Első rész A DsbA-L kölcsönhatásba lép a VDAC1-gyel a mitokondriumok által közvetített tubuláris sejt apoptózisban, és hozzájárul az akut vesebetegség progressziójához

Összegzés

1.Háttér

kimutattuk, hogy a diszulfid-kötés A oxidoreduktáz-szerű fehérje (DsbA-L) részt vesz a vesefibrózis progressziójában. Azonban a DsbA-L pontos funkciója az akut vesekárosodásban (AKI) és az érintett mechanizmusok még tisztázásra várnak.

2. Módszerek

Illusztráljuk a VDAC1-vel kölcsönhatásba lépő DsbA-L-t co-IP (koimmunoprecipitáció) in vitro és Viv segítségével, és mutációs kísérlettel találtuk meg ezek kölcsönhatási részeit. A fenti megállapításokat együttes lokalizációval igazoltuk. Ezenkívül megszerkesztettük a PT-DsbA-L és a VDAC1 KO egerek két modelljét, hogy ellenőrizzük a DsbAL és a VDAC1 funkcióját a VAN, CL, P és I/R által indukált AKI modellekben.

3. Megállapítások

A PT-DsbA-L-KO egerek az I/R, VAN- és CLP által kiváltott AKI progressziója javulását mutatták a VDAC1 downregulációja révén. Végül ischaemiás vagy akut interstitialis nephritis (AIN) által kiváltott AKI-ban szenvedő betegektől vett HK-2 sejtek és vesebiopsziák vizsgálatával megerősítettük ezeket a szignálmolekulák változásait. Mechanikailag a DsbA-L kölcsönhatásba lép a VDAC1 9-13 és 22-27 aminosavaival a BUMPT sejtek mitokondriumában, hogy vesesejtek apoptózisát és mitokondriális károsodást váltson ki.

4. Értelmezés

Ez a munka azt sugallta, hogy a proximális tubuláris sejtekben található DsbA-L elősegíti az AKI progresszióját azáltal, hogy közvetlenül szabályozza a VDAC1 szintjét. Running Title: The Role of DsbA-L in AKI.

5. Finanszírozás

Kínai Nemzeti Természettudományi Alapítvány, a Hunan tartományi tudományos és technológiai innováció kulcsfontosságú projektje, Hunan tartomány Tudományos és Technológiai Osztályának Nemzetközi Együttműködési és Csere projektje, Changsha Tudományos és Technológiai Iroda projektje, Hunan tartomány Természettudományi Alapítványa, Fundamentális támogatása. Kutatási alapok a Közép-Dél Egyetem központi egyetemei számára, Hunan Tartományi Innovációs Alapítvány Posztgraduális Kína Hunan Tartományi Tudományos és Technológiai Tanszékének.

Kulcsszavak

DsbA-L; VDAC_I; Bax; Cyt-c; AKI

Kattintson ide, hogy megkapja a Cistanche előnyeit, és vásároljon Cistanche tablettákat

Bevezetés

Az akut vesekárosodás (AKI) pusztító klinikai szövődmény, magas morbiditási és mortalitási arányokkal, és betegek millióit érinti szerte a világon (1). Az AKI-t általában szepszis, nefrotoxikus szerek és ischaemia-reperfúziós károsodás (IRI) váltják ki (2). Az AKI mögött meghúzódó molekuláris mechanizmusok még mindig nem teljesen tisztázottak. Következésképpen nem állnak rendelkezésre hatékony kezelési stratégiák az AKI számára.

A tubuláris sejtsérülést évtizedek óta az AKI egyik fontos mozgatórugójaként ismerték fel.3 A kutatás előrehaladtával egyre több kutató állapította meg, hogy a mitokondriális károsodás kulcsszerepet játszik a tubuláris sejtkárosodásban, és ezt a kezdeti károsodást a sejtek felhalmozódása okozza. ROS, citokinek termelése és sejthalál (beleértve a nekrózist és az apoptózist is); összességében ezek a folyamatok mind hozzájárulnak az AKI kialakulásához.4-6 Bár egyre több kutatás foglalkozik az AKI mitokondriális károsodásának hátterében álló mechanizmusokkal,7- 12 a mitokondriális sérülésekért felelős pontos mechanizmust még nem sikerült azonosítani.

