Első rész Az MnSOD genetikai polimorfizmusai módosítják a környezeti melaminnak az oxidatív stresszre és a korai vesekárosodásra gyakorolt ​​hatását kalcium-urolithiasisos betegekben

Absztrakt

A környezeti melamin expozíció növeli az oxidatív stressz és a korai vesekárosodás kockázatát. A mangán-szuperoxid-diszmutáz (MnSOD), a glutation-peroxidáz és a kataláz képes megvédeni a veséket az oxidatív stressztől és fenntartani a normál működést. Megvizsgáltuk, hogy az egynukleotidos polimorfizmusaik (SNP-k) módosíthatják-e a melamin hatásait. Összesen 302 kalcium-urolithiasisban diagnosztizált beteget vontak be. Minden betegnek egy helyen egy éjszakai vizeletmintát adtak a melamin szintjének, az oxidatív stressz vizelet biomarkereinek és a vese tubuláris sérülésének mérésére. A medián értékeket a szintek magas és alacsony dichotomizálására használtuk. Az rs4880 T allélját és magas melaminszintet hordozó alanyoknál 3,60-szor nagyobb volt a magas malondialdehidszint kockázata, mint azoknál, akik az rs4880 C allélját és alacsony melaminszintet hordoztak a beállítás után. Az rs5746136 G allélt hordozó és magas melaminszintű alanyoknál 1,73-szor nagyobb volt a magas N-acetil- -D-glükózaminidáz szint kockázata, mint azoknál, akik az rs5746136 A allélt és alacsony melaminszintet hordoztak. Összefoglalva, az MnSOD, az rs4880 és az rs5746136 SNP-i befolyásolják az oxidatív stressz, illetve a vese tubuláris sérülésének kockázatát kalcium-urolithiasisban szenvedő betegeknél. A vizelet magas melaminszintjével összefüggésben tovább fokozódott az oxidatív stresszre és a vesetubuláris sérülésekre gyakorolt ​​hatása.

Kulcsszavak

mangán-szuperoxid-diszmutáz; genetikai polimorfizmus; melamin; vesekárosodás; oxidatív stressz; kalcium-urolithiasis.

Kattintson ide a Cistanche kivonat megtekintéséhez

Bevezetés

A melamin egy szintetikus vegyi anyag, amelyet különféle kereskedelmi mindennapi élethez szükséges termékek gyártásához használnak, beleértve a háztartási cikkeket, munkalapokat, szöveteket, ragasztókat és égésgátlókat [1,2]. Mivel magas nitrogéntartalma van, nem megfelelően használták állati takarmányban és tejben a fehérjetartalom megtévesztő megemelésére [1,2]. A melaminnak való kitettség káros hatásai világszerte felkeltették a figyelmet, miután botrányos módon hozzáadták az állati takarmányokhoz, ami 2007-ben több ezer kedvtelésből tartott állat pusztulásához vezetett az Egyesült Államokban, valamint az anyatej-helyettesítő tápszerhez, ami több mint 50 esetben urolithiasist okozott,{{6 }} gyermek és hat haláleset Kínában 2008-ban [1,2]. A melamin a mai napig mindenütt jelen van környezetünkben. Számos tanulmány kimutatta a melamint a vízben, a talajban, a terményekben, a napi élelmiszerekben és az állati szövetekben [3–5], mások pedig a különböző országokból származó általános populációk legtöbb vizeletmintájában [6–9].

