A Cistanche-ból származó poliszacharidok jelentősen késleltethetik a tüdőműködés öregedését

Kapcsolatfelvétel: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

Sun Yun Wang Dejun Liu Xiaomei Shi Le Zhang Hongquan

(Orvostudományi Intézet, Yangzhou Egyetem, Yangzhou 225001)

Öregedésegy olyan folyamat, amelyben a test szövetei és szervei életük során funkcionális és morfológiai degeneráción, sőt öregedésen mennek keresztül. A tüdő közvetlenül kapcsolódik a külső környezethez, és átveszi a vérkeringést az egész testből. A leginkább érzékeny a környezet és a szervezet különböző káros tényezőire. Ez az egyik legkorábbi szerv a szervezetben, ahol az öregedés megtörténik. A szabad gyökök szerepét az öregedési folyamatban számos tudós kutatása igazolta. Ez a kísérlet ózont használ a megfigyelésre alkalmas kísérleti öregedési modell létrehozásáraa Cistanche-ból származó poliszacharidok hatása az öregedő egerek tüdejének hipoxia toleranciájára, antioxidáns funkciójára és ultrastruktúrájára. Befolyás. Ez várhatóan megalapozza a kutatástCistanche poliszacharidjaia tüdő degeneratív elváltozásainak késleltetésében és az időskori légzőrendszer egészségügyi ellátásában.

A tanulmány célja a tüdőszöveti sejtek ultrastruktúrájának degeneratív változásainak megfigyelése kísérleti idősödő egerekben és aCistanche poliszacharidjaiRajta. Ózon (Ozone, Ob) folyamatos inhaláció 4 hétig a tüdő öregedésének indukálására, modellmódszer, a Cistanche 50 és 100 grammos poliszacharidja modell egerek beadására 6 hétig a hipoxia tolerancia, a tüdő és a szérum szuperoxid kimutatására öregedő egerekben. Dismutase (SOD) ) aktivitása és malondialdehid (MDA) tartalma. A tüdőszövet organellumainak és ultrastruktúrájának változásait elektronmikroszkóp alatt figyeltük meg. Eredmények Az ózon által okozott kísérleti öregedő egerek jelentősen csökkentették a hipoxia toleranciát; a tüdő és a szérum SOD csökkent, az MDA pedig nőtt. A modellcsoporttal összehasonlítva a Cistanche-ból származó poliszacharid jelentősen meghosszabbíthatja az öregedő egerek hipoxia-tűrési idejét (P<0.01), improve="" the="" activity="" of="" sod="" in="" the="" serum,="" reduce="" the="" content="" of="" mda=""><0.01), and="" delay="" the="" degeneration="" of="" mitochondria="" and="" lamellar="" bodies="" in="" the="" lung="" cells="" of="" aging="" mice=""><0.01). conclusion="">A Cistanche-ból származó poliszacharidok jelentősenkésleltesse a kísérletet A tüdő fiziológiai degenerációja és sejtmorfológiájaszexuálisan öregedő egerek esetében.

1 anyag

1.1 Állatok

3 hónapos tiszta egér ICR törzsből, 18-22 g, fele ¥^, a Yangzhou Egyetem Kísérleti Állatközpontja biztosította, bizonyítvány száma: Su Dongzhi 98002^

1.2 Gyógyszerek és reagensek

Cisztanchából származó poliszacharidok: a Nanjing Wild Plant Research Institute által biztosított, desztillált vízzel 2,5 g·LT, 5.0 gL-1-ig elkészítve; A SOD, MDA tesztkészleteket a Nanjing Juli Biomedical Engineering Research Institute biztosítja.

1.3 Eszköz

UV755B ultraibolya spektrofotométer, a Shanghai Analytical Instrument Factory terméke; ózongenerátor, a Wuxi Medical Instrument Factory terméke; H-300 transzmissziós elektronmikroszkóp, a Hitachi, Japán terméke.

2 Módszer

2 1 Kísérleti tüdőöregedési modell készítése szagfordulatsérüléssel Az ICR egereket a napi és a kísérleti tervből vettük, és a modell- és a kezelt csoport egereit véletlenszerűen csoportosították.

A kísérleti öregedési modell 4 hétig folyamatosan készült. Ezzel egyidejűleg a kontrollcsoport (az azonos tételben vásárolt normál egereket) és a modellcsoport 20 ml-kg ^d'1-et kapott normál sóoldattal, poliszacharidot a Cistanche kezelési csoportból I. és II. poliszacharidot a Cistanche 50-től, 100 mg-kg -1-d-' intragasztrikus beadással, a beadási időszak 6 hét volt. Az utolsó beadás után különféle indexvizsgálatokat végeztek.

2.2 Hipoxia tolerancia vizsgálati módszere (2)

Az egerek mindegyik csoportját egy 250 ml-es őrlőpalackba helyeztük, amely 20 g nátrium-meszet tartalmazott. A vazelint lezártuk, és az egerek palackba helyezésétől a fulladásig és elpusztulásig eltelt időt normál hőmérsékleten és nyomáson rögzítettük.

