hengji Scientific Instruments Co., Ltd.); SQP elektronikus mérleg (Sartorius Scientific Instruments Co., Ltd.); EYELA vízfürdő (SB-1200); CA-1111 hűtővíz keringtető berendezés (Shanghai Ailang Instruments Co., Ltd.); SHZ-D keringető víz vákuumszivattyú (Shanghai Jinfu Experimental Instrument Equipment Co., Ltd.); N-1100 rotációs elpárologtató; XCLD-10FE fagyasztva szárító (Shanghai Xingchuang Scientific Instrument Equipment Co., Ltd.); BONA-GM-18C szerves membránelválasztó kísérleti gép; 300 kDa, 50 kDa, 10 kDa ultraszűrő membránok (poliéterszulfon, Jinan Bona Co., Ltd., Shandong); TGL-16A centrifuga (Changsha Pingfan Instruments); BT25S analitikai mérleg (Sartorius Scientific Instruments); Dionex U3000 nagy teljesítményű folyadékkromatográf (Thermo Fisher Scientific, USA); LC-DCY-12GK nitrogénfúvó (Shanghai Lichen Bangxi Instrument Technology Co., Ltd.); UPH-I-10T ultratiszta vízrendszer (Chengdu Ultra Pure Technology Co., Ltd.); DF-101S infravörös spektrométer (Shimadzu Instruments Co., Ltd.); Zeiss Supra55VP pásztázó elektronmikroszkóp (Carl Zeiss (Shanghai) Management Co., Ltd.).

 

Cistanche specifikációk

1.2 Kísérleti módszerek

1.2.1 Nyersanyag kitermeléseCistanchePoliszacharidok

Az előzetes elővizsgálatokból nyert extrakciós eljárás szerint 150 gSivatagi cistancheA maradékot lemértük, 100 fokon 3 órán át extraháltuk 1:20 g/ml szilárd-folyadék aránnyal, 4000 fordulat/perc sebességgel centrifugáltuk 10 percig, és a felülúszót (poliszacharidtartalom: 4,4 mg/ml) összegyűjtöttük, hogy megkapjuk a poliszacharid kivonatot.

1.2.2. Frakcionálás és szétválasztásCistanchePoliszacharidok

A vizes kivonat aCistancheA poliszacharidokat ultraszűrő frakcionálásnak vetettük alá 300 kDa, 50 kDa és 10 kDa méretű ultraszűrő membránokkal 0,18 MPa nyomás és 40 fokos hőmérséklet mellett. A retentátokat és a permeátumokat külön összegyűjtöttük, rotációs bepárlóval betöményítettük, és 95%-os etanolt adtunk hozzá, hogy 80%-os végső etanolkoncentrációt érjünk el. Az elegyet 4 °C-on 24 órára helyeztük, majd 4000 fordulat/perc sebességgel 10 percig centrifugáltuk, és a felülúszót elöntöttük, hogy csapadékot kapjunk. A csapadékot újra feloldottuk vízben, 3500 Da-os dialíziszsákkal szemben 48 órán át dializáltuk, majd fagyasztva szárítottuk.Cistanche polysaccharides. Four fractions were obtained by collecting retentates and permeates: >300 kDa (CTP 1 néven), 50–300 kDa (CTP 2), 10–50 kDa (CTP 3) és<10 kDa (CTP 4).

1.2.3 A poliszacharidok kémiai összetevőinek meghatározása

1.2.3.1 A teljes cukortartalom meghatározása

A minták poliszacharidtartalmának meghatározására fenol-kénsav módszert alkalmaztunk [11]. Egy standard görbét készítettünk glükóz felhasználásával, 0,1 mg/ml glükóz standard oldattal. A standard oldatból 0,4 ml, 0,8 ml, 1,2 ml, 1,6 ml és 2,0 ml pontos térfogatokat vittünk át 10 ml-es dugós kémcsövekbe, és vizet adtunk hozzá 2,0 ml össztérfogatig. Ezután 1,0 ml frissen készített 6%-os fenolos oldatot adtunk hozzá, jól összekevertük, és gyorsan 5,0 ml tömény kénsavat adtunk hozzá a cső fala mentén. Az elegyet összerázzuk, 90 fokos vízfürdőben 15 percig melegítjük, majd eltávolítjuk és szobahőmérsékletre hűtjük. Desztillált vizet használva vakpróbaként, az abszorbanciát 490 nm-en mértük UV-Vis spektrofotométerrel. A kapott standard görbe: y=16.196x+0.0834, R2=0.999. 0,1 mg/ml-es poliszacharid oldatot készítettünk, és az egyes poliszacharidfrakciók abszorbanciáját ugyanezzel a módszerrel mértük. Az egyes frakciók teljes cukortartalmát a standard görbe behelyettesítésével számítottuk ki.