A melamin bevitele után az eredeti formájának kilencven százaléka 24 órán belül kiürül a vizelettel, így a vesék érzékenyebbek lehetnek a melaminra [1]. Amellett, hogy 2008-ban nagy dózisú melamin akut nephrotoxicitásra gyakorolt ​​hatást a gyermekeknél, a hosszú távú, alacsony dózisú melamin expozíciót összefüggésbe hozták a veseszövődmények kockázatával, beleértve a kőképződést és a vesefunkció romlását felnőtteknél [10– 12]. Az egyik valószínű mechanizmus, amely szerint a krónikus, alacsony dózisú melamin expozíció korai vesekárosodáshoz és kövek kialakulásához vezethet, a vesetubulusokra gyakorolt ​​káros hatása, amint azt két humán vizsgálatunk is megállapította melamin edényekkel dolgozó dolgozókon [13] és kalcium-urolithiasisban szenvedő felnőtt betegeken. 14]. In vitro vizsgálatot is végeztünk humán vese proximális tubuláris HK-2 sejtjeinek felhasználásával, és azt találtuk, hogy a melamin az oxidatív stressz fokozásával vesetubuláris károsodást okozhat [15]. Két közelmúltbeli humán vizsgálatban azt is megállapítottuk, hogy a melaminnak való kitettség növelte az oxidatív stressz vizeletben előforduló biomarkereit, a malondialdehidet (MDA) és az 8-oxo-20 -dezoxiguanozint (8-OHdG) az MDA-val. a melamin teljes hatásának 36-53 százalékát közvetíti a vesetubuláris sérülés egyik biomarkerére, az N-acetil- -D-glükózaminidázra (NAG) [16]. Ezek az eredmények arra utalnak, hogy az alacsony dózisú környezeti melaminnak való kitettség növelheti az oxidatív stresszt, és tovább növelheti a korai vesekárosodás kockázatát az emberekben.

Oxidatív stressz akkor fordul elő, ha a pro-oxidánsok vagy a reaktív oxigénfajták (ROS) képződése meghaladja az endogén antioxidáns kapacitást. Veséink különösen érzékenyek az oxidatív stresszre, amelyről úgy gondolják, hogy fontos tényező a legtöbb vesebetegség kialakulásában, kialakulásában és progressziójában [17,18]. A vesékben fellépő oxidatív stressz okai összefüggésbe hozhatók az orvosi betegségek és a vegyi anyagok, például a melamin környezeti expozíciója közötti kölcsönhatásokkal [16]. Az endogén antioxidáns rendszerekről, köztük a mangán-szuperoxid-diszmutázról (MnSOD), a glutation-peroxidázról (GPX1) és a katalázról (CAT) azt találták, hogy megvédik a veséket az oxidatív stresszel szemben, és ezt követően segítik a normál működés fenntartását [18]. Az MnSOD a toxikus ROS-t és a szuperoxid anionokat hidrogén-peroxiddá tudja bontani, amit aztán a GPX1 és a CAT nem mérgező vízzé és oxigénné alakít a mitokondriumokban [18]. Ezen antioxidáns enzim gének számos egynukleotidos polimorfizmusát (SNP) különféle betegségekkel [19], köztük vesebetegségekkel [20–22] társították.

Mivel a környezeti toxikus anyagokkal összefüggő vesekárosodást genetikai tényezők befolyásolhatják [23], lehetséges, hogy az antioxidáns enzim gének SNP-i (pl. MnSOD, GPX1, CAT) módosíthatják a környezeti melamin expozíció hatásait az oxidatív stressz kockázatára. és vesetubuláris sérülések emberekben. Ennek kiderítésére kiválasztottunk öt antioxidáns enzim gének jelölt SNP-jét (MnSOD: rs4880 és rs5746136, GPX1: rs1800668, CAT: rs1001179 és rs769217), amelyek többségét vesebetegségekkel hozták összefüggésbe [20–22]. környezeti melamin-expozícióval kombinálva az 8-OHdG-re és az MDA-ra, az oxidatív stressz két biomarkerére, valamint a NAG-ra, a vese tubuláris sérülésének biomarkerére a vizeletben.

