Ⅱ rész A termesztett Cistanche Deserticola különböző részei kémiai profiljainak és antioxidáns aktivitásának összehasonlítása Ultra Performance Folyadékkromatográfia – Kvadrupol repülési idő tömegspektrometria és A 1,1-difenil--2-pikry segítségével
Mar 07, 2022
További információért:emily.li@wecistanche.com
Kattintson ide, ha többet szeretne megtudni Cistanche-ról
A részletes tömegspektrum adatok és a javasolt fragmentációs mintázatok a 7. ábrán láthatók. A fent azonosított hat PhG szerkezete három részre oszlik: I-kávésav (CA), II-aglikon és III-cukor (Glc és Rha). . Az MS/MS spektrumokban a koffeoilcsoport, valamint a Glc és Rha csoportok semleges hasításának megfelelő tömeghibák uralják a PhG-k fragmentációs útvonalait és generálják a diagnosztikai fragmens ionokat (8. ábra). További MS/MS jellegzetes fragmensionok m/z 179, 161 és 135 értéknél továbbá arra utalnak, hogy szerkezetükben koffeoil-szubsztituens található. Ezeket a fragmentációs jellemzőket felhasználva magabiztosan javasolhatnánk a következő fragmentációs útvonalakat.Acteozid(7c. ábra) 461 m/z értékű fragmentumot állított elő egy CA-rész elvesztésével, majd egy iont állított elő m/z 315-nél az Rha további elvesztésével. A CA részt m/z 179-nél találtuk meg, fragmensionjait pedig m/z 161-nél és m/z 135-nél a H2O, illetve a CO2 elvesztése okozta. Az izoakteozid (7d. ábra) ugyanazokat az ionokat termelte, mint az akteozid, m/z 461, 315, 179, 161 és 135. 20 -Az acetil-lakteozid (7e. ábra) acetil- és majd ionokat generált 461, 315, 179, 161 és 135 m/z-nél, ami megegyezett az akteozid fragmentációs mintájával. Eközben az 20 -acetil-lakteozid m/z 503-nál is termelt egy fragmentumot, elvesztve CA-részét, majd elvesztette az Ac-csoportját, és így ion keletkezett m/z 461-nél. A tubulozid B (6f. ábra) hasonló fragmentációs mintázatot mutatott, mint 20 -acetil-lakteozid. Az echinakozid (7a. ábra) egy fragmentiont termelt m/z 623-nál CA-részének elvesztésével, majd az Rha- és Glc-részek egymás utáni elvesztése 477 és 315 m/z-nél eredményezte a fragmensionokat. A fragmention m/z-nél 461 A CA és Glc csoportok elvesztésével keletkeztek a prekurzor ionból. Megtalálták a jellegzetes CA-ionokat is 179, 161 és 135 m/z-nél. A cisztanozid A (7b. ábra) egy fragmentiont termelt m/z 637-nél CA-részének elvesztésével, majd ionokat generált m/z 491-nél és 475-nél az Rha- és Glc-részek további elvesztésével. Ezért az UPLC-PDA-QTOF/MS kombinációs alkalmazása nagyban hozzájárulhat a vegyületek kémiai szerkezetének pontos tisztázásához.
2.7. Összefüggés az antioxidánsok és az A8-antioxidáns tulajdonságok között.
