Hogyan játszanak szerepet a Cistanche Tubulosa aktív összetevői az Alzheimer-kórban?

JIANHUA YANG1*, BOWEI JU1,2*, YAO YAN1, HUANHUAN XU1, SHANSHAN WU1, DANDAN ZHU1, DANDAN CAO1 és JUNPING HU2

Absztrakt.Jelen tanulmány célja a neuroprotektív hatások vizsgálata voltfeniletanoid glikozidok(PhG-k) a H2O2- és -amiloid peptid (A )1-42- által kiváltott PC12 sejtek sérülésén, mint in vitro modellAlzheimer kór (HIRDETÉS). Az optimális indukciós körülményeket különböző inkubációs idők és koncentrációk szűrésével határoztuk meg. A PC12 sejteket 0,5 µM A 1-42-val és H2O2-vel kezeltük PhG-k jelenlétében 24 órán át, majd a sejtek életképességét MTT vizsgálattal értékeltük; laktát-dehidrogenáz (LDH) felszabadulást és malondialdehid (MDA) tartalmat is mértek. Létrehozásának optimális feltételei aHIRDETÉSA modell a PC12 sejtek kezelése 0,5 µM A-val 1-42 48 órán át, vagy 25 µM H2O2-val, DMEM-ben oldott PBS-sel. A PhG-k 5, 25 és 50 µg/ml koncentrációban növelték az A 1-42 vagy H2O2 által sérült PC12 sejtek életképességét és csökkentették az LDH és MDA felszabadulását. Összefoglalva, az A 1-42- és H2O2- által kiváltott PC12 sejtkárosodás modelljét sikeresen létrehozták. Kimutatták, hogy a PhG-k jelentős neuroprotektív hatást fejtenek ki az A 1-42- vagy H2O2- által kiváltott sejtkárosodás ellen.

Kapcsolatba lépni:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

A Cistanche tubulosa számos hatással rendelkezik, kattintson ide, ha többet szeretne megtudni

Bevezetés

Alzheimer kór (HIRDETÉS), egy neurodegeneratív rendellenesség, amelynek klinikai jellemzői a progresszív memóriavesztés és a kognitív funkciók károsodása (1), a demencia leggyakoribb oka világszerte (2). A pénzügyi költségek az AD elterjedtsége miatt óriásiak (3). Ezért sürgősen ki kell dolgozni a megfelelő eszközöket a kezelésére és megelőzéséreHIRDETÉS.

A patogenezis aHIRDETÉSszorosan összefügg a neurofibrilláris gubancok és a szenilis plakkok (SP) felhalmozódásával az érintett agyi régiókban (4,5). Az amiloid peptid (A ), az SP-k fő komponense, kimutatták, hogy okozó szerepet játszik a betegség progressziójában.HIRDETÉSmivel toxikus hatással van az idegsejtekre (6). Az A fragmensek, köztük az A 1-40, A 25-35 és A 1-42, az amiloid prekurzor fehérje hasítása révén keletkeztek (7). Az A 1-42 neurotoxicitása szignifikánsan magasabb, mint az A 25-35 és A 1-40, és az A 1-42 képes egyHIRDETÉSmodell (1,8-10). Az oxidatív stressz szerepet játszhat a patogenezisbenHIRDETÉSés ez az A-indukált neurotoxicitás hátterében álló fő mechanizmus (11-13). Számos tanulmány azt sugallta, hogy az A 1-42 reaktív oxigénfajták (ROS) intracelluláris felhalmozódását idézte elő, ami lipid- és fehérjeoxidációhoz, DNS-károsodáshoz és a sejtciklus-ellenőrzőpont-jelátvitel aktiválásához vezetett (1,14,15). A túlzott mennyiségű H2O2 oxidatív károsodáshoz vezethet, és a PC12 sejtek apoptózisát idézheti elő (16). Ezért az oxidatív stressz megcélzása ígéretes megközelítés lehet az A-indukált neurotoxicitás gátlására szolgáló terápiás stratégiák kidolgozásához AD-ben.

