A Kelong kapszula enyhíti a jóindulatú prosztata hiperpláziát a Nrf2 jelzés aktiválásával és a gyulladás gátlásával patkányokban

Absztrakt

Célkitűzés:
Vizsgálni azokat a molekuláris mechanizmusokat, amelyek révén a Kelong kapszula javítja a jóindulatú prosztata hiperpláziát (BPH), a nukleáris faktor eritroid 2-vel kapcsolatos 2. faktor (Nrf2) jelátviteli útvonalra összpontosítva.

Mód:
Hatvan hím Sprague-Dawley (SD) patkányt véletlenszerűen hét csoportra osztottak: vak kontroll, modell, ál, finaszterid, valamint nagy, közepes és alacsony dózisú Kelong kapszula. A BPH modellt kétoldali orchiectomiával, majd tesztoszteron cipionát szubkután injekciójával hozták létre. Az orchiectomia utáni 8. naptól kezdve a gyógyszeres kezeléssel kezelt csoportok tesztoszteron-propionát injekciót kaptak, és a megfelelő kezeléseket egyidejűleg orálisan adták. A prosztataszövet hisztopatológiai elváltozásait hematoxilin és eozin (HE) festéssel figyelték meg. A tesztoszteron (T), a dihidrotesztoszteron (DHT) és az ösztradiol (E2) szérumszintjét ELISA-val mérték. Valós idejű kvantitatív PCR-t (RT-qPCR) alkalmaztunk a TNF-, IL-1, IL-6, Nrf2 és NAD(P)H kinon-oxidoreduktáz 1 (NQO1) mRNS-expressziós szintjének prosztataszövetben történő értékelésére.

A Cistanche előnyei jóindulatú prosztata hiperplázia esetén

 

Eredmények:
Összehasonlítva az ál-csoporttal, a BPH modellcsoport patkányai kocka alakú vagy magas oszlop alakú mirigyhámot, jelentősen kitágult mirigy lumeneket és fokozott intraluminális váladékot mutattak. A szérum T és DHT szintje jelentősen megemelkedett.P<0.05), whereas E2 levels were significantly decreased (P<0.01). Prostatic mRNA expression of TNF-α, IL-1β, and IL-6 was markedly increased (P<0.01), while Nrf2 and NQO1 mRNA levels were significantly downregulated (P<0.01). In the high-dose Kelong capsule group, the tall columnar epithelium was markedly reduced, and glandular dilation was notably improved. Serum E2 levels were significantly increased (P<0.05), while T and DHT were significantly decreased (P<0.05). NQO1 mRNA expression was significantly upregulated in both the high- and medium-dose groups (P<0.01). Nrf2 mRNA expression was significantly increased (P<0.05), and TNF-α, IL-1β, and IL-6 mRNA levels were significantly decreased (P<0.05) across all Kelong capsule treatment groups.

TCM GYÓGYNÖVÉNY-KIEGÉSZÍTŐ PROSZTATABETEGSÉGEK KEZELÉSÉRE

 

 

CISTANCHE RÉSZLETEK

 

 

 

Következtetés:
A Kelong kapszula hatékonyan enyhíti a patológiás prosztata hiperpláziát BPH modell patkányokban, potenciálisan az Nrf2 jelátviteli útvonal aktiválásával és a gyulladásos válaszok gátlásával.

Kulcsszavak:jóindulatú prosztata hiperplázia; Kelong kapszula; Oxidatív stressz; Gyulladás; Nrf2 jelátviteli útvonal

 

 

 

Bevezetés

A jóindulatú prosztata hiperplázia (BPH) az idősödő férfiak elterjedt urológiai állapota, amelyet az alsó húgyúti tünetek (LUTS) jellemeznek, mint például a gyakori vizelés, a sürgős vizelés és a progresszív ürítési nehézség. Szövettanilag a BPH a prosztata stroma- és mirigykomponenseinek hiperpláziájában, míg anatómiailag prosztata megnagyobbodásban és hólyagkiáramlási elzáródásban nyilvánul meg. Tanulmányok kimutatták, hogy a BPH prevalenciája az életkorral növekszik, és a 40-es éveiben járó férfiak körülbelül 30-40%-át, a 80 év felettiek akár 70-80%-át érinti.

A hagyományos kínai orvoslásban (TCM) a BPH a "hosszú bi" (húgyúti elzáródás) és a "lin zheng" (húgyúti szindróma) kategóriájába tartozik. Úgy gondolják, hogy a patogenezis a vese-qi-hiányból ered, ami vérpangáshoz és károsodott keringéshez vezet, ami végül prosztataszövet-megnagyobbodáshoz vezet.

Míg az androgén jelátvitel, különösen a tesztoszteron és a dihidrotesztoszteron részvételével, jól bevált tényező a BPH patofiziológiájában, az újabb bizonyítékok rávilágítanak aoxidatív stressz, krónikus gyulladások, hormonális egyensúlyhiányokés helyi hipoxia. A legújabb kutatások szerint aNrf2 jelátviteli útvonal, a sejtes antioxidáns válaszok kulcsfontosságú szabályozója, kritikus szerepet játszik a BPH-val kapcsolatos oxidatív stressz és gyulladás mérséklésében.

 

A gyógynövénygyógyászat szerepe a BPH-ban: Cistanche és a prosztata egészsége

A különféle gyógynövényes megközelítések közül az összetevők, mint plCistanche deserticola- a hagyományos formulákban széles körben használtak - egyre jobban felfigyelnek rájukvédő hatások a prosztata egészségére. Cistanchetartalmazfeniletanoid glikozidok (pl. echinakozid, akteozid)ismertek rólukgyulladáscsökkentő, antioxidáns és hormonszabályozó tulajdonságokkal rendelkezik. Tanulmányok kimutatták, hogyCistancheA kivonatok:

Csökkentse a prosztata gyulladásáta gyulladást elősegítő citokinek (pl. IL-6, TNF-) leszabályozásával

Modulálja az androgén szinteta hormonális egyensúly helyreállítására

Aktiválja a Nrf2 jelzést, ezáltal fokozza az olyan antioxidáns enzimek expresszióját, mint a HO-1 és az NQO1

Javítja a húgyúti tüneteket és csökkenti a prosztata térfogatátkísérleti modellekben

Ezek az előnyök szorosan illeszkednek a jelenlegi tanulmány megállapításaihoz, ami arra utal, hogy a képletek tartalmazzákCistanche-mint például a Kelong kapszula - keresztül fejthetik ki terápiás hatásukataz oxidatív stressz és a gyulladás többcélú modulálásaa prosztatában.

Anyagok és módszerek

1. Állatok

A hím SD patkányokat (6-8 hetes, 200 ± 10 g) a National Institutes for Food and Drug Controltól szereztük be (licencszám: SCXK (Jing) 2022-0002). Szabványos körülmények között (hőmérséklet 20-25 fok, páratartalom 40-60%) tartották őket, ad libitum hozzáférve az élelemhez és a vízhez.

2. Gyógyszerek és reagensek

A Kelong kapszula egy módosított formula alapjánJin Gui Shen Qi Wan, amely [Rehmannia glutinosa, Cornus officinalis, Poria cocos, Moutan cortex] és további gyógynövényeket, például astragalust, szója izoflavonokat és tökmagolajat tartalmaz. A gyógynövénykivonatot vizes lefőzéssel és vákuumszárítással állítottuk elő. Egyéb reagensek a következők:

Finaszterid (5 mg, Merck Sharp & Dohme)

Tesztoszteron-propionát (98%, Macklin Biotech)

ELISA készletek T, DHT és E2 számára (Sabokang Biotech)

RNS extrakció és qPCR reagensek (Yisheng Biotech, Invitrogen)

HE festőkészlet (Jiuzhou Berlin Biotech)

3. Eszközök

Biológiai szövetbeágyazó rendszereket, mikrotomokat, PCR-gépeket és ELISA-leolvasókat használtak a Thermo Fisher, a BioTek, a Leica és más szabványos laboratóriumi beszállítóktól.

 

Kísérleti tervezés

1. BPH modell indukció

7 napos akklimatizáció után 60 patkányt véletlenszerűen besoroltunk a kontroll, az ál- és a BPH modellcsoportokba. Kétoldali orchiectomiát végeztek altatásban (nátrium pentobarbitál, 45 mg/kg) az androgénhiány előidézésére, majd szubkután tesztoszteron-propionát injekciókat (5 mg/kg) 28 napon keresztül a BPH állapotok szimulálására. Az áloperált patkányokon hereeltávolítás nélkül herezacskós metszést végeztek.

2. Csoportosítás és kezelés

A modellpatkányokat tovább osztották modellcsoportra, finaszterid csoportra (0,45 mg/kg), valamint magas (14,4 g/kg), közepes (7,2 g/kg) és alacsony (3,6 g/kg) dózisú Kelong kapszula csoportokra. Minden kezelést szájszondán keresztül adtunk 28 napon keresztül. A kontroll és az álpatkányok desztillált vizet kaptak.

3. Szövettan (HE festés)

A prosztata szöveteit 4%-os paraformaldehidben fixáltuk, paraffinba ágyaztuk, metszetet készítettünk, majd hematoxilinnel és eozinnal festettük. A kórszövettani elváltozások felmérésére mikroszkópos értékelést alkalmaztunk.

4. ELISA-elemzés

A tesztoszteron, a DHT és az ösztradiol szérumszintjét a kereskedelemben kapható ELISA kitekkel mértük a gyártó utasításai szerint.

5. Valós idejű PCR

A teljes RNS-t a prosztataszövetekből Trizol segítségével extraháltuk, cDNS-vé fordítottuk, és qPCR-hez használtuk. A Nrf2, NQO1, TNF-, IL-1 és IL-6 relatív expresszióját a 2^-ΔΔCt módszerrel számítottuk ki. A primer szekvenciákat az 1. táblázat tartalmazza.