A Cistanche Deserticola összes glikozidjának fitokémiai szűrése és ösztrogén aktivitása

Kapcsolatfelvétel: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

Absztrakt

Az évtizedek során folyamatos erőfeszítések történtek az emberi életminőség javítására. A posztmenopauzális szindróma komoly aggodalomra ad okot a nők egészsége szempontjából. A hormonterápia jelenleg ennek az állapotnak a kezelésének fő eszköze. Ez a terápia azonban ösztrogénnel való visszaéléshez vezethet, ami mellékhatásokhoz és mellékhatásokhoz vezethet. Ennek eredményeként a hormonterápia sikertelen volt a posztmenopauzális szindróma enyhítésében.Cistanche deserticolaa hagyományos kínai orvoslás klasszikus tonizáló gyógynövénye. Jelentős ösztrogén aktivitást mutat. Ennek a gyógynövénynek a fő hatóanyagai a glikozidok. Egy korábbi kísérletben három fontos tényezőt azonosítottak, amelyek hozzájárultak a teljes glikozidhozamhoz, az akteozidhozamhoz és az ösztrogén aktivitáshoz, nevezetesen az eluens koncentrációját, pH-ját és az eluens térfogatát. Ebben a kísérletben az optimális tisztítási folyamatot határozták meg egy központi kompozit tervezési-válasz felületi módszerrel, hogy glikozidokat nyerjenek ebből a gyógynövényből. Az eluens (etanol) 85%-os koncentrációja és 25 BV térfogata 11-es pH-nál optimálisnak bizonyult. Huszonegy aktív vegyületet azonosítottak nagy teljesítményű folyadékkromatográfiás/kvadrupólus repülési idő tömegspektrometriás vizsgálattal. Ez a tanulmány értékes betekintést nyújt a további mélyreható kutatásokhoz, amelyek az összes glikozid ösztrogén aktivitását értékelik.Cistanche deserticola.

Kulcsszavak: Központi kompozit tervezés; Cistanche deserticola összes glikozidja; LC/Q-TOF-MS; tisztítási technológia; méh növekedési teszt.

Bevezetés

Cistanche deserticolaegy ehető, klasszikus tonizáló gyógynövény. Shen Nong gyógynövény-klasszikusában említették először, és a legjobb osztályba sorolták. Ez egy meleg fűszernövény és édes. Számos gyógyászati ​​tulajdonsággal rendelkezik, például táplálja a májat és a vesét, erősíti az izmokat és a csontokat, javítja az immunrendszer szabályozását, valamint öregedés- és daganatellenes tevékenységet [1-4]. Ennek a gyógynövénynek a kivonataiból izoláltak és azonosítottak néhány természetes vegyületet, a főbbek a feniletanoid-glikozidok, lignanoidok, iridoidok, poliszacharidok és alkaloidok [5-8].

A gyógynövényekből nyert gyógyszerek különféle hatóanyagokat tartalmaznak, amelyek elsősorban terápiás hatásukért felelősek. A különböző növényi forrásokból nyert ugyanazon gyógyszer hatékonysága a benne lévő hatóanyagok típusának és mennyiségének különbségei miatt változhat. Ezért fontos a gyógynövényekből nyert gyógyszerekben jelen lévő összes hatóanyag azonosítása és mennyiségi meghatározása. Ugyanez vonatkozik a C. deserticolára is. A válaszfelület módszertana egy kísérleti módszer a különböző tényezők közötti kölcsönhatás egyidejű vizsgálatára [9-10]. Felhasználható fitogyógyszerek extrakciós paramétereinek optimalizálására és a hatóanyagok mennyiségi becslésére a gyógyszerekben. A központi kompozit tervezés (CCD) a válaszfelület módszertanában használható kísérleti tervek egyike. Az ortogonális és egységes kialakításokhoz képest a CCD nagyobb pontossággal és jobb kiszámíthatósággal rendelkezik [11].

