3. rész: A hippocampális CREB-pCREB-miRNS MEF2 tengely aktiválása, amely modulálja a térbeli tanulási és memóriaképesség egyéni változásait

Kapcsolatba lépni:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Plc kattintson ide a 2. részhez

Egyedülálló módon a miR{0}}f-3p pozitív szabályozója a térbeli tanulásnak ésmemória(1. és 3. ábra). Ma már jól bebizonyosodott, hogy a specifikus miRNS-ek biogenezise, ​​aktivitása és lebomlása részt vesz a tanulásért és a hosszú távú idegsejtek plaszticitásának szabályozásában.memóriaformáció (McNeill és Van Vactor, 2012), és némelyikük téves kifejezése neurológiai rendellenességekkel jár (Issler és Chen, 2015; Salta és De Strooper, 2017). Például a gerinctelen Aplysia California-ban a miR-124 a CREB szabályozásán keresztül szabályozza a szerotonin által közvetített szinaptikus plaszticitást (Rajasethupathy et al., 2009). A miRNS-ek szerepe a stresszhez kapcsolódó, amygdala-függőben

A Cistanche javíthatja a memóriát

6. ábra: A hippocampalis CREB sztochasztikus foszforilációja és a miR-466-669 klaszter transzkripciós aktiválása

(A) Az mSfmbt2 és a miR-466-669 klaszter géntérképei. Az mSfmbt2 gén 10. intronjában található miR-466-669 klaszter miRNS-prekurzort kódoló szekvenciái szürke dobozokként jelennek meg. A legtöbb 50 miRNS-prekurzor első nukleotidját (pre-mir-466m) plusz 1-gyel jelöljük. A miR-466-669 klaszter (A–H) elsődleges transzkriptumának különböző részeinek elhelyezkedése pozitív ( plusz ) Az RT-qPCR jeleket szürke sávok jelzik. Az I. részt, amely nem mutat () RT-qPCR jelet, az üres sáv jelzi. TSS, a miR-466-669 klaszter feltételezett transzkripciós kezdőhelye.

(B) A GLN egerek mSfmbt2 mRNS-ének relatív hippocampális expressziós szintjei, amelyek magas miR-466f-3p szintet mutatnak, összehasonlítva a PLN egerekkel (n=7 csoportonként). Az mSfmbt2 Ct értéke ~29–32.

(C) A GLN egerek miR-466-669 klaszterének (B és G rész) elsődleges transzkriptumának relatív hippocampális expressziós szintje a PLN egerekkel összehasonlítva (n=10 csoportonként).

(D) A foszfo-CREB (pCREB), a teljes CREB (tCREB) és a b-aktin expresszió Western-blot elemzése GLN, PLN és HC egerek hippokampuszában. A reprezentatív blotok láthatók (balra), a jobb oldali hisztogram pedig a relatív pCREB/tCREB arányt mutatja a b-aktinra normalizálás után (n=16 csoportonként). (E) A Pearson-féle korrelációs szórásdiagramok korrelációt mutatnak a miR-466-669 klaszter elsődleges transzkriptumának hippocampális expressziós szintjei és az egyes GLN pCREB/tCREB fehérje között (n=18, R=0.52, *p).=0.02, pontok) és PLN egerek (n=9, R=0.71, *p=0.03, négyzetek). A HC egerek (n=9) átlagos szintjét 1-re állítottuk be.

(F) Western blotting analízis a pCREB, tCREB és b-aktin expressziójáról a DIV14 elsődleges hippocampális neuronokban kémiailag indukált LTP (forskolin által) és kémiailag gátolt CREB foszforiláció hatására (666-15). A neuronokat 1 nM vagy 2 nM 666-15-val kezeltük 1 órán át, majd forskolinnal 2 órán át. A hisztogram a relatív pCREB/tCREB arányokat mutatja.

(G és H) A miR-466f-3p (G) és a miR-466-669 klaszter elsődleges transzkriptumának (H) expressziós szintjének összehasonlítása a DIV14 elsődleges hippocampális neuronokban a {{4} alatt } és forskolin kezelés az (F) pontban leírtak szerint. A Nurr1 és homer1a mRNS-ek pozitív kontrollok. A fenti (A) pontban jelzett B és G rész RT-qPCR jeleit használtuk a miR-466-669 klaszter elsődleges transzkriptumának reprezentálására.