A diszulfidkötés A oxidoreduktáz-szerű fehérjét (DsbAL) először mitokondrium fehérjeként azonosították patkány májsejtekben.13 Korábbi vizsgálatok kimutatták, hogy a DsbA-L megakadályozta a diétát vagy a diabéteszes nefropátia (DN) által kiváltott elhízást, gyulladást, inzulinrezisztenciát vagy vesekárosodás.{5}} Érdekes módon a közelmúltban végzett vizsgálatunk azt találta, hogy a DsbA-L által közvetített unilaterális ureterelzáródás (UUO) által kiváltott vesefibrózis. Azonban a tubuláris DsbA-L szerepe és mechanizmusa az AKI-ban még mindig teljesen ismeretlen.

Jelen tanulmányban a DsbA-L (PT-DsbA-L-KO) proximális tubuláris deléciója egérmodellben az I/R jelentős gyengülését eredményezte, valamint vankomicin (VAN) és vakbél ligálás és punkció (CLP) )-indukált AKI. Következetesen a DsbA-L I/R, VAN és LPS által kiváltott apoptózist is közvetített egér vese proximális tubuláris epiteliális (BUMPT) sejtjeiben. Érdekes módon azt találtuk, hogy a DsbA-L kölcsönhatásba lép a feszültségfüggő anioncsatorna 1 (VDAC1) 9-13 és 22 27 régióival, amely a VDAC fehérjecsalád kulcsfontosságú tagja19 21; ezeket a hatásokat mind in vivo, mind in vitro mitokondriális mintákon és humán AKI mintákon megfigyelték. Továbbá kimutattuk, hogy a PTVDAC1-KO a vesesejtek apoptózisát is javította az AKI in vitro és in vivo modelljében. Összességében kimutattuk, hogy a DsbA-L kölcsönhatásba lép a VDAC1-gyel a mitokondriumok által közvetített tubuláris sejt apoptózisban, és ezért az AKI progresszióját okozta.

Cistanche tubulosa

Anyagok és metódusok

1. Etikai nyilatkozat

A vizsgálatot a Kínai Népköztársaság második Xiangya Kórházának Felülvizsgáló Testülete hagyta jóvá (NO. 2018065), és ebbe a vizsgálatba 18 beteget vontak be. A vizsgálatba való felvétel előtt minden résztvevőt írásos beleegyezéssel vettek fel. Minden állatkísérlet megfelelt a Kínai Népköztársaság második Xiangya Kórházának Állatgondozási Etikai Bizottsága (NO. 2020310) által jóváhagyott irányadó elveknek.

2. Antitestek és reagensek

Anti-COXIV (ab33985, RRID: AB_879754), VDAC1 (ab14734, RRID: AB_443084), and PGC-1a (ab191838, RRID: AB_2721267) antibodies were obtained from Abcam (Cambridge Science Park, Cambridge, UK). Anti-Caspase3 (9662, RRID: AB_331439) and cleavedcapase3 (9664, RRID: AB_2070042) antibodies were purchased from Cell Signaling Technology (Danvers, MA, USA). Anti-Bax (50599-2-Ig, RRID: AB_2061561), Cyt-c (10993-1-AP, RRID: AB_2090467), NRF1 (12482- 1-AP, RRID: AB_2282876), GAPDH (60004-1-Ig, RRID: AB_2107436), and b-tubulin (10094-1-AP, RRID: AB_2210695) antibodies were obtained from Proteintech (Rosemont, IL, USA). The anti-DsbA-L antibody was provided by Dr. Feng Liu(14). All secondary antibodies (MitoTracker Green FM and MitoTracker Red CMXRos) were obtained from Thermo Fisher Scientific (Waltham, MA, USA). The calcium ionophore was purchased from Sigma-Aldrich (Shanghai, China). Antimycin A (>95 százalékos tisztaságú, ab141904) és egy Mitochondria/Cytosol Fractionation Kit (ab65320) az Abcam-től (Cambridge Science Park, Cambridge, Egyesült Királyság) vásároltuk. Az egér DsbAL célszekvenciáját korábban leírtuk.22