Az összes antioxidáns-tartalom és az összes antioxidáns aktivitás közötti korrelációs elemzést számos tanulmány leírt [33–38]. Legjobb tudomásunk szerint hiányoznak a termesztett növények antioxidáns tulajdonságainak és PhG-tartalmának összehasonlítására vonatkozó tanulmányok.C. deserticolarészeket ilyen tömör jellemzési módszerrel. A „Kvantitatív elemzés” részben leírt hat PhG-tartalom előzetes eredményeit a 4. táblázat foglalja össze, az antioxidáns aktivitást (IC50) pedig az „Antioxidáns kapacitás” részben leírt DPPH-teszt segítségével határoztuk meg az 5. táblázatban. az egyes részek összes antioxidáns tartalma és aktivitása a 9. ábrán látható. Nyilvánvaló, hogy szembetűnő különbségek vannak a különböző részek között. Valójában a kapott eredmények azt mutatták, hogy a termesztett antioxidáns aktivitástC. deserticolaszárak összehasonlíthatóak voltak a piacon kapható tövekével. Ezek az eredmények arra utalnak, hogy a szárkivonat antioxidáns aktivitása összefüggésben lehet a PhG-tartalmával. Ezért a termesztett szárkivonatban lévő fitokemikáliákC. deserticolafeltételezések szerint fontos szerepet játszanak a DPPH gyökfogó aktivitásában. Eredményeink összességében erős korrelációt jeleztek a teljes PhG-tartalom és az antioxidáns aktivitás között: r {{0}},92, ** p <>
Ezenkívül bizonyos magasabb összes antioxidáns tartalmú minták nem mutattak magas antioxidáns aktivitást, például a tengely és a virágzat. Mindeközben a hat rész közül a legnagyobb aktivitású corolla összes antioxidáns tartalma alacsonyabb volt, mint a tengely és a virágzat. A 4. ábra, a „Kvantitatív elemzés” részben leírtak szerint, a PhG-vegyületek relatív mennyiségét mutatja, hogy előzetes megértést adjon egyéni hozzájárulásukról. Ebben a tanulmányban részleges legkisebb négyzetek (PLS) regressziós analízist is végeztek [39–41], hogy összehasonlítsák az egyes antioxidánsok bősége és az in vitro antioxidáns aktivitás közötti összefüggést. A PLS-modellt az egyes antioxidánsok (mint X leíró mátrix) 330 nm-en lévő ujjlenyomat-kromatogramokon és az összes rész antioxidáns aktivitásának (Y válaszmátrixként) felhasználásával állítottuk össze. A SIMCA-P plus szoftver (13-as verzió.{18}}, Umetrics, Umea, Svédország) segítségével kapott együttható diagramok és változó fontosság a vetítésben (VIP) az 1. ábrán láthatók0. Nevezetesen, hogy az IC50 értékek fordítottját (1/IC50) választottuk Y változóként a modellek létrehozásához, mivel az alacsonyabb IC50 értékek erősebb antioxidáns aktivitást jeleznek. A 10A. ábrán kapott regressziós együttható diagram szerint a lineáris regressziós modellek azt mutatják, hogy az akteozid kivételével az összes antioxidáns pozitív korrelációt mutatott az 1/IC50 értékkel. A PLS kapott kalibrációs modelljét a következő regressziós egyenlet fejezi ki: Y=0,50X1 plusz 0,57X2 − 0,11X3 plusz 0,32X4 plus 0,58X5 plus 0,24X6. A VIP értékek tükrözik a változók fontosságát a modellben. minél nagyobb a VIP, annál relevánsabb a minta besorolása. Amint azt eredményeink mutatták, az 20 -acetil-lakteozid fontos szerepet játszott az antioxidáns aktivitásban (10B. ábra). Ez a megállapítás összhangban van Yang és munkatársai [20] tanulmányával.
3 Anyagok és Mód
3.1 Üzem Anyagok.MűveltC. deserticolaA Bencao Congrong ültetőbázis nagylelkűen biztosította a Ningxia tartomány Yongning megyében, és Prof. Jun Chen, a Kínai Orvostudományi Akadémia Gyógynövényfejlesztési Intézetének munkatársa hitelesítette, Peking, Kína. A hat különböző része megműveltC. deserticola ide tartozik a zamatos szár (R1), a virágzati tengely (R2), a virágzat (R3), a virág (mag nélkül) (R4), a virágzati szár (R5) és a korolla (R6). A részletes mintainformáció a 11. ábrán látható. Mindegyik részt külön-külön szárítógépben szárítottuk, porrá zúztuk, 40-hálós szitán átpasszíroztuk, majd légmentesen záródó tartályokba töltöttük és exszikkátorban tároltuk. Ezeknek a mintáknak az utalványos mintáit a Kínai Orvostudományi Akadémia Gyógynövényfejlesztési Intézetében helyezték letétbe, Pekingben, Kínában.