Herba (H.)Cistanche, a szárazföldi Kínában általánosan használt, a vesék táplálására, valamint az esszencia és a vér pótlására használt kínai gyógynövényből készült gyógyszer, amelyet memóriavesztés és időskori székrekedés kezelésére használnak (17). Fenil-etanol-glikozid (PhG), a H. egyik fő alkotóeleme.Cistanche, javítja az A 25-35 által okozott neuronális apoptózis károsodását antioxidáns hatásai révén (18,19). Egy korábbi tanulmány öt fő összetevőt azonosított az összes PhG-ből, nevezetesenakteozid,2'-acetil-lakteozid,echinakozid, cisztanozidok és izoakteozid (20). Ezen összetevők közöttakteozidésechinakozidneuroprotektív hatásukról számoltak be az A 25-35- vagy H2O2- által kiváltott neurotoxicitásra (21-23). Wu és munkatársai (24) például azt javasolták, hogy az akteozid ésechinakozid

Kulcsszavak:feniletanoidglikozidok, PC12 sejtek, H2O2, -amiloid peptid1-42, neuroprotection,cistanche

Anyagok és metódusok

PhG-k elkészítése. Az összes PhG-t H-ból vontuk ki.Cistanchea korábban leírtak szerint (25). A H levegőn szárított szára.Cistancheporrá törjük és 8 0 százalékos etanollal perkolálással extraháljuk. A perkolátumot csökkentett nyomáson bepároltuk, majd megfelelő mennyiségű H2O2-ben (1{{20}}0 µmol/l) újraszuszpendáltuk. Az elegyet SP-825 makropórusos gyantaoszlopon (Mitsubishi Chemical, Tokió, Japán) izoláltuk, és 0, 30, 50, 70 és 90 százalékos vizes EtOH-dal eluáltuk. A PhG-ben gazdag frakció előállításához a 30-50% EtOH eluenseket bepároljuk és csökkentett nyomáson szárítjuk. Ultraibolya (UV) spektrofotometriát végeztünk az összes PhG meghatározására. Az echinakozid és akteozid tartalmát nagynyomású folyadékkromatográfiával határozták meg egy korábbi protokoll szerint (26). Hypersil ODS{15}} oszlopot (4,6x250 mm, 5 µm; Dalian Elite Analytical Instruments, Co., Ltd., Dalian, Kína) használtunk és szobahőmérsékleten tartottuk. A mozgó fázisok metil-cianidok és 0,4% foszforsavat tartalmazó víz (v/v; Sigma-Aldrich; Merck KGaA, Darmstadt, Németország) voltak. Az áramlási sebesség 0,75 ml/perc volt, a hullámhosszt 333 nm-re állítottuk be.

Sejttenyésztés és gyógyszeres kezelés. A PC12 patkány pheochromocytoma sejtvonalat Dr. He Chunhui, a Xinjiang Medical University (Urumcsi, Kína) Orvostudományi Kara biztosította. A sejteket magas glükóztartalmú Dulbecco módosított Eagle táptalajban (DMEM; Thermo Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA, USA) tenyésztettük, amely 10 százalék magzati szarvasmarha szérumot tartalmazott (Sangon Biotech Co. Ltd., Shanghai, Kína). , 100 U/ml penicillin és 100 U/ml sztreptomicin inkubátorban 37 ˚C-on, amely 5% CO2-t és 95% levegőt tartalmaz. A 80 százalékos összefolyás elérésekor a sejteket 0,25 százalékos tripszinnel kezeltük és passzáltuk.