Cistanche tubulosa és Cistanche tabletták

Anyagok és metódusok

1. Tantárgyak

Összesen 309 felső húgyúti kalcium-urolithiasisban diagnosztizált beteget vontak be 2010 novembere és 2015 januárja között. A részletes vizsgálati terveket és a felvételükre vonatkozó protokollokat korábban leírták [14,16]. Röviden, minden beteg a Kaohsiung Medical University-hez kapcsolódó kórházakból származott Tajvan délnyugati részén. A jogosult betegek legfeljebb 20 évesek voltak, akiknél urolithiasist diagnosztizáltak a felső húgyúti traktusban radiográfiával vagy ultrahanggal, és akikről kőmintákat adtak, amelyekről infravörös spektroszkópiai analízis (Spectrum RX I Fourier Transform) igazolta, hogy kalciumkomponenseket tartalmaznak. -Infravörös rendszer, PerkinElmer, Waltham, MA, USA). Röntgenvizsgálattal egyik résztvevőnél sem találtak húgysav vagy cisztin köveket a klinikai vizsgálatok szerint.

Azokat a betegeket kizártuk, akiknek kórtörténetében krónikus húgyúti fertőzés, krónikus hasmenés, köszvény, hyperparathyreosis, tubuláris acidózis, veseelégtelenség vagy rák szerepelt. Szintén kizárták azokat az alanyokat, akik az urolithiasis diagnózisát vagy az interjút megelőző hat hónapon belül hetente többször vettek D-vitamint, kalcium-kiegészítőket, vízhajtókat vagy kálium-citrátot. A vizsgálati protokollt a KMUH Intézményi Ellenőrző Testülete hagyta jóvá, és minden jogosult beteg aláírt, írásos beleegyező nyilatkozatot adott át. Ez a tanulmány követte a STREGA irányelveit [24] (lásd a kiegészítő anyagok S1 táblázatát).

2. Klinikai adatok és biológiai minták gyűjtése

Belépéskor minden résztvevőnek vér- és egypontos első üreges reggeli vizeletmintát adtak az éjszakai éhezés után és az urolithiasis bármely kezelése előtt biokémiai és genetikai elemzés céljából. Egy strukturált kérdőívet is kitöltöttek, hogy összegyűjtsék demográfiai adataikat, kórtörténetüket és szerhasználatukat (cigaretta, alkohol és bétel-quid) [14,16]. Azok a résztvevők, akik dohányosnak, alkoholfogyasztónak vagy bétel-quid rágónak minősülnek, ha rendszeresen elszívtak legalább 10 cigarettát hetente, alkoholos italt fogyasztottak legalább hetente 1 alkalommal, vagy többet rágtak, mint vagy heti 7 bétel quidnek felel meg legalább hat hónapon keresztül. A jelenlegi felhasználók azok voltak, akik az urolithiasis diagnózisa vagy az interjú előtt egy éven belül még gyakorolták a fenti szokásokat [11,25].

A klinikai információkat, beleértve a kövek elhelyezkedését, a kőszámot, a kő átmérőjét és a kőepizódokat, szintén kérdőív segítségével gyűjtötték össze, és egy urológus (C.-CL) tovább vizsgálta a betegek egészségügyi diagramja alapján, aki nem tudott az érdeklődésre számot tartó expozícióról. melamin és az oxidatív stressz (8-OHdG és MDA) és a vesetubuláris sérülés (NAG) biomarkerei a vizeletben és az antioxidáns enzim gének genotipizálása.

Cistanche kapszula

3. A melamin, az oxidatív stressz biomarkereinek (MDA és 8-OHdG) és a vese tubuláris sérülésének (NAG) elemzése a vizeletben