3.2. Vegyszerek és reagensek. Az izoakteozidot (130809. tétel), az akteozidot (130421. tétel) és az echinakozidot (121027. tétel) a Chengdu Pure-Chem Standard Co. Ltd.-től (Peking, Kína), a Cistanoside A-t, az 20 -acetil-lakteozidot és a tubulozidot izoláltuk. és megtisztítják a termesztettC. deserticolalaboratóriumunkban több mint 98 százalékos tisztaságú (HPLC) és szerkezetüket HR-MS, 1H-NMR és 13C-NMR alapján is igazoltuk, és összehasonlítottuk a korábbi irodalommal. Szerkezetük a 7. táblázatban látható. A DPPH-t, az L-aszkorbinsavat és a Troloxot a Sigma-Aldrich-től (St. Louis, MO, USA) vásároltuk. Az oldószerek, az acetonitril és a metanol HPLC minőségű a Mercktől (Darmstadt, Németország), a 96 százalékos tisztaságú hangyasav pedig HPLC minőségű (Tedia, Fairfield, OH, USA). Ionmentesített vizet (18 MΩ) állítottunk elő desztillált vízzel Milli-Q rendszeren keresztül (Millipore, Milford, MA, USA). A többi reagens és vegyszer analitikai minőségű volt.
3.3. Megoldások elkészítése
3.3.1. Standard Solutions.Egy kevert standard törzsoldat, amely tartalmazzaechinakozid(501 µg/ml), cisztanozid A (64 µg/ml), akteozid (239 µg/ml), izoakteozid (22,6 µg/ml), 20 -acetil-lakteozid (278 µg/ml) és tubulozid B (46,2 µg) /ml) metanolban állítottuk elő. A törzsoldatokat metanollal hígítottuk, hogy megfelelő koncentrációkat kapjunk, amelyeket munkaoldatként használtunk a kalibrációs görbe kialakításához, és felhasználás előtt 4 ◦C-on tároltuk.
3.3.2. Mintamegoldások. Pontosan kimért por (40 mesh, 1 g) hat különböző termesztett részbőlC. deserticola50 ml metanolt adtunk hozzá. Miután 30 percig szobahőmérsékleten merítettük, a keverékeket lemértük, majd ultrahangos vízfürdőben (40 kHz, 250 W, Kunshan, Kína) szobahőmérsékleten 40 percig extraháltuk. Lehűlés után további metanolt adtunk hozzá, hogy kompenzáljuk a súlyvesztést. Minden oldatot 0,22 µm-es membránszűrőn szűrtünk az injekció beadása előtt. A felülúszó oldat egy alikvot részét (3 µl) injektáltuk az UPLC-be elemzés céljából. Mindegyik kivonatot három példányban injektáltuk be.
3.3.3. DPPH megoldások. A DPPH gyök törzsoldatot (5 × 10-3 mol/L) úgy készítettük, hogy egy pontosan lemért DPPH mintát közvetlenül a kísérletek előtt metanolban oldottunk, és fénytől védjük. Ezután a törzsoldatot frissen hígítottuk metanollal, hogy standard oldatot kapjunk (1 × 10–4 mol/l).
3.4. UPLC-PDA elemzési állapot. Az UPLC elemzést Waters Acquity UPLC rendszeren (Waters, Milford, MA, USA) végeztük, amely oszlopfűtőt, mintakezelőt, bináris oldószerkezelőt és fotodiódasoros detektort tartalmazott. A kromatográfiás elválasztást Acquity UPLC BEH C18 oszlopon (1,7 µm, 2,1 mm × 1{{10}}0 mm; Waters) végeztük úgy, hogy az oszlopfűtőt 30 ◦C-on rögzítettük. A mozgó fázis acetonitrilből (A) és 0,2% hangyasavat (B) tartalmazó vízből állt, 0,4 ml/perc áramlási sebességgel. A gradiens elúciós programot a következőképpen alkalmaztuk: 5 százalék A 0-2 percnél, 5-15 százalék A 2-4 percnél, 15 százalék A 4-6 percnél, 15-20 százalék A 6-10 percnél, 20 –35 százalék A 10–15 percnél, 35 százalék A 15–18 percnél és 35–5 százalék A 18–18,1 percnél. A készítményt ezután 5% A-n tartottuk további 10 percig az újraegyensúlyozáshoz. A detektálási hullámhosszt 330 nm-re állítottuk be.