Annak érdekében, hogy kiküszöböljük magának a gyógyszernek a PC12 sejtek növekedésére gyakorolt ​​hatását, toxicitási kísérletet végeztünk. Röviden, PC12 sejteket (3x104 sejt/ml) 100 µl/lyuk mennyiségben 96-lyukú lemezekre oltottunk, és 37 ˚C-on inkubáltuk egy éjszakán át. A felülúszó eldobása után 200 µl komplett DMEM-et adtunk az üres csoporthoz, míg a beavatkozási csoportok sejtjeit PhG-kkel kezeltük különböző dózisokban (5, 25, 50, 75, 100, 125, 150, 175 és 200 µg/g). ml). A sejtek 37 °C-on 48 órás inkubálása után 20 µl MTT-oldatot (Sigma-Aldrich; Merck KGaA) adtunk minden egyes lyukba. 4 órás inkubálás után a felülúszót elöntjük, és lyukanként 150 µl dimetil-szulfoxidot adunk hozzá, majd 10 percig keverjük. Az optikai sűrűség (OD) értékeit 490 nm-en ELISA lemezleolvasóval detektáltuk.

1-42-es PC12 sejtsérülés. A Bioss Biotech-től (Peking, Kína) vásárolt 1-42 peptidet vízben (100 µg/ml) oldottunk. Ezt követően a keveréket 37 °C-on 4 napig inkubáltuk, és felhasználás előtt 4 °C-on tároltuk.

A PC12 sejteket 96-lyukú lemezekre oltottuk (3xl04 sejt 100 µl-ben lyukanként). A tapadás érdekében 24 órás tenyésztést követően 50 µl A 1-42-t adtunk hozzá különböző végső koncentrációkban (0, 0,25, 0,5, 1, 1,5 vagy 2 µM) szérummentes DMEM-ben oldva, majd inkubálás 24, 48, 72 vagy 96 óráig. A sejtek életképességét MTT vizsgálattal értékeltük. Az optimális A 1-42 koncentráció 0,5 volt, amelyet µM-nak határoztunk meg.

PC12 sejteket (3xl04 sejt lyukanként) különböző dózisú PhG-ekkel (0, 0,5, 5, 25 vagy 50 µg/ml) kezeltünk 0,5 µM A 1-42 24 órán keresztül. A sejtek életképességét MTT vizsgálattal értékeltük.

H2O2 által kiváltott PC12 sejtsérülés. A PC12 sejteket 96-lyukú lemezekre oltva szélesztettük (3xl04 sejt 100 µl-ben lyukanként). A tapadás érdekében 24 órás tenyésztést követően 100 µl H2O2-t adtunk hozzá különböző végső koncentrációkban (0, 25, 50, 100, 200, 300, 400 és 500 µM), DMEM-ben oldva PBS-sel (0,01 mol/l) vagy anélkül. majd 24 órán át inkubáljuk. A sejtek életképességét MTT vizsgálattal értékeltük. Meghatároztuk az optimális H2O2 koncentrációt és az oldószert az AD in vitro modelljének felállításához.

PC12 sejteket (üregenként 3xl04 sejt) különböző dózisú PhG-kkel (0, 0,5, 5, 25 és 50 µM) kezeltünk. A tapadás érdekében 24 órás tenyésztés után a PC12 sejteket 100 µl H2O2-val kezeltük DMEM-ben PBS-sel, PhG-k jelenlétében 24 órán át. A sejtek életképességét MTT vizsgálattal értékeltük.

Laktát-dehidrogenáz (LDH) felszabadulási vizsgálat. A sejtsérülést a PC12 sejtek felülúszójában lévő LDH-aktivitás mérésével határozták meg egy LDH kit segítségével a gyártó protokollja szerint (kat. sz. 20150604; Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute, Nanjing, Kína). Röviden, kétszer desztillált H2O-t, 0,2 µmol/ml piroszőlősavat, mátrix puffert és koenzim I puffert adtunk egymás után 48 órával a gyógyszeres kezelés után. 37 °C-on 15 percig végzett inkubálás után 2,4-dinitro-fenil-hidrazint adtunk hozzá. Ezt követően 250 µl 0,4 M NaOH-oldatot adtunk minden egyes lyukba. A felülúszót 30 perces szobahőmérsékleten végzett inkubálás után összegyűjtöttük. Az abszorbanciát 450 nm-en ezután mikrolemez-leolvasóval mértük.