A (B)–(D)-ben látható adatok átlag ± SEM-ként vannak megadva, és három független kísérletsorozat adatai (n {{0}} csoportonként) az (F) és (G) pontokban láthatók. mint átlag ± SD. A statisztikai szignifikanciát nem párosított t-próbával (B és C), egy-ANOVA-val Tukey post hoc teszttel (D, F és G), vagy két-ANOVA-val Tukey post hoc teszttel (H) értékeltük. Statisztikai különbségek: *p < 0.05,="" **p="">< 0,01,="" ***p="">< 0,001="" és="" ****p=""><>

a félelem tanulása és a kihalás egyértelműen kimutatható (Ronovsky és mtsai, 2019; Sillivan és mtsai, 2020). Emellett a NOR teszt növeli a miR-183/96/182 expressziót a hippocampusban (Woldemichael et al., 2016). A miR{7}}-hez hasonlóan az agy-specifikus miR-134 is negatívan szabályozza a félelmetmemóriaképződés és LTP indukció a rágcsálók hippocampalis CA1 régiójában a LimK1 mRNS transzlációs represszióján keresztül (Gao et al., 2010). A tér- és tárgyfelismerés tekintetébenmemória, a miR-132 a CREB neuronális aktivitás-függő modulációjával indukálható (Hansen et al., 2016). A miR-132-hoz hasonlóan azt találtuk, hogy a neuronális aktivitás miR-466f-3p-t indukál a CREB transzkripciós aktiválása révén (6F–6H. ábra). A miR-466f-3p-vel ellentétben azonban a miR-132 egerekben jobb vagy gyengébb MWM-feladattal indukálódik (1. és S1A. ábra), valószínűleg a miR-132 miatt. stressz hatására is indukálható (Shaltiel et al., 2013), ahogy az a hosszan tartó és stresszes MWM-feladat során is történne. Egy másik lehetséges ok, amiért a kimutatott arányok megkülönböztethetetlenek a GLN és PLN csoportokban, az általunk használt kimutatási módszer korlátozása, magas alapszintű miR-132, valamint ERK-vel, ami akadályozza azon képességünket, hogy észleljük a hajtásváltozásokat a hippocampalis lizátumok ritka engramjaiban. Bár a miR-466-669 klaszterben lévő miRNS-ek nagymértékű szekvencia-hasonlóságot mutatnak, csak néhány tag indukálódik az MWM tréning során (1B. ábra), valószínűleg a miRNS biogenezis során bekövetkező differenciális transzkripciós szabályozás és/vagy poszttranszkripciós szabályozás miatt (Michlewski és Ca). Ceres, 2019; Siomi és Siomi, 2010).

Ezekkel a többi miRNS-sel ellentétben a miR-466f-3p a miR-466f-3p a neuronális plaszticitás pozitív szabályozójaként jelent meg tanulmányunkban a CREB-pCREB-miR-466f-3p-n keresztül. -MEF2A tengely (5. és 6. ábra). Az MWM-feladatról ismert, hogy serkenti a CREB foszforilációját (Porte et al., 2008). A pCREB pozitívan szabályozza az idegsejtek plaszticitását, valamintmemóriaallokáció és konszolidáció, főleg különböző genomi lókuszok/gének transzkripciós aktiválásával (Lisman et al., 2018). In vitro adataink azt mutatják, hogy a CREB foszforiláción keresztüli aktiválása szükséges a miR-466f-3p expressziójához (6F és 6G ábra). Szignifikáns módon, párhuzamosan a hippocampális miR-466f-3p szintjével (1B. ábra), azt találtuk, hogy a CREB-t a GLN foszforilációja aktiválta, de a PLN-t nem (6D. ábra; lásd alább). Ezenkívül a lentivírus által közvetített túlzott expressziót és a szivacs gátlást alkalmazó kombinatorikus megközelítésünk azt mutatja, hogy a miR{10}}p indukció a jobb térbeli tanulás és tanulás elsődleges oka.memóriaképesség (3C. ábra). Az MWM-feladat eredményeivel összefüggésben a hippokampuszukban a miR-466f- 3p-t túlexpresszáló egerek erősebb LTP-t mutattak, amit a kontrollhoz vagy a miR-szivacsvírushoz viszonyított fEPSP-k növekedése bizonyít. fertőzött egerek (4B. ábra).

