A Cistanche Salsa fenil-etanol-glikozidok megelőző hatása nagy magasságban agyödémában szenvedő patkányokon

Kapcsolatfelvétel: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

Absztrakt

Cél A Cistamnche Salsa-ból származó fenil-etanol-glikozidok hatásának és mechanizmusának megfigyelése nagy magasságban agyödémában szenvedő patkányokon. Módszerek Fenil-etanoid glikozidokat adtunk profilaktikusan a nagy magasságban kialakuló agyödéma patkánymodelljének megállapítására, hipobarikus kamrával 5000 m magasságban szimulált környezetben. Mértük a patkány tüdőszövetének kóros elváltozásait, a tüdőhomogenizátum víz-, IL-6-, TNF-a-, MDA-tartalmát, valamint SOD és GSH-Px enzimatikus aktivitását. Eredmények A nagy magasságú agyödémás patkányok a kontrollcsoporttal összehasonlítva az agyödéma figyelemre méltó jellegét és a tüdő magas víztartalmát mutatták. A tüdő homogenizátum IL-6, TNF-a és MDA tartalma nőtt, míg a SOD és GSH-Px enzimaktivitása szignifikánsan csökkent. A fenil-etanol-glikozidok javíthatják a tüdőszövet kóros elváltozásait, csökkenthetik a víz-, IL-6-, TNF-a- és MDA-tartalmat, miközben növelhetik a SOD és GSH-Px enzimaktivitását a tüdőhomogenizátumban. A fenil-etanoid-glikozidok megakadályozhatják a nagy magasságban kialakuló agyödémát. melynek mechanizmusa összefüggésbe hozható a tüdőszövet gyulladásgátló és antioxidációs stresszével.

Kulcsszavak: Cistanche Salsa; fenil-etanol-glikozid; magaslati agyödéma

Cistanche feniletanoid glikozidok

A nagy magasságú agyi ödéma (HACE) általában akkor fordul elő, ha a tengerszint feletti magasság első alkalommal haladja meg a 3000 métert. Súlyos életveszélyes betegség, amelyet a szervezetnek a magassági alacsony nyomású és oxigénszegény környezethez való alkalmatlansága okoz. Összefügg a magassági betegséggel. , A magaslati tüdőödéma az akut magassági betegség három megnyilvánulása. Bár a HACE-ról kevesebb tanulmány készült, mint a nagy magasságú tüdőödémával, a kapcsolódó vizsgálatok kimutatták, hogy az oxidatív stressz és a gyulladás fontos szerepet játszik a HACE patogenezisében (P-3).

Cistanche feniletanoid glikozidok(fenil-etanol-glikozidokat a Cistanche Salsa-ból, PhGC-k) a Xinjiang Cistanche cistanche-ból vonják ki, és a kapcsolódó tanulmányok sikeresen izoláltak számos fenil-etanol-glikozidot, köztük elsősorban az echinakozidot és a verbakozidot 1. A PhGC-k farmakológiai hatásaival kapcsolatos évek során végzett kutatások azt mutatták, hogy hasonló farmakológiai hatásai a salidrozidnak, a magaslati betegség hatóanyagának. Antihipoxia, sugárzásgátló, szabad gyökök megkötője stb. P-7]. Ebben a kísérletben egy patkány HACE modellhálózatot 91 hoztunk létre egy speciális környezetben, az északnyugati régióban található mesterséges kísérleti kamrában, és PhGC-ket adtunk preventív módon, hogy megfigyeljük annak HACE-ra gyakorolt ​​megelőző hatását és lehetséges hatásmechanizmusát.

Cistanche gyógynövény:Cistanche feniletanoid glikozidok

1 anyag

1.1 Állatok

Kísérleti állat Wistar patkány, SPF fokozat, félig hím és félig hím, súlya 180-220g [Hszincsiangi Orvostudományi Egyetem Kísérleti Állatközpontja, állattenyésztési engedély száma SCXK (új) 2011-0004, állathasználati engedély száma SYXK ( új) 2011- 0004].

