Iridoid és aciklikus monoterpén-glikozidok, kankanozidok L, M, N, O és P a Cistanche Tubulosa-ból

Cistanche tubulosa(SCHRENK) R. WJÓ(Orobanchaceae) egy évelő parazita növény, amely a gyökereken nőSalvadoravagyCalotropisfaj, elterjedt Észak-Afrikában, Arábiában és ázsiai országokban.1) Ennek a növénynek a szárát (japánul Kanka-nikujuyou) hagyományosan aimpotencia, sterilitás, lumbágó és testgyengeség kezelésevalamint a vérkeringést elősegítő szer.1,2) A szárból származó bioaktív összetevőkkel kapcsolatos vizsgálataink soránC. tubulosa, 3-6) korábban huszonnégy fenil-etanoid aminoglikozidról számoltunk be, köztük a kankanosid H-ról1, H2, I, J1, J2, K1, és K2, és két acilezett oligocukrot friss szárábólC. tubulosa. 5,6) Továbbá igazgatófeniletanoid glikozidok, echinakozid, akteozid és izoakteozidkimutatták, hogy gátolják a szérum aszpartát-aminotranszferáz (AST) és alanin-aminotranszferáz (só) szintjének emelkedését az egerek károsodott májában, amelyetD- galaktózamin (D-GalN)/ lipopoliszacharid 25-100 mg/kg dózisbanper os(p.o.). A fenil-etanoid-glikozidok hepatoprotektív aktivitásához szükséges szerkezeti követelményeit is tisztáztuk.5) Ebben a folyamatos tanulmányban a friss szárak összetevőirőlC. tubulosa, további tizenegy iridoid glikozidot izoláltunk, köztük a kankanosid L-t (1), M (2), és N (3), hét aciklikus monoterpén-glikozid, köztük a kankanozidok O (4) és P (5), három fenilpropanoid és négy lignán. Ez a cikk öt új vegyület izolálásával és szerkezetének feltárásával foglalkozik (1-5).

TERMÉSZETES CISTANCHE TUBULOSA A SZEXUÁLIS DISZFUNKCIÓ MENTESÍTÉSÉRE PHGS75% ECH 30% ACT 12%

A C. tubulosa (Urumqiban, Xinjiang tartományban, Kína) friss szárait metanollal extraháltuk visszafolyató hűtő alatt, így metanolos kivonatot kaptunk (8,36% a friss szárból). A metanolos kivonatból a H2O-val és MeOH-val eluált frakciókat (5,63%, illetve 2,73%) Diaion HP-20 oszlopkromatográfiával (H2O→MeOH) kaptuk a korábban leírtak szerint.5) A MeOH-val eluált frakciót SiO2- és ODS-oszlopkromatográfiának, végül HPLC-nek vetjük alá, hogy megkapjuk az L (1, 0.0026%), M (2, 0) kankanozidot.{27 }}001%), N (3, 0.00{{60}}7%), O (4, 0.0{{90}}2{{105}}%) és P (5, 0 .0002%), 6-dezoxikatalpol3,7) (6, 0.197%), bartsiozid3,7) (7, { {147}}.0583%), glurozid3,7) (8, 0,0443%), kankanoizid A3) (9, 22,3 mg, 0,0010%), muszaénozidsav3,7) ( 10, 0,0056%), 8- epilogánsav3,8) (11, 0,0023%), 8-epideoxilogánsav3,7) (12, 0,0004%), genipozidsav3,7) (13, 0,0040%) ), kankanosid E3) (14, 0,0026%), (2E,6Z)-8-bD-glükopiranoziloxi-2, 6-dimetil-2, 6-oktadiénsav3 ,9) (15, 31,0 mg, 0,0014%), (2E,6E)-3,7-dimetil-8-hidroxi-oktadien-1-il-ObD-glükopiranozid10) (16, 0,0082%), 8-hidroxigeraniol 8-O-bD-glükopiranozid11) (17, 0,0044%), betulalbusid A12) (18, 0,0004%), tűlevelű 13) (19, 0,0002%)), (fecskendő 20, 0,0015%), szinapin-aldehid 4-ObD-glükopiranozid14) (21, 0,0001%), ()-pinorezinol ObD-glükopiranozid4,8,15) (22, 0,0010%), eucommin A3,16) (203,16). %), izoeukomin A17) (24, 0,0010%) és ()-sziringarezinol ObD-glükopiranozid4,8,18) (25, 0,0044%).