3. AKI modellek létrehozása ischaemiás reperfúzióval, CLP-vel és VAN-nal

A 8-10 hetes C57BL/6J hím egereket (RRID: MGI:5657312) a Hunan SJA Laboratory Animal Co., Ltd.-től vásároltuk. A proximális tubulus-specifikus DsbA-L vagy VDAC1 deléciót mutató egereket DsbA-L keresztezésével állítottuk elő. (flox/flox) egerek (Dr. Feng Liu) vagy VDAC1 (flox/flox) egerek (Sanghaji modellorganizmusokból származnak) PEPCK-Cre egerekkel (Dr. Volker Haase (Pennsylvania Egyetem, Philadelphia, PA) ). 28 perccel, majd 24 vagy 48 órás reperfúzióval. Az egerek testhőmérsékletét körülbelül 37 fokon tartottuk. CLP-indukált AKI esetén a vakbelet szorosan lekötöttük a csúcstól 1,5 cm-re. Ezt követte egy szúrás 18 órán át. VAN sérülés esetén az egereket intraperitoneálisan egyetlen adag VAN-nal fecskendezték be 600 mg/kg dózisban 7 egymást követő napon keresztül, a korábban leírtak szerint.28,29 Ezenkívül a C57BL/6 egereket DsbA-L vagy VDAC1 plazmidok vagy VDAC1 siRNS (15 mg/kg dózisban) a farokvénán keresztül hetente kétszer22; fiziológiás sóoldatot használtunk kontroll injekcióként. Minden egyes vizsgálatnál együtt elemeztük a mintákat, hogy elkerüljük a torzítást, a korábbi vizsgálatok alapján, és a PASS szoftvert használtuk a mintanagyság(n=6) meghatározásához. Kizártuk azt a mintát, amely a végpont előtt meghalt vagy meghiúsította a modell létrehozását. A kísérleti egereket véletlenszám-táblázat alapján csoportosítottuk. A kutatók nem voltak vakok a kísérlet során, de az allokáció, a mintagyűjtés és az adatelemzés során vakok voltak. Minden állatkísérlet megfelelt a Kínai Népköztársaság második Xiangya Kórházának Állatgondozási Etikai Bizottsága által jóváhagyott vezérelveknek. Az egereket 12-órás világos/sötét környezetben tartottuk, szabad hozzáférést biztosítva a szokásos rágcsálótáphoz és vízhez.