Malondialdehid (MDA) mérése. Az MDA-t a PC12 sejtek felülúszójában mértük kereskedelmi készlettel (kat. szám: 20150604; Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute) a gyártó protokollja szerint. 95°C-on 40 percig. Az elegyet hűtés után 10 percig 1006 xg-vel és 25 °C-on centrifugáltuk. Ezután a felülúszót használjuk az MDA-tartalom meghatározására. Az abszorbanciát ezt követően mikrolemez-leolvasóval mértük 532 nm-en.

Az echinakozid és az akteozid AD elleni védőhatásainak értékelése in vitro. A PC12 sejteket 3xl04 sejt/lyuk sűrűséggel oltottuk be 96-lyukú lemezekre (100 µl/lyuk). A sejteket olyan gyógyszerekkel inkubáltuk, mint az echinakozid (kat. szám: 111670-200503; Nemzeti Élelmiszer- és Gyógyszerellenőrző Intézet, Peking, Kína) és acetonid (kat. szám: 111530-200505; Nemzeti Élelmiszer- és Gyógyszerellenőrző Intézet) ) különböző koncentrációkban (0,5, 25 és 50 µg/ml). Ezt követően a sejteket A 1-42-val vagy H2O2-vel kezeltük 24 órán át, és a sejtek életképességét MTT-teszttel mértük.

Statisztikai analízis. Az értékeket átlag ± szórásként fejezzük ki. A hallgatói t-próbát a csoportok közötti összehasonlításhoz használtuk. A statisztikai elemzéseket SPSS 18.0 (SPSS, Inc., Chicago, IL, USA) segítségével végeztük. P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">

Eredmények

A H. Cistanches-ból származó PhG-k mennyiségi meghatározása. Az UV-spektrumok aPhGsextrahált, valamint standard oldatokatechinakozidésakteozidfeljegyeztük, és az eredmények azt mutatták, hogy az UV-spektrumok konzisztensek voltak (1. ábra). UV spektrofotometria

kimutatta, hogy a PhG-tartalom 87,6 százalék volt. A HPLC eredmények azt mutatták, hogy az echinakozid és az akteozid tartalom 37,7, illetve 17,8% volt (2. ábra).

Az ideális PhG koncentráció meghatározása. A vak csoporttal összehasonlítva a 75, 100, 125, 150, 175 és 200 µg/ml-es PhG szignifikáns gátló hatást gyakorolt ​​a PC12 sejtekre (P<0.05), while="" phg="" at="" 5,="" 25="" and="" 50="" µg/ml="" showed="" low="" toxicity="" on="" pc12="" cells,="" and="" the="" cell="" viability="" was="">80 százalék (3. ábra). Így a következő kísérletekben 5, 25 és 50 µg/ml koncentrációjú PhG-ket használtunk a PC12 sejtek kezelésére, mivel nem befolyásolták a sejtek életképességét.

1-42-es PC12 sejtsérülés. A kontrollcsoporthoz képest a sejtek életképessége a 0,5 µM A 1-42 sérült csoportban 63 százalék volt (P<0.05). the="" cell="" viability="" was="" decreased="" by="" aβ1-42="" in="" a="" concentration-dependent="" manner,="" and="" the="" viability="" was=""><50% in="" the="" 1,="" 1.5,="" and="" 2="" µm="" aβ1-42="" injury="" groups="" (fig.="" 4).="" thus,="" treatment="" with="" 0.5="" µm="" aβ1-42="" for="" 48="" h="" was="" determined="" to="" be="" the="" optimal="" condition="" for="" establishing="" the="" in="" vitro="" ad="">

Meghatároztuk a biztonságos PhG-dózisok (5, 25 és 50 µg/ml) jelenlétében 24 órán keresztül 0,5 µM A 1-42-val kezelt PC12 sejtek aktivitását is. Összehasonlítva a modellcsoporttal (P<0.01), phgs="" showed="" a="" significant="" neuroprotective="" effect="" on="" pc12="" cells.="" the="" cell="" viability="" was="" rescued="" by="" phgs="" in="" a="" dose-dependent="" manner="" (fig.="">

H2O2 által kiváltott PC12 sejtsérülés. A PBS-t tartalmazó DMEM-ben oldott 25 µM H2O2-val kezelt PC12 sejtek életképessége 56,43 százalék volt. A PBS-mentes DMEM-ben oldott 200 µM H2O2-val kezelt PC12 sejtek életképessége 71,64% volt (I. táblázat). Így a PBS-t tartalmazó DMEM-ben oldott 25 µM H2O2-val kezelt PC12 sejteket választottuk ki optimális feltételeknek az AD modell létrehozásához.