A vizelet melamint izotóp folyadékkromatográfiás-tandem tömegspektrometriás módszerrel (LC-MS/MS) mértük (API40{{20}}0Q, Applied Biosystems/MDS SCIEX , Concord, Vaughan, ON, Kanada) [13]. A vizelet MDA-ját nagy teljesítményű folyadékkromatográfiával, fluoreszcens (HPLC-FL) detektálással mértük fordított fázisú oszlopon (Luna C18, 250 × 4,6 nm) [26]. A vizelet 8-OHdG-jét az online szilárdfázisú extrakció (SPE) validált módszerével mértük, LC-MS/MS [27]. A részletes módszereket korábban leírtuk [14,16]. A vizelet melamin és az oxidatív stressz biomarkereinek kimutatási határa 0,4 ng/ml volt melamin, 0,02 µmol/L MDA és 0,01 ng/ml 8-OHdG esetében. Minden vizeletben mért MDA és 8-OHdG kimutatható volt. Ezzel szemben a 309 vizelet melaminmérés közül 31 (10,0 százalék) volt a LOD alatt, és LOD/√ 2 értékkel helyettesítették.

A vizelet NAG-ját NAG assay kit (Diazyme Laboratory, Poway, CA, USA) segítségével mérték [13,14]. Minden vizelet NAG-mérés kimutatható volt. A vizelet kreatinint spektrofotometriával (U-2000; Hitachi, Tokió, Japán) 520 nm hullámhosszra állítottuk a kreatinin-pikrát reakció mérésére [14]. Az összes fenti biokémiai paraméter mérését két különböző laboratóriumi technikus végezte, akik nem voltak tekintettel egymás eredményeire, a vizsgálati tervre és a résztvevők információira.

4. Öt SNP genotipizálása

A DNS-t a perifériás teljes vérből Puregene DNA Isolation Kit (Gentra Systems Inc., Minneapolis, MN, USA) segítségével extraháltuk. Az öt SNP-t (MnSOD-rs4880, MnSODrs5746136, GPX1-rs1800668, CAT-rs1001179 és CAT-rs769217) egy assay-on-demand SNP genotipizálási készlettel elemeztük egy TaqAylic discus5' alle TaqAppliiss-re. , Foster City, CA, USA). Röviden, az SNP-amplifikációs vizsgálatok, amelyek 10 ng DNS-mintát tartalmaztak 25 µl reakcióoldatban, 12,5 µl 2× TaqMan®Universal PCR Mix-et (Applied Biosystems) tartalmaztak, míg 1,25 µl előre kifejlesztett vizsgálati reagenst (SNP-genotipizált termék) Biosystems) két primert tartalmazott. Két MCB-Taqman szondát végeztünk a gyártó utasításait követve. A polimeráz láncreakciókat (PCR) ABI Prism 7500 Sequence Detection System (Applied Biosystems) segítségével végeztük [28,29]. Ezeket a genotípusokat teljes körű genotipizálást követően közvetlen szekvenálással igazoltuk. Véletlenszerűen a vizsgálati minták ~10 százalékát (30 eset) ismételtük meg minőség-ellenőrzés céljából, az eredmények 100 százalékos pontosságot mutattak.

A Cistanche előnyei

5. Statisztikai elemzések

A kvantitatív adatokat átlag ± standard deviáció (SD) vagy medián interkvartilis tartományokkal (IQR) fejeztük ki, a kategorikus adatokat pedig számok (n) és százalékok formájában mutattuk be. A Hardy–Weinberg egyensúlyt a genotípusok eloszlására a khi-négyzet teszttel ellenőriztük.

A vizelet melaminszintjét és a vizelet biomarkereit (MDA, 8-OHdG, NAG) a vizelet kreatininértékeivel korrigáltuk a további elemzések előtt. A korrekció után az oxidatív stressz (MDA és 8-OHdG) és a vesetubuláris sérülés (NAG) vizeletben előforduló biomarkereit mediánértékeik alapján dichotomizáltuk magasra vagy alacsonyra [14,16]. Egyszerű logisztikus regressziós modelleket használtak először az antioxidáns enzim gének genotípusai és az oxidatív stressz és a vesetubuláris sérülés vizeletben előforduló biomarkerei közötti összefüggések értékelésére. Ha a kezdeti elemzésben szignifikáns összefüggést észleltek, az antioxidáns enzim gének genotípusai és a vizeletben a mediánértékekkel dichotomizált melaminszintek közötti kombinált hatást többszörös logisztikus regressziós elemzéssel tesztelték, miután korrigálták a kovariánsokat, például kor, nem, BMI, iskolai végzettség. szint, személyes szokások, kőszám, kőméret, kő elhelyezkedése és társbetegségei. Minden statisztikai elemzést a SAS statisztikai csomag segítségével végeztünk. Minden p-érték kétoldalú volt, és szignifikánsnak tekinthető, ha<0.05.