Mechanikailag a miR-466f-3p elnyomja a Mef2a mRNS transzlációját, ezáltal csökkenti a MEF2A fehérje szintjét, amely a tanulás által kiváltott dendritikus gerincnövekedés és a térbeli növekedés negatív szabályozója.memóriaképződése (Cole és mtsai, 2012; Flavell és mtsai, 2006), a GLN egerek hippokampuszában (5D, 5F és 5G ábra). A MEF2A/2D-ről beszámoltak arról, hogy gátolja a serkentő dendritikus szinapszisok indukcióját (Flavell és mtsai, 2006). Bár mindkét korábbi tanulmány, tükrözve a miR-466f-3p túlexpressziós vagy miR-szivacs alapú gátlási módszerekkel végzett vizsgálatunkat (2A. ábra), megvizsgálta a dendrites arborizációt, és nem számolt be különbségről a vad típusú és MEF2 túlzott expressziós vagy knockdown alanyoknál, egyik tanulmány sem elemezte a dendrithosszra gyakorolt ​​hatást. Itt meg kell említeni, hogy bár a Mef2d mRNS 30 UTR-je prediktív kötőhelyet is tartalmaz a miR-466f-3p számára, a miR-466-f-3p túlzott expressziója nem befolyásolja egy Mef2d 30 UTR-hordozó plazmid riporter aktivitását (az adatokat nem mutatjuk be). Nevezetesen Cole et al. (2012) kimutatták, hogy a vízi labirintusban edzett egerek hippokampuszában a MEF2A/D fehérjék szintje lecsökkent. Továbbá, mivel a későbbi MEF2-túlexpresszióval rendelkező betanított egereik normális térbeliséget mutattakmemóriaArra a következtetésre jutottak, hogy a MEF2 túlzott expressziója kifejezetten megzavarta a térbeli memória kialakulását, de nem létező. A memória manipulálása azonban időlegesen korlátozott volt, mivel a transzgén expressziójára használt herpes simplex vírus (HSV) vektor tipikusan a mikroinjekció után 2–4 nappal érte el csúcsát, és a mikroinjekció után 8–12 nappal disszipált (Cole és mtsai, 2012). Ezzel szemben lentivírust használtunk, amelynek DNS-e beépülne a gazda kromoszómáiba, tartós fertőzést biztosítva, lehetővé téve a tanulás hosszan tartó manipulálását.memória(3. ábra). Végül a GLN egerek kis hányada (25 százaléka) nem mutatott miR-466f-3p indukciót az MWM-feladat során (1C. ábra), ami arra utal, hogy más tényezők és/vagy útvonalak is hozzájárulhatnak a téri tanulás ésmemóriaezeknek a GLN egereknek a képessége. Felmértük a miR-335-5p és az Sgk mRNS-t, amelyek mindkettő eltérően fejeződik ki a térbeli tanulás és a memóriaformálás során (Capitano et al., 2017; Tsai et al., 2002). A patkányokkal vagy a CD1-en kívültenyésztett egerekkel ellentétben azonban nem tapasztaltunk különbséget a GLN egerek és a PLN egerek hippocampális miR-335-5p vagy Sgk mRNS szintjében (S1A és S5 ábra). Így úgy tűnik, hogy a CREB-pCREB-miR-466f-3p-MEF2A tengely sztochasztikus aktiválása a fő oka a térbeli tanulás és az egyéni eltérések hátterében.memóriabeltenyésztett C57BL/6J egereink képessége.

A transzkripció, transzláció vagy poszttranszlációs módosulás szintjén működő, genetikailag azonos sejtek közötti sztochasztikus génexpressziót intenzíven tanulmányozták (Eling et al., 2019; Reinius és Sandberg, 2015). Ez a sztochaszticitás alapozza meg a sejtfunkciók sejtenkénti variabilitását, és a fenotípusos jellemzők ebből következő sokféleségét, amelyek ugyanabban a mikrokörnyezetben manifesztálódnak, válaszul a környezeti ingerekre a differenciálódás/fejlődés során (Eling et al., 2019). A sejtszintű génexpresszió ilyen sztochaszticitásának két jól tanulmányozott példája a szaglóreceptor-promoter és a specifikus Pcdh-promoter kiválasztása az egyes emlős szagló szenzoros neuronok szaglógén-klaszterében, amelyek epigenetikai váltáskor aktiválódnak (Magklara és 2013). ). A Pcdh-promoter használatára vonatkozó sztochasztikus és visszafordíthatatlan döntés a kópiaszám-változtatás, a DNS-metilációban bekövetkezett változások és a nem kódoló RNS-transzkripció kombinációjának eredménye (Canzio et al., 2019). Ezzel párhuzamosan korábban is megfigyelték a génexpresszió sztochaszticitását és a jelátvitel átalakítását specifikus szövetekben, beleértve a hippokampust is, genetikailag azonos rágcsálók körében (Alfonso és mtsai, 2002; I GH et al., 2014V). Tanulmányunk egy bizonyítékot mutat be, amely azt mutatja, hogy a különböző egyének fenotípusos változatossága, különösen a térbeli tanulásuk ésmemóriaképességét a hippocampusban a CREB aktiváció sztochasztikussága és a miR- 466-669 klaszter ebből következő transzkripciós aktiválása modulálja, ami egy specifikus miRNS (miR-466f-3p) emelkedett szintjéhez vezet. gátolja a memória negatív szabályozó (MEF2A) expresszióját. Azonban még nem világos, hogy a miR-466-669 klaszter által kódolt más miRNS-ek is hozzájárulnak-e a jobb tanuláshoz ésmemóriaképesség. Ez a fenotípusos heterogenitás a hippokampusz sejtes heterogenitásának tudható be, ami az aktivitás által kiváltott engram génexpresszió eltéréseihez vezethet (Jaeger és mtsai, 2018; Rao-Ruiz és mtsai, 2019).