3.5. UPLC-ESI-Q/TOF-MS elemzés. Feltétel Az UPLC feltételei megegyeztek a 3.4. szakaszban leírtakkal. Az MS analízist Waters Xevo G2-XS QTOF tömegspektrométeren (Waters MS Technologies, Manchester, Egyesült Királyság) végeztük, amely elektrospray interfésszel (ESI) volt felszerelve negatív ion üzemmódban, teljes pásztázó MS spektrummal az m/ z tartomány 50-1200. A forrásban a kapilláris feszültség 2000 V, a forrás hőmérséklete 120 ◦ C, a deszolvatációs hőmérséklet 450 ◦ C, a kúpfeszültség 40 V, a kúpgáz 30 L/h és a deszolvatációs gáz áramlási sebessége 600 L/h. Az MS/MS kísérleteket MSE-vel végezték, és az ütközési energia 20-40 V volt. Az összes MS adatot a Lock Spray rendszerrel gyűjtöttük a tömegpontosság és a reprodukálhatóság biztosítása érdekében. Negatív ESI módban a leucin-enkefalin [M − H]− ionját m/z 554,2615-nél használtuk zártömegként. Az adatokat Waters Mass Lynx 4.1 szoftverrel (Waters MS Technologies, Manchester, Egyesült Királyság) szereztük be, elemeztük és dolgoztuk fel.
3.6. Offline DPPH gyökfogó vizsgálat. A növényi kivonatok teljes antioxidáns aktivitását offline DPPH gyökfogó vizsgálattal értékeltük. A különböző koncentrációjú mintaoldatokat (2 ml) 2 ml 1 × 10-4 mol/l DPPH-oldattal (metanolban) kevertük össze. Minden mintát felráztunk, és sötétben, szobahőmérsékleten 60 percig állni hagytuk. A DPPH szabad gyökök csökkenését úgy mértük, hogy az abszorbanciát 517 nm-en leolvastuk egy ELISA-leolvasón (TECAN, Growing, Ausztria) egy vakpróbával szemben (metanol minta nélkül). A kísérlet kontrolljaként 2 ml metanolt használtunk. Pozitív kontrollként Troloxot és L-aszkorbinsavat használtunk. A vizsgált minták gyökfogó aktivitását (százalékos gátlás), amelyet a DPPH-fogó százalékban fejeztünk ki, a következő képlettel számítottuk ki: százalékos gátlás=[(A kontroll − A minta)/Akontroll] × 100. A teljes antioxidáns aktivitást úgy számítottuk ki, hogy a százalékos gátlást a mintakoncentráció függvényében ábrázoltuk, és a DPPH-gyökök 50 százalékának eltávolításához szükséges mintakoncentrációt (IC50) ábrázoltuk. Minden tesztet három párhuzamosban végeztünk, és az IC50 értékeket átlag ± SD-ként adtuk meg.
3.7. UPLC-PDA az oszlop előtti DPPH vizsgálattal kapcsolva. Ebben a vizsgálatban, miután 2 ml DPPH-oldatot (3 × 10-3 mol/l) és 1 ml mintaoldatot (12 mg/ml) a tenyésztett C. deserticola különböző részeiből összekevertünk, az UPLC-PDA-t alkalmaztuk a továbbfejlesztéshez. az antioxidáns profilok szűrése és az antioxidáns komponensek azonosítása a mintaoldatok jellegzetes csúcsainak változásainak kimutatásával a DPPH szabad gyökfogó reakció előtt és után. Minden egyes növényi rész esetében a mintaoldat 10 µl-es aliquotjait a DPPH vizsgálat előtt és után külön-külön injektáltuk az UPLC rendszerbe a 3.4. szakaszban leírtakkal megegyező körülmények között. A mintaoldatok DPPH-oldattal való összekeverése után a mintaoldatok jellemző csúcsaiban változást észleltünk 330 nm-en.