Herba Cistanche

4. Sejttenyésztés és ischaemia-reperfúziós modell

Dr. Wilfred Lieberthaltól (Bostoni Egyetem Orvostudományi Karától) beszerzett BUMPT sejteket vagy a Shanghai Zhongqiaoxinzhou Biotechtől származó HK{{0}} sejteket DMEM-mel (Gibco, 11965092) tenyésztettük 10 százalékos FBS-sel (Gibco, 10100147). és 1% Penicillin-Streptomycin (Gibco, 15140163) 37 °C-on 5% CO2-ban. Az ischaemiás sejtmodellhez a BUMPTs sejteket 10 mM antimycin A-val (a III. mitokondriális komplex inhibitora, Abcam, ab141904) és 1,5 mM kalcium-ionoforral (Sigma, A23187) kezeltük Hanks' Balanced Salt Solution (Hyclone, SH302030) oldatban. 2 óra. 30 Ezt követően a HBSS-t DMEM táptalajra cseréltük 0, 2 és 4 órára a reperfúziós szakaszban. A sejt apoptózist morfológiával és immunblottal mutattuk ki apoptotikus indikátorok, köztük a hasított kaszpáz3, Bax és Cyt-c kimutatására. Számos plazmidot hoztak létre és transzfektáltak sejtekbe lipofekcióval: DsbA-L, HA-VDAC1-1-25, HA-VDAC1-26-366, HA-VDAC1-teljes hosszúságú, HA-VDAC{{33 }}D9-13,22-27, HAVDAC1-D39-45,55-57 és HA-VDAC1-D9-13, 22-27 D39-45,55-57 és siRNS a DsbA-L és VDAC1 számára. A transzfekció után hat-nyolc órával a tápközeget DMEM-re cseréltük. A DsbA-L siRNS és a VDAC1 siRNS szekvenciája egereknél a következő volt: 50 - GCAUGGAGCAACCAGAGAUTT -30, illetve 50 - CCAGAGCAACTTCGCAGTT -30; a kódolt NC siRNS szekvenciája a következő volt: 50 -UUCUCCGAACGUGUCACGUTT-30. A DsbA-L siRNS és a VDAC1 siRNS humán szekvenciája a következő volt: 50 - UCAUUUGCCAUGUAUAGUCCU-30, illetve 50 -UAUUAAGCCAAAUCCAUAGCC -30; a kódolt NC siRNS szekvenciái a következők voltak: 50 -AACCACUCAACUUUUUCC CAA -30. Az IR modellt ezután indukáltuk, amikor a sejtsűrűség elérte a 90 százalékot.

5. Áramlási citometria

Az áramlási citometriát a FITC Annexin V Apoptosis Detection Kit (BD, 556547) utasításai szerint végeztük. BUMPT vagy HK-2 A különböző kezelésekkel kezelt sejteket EDTA nélküli tripszin segítségével gyűjtöttük össze, és háromszor mostuk PBS-sel, majd FITC-vel 15 percig és PI-vel 5 percig szobahőmérsékleten, végül áramlási citometriával vizsgáltuk.

6. AKI betegek és mintagyűjtés

A protokollt a Kínai Népköztársaság második Xiangya kórházának felülvizsgálati bizottsága hagyta jóvá. Ebben a vizsgálatban 18 beteg vett részt, köztük 12 férfi és 6 nő. A toborzási elv a vesebiopszián alapult. A betegek adatait az 1. táblázat egészíti ki. A vesebiopsziás mintákat minimális változási betegségben (MCD) (n=6) és ischaemiás vagy akut interstitialis nephritis (AIN) által kiváltott AKI-ban (n{{6}) szenvedő betegektől vettük. }). Kijelentjük, hogy minden vizsgálat megfelel a humán résztvevőkkel végzett kutatásra vonatkozó összes vonatkozó etikai előírásnak, és a Helsinki Nyilatkozat elveinek megfelelően végezték, és hogy a tanulmány megfelel a Tudományos és Technológiai Minisztérium által a kutatás felülvizsgálatára és jóváhagyására vonatkozó útmutatásnak. Humán genetikai erőforrások. Az MCD felvételi és kizárási kritériumait korábbi tanulmányunkban írtuk le.23 IR esetén: Bevételi kritériumok: 1 Biopszia ischaemiás reperfúziós betegek számára,2 75 évnél fiatalabb kor; Kizárási kritériumok1: kizárják a posztoperatív orvosi vizsgálatok során daganatos betegeket,2 kizárják azokat a betegeket, akiknek anamnézisében cukorbetegség, köszvény, magas vérnyomás, húgyúti tuberkulózis vagy fertőzés szerepel. AIN esetében: Bevonási kritériumok1: Klinikailag akut intersticiális nephritisként diagnosztizálták2 Biopsziával igazolt AIN-betegek,3 75 évnél fiatalabbak; Kizárási kritériumok1: A kóros vér kreatininszinttel rendelkező betegek kizárása a felvétel előtt,2 olyan betegek kizárása, akiknek a kórtörténetében cukorbetegség, köszvény, magas vérnyomás, húgyúti tuberkulózis vagy fertőzés szerepel. Ezeket a mintákat ezután a HE, a TUNEL és az immunhisztokémia festésére, valamint az immunprecipitációra (IP) és az immunblot-vizsgálatra használták.