1.2 Berendezés

Északnyugati speciális környezet mesterséges kísérleti kabin (Guizhou Fenglei Aviation Ordnance Co., Ltd., DY{{0}}); optikai mikroszkóp (Japán Nikon cég, E 200); szövetszeletelő (német Mecang cég, HM340E); elektronikus mérleg (Mettler-Toledo Instrument Co., Ltd., AL204, pontosság; 0,1 mg); mikrolemez-olvasó (Bio-RAD, XMark 7M, USA): UV spektrofotométer (Shanghai Lens Optical Technology Co., Ltd., SpectrumLab 22); elektromos fűtésű állandó hőmérsékletű szárítókemence (Huangshi, Hubei) City Medical Equipment Co., Ltd., SKHG-01).

1.3 Teszt gyógyszer

PhGC-k (Tu Pengfei professzor a Pekingi Egyetemről, tartalom: 90,70%, desztillált vízzel készítve megfelelő koncentrációjú oldatot); Rhodiola Rosea Oral Liquid (Tibet Tibetan Medicine Group Co., Ltd., tételszám: 120503, specifikáció: 10 ml); tumor necrosis Factor- (tumor necrosis factor- , TNF- ) kit (gyártási szám: ZJAGBZAB01), interleukin-6 (interleukin-6, IL-6) kit (gyártási szám: ZIBIBZAB 02) (Shanghai Yikesai Biological Products Co., Ltd. Company); Nátrium-pentobarbitál (American Amresco Company, tételszám: 20110612); Paraformaldehid (Chengdu Kelon Chemical Reagent Factory, tételszám: 20110901); Szuperoxid-diszmutáz (SOD) készlet (tételszám: 20130812), malondialdehid (MDA) készlet (tételszám: 20130812), glutation-peroxidáz (GSH-Px) készlet (tételszám: 20130814) (Nanjing Jiancheng Institute of Bioengineering); PBS-foszfát pufferpor (Fuzhou Maixin Biotechnology Development Co., Ltd., tételszám: 13061716).

cistanche gyógynövény

2 módszer

2.1 Csoportosítás és gyógyszeres kezelés

A Wistar patkányokat véletlenszerűen 6 csoportra osztották: normál kontrollcsoport, modellcsoport, Rhodiola Rosea belsőleges oldatos csoport (1,78 ml·kg-'), PhGC-k alacsony dózisú csoportja (75 mg·kg-), PhGC-k közepes dózisú csoportja (15). 0mg ·Kg-'), PhGC-k nagy dózisú csoportja (300mg·kg-), csoportonként 12 patkány. Minden csoportot SPF környezetben tenyésztettek. A normál kontrollcsoport és a modellcsoport intragasztrikusan desztillált vízzel (1,0 ml/100 g) kapott. A többi csoport 10 egymást követő napon keresztül intragasztrikusan adtuk a megfelelő dózisnak megfelelően. A 8. napon a többit, kivéve a normál kontrollcsoportot. Mindegyik csoportot 72 órán keresztül tartottuk mesterséges kísérleti kabinban, amely egy fennsík környezetet szimulált 5 000 m magasságban. A kabinban a magasság állandó 10 m·s-' sebességgel emelkedik 5000 m magasságig (légköri nyomás 54,1 kPa, oxigén parciális nyomás 11,52 kPa), amely során az állatok szabadon belépnek a vízbe és esznek, ill. a kabin 24 óránként 0,5 órára nyitva van. Gyógyszer, adjunk hozzá takarmányt és ivóvizet.

2.2 Állatkezelés

Az egyes csoportok patkányait nátrium-pentobarbitál (2 százalék, 0,2 ml/100 g) intraperitoneális injekciójával érzéstelenítettük, közvetlenül a kabin elhagyása után, vért vettünk a hasi aortából, kinyitottuk a koponyaüreget és az agyszövetet. vettük, és a bal agy felső felét kivették és lemértük. A csomagot a víztartalom meghatározására használják, és a bal agy alsó felét 4 százalékos paraformaldehiddel rögzítik a HE-festéshez. Mérjük meg a jobb agyat, adjunk hozzá PBS-oldatot, hogy 10 százalékos homogenizátumot készítsünk, centrifugáljuk 3 000 r·min-'-vel 10 percig, a felülúszót aliquot részekre osztjuk, és hűtőszekrényben tároljuk 80 fokon a TNF- meghatározásához. a, IIL-6, SOD, MDA, GSH-Px.