3.8. Adatelemzés. Az analitikai adatokat három független mérés átlaga ± standard deviációja (SD) fejezi ki. Kétváltozós korrelációs elemzést végeztünk a teljes PhG-tartalom és az antioxidáns aktivitás közötti kapcsolat tanulmányozására a Pearson-korrelációs együttható (r) meghatározásával az IBM SPPS Statistics (19-es verzió; International Business Machines Corp., New York, NY, USA) segítségével. Az IC50 értékeket probit-analízissel is kiszámítottuk az SPPS Statistics 19 segítségével. A DPPH szabad gyökfogó sebességét és a teljes PhG-tartalmat OriginPro 8.5.1 (Origin Lab Corp., Northampton, MA, USA) segítségével ábrázoltuk. A részleges legkisebb négyzetek (PLS) regresszióit SIMCA-P plus szoftverrel határoztuk meg (Version 13.0, Umetrics, Umea, Svédország).
4. Konklúziók
A termesztett C. deserticola, egy széles körben használt gyógynövény különböző részeit megvizsgálták tulajdonságaik szempontjából. Először is, a termesztett növény hat különböző részének jellegzetes ujjlenyomataCistanchedeserticolaA mintákat SES és hat marker vegyület tartalmának egyidejű elemzésével állítottuk elő és értékeltük ki. Másodszor, a hat fő vegyület UPLC-vel történő számszerűsítése megmutatta e vegyületek eloszlási jellemzőit a különböző részekben. Az eredmények azonban nem hozhatók közvetlen összefüggésbe a gyógynövény-gyógyászat tevékenységével. Ezért szükség volt egy jobb módszerre a termesztett C. deserticola minták minőségének és aktivitásának egyidejű meghatározására. Először egy offline DPPH gyökfogó vizsgálatot használtunk a termesztett növények antioxidáns aktivitásának értékelésére.Cistanchedeserticolakivonatokat, és a szárkivonatban találta a legmagasabb aktivitást. Ezenkívül az oszlop előtti DPPH vizsgálattal összekapcsolt UPLC-PDA-t alkalmaztunk a tenyésztett antioxidánsok szűrésére és értékelésére.Cistanchedeserticolaszárkivonatok. Ez a módszer nemcsak több kémiai információt, hanem bizonyos antioxidáns információkat is adott, amelyek felhasználhatók a növényi gyógyszerek azonosítására és értékelésére. Másodszor, a szárkivonatokban lévő aktív komponenseket elválasztottuk és azonosítottuk UPLC-PAD-QTOF/MS segítségével, hogy megerősítsük a szubsztituens csoportok számát és helyzetét, és javítsuk a szerkezeti elemzés pontosságát. Végül a kémiai komponensek és az in vitro antioxidáns aktivitás közötti kapcsolatot megállapítottuk és validáltuk a PLS modell segítségével.
