2. rész: A Cistanche Deserticola kivonatai antagonizálhatják az immunszenszcenciát és meghosszabbíthatják az élettartamot az öregedésre hajlamos egér 8 (SAM-P8) egerekben

Kapcsolatfelvétel: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

3.5. Kivonatok dfCistanche deserticola(ECD)Népesítés.

A limfociták apoptózisa és nekrózisának gátlása SAM-P8 egerekben. A vér limfocita-populációiban a nekrózis és apoptózis szintjét Annexin V-FITC V/PI-vel végzett kettős festéssel elemeztük. Ez feltárta, hogy a SAM-P8micusban a nekrotikus limfociták aránya szignifikánsan magasabb volt, mint a SAM-R1 kontroll állatokban, míg az apoptotikus limfociták aránya alacsonyabb (7. ábra). A SAM-P8 egerek étrendjének három különböző dózisú ECD-vel történő kiegészítése képes volt gátolni a perifériás limfocitapopulációkban észlelt nekrózis szintjét, míg csak a két magasabb szintű ECD-kiegészítés okozott jelentős változást az apoptotikus limfociták szintjében (7. ábra).

3.6.KivonatokCistanche deserticola(ECD) Csökkentse a proinflammatorikus citokin IL-6 szintjét SAM-P8 egerekben.

Az ECD-nek az immunrendszer életkorral összefüggő változásait befolyásoló képességének további mutatójaként az ECD étrend-kiegészítés hatása számos citokin (IFN-, TNF-, IL-2.IL{{4) szintjére. }}.IL-10, GM-CSF és IL-3) citometrikus gyöngysor-analízissel (CBA) elemeztük, amely magában foglalja a fluoreszcens festékkel jelölt antitestekkel és befogó citometrikus gyöngyökkel való festést. Az eredmények (8. ábra) azt mutatták, hogy a gyulladásos citokin IL-6 nem emelkedett a 8-hónapos SAM-P8 egerekben az azonos korú kontroll SAM-R1 egerekhez képest, de szignifikánsan megnőtt, amikor a 6-hónapos SAM-R1 egerekhez képest (az eredményeket nem mutatjuk be). A nagy és közepes dózisú ECD étrend-kiegészítő alkalmazása azonban statisztikailag szignifikánsan csökkentette a plazma IL-6 szintjét (8(a) és 8(b) ábra,<>

(IFN-, TNF-, IL-2, IL-10, GM-CSF és IL-3) nem mutatott szignifikáns eltéréseket a SAM-P8, SAM-R1 és ECD-vel kezelt egércsoportok között (adatok nem látható).

4. Megbeszélés

Az újonnan invazív mikroorganizmusokkal vagy endogén tumorsejtekkel szembeni immunvédelem a T-sejtek repertoárjának sokféleségétől függ, amely viszont a naiv T-sejtek létrehozásától és fenntartásától függ[19]. Az öregedési folyamat során a T-sejtek repertoárjának sokfélesége drámaian csökken a perifériás tartalékkészletben lévő naiv T-sejtek fokozatos kimerülése miatt. Úgy gondolják, hogy a reagáló naiv T-sejtek hiánya felelős az idős emberek fertőzésekre, rákra való fogékonyságáért és a vakcinázást követő rossz eredményekért [20]. Különféle beavatkozásokat alkalmaztak, beleértve a kalóriakorlátozást [7], a testmozgást [21] és az E-vitamin-pótlást [8], hogy sikeresen pótolják a naiv T-sejteket, és ezáltal meghosszabbítsák az élettartamot, és csökkentsék a fertőzések és a rák kialakulását az idősek körében. Ebben a vizsgálatban kimutattuk, hogy az ECD képes növelni a naiv T-sejtek szintjét a perifériás készletben, és ezzel párhuzamosan meghosszabbodott az élettartam, és csökkent a daganatképződés gyakorisága öregedő felgyorsult egerekben (ECD-terápiás csoport a SAM-P8-cal szemben). ,0 versus 1/6). Ezért ésszerűnek tűnik azt a következtetést levonni, hogy az ECD azon képessége, hogy megfordítsa a perifériás naiv T-sejtek korfüggő kimerülését, hozzájárulhat az életkorral összefüggő betegségek csökkentésében ismert, hosszú távú klinikai megfigyelésekből származó hatásaihoz.

5. Anyagok és módszerek

5.1.Anyagok.

A normál immunreakció során, egy idegen antigén visszaszorítását és eliminációját követően a legtöbb klonálisan kitágult T-sejtek apoptózison megy keresztül, és csak egy kis része marad meg memória T-sejtként. Következésképpen, ahogy az immunkompetens szervezet öregszik, a perifériás memória T-sejtek felhalmozódnak az idegen antigénekkel való érintkezés eredményeként, amelyek a naiv T-sejteket memóriasejtekké alakítják [22,23]. Számos tanulmány utal arra, hogy a limfocita apoptózis hibái idős állatokban és emberekben szintén hozzájárulnak a memória T-sejt kompartmentjének megnagyobbodásához [24,25]. Ezenkívül egy közelmúltbeli tanulmány kimutatta, hogy a perifériás memória T-sejtek túlzott mennyisége gátolhatja a naiv T-sejtek homeosztatikus proliferációját [26]. Ezek a közelmúltbeli tanulmányok azt is sugallták, hogy a memória T-sejtek nagy mennyiségű proinflammatorikus citokint választanak ki, amelyek hozzájárulhatnak az idősek különböző szöveteinek tartós gyulladásához. Következésképpen a memória T-sejtek szintjének csökkentése előnyös mind a naiv T-sejtek homeosztatikus proliferációja szempontjából, mind pedig az idősebb szervezetekben tapasztalható túlzott gyulladásos állapot enyhítésében. Ebben a vizsgálatban kimutatták, hogy az ECD-vel történő étrend-kiegészítés képes csökkenteni a perifériás memória T-sejtek szintjét és növelni a naiv T-sejtek szintjét. Ezenkívül az ECD-kiegészítés növelte az apoptózis terét az új naiv limfociták számára. Szintén gátolt volt a perifériás limfociták nekrózisa, amelyet főként az oxidatív stressz okoz idős állatokban.

Széleskörű bizonyítékok állnak rendelkezésre arra vonatkozóan, hogy a szervezet öregedését nemcsak az immunhiány, hanem a krónikus gyulladás növekedése is jellemzi[27. A proinflammatorikus állapot legvilágosabban a keringés fokozott IL-1-ében nyilvánul meg, valamint az öregedéssel összefüggő krónikus gyulladásos betegségek, például az Alzheimer-kór, a Parkinson-kór és az érelmeszesedés megnövekedett gyakoriságában. Az egyik legjelentősebb gyulladásos citokinézis az IL-6, amelynek plazmakoncentrációja az idősödéssel és az életkorral összefüggő betegségekkel növekszik [18,28,29], és epidemiológiai vizsgálatok szerint az IL-6 a hosszú élettartam jó biomarkere. mivel ez szorosan összefügg az idős betegcsoportok mortalitásával [30,31]. Ezzel összhangban számos terápiás beavatkozás, amely csökkenti az IL{10}} koncentrációját, képes erre

6. ábra: Az ECD étrend-kiegészítés hatása az őssejt-antigénre-1 (Sca-1) SAM-P8 egerek perifériás vér limfocitáiban. A nyolc hónapos hím SAM-P8 és a kontroll SAM-RI egereket 5 csoportba osztották. A SAM-P8 állatok 3 kezelt csoportját négy héten keresztül táplálták alacsony (100 mg/kg), közepes 500 mg/kg és magas, 250 mg/kg dózisú ECD-vel, a két kontrollcsoportot pedig ugyanaz a diéta pótlás nélkül. 12 órás koplalás után perifériás vért vettünk az érzéstelenített állatokból, és FACS-elemzésnek vetették alá az 5. részben leírtak szerint. (a) A különböző egércsoportok reprezentatív FACS-diagramjai, amelyeket őssejt-antigén kapuzásával generáltak-1 (Sca{{) 20}})pozitív sejtek.(b) A hisztogram, amely az őssejt-antigén-1 (Sca-1)-pozitív sejtek százalékos arányát mutatja a különböző állatcsoportok perifériás vérében. {23}}).w*<0.01 sam-p8="" versus="" sam-r1;**=""><0.01 each="" treated="" group="" versus="" sam-p8="" group="" (by="" one-way="" anova="" with="" post="" hoc="">

7. ábra: Az ECD étrend-kiegészítés hatása a limfociták apoptózisára és nekrózisára idős SAM-P8 egerekben. A nyolc hónapos hím SAM-P8 és a kontroll SAM-RI egereket 5 csoportba osztották. A SAM-P8 állatok három kezelt csoportját négy héten keresztül táplálták alacsony (100 mg/kg), közepes (500 mg/kg) és magas (2500 mg/kg) dózisú ECD-vel kiegészített étrenddel, és a két kontroll állatcsoportot etettük. ugyanazt a diétát kiegészítés nélkül. 12 órás éheztetés után perifériás vért vettünk az érzéstelenített állatokból, és FACS-analízisnek vetettük alá, az 5. szakaszban leírtak szerint. (a) Reprezentatív FACS-diagramok a különböző egércsoportokról, amelyeket kétszeresen festett vér limfocitákon Annexin V-FITC-vel kaptunk. /PI. (b) Az apoptotikus limfociták (annexin V-FITC pozitív sejtek) százalékos arányát mutató hisztogram a különböző állatcsoportok perifériás vérében. (c) A hisztogram, amely a nekrotikus limfociták (PI-pozitív sejtek) százalékos arányát mutatja a különböző állatcsoportok perifériás vérében. Az oszlopok a mear SD-t jelölik (minden csoportban,= 10)."<0.05 sam-p8=""><0.05each treated="" groupversussam-p8group(by="" one-way="" anova="" with="" post="" hoc="">

8. ábra: Az ECD étrend-kiegészítő hatása a szérum proinflammatorikus citokin L6 szintjére SAM-P8 egerekben. A nyolc hónapos hím SAM-P8 és a kontroll SAM-RI egereket 5 csoportra osztottuk. A SAM-P8 állatok három kezelt csoportját négy hétig alacsony (100 mg/kg), közepes (500 mg/kg) táplálékkal táplálták. kg) és nagy (2500 mg/kg) ECD-dózisokkal, és a két kontroll állatcsoportot ugyanazzal a táplálékkal etették kiegészítés nélkül. 12 órás koplalás után a plazmákat összegyűjtöttük, és a plazma citokineket a különböző állatcsoportokban citometrikus gyöngysoros immunoassay segítségével határoztuk meg, mindezt az 5. szakaszban leírtak szerint. (a) A gatingonIL által generált különböző egércsoportok reprezentatív EACS-plotjai citometrikus gyöngysor. (b) A különböző állatcsoportok plazmájában lévő citokin IL6 koncentrációját mutató hisztogram.<0.001each treated="" group="" versus="" sam-p8="" group="" (by="" one-way="" anova="" with="" post="" hoc="">

az életkorral összefüggő betegségek enyhítésére [18]. Ennek fényében jelentős volt, hogy ebben a vizsgálatban az ECD-vel történő étrend-kiegészítés csökkenteni tudta a perifériás IL-6-koncentrációt, ami arra utal, hogy ez a hatás hozzájárulhat az életkorral összefüggő betegségek gyakoriságának csökkentésének mögöttes mechanizmusaihoz. az ECD klinikai gyakorlatban való hosszú távú alkalmazása révén szerezték meg.

Az életkor előrehaladtával fellépő adaptív immunválasz változásai mellett a veleszületett immunitásban is jelentős változások következnek be, ahogy a szervezet öregszik. Ezek közül a természetes gyilkos [18] sejtekben, a tumorsejtek és a vírussal fertőzött sejtek közvetlen citotoxikus lízisét biztosító sejtkomponensek első sorában bekövetkezett változások kiterjedtek, mivel az idős emberek fokozott érzékenységet mutatnak mind a daganatok kialakulására, mind a vírusfertőzésekre [32]. ]. Ez a tanulmány azt mutatta, hogy a CD3 plusz Ly49 plusz NK sejtek szignifikánsan alacsonyabb szinten voltak jelen a szenilis SAM-P8 egerekben, mint a SAM-R1 kontroll állatokban, ami egy másik mögöttes tényező lehet, amely az idős egerek rák- és vírusfertőzésekkel szembeni fokozott fogékonyságát magyarázza. Az NK-sejtek szintjének ebben a vizsgálatban tapasztalt növekedése az ECD-vel történő étrend-kiegészítés után ezért előnyös lehet az idős szervezetek számára a daganatok kialakulásával és a vírusfertőzéssel szembeni fokozott rezisztencia szempontjából. Azonban további vizsgálatokra van szükség annak tisztázásához, hogy az ECD milyen szerepet játszik az NK-sejtekre az idős szervezetekben.

Összefoglalva, ez a tanulmány kimutatta, hogy az öregedésre hajlamos egér-altörzs, a SAM-P8 ECD-vel történő kezelése jelentős mértékben visszafordíthatja az életkorral összefüggő immunszenszcencia-változásokat. A naiv T-sejtek és NK-sejtek perifériás és lépsejt-populációiban egyaránt csökkentek a hiányosságok, miközben a redundáns memóriasejtek szintje is csökkent. Ezenkívül az ECD-vel történő étrend-kiegészítés képes volt elnyomni mind a perifériás limfociták nekrózisát, mind a proinflammatorikus citokin, az IL-6 szintjét. Végül, a szenilis immunrendszer változásai mellett az ECD étrend-kiegészítés jelentősen meghosszabbította a senileSAM-P8 mikrofon élettartamát.

Hivatkozások

[1] Y.Jiang és PF.Tu, "Analysis of Chemical constituentsCistanchefajok, "Journal of Chromatography A, vol.1216, no. 11, pp.{2}}, 2009.

[2] Q. Xiong K. Hase Y. Tezuka, T. Tani, T. Namba és SKadota. "A feniletanoidok májvédő aktivitásaCistanche deserticola", PlartaMedica, 64. kötet, 2. sz., pp.{2}}, 1998.

[3]"Immunology and aging in Europe. Proceeding of the 2nd Conference on Basic Biology and Clinical Impact of Immunosenescence March 22-26, Cordoba, Spain, "Experimental Gerontology, vol.37, no.{5} }, pp.{6}},2002.

[4] G.-D. Xuan és C.-Q. Liu: "Kutatás aa Cistanche deserticola fenil-etanol-glikozidjainak (PEG) hatásatovábböregedésgátlóD-galaktóz által indukált idős egerekben, "Journal of Chinese Medicinal Materials, 31. évf., 9. szám, pp. 1385-1388, 2008.

[5] D.Aw, ABSilva és DBPalmer, "Immunosenescence emerging challenges for an aging népesség", Immwmology, 120. kötet, 4. o., pp.{3}}, 2007.