Jelenleg nem ismert, hogy mikor és hogyan határozzák meg a hippokampusz CREB aktivációjának sztochaszticitását specifikus neuronális ingerekre. Valószínű, hogy létezik egy lokusz-specifikus mechanizmus, amely lehetővé teszi, hogy a sztochasztikusan foszforilált CREB aktiválja a miR-466-669 klaszter promóterét. Jelenleg azonban nem áll rendelkezésre nyilvános adatbázis ennek a miRNS-klaszternek a transzkripciós kezdőhelyéről (TSS), és csak egyetlen potenciális CREB-kötő motívum található a miR-466-669 klaszter feltételezett TSS-jétől 5 kb-ra feljebb. . Jelenleg nem ismert, hogy a pCREB közvetlenül vagy közvetve aktiválja-e ezt a miRNS-klasztert, ahogy a mögöttes mechanizmusok sem. Nevezetesen, a miR-466-669 klaszter csak rágcsálókban létezik. Azonban az emberi miRNS has-miR-466 és hsa-miR-3941 magszekvenciái hasonlóak, mint az egér mmu-miR-466f-3p, és képesek bázispárosításra. a humán MEF2A mRNS 30 UTR-jével, a miRWalk 2.0 előrejelzése szerint (Sticht et al., 2018). Ezenkívül egy másik ismert humán miRNS-ről (hsa-miR{20}}) is kimutatták, hogy negatívan szabályozza a MEF2A expresszióját (Ikeda et al., 2009). Így a CREB-pCREB-miR-466f-3p-MEF2Aaxis ebben a tanulmányban feltárt sztochasztikus aktiválása a térbeli tanulás és a térbeli tanulás fajon belüli variációinak generálásának általános mechanizmusa.memóriaa különböző egyedek közötti képesség, amely evolúciós szempontból előnyös lehet a természetes szelekció számára.

CSILLAG plusz MÓDSZEREK

A részletes módszereket a cikk online változata tartalmazza, és a következőket tartalmazza:

d KULCS FORRÁSOK TÁBLÁZATA

d ERŐFORRÁS ELÉRHETŐSÉG

B Vezető érintkező

B Anyagok elérhetősége

B Adatok és kódok elérhetősége

d KÍSÉRLETI MODELL ÉS A TÁRGY RÉSZLETEI

B Állatok

B Sejttenyészetek

d A MÓDSZER RÉSZLETEI

B Morris vízi labirintus feladat

B Új objektum felismerési teszt (NOR)

B Barnes labirintus (BM) feladat

B miRNS microarray hibridizáció és RT-qPCR elemzés

B Plazmid felépítés

B Sejttranszfekció és kémiai kezelés B miRNS in situ hibridizáció (ISH)

B Proteinlizátum készítés, Western blot, immunfluoreszcens festés és képalkotó elemzés

B Golgi festés

B Egér elsődleges hippocampális neuronjainak rekombináns lentivírus fertőzése

B Rekombináns lentivírus injekció egér hippokampuszába

B Teljes cellás patch-clamp felvétel

B Elektrofiziológia

B Luciferáz riporter vizsgálat d QUANTIFIKÁCIÓ ÉS STATISZTIKAI ELEMZÉS

KIEGÉSZÍTŐ INFORMÁCIÓK

Kiegészítő információk találhatók online a https://doi.org/10.1016/j címen. celrep.2021.109477.

KÖSZÖNETNYILVÁNÍTÁS

Köszönetet mondunk az Academia Sinica National RNAi Core Facility-jének a rekombináns lentivírus-előkészítésért, az Academia Sinica Neuroscience Core Facility-jének (AS-CFII-108-106) a fEPSP-rögzítési technikákért és a tenyésztett neuronok teljes sejtes rögzítéséért, valamint a Molekuláris Intézetnek Biology Imaging Core és Bioinformatics Core technikai segítségnyújtásért. Szintén köszönetet mondunk Dr. Hsien-Sung Huangnak (Tajvani Nemzeti Egyetem) a pFUGW-dsRed lentivírus vektor biztosításáért. Ezt a kutatást a Taipei Orvosi Egyetem, a Frontier of Science Award (MOST 107-2321-B-001-016) támogatta; a Tajpej, Tajvani Tudományos és Technológiai Minisztérium (MOST) támogatásai (MOST 108- 2320-B-038-066 és MOST 109-2320-B-038-071); valamint egy Senior Investigator Award az Academia Sinica-tól, Tajpej, Tajvan.

A SZERZŐ HOZZÁJÁRULÁSAI

I.-FW, K.-JT és C.-KJS tervezte a kísérleteket. G.-JH elvégezte a Golgi-festést. Az I.-FW YW és Y.-HY segítségével az összes többi kísérletet elvégezte. Az adatelemzést az I.-FW végezte. I.-FW és C.-KJS írta a kéziratot.

ÉRDEKLŐDÉSI NYILATKOZAT

A szerzők nem nyilatkoznak egymással versengő érdekekről.

BEFOGADÁS ÉS VÁLTOZATOSSÁG

Azon dolgoztunk, hogy biztosítsuk a nemi egyensúlyt a nem humán alanyok kiválasztásánál. A kísérleti minták változatosságának biztosítására dolgoztunk a sejtvonalak kiválasztásával. Miközben hivatkoztunk a munkához tudományosan releváns hivatkozásokra, aktívan dolgoztunk a nemek közötti egyensúly előmozdításán is a referencialistánkon.