Összefoglalva, most először hasonlítottuk össze a termesztett C. deserticola minták különböző részeinek kémiai összetételi profilját és antioxidáns aktivitását. Ezek az eredmények különösen érdekesek voltak, mivel a PhG-vegyületek eloszlását, PhG-tartalmát és a tenyésztett C. deserticola minták különböző részeinek antioxidáns hatásához való hozzájárulásukat jelen tanulmányig nem számoltak be. Ezen túlmenően a PLS-elemzést először azért hozták létre, hogy előzetesen megértsék hat PhG egyéni hozzájárulását az antioxidáns aktivitáshoz. Ez a megközelítés új betekintést nyújthat a termesztett C. deserticola átfogó minőségértékelésébe. Végül ez a munka az első jelentés arról, hogy szoros összefüggés van a DPPH gyökfogó aktivitása és a termesztett C. deserticola (r=0.92) különböző részeinek teljes PhG-tartalma között. Ezek közül a különböző részek közül a szárak PhG-ben gazdagok és erős antioxidáns aktivitással rendelkeznek. Különösen a termesztett C. deserticola kidobott részei is tartalmaztak néhány bioaktív vegyületet, és alternatív étrend-kiegészítőként használhatók. Reméljük, hogy az eredmények hasznos információkkal szolgálnak a termesztett C. deserticola jövőbeni hasznosításához. Legjobb tudomásunk szerint ez az első jelentés a természetes antioxidánsok gyors azonosításáról és mennyiségi meghatározásáról a termesztett növények különböző részein.CistanchedeserticolaUPLC-PAD-QTOF/MS, offline DPPH módszer és UPLC-PAD-pre-columnDPPH módszer használatával. Eredményeink szerint az itt kidolgozott módszer hatékony és értelmes eszközt jelenthet a komplex gyógynövénykészítmények átfogó minőségellenőrzéséhez. Hazánkban az "Egy öv, egy út" kezdeményezés irányításával ezt a hagyományos, egészségügyi előnyökkel járó növényt új, világszerte alkalmazható termékek tervezésére lehetne felhasználni.
Köszönetnyilvánítás
A szerzők hálásan köszönik a Kínai Orvostudományi Akadémia (CAMS) Orvostudományi Innovációs Alapja (CIFMS) (2016-I2M-1-012) és a Kínai Nemzeti Természettudományi Alapítvány (No. 31570344).
Szerzői hozzájárulások
Yue Shi és Xiaoming Wang részt vett a kutatás tervezésében. Xiaoming Wang, Jinfang Wang, Huanyu Guan, Rong Xu, Xiaomei Luo, Meifeng Su, Xiaoyan Chang, Wenting Tan és Jun Chen voltak felelősek a kísérletek elvégzéséért. Yue Shi, Xiaoming Wang és Jinfang Wang adatelemzést végzett. Yue Shi és Xiaoming Wang közreműködtek a kézirat megírásában és szerkesztésében. Összeférhetetlenség: A szerzők nem nyilatkoznak összeférhetetlenségről.
Hivatkozások
Wang, T.; Zhang, X.; Xie, W. Cistanche deserticola YC Ma, "Desert Ginseng": A Review. Am. J. Chin. Med. 2012, 40, 1123–1141. [CrossRef] [PubMed]
2. Li, Z.; Lin, H.; Gu, L.; Gao, J.; Tzeng, C. Herba Cistanche (Rou Cong-Rong): A hagyományos kínai orvoslás egyik legjobb gyógyszerészeti ajándéka. Elülső. Pharmacol. 2016, 7, 41. [CrossRef] [PubMed]
3. Gu, C.; Yang, X.; Huang, L. Cistanches Herba: A Neuropharmacology Review. Elülső. Pharmacol. 2016, 7, 289. [CrossRef] [PubMed]
4. Xu, X.; Zhang, Z.; Wang, W.; Yao, H.; Ma, X. A Cisztanozid A terápiás hatása petefészek-eltávolított egerek csontanyagcseréjére. Molecules 2017, 22, 197. [CrossRef] [PubMed]
5. Wang, D.; Wang, H.; Gu, L. A hagyományos kínai gyógynövény Cistanche antidepresszáns és kognitív fejlesztő tevékenységei. Evid.-alapú kiegészítés. Altern. Med. 2017, 2017, 1–9. [CrossRef] [PubMed]
6. Xue, Z.; Yang, B. Phenylethanoid Glycosides: Research Advances in Their Phytochemistry, Farmakological Activity and Pharmacokinetics. Molecules 2016, 21, 991. [CrossRef] [PubMed]