2.3 Az agyszövet patológiájának megfigyelése

Az agyszövet 4 százalékos paraformaldehidben történő teljes fixálása, dehidratálása, beágyazása, felszeletelése és HE-festése után a kóros elváltozásokat optikai mikroszkóp alatt, különböző nagyításokkal figyeljük meg, és képeket készítünk.

2.4 Az agy víztartalmának meghatározása és az agyszövet homogenizált gyulladás és oxidatív stressz kapcsolódó indexeinek meghatározása

A fóliába csomagolt agyszövetet sütőben (80 fok, 72 óra) süssük állandó súlyra, mérjük le a száraz tömeget, és számítsuk ki a víztartalmat: víztartalom=(szövettömeg-szövet száraz tömeg) / szövettömeg × 100 százalék. Használjon enzimhez kötött immunoassay készletet a TNF-, IL-6 tartalom mérésére, UV spektrofotométert az MDA, SOD, GSH-Px mérésére, a konkrét lépések kövesse az utasításokat.

2.5 Statisztikai elemzés

Az elemzéshez az SPSS 16.0 szoftvert használtuk, a mérési adatokat mind az alsó plusz s-ek képviselték, az adatok először a normalitást vizsgálták, a független 1. minta tesztet használtuk a megfelelő csoportok összehasonlítására, ill. a logaritmikus transzformációt a nem megfelelő csoportra végeztük el. Az ellenőrzési szint =0.05.

cistanche kivonat

3 Eredmények

3.1 A PhGC-k hatása az agyszövet kóros elváltozásaira HACE patkányokban

Az egyes csoportokban lévő patkányok agyszöveteinek kóros szeleteinek fénymikroszkópos megfigyelése azt mutatta, hogy az agyszövet molekuláris rétege, külső szemcsés sejtrétege, csigolyatestréteg sejtrétege, belső szemcsés sejtrétege és többsoros sejtréteg szerkezete a normál kontrollcsoportban tiszták voltak, és nem találtak elváltozást. A modellcsoportban a patkányok agyszövetei hiperémia és kapilláris ödéma voltak, a molekuláris réteg és a csigolyatestréteg sejtjeinek ödémája pedig nyilvánvaló volt. PhGC-k alacsony dózisú patkánycsoport agyszövet molekuláris rétege értágulat és pangásos ödéma, enyhe sejtödéma, ödéma kisebb, mint a modellcsoportnál: PhGC-k közepes dózisú patkánycsoport agyszövet része agyhártya alatti értágulat és pangás, esetenként sejtödéma , ödéma a modellcsoporthoz képest A csoport jelentősen csökkent; a nagy dózisú PhGC csoport molekuláris rétegében nem volt nyilvánvaló ödéma, és enyhe perivascularis ödéma volt, amely szignifikánsan csökkent a modellcsoporthoz képest. A Rhodiola Rosea csoportba tartozó patkányok agyszöveti molekuláris rétegében szétszórt ödéma, a szétszórt ereken pedig nagyon enyhe ödéma volt. Az ödéma szignifikánsan csökkent a modellcsoporthoz képest. Látható, hogy a modellcsoportba tartozó patkányok agyszövete nyilvánvalóan ödéma, és a modell létrejött. A PhGC-k és a Rhodiola Rosea csökkenthetik az agyödéma mértékét HACE modell patkányokban. Az eredményeket az 1. ábra mutatja.

1. ábra Patkány agyának hisztopatológiai megfigyelése különböző csoportokban (HE × 400)

3.2 A PhGC-k hatása HACE patkányok agyvíztartalmára

A normál kontrollcsoporthoz képest a modellcsoport agyszöveti víztartalma nőtt, a különbség statisztikailag szignifikáns volt (P<0.01), indicating="" that="" the="" model="" was="" established.="" the="" brain="" tissue="" water="" content="" of="" rats="" in="" the="" low,="" medium,="" and="" high="" doses="" of="" phgcs="" and="" the="" rhodiola="" rosea="" group="" was="" lower="" than="" that="" of="" the="" model="" group,="" and="" the="" difference="" was="" statistically="" significant=""><0.01). there="" was="" no="" statistically="" significant="" difference="" in="" tissue="" water="">