Érkezés: 2020. április 27

Felülvizsgálva: 2021. június 7

Elfogadva: 2021. július 13

Közzétéve: 2021. augusztus 3

IRODALOM

Abraham, WC, Jones, OD és Glanzman, DL (2019). A szinapszisok plaszticitása a hosszú távú mechanizmus?memóriatárolás? NPJ Sci. Learn.4, 9. Alfonso, J., Pollevick, GD, Castensson, A., Jazin, E. és Frasch, ACC (2002). A patkány hippokampuszban a génexpressziónak valós idejű PCR-rel végzett elemzése az mRNS expressziós szintjei nagy egyedek közötti variációt tár fel. J. Neurosci. Res. 67, 225–234.

Asok, A., Leroy, F., Rayman, JB és Kandel, ER (2019). Az emléknyom molekuláris mechanizmusai. Trends Neurosci. 42, 14–22.

Attar, A., Liu, T., Chan, WT, Hayes, J., Nejad, M., Lei, K. és Bitan, G. (2013). Egy rövidített Barnes-labirintus protokoll felfedimemória4-hónapos korban hiányzik az Alzheimer-kór hármas transzgénikus egérmodelljében. PLoS ONE8, e80355. Bale, TL (2015). Az agy fejlődésének epigenetikai és transzgenerációs újraprogramozása. Nat. Neurosci tiszteletes. 16, 332–344. Belfield, JL, Whittaker, C., Cader, MZ és Chawla, S. (2006). A Ca2 plus és a cAMP eltérő hatásai a MEF2D és a cAMP-válasz elemkötő fehérje által közvetített transzkripcióra hippocampális neuronokban. J. Biol. Chem. 281, 27724–27732.

Humeau, Y. és Choquet, D. (2019). A megközelítések következő generációja a szinaptikus plaszticitás és a tanulás közötti kapcsolat vizsgálatára. Nat. Neurosci.

Bendesky, A. és Bargmann, CI (2011). Genetikai hozzájárulás a viselkedési sokféleséghez a gén-környezet határfelületén. Nat. Genet tiszteletes. 12, 809–820.

Bridi, MS, Hawk, JD, Chatterjee, S., Safe, S. és Abel, T. (2017). Az NR4A nukleáris receptorok farmakológiai aktivátorai CREB/CBP-függő módon fokozzák az LTP-t. Neuropsychopharmacology 42, 1243–1253.

Canzio, D., Nwakeze, CL, Horta, A., Rajkumar, SM, Coffey, EL, Duffy, EE, Duffie', R., Monahan, K., O'Keeffe, S., Simon, MD és munkatársai . (2019). Az antiszensz lncRNS-transzkripció közvetíti a DNS-demetilációt, hogy a sztochasztikus protokadherint a promóter választásává tegye. 177. cella, 639–653.e15.

Capitano, F., Camon, J., Licursi, V., Ferretti, V., Maggi, L., Scianni, M., Del Vecchio, G., Rinaldi, A., Mannironi, C., Limatola, C. és mtsai. (2017). A mikroRNS-335- 5p modulálja a térbeli működéstmemóriaés a hippocampális szinaptikus plaszticitás. Neurobiol. Tanul. Mem. 139, 63–68.

Casellas, J. (2011). Beltenyésztett egértörzsek és genetikai stabilitás: áttekintés. Állat 5, 1–7.

Chen, YK és Hsueh, YP (2012). A cortactin-kötő fehérje 2 modulálja a cortactin mobilitását, és szabályozza a dendritikus gerinc kialakulását és fenntartását. J. Neurosci. 32, 1043–1055.

Chen, YL és Shen, CK (2013). Az mGluR-függő MAP1B transzláció és az AMPA receptor endocitózis modulálása mikroRNS miR-146a-5p. J. Neurosci. 33, 9013–9020.

Chu, JF, Majumder, P., Chatterjee, B., Huang, SL és Shen, CJ (2019). A TDP-43 Az FMRP-vel és a Staufen1-gyel együttműködve szabályozza a csatolt dendrites mRNS transzport-transzlációs folyamatokat. Cell Rep. 29, 3118–3133.e6.

Cohen, JE, Lee, PR, Chen, S., Li, W. és Fields, RD (2011). A homeosztatikus szinaptikus plaszticitás mikroRNS szabályozása. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 108, 11650–11655.

Cole, CJ, Mercaldo, V., Restivo, L., Yiu, AP, Sekeres, MJ, Han, JH, Vetere, G., Pekar, T., Ross, PJ, Neve, RL és munkatársai. (2012). A MEF2 negatívan szabályozza a tanulás által kiváltott szerkezeti plaszticitást ésmemóriaképződés. Nat. Neu- rosci. 15, 1255–1264.

Danchin, E´ ., Charmantier, A., Champagne, FA, Mesoudi, A., Pujol, B. és Blanchet, S. (2011). A DNS-en túl: a befogadó öröklődés integrálása egy kiterjesztett evolúciós elméletbe. Nat. Genet tiszteletes. 12, 475–486.