6. Érzékenységelemzés

Eredményeink robusztusságának vizsgálata érdekében érzékenységi elemzéseket végeztünk, hogy összehasonlítsuk az eredményeket, amikor a vizelet melaminszintjét harmadrészekre osztottuk. Ezenkívül összehasonlítjuk az eredményeket egy új, kovariáns korrigált standardizálási módszerrel, valamint kreatinin-korrekcióval a vizeletkoncentráció és a bonyolult zavaró struktúrák korrigálása érdekében [14,30].

Hivatkozások

1. Hau, AK; Kwan, TH; Li, PK Melamin toxicitás és a vese. J. Am. Soc. Nephrol. 2009, 20, 245–250. [CrossRef]

2. Bhalla, V.; Grimm, PC; Chertow, GM; Pao, AC Melamin nefrotoxicitás: Feltörekvő járvány a globalizáció korában. Kidney Int. 2009, 75, 774–779. [CrossRef]

3. Qin, Y.; Lv, X.; Li, J.; Qi, G.; Diao, Q.; Liu, G.; Xue, M.; Wang, J.; Tong, J.; Zhang, L.; et al. A termény, a talaj és a víz melaminszennyezettségének felmérése Kínában, valamint a melamin felhalmozódásának kockázata az állati szövetekben és termékekben. Environ. Int. 2010, 36, 446–452. [CrossRef]

4. Zhu, H.; Kannan, K. A melamin és származékainak előfordulása és eloszlása ​​felszíni vízben, ivóvízben, csapadékban, szennyvízben és uszodavízben. Environ. Pollut. 2020, 258, 113743. [CrossRef]

5. Zhu, H.; Kannan, K. Melamin és cianursav az Egyesült Államokból származó élelmiszerekben és ezek emberi expozícióra gyakorolt ​​hatásai. Environ. Int. 2019, 130, 104950. [CrossRef]

6. Panuwet, P.; Nguyen, JV; Wade, EL; D'Souza, PE; Ryan, PB; Barr, DB Melamin mennyiségi meghatározása emberi vizeletben kationcserélő alapú, nagy teljesítményű folyadékkromatográfiás-tandem tömegspektrometriával. J. Chromatogr. B Anal. Technol. Biomed Life Sci. 2012, 887–888, 48–54. [CrossRef]

7. Lin, Y.-T.; Tsai, M.-T.; Chen, Y.-L.; Cheng, C.-M.; Hung, C.-C.; Wu, C.-F.; Liu, C.-C.; Hsieh, T.-J.; Shiea, J.; Chen, BH; et al. Megjósolhatja-e a melaminszint az 1-egy éjszakai vizeletmintákban a teljes előző 24-órás melaminkiválasztás szintjét iskolás gyerekeknél? Clin. Chim. Acta 2013, 420, 128–133. [CrossRef]

8. Sathyanarayana, S.; Flynn, JT; Messito, MJ; Gross, R.; Whitlock, KB; Kannan, K.; Karthikraj, R.; Morrison, D.; Huie, M.; Christakis, D.; et al. Melamin és cianursav expozíció és vesekárosodás amerikai gyermekeknél. Environ. Res. 2019, 171, 18–23. [CrossRef]