A posztmenopauzális szindróma jelentősen csökkentheti a nők életminőségét. Általában az ösztrogént használják ennek az állapotnak a kezelésére. Az ösztrogén hosszú távú használata azonban visszaélésekhez vezethet, ami különféle mellékhatásokat és mellékhatásokat okozhat. Ezért a posztmenopauzális szindróma [12-13] kezelésére mindenképpen alternatív terápiát kell választani, lehetőleg ösztrogént tartalmazó gyógynövényből készült gyógyszert.

Egy előzetes kísérletben a C. deserticolából nyert különböző természetes vegyületek szerkezetét tömegspektrometriával (MS) azonosították [14]. Megerősítették, hogy a glikozidok a fő hatóanyagok, amelyek jelentős ösztrogén hatással rendelkeznek [14-15]. Ahhoz, hogy egy új gyógyszerben biztonságos és hatékony ösztrogén hatóanyagot fejlesszünk ki, a TGCD mélyreható vizsgálatára van szükség a tisztítás után. Ebben a tanulmányban először CCD-t alkalmaztak a C. deserticola (TGCD) összes glikozidjainak tisztításának optimalizálására. Ezt követően a méhnövekedési tesztet alkalmaztuk ugyanazon glikozid ösztrogén aktivitásának értékelésére. Nagy teljesítményű folyadékkromatográfiát/kvadrupólus repülési idő tömegspektrometriát (HPLC/Q-TOF-MS) alkalmaztunk a TGCD-vegyületek tisztítás utáni kvalitatív elemzésére. Ezt az eljárást arra használták, hogy explicit módon demonstrálják a különböző, ösztrogén hatású aktív vegyületek jelenlétét a TGCD-ben. Ez egyben megalapozhatja a klinikai alkalmazását az ösztrogént helyettesítő posztmenopauzális szindrómában.

Kísérleti eljárás

Hangszerek

Agilent 1290 HPLC rendszer (Agilent Technologies, Palo Alto, CA, USA), Agilent 6530 sorozatú négypólus repülési idő LC/MS (Q-TOF) rendszer (Agilent Technologies, Palo Alto, CA, USA) és Chemical HPLC{ {5}}A D munkaállomásokat kromatográfiás műszerként használták az adatfeldolgozáshoz. A teljes vizsgálat során Milli-Q ultratiszta vizet használtunk. AR1140 elektronikus analitikai mérleg (Ohaus International Ltd.); 680 mikrolemez-olvasó (Bio-Rad Corporation); és 64R nagy sebességű centrifugát (Beckman Coulter Allegra) használtunk a minták előkészítésére.

Gyógyszerek és vegyszerek

A C. deserticolát a gyógyszerpiacról vásárolták, és Prof. Zhang Delian (Harbini Kereskedelmi Egyetem, Kína) azonosította. A standard dietil-stilbesztrolt (99%-os tisztaságú, 60518-as tételszám) Dr. Ehrenstorfertől (Németország) vásároltuk. Az akteozidot (111530-200505) és az echinakozidot (111670-200503) a Pekingi Nemzeti Gyógyszerészeti és Biológiai Termékek Ellenőrzési Intézetétől szereztük be. Az egyes standardok tisztasága >98 százalék volt. Az acetonitrilt (ACN), a metanolt és a hangyasavat (MS minőségű) a Thermo Scientific Pierce-től (Rockford, IL, USA) vásároltuk. Az ultratiszta vizet a Hangzhou Wahaha Group Co., Ltd.-től (Hangzhou, Kína) szereztük be. Az összes kereskedelemben kapható reagens analitikai minőségű volt.

C. deserticola tisztítóoldat összglikozidjainak előállítása

75%-os etanolba való 12 órás merítés után a nyers C. deserticola port (100 g) 800 ml 75%-os (v/v) etanollal extraháltuk 80 fokon 150 percig visszafolyató hűtő alatt. Ezután kétszintes szűrőn átszűrjük, majd 800 ml 75%-os etanollal kétszer további 150 percig extraháljuk. Ezt követően a szűrleteket egyesítjük és vákuumban 45 °C-on bepároljuk. Az extraktumot az oldószer eltávolításával kapjuk. Az extraktumhoz bizonyos mennyiségű desztillált vizet adtunk, hogy 0,5 g/ml koncentrációt kapjunk, amelyet a tisztítási folyamat átvizsgálására használtunk.