2.3 Tüdő és vér

Minden egércsoport SOD^MDA-tartalmának meghatározása az utolsó adagolás után 1 órával, távolítsa el a szemgolyókat és gyűjtsön vért a szérum elválasztásához; majd az egereket leöltük, a tüdőszöveteket kiszedtük, és sóoldatot adtunk az üveghomogenizátorba, hogy 100 g -f1 tüdőszövet homogenizátumot készítsünk, a tüdő és a szérum SOD aktivitását Huangsuyin oxidáz módszerrel, valamint az MDA-tartalmat meghatározzuk. tiobarbitursav kondenzációs módszerrel.

2.4. Elektronmikroszkópos minta-előkészítési módszer (3)

A kísérlet kontrollcsoportra, modellcsoportra és nagy dózisú csoportra oszlik. A modellezési és adminisztrációs módszerek megegyeznek a fentiekkel. Az utolsó adagolást követően minden csoportból véletlenszerűen kiválasztunk 3 egeret, és nyakba vágással elpusztítjuk, majd a jobb oldalukat levesszük. Tüdőcsúcs szövet, 0,4 mmol, L-1 glutáraldehid és 0,04 mmol, kettős rögzítés L'1 OfeO4-gyel, acetonos gradiens dehidratáció, Epon 812 beágyazás, ólom-urán elektronfestés, Hitachi H-300 transzmissziós elektronmikroszkóp 10,000 - 20,000 nagyítással Figyelje meg a fő organellumok változásait, szerkezeti változásait többszörösen.

2.5 A statisztikai feldolgozás eredményeit a talaj s tízesével fejezzük ki, és a két mintaátlag összehasonlítása a t-próbát használja.

3 Eredmények

3.1 A Cistanche-ból származó poliszacharid hatása az idősödő egerek hipoxia toleranciájára

Egy órával az egerek utolsó beadása után minden csoportban teszteltük a hipoxia tolerancia idejét. Az eredmények azt mutatták, hogy az idő, amíg az öregedő egerek elviselték a hipoxiát, lényegesen rövidebb volt, mint a normál egereknél. Az idő szignifikánsan hosszabb a modellcsoporthoz képest, de nincs szignifikáns különbség a kontrollcsoporthoz képest, ami azt jelzi, hogy a Cistanche-ból származó poliszacharid jelentősen javíthatja az idősödő egerek hipoxia toleranciáját, lásd 1.

3.2 A Cistanche poliszacharid hatása az öregedő egerek antioxidáns funkciójára

Minden csoportban az egerek vérét (szérumát) és tüdőszövetét (tüdőhomogenizátum) az utolsó adagolás után összegyűjtöttük, és meghatároztuk az SOD-t és az MDA-t. Eredmények Az idősödő egerek szérum és tüdő SOD aktivitása csökkent, az MDA tartalom pedig nőtt. A kontroll csoporthoz képest a különbség szignifikáns volt. A Cistanche-ból származó poliszacharidok növelhetik a szérum és a tüdő SOD aktivitását öregedő egerekben, és csökkenthetik az MDA-tartalmat. A kontrollcsoporthoz képest nincs szignifikáns különbség, az öregedési modellcsoporthoz képest szignifikáns a különbség, lásd a 2. és 3. táblázatot.

3.3 A Cistanche-ból származó poliszacharid hatása az alveoláris hámsejtek intracelluláris sötétségére⑷

Az elektronmikroszkóp gyártási módja megegyezik az előzővel. Morfometrikus analízis: Elektronmikroszkóp alatt minden mintát 10 látómezőben figyeltek meg az organellumok mérésére. Az eredmények azt mutatták, hogy a modellcsoport mitokondriumai és lamelláris testei csökkentek, az alapmembrán megvastagodott, a poliszómák pedig megnövekedtek. A kontroll csoporthoz képest szignifikáns különbségek voltak. A Cistanche nagy dózisú csoportból származó poliszacharidok javították. A modellcsoporthoz képest a különbség szignifikáns volt, és alapvetően közel volt a kontrollcsoporthoz. Lásd a 4. lapot.