1.2.3.2 A fehérjetartalom meghatározása

A minták fehérjetartalmának meghatározására a Coomassie Brilliant Blue módszert alkalmaztuk [12]. Standard görbét készítettünk szarvasmarha-szérumalbumin felhasználásával, 0,1 mg/ml standard fehérjeoldattal. A standard fehérjeoldatot 0,02, 0,03, 0,05, 0,07 és 0,09 mg/ml koncentrációkra hígítottuk. Ezután a standard fehérjeoldat minden koncentrációjából 1 ml-t adtunk a kémcsövekbe, majd 5,0 ml Coomassie Brilliant Blue kromogén reagenst, és rázatással összekevertük. Desztillált vizet használva vakpróbaként, az abszorbanciát 595 nm-en mértük 10 perces reakció után. A kapott standard görbe: y=0.0034x+0.7673, ahol R2=0.996. Az egyes poliszacharidfrakciók abszorbanciáját ugyanazzal a módszerrel mértük, és az egyes frakciók fehérjetartalmát a standard görbére történő helyettesítéssel számítottuk ki.

1.2.3.3 Az uronsavtartalom meghatározása

A minták uronsavtartalmának meghatározására m-hidroxi-bifenil módszert alkalmaztunk [13]. Standard görbét készítettünk galakturonsav felhasználásával, 0,1 mg/ml galakturonsav standard oldattal. A standard oldatot 0,01, 0,02, 0,03, 0,05 és 0,1 mg/ml koncentrációkra hígítottuk. Ezután a standard oldat minden koncentrációjából 1 ml-t adtunk a kémcsövekbe, majd jeges fürdőben 6 ml nátrium-tetraborát-kénsavas oldatot adtunk hozzá, rázatással összekevertük, 5 percig forrásban lévő vízben melegítettük, szobahőmérsékletre hűtöttük, majd 0,1 ml m-hidroxi-bifenil reagenst adtunk hozzá, szobahőmérsékleten alaposan összekevertük, majd 3 percig állni hagytuk. Desztillált vizet használva vakpróbaként, az abszorbanciát 525 nm-en mértük. A kapott standard görbe: y=7.5339x+0.0494, R2=0.995. 0,1 mg/ml-es poliszacharid oldatot készítettünk, és az egyes poliszacharidfrakciók abszorbanciáját ugyanezzel a módszerrel mértük. Az egyes frakciók uronsavtartalmát a standard görbe behelyettesítésével számítottuk ki.

 

Wecistanche Gyártó

1.2.4 A monoszacharid összetétel meghatározása

Kromatográfiás körülmények: Thermo U3000 folyadékkromatográfiás rendszer, Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18 oszloppal (4,6 mm × 250 mm, 5 μm). A mozgófázis acetonitril:foszfát puffer volt (12 g/l kálium-dihidrogén-foszfát, pH 6,8-ra 2 mol/l NaOH-dal) 17:83 térfogatarányban, izokratikus elúcióval. Az áramlási sebesség 0,8 ml/perc, az oszlop hőmérséklete 30 fok, a detektálási hullámhossz 250 nm, az injektált térfogat 10 μL.

Standard oldat készítése: 5 mg ramnózt, arabinózt, galaktózt, glükózt, xilózt, mannózt, galakturonsavat, glükuronsavat, glükózamin-hidrokloridot és galaktózamin-hidrokloridot, valamint 10 mg fukózt egymás után lemérünk, feloldjuk, és 10 ml-re töltjük fel egy standard törzslombikban.