Az AB{0}} makropórusos gyantával történő adszorpcióhoz a vizsgálati mintaoldat pH-ját 11-re állítottuk be. Először 2 BV desztillált vizet használtunk a szennyeződések kimosására. Ezután a 25 BV 85% etanol koncentrációjú eluenst eluáltuk és összegyűjtöttük. Végül az összegyűjtött tisztított eluenst összeöntöttük. Az extraktumhoz bizonyos mennyiségű desztillált vizet adtunk, hogy 1,5 g/ml koncentrációt kapjunk, amelyet intragasztrikus beadásra használunk. A pozitív kontrollhoz dietil-stilbesztrol-oldatot (20 ug/ml) készítettünk dietil-stilbesztrol-porral.

A tisztítási aránynak megfelelően ({{0}},6) a kivonat bizonyos mennyiségét (1 g C. deserticola-nak megfelelő) egy 10 ml-es mérőlombikba vittük át, 50%-os (v/v) metanolos oldatban ultrahangos fürdőben 5 percig feloldjuk, majd 10 ml-re hígítjuk. A gyógyászati ​​oldatot a felülúszó 0,45 μm-es szűrőmembránon történő szűrése után kaptuk. Az akteozidot és az echinakozidot (egyenként 1 mg) összekeverjük, és teljesen feloldjuk 10 ml 50%-os (v/v) metanolos oldatban. Végül a standard oldatot egy 0,45 μm-es Millipore szűrőn átszűrtük az elemzés előtt.

LC-MS körülmények

A kromatográfiás elválasztást HPLC rendszerben (Agilent 129{{10}}) végeztük, amely kvaterner oldószeradagoló rendszerrel, vákuumgáztalanítóval és fotodiódasoros detektorral volt felszerelve. Az MS/MS analízist egy műszeres Agilent-1290 HPLC/6530 Q-TOF-MS rendszerben végeztük, amely pozitív és negatív ion üzemmódban is elektropermet ionizációs forrással volt felszerelve. Az elválasztáshoz Waters Symmetry shield RP C18 oszlopot (4,6 × 250 mm, 5 μm) (Waters Corporation, Milford, MA, USA) használtunk. A mozgófázis 0,2%-os vizes hangyasavoldatot (V/V) (A) és ACN-t (B) tartalmazott, és 0,5 ml/perc áramlási sebességgel szivattyúzzuk. Mindegyik minta befecskendezett térfogata 10 μl volt. A gradienselúciós program a következő volt: 5-23 százalék B 0-35 percig, 23-25 ​​százalék B 35-65 percig és 25-5 százalék B 65-70 percig. Az oszlop hőmérsékletét 30 °C-on tartottuk. A kromatogramokat követtük és 330 nm-en rögzítettük. A porlasztógáz nyomását 30 Psi-re, a kapilláris feszültséget 3,5 kV-ra állítottuk be. A száraz gáz áramlási sebessége 8 l/perc volt 30 fokos hőmérsékleten. A köpenygáz hőmérsékletét 400 fokra állítottuk be 12 l/perc áramlási sebesség mellett. Az ütközési energiát 10–20 eV-ra állítottuk be az alacsony energiájú letapogatásoknál, és 30–50 eV-ra a nagyenergiájú szkenneléseknél. A tömegspektrumadatokat 50-1000 Da szkennelési tartományban rögzítettük pozitív és negatív ionos pásztázási módban. Ebben a vizsgálatban a TGCD és a standardok közötti gyors és hatékony összehasonlítást végeztünk ugyanazon LC-MS körülmények között.