Daugaard, I. és Hansen, TB (2017). Az Ago-asszociált RNS-ek biogenezise és funkciója. Trends Genet. 33, 208–219.

Ekstrom, AD, Arnold, AE és Iaria, G. (2014). Az allocentrikus térábrázolás és neurális alapjainak kritikai áttekintése: a hálózat alapú perspektíva felé. Elülső. Zümmögés. Neurosci. 8, 803.

Eling, N., Morgan, MD és Marioni, JC (2019). Kihívások a biológiai zaj mérésében és megértésében. Nat. Genet tiszteletes. 20, 536–548.

Flavell, SW, Cowan, CW, Kim, TK, Greer, PL, Lin, Y., Paradis, S., Griffith, EC, Hu, LS, Chen, C. és Greenberg, ME (2006). A MEF2 transzkripciós faktorok aktivitásfüggő szabályozása elnyomja a serkentő szinapszisok számát. Tudomány 311, 1008–1012.

Gao, J., Wang, WY, Mao, YW, Grff, J., Guan, JS, Pan, L., Mak, G., Kim, D., Su, SC és Tsai, LH (2010). Egy új út szabályozzamemóriaés plaszticitás a SIRT1-en és a miR-en keresztül{1}}. Természet 466, 1105–1109.

Hansen, KF, Sakamoto, K., Aten, S., Snider, KH, Loeser, J., Hesse, AM, Page, CE, Pelz, C., Arthur, JS, Impey, S. és Obrietan, K. (2016). A miR-132/-212 célzott törlése károsítjamemóriaés megváltoztatja a hippocampális transzkriptumot. Tanul. Mem. 23, 61–71.

Holmes, JR és Berkowitz, A. (2014). A dendrites orientáció és az elágazás megkülönbözteti a többfunkciós teknős gerinc interneuronjait. Elülső. Neurális áramkörök 8, 136.

Huang, GJ, Ben-David, E., Tort Piella, A., Edwards, A., Flint, J. és Shifman, S. (2012). Neurogenomikus bizonyítékok a testmozgás és a krónikus fluoxetin antidepresszáns hatásának közös mechanizmusára egerekben. PLoS ONE 7, e35901.

Ikeda, S., He, A., Kong, SW, Lu, J., Bejar, R., Bodyak, N., Lee, KH, Ma, Q., Kang, PM, Golub, TR és Pu, WT (2009). A mikroRNS-1 negatívan szabályozza a hipertrófiával összefüggő kalmodulin és Mef2a gének expresszióját. Mol. Sejt. Biol. 29, 2193–2204.

Inoue, K., Hirose, M., Inoue, H., Hatanaka, Y., Honda, A., Hasegawa, A., Mochida, K. és Ogura, A. (2017). Az Sfmbt2 génen belüli rágcsáló-specifikus mikroRNS-klaszter bevésődött és elengedhetetlen a placenta fejlődéséhez. Cell Rep. 19, 949–956.

Issler, O. és Chen, A. (2015). A mikroRNS-ek szerepének meghatározása pszichiátriai zavarokban. Nat. Neurosci tiszteletes. 16, 201–212.

Jaeger, BN, Linker, SB, Parylak, SL, Barron, JJ, Gallina, IS, Saavedra, CD, Fitzpatrick, C., Lim, CK, Schafer, ST, Lacar, B. et al. (2018). Egy új, környezet által kiváltott transzkripciós szignatúra megjósolja a reaktivitást az egyfogazott szemcse neuronokban. Nat. Commun. 9, 3084.

Jensen, P., Myhre, CL, Lassen, PS, Metaxas, A., Khan, AM, Lambertsen, KL, Babcock, AA, Finsen, B., Larsen, MR és Kempf, SJ (2017). A TNFa befolyásolja a szinaptikus plaszticitás CREB által közvetített neuroprotektív jelátviteli útvonalait az idegsejtekben, amint azt a proteomika és a foszfo-proteomika kimutatta. Egyszeri cél 8, 60223–60242.

Kandel, ER (2012). A molekuláris biológiájamemória: cAMP, PKA, CRE, CREB-1, CREB-2 és CPEB. Mol. Agy 5, 14.

Kluiver, J., Gibcus, JH, Hettinga, C., Adema, A., Richter, MK, Halsema, N., Slezak-Prochazka, I., Ding, Y., Kroesen, BJ és van den Berg, A (2012). MikroRNS-szivacsok gyors előállítása a mikroRNS gátlására. PLoS ONE 7, e29275.

Lee, MC, Yu, WC, Shih, YH, Chen, CY, Guo, ZH, Huang, SJ, Chan, JCC és Chen, YR (2018). A cinkion gyorsan indukál toxikus, off-way amiloid-b oligomereket, amelyek különböznek az amiloid-b-ből származó diffúziós ligandumoktól Alzheimer-kórban. Sci. Rep. 8, 4772.