7. Immunprecipitáció

A BUMPT sejtekből származó citoplazmát és mitokondriumokat, valamint egerek és AKI-s betegek veseszövetét Mitochondria/Cytosol Fractionation Kit (Abcam, ab65320) segítségével választottuk el; a készletet a gyártó utasításai szerint használták. Az antitesteket (DsbA-L, VDAC1, HA vagy IgG) a mágneses gyöngyökhöz kötöttük. Ezután hozzáadtuk a mitokondrium/citoplazma lizátumot, és három órán át inkubáltuk. Ezután a keveréket eluáltuk, és immunblottal vizsgáltuk a kapcsolódó markerek expresszióját.

8. Relatív kvantitatív PCR (qPCR)

Az RNS-t BUMPT sejtekből vagy veseszövetből vontuk ki Trizol reagenssel (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA). Ezután az RNS-t reverz transzkripcióval írtuk át első szálú cDNS-be a Prime Script RT Reagent készlet és a gDNS Eraser (TaKaRa, RR037A) segítségével, a korábban leírtak szerint.31'34 Ezután a cDNS-t használtuk templátként TB zölddel (TaKaRa, RR820A) és egy Light cycler 96-tal (Roche) a következő primerpárokkal: DsbA-L: 5 - AAATATGGGGCCTT TGGGCT-3'(előre) és 5'- TAGCAACTCCAAGCGGTCA G-3'(fordított); és GAPDH: 5'-GGTTCTCCTCTGACTTCCACA-3'(előre) és 5'-GTGAGGGTC TCTCTCTTCCT-3'(fordított); PGC- 1a: 5'-ATGTGTCGCCTTCTTGCTCTTCC-3 (előre) és 5'-CTCCCGCTTCTCGTGCTCTTTG-3'(fordított); NrF1:5'-TCTGCTGTGGCTGATGGAGA GG-3'(előre) és NrF1:5'-GATGCTTGCGTCGTCTGGATGG-3 (hátra);

9. BUN és kreatinin kimutatás

A BUN és a kreatinin kimutatását a BUN (Urea Nitrogen Content Assay Kit Beijing Boxbio Science & Technology Co, Ltd.) és a Creatinine Assay kit (Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute, Nanjing, Kína) protokollja szerint végeztük.

10. HE festés, TUNEL festés, immunkémia, immunfluoreszcencia és immunoblot

A veseszövetet paraffinba ágyaztuk, majd metszetekre vágtuk különböző típusú festéshez, amint azt korábban leírtuk.26,35 A szövettani vizsgálatot hematoxilin és eozin festéssel értékeltük. A vesetubuláris sérülések értékelésére használt kritériumokat korábban leírták.23 TUNEL festést használtunk a vesesejtek apoptózisának értékelésére. Az apoptózis kvantitatív indikátoraként a TUNEL-pozitív sejtek arányát (százalék) használták 10-20 mikroszkopikus mezőben szövetmetszetenként.26 Az immunkémiai festéshez a szövetmetszeteket egy éjszakán át 4 °C-on inkubáltuk egy specifikus primer antitesttel. DsbA-L 1:200 vagy VDAC{10}}:100). Másnap reggel a metszeteket másodlagos antitesttel 30 percig 37 fokon inkubáltuk, majd DAB-val reagáltattuk 5-10 percig. Az immunfluoreszcens festéshez a metszeteket egy specifikus elsődleges antitesttel (DsbA-L 1:200, VDAC1 1:100) inkubáltuk egy éjszakán át 4 fokon, majd egy másodlagos fluoreszcens antitesttel 1 órán át 37 fokon, sötétben. Ezután DAPI-t adtunk hozzá 3-5 percig, és a metszeteket fluoreszcens mikroszkóppal figyeltük meg. A mitokondriális festést standard protokoll szerint végeztük. A BUMPT sejtekből vagy vesékből származó fehérjelizátumokat összegyűjtöttük, majd centrifugáltuk, hogy összegyűjtsük a fehérjéket tartalmazó felülúszót. A felülúszót SDS-PAGE-nak vetettük alá, majd PVDF membránra vittük át. A membránokat ezután egy éjszakán át egy primer antitesttel inkubáltuk 4 °C-on, majd egy másodlagos antitesttel 1 órán át szobahőmérsékleten. Az antiCOXIV, VDAC1, PGC-1a, Bax, Cyt-c, NRF1, GAPDH és b-tubulin koncentrációja 1:1000. Az anti-kaszpáz3 és a hasított kapáz3 koncentrációja 1:2000.