Méh növekedési teszt

Ezt szigorúan az Országos Egészségügyi Intézetek Laboratóriumi Állatok gondozási és használati útmutatója ajánlásaival összhangban végezték. Minden kísérleti eljárást felülvizsgált és jóváhagyott a kínai Harbini Kereskedelmi Egyetem Állat-etikai Bizottsága.

12 ± 2 g súlyú, éretlen nőstény Kunming egereket (körülbelül 21 napos születéskor, elválasztva) a Changchun National Biological Industry Base Laboratory Animal Centertől (Changchun, Kína) vásároltunk. Az egereket szabályozott hőmérsékletű helyiségben (22 ± 2 °C) tartottuk, ad libitum táplálékkal és vízzel. Az állatkísérleteket öt nap akklimatizáció után kezdtük meg. Az egerek egy éjszakán át ad libitum vízzel koplaltak a tesztoldat gyomorba történő beadása előtt.

Az egereket véletlenszerűen 22 csoportra osztották, mindegyik csoportban 10 állattal. Naponta kétszer (reggel és este) adagoltak nekik azonos térfogatú kísérleti gyógyszereket négy napon keresztül az alábbiak szerint:

1. csoport: C. deserticola tisztítóoldat (20 ml/kg) intragasztrikus összglikozidjai (oldattérfogat/egér tömeg),

II. csoport: Intragasztrikus desztillált víz (negatív kontrollcsoport), és

III. csoport: Intragasztrikus dietil-stilbesztrol (20 ug/ml) (pozitív kontrollcsoport).

Az ötödik napon az összes egeret leöltük. A méheket azonnal eltávolítottuk, lemértük, és kiszámítottuk az uterus koefficienseket.

Statisztikai analízis

Kétirányú, páros mintás t-próbát alkalmaztunk a különböző paraméterek statisztikailag szignifikáns különbségeinek azonosítására a különböző kísérleti csoportokban. Az elemzést SPSS statisztikai szoftverrel (SPSS for Windows v21.0, SPSS Inc., USA) végeztük. A különbségeket statisztikailag szignifikánsnak tekintettük 95 százalékos megbízhatósági szinten (p <>

Eredmények és vita

Az akteozid és az összes glikozid hozamok linearitása és korrelációja

Az akteozidhozam lineáris regressziós egyenlete: y {0}}x – 14,75 (ahol x az akteozid koncentrációja, y pedig a megfelelő csúcsterület), r=1 korrelációs együtthatóval. a 0,12−{{10}},72 mg/ml koncentrációtartományban. Ez egy lineáris kalibrációs görbét jelez. A teljes glikozidhozam lineáris regressziós egyenlete y=26.074x plusz 0,0866 (ahol x az összes glikozid koncentrációja, y pedig a megfelelő csúcsterület), r { korrelációs együtthatóval {12}},9982 a 0,013-0,065 mg/ml koncentrációtartományban. Ez egy lineáris kalibrációs görbét is jelzett.

Módszertani vizsgálat

A módszertani vizsgálat során a minták pontosságát, reprodukálhatóságát, stabilitását és visszanyerését vizsgáltam. A precíziós kísérletben az akteozid és az összes glikozid relatív szórása (RSD) 1,43 százalék, illetve 0.05 százalék volt. A reprodukálhatósági kísérletben az akteozid és az összes glikozid RSD értéke 0,10 százalék, illetve 1,44 százalék volt. A 24 órás stabilitási kísérletben az akteozid és az összes glikozid RSD értéke 0,14%, illetve 0,90% volt. A visszanyerési kísérletben az akteozid visszanyerése 100,50 százalék volt 2,08 százalékos RSD mellett, míg az összes glikozid visszanyerése 99,12 százalék volt 1,65 százalékos RSD mellett. Az összes RSD érték 3 százalék alatt volt. Ezek az eredmények jó pontosságot és reprodukálhatóságot mutattak. Ezenkívül a minta 24 órán át stabil volt. A gyógyulás eredménye is a megengedett tartományon belül van (95-105 százalék). Ezért ez a módszer használható az akteozid és az összes glikozid hozam meghatározására tisztítás után.