7. Jiang, Y.; Tu, P. Cistanche fajok kémiai összetevőinek elemzése. J. Chromatogr. A 2009, 1216, 1970–1979. [CrossRef] [PubMed]
8. Xiong, Q.; Kadota, S.; Tani, T. A Cistanche deserticola feniletanoidjainak antioxidáns hatásai. Biol. Pharm. Bika. 1996, 19, 1580–1585. [CrossRef] [PubMed]
9. Ma, Z.; Yang, Z.; Ajak.; Li, C. Nyolc fenil-etanol-glikozid szimultán meghatározása a Cistanche nemzetség különböző fajtáiban nagy teljesítményű folyadékkromatográfiával. J. Liq. Chromatogr. Relat. Technol. 2008, 31, 2838–2850. [CrossRef]
10. Jiang, Y.; Li, SP; Wang, YT; Chen, XJ; Tu, PF Herba Cistanches differenciálása ujjlenyomat alapján nagy teljesítményű folyadékkromatográfia-diódasoros detektálás-tömegspektrometriával. J. Chromatogr. 2009, 1216, 2156–2162. [CrossRef] [PubMed]
11. Lu, D.; Zhang, J.; Yang, Z.; Liu, H.; Li, S.; Wu, B.; Ma, Z. A Cistanches Herba kvantitatív elemzése nagy teljesítményű folyadékkromatográfiával, diódasoros detektálással és nagy felbontású tömegspektrometriával kombinálva kemometrikus módszerekkel. J. Sep. Sci. 2013, 36, 1945–1952. [CrossRef] [PubMed]
12. Song, Q.; Li, J.; Liu, X.; Zhang, Y.; Guo, L.; Jiang, Y.; Song, Y.; Tu, P. Nyomás alatti folyadék-extrakció, turbulens áramlási kromatográfia és nagy teljesítményű folyadékkromatográfia házilag készített online elválasztása, Cistanche deserticola esettanulmányként. J. Chromatogr. 2016, 1438, 189–197. [CrossRef] [PubMed]
13. Han, L.; Boakye-yiadom, M.; Liu, E.; Zhang, Y.; Li, W. A Cistanches deserticola YC Ma-ból származó feniletanoid-glikozidok szerkezeti jellemzése és azonosítása UHPLC/ESI-QTOF-MS/MS segítségével. Phytochem. Anális. 2012, 23, 668–676. [CrossRef] [PubMed]
14. Zheng, S.; Jiang, X.; Wu, L.; Wang, Z.; Huang, L. A Cistanches Herba kémiai és genetikai megkülönböztetése UPLC-QTOF/MS és DNS vonalkódolás alapján. PLoS ONE 2014, 9, 1–11. [CrossRef] [PubMed]
15. Song, Y.; Song, Q.; Li, J.; Zhang, N.; Zhao, Y.; Liu, X.; Jiang, Y.; Tu, P. Egy integrált stratégia a kamilla mennyiségi megkülönböztetésére a Cistanche deserticola és a C. tubulosa között, nagy teljesítményű folyadékkromatográfia-hibrid tripla kvadrupól-lineáris ioncsapda tömegspektrometriával. J. Chromatogr. 2016, 1429, 238–247. [CrossRef] [PubMed]
16. Niu, Y.; Yin, L.; Luo, S.; Dong, J.; Wang, H.; Hashi, Y.; Chen, S. Az antioxidánsok azonosítása Flos Chrysanthemi-ben HPLC-DAD-ESI/MSN és HPLC segítségével, oszlop utáni származékképző rendszerrel kapcsolva. Phytochem. Anális. 2013, 24, 59–68. [CrossRef] [PubMed]
17. Chen, LX; Hu, DJ; Lam, SC; Ge, L.; Wu, D.; Zhao, J.; Hosszú, ZR; Yang, WJ; Fan, B.; Li, SP A hókrizantém (Coreopsis tinctoria Nutt.) különböző részei antioxidáns aktivitásának összehasonlítása és természetes antioxidánsaik azonosítása nagy teljesítményű folyadékkromatográfiával, diódasoros detektálással és tömegspektrometriával, valamint 2,20 -azinobisz({) {4}}etilbenztiazolin-szulfonsav) diammóniumsó alapú vizsgálat. J. Chromatogr. 2016, 1428, 134–142. [PubMed]
18. Fu, M.; Xu, Y.; Chen, Y.; Wu, J.; Yu, Y.; Zou, B.; An, K.; Xiao, G. Bioaktív flavonoidok és antioxidáns aktivitás értékelése Pericarpium Citri Reticulate (Citrus reticulata "Chachi") tárolás során. Food Chem. 2017, 230, 649–656. [CrossRef] [PubMed]
19. Zhang, X.; Xu, M.; Zhang, J.; Wu, L.; Liu, J.; Si, J. Antioxidáns komponensek azonosítása és értékelése öt Chimonanthus faj virágaiban. Ind. Crop. Prod. 2017, 102, 164–172. [CrossRef]
20. Yang, J.; Hu, J.; Rena, K.; Ka, S.; Du, N. A feniletanoid-glikozidok szerkezeti-aktivitási összefüggései Cistanche salsa növényekben az antioxidáns aktivitásra. J. Chin. Med. Mater. 2009, 32, 1067–1069.