Cistanche kiegészítő

11. Statisztika

Minden adatot átlagként adtunk meg § SD. Kétirányú Student t-próbát használtunk két csoport összehasonlításához. Egyutas ANOVA-t, majd Tukey post hoc elemzését alkalmaztuk a többszörös összehasonlításhoz. A nem normál eloszlású adatokhoz Kruskal Walls tesztet használtunk. A Graph Pad 8.0 szoftvert használtuk az adatok és a P<0.05 was considered statistically significant.

12. A finanszírozási forrás szerepe

A finanszírozók nem vettek részt a tanulmány tervezésében, adatgyűjtésében, elemzésében, értelmezésében vagy a kézirat megírásában.

Hivatkozások

1 Zuk A, Bonventre JV. Akut vese sérülés. Annu Rev Med. 2016;67:293–307.

2 Zhou D, Tan RJ, Lin L, Zhou L, Liu Y. A hepatocita növekedési faktor receptor, c-met, aktiválása vesetubulusokban szükséges az akut vesekárosodás utáni renoprotekcióhoz. Kidney Int. 2013;84(3):509–520.

3 O'Neal JB, Shaw AD, Billings FT. Akut vesekárosodás szívműtét után: jelenlegi ismeretek és jövőbeli irányok. Crit Care. 2016;20(1):187.

4 Ishimoto Y, Inagi R. Mitokondriumok: terápiás célpont akut vesekárosodásban. Nephrol Dial Transplant. 2016;31(7):1062–1069. az Európai Dialízis és Transzplantációs Szövetség – Európai Veseszövetség – hivatalos kiadványa.

5 Linkermann A, Chen G, Dong G, Kunzendorf U, Krautwald S, Dong Z. Szabályozott sejthalál az AKI-ban. J Am Soc Nephrol. 2014;25(12):2689–2701.

6 Agarwal A, Dong Z, Harris R et al. Az AKI sejtes és molekuláris mechanizmusai. J Am Soc Nephrol. 2016;27(5):1288–1299.

7 Morigi M, Perico L, Rota C, et al. A Sirtuin 3-dependens mitokondriális dinamikus fejlesztések védelmet nyújtanak az akut vesekárosodás ellen. J Clin Investig. 2015;125(2):715–726.

8 Yu X, Xu M, Meng X és mtsai. A nukleáris receptor PXR az AKR1B7-et célozza meg, hogy megvédje a mitokondriális metabolizmust és a vesefunkciót AKI-ban. Sci Transl Med. 2020;12(543):7591–7605.

9 Stoppe C, Averdunk L, Goetzenich A et al. A makrofág migrációt gátló faktor protektív szerepe szívműtét utáni akut vesekárosodásban. Sci Transl Med. 2018;10(441):4886–4898.

10 Wei Q, Sun H, Song S et al. A mikroRNS-668 elnyomja az MTP18-at, hogy megőrizze a mitokondriális dinamikát ischaemiás akut vesekárosodásban. J Clin Investig. 2018;128(12):5448–5464.