A TGCD egytényezős vizsgálata

A TGCD makropórusos gyantával történő tisztítását számos tényező befolyásolhatja, mint például a gyanta típusa, a statikus adszorpciós tényezők (adszorpciós idő, szivárgási koncentráció és a mintaoldat pH-ja), valamint az elúciós körülmények (áramlási sebesség, térfogat és koncentráció). A TGCD adszorpciós kapacitását, deszorpciós és elúciós sebességét indexként használva a kísérleti körülményeket egyfaktoros kísérletek eredményei alapján határoztuk meg. AB-8 típusú makropórusos adszorpciós gyanta felhasználásával a következő optimális körülményeket határoztuk meg: 0,5 mg/mL mintaoldat, pH 10, statikus adszorpciós idő 8 óra, 2 BV desztillált víz a szennyeződések mosására, 20 BV 80% etanol eluensként és 0,5 BV/perc áramlási sebesség. A konkrét eredményeket az 1–7. ábrák mutatják.

CCD a TGCD tisztítási technológia optimalizálásához

Az egytényezős vizsgálat eredményei alapján három, a tisztítási módszert jelentősen befolyásoló tényezőt választottam ki indexként, nevezetesen a mintaoldat pH-ját (x1), az eluens koncentrációját (x2) és az eluens térfogatát (x3). A CCD elve szerint minden tényezőnek öt szintje van. Ezen különböző tényezők maximális és minimális szintjeit az előzetes kísérlet eredményei alapján határoztuk meg. A faktorszinteket az 1. táblázat, a kísérleti eredményeket pedig a 2. táblázat tartalmazza.

A teljes glikozid- és akteozidhozamot meghatároztuk a TGCD tisztítási módszerének optimalizálása érdekében. Először is, az összes glikozid- és akteozidhozamot a kívánatosság (d) numerikus kritériumaira állítottuk be {{0}}-1 között. Ezután kiszámítottuk az általános kívánatosságot (OD) [OD=(d1, d2, d3,....,dn)1/n, ahol n az indexszám]. SPSS21.{{10}} szoftvert és tervező-szakértői szoftvert használtak független változók és OD többszörös lineáris regressziójához és binomiális illesztéséhez, p < 0.05="" értékkel="" vették="" figyelembe="" az="" egyenlet="" statisztikailag="" szignifikáns="" standardja.="" a="" nagyobb="" r-értékű="" (többszörös="" korrelációs="" együttható)="" egyenletet="" választottuk="" a="" legjobban="" illeszkedő="" modellnek.="" a="" többváltozós="" lineáris="" egyenlet="" y="–" 1.02="" –="" 0.131x1="" plusz="" 0.034x2="" plusz="" 0,012x3="" (r="" {{="" 25}}.55,="" p="0.004)." a="" binomiális="" egyenlet:="" y="–" 21,92173="" –="" 0,74079x1="" plusz="" 0,62914x2="" plusz="" 0,041161x3="" plusz="" 0,014972x1x2="" plusz="" 2,06050*10-4x1x3="" plusz="" 9}4="" ×="" 2x5,9}="" 9,2="" ×="" 1="" ×="" 5,5}="" 9,2="" ×="" 1="" ×="" 5,5.="" {56}}.78730="" ×="" 10-3x22="" -="" 2.89446="" ×="" 10-3x32="" (r="0.91," p="0.012)." a="" fenti="" egyenletekből="" látható,="" hogy="" a="" többváltozós="" lineáris="" regressziós="" egyenlet="" korrelációs="" együtthatója="" alacsonyabb.="" a="" független="" és="" a="" függő="" változók="" közötti="" korreláció="" nagyon="" alacsony,="" és="" a="" lineáris="" modellben="" történő="" alkalmazását="" kedvezőtlennek="">