3.3 A PhGC-k hatása a TNF-a-ra és az IL-re -6 HACE patkányok agyszövetében

A normál kontrollcsoporthoz képest a modellcsoport agyszöveti homogenizátumában a TNF-a és IIL-6 tartalma szignifikánsan megnőtt (P<0.01). the="" contents="" of="" tnf-α="" and="" iil-6="" in="" the="" brain="" tissue="" homogenate="" of="" phgcs="" low,="" medium,="" and="" high="" dose="" groups="" and="" rhodiola="" rosea="" group="" were="" lower="" than="" those="" of="" the="" model="" group=""><0.05), and="" the="" difference="" was="" statistically="" significant.="" there="" was="" no="" statistically="" significant="" difference="" in="" brain="" tissue="" tnf-a="" and="" iil-6="" levels="" between="" the="" phgcs="" dose="" groups="" and="" the="" rhodiola="" rosea="">

3.4 A PhGC-k hatása az oxidatív stresszre HACE patkányok agyszövetében

A normál kontrollcsoporthoz képest a modellcsoport agyszövetében a SOD és a GSH-Px enzimaktivitások szignifikánsan csökkentek, az MDA tartalom pedig szignifikánsan emelkedett (P<0.01). the="" sod="" and="" gsh-px="" enzyme="" activities="" in="" the="" brain="" tissue="" of="" the="" phgcs="" low,="" medium,="" and="" high="" dose="" groups="" and="" rhodiola="" rosea="" group="" were="" higher="" than="" the="" model="" group,="" and="" the="" mda="" content="" was="" lower="" than="" that="" of="" the="" model="" group.="" the="" difference="" was="" statistically="" significant=""><0.05). there="" was="" no="" significant="" difference="" in="" the="" content="" of="" sod,="" gsh-px,="" and="" mda="" in="" the="" brain="" tissue="" between="" the="" phgcs="" groups="" and="" the="" rhodiola="" rosea="">

cistanche kiegészítő: javítja az immunitást

4. Megbeszélés

Az elmúlt években jelentős innovatív eredményeket értek el a magaslati betegség hagyományos kínai gyógyászattal történő megelőzésével és kezelésével kapcsolatos hazai kutatások, és sikeresen fejlesztették ki a hagyományos kínai gyógyszereket, amelyek önálló szellemi tulajdonjoggal rendelkeznek a magassági betegség megelőzésére és kezelésére. Például a tibeti katonai régió által kifejlesztett Rhodiola kapszulák megkapták a katonai speciális gyógyszerek engedélyezési számát, és a fennsík határvédelmi erőinél speciális gyógyszerként használják a fennsík betegségek megelőzésére és kezelésére. A Qinghai és a tibeti helyi gyógyszergyárak által piacra dobott Rhodiola Rosea szájon át szedhető folyadék megkapta a nemzeti kínai orvoslás fajtáinak hivatalos jóváhagyási számát, és klinikailag alkalmas az akut és krónikus magassági betegség megelőzésére és kezelésére10. A PhGC-k farmakológiai hatásai hasonlóak a salidrosidhoz, ezért a piacon forgalmazott és használt, gyógyszerszabványos Rhodiola Rosea belsőleges folyadékot választottuk pozitív kontrollként.

Számos tanulmány [1H12] bizonyította, hogy a HACE-betegekben a TNF- és IL-6 szintje emelkedett, Zhou Qiquan et al. [3 Tanulmányok kimutatták, hogy a TNF- fontos szerepet játszik a vér-agy gát permeabilitásának megváltoztatásában. Fontos tényező a gát áteresztőképességének növelésében. A TNF-szekréció fokozódik hipoxémia során. Ha a TNF- abnormálisan megemelkedik a vérben, az károsíthatja az ér endothel sejtjeit, ami a vaszkuláris endotélsejtek morfológiai változásait, sejtmembrán- és organellumák károsodását, stb. vaszkuláris endothel sejtek, elősegíti az endotelin (ET-1) termelődését és súlyosbítja az érfal károsodását, valamint elősegíti az IIL szekrécióját-614.