11 Tran M, Tam D, Bardia A és mtsai. A PGC-1alfa elősegíti a felépülést az egerek szisztémás gyulladása során fellépő akut vesekárosodás után. J Clin Investig. 2011;121(10):4003–4014.

12 Lan R, Geng H, Singha PK és mtsai. Mitokondriális patológia és glikolitikus eltolódás az ischaemiás AKI utáni proximális tubulus atrófia során. J Am Soc Nephrol. 2016;27(11):3356–3367.

13 Harris JM, Meyer DJ, Coles B, Ketterer B. A patkánymáj mitokondriumainak mátrixából izolált új glutation transzferáz (13-13) szerkezeti hasonlóságot mutat a théta osztályba tartozó enzimekkel. Biochem J. 1991;278(Pt 1):137-141.

14 Bai J, Cervantes C, Liu J és mtsai. A DsbA-L megakadályozza az elhízás által kiváltott gyulladást és az inzulinrezisztenciát azáltal, hogy elnyomja az mtDNS-felszabadulás által aktivált cGAS-cGAMP-STING útvonalat. Proc Natl Acad Sci USA. 2017;114(46):12196–12201.

15 Chen H, Bai J, Dong F és mtsai. A máj DsbA-L megvédi az egereket az étrend által kiváltott hepatoszteatosistól és az inzulinrezisztenciától. FASEB J. 2017;31(6):2314–2326.

16 Liu M, Xiang R, Wilk SA, et al. A zsírspecifikus DsbA-L túlzott expressziója elősegíti az adiponektin multimerizációját, és megvédi az egereket az étrend által kiváltott elhízástól és az inzulinrezisztenciától. Cukorbetegség. 2012;61(11):2776–2786.

17 Chen X, Han Y, Gao P és mtsai. Diszulfid-kötés Az oxidoreduktáz-szerű fehérje véd a méhen kívüli zsírlerakódás és a lipidekkel összefüggő vesekárosodás ellen diabéteszes nephropathiában. Kidney Int. 2019;95(4):880–895.

18 Dai XG, Xu W, Li T et al. A foszfatáz és a tenzin homológ által kiváltott feltételezett kináz 1-Parkin által közvetített mitofágia szerepe szeptikus akut vesekárosodásban. Chin Med J (angol). 2019;132(19):2340–2347.

19 Shoshan-Barmatz V, Nahon-Crystal E, Shteinfer-Kuzmine A, Gupta R. VDAC1, mitokondriális diszfunkció és Alzheimer-kór. Pharmacol Res. 2018;131:87–101.

20 Geisler S, Holmstrom KM, Skujat D, et al. A PINK1/Parkin által közvetített mitofagia a VDAC1-től és a p62/SQSTM1-től függ. Nat Cell Biol. 2010;12(2):119–131.

21 Lipper CH, Stofleth JT, Bai F, et al. A VDAC redox-függő kapuzása a mitoNEET által. Proc Natl Acad Sci USA. 2019;116(40):19924–19929.

22 Li X, Pan J, Li H és mtsai. DsbA-L által közvetített vese tubulointersticiális fibrózis UUO egerekben. Nat Commun. 2020;11(1):4467.

23 Zhang D, Liu Y, Wei Q et al. A tubuláris p53 több gént szabályoz az AKI közvetítése érdekében. J Am Soc Nephrol. 2014;25(10):2278–2289.

24 Xu X, Wang J, Yang R, Dong Z, Zhang D. Az EGFR genetikai vagy farmakológiai gátlása javítja a szepszis által kiváltott AKI-t. Oncotarget. 2017;8(53):91577–91592.

25 Wang J, Li H, Qiu S, Dong Z, Xiang X, Zhang D. Az MBD2 felszabályozza a miR-301a-5p-t, hogy a vesesejtek apoptózisát indukálja a vankomicin-indukált AKI során. Cell Death Dis. 2017;8(10):e3120.