A binomiális egyenlet korrelációs együtthatója azonban magas volt, és ez jó illeszkedést eredményezett. Ezért a binomiális modellt választottuk. A felszíni ábra és a kontúrtérkép átfogó elemzése alapján, kombinálva a kísérleti adatokkal (OD érték közel {{0}},6), megkaptuk a tisztítási módszer optimális tartományát. A 8. ábrán látható, hogy a maximális OD érték akkor keletkezett, amikor a mintaoldat (A) pH-ja 9-10, az eluens koncentrációja (B) pedig 79-85 százalék között volt. . A 9. ábra azt mutatja, hogy a maximális OD értéket akkor kaptuk, ha az (A) mintaoldat pH-értéke 9-10, az eluens térfogata (C) pedig 20-25 BV között volt. A 10. ábra azt mutatja, hogy a maximális OD értéket akkor kaptuk, ha az eluens koncentrációja (B) 80-85% tartományban volt, és az eluens térfogata (C) 20-25 BV tartományban volt. Ezen adatok átfogó elemzése alapján a mintaoldat pH-értékét, az eluens koncentrációját és az eluens térfogatát 9-10, 80-85 százalék és 20-25 BV közötti tartományban határozták meg. A változó derivált eredmények többváltozós binomiális egyenlete és az optimális séma alapján a legjobb TGCD tisztítási módszer 85 százalékos eluens (etanol) koncentráció és 25 BV térfogat 11 pH mellett. A megfelelő OD érték 0,8332 volt. és a teljes glikozidhozam 73,0339 százalék volt. A 8-10 ábrákból származó vizuális benyomás azt mutatja, hogy a legjobb módszer az, amelyben a két tényező közötti kölcsönhatásokat vették figyelembe, bár a képletből levezetett legjobb módszer azt ismeri fel, amelyben a három tényező közötti kölcsönhatások szerepelnek. A két eredmény különbözött, és az optimális tisztítási módszert 85 százalékos eluens (etanol) koncentrációval és 25 BV térfogattal 11-es pH-nál tartottuk.

A méh növekedésének mérése

Az egyes csoportok méhkoefficiense a 3. táblázatban látható. A negatív kontrollcsoporthoz képest a többi csoport eredményei szignifikánsan eltérőek voltak. Azt találták, hogy a 20 különböző tisztítási módszerrel kapott TGCD mindegyike ösztrogén hatást fejtett ki.

Megerősítő kísérlet

A CCD és az uterus növekedési teszt átfogó eredményei azt mutatták, hogy az optimális tisztítási módszernek a 85 százalékos eluens (etanol) koncentrációt és 25 BV térfogatot 11 pH-n tartották.

validálási eljárás során az összes glikozid átlagos kitermelése 70,9150 százalék volt. Az előrejelzett és a tényleges értékek átlagos eltérése 2,1180 százalék volt. Ezért feltételezhető, hogy ennek a modellnek a kiszámíthatósága és kísérleti hitelessége jó.

A TGCD azonosítása tisztítás után

A retenciós idő és az MS adatok alapján 21 természetes összetevőt feltételeztek, köztük kampneozid 1, 2'-acetil-lakteozid, cisztanozid A, cisztanozid B, sziringalid A 3'- - L-ramnopiranozid, tubulozid A, tubulozid B, szalidrozid, cisztanozid G, tenipozid sav, koffeoil-lakteozid, 8-epilogánsav, echinakozid, cisztanozid F, cisztantubulozid B1, izoakteozid, akteozid, cisz-akteozid, kankanozid E, ozmantusid B és cisztanozid C. Az MS és a retenciós idő, MS/ Az MS információkat, a képletet és a feltételezett vegyületeket a 4. táblázat tartalmazza.