9. Shi, X.; Dong, R.; Chen, J.; Yuan, Y.; Long, Q.; Guo, J.; Li, S.; Chen, B. Sanghaji felnőttek melaminexpozíciójának értékelése és összefüggése az élelmiszerfogyasztással. Environ. Int. 2020, 135, 105363. [CrossRef]

10. Wu, C.-F.; Liu, C.-C.; Chen, B.-H.; Huang, S.-P.; Lee, H.-H.; Chou, Y.-H.; Wu, W.-J.; Wu, M.-T. A vizelet melamin és a felnőttkori urolithiasis Tajvanon. Clin. Chim. Acta 2010, 411, 184–189. [CrossRef]

11. Liu, C.-C.; Wu, C.-F.; Chen, B.-H.; Huang, S.-P.; Goggins, W.; Lee, H.-H.; Chou, Y.-H.; Wu, W.-J.; Huang, C.-H.; Shiea, J.; et al. A melamin alacsony expozíciója növeli az urolithiasis kockázatát felnőtteknél. Kidney Int. 2011, 80, 746–752. [CrossRef]

12. Tsai, Y.-C.; Wu, C.-F.; Liu, C.-C.; Hsieh, T.-J.; Lin, Y.-T.; Chiu, Y.-W.; Hwang, S.-J.; Chen, H.-C.; Wu, M.-T. A vizelet melaminszintje és a CKD progressziója. Clin. J. Am. Soc. Nephrol. CJASN 2019, 14, 1133–1141. [CrossRef]

13. Wu, C.-F.; Peng, C.-Y.; Liu, C.-C.; Lin, W.-Y.; Pan, C.-H.; Cheng, C.-M.; Hsieh, H.-M.; Hsieh, T.-J.; Chen, BH; Wu, M.-T. A környezeti melamin expozíció és a vizelet korai vesekárosodásának biomarkerei. J. Am. Soc. Nephrol. 2015, 26, 2821–2829. [CrossRef] [PubMed]

14. Liu, C.-C.; Hsieh, T.-J.; Wu, C.-F.; Tsai, Y.-C.; Huang, S.-P.; Lee, Y.-C.; Huang, T.-Y.; Shen, J.-T.; Chou, Y.-H.; Huang, C.-N.; et al. A vizelet melamin kiválasztása és a vese tubuláris sérülésének megnövekedett markerei kalcium-urolithiasisban szenvedő betegeknél: Keresztmetszeti vizsgálat. Environ. Pollut. 2017, 231, 1284–1290. [CrossRef]

15. Hsieh, TJ; Hsieh, PC; Tsai, YH; Wu, C.; Liu, C.; Lin, M.; Wu, M. A melamin az emberi vese proximális tubuláris sejtjeinek sérülését idézi elő a béta növekedési faktor transzformációja és az oxidatív stressz révén. Toxicol. Sci. 2012, 130, 17–32. [CrossRef]

16. Liu, C.-C.; Hsieh, T.-J.; Wu, C.-F.; Lee, C.-H.; Tsai, Y.-C.; Huang, T.-Y.; Wen, S.-C.; Lee, C.-H.; Chien, T.-M.; Lee, Y.-C.; et al. A környezeti melamin expozíció, az oxidatív stressz biomarkerei és a korai vesekárosodás összefüggései. J. Hazard Mater. 2020, 396, 122726. [CrossRef] [PubMed]

17. Gorin, Y. A vese: Egy szerv az oxidatív stresszel összefüggő patológiák frontvonalában. Antioxidáns. Redox jel. 2016, 25, 639–641. [CrossRef]

18. Ratliff, BB; Abdulmahdi, W.; Pawar, R.; Wolin, MS Oxidáló mechanizmusok vesekárosodásban és -betegségben. Antioxidáns. Redox jel. 2016, 25, 119–146. [CrossRef]