21. Ő, W.; Fang, T.; Tu, P. Kutatási előrehaladás az echinacoside farmakológiai aktivitásával kapcsolatban. Kína J. Chin. Mater. Med. 2009, 34, 476–479.
22. Li, Y.; Chen, J.; Li, Y.; Li, P. A Lonicera fajok virágbimbóiban található szabadgyökfogók azonosítása és mennyiségi meghatározása online HPLC-DPPH vizsgálattal, elektropermetezéses ionizációs kvadrupólus repülési idő tandem tömegspektrometriával párosítva. Biomed. Chromatogr. 2012, 26, 449–457. [CrossRef] [PubMed]
23. Yao, H.; Chen, Y.; Shi, P.; Hu, J.; Li, S.; Huang, L.; Lin, J.; Lin, X. A Livistona Chinensis R. Br terméseiben lévő antioxidánsok szűrése és kvantitatív elemzése HPLC-DAD-ESI MS alkalmazásával, oszlop előtti DPPH vizsgálattal párosítva. Food Chem. 2012, 135, 2802–2807. [CrossRef] [PubMed]
24. Wang, Y.; Hao, H.; Wang, G.; Tu, P.; Jiang, Y.; Liang, Y.; Dai, L.; Yang, H.; Lai, L.; Zheng, C.; et al. Megközelítés egy tipikus fenil-etanol-glikozid, az echinakozid szekvenciális metabolitjainak azonosítására, folyadékkromatográfiás ioncsapda-repülési tömegspektrometriás analízis alapján. Talánta 2009, 80, 572–580. [CrossRef] [PubMed]
25. Qi, M.; Xiong, A.; Ajak.; Yang, Q.; Yang, L.; Wang, Z. Az akteozid és főbb metabolitjainak azonosítása patkányvizeletben ultra-performance folyadékkromatográfiával kombinálva elektrospray ionizációs kvadrupólus repülési idő tandem tömegspektrometriával. J. Chromatogr. B 2013, 940, 77–85. [CrossRef] [PubMed]
26. Li, W.; Sun, X.; Song, H.; Ding, J.; Bai, J.; Chen, Q. A felszívódott összetevők és metabolitjaik HPLC/Q-TOF-MS-alapú azonosítása patkányszérumban és -vizeletben a Cistanche deserticola kivonat orális beadása után. J. Food Sci. 2015, 80, H2079–H2087. [CrossRef] [PubMed]
27. Li, Y.; Zhou, G.; Xing, S.; Xing, S.; Tu, P.; Li, X. Humán bélbaktériumok által termelt echinacoside metabolitok azonosítása Ultraperformance Liquid Chromatography-Quadrupole Time-of-Flight Mass Spectrometria segítségével. J. Agric. Étel. Chem. 2015, 63, 6764–6771. [CrossRef] [PubMed]