AZ EGYSEJTŰ RNS-SEQ FELFEDEZI A CSÚCS- ÉS MDA5-KÖZVETÍTETT CITOSZOLOS NUKLEINSAV ÉRZÉKELŐ ÚTVONALÁNAK, VALAMINT AZ IFNAR/STAT2 JELZÉS KRITIKUS SZEREPEIT A REKOMBINÁNS MVAINDUKÁCIÓS ANTITUMUNIMMUNITÁSBAN

Háttér

Az onkolitikus vírusok ígéretes terápiás szerek előrehaladott rákos megbetegedések esetén, mivel képesek daganatellenes veleszületett és adaptív immunitást kiváltani. A módosított vacciniavírus Ankara (MVA) egy legyengített, replikációhiányos himlővírus, amely biztonságos emberi használatra, így kedvező platform a