3.4 Változások a tüdő hámsejtek ultrastruktúrájában kísérletileg öregedő egerekben és a Cistanche poliszacharidok hatása

Az öregedő modellegerek elektronmikroszkóp alatt láthatók: az I. típusú alveoláris hámsejtek egyrétegű, lapított típusúak, vastagságuk körülbelül {{0}},2 pm. A mag kicsi és sűrű. A perinukleáris citoplazmában néhány mitokondrium, Golgi-komplex és szétszórt endoplazmatikus retikulum található. Viszonylag ritka, kevesebb mikrofilamentummal és mikrotubulussal. Az öregedő egerek tüdejének szövettani elváltozásait elektronmikroszkóp alatt figyeltük meg. A fő változások a II típusú alveoláris hámsejtek voltak. A sejtek szabad felületén a mikrobolyhok csökkentek vagy eltűntek, a lamelláris testek meggyengültek, a lamelláris szerkezet elmosódott, néhány sejt kisméretű lamellás sejtekkel rendelkezik. A test eltűnik, és egy üreges vagy homogén amorf szalagszerű anyag, alacsony elektronsűrűséggel. A sejttestben a mitokondriumok és a durva endoplazmatikus retikulum csökken. Az alveoláris hámsejtek alapmembránja nyilvánvalóan megvastagodott, az alveoláris interstitiumban a rekeszizomsejtek és a fibroblasztok proliferációja látható (1,2. ábra). Bár a belső magmembrán és a mitokondriális duzzanat látható volt a Cistanche poliszacharid csoportban, a mértéke szignifikánsan csökkent a modellcsoporthoz képest (3.4. ábra). A gyógyszeres csoport elektronmikroszkópos megfigyelése azt mutatta, hogy a típusú hámsejtek laposak, sima felületűek, sejtmag nélkül, és néhányuk körülbelül 0,1 vastag volt. A perinukleuszban néhány organellum volt, és rádiumrészecskék voltak láthatók. A II-es típusú sejtek felületén rövid bolyhok, nagyszámú mitokondrium, durva endoplazmatikus retikulum és Golgi-komplex található a citoplazmában (5,6. ábra)

Az ózonkárosító öregedési modell az öregedés szabad gyökök elméletén alapul. Az oxigénmentes gyökök károsítása fontos szerepet játszik a tüdő öregedésének folyamatában. A tüdő az egyetlen szerv, amely kommunikál a külső környezettel. Egy bizonyos ideig az állatokat folyamatosan ózonnal szívják be. A tüdő az első, amely az ózon hatásának van kitéve, és a leginkább sebezhető a károsodásokkal szemben. Miután az ózon bejut a szervezetbe, gyorsan rendkívül aktív szuperoxid anion szabad gyököket termel. A felesleges szabad gyökök meghaladják a szervezet megkötő képességét, elpusztítják és felemésztik a szervezetben lévő szabad gyökfogó enzimeket (például SOD), majd a szervek, sőt a szervezet öregedését is okozzák. Ebben a kísérletben az öregedő egerek ózon okozta hipoxia elleni képessége jelentősen csökkent, az antioxidáns SOD anyag aktivitása a szérumban és a tüdőszövetben, valamint a lipid-peroxidációs metabolit MDA szignifikánsan nőtt. A Rongrong Duojing 50 100 mg-kg1 kísérleti idősödő egerek folyamatos infúziójával az idősödő egerek nyilvánvaló hipoxia toleranciája megnövekedett, a szuperoxid-diszmutáz szabadgyök-megkötő aktivitása fokozódik. A lipid-peroxidációs metabolitok tartalma csökken, ami azt jelzi, hogy a Cistanche-ból származó poliszacharidok fokozhatják az öregedő egerek antioxidáns funkcióját.

Az alveoláris n-típusú hámsejtek citoplazmájában lévő lamelláris testeket gyakran használják a hámsejtek működésének mérésére. Az éhezés lamellás testeinek váladékát alveoláris felületaktív anyagoknak nevezzük, amelyek az alveolusok levegő-folyadék határfelületén találhatók, és csökkenthetik az alveolusok felületi feszültségét. A lamelláris testek öregedési változásai az alveoláris felületaktív anyagok csökkenéséhez vezethetnek. Az alveolusok felületi feszültsége viszonylag nagy, és az alveolusok visszahúzó ereje megnő, ami az alveolusok zsugorodását eredményezi. Az elektronmikroszkópos megfigyelések kimutatták, hogy az öregedő egerek n-típusú alveoláris hámsejtjei jelentősen megváltoztak. Látható, hogy a lamelláris sejttestek legyengülnek, a szerkezet elmosódott, a mitokondriumok megduzzadtak és csökkentek, a durva endoplazmatikus retikulum is csökken, az alaphártya jelentősen megvastagszik. Bár hasonló szerkezeti változások láthatók a Cistanche-ból származó poliszacharid alkalmazása után, a mértéke jelentősen csökken, ami azt jelzi, hogy a Cistanche-ból származó poliszacharid jelentősen javíthatja vagy késleltetheti a tüdő epiteliális sejtrétegeinek morfológiai degeneratív változásait és a mitokondriális degenerációt öregedő egerekben. A sejtszerkezet nagy része alapvetően ép, késlelteti a tüdő ultrastruktúrájának változásait. A tanulmány eredményei arra utalnak, hogy a Cistanche-ból származó poliszacharidok csökkenthetik az ózon által kiváltott tüdő oxidatív károsodása által okozott szerkezeti és funkcionális változásokat, késleltetik a tüdő öregedését, és kísérleti bizonyítékot szolgáltathatnak az alkalmazott kutatásokhoz.