19. Crawford, A.; Fassett, RG; Geraghty, DP; Kunde, DA; Ball, MJ; Robertson, IK; Coombes, JS Az antioxidáns enzimek egynukleotidos polimorfizmusa és a betegség közötti összefüggések. Gene 2012, 501, 89–103. [CrossRef] [PubMed]

20. Crawford, A.; Fassett, RG; Coombes, J.; Kunde, D.; Ahuja, K.; Robertson, IK; Ball, MJ; Geraghty, D. Glutation-peroxidáz, szuperoxid-diszmutáz és kataláz genotípusok és aktivitások, valamint a krónikus vesebetegség progressziója. Nephrol. Tárcsa. Transzplantáció. 2011, 26, 2806–2813. [CrossRef]

21. Kidir, V.; Uz, E.; Yigit, A.; Altuntas, A.; Yigit, B.; Inal, S.; Uz, E.; Sezer, MT; Yilmaz, HR Mangán-szuperoxid-diszmutáz, glutation-peroxidáz és kataláz gén polimorfizmusai és klinikai eredményei akut vesekárosodásban. Ren. Sikertelen. 2016, 38, 372–377. [CrossRef] [PubMed]

22. Ewens, KG; George, RA; Sharma, K.; Ziyadeh, FN; Spielman, RS Diabéteszes nephropathia 115 jelölt génjének értékelése átviteli/kiegyensúlyozatlansági teszttel. Diabetes 2005, 54, 3305–3318. [CrossRef]

23. Lash, LH Vesetoxicitást befolyásoló környezeti és genetikai tényezők. Semin. Nephrol. 2019, 39, 132–140. [CrossRef]

24. Little, J.; Higgins, JPT; Ioannidis, JPA; Moher, D.; Gagnon, F.; von Elm, E.; Khoury, MJ; Cohen, B.; Davey-Smith, G.; Grimshaw, J.; et al. A genetikai asszociációs vizsgálatok jelentésének megerősítése (STREGA): A STROBE nyilatkozat kiterjesztése. Zümmögés. Közönséges petymeg. 2009, 125, 131–151. [CrossRef]

25. Liu, C.-C.; Huang, S.-P.; Wu, WJ; Chou, Y.-H.; Juo, S.; Tsai, L.-Y.; Huang, C.-H.; Wu, M.-T. A dohányzás, az alkoholfogyasztás és a bétel-quid rágásának hatása a kalcium-urolithiasis kockázatára. Ann. Epidemiol. 2009, 19, 539–545. [CrossRef] [PubMed]

26. Hsu, KC; Hsu, PF; Chen, YC; Lin, H.; Chen, HP; Huang, Y. Oxidatív stressz a bakteriális növekedés során, amelyet mikrodialízis mintavétellel jellemeznek, és malondialdehid HPLC/fluoreszcens kimutatásával párosul. J. Chromatogr. B Anal. Technol. Biomed Life Sci. 2016, 1019, 112–116. [CrossRef] [PubMed]

27. Hu, CW; Chao, MR; Sie, CH Az 8-oxo-7,8-dihidroguanin és az 8-oxo-7,8-dihidro-2'- vizeletvizsgálata dezoxiguanozin izotóp-hígítással LC-MS/MS automatizált szilárd fázisú extrakcióval: 8-oxo-7,8-dihidroguanin stabilitásának vizsgálata. Free Radic. Biol. Med. 2010, 48, 89–97. [CrossRef]

28. Liu, C.-C.; Lee, Y.-C.; Huang, S.-P.; Cheng, K.-H.; Hsieh, T.-J.; Huang, T.-Y.; Lee, C.-H.; Geng, J.-H.; Li, C.-C.; Wu, WJ Hepatocyte Nuclear Factor{10}}Az alfa-P2-promóter-változatok összefüggésbe hozhatók a metabolikus szindróma és a tesztoszteronhiány kockázatával az idősödő tajvani férfiaknál. J. Sex Med. 2018, 15, 1527–1536. [CrossRef]