A kontrollcsoporthoz képest a sejtek életképessége a modellcsoportban 48,8 százalék volt (P<0.05). compared="" with="" the="" model="" group,="" phgs="" had="" a="" significant="" neuroprotective="" effect="" on="" pc12="" cells.="" the="" cell="" viability="" was="" dose-dependently="" increased="">

PhG-k és az 5, 25 és 50 µg/ml koncentrációjú PhG-kkel kezelt PC12 sejtek életképessége 54, 57 és 64% volt (II. táblázat).

A PhG-k gátolják a PC12 sejtek sérülés által kiváltott LDH felszabadulását. A kontroll csoporthoz képest a sérült PC12 sejtek felülúszójának LDH tartalma megemelkedett, amit a PhG-k koncentrációfüggő módon gátoltak. Ez az eredmény azt jelzi, hogy a PhG-k jelentős neuroprotektív hatást fejtenek ki a PC12 sejtekre (6. ábra).

I. táblázat A sejtek életképessége (százalék) H2O2-kezelés után.

táblázat II. A sejtek életképessége gyógyszer-interferencia után.

koncentrációfüggő módon PhG-k gátolják. Ez az eredmény azt jelzi, hogy a PhG-k jelentős neuroprotektív hatást fejtenek ki a PC12 sejtekre (7. ábra).

A PhG és összetevői, az echinakozid és az akteozid megmentik a sérült PC12 sejtek életképességét. A modellcsoporthoz képest az akteozidos kezelés dózisfüggő módon szignifikánsan növelte az A 1-42-sérült PC12 sejtek életképességét. A PhG-k és az echinakozid szintén szignifikánsan növelték az A 1-42-sérült PC12 sejtek életképességét minden vizsgált koncentrációban (8A. ábra).

**P<0.05, vs.="" model="" group.="" aβ,="" â-amyloid="" peptide;="" phgs,="" phenylethanoid="" glycosides;="" ech,="" echinacoside;="" as,="">

A modellcsoporthoz képest az akteozid szignifikánsan növelte a H2O2-val kezelt PC12 sejtek életképességét. A PhG-k szintén növelték a H2O2-val kezelt PC12 sejtek életképességét, miközben a hatás nem volt szignifikáns 5 és 25 µg/ml koncentrációknál (8B. ábra). Ezenkívül az echinakozid 25 µg/ml-rel növelte a sejtek életképességét.

Összefoglalva, az akteozid, a PhG-k és az echinakozid jelentős neuroprotektív hatást fejtettek ki az A 1-42 vagy H2O2 által károsított PC12 sejteken.

Vita

Az oxidatív stressz az A-mediált neurotoxicitás hátterében álló fő mechanizmus AD-ban (11-13). Ezért az oxidatív stressz megcélzása egy megközelítést jelenthet az AD kezelésében. Jelen tanulmányban sikeresen létrehozták az AD in vitro modelljét, amely A 1-42- és H2O2- által indukált PC12 sejtsérülést tartalmaz. Az MTT, LDH és MDA vizsgálatok eredményei azt mutatták, hogy a PhG-k növelték a sejtek életképességét, és csökkentették a sérülésnek kitett PC12 sejtek LDH és MDA felszabadulását. Megállapítható, hogy a PhG-k jelentős neuroprotektív hatással bírnak a PC12 sejtekre.