A Q-TOF-MS különösen alkalmas gyógyszerek és élelmiszerek komplex molekuláris komponenseinek szerkezeti azonosítására, mivel pontos molekulatömeggel és a fragmensionok szerkezeti jellemzőivel lehetséges elemi összetételeket biztosít. A szisztematikus szerkezeti jellemzés elkészítéséhez Q-TOF-MS, MS adatokat, adatbáziskeresést és publikált referencia irodalmat is felhasználtunk az azonosításhoz. Az egyes célkomponensek molekulaképletét a kiindulási ionból vezették le, és az ismert vegyületekkel párosították. Ez a képlet tovább meghatározható a rokon fragmensionokból. Például az 5. csúcs egy túlnyomórészt deprotonált iont mutatott m/z 654-nél (C30H38O16), ami megegyezett a kampneozid 1 elemi összetételével. A koffeoil vesztesége egy fragmensionból képződik 493 m/z-nél, és Az rha rész egy fragmensionból képződik, m/z 347.

Következtetés

Az LC-Q-TOF-MS technológiát használva egy egyszerű és robusztus kvalitatív elemzési módszert fejlesztettek ki a TGCD-hez, és teljes mértékben validálták. A TGCD-ből származó természetes vegyületek szűrésére és azonosítására vonatkozó validációs adatok kielégítőek voltak. A TGCD-ből származó huszonegy bioaktív vegyületet a következőképpen feltételezték: szalidrozid, cisztanozid G, genipozidsav, koffeoil-lakteozid, kampneozid 1, 8-epilogánsav, 2'-acetil-lakteozid, cisztanozid A, cisztanozid B, sziringalid{{9′ }}L-ramnopiranozid, echinakozid, cisztanozid F, cisztantubulozid B1, izoakteozid, akteozid, tubulozid A, cisz-akteozid, kankanosid E, ozmantusid B, cisztanozid C és tubulozid B. Ezeknek a vegyületeknek a szerkezeti jellemzése kísérleti alapot nyújthat minőségellenőrzésük és további klinikai alkalmazásuk ösztrogén aktivitásuk miatt. Ez újszerű és továbbfejlesztett terápiás lehetőséget kínálhat a posztmenopauzális szindróma kezelésére, elkerülve ezzel az ösztrogénterápia mellékhatásait és mellékhatásait.

Rövidítések

TGCDCistanche deserticolaösszes glikozid LC/Q-TOF-MS folyadékkromatográfia/kvadrupólus repülési idő tömegspektrometria

RSM válaszfelület módszertana

CCD központi kompozit kialakítás

MS tömegspektrometria HPLC/Q-TOF-MS nagy teljesítményű folyadékkromatográfia/ kvadrupól repülési idő tömegspektrometria

ACN acetonitril

BV ágytérfogat

OD általános kívánatosság

LC-MS folyadékkromatográfia-tömegspektrometria

Q-TOF-MS kvadrupólus repülési idő tömegspektrometria

TCM hagyományos kínai orvoslás

RSD relatív szórás

Köszönetnyilvánítás

Ezt a projektet a Kínai Nemzeti Természettudományi Alapítvány (81073015. sz.), a Heilongjiang tartomány Természettudományi Alapítványa (ZD2017014), a Heilongjiang tartományi Főiskola Fiatal innovatív tehetségképzési terve (UNPYSCT- 2017209) támogatta. A szerzők kijelentik, hogy nem áll fenn összeférhetetlenség a jelen dolgozat kiadásával kapcsolatban.

Összeférhetetlenség

A szerzők nem állítanak összeférhetetlenséget.

Hivatkozások

[1] Nan ZD, Zeng KW, Shi SP, Zhao MB, Jiang Y., Tu PF, Fenylethanoid glikozidok gyulladásgátló hatással a Tarim-sivatagban tenyésztett Cistanche deserticola szárából, Fitoterapia, 2013, 89, {{4} }.

[2] Guo Y., Cao L., Zhao Q., Zhang L., Chen J., Liu B., Zhao B., Preliminary characterizations, the antioxidant and hepatoprotective activity of polysaccharide from Cistanche deserticola, International Journal of Biological Macromolecules , 2016, 293, 678-685.

[3] Nan ZD, Zhao MB, Zeng KW, Tian SH, Wang WN, Jiang Y., Tu PF, gyulladásgátló iridoidok a Tarim-sivatagban tenyésztett Cistanche deserticola szárából, Chinese Journal of Natural Medicines, 2016, 14, 61-65.

