Az echinakozid és az akteozid termelés javítása kétlépcsős kiváltással a Cistanche Deserticola sejtszuszpenziós tenyészetében

további információ:ali.ma@wecistanche.com

Wen-Hao Chen et al

Absztrakt

Megfelelő koncentrációban a poliaminok elősegítették a kallusz növekedését ésechinakozidtartalmaCistanche deserticolamíg az Ag plusz növelte a tartalmátechinakozidésakteozid. Egy 20-napos tenyésztési időszakban, amikor putreszcint (25 lM) és Ag pluszt (10 lM) adtunk hozzá a 8., illetve a 16. napon, aechinakozidtermelés (1,7 gl–1) ésakteozida termelés (0,4 gl–1) elérte a maximumot, amely az egyszeri putreszcin kezelés 1.4-szerese és 15-szerese, 1.6-szerese és 1.{10}}szerese az egyszeri Ag plusz kezelésben. Az exogén putreszcin növelte a sejtek életképességét és az antioxidáns enzimaktivitást, így jelentősen megnövelte a végső biomasszát. Az Ag plusz hozzáadása jelentősen növelte a H2O2-tartalmat és a fenilalanin-ammónia-liáz aktivitást, ami magasabbechinakozidésakteozidtartalmat.

Kulcsszavakakteozid,Cistanche deserticola, Echinakozid, Elicitor, Felfüggesztési kultúra

Rövidítések

APOX aszkorbát peroxidáz

CAT kataláz

H2O2 Hidrogén-peroxid

PAL Fenilalanin ammónia-liáz

PeGs feniletanoid glikozidok

ROS reaktív oxigénfajták

SOD szuperoxid-diszmutáz

Cistanche deserticola

Kattintson a Cistanche UK és a Cistanche kivonat termékeihez

Bevezetés

Cistanche deserticolaAz YC Ma-t széles körben használják a hagyományos kínai orvoslásban. A fenil-etanol-glikozidok (PeG-k) ennek a növénynek a fő bioaktív összetevői.echinakozidésakteozida szexuális potencia javításának, az immunműködés szabályozásának, a szabad gyökök megkötésének és az öregedésgátló tulajdonságainak fő összetevői (Song et al. 2003). A túlzott kizsákmányolás, a nehéz termesztés és a leromlott környezet miatt vad Cistanche deserticolanövények a kihalás szélén állnak. A növényi sejtkultúra vonzó alternatíva lehet ezen bioaktív komponensek előállítására. Az in vitro tenyésztéssel kapcsolatos főbb problémákCistanche deserticolaalacsony biomasszával és alacsony PeG-tartalommal rendelkeznek. Számos kiváltóról számoltak be, hogy serkenti a PeG-szintézist (Cheng és mtsai. 2005, 2006; Lu és Mei 2003; Ouyang et al. 2003a; Xu és mtsai. 2005), de sajnos a legtöbb kiváltó csökkentette a sejt biomasszáját.

Az elmúlt években a különböző elicitorok kombinációját kutatják a növényi sejtek szuszpenziós tenyészetében. A különböző elicitorok eltérő hatásából adódóan a különböző elicitorok kombinációja szinergikus hatást érhet el. Az elicitorok egyidejűleg gyöngyözhetők, például a Taxus spp. szuszpenziós tenyészetében. (Yuan et al. 2002) és ginzeng (Bae et al. 2006). Másrészt, ha a biomassza növekedési szakaszában és a másodlagos metabolittermelési szakaszban különböző kiváltókat adtunk hozzá, a maximális biomassza- és taxoltermelés érhető el a Taxus baccata szuszpenziós kultúrájában ( Khosroushahiet al. 2006). Mindazonáltal kevés jelentés áll rendelkezésre a kombináló elicitorok felhasználásáról a sejttenyészetben Cistanche deserticola.

Ehcinakozidban benCistanche deserticola

Korábbi beszámolók kbCistanche deserticolaa PeG-tartalom növelésére összpontosított, de a biomassza előmozdítására szolgáló kiváltó anyagokat, például a poliaminokat részben figyelmen kívül hagyták. A poliaminok elősegíthetik a kallusz biomasszáját azáltal, hogy fokozzák a sejtproliferációt és enyhítik a sejtek öregedését (Bais és Ravishankar 2002). A közelmúltban beszámoltak arról, hogy a poliaminok részt vesznek az etilénnel és az abiotikus stressztűrő képességgel való kölcsönhatásban, míg az abiotikus stresszből származó etilén és reaktív oxigénfajták (ROS) a sejtek öregedését és halálát okozták (Cona et al. 2006). Másrészt az elicitorok által okozott oxidatív stressz a ROS felhalmozódását eredményezte, beleértve a hidrogén-peroxidot (H2O2) és a szuperoxid aniont (O2–), amelyek a jelentések szerint jelmolekulákként közvetítik a programozott sejthalált és a másodlagos metabolitszintézist (Yuan et al. 2001). Xu és Dong 2005). Például a H2O2 indukálta a fenilalanin-ammónia-liáz (EC 4.3.1.5) génexpresszióját, amely a védekezési válasz és a másodlagos metabolizmus kulcsfontosságú enzime (Desikan et al. 1998), amely szabályozza a PeG termelést a sejttenyészetben.Cistanche deserticola(Cheng et al. 2005; Ouyanget al. 2003a). Tekintettel az oxidatív stresszre, egyes fémionok, mint például a Ni2 plus, Co2 plus, Ag plus, számos növényben hatékonyan elősegítették a másodlagos metabolitok szintézisét (Zhao et al. 2005). Talán fokozhatják a PAL aktivitást és a PeG termelést. Ebben a vizsgálatban poliaminokat és fémionokat, valamint ezek kombinációját alkalmazták a kallusz növekedésének fokozására,echinakozid, ésakteozidtartalma Cistanche deserticola. Ezen túlmenően az elicitorok és a H2O2 tartalom közötti összefüggést, valamint a PAL és az antioxidáns enzimek aktivitására gyakorolt ​​hatását is vizsgáltuk.

Anyagok és metódusok

Növényi anyagok

Cistanche deserticolasejtvonalakat indukáltak a szárból. Sterilizálás után a szárat körülbelül 1 cm3-es darabokra vágtuk, és 5 lM naftalin-ecetsavat (NAA), 9 lM 6-benzil-adenint (6-BA), 4 B5 táptalajon tenyésztettük (Gamborg et al. 1968). lM 2,4-diklór-fenoxi-ecetsav (2,4-D) és 30 g szacharóz l–1. 30 nap elteltével a világossárga bőrkeményedést kivettük, és 5 lMNAA-t, 9 lM 6-BA-t és 1 lM 2,4-D-t tartalmazó B5 táptalajon áttenyésztettük, és a sejtszuszpenziót a módszerek szerint létrehoztuk. ofOuyang et al. (2003b).

Callus kultúra

Körülbelül 1,5 g friss kallusz (0,125 g DW) a 20-napos szuszpenziós tenyészetbőlCistanche deserticola50 ml B5 táptalajt tartalmazó 250- ml-es Erlenmeyer-lombikba oltottuk be. A B5 táptalajt 5 lM NAA-val, 9 lM 6-BA-val, 1 lM 2,4-D-vel és 30 g szacharóz l–1-tel egészítettük ki 5,6-os pH-n az autoklávozás előtt. Valamennyi kísérletet háromszor végeztük 25 fokos hőmérsékleten, sötétben, forgó rázógépen (110 fordulat/perc) 20 napon keresztül.

Actedosieban benCistanche deserticola

Elicitor kezelések

Egyetlen kiváltási kísérletben putreszcin (Put), spermin (Spm), spermidin (Spd), ezüstnitrát és kobalt-klorid szűrővel sterilizált oldatát adták a táptalajhoz a tervezett koncentrációban, hogy megvizsgálják azok hatását a kallusz növekedésére és a PeG-tartalomra. Optimális elicitor típus és koncentráció mellett az etetési idő hatását vizsgáltuk. Ezután az optimális koncentráció és etetési idő alapján a különböző elicitorok kombinációját úgy tervezték meg, hogy fokozzák a PeG termelést egy kétlépcsős kiváltási kísérletben. A kalluszkultúra kiváltók nélkül működött a kontrollként. Az előhívók hatásmechanizmusának vizsgálata érdekében a kalluszokat egy tervezett időpontban eltávolítottuk az utóelicitor hozzáadásával további elemzés céljából a két-stageelicitációs kísérletben.

Biokémiai vizsgálatok

Az elicitor hozzáadása után a tervezett időpontban a sejteket szűrtük, és desztillált vízzel óvatosan mostuk. Ezután a sejtéletképességet 2,3,5-trifenil-tetrazólium-kloridos festéssel határoztuk meg Verleysenet al. módszere szerint. (2004), Az életképességi index a friss szövet grammjára vonatkoztatott abszorbancia meghatározása. A friss sejtek H2O2 tartalmát Velikova et al. (2000). A fenilalanin ammónia-liáz (PAL) (EC 4.3.1.5) aktivitásának meghatározása Koukol és Conn (1961) módszerén alapult. A szuperoxid-diszmutáz (SOD) (EC1.15.1.1), a kataláz (CAT) (EC 1.11.1.6), az aszkorbát-peroxidáz (APOX) extrakció és a meghatározás módszerei megegyeztek Jebara és munkatársai módszereivel. (2005).

Biomassza, echinakozid és akteozid mérése

A száraz tömeg (DW) meghatározásához a kalluszt szűrtük, desztillált vízzel mostuk, majd fagyasztva szárítottuk állandó tömegig, hogy rögzítsük a száraz tömeget.

Száraz sejteket (20 mg) 10 ml 50% (v/v) metanollal extraháltunk szobahőmérsékleten ultrahangos kezelésben (40 kHz, 160 W) 15 percig. 0,22 lm-es szűrőn történő szűrés után 20 ul mintát injektáltunk egy HPLC-rendszerbe (Waters 2695), amely C18 oszloppal (Diamonsil, 250 mm · 4,6 mm, 5 μm részecskeméret) volt felszerelve. A mozgó fázis metanolból és 0,05%-os ecetsav-víz oldatból (v/v) 35:65 (v/v) arányban állt. Az áramlási sebesség 1,0 ml perc volt^–1Az oszlop hőmérséklete 30 fok, az UV detektálási hullámhossz (Waters 2996) pedig 334 nm.

A kalibrációs görbéiechinakozidésakteozidjó linearitásúak voltak a {{0}},2–6,4 lg(r=0,9997) és a 0,16–4,6 lg (r {{1{{) tartományban 24}}}}.9995), illetve. Az echinakozid és az akteozid (n=5) átlagos visszanyerése 98,7 százalék (RSD=1,5 százalék ) és 98,2 százalék (RSD=1) volt. .28 százalék), ill. A precíziós és pontossági kísérletek jó eredményeket mutattak, a relatív szórás kevesebb, mint 2 százalék volt. A mennyiségi meghatározási határok 0,04 és 0,06 lg voltak az echinakozid és az akteozid esetében. Az echinakozid és akteozid standardokat a NICPBP-től (National Institute for the Controlof Pharmaceutical and Biological Products, Peking, Kína) vásárolták. Echinakozid/akteozid termelés=echinakozid/akteozid tartalom (mg g–1 DW) x biomassza (g DW l^–1).

statisztikai elemzések

Minden kísérletet és meghatározást háromszor megismételtünk, és minden érték a három párhuzamos mérés átlaga ± SE. Az adatokat varianciaanalízisnek vetették alá (egyutas ANOVA, Tukey-teszt) a szignifikáns különbségek kimutatására a SAS 6.12-es verziójának PROC ANOVA-jával.

Eredmények

A poliaminok hatása a kallusz növekedésére,echinakozid, ésakteozidtartalom.

Az 1. táblázat mutatja a poliaminok hatását a bőrkeményedés növekedésére,echinakozid, ésakteozidtartalmaCistanche deserticola. A Put és az Spm megfelelő koncentrációban szignifikánsan elősegítette a kallusz növekedését. Körülbelül 25 lM Put volt a leghatékonyabb, és a biomassza (11,2 g DW l–1) 1.{5}}szerese volt a kontrollnak. Ezzel párhuzamosan a poliaminok is megnövekedtekechinakozidtartalma jelentősen. Amikor 25 lM Put-ot adtunk hozzá,echinakozidtartalom 46 százalékkal nőtt a kontrollhoz képest, miközben az akteozidtartalom szignifikáns növekedését nem tapasztaltuk.

Az Ag plus és a Co2 plus hatása a kallusz növekedésére, az echinakozid és az akteozid tartalomra

A fémionok hatása a kallusz növekedésére,echinakozid, ésakteozidAz echinakozid és az akteozid tartalmat az Ag plus nagymértékben elősegítette, míg a kallusz növekedését enyhén gátolta. Amikor 10 lM Ag pluszt adtunk hozzá,echinakozidtartalom ésakteozidtartalom 73 százalékkal, illetve 62 százalékkal nőtt a kontrollhoz képest. Ezzel egyidejűleg nem volt szignifikáns különbség a biomasszában az Ag plusz kezelés és a kontroll között. A Co2 plus alig mutatott pozitív hatást a kallusz növekedésére és a PeGtartalomra.

A táplálkozási idő hatása a kallusz növekedésére, az echinakozid és az akteozid tartalomra

Put (25 lM) és Ag plus (10 lM) került kiválasztásra a további kísérletekhez. Az etetési idő hatása a bőrkeményedésre,echinakozid, ésakteozidA 8. napon Put (25 lM) hozzáadásakor a maximális biomasszát (11,8 g DW l–1) kaptuk. Eközben aechinakozidtartalom 107,2 mg g–1 DW-ra emelkedett, mígakteozida tartalom majdnem megegyezett a kontrolléval.

Az ag plusz hozzáadás egy korábbi időpontban kevesebb biomasszához vezetett. Ag plus (10 lM) hozzáadásával a 16. napon, mindkettőechinakozidtartalom (127,9 mg g–1 DW) ésakteozidtartalom (34,2 mg g–1 DW) érte el a maximumot, amely 2.2-szerese, illetve 1.{6}}szerese volt a kontrollhoz képest.

A Put és az Ag plus kombinált hatása a bőrkeményedésre, az echinakozid és az akteozid termelésre

Amint azt az egyedi kiváltók eredményei is mutatják, a korai szakaszban történő put hozzáadása növelte a biomasszát, és az Ag plusz a késői szakaszban elősegítette az echinakozid és az akteozid tartalmat anélkül, hogy jelentősen csökkentette volna a biomasszát. Tehát egy két-stageelicitációs protokoll készült. Put (25 lM) és Ag plus (10 lM) adtuk a megfelelő optimális fázisban.

Az 1. ábra a Putand Ag plus hozzáadásának a kallusz növekedésére gyakorolt ​​hatását mutatja,echinakozid, ésakteozidtermelés a kontrollal ellentétben. Ha a 8. napon Put (25 lM) és a 16. napon Ag pluszt (10 lM) adtunk hozzá, az optimális biomassza (11,4 g DW l–1), echinakozid-tartalom (152,4 mg g–1 DW) és akteozid-tartalom (36,1) mg g–1 DW) értékét a 20. napon érték el (1. ábra). Azechinakozidtermelés (1,7 gl–1) illakteozida termelés (0,4 gl–1) a kontrollban lévők 33--szeresét, illetve 21--szeresét tette ki, amelyek magasabbak voltak, mint az egyszeri kiváltásnál (3. táblázat). . Az egyelicitoros kezeléshez képest aechinakozidésakteozidAz elicitorok kombinálásával végzett termelés 1.{1}}szerese és 1.5-szerese volt az egyszeri Put kezelésben, 1.{5}}szerese és 1.{7}}szerese az egyetlen Ag plusz kezelésnek. , ill. A hosszan tartó tenyésztés csökkentette a biomasszát, az echinakozid-termelést és az akteozidtermelést (1. ábra)

1. ábra A biomassza profiljai (A),echinakozid, ésakteozidtermelés (B) szuszpenziós tenyészetben lévő elicitorokkal vagy anélkülCistanche deserticola. A függőleges sávok három replikáció standard hibáját jelentik. Kalluszt (0,125 g DW) 50 ml B5 táptalajt tartalmazó 250- ml-es Erlenmeyer-lombikokba oltottunk. Put (25 lM) és Ag plus (10 lM) adtunk hozzá a 8., illetve a 16. napon. A kísérleteket 25 fokon, sötétben, forgó rázógépen (110 fordulat/perc) végeztük 20 napon keresztül.

A Put és az Ag plus hatása a sejtek életképességére, a H2O2-tartalomra, valamint a PAL és az antioxidáns enzimek aktivitására

Az elicitorok sejtnövekedésre és másodlagos anyagcserére kifejtett hatásmechanizmusának megértéseCistanche deserticola, a sejtek életképességének, a H2O2-tartalomnak, valamint a PAL és az antioxidáns enzimek aktivitásának változását Put és Ag plus hozzáadása után vizsgáltuk a kétlépcsős kiváltásos tenyészetben. Amikor a Putot a 8. napon adtuk hozzá (0 óra a 2. ábrán), a H2O2-tartalom gyorsan csökkent, ami a 6. órában már csak 48,9 százaléka volt a kontrollnak, és 24 óra elteltével fokozatosan visszaállt a kontroll szintjére (ábra 2A). A sejtek életképessége 12 óráig nőtt, majd folyamatosan csökkent, ami 26,9%-kal, illetve 16,7%-kal volt magasabb, mint a kontrollé 24 és 48 óra elteltével (2B. ábra). A SOD és az APOX aktivitása 6 óra elteltével jelentősen megnőtt, és az SOD aktivitása 24 óra elteltével a kontrollhoz hasonló szintre csökkent, miközben az APOX aktivitás még mindig a kontroll 1.{24}}szerese volt (2C, D ábra). Az összeadás nem mutatott szignifikáns hatást a CAT aktivitásra (2E. ábra). A H2O2 tartalom csökkenése és az antioxidáns enzimaktivitás növekedése kisebb oxidatív károsodást jelentett és több sejtet tartott életképesnek, mint a kontroll.

2. ábra A H2O2-tartalom, a sejtek életképességének, az APOX, SOD, CAT és PAL aktivitásának változásai a 8. napon történő inszuszpenziós tenyészet hozzáadása utánCistanche deserticola. A függőleges sávok három replikáció standard hibáját jelentik

Ezzel párhuzamosan a PAL aktivitása a 12. órában érte el a maximumot, majd 48 óra elteltével fokozatosan a kontrollhoz hasonló szintre csökkent (2F. ábra).

A sejteket folyamatosan tenyésztettük a Put hozzáadása után, és Ag pluszt adtunk a táptalajhoz a 16. napon (0 óra a 3. ábrán). A H2O2-tartalom gyorsan nőtt, és 48 óráig szignifikánsan magasabb szinten tartotta, mint a kontroll (3A. ábra). A sejtek életképessége azonban jelentősen gátolt, és kisebb lett (3B. ábra). Az APOX aktivitás állandó szinten maradt, és 24 óra elteltével csökkent (3C. ábra). A SOD- és a CAT-aktivitások 3 óra elteltével meredeken növekedtek, és 12, illetve 6 óra elteltével érték el maximumukat, amelyek 1.{14}}szeresével és 1.{16}}-szer magasabbak voltak, mint a kontrolloké, majd lassan csökkentek (3D. ábra). , E). A PAL-aktivitás a kontrollé 21-szeresére nőtt 24 óra elteltével, ami még mindig 22,5%-kal volt magasabb, mint a kontrollé 48 óra elteltével (3F. ábra).

3. ábra A H2O2-tartalom, a sejtek életképességének, az APOX, SOD, CAT és PAL aktivitásának változása Ag plusz hozzáadása után a 16. napon szuszpenziós tenyészetbenCistanche deserticolaA függőleges oszlopok három ismétlés standard hibáját jelentik.

Vita

A poliaminok és fémionok eltérő hatást mutattak a kallusz növekedésére és a PeG termeléséreCistanche deserticola. Megfelelő koncentrációban a poliaminok főként a kallusz növekedését, míg az Ag plus a kallusz termelődését fokoztákechinakozidésakteozidszignifikánsan. Amikor a Putand Ag plusz optimális koncentrációban különböző időpontokban adták hozzá, bizonyos szinergikus hatások jelentkeztek.

A kallusznövekedést elősegítő hatás a poliaminok típusától, a koncentrációtól és a táplálási időtől függött. 25 lMPut volt a leghatékonyabb a kallusz növekedésére, amikor a 8. napon adták hozzá. Az elicitor a korai növekedési szakaszban mutatta az optimális promóciós hatást. Bár az Ag plus és a Co2 plus fokozza a másodlagos metabolitokat különböző növényekben (Zhaoet al. 2005), csak az Ag plus mutatott pozitív hatást aechinakozidésakteozid. Mivel az Ag plus gátolhatja a sejtek életképességét és a sejtproliferációt, az Ag plusz hozzáadása a 16. napon fokozta a sejtek termelését.echinakozidésakteozidanélkül, hogy jelentősen csökkentené a biomasszát.

Amikor a növényi sejteket kiváltó kezelésnek teszik ki, az elicitor jelátvitelt indít a plazmamembrán felszínéről és ROS termelést, növényvédelmi választ indukál, és fokozza a növény másodlagos metabolizmusát azáltal, hogy szabályozza a kulcsfontosságú enzimeket, amelyek katalizálják a cél másodlagos metabolitok bioszintézisét (Zhao et al. 2005). Az előidéző ​​kezelés miatti oxidatív stressz ROS-akkumulációt eredményez, és antioxidáns enzimekkel, köztük SOD, APX, CAT és POD enyhíthető. Ha az oxidatív károsodás meghaladja az antioxidáns enzimek funkcióit, a növényi sejtek elpusztulhatnak, ahogy a sejtek életképessége csökken.

Úgy gondolják, hogy a H2O2, a ROS egyik típusa közvetíti a programozott sejthalált, és szabályozza a másodlagos metabolitszintézist számos védekező gén és másodlagos metabolit bioszintetikus gén, például a PAL expressziójának indukálásával. Úgy gondolják, hogy a H2O2, a ROS egyik típusa közvetíti a programozott sejthalált, és szabályozza a másodlagos metabolitszintézist számos védekező gén és másodlagos metabolit bioszintetikus gén, például a PAL expressziójának indukálásával.

A poliaminok javították az abiotikus stressztűrést azáltal, hogy hatékonyan eltávolították a ROS-t, védték a nukleinsavat és a membránt (Alca´zar et al. 2006), valamint fokozták az antioxidáns enzimaktivitást (Tang és Newton 2005). Papadakis és Roubelakis-Angelakis (2005) jelentése szerint a Put jobb blokkoló hatást mutatott a ROS-felhalmozódásra, mint az Spd és az Spm. Amint az eredményeinkből kiderül, a végső biomassza inPut kezelés több volt, mint az Spd és Spm kezeléseknél. Exogenous Put csökkentette a H2O2-tartalmat, növelte az antioxidáns enzimaktivitást és a sejtek életképességét. Így megmagyarázható, hogy az Ag plusz korábbi időpontokban történő adagolása miért csökkentette az Ag biomasszáját, valamint fokozta a H2O2 felhalmozódást és jelentősen csökkentette a sejtek életképességét. Az antioxidáns enzimek aktivitását fokozták, hogy enyhítsék az oxidatív stresszt a sejtek életképességének befolyásolása nélkül. Az Ag plus hozzáadás szintén elősegítette a PALaktivitást, valamint a termelésétechinakozidésakteozidszámottevően. A mechanizmus összhangban lehet Desiken et al. (1998) és Yuan és mtsai. (2001). A H2O2 kulcsszerepet játszhat a sejtproliferációban és a PeG termelésben. Tedd fokozott PAL aktivitást ésechinakozidtartalom bizonyos mértékben, esetleg valamilyen más módon a Put csökkent H2O2 tartalomhoz.

Az elmúlt években a legtöbb jelentés egyetlen kiváltó hatásra összpontosított a kallusz növekedésére és a PeG-tartalomra.Cistanche deserticola. Számos kiváltó azonban nem fokozta a kallusznövekedést optimális koncentrációban, mint például az aschitosan, funal elicitor (Fusarium solani), metil-jazmonát és szalicilsav (Cheng és mtsai. 2006; Lu és Mei2003; Xu és mtsai. 2005). A ritkaföldfém-elemek keveréke javította a sejtnövekedést és a PeG-termelést, 26%-kal, illetve 167%-kal magasabb, mint a kontrollé (Ouyanget al. 2003b). Az egyetlen kiváltóval történő ismételt kiváltás szintén jelentősen fokozta a PeG termelést (Cheng et al. 2005, 2006). Jó alternatíva az optimális biomassza és PeG termelés eléréséhez különböző kiváltók hozzáadásával különböző szakaszokban. Amikor 25 lM Put és 10 lM Ag pluszt adtunk hozzá a 8., illetve a 16. napon, aechinakozida termelés (1,7 gl–1) és az akteozid termelés (0,4 gl–1) érte el a maximumot, amelyek magasabbak voltak, mint az egyszeri Put vagy Ag plusz kiváltásnál, valamint az előbbiekben.

Feladó: ' Javításaechinakozidésakteozidelőállítása kétlépcsős kiváltással sejtszuszpenziós tenyészetbenCistanche deserticola' általWen-Hao Chen et al

---World J Microbiol Biotechnol (2007) 23:1451–1458 / Springer Science plus Business Media BV 2007

Hivatkozások

Alca´zar R, Marco F, Cuevas JC, Patron M, Ferrando A, Carrasco P, Tiburcio AF, Altabella T (2006) Poliaminok bevonása a növényi válaszreakcióban az abiotikus stresszre. Biotechnol Lett 28:1867–1876
Bae KH, Choi YE, Shin CG, Kim YY, Kim YS (2006) Fokozott ginzenozid termelékenység az etefon és metil-jazmonát kombinációjával a ginzeng (Panax ginseng CA Meyer) járulékos gyökérkultúráiban. Biotechnol Lett 28:1163–1166
Bais HP, Ravishankar GA (2002) A poliaminok szerepe a növények ontogenezisében és biotechnológiai alkalmazásaik. Növényi sejtszövet szervkultusz 69:1–34
Cheng XY, Guo B, Zhou HY, Ni W, Liu CZ (2005) Az ismételt kiváltás fokozza a fenil-etanoid glikozidok felhalmozódását a sejtszuszpenziós tenyészetekbenCistanche deserticola. Biochem Eng J 24:203–207
Cheng XY, Zhou HY, Cui X, Ni W, Liu CZ (2006) Feniletanoid glikozidok bioszintézisének javítása inCistanche deserticolasejtszuszpenziós tenyészetek kitozán-elicitorral. J Biotechnol. 121:253-260
Cona A, Rea G, Angelini R, Federico R, Tavladoraki P (2006) Functions of amine oxidases in plant development and protection. Trends Plant Sci 11:80–88
Desikan R, Reynolds A, Hancock JT, Neill SJ (1998) A Harpin és a hidrogén-peroxid egyaránt beindítja a programozott sejthalált, de eltérő hatással van a védekező génexpresszióra Arabidopsis szuszpenziós tenyészetekben. Biochem. J. 330:115–120
Gamborg OL, Miller RA, Ojima K (1968) Szójabab gyökérsejtek szuszpenziós kultúráinak tápanyagigénye. Exp Cell Res 50:151–158Jebara S, Jebara M, Limam F, Aouani ME (2005) Változások
aszkorbát-peroxidáz, kataláz, guajakol-peroxidáz és szuperoxid-diszmutáz aktivitások közönséges bab (Phaseolus vulgaris) csomókban sóstressz alatt. J Plant Physiol 162:929–936
Khosroushahi AY, Valizadeh M, Ghasempour A, Khosrowshahli M, Naghdibadi H, Dadpour MR, Omid Y (2006) Javította a taxoltermelést indukáló faktorok kombinációjával a Taxus baccata szuszpenziós sejttenyészetében. Cell Biol. Int. 30:262–269
Koukol J, Conn EE (1961) A Hordeum vulgare fenilalanin-deamináz aromás anyagcseréje és tulajdonságai. J. Biol. Chem. 236:2692-2698
Lu CT, Mei XG (2003) A fenil-etanoid-glikozidok termelésének javítása gomba kiváltóval a sejtszuszpenziós tenyészetbenCistanche deserticola. Biotechnol Lett 25:1437–1439
Ouyang J, Wang XD, Zhao B, Yuan XF, Wang YC (2003a) Fenylethanoid glikozidok képződése általCistanche deserticolaszilárd táptalajon termesztett kallusz. Biotechnol Lett 25:223–225
Ouyang J, Wang XD, Zhao B, Yuan XF, Wang YC (2003b) Ritkaföldfémek hatásai aCistanche deserticolasejtek és a fenil-etanol-glikozidok termelése. J Biotechnol 102:129-134
Papadakis AK, Roubelakis-Angelakis KA (2005) A poliaminok gátolják a NADPH-oxidáz által közvetített szuperoxid képződést, a putreszcin pedig megakadályozza a poliamin-oxidáz által generált hidrogén-peroxid által kiváltott programozott sejthalált. Planta 220:826–837
Song ZH, Lei L, Tu PF (2003) Előrelépések a farmakológiai aktivitás kutatásában a növényekbenCistancheHoffing és Link. Chin Tradit Herbal Drugs 34:16–18
Tang W, Newton RJ (2005) A poliaminok csökkentik a só által kiváltott oxidatív károsodást azáltal, hogy növelik az antioxidáns enzimek aktivitását és csökkentik a lipid-peroxidációt a virginiai fenyőben. Növénynövekedés Regul 46:31–43
Velikova V, Yordanov I, Edreva A (2000) Az oxidatív stressz és néhány antioxidáns rendszer a savas esővel kezelt növényekben exogén poliaminok védő szerepe volt. Plant Sci 151:59–66
Verleysen H, Samyn G, Van Bockstaele E, Debergh P (2004) Az analitikai technikák értékelése a krioprezerváció utáni életképesség előrejelzésére. Növényi sejtszövet szervkultusz 77:11–21
Xu MJ, Dong JF (2005) A kiváltó által kiváltott oxidatív robbanásból származó O2 szükséges a fenilalanin ammónia-liáz aktivációjának és katarantin szintézisének kiváltásához Catharanthus roseus sejtkultúrákban. Enzyme Microb Technol 36:280-284
Xu LS, Xue XF, Fu CX, Jin ZP, Chen YQ, Zhao DX (2005) A metil-jazmonát és a szalicilsav hatása a fenil-etanol-glikozidok szintézisére szuszpenziós kultúrákbanCistanche deserticola. Chin J. Biotechnol. 21:402–406
Yuan YJ, Li C, Hu ZD, Wu JC (2001) Signal transduction pathway for oxidative burst and taxol production in suspension cultures of Taxus Chinensis var. mairei, amelyet a Fusarium oxysprum oligoszacharidja indukált. Enzyme Microb Technol 29:372-379
Yuan YJ, Wei ZJ, Miao ZQ, Wu JC (2002) A taxol bioszintézis útvonalának kiváltóinak hatóútjai és szinergikus hatásaik. Biochem Eng J 10:77–83
Zhao J, Davis LC, Verpoorte R (2005) Elicitor jelátvitel, ami növényi másodlagos metabolitok termeléséhez vezet. Biotechnol Adv 23:283–333