A PhG-k PC12 sejtnövekedésre gyakorolt ​​hatásának csökkentése és a rendellenes proliferáció megelőzése érdekében a PhG-k biztonságos dózisát szűrővizsgálattal határoztuk meg. Az eredmények azt mutatták, hogy a 75, 100, 125, 150, 175 és 200 µg/ml-es PhG-k szignifikáns gátló hatást gyakoroltak a PC12 sejtekre (P<0.05,><0.01), while="" cell="" viability="" remained="">80% 5, 25 és 50 µg/ml koncentrációban. Így az 5, 25 és 50 µg/ml koncentrációjú PhG-k biztonságosak voltak a PC12 sejtek számára.

Az A {{0}} által okozott sérülést bizonyos tényezők befolyásolták, beleértve az oldószert, az inkubációs időt és a termék minőségét. A jelen vizsgálatban az A 1-42 peptidet vízben (100 µg/ml) oldottuk, és felhasználás előtt 37 ˚C-on 4 napig inkubáltuk CO2 inkubátorban. A PC12 sejteket A 1-42-val kezeltük 0,5, 1, 1,5 és 2 µM koncentrációkban. Az eredmények azt mutatták, hogy a sejtek életképessége csökkent az A 1-42 növekedésével, és az életképesség<50% in="" the="" 1,="" 1.5,="" and="" 2="" µm="" aβ1-42="" injury="" groups.="" thus,="" treatment="" of="" pc12="" cells="" with="" 0.5="" µm="" aβ1-42="" for="" 48="" h="" was="" determined="" to="" be="" the="" optimal="" condition="" for="" establishing="" the="" ad="" model.="" aβ25-35="" has="" been="" commonly="" used="" to="" establish="" ad="" models="" due="" to="" its="" low="" cost="" and="" simple="" operation="" (27-29).="" the="" neurotoxicity="" of="" aβ1-42="" is="" significantly="" higher="" than="" that="" of="" aβ25-35,="" and="" aβ1-42="" is,="" therefore,="" the="" optimal="" aβ="" fragment="" for="" establishing="" an="" ad="" model="">

A H2O2 oxidálószer, és a túlzott H2O2 oxidatív károsodást okozhat, és sejtapoptózist válthat ki (30). Jelen vizsgálatban a PC12 sejteket DMEM-ben oldott 25-500 µM H2O2-val kezeltük PBS-sel vagy anélkül. Az eredmények azt mutatták, hogy a DMEM-ben oldott H2O2 PBS nélkül a PC12 sejtek abnormális proliferációját okozta. Így a PC12 sejtek kezelése DMEM-ben oldott 25 µM H2O2-val PBS-sel volt az optimális feltétel az AD modell létrehozásához. Az a 1-42-indukált sérülés nagyobb volt, mint a H2O2- által okozott sérülés a H2O2 gyenge stabilitása és az oldószerhatás miatt.

Ha a sejt sérült, az LDH-szivárgás a táptalajba jelentősen megnő. Ismeretes, hogy a ROS okozza az MDA termelését. Az MDA és LDH tartalma tehát az oxidatív károsodás mértékét tükrözi. Jelen vizsgálatban a károsodás által kiváltott LDH és MDA aktivitás csökkent a PhG-k növekvő dózisával. Ezek az eredmények azt mutatták, hogy a PhG-knek jelentős neuroprotektív hatása van a PC12 sejtekre. Az MTT vizsgálat kimutatta, hogy a PhG-k dózisfüggő neuroprotektív hatást mutatnak a PC12 sejteken.

Összefoglalva, sikeresen létrehozták az AD in vitro modelljét, amely A 1-42- és H2O2- által kiváltott PC12 sejtsérülést tartalmaz. A PhG-kezelés növelte a sejtek életképességét és csökkentette az LDH- és MDA-felszabadulást az A 1-42-val vagy H2O2-val kezelt PC12-sejtek esetében. A PhG-k jelentős neuroprotektív hatást fejtettek ki az A 1-42- vagy H2O2-indukált sejtkárosodásra.

Hivatkozások

1. Qu M, Zhou Z, Xu S, Chen C, Yu Z és Wang D: A mortalin túlzott expressziója csökkenti a béta-amiloid által kiváltott neurotoxicitást az SH-SY5Y sejtekben. Brain Res 1368: 336-345, 2011.

2. Uzun S, Kozumplik O és Folnegović-Small V: Alzheimer-demencia: jelenlegi adatok áttekintése. Collegium antropologicum 35: 1333-1337, 2011.

3. Brookmeyer R, Johnson E, Ziegler-Graham K és Arrighi HM: Az Alzheimer-kór globális terheinek előrejelzése. Alzheimer-kór és demencia 3: 186-191, 2007.

4. Castellani RJ, Rolston RK és Smith MA: Alzheimer-kór. Betegség-havonta 56: 484-546, 2010.

5. Mattson MP: Útvonalak az Alzheimer-kór felé és onnan. Nature 430: 631-639, 2004.

6. Gouras GK, Tsai J, Naslund J és munkatársai: Intraneuronális A 42 akkumuláció az emberi agyban. The American Journal of Patology 156: 15-20, 2000.

7. Shen C, Chen Y, Liu H és munkatársai: A hidrogén-peroxid elősegíti az A termelést a -szekretáz JNK-függő aktiválásával. Journal of Biological Chemistry 283: 17721-17730, 2008.

8. Shih PH és Wu CH, Yeh CT és Yen GC: Az antocianinok védő hatása az amiloid-peptid által kiváltott károsodások ellen neuro-2A sejtekben. Journal of Agriculture and Food Chemistry 59: 1683-1689, 2011.

9. Figueiredo CP, Bicca MA, Latini A, Prediger R, Medeiros R és Calixto JB: A folsav plusz -tokoferol csökkenti az amiloid- - által kiváltott neurotoxicitást a mitokondriális komplexek aktivitásának modulálásával. Journal of Alzheimer-kór: JAD 24: 61-75, 2010.

10. Dumont M, Lin MT és Beal MF: Mitokondrium és antioxidáns célzott terápiás stratégiák Alzheimer-kórra. Journal of Alzheimer-kór: JAD 20: S633, 2010.

11. Sonnen JA, Breitner JC, Lovell MA, Markesbery WR, Quinn JF és Montine TJ: Szabadgyökök által közvetített agykárosodás az Alzheimer-kórban és annak transzgénikus egérmodelljeiben. Free Radical Biology and Medicine 45: 219-230, 2008.

12. Lin MT és Beal MF: Mitokondriális diszfunkció és oxidatív stressz neurodegeneratív betegségekben. Nature 443: 787-795, 2006.

13. Trushina E és McMurray C: Oxidatív stressz és mitokondriális diszfunkció neurodegeneratív betegségekben. Neuroscience 145: 1233-1248, 2007.

14. Huang SH, Lin CM és Chiang BH: Az Angelica Sinensis kivonat védő hatása az amiloid peptid által kiváltott neurotoxicitásra. Fitomedicina 15: 710-721, 2008.

15. Burhans WC és Heintz NH: A sejtciklus egy redox ciklus: fázis-specifikus célpontokat kapcsol össze a sejt sorsával. Free Radical Biology and Medicine 47: 1282-1293, 2009.

16. Xue HY, Gao GZ, Lin QY, Jin LJ és Xu YP: Az aucubin védő hatása a HO-indukált apoptózisra PC12 sejtekben. Fitoterápia

18. Liu, Fx Wang, Xw Luo L és Xin H, Na B és Wang Xf: A cisztanche glikozidjainak hatása a tanulásra és a memóriára béta-amiloid peptid által kiváltott Alzheimer-kórban egerekben és lehetséges mechanizmusa. Chinese Pharmacological Bulletin 22: 595, 2006.

19. Bao B, Tang X, Tian H, Tong Y, Wu W és Hong Y: A sivatagi élő Cistanche tubulosa (Schrenk) kivonatainak antioxidáns hatása R. Wright Shanghai J Tradit Chin Med 44: 68-71, 2010 .

20. Jiang Y, Li S, Wang Y, Chen X és Tu P: Herba Cistanches differenciálása ujjlenyomat alapján nagy teljesítményű folyadékkromatográfiás diódasoros detektálási tömegspektrometriával. Journal of Chromatography A 1216: 2156-2162, 2009.