[4] Peng F., Chen J., Wang X., Xu C., Liu T., Xu R., Changes in Levels of Phenylethanoid Glycosids, Antioxidant Activity, and Other Quality Features in Cistanche deserticola Slices by Steam Processing, Chemical és Pharmaceutical Bulletin (Tokió), 2016, 64, 1024-1030.

[5] Wang T., Zhang X., Xie W., Cistanche deserticola YC Ma, "Desert Ginseng": áttekintés, The American Journal of Chinese Medicine, 2012, 40, 1123-1141.

[6] Song Y., Song Q., Li J., Zhang N., Zhao Y., Liu X., Jiang Y., Tu P., Egy integrált stratégia a kamilla mennyiségi megkülönböztetéséreCistanche deserticolaés C. tubulosa, nagy teljesítményű folyadékkromatográfiás-hibrid hármas kvadrupól lineáris ioncsapda tömegspektrometriával, Journal of Chromatography A, 2016, 1429, 238-247.

[7] Li Y., Peng Y., Wang M., Zhou G., Zhang Y., Li X., Gyors szűrés és a metabolitok közötti különbségek azonosításaCistanche deserticolaés C. tubulosa vízkivonat patkányokban UPLC-Q-TOF-MS kombinált mintázatfelismerő analízissel, Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 2016, 131, 364-372.

[8] Li WL, Sun XM, Song H., Ding JX, Bai J., Chen Q., HPLC/Q-TOF-MS-Based Identification of Absorbed Constituents and their Metabolites in Patkány szérum és vizelet a Cistanche orális beadása után deserticola kivonat, Journal of Food Science, 2015, 80, H2079-2087.

[9] Almasi A., Dargahi A., Mohamadi M., Biglari H., Amirian F., Raei M., Removal of Penicillin G by the Combination of sonolysis and Photocatalytic (sono-photocatalytic) process from aqueous solution: process optimization RSM (Response Surface Methodology) segítségével, Electron Physician, 2016, 8,

[10] 2878-2887. Hou W., Zhang W., Chen G., Luo Y., Extraction Conditions for Maximal Phenolic, Flavonoid and Antioxidant Activity from Melaleuca bact data Leaves Using the Response Surface Methodology, PloS One, 2016, 11,

[11] e0162139. Pooralhossini J., Ghaedi M., Zanjanchi MA, Asfaram A., Az ultrahanggal segített extrakció választása spektrofotometriával párosítva a galluszsav gyors meghatározásához vízmintákban: Központi kompozit tervezés a folyamatváltozók optimalizálásához, Ultrasonics Sonochemistry, 2017, 34 , 692- 699.

[12] Han L., Boakye-Yiadom M., Liu E., Zhang Y., Li W., Song X., Fu F., Gao X., Fenylethanoid glikozidok szerkezeti jellemzése és azonosítása fromCistanches deserticola YC MaUHPLC/ESI-QTOF-MS/MS, Phytochemical Analysis, 2012, 23, 668-676.

[13] Lu D., Zhang J., Yang Z., Liu H., Li S., Wu B., Ma Z., Cistanches Herba kvantitatív elemzése nagy teljesítményű folyadékkromatográfiával, diódasoros detektálással és nagy felbontású tömegspektrometria kemometriai módszerekkel kombinálva. Journal of Separation Science, 2013, 36, 1945-1952.

[14] Li WL, Chen Q., Yang B., Gao S., Zhang JJ, A fitoösztrogén hatásos kivonatok és a dózisok szűréseCistanche deserticola, Kínai gyógynövények, 2013, 5, 292-296.

[15] Li YP, Huang FR, Dong J., Xiao C., Xian RY, Ma ZG, Zhao J., Rapid Identification of Cistanche via Fluorescence Spectrum Imaging Technology Combined with Principal Components Analysis and Fisher Distinction, Guang Pu Xue Yu Guang Pu Fen Xi, 2015, 35, 689-694.