Mintaoldat elkészítéseMind a négy poliszacharid frakcióból 5 mg-ot lemérünk, 1 ml 2 mol/l-es TFA-oldathoz adjuk, és 2 órán át 121 °C-on melegítjük. Az oldat szárításához nitrogént öblítettünk. Ezután 3 ml metanolt adunk a mosáshoz, és az oldatot ismét szárítjuk; ezt a metanolos mosási lépést 2-3 alkalommal megismételtük. A maradékot 1 ml steril vízben feloldottuk, és tesztelés céljából kromatográfiás fiolába vittük át. Ezután 0,2 ml poliszacharid-hidrolizátumot adtunk egy lezárt kúpos centrifugacsőbe, majd 0,2 ml 0,5 mol/l-es nátrium-hidroxid-oldatot és 0,5 ml 0,5 mol/l-es PMP metanolos oldatot. Az elegyet vortexeljük és 70 fokos vízfürdőben 1 órán át reagáltatjuk. A reakció után 0,2 ml 0,5 mol/l-es sósavat adtunk hozzá a nátrium-hidroxid semlegesítésére, 1 ml kloroformot adtunk hozzá, és az elegyet háromszor vortexeltük az extrakcióhoz, hogy eltávolítsuk a felesleges PMP-t. A kloroformos réteget elöntjük, a vizes rétegből 0,3 ml-t veszünk fel, és vizet adunk hozzá, hogy 1 ml-re töltsük fel. Ezután a 11 monoszacharid standard mindegyikéből 0,2 ml-t derivatizáltunk ugyanazzal a módszerrel [14-15].

1.2.5 Fourier-transzformációs infravörös spektroszkópiai (FT-IR) elemzés

Mind a négy poliszacharid frakcióból megfelelő mennyiséget helyeztünk az infravörös spektrométer ATR tartozékának mintafokozatára, és FT-IR méréseket végeztünk Fourier-transzformációs infravörös spektrofotométerrel 4000-400 cm⁻¹ frekvenciatartományban [16].

1.2.6 Pásztázó elektronmikroszkópos (SEM) elemzés

A négy poliszacharid frakció morfológiáját SEM segítségével elemeztük [17]. Az egyes poliszacharidfrakciókból egy kis mennyiséget egyenletesen rögzítettünk egy vékony rézlemezen, és a minta felületén ionporlasztással egy aranyporréteget párologtattunk el. A felületi morfológiát 5,00 kV-on figyeltük meg.

1.2.7 Az in vitro antioxidáns aktivitás meghatározása

1.2.7.1 A DPPH· gyökfogó kapacitásának meghatározása

A négy poliszacharid frakció koncentrációját 1, 2, 3, 4 és 8 mg/ml-re állítottuk be, és a pozitív kontrollcsoportot (Vc) is ugyanilyen koncentrációra állítottuk be. A meghatározást a DPPH· gyökfogó kapacitást vizsgáló kit utasításai szerint végeztük.

1.2.7.2 A szuperoxid-anion-eltávolító kapacitás meghatározása

A négy poliszacharid frakció koncentrációját 0,5, 1, 2, 4 és 8 mg/ml-re állítottuk, és a pozitív kontrollcsoportot (Vc) is ugyanilyen koncentrációra állítottuk be. A meghatározást a szuperoxid-anion-fogó kapacitást vizsgáló kit utasításai szerint végeztük.

1.2.7.3 A teljes antioxidáns kapacitás meghatározása

A négy poliszacharid frakció koncentrációját 0,5, 1, 2, 4 és 8 mg/ml-re állítottuk, és a pozitív kontrollcsoportot (Vc) is ugyanilyen koncentrációra állítottuk be. A meghatározást a teljes antioxidáns kapacitást vizsgáló kit utasításai szerint végeztük.

1.2.7.4 ABTS⁺ gyökfogó kapacitás meghatározása

A négy poliszacharid frakció koncentrációját 0,5, 1, 2, 4 és 8 mg/ml-re állítottuk, és a pozitív kontrollcsoportot (Vc) is ugyanilyen koncentrációra állítottuk be. A meghatározást az ABTS gyökfogó kapacitást vizsgáló kit utasításai szerint végeztük.

1.3 Adatfeldolgozás

Mindegyik kísérletet háromszor megismételtük azonos körülmények között, és az eredményeket átlag ± standard deviációban fejeztük ki. A szignifikanciaanalízishez az SPSS 21.0 szoftvert, az egytényezős elemzéshez egyutas ANOVA-t használtunk; P < 0,05 statisztikailag szignifikánsnak tekinthető. Az Origin 2024 és a GraphPad Prism 10.1.2 szoftvert használtuk a grafikonok készítéséhez.

 

Kiváló minőségű nyersanyagok

Hivatkozások

[1] Állami Gyógyszerkönyvi Bizottság.A Kínai Népköztársaság Gyógyszerkönyve, I. kötet[M]. Peking: China Pharmaceutical Technology Press, 2020.