A hipoxiát az akut magassági betegség kialakulásához vezető kulcstényezőnek tekintik. A hipoxia által kiváltott oxidatív stresszválasz fontos szerepet játszik az agyi artériás magas vérnyomásban és az érrendszeri szivárgásban. A helyi szabad gyökök részt vesznek az érrendszeri károsodásban. Agyi érkárosodás és fokozott folyadékszivárgás agyödémát okozhat 13i4. Zhou Qiquan et al. [7 Tanulmányok kimutatták, hogy az oxigén szabad gyökök fontos szerepet játszanak a HACE kialakulásában, és fontos tényezők a vér-agy gát permeabilitásának növelésében nagy magasságban. Hipoxiás környezetben a szabad gyökök és az MDA jelentősen megnövekszik, míg az antioxidáns enzimek működése lecsökken. Emiatt az antioxidáns enzimek alacsony működése és a lipid-peroxidációs károsodás fokozódása fontos jelentőséggel bírhat az akut magassági betegség patogenezisében. Az MDA zsírsav-peroxidok lebontása során keletkezik, és a biológiai rendszerekben leggyakrabban mért lipid-peroxidációs termék. A szervezetben található antioxidáns enzimek közé tartozik a SOD, a GSH-Px stb., amelyek vagy közvetlenül megkötik a szuperoxid szabad gyököket és a hidrogén-peroxidot, vagy kevésbé aktív anyagokká alakítják át, hogy védekező szerepet töltsenek be. Így SOD-t, MDA-t, GSH-Px-et detektáltunk agyszövet homogenizátumban.

Ebben a kísérletben a normál kontrollcsoporthoz képest a HACE modellcsoport agyszöveti homogenizátumában a TNF-a és IIL-6 mennyisége szignifikánsan megnőtt, a SOD, a GSH-Px enzimek aktivitása csökkent, és a Az MDA-tartalom szignifikánsan megemelkedett. Azt mutatja, hogy a hipoxia által kiváltott oxidatív stressz diszfunkció és patkányok gyulladása szerepet játszik a HACE kialakulásában. A PhGC-k preventív adagolása csökkentheti az agyi ödémás patkányok agyszövetének víztartalmát, és jelentősen javíthatja az agyszöveti ödéma kóros elváltozásait, jelezve, hogy a HACE kialakulását megakadályozó hatású. A PhGC-k növelhetik az SOD-t és a GSH-Px-et patkány agyszövetében hipoxia során. Az enzimaktivitás csökkenti az MDA tartalmát az agyszövetben, amelyet a hipoxia okoz. A patkányok agyszövetének TNF- és IL{6}} tartalma a PhGC-t megelőző csoportban szignifikánsan alacsonyabb, mint a modellcsoportban, ami arra utal, hogy antioxidatív stresszünk és gyulladáscsökkentőnk lehet a megelőzés és a kezelés. PhGCs A magassági betegség egyik mechanizmusa. A kísérlet eredményei alapján a PhGC-k hatása a középső dózisú csoportban valamivel jobb, mint a magas dózisé, de a különbség statisztikailag nem szignifikáns. A kapcsolódó szakirodalomban nem számolnak be a PhGC-k májenzim-induktorok, ami kizárhatja annak lehetőségét, hogy a gyógyszerek fokozzák a máj gyógyszer enzimaktivitását és felgyorsítsák az önmetabolizmust. A feltételezések szerint a lehetséges ok az, hogy a gyógyszer koncentrációjának növekedésével a szervezetben a hatóanyag koncentrációja meghaladja a dózis-hatás összefüggés tartományát. A középső dózisnál a szervezetben a receptorok mind foglaltak, a receptorok telítettek, így a nagy dózisok hatása nem növekszik tovább, és a gyógyszer Ez egy glikozid, amely a gyomorban hidrolizálhatja a cukrot, és a viszkozitás növekedése korlátozza a gyógyszer hatékony felszívódását, ha a koncentráció túl magas.

cistanche kiegészítő: javítja az immunitást

Referencia

[1] John B. West, "a nagy magasságban előforduló betegségek nómenklatúrája, osztályozása és diagnosztikai kritériumai Kínában" angol fordítása [J]. High Altitude Med Biol, 2010, 11(2): 169-172.