29. Liu, C.-C.; Huang, S.-P.; Tsai, L.-Y.; Wu, WJ; Juo, S.-HH; Chou, Y.-H.; Huang, C.-H.; Wu, M.-T. Az osteopontin promoter polimorfizmusainak hatása a kalcium urolithiasis kockázatára. Clin. Chim. Acta 2010, 411, 739–743. [CrossRef]

30. O'Brien, KM; Upson, K.; Cook, NR; Weinberg, CR Környezeti vegyszerek vizeletben és vérben: A kreatinin- és lipidbeállítási módszerek javítása. Environ. Egészségügyi Perspektíva. 2016, 124, 220–227. [CrossRef]

Chia-Chu Liu 1,2,3,4, Chia-Fang Wu 1,5, Yung-Chin Lee 2,3,6, Tsung-Yi Huang 2, Shih-Ting Huang 1,7, Hsun-Shuan Wang 6, Jhen-Hao Jhan 6, Shu-Pin Huang 2,3, Ching-Chia Li 2,3, Yung-Shun Juan 2,3, Tusty-Jiuan Hsieh 1,7, Yi-Chun Tsai 1,8,9, Chu- Chih Chen 1,10 és Ming-Tsang Wu 1,11,12,13,

1 Research Center for Environmental Medicine, Kaohsiung Medical University, Kaohsiung City 807, Tajvan; ccliu0204@gmail.com (C.-CL); cfwu27@nuu.edu.tw (C.-FW); u107800006@kmu.edu.tw (S.-TH); hsiehjun@kmu.edu.tw (T.-JH); 920254@kmuh.org.tw (Y.-CT); ccchen@nhri.edu.tw (C.-CC)

2 Urológiai osztály, Kaohsiung Medical University Hospital, Kaohsiung Medical University, Kaohsiung City 807, Tajvan; 890197@kmuh.org.tw (Y.-CL); 970417@kmuh.org.tw (T.-YH); shpihu@kmu.edu.tw (S.-PH); 850144@kmuh.org.tw (C.-CL); 840066@kmuh.org.tw (Y.-SJ)

3 Urológiai osztály, Orvostudományi Kar, Orvosi Főiskola, Kaohsiung Medical University, Kaohsiung City 807, Tajvan

4 Urológiai Osztály, Pingtung Kórház, Egészségügyi és Jóléti Minisztérium, Pingtung City 900, Tajvan

5 Nemzetközi Translációs Orvostudományi Master Program, National United University, Miaoli 360, Tajvan

6 Urológiai Osztály, Kaohsiung Városi Siaogang Kórház, Kaohsiung City 812, Tajvan; 940199@kmuh.org.tw (H.-SW); 1030398@kmuh.org.tw (J.-HJ)

7 Graduate Institute of Medicine, College of Medicine, Kaohsiung Medical University, Kaohsiung City 807, Tajvan

8 Belgyógyászati ​​Osztály, Nefrológiai és Általános Orvostudományi Osztály, Kaohsiung Medical University Hospital, Kaohsiung Medical University, Kaohsiung City 807, Tajvan

9 Belgyógyászati ​​Tanszék, Orvostudományi Kar, Orvostudományi Főiskola, Kaohsiung Medical University, Kaohsiung City 807, Tajvan

10 Biostatisztikai és Bioinformatikai Osztály, Népegészségügyi Tudományok Intézete, Nemzeti Egészségügyi Kutatóintézetek, Miaoli 350, Tajvan

11 Environmental and Occupational Medicine és Graduate Institute of Clinical Medicine, Kaohsiung Medical University, Kaohsiung City 807, Tajvan

12 Department of Family Medicine, Kaohsiung Medical University Hospital, Kaohsiung Medical University, Kaohsiung City 807, Tajvan

13 Department of Public Health, College of Health Sciences, Kaohsiung Medical University, Kaohsiung City 807, Tajvan