[2] GUO Y, CAO L, ZHAO Q és mások. A poliszacharid előzetes jellemzése, antioxidáns és hepatoprotektív hatásaCistanche deserticola [J]. A Biológiai Makromolekulák Nemzetközi Folyóirata, 2016, 93: 678-685.

[3] ZHANG XY, JIANG QW, YANG SH és társai. A kemometriai elemzés és az integrált farmakológiai megközelítés a nyers és a feldolgozott közötti hatás és mechanizmus megfejtéséreCistanche tubulosa [J]. A népgyógyászat folyóirata, 2024, 328.

[4] CHENG N, WANG H, HAO H és társai. A poliszacharid komponensekkel kapcsolatos kutatási eredményekSivatagi cistanchemint potenciális gyógyszerészeti szerek [J].Európai Gyógyszervegyészeti Folyóirat, 2023, 245.

[5] TAO J, ZHONG X, LIN H, et al. A nemzetségből származó poliszacharidok lehetőségei, kihívásai és kilátásaiCistanchemint terápiás szerek öregedéssel összefüggő betegségekben: Áttekintés [J].Nemzetközi Biológiai Makromolekulák Folyóirata, 2025, 312.

[6] ZHOU S, FENG D, ZHOU Y és mások. A hatóanyagok és egészségügyi alkalmazások elemzéseCistanche [J]. Határok a táplálkozásban, 2023, 10.

[7] ZHANG X, LIU Z, LI Z et al. Ferroptosis útvonalak: A neuroprotektív erejének feltárásaCistanche deserticolafeniletanoid glikozidok [J].Journal of Ethnopharmacology, 2024, 333.

[8] CAI M, XING H, TIAN B, et al. Az osztályozott poliszacharidok jellemzői és fáradtsággátló hatásaGanoderma lucidumkaszkád membrántechnológiával elválasztva [J].Szénhidrát polimerek, 2021, 269: 118329.

[9] TANG W, LIU C, LIU J et al. A poliszacharid tisztítása aLentinus edodesvízkivonat membránelválasztással és kémiai összetételének és szerkezetének jellemzése [J].Élelmiszer-hidrokolloidok, 2020, 105.

[10] Ainur Memetiturxun, GAO L, HUO SX és társai. Verbascoside centrifugális extrakciós folyamatának optimalizálása Box-Behnken válaszfelületi módszerrel [J].Kínai Modern Alkalmazott Gyógyszerészet folyóirat, 2022, 39(23): 3086-3091.

[11] JIN W, ZHOU H, ZHAO H és társai. A poliszacharidok izolálása, in vitro antioxidáns kapacitása, hipoglikémiás aktivitása és immunaktivitásának értékeléseCoriandrum sativumL [J/OL].Antioxidánsok, 2025, 14(2): 149. https://doi.org/10.3390/antiox14020149

[12] SPLITTGERBER AG, SOHL J. Nemlinearitás fehérjevizsgálatokban a Coomassie blue dye-binding módszerrel [J].Analitikai biokémia, 1989, 179(1): 198-201.

[13] CAI M, XING HY, XU J et al. Osztályozott elválasztásaGanoderma lucidumNyers poliszacharidok membrántechnológiával és antioxidáns aktivitásuk összehasonlítása [J].Élelmiszeripari tudomány és technológia, 2021, 42(10): 29-35.

[14] GUO Y, WANG L, LIU K és társai. Egy gyors és pontos UHPLC módszer a monoszacharidok meghatározására különböző eredetű poliszacharidokbanRadix Astragaliés annak immunaktivitás-elemzése [J/OL].Molekulák, 2024, 29(10): 2287. https://doi.org/10.3390/molecules29102287

[15] DU C, LIU X, ALGADI H, et al. A poliszacharid extrakció optimalizálása, a monoszacharid összetétel és az antioxidáns aktivitás elemzése különböző fajtáknálGastrodia elataBl. légi alkatrészek [J].Biomassza átalakítás és biofinomító, 2023, 14(23): 29353-29365.[16] HONG T, YIN JY, NIE SP stb. Az infravörös spektroszkópia alkalmazásai poliszacharid szerkezeti elemzésben: Haladás, kihívás és perspektíva [J].Élelmiszerkémia: X, 2021, 12.[17] ZHOU S, HUANG G. Poliszacharid kinyerése, szerkezeti jellemzése és biológiai aktivitása kókuszhéjból [J].Kémiai és biológiai technológiák a mezőgazdaságban, 2023, 10(1).