26 Xu L, Li X, Zhang F, Wu L, Dong Z, Zhang D. Az EGFR a HIPK2 túlzott expresszióján keresztül hajtja az AKI CKD-vé való progresszióját. Theranostics. 2019;9(9):2712–2726.

27 Zhang P, Yi L, Qu S et al. A Biomarker TCONS{1}} a miR-22-3p/AIFM1 jelzőtengelyt célozva szeptikus AKI-t hajt végre. Mol Ther Nukleinsavak. 2020;19:1027–1042.

28 Chen J, Wang J, Li H, Wang S, Xiang X, Zhang D. p53 aktiválja a miR-192-5p-t a vankomicin-indukált AKI közvetítésére. Sci Rep. 2016;6:38868.

29 Xu X, Pan J, Li H és mtsai. Az Atg7 közvetíti a vese tubuláris sejt apoptózisát a vankomicin nefrotoxicitásban a PKC-delta aktiválása révén. FASEB J. 2019;33(3):4513–4524.

30 Lee HT, Emala CW. Az előkondicionálás és az adenozin védi a humán proximális tubulussejteket az ischaemiás sérülés in vitro modelljében. J Am Soc Nephrol. 2002;13(11):2753–2761.

31 Ge Y, Wang J, Wu D és mtsai. Az lncRNS NR_038323 A miR-324-3p/DUSP1 tengelyt célozva elnyomja a vesefibrózist diabéteszes nephropathiában. Mol Ther Nukleinsavak. 2019;17:741–753.

32 Wang J, Pan J, Li H és mtsai. Az lncRNS ZEB1-AS1-et a p53 szuppresszálta a vesefibrózis miatt diabéteszes nephropathiában. Mol Ther Nukleinsavak. 2018;12:741–750.

33 Song YX, Sun JX, Zhao JH és mások. A nem kódoló RNS-ek a ceRNS által közvetített miRNS-elkerüléssel vesznek részt a CLDN4 szabályozó hálózatában. Nat Commun. 2017;8(1):289.

34 Zhu M, Liu J, Xiao J et al. Az Lnc-mg egy hosszú, nem kódoló RNS, amely elősegíti a miogenezist. Nat Commun. 2017;8:14718.

35 Kishi S, Brooks CR, Taguchi K et al. A proximális tubulus ATR szabályozza a DNS-javítást, hogy megakadályozza a maladaptív vesekárosodás válaszait. J Clin Investig. 2019;129(11):4797–4816.

Xiaozhou Li,a,b,1 Jian Pan,a,b,1 Huiling Li,c Guangdi Li,g Bohao Liu,a,b Xianming Tang,a,b Xiangfeng Liu,f Zhibiao He,a,b Zhenyu Peng,a ,b Hongliang Zhang,a,b Luxiang Wang,a,b Yijian Li,d Xudong Xiang,a,b Xiangping Chai,a,b Yunchang Yuan,e Peilin Zheng,h és Dongshan Zhang a,b *

a Kínai Népköztársaság Sürgősségi Orvostudományi Osztálya

b Sürgősségi Orvosi és Nehéz Betegségek Intézete, Második Xiangya Kórház, Közép-Dél Egyetem, Changsha, Hunan 410011, Kínai Népköztársaság

c Szemészeti Osztály, Kínai Népköztársaság

d Húgysebészeti Osztály, Kínai Népköztársaság

e Mellkassebészeti Osztály, Kínai Népköztársaság

f Második Xiangya Kórház Általános Sebészeti Osztálya, Kínai Népköztársaság

g Közegészségügyi Tanszék, Central South University, Changsha, Hunan, Kínai Népköztársaság

h Endokrinológiai Osztály, Shenzhen Népi Kórház, A Jinan Egyetem Második Klinikai Orvosi Főiskolája, A Déli Tudományos és Technológiai Egyetem első társkórháza, Shenzhen, Kínai Népköztársaság

1 Xiaozhou Li és Jian Pan egyformán hozzájárult ehhez a tanulmányhoz