[2] Bailey DM, Evans KA, James PE, et al. Megváltozott szabad gyökök metabolizmusa akut hegyi betegségben: következmények a dinamikus agyi autoregulációra és a vér-agy gát funkcióra [J]. J Physiol, 2009, 587(1): 73-85.

[3] Tang YP, Wu P, Su JJ és mások. Az aquaporin-4 hatása az intracerebrális vérzést követő ödémaképződésre [J]. Experimental Neurology, 2010, (223): 485-495.

[4] Cai Hong, Bao Zhong, Jiang Yong stb. Különböző eredetű Cistanche cistanche hatásos összetevői [J] mennyiségi elemzése. Chinese Herbal Medicine, 2007, 38(3): 452-455.

[5] Muhebuli • Abuliz, Mao Xinmin, Rena • Kasmu stb. PhGC-k Antioxidáns aktivitás HL-60 sejtekben [J]. Chinese Pharmacological Bulletin, 2008, 3 (24): 362-364.

[6] Liu Fengxia, Wang Xiaowen, Luo Lan és mások. PhGC-k az -amiloid peptid ellen Az Alzheimer-kór egérmodelljének hatása és mechanizmusa a tanulásra és a memóriára [J]. Chinese Pharmacology Science Bulletin, 2006, 22(5): 595-599.

[7] Liu Zhiqin, Chen Quieting, Li Yan és mások. A Cistanche hatása a hematopoiesisre és a kemoterápia hematopoietikus hatásai daganatos egerekben Az immunfunkció hatása [J]. Journal of Beijing University of Traditional Chinese Medicine, 2010, 33 (11): 758-761.

[8] Xu Yonghua, Zhang Qiong, Cao Jinjun stb. Hozzon létre egy nagyméretű összetett alacsony nyomású kamrát az orvostudomány bővítéséhez. Kísérleti platformok típusai [J]. Chinese Journal of Comparative Medicine, 2012, 22(7): 60-63.

[9] Tao Yicun, Shi Wen Hui, Xu Yonghua és mások. Nagy magasságban kialakuló tüdőödéma szimulált platói környezetben Az egérmodell létrehozása [J]. Chinese Journal of Experimental Animal, 2014, 22 (1): 76-78.

[10] Wang Hai. Farmakoterápia foglalkozási magassági betegség esetén [M]. Peking: Hadorvostudományi Kiadó, 2010: 131-148.

[11] Chen Yuntian, Hu Ying. A plazma interleukin-6 változásai akut HACE-ban szenvedő betegekben [J]. Chinese Journal of Preventive Medicine, 2006, 24 (2): 92-94.

[12] Colleen Glyde JL, Andrew WS, Megan JW és mások. Akut hegyi betegség, gyulladás és permeabilitás: új meglátások egy vér biomarker vizsgálatából [J]. J Appl Physiol, 2011, 111: 392-399.

[13] Zhou QQ, Tan XL, Wang J. A vér-agy gát gyulladásos mediátorok által okozott megnövekedett permeabilitása szerepet játszik a nagy magasságban fellépő agyödémában [J]. Sci Res and Essays, 2011, 6 (3): 607-615.

[14] Ohga E, Matsuset. Az adhéziós molekulák és a hipoxia kapcsolata [J]. Nippon Rinsho, 2000, 59 (8): 1587-1591.

[15] Bakonyi T, Radak Z. Nagy magasság és szabad gyökök [J]. J Sports Sci Med, 2004, 3(2): 64-69.

[16] Bailey DM, Evans KA, James PE, et al. Megváltozott szabad gyökök metabolizmusa akut hegyi betegségben: következmények a dinamikus agyi autoregulációra és a vér-agy gát funkcióra [J]. J Physiol, 2009, 587(1): 73-85.

[17] Zhou Qiquan, Wang Jing, Wang Yunli és mások. Vér-agy nagy magasságban oxigén szabad gyökök hatására A gát permeabilitás szerepe megváltozik és kapcsolata a HACE-val [J]. China Micro Circulation, 2007, 11(3): 149-153.