Leger, M., Quiedeville, A., Bouet, V., Haelewyn, B., Boulouard, M., Schumann-Bard, P. és Freret, T. (2013). Tárgyfelismerési teszt egereken. Nat. Protoc.8, 2531–2537.

Lisman, J., Cooper, K., Sehgal, M. és Silva, AJ (2018).memóriaA képződés a szinaptikus erő szinapszis-specifikus módosulásaitól és az ingerlékenység sejtspecifikus növekedésétől függ. Nat. Neurosci. 21, 309–314.

Locke, ME, Milojevic, M., Eitutis, ST, Patel, N., Wishart, AE, Daley, M. és Hill, KA (2015). Genomikus kópiaszám változása Mus musculusban. BMC Genomics 16, 497.

Lois, C., Hong, EJ, Pease, S., Brown, EJ és Baltimore, D. (2002). Lentivírus vektorok által szállított transzgének csíravonal transzmissziója és szövet-specifikus expressziója. Tudomány 295, 868–872.

Loos, M., Koopmans, B., Aarts, E., Maroteaux, G., van der Sluis, S., Verhage, M. és Smit, AB; Neuro-BSIK Mouse Phenomics Consortium (2015). A törzsön belüli viselkedésbeli eltérések következetesen különböznek a gyakori beltenyésztett egértörzsek között. Mamm. Genome 26, 348–354.

Lorsch, ZS, Hamilton, PJ, Ramakrishnan, A., Parise, EM, Salery, M., Wright, WJ, Lepack, AE, Mews, P., Issler, O., McKenzie, A. és munkatársai. (2019). A stressztűrő képességet a Zfp{1}}vezérelt transzkripciós hálózat segíti elő a prefrontális kéregben. Nat. Neurosci. 22, 1413–1423.

Magklara, A. és Lomvardas, S. (2013). Sztochasztikus génexpresszió emlősökben: a szaglás tanulságai. Trends Cell Biol. 23, 449–456.

Malhotra, SS, Suman, P. és Gupta, SK (2015). Az alfa vagy béta-humán koriongonadotropin leütése csökkenti a BeWo sejtfúziót a PKA és a CREB aktiválásának leszabályozásával. Sci. Rep. 5, 11210.

McNeill, E. és Van Vactor, D. (2012). A mikroRNS-ek alakítják a neuronális tájat. Neuron 75, 363–379.

Michlewski, G. és Ca' ceres, JF (2019). A miRNS biogenezis poszt-transzkripciós szabályozása. RNS 25, 1–16.

Oey, H., Isbel, L., Hickey, P., Ebaid, B. és Whitelaw, E. (2015). Genetikai és epigenetikai eltérések a beltenyésztett egér alomtársak között: az egyedek közötti differenciálisan metilált régiók azonosítása. Epigenetics Chromatin 8, 54.

Siegel, G., Obernosterer, G., Fiore, R., Oehmen, M., Bicker, S., Christensen, M., Khudayberdiev, S., Leuschner, PF, Busch, CJ, Kane, C. és munkatársai . (2009). A funkcionális képernyő mikroRNS-függő szabályozást jelent a de-

Pavlicev, M., Cheverud, JM és Wagner, GP (2011). Adaptív fenotípusos variációs minták evolúciója a fejleszthetőség közvetlen szelekciójával. Proc. Biol.

Sci. 278, 1903–1912. Pedersen, CA, Vadlamudi, S., Boccia, ML és Moy, SS (2011). Változások az anyai viselkedésben C57BL/6J egerekben: Magatartási összehasonlítások a magas és alacsony kölyöknyalogató anyák felnőtt utódai között. Elülső. Pszichiátria2,42. Pitts, MW (2018). Barnes labirintus eljárás a térbeli tanuláshoz ésmemóriaaz Egerekben. Biol. Protoc. 8, e2774. Porte, Y., Buhot, MC és Mons, NE (2008). Térbelimemóriaa Morris vízi labirintusban és a ciklikus AMP válasz elemkötő (CREB) fehérje aktiválása az egér hippokampuszában. Tanul. Mem. 15, 885–894. Rajasethupathy, P., Fiumara, F., Sheridan, R., Betel, D., Puthanveettil, SV, Russo, JJ, Sander, C., Tuschl, T. és Kandel, E. (2009). A kis RNS-ek jellemzése Aplysia-ban feltárja a miR-124 szerepét a szinaptikus plaszticitás CREB-en keresztüli korlátozásában. Neuron 63, 803–817. Rao-Ruiz, P., Couey, JJ, Marcelo, IM, Bouwkamp, ​​CG, Slump, DE, Matos, MR, van der Loo, RJ, Martins, GJ, van den Hout, M., van IJcken, WF , et al. (2019). A kontextuális memóriakonszolidáció engram-specifikus transzkriptomprofilálása. Nat. Commun. 10, 2232. Reinius, B. és Sandberg, R. (2015). Autoszomális gének véletlenszerű monoallélikus expressziója: sztochasztikus transzkripció és allélszintű szabályozás. Nat. Genet tiszteletes. 16, 653–664. Rogerson, T., Cai, DJ, Frank, A., Sano, Y., Shobe, J., Lopez-Aranda, MF és Silva, AJ (2014). Szinaptikus címkézés a memóriafoglalás során. Nat. Neurosci tiszteletes. 15, 157–169. Ronovsky, M., Zambon, A., Cicvaric, A., Boehm, V., Hoesel, B., Moser, BA, Yang, J., Schmid, JA, Haubensak, WE, Monje, FJ és Pollak, DD (2019). A miR{27}} szerepe a tanult biztonságban. Sci. Rep. 9, 528. Salta, E. és De Strooper, B. (2017). Nem kódoló RNS-ek a neurodegenerációban. Nat. Neurosci tiszteletes. 18, 627–640. Sastry, L., Johnson, T., Hobson, MJ, Smucker, B. és Cornetta, K. (2002). Titerező lentivírus vektorok: DNS, RNS és marker expressziós módszerek összehasonlítása. Gene Ther. 9, 1155–1162. Schneider, A., Hommel, G. és Blettner, M. (2010). Lineáris regressziós elemzés: a tudományos publikációk értékeléséről szóló sorozat 14. része. Dtsch. Arztebl. Int. 107, 776–782. Schneider, CA, Rasband, WS és Eliceiri, KW (2012). NIH Image to ImageJ: 25 év képelemzés. Nat. Methods 9, 671–675. Shaltiel, G., Hanan, M., Wolf, Y., Barbash, S., Kovalev, E., Shoham, S. és Soreq, H. (2013). A hippocampális mikroRNS{50}} acetilkolinészteráz-célpontján keresztül stressz-indukálható kognitív hiányosságokat közvetít. Agyszerkezet. Funkció. 218, 59–72.