A Kankanosides L (1), M (2) és N (3) szerkezete

A kankanozid L-t (1) fehér por formájában kaptuk negatív optikai forgatással ([a]D 26 - 45,7 MeOH-ban). IR-spektruma erős abszorpciós sávot mutatott 3433-nál és 1{{20}}80 cm- 1-nél, ami glikozidcsoportra utal. A gyors atombombázás (FAB)-MS 1 futtatása pozitív és negatív ion módban kvázimolekuláris ioncsúcsokat mutatott m/z 371 [M Na], illetve 347 [M-H]- mellett, és a molekulaképlet: nagy felbontású FABMS méréssel C15H24O9-ként határozták meg. Az 1 savas hidrolízise 1,0 M sósavval (HCl) felszabadította a D-glükózt, amelyet HPLC analízissel azonosítottunk optikai rotációs detektor segítségével.{22}}) Az 1 1 H- és 13C-NMR spektruma (CD3OD, táblázatok 1, 2), amelyeket különböző NMR-kísérletekkel jelöltek ki,19) négy metilénhez rendelhető jeleket mutattak [d 1,43 (1H, br dd, J= kb. 5, 13 Hz, 4a-H), 1,73 ( 1H, br dd, J= kb. 12, 14 Hz, 6a-H), 1,85 (1H, m, 4b-H), 1,93 (1H, br dd, J= kb. , 14 Hz, 6b-H), 3,50 (1H, ddd, J= 2,4, 12,5, 13,0 Hz, 3a-H), 3,83 (1H, br dd, J=

kb. 5, 13 Hz, 3b-H), 3,78, 4,12 (mindegyik 1H, mindkettő d, J= 13,1 Hz, 10-H2)], két metin [d 2,15 (1H, dd, J)=7,2, 8,9 Hz, 9-H) és 2,23 (1H, m, 5-H)] és egy acetálcsoport [d 4,81 (1H, d, J{{28) }},9 Hz, 1-H)] egy b-glükopiranozil-résszel együtt [d 4,70 (d, J= 7,9 Hz, 1 -H)]. Amint az 1. ábrán látható, az 1 H-1 H korrelációs spektroszkópiai (1 H-1 H COSY) kísérlet az 1-en félkövér vonallal írt részstruktúrák jelenlétét jelezte. Az 1-en végzett heteronukleáris többszörös kötéskorrelációs (HMBC) kísérletben a következő protonok és szénatomok között figyeltek meg hosszú távú korrelációt (1-H és 3-C, 8-C; {{ 49}}H és 1-C 7-H és 8-C, 10-H és 8-C; }}H2 és 7-C, 8-C; 1 -H és 1-C) az 1. ábrán látható módon. Ezután az 1 relatív sztereostruktúráját fázisérzékenységgel jellemeztük. nukleáris Overhauser fokozó spektroszkópia (fázisérzékeny NOESY) kísérlet, amely NOE korrelációt mutatott ki a következő protonpárok között (1-H és 3aH; 3a-H és 4a-H; 3b-H és 4b-H; 4b-H). és 5-H, 9- H és 6b-H, 9-H és 7-H; és 10-H2). a telített d-laktol-részhez. Végül a 6 hidrogénezése 1-et eredményezett, így a kankanosid L sztereostruktúrája 3,{101}} dihidro-6-dezoxikatalpol (1).

TERMÉSZETES CISTANCHE TUBULOSA A POSTAI IZGATÁSI ZAVAR MENTESÍTÉSÉHEZ PHGS75% ECH 30% ACT 12%

A kankanozid M-et (2) fehér por formájában kaptuk negatív optikai forgatással ([a]D 26 - 18,7 MeOH-ban). A 2-es IR-spektruma 3433, 1736, 1655 és 1076 cm- 1 abszorpciós sávokat mutatott, amelyek a hidroxil-, d-lakton-, olefin- és étercsoportoknak tulajdoníthatók. A 2-es pozitív ion FAB-MS spektruma kvázimolekuláris ioncsúcsot mutatott m/z 353 [M Na] mellett, a molekulaképletet pedig C15H22O8-ként határoztuk meg nagy felbontású pozitív ionos FAB-MS méréssel. 2 savas hidrolízise 1,0 M HCl-oldattal felszabadított D-glükózzal. A 2 1H- és 13CNMR spektruma (CD3OD, 1. és 2. táblázat) négy metilénhez rendelhető jeleket mutatott [d 1,66, 2,11 (mindegyik 1H, mindkettő m, 4-H2), 2,15, 2,75 (mindegyik 1H, mindkettő m, 6-H2), 4,29 (1H, ddd, J= 2,8, 8,4, 14,3 Hz, 3b-H), 4,32, 4,51 (mindegyik 1H, mindkettő d, J{{61 }},1 Hz, 10-H2), 4,35 (1H, ddd, J= 3,1, 6,7, 14,3 Hz, 3a-H)], két metin [d 2,97 (1H, m, 5-H), 3,82 (1H, br s, 9-H)], egy olefin [d 5,94 (1H, m, 7-H)] és egy telített laktoncsoport (d C 174,9) egy bD-glükopiranozil-résszel együtt [d 4,32 (1H, d, J= 7,9 Hz, 1 -H)]. Amint az 1. ábrán látható, az 1 H–1 H COZY kísérlet a 2-n félkövér vonallal írt részleges struktúrák jelenlétét jelezte, és a HMBC kísérletben hosszú távú korrelációkat figyeltek meg a következő proton- és szénpárok között ({{ 103}}H és 1-C 9-H és 1-C, {{110 }}H2 és 7-C, 8-C, 9-1 -H és 10-C). A 2 relatív sztereostruktúráját egy fázisérzékeny NOESY kísérlettel jellemeztük, amely NOE korrelációt mutatott ki a következő protonpárok között (3a-H és 4a-H; 3b-H és 4b-H; 4b-H és 5- H; 5-H és 6b-H, 9-H) az 1. ábrán látható módon. Így a 2. sztereostruktúrája az ábra szerint lett tisztázva.

A kankanozid N-t (3) fehér por formájában izoláltuk negatív optikai forgatással ([a]D 25 - 24,6 MeOH-ban). A 3-as pozitív ionos FAB-MS-ben egy kvázimolekuláris ioncsúcs m/z 371 [M Na] mellett volt megfigyelhető. A C16H28O8 molekulaképletet nagy felbontású FAB-MS méréssel határoztuk meg. A 3 savas hidrolízise 1.{14}} M HCl-felszabadított D-glükózzal. Az1H- és a 13C-NMR adatok (CD3OD, 1. és 2. táblázat) metilhez rendelhető jeleket mutattak [d 1.07 (3H, d, J= 7.2 Hz, {{ 28}}H3)], négy metilén {d 1,37, 1,87 (mindegyik 1H, mindkettő m, 7-H2), 1,65, 1,81 (mindegyik 1H, mindkettő m, 6-H2), [3,65 ( 1H, dd, J= 9,1, 9,8 Hz), 3,90 (1H, dd, J= 5,9, 9,8 Hz), 11-H2] és [3,70 (1H, dd, J= 3,3, 12,0 Hz), 3,88 (1H, m), 3-H2]}, négy metin [d 1,69 (1H, m, 4-H), 1,75 (1H, m, 9-H), 2,06 (1H, m, 8-H), 2,16 (1H, m, 5-H)] és egy félacetálcsoport [d 4,67 ( 1H, d, J= 7,4 Hz, 1-H)] egy bD-glükopiranozil-résszel együtt [d 4,26 (1H, d, J= 7,9 Hz, {{101) }}H)]. A 3 iridoid szerkezetét 1 H–1 H COZY és HMBC kísérletekkel tisztáztuk, a relatív sztereostruktúrát pedig fázisérzékeny NOESY kísérlettel jellemeztük, amint az 1. ábrán látható. Következésképpen a 3 szteroszerkezetét az ábra szerint tisztáztuk.

TERMÉSZETES CISTANCHE TUBULOSA SZEXUÁLIS PROBLÉMA MEGOLDÁSÁRA PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Kankanozidok O (4) és P (5) szerkezete

Az O (4) és P (5) kankanozidokat (C16H26O8) szintén fehér por formájában kaptuk negatív optikai forgatóképességgel (4: [a]D 23 - 26.1; 5: [a]D 21 - 32). 7 mindkettő MeOH-ban). A 4 és 5 infravörös spektruma abszorpciós sávokat mutatott 3433, 1696, 1647 és 1076 cm- 1 a 4-nél, valamint 3434, 1701, 1647 és 1{ {95}}76 cm- 1 5 esetén, glikozidos, karboxil- és olefinfunkcióknak tulajdonítható. UV-spektrumuk közös abszorpciós maximumot mutatott 217 nm-en, ami azt jelzi, hogy mindkettőben egy a,b-telítetlen karbonsav-rész található. A 4 és 5 savas hidrolízise során D-glükóz szabadult fel, míg a 4 és 5 enzimes hidrolízisével glükozidázzal (2E,6E)-8-hidroxi-2,6-dimetil{{37} },6-oktadiénsav20) (4a) és (2E,6E)-8-hidroxi-3,7- dimetil-2,{{ 47}}oktadiénsav21) (5a), ill. A 4 1H- és 13C-NMR adatai (CD3OD, 2. és 3. táblázat) két metilhez rendelhető jeleket mutattak [d 1,71 (3H, br s, 10-H3), 1,81 (3H, d, J{{) 66}},0 Hz, 9-H3)], három metilén {d 2,19 (2H, br t, J= kb. 7 Hz, 5-H2), 2,36 (2H, m, 4-H2), [4,24 (1H, dd, J= 7,6, 12,0 Hz), 4,33 (1H, dd, J= 6,2, 12,0 Hz), { {96}}H2]} és két háromszorosan helyettesített olefin [d 5,41 (1H, ddd, J= 1,2, 6,2, 7,6 Hz, 7- H), 6,75 (1H, tq, J{ {111}},2, 1,0 Hz, 3-H)] egy b-Dglükopiranozil-résszel együtt [d 4,34 (d, J= 7,8 Hz, 1 -H)]. A szénjelek összehasonlításával a 4 13C-NMR spektrumában

a 4a szerintiekkel glikozilációs eltolódást figyeltek meg a 8- pozícióban (d C 4: 65,5; 4a: 59,4). A glükozid kötés helyzetét HMBC-kísérletekkel is megerősítették, amint az a 2. ábrán látható. Következésképpen a 4 sztereostruktúrája (2E,6E)-8-bD-glükopiranoziloxi-2,{{ 16}}dimetil-2,6-oktadiénsav. Másrészt az 5 1H- és 13C-NMR adatai (CD3OD, 2. és 3. táblázat) egy (2E,6E)-8-hidroxi{{30}} jelenlétét jelezték. ,7-dimetil-2,6-oktadiénsav-rész [d 1,70 (3H, br s, 10-H3), 2,14 (3H, széles s, 9- H3), 2,24 (2H, m, 4-H2), 2,27 (2H, m, 5-H2), 4,05, 4,20 (mindegyik 1H, mindkettő br d, J= kb. 12 Hz, 8-H2), 5,47 (1H, tq, J= 7,1, 0,9 Hz, 6-H), 5,67 (1H, br s, 1-H )] egy bD-glükopiranozil résszel együtt [d 4,23 (d, J= 7,7 Hz, 1 -H)]. A bD-glükopiranozil-rész kapcsolódását az 5-ben HMBC-kísérletek alapján tisztáztuk, amint az a 2. ábrán látható. Továbbá tipikus glikozilációs eltolódást figyeltünk meg a 8--helyzetben lévő jeleknél (d C 5:75,6; 5a: 68.8). a fent említett bizonyítékok alapján az 5 sztereostruktúráját a következőképpen határozták meg: (2E,6E)-8-bD-glükopiranoziloxi-3,7-dimetil-2,{103 }}oktadiénsav.

Az összetevők hatása a tumornekrózis faktor-a (TNF-a) által kiváltott citotoxicitásra L929 sejtekben

A TNF-a sejtapoptózis indukálása révén számos szervsérülést közvetít. A máj esetében a TNF-a biológiai hatásai szerepet játszanak a májtoxinok által kiváltott májkárosodásban, az ischaemiában/reperfúzióban, a vírusos hepatitisben és az alkoholban.22-24) Ezért a TNF-a-t úgy tekintik, mint fontos célpont a gyulladásgátló és májvédő szerek felfedezésében. A fent említett koncepció alapján természetben előforduló termékekből származó védő összetevőket vizsgáltunk a TNF-a által kiváltott sejthalálon L929 sejtekben, egy TNF-a-érzékeny sejtvonalban.25) Korábban beszámoltunk róla.

hogy a Piper chaba, 26-29) Boesenbergia rotunda, 30, 31) Punica granatum, 32) Helichrysum arenarium, 33-35) és a Sapindus rarak, 36-38) több összetevője gátló hatást mutatott a TNF-a által kiváltott citotoxicitás L929 sejtekben. Mivel a C. tubulosa feniletanoid összetevői (plechinakozid, akteozid és izoakteozidstb.) 5) is gátolta ezt a citotoxicitást, tovább vizsgáltuk az iridoid, fenilpropanoid és lignán összetevőket a 4. táblázat szerint. Ennek eredményeként a kankanosid A (9, gátlás: 16,3± 2.0% 1-nél) 00 mM), muszaénozidsav (10, 44,7±8,7%), 8-epigaminsav (11, 10,7±0,4%), 8-hidroxi-geraniol 8-ObD- a glükopiranozid (17, 21,3± 2,4%) és a ()-pinorezinol ObD-glükopiranozid (22, 22,3±1,6%) szignifikáns aktivitást mutatott. Bár aktivitásuk gyengébb volt, mint az echinakozidé (IC50= 31,1 mM), az akteozidé (17,8 mM) és az izoaceteozidé (22,7 mM), amelyek a fő fenil-etanoid összetevők.5)

TERMÉSZETES CISTANCHE TUBULOSA A SZEXUÁLIS FUNKCIÓ JAVÍTÁSÁRA PHGS75% ECH 30% ACT 12%