Sillivan, SE, Jamieson, S., de Nijs, L., Jones, M., Snijders, C., Klengel, T., Joseph, NF, Krauskopf, J., Kleinjans, J., Vinkers, CH, et al. (2020). A tartós stressz-fokozott memória mikroRNS szabályozása. Mol. Pszichiátria25, 965–976.

Siomi, H. és Siomi, MC (2010). A mikroRNS biogenezis poszttranszkripciós szabályozása állatokban. Mol. 38. cella, 323–332.

Sticht, C., De La Torre, C., Parveen, A. és Gretz, N. (2018). miRWalk: Online forrás a mikroRNS-kötő helyek előrejelzéséhez. PLoS ONE13, e0206239.

Thomas, KT, Anderson, BR, Shah, N., Zimmer, SE, Hawkins, D., Valdez, AN, Gu, Q. és Bassell, GJ (2017). A skizofréniával összefüggő mikroRNS miR-137 gátlása megzavarja a Nrg1a idegfejlődési jelátvitelt. Cell Rep. 20, 1–12.

Tsai, KJ, Chen, SK, Ma, YL, Hsu, WL és Lee, EH (2002). Az sgk, egy elsődleges glükokortikoid-indukált gén elősegítimemóriaa térbeli tanulás megszilárdítása patkányokban. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 99, 3990–3995.

Vedell, PT, Svenson, KL és Churchill, GA (2011). A transzkriptum abundanciájának sztochasztikus változása C57BL/6J egerekben. BMC Genomics 12, 167.

e´gh, MJ, Rausell, A., Loos, M., Heldring, CM, Jurkowski, W., van Nierop, V P., Paliukhovich, I., Li, KW, del Sol, A., Smit, AB , et al. (2014). A hippocampalis extracelluláris mátrix szintje és a szinaptikus fehérjeexpresszió sztochaszticitása az életkorral növekszik, és korfüggő kognitív hanyatlással jár. Mol. Sejt. Proteomics 13, 2975–2985.

Vorhees, CV és Williams, MT (2014). A térbeli tanulás és memória felmérése rágcsálókban. ILAR J. 55, 310–332.

Wang, IF, Guo, BS, Liu, YC, Wu, CC, Yang, CH, Tsai, KJ és Shen, CK (2012a). Az autofágia aktivátorok megmentik és enyhítik a TAR DNS-kötő fehérje proteinopátiáival rendelkező egérmodell patogenezisét 43. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 109, 15024–15029.

Wang, W., Kwon, EJ és Tsai, LH (2012b). MikroRNS-ek a tanulásban, a memóriában és a neurológiai betegségekben. Tanul. Mem. 19, 359–368.

Woldemichael, BT, Jawaid, A., Kremer, EA, Gaur, N., Krol, J., Marchais, A. és Mansuy, IM (2016). A miR-183/96/182 mikroRNS-klaszter protein-foszfatáz-1-függő módon hozzájárul a hosszú távú memóriához. Nat. Közös. 7, 12594.

Xie, F., Li, BX, Kassenbrock, A., Xue, C., Wang, X., Qian, DZ, Sears, RC és Xiao, X. (2015). A CREB által közvetített géntranszkripció hatékony gátlójának azonosítása hatékony in vivo rákellenes hatással. J. Med. Chem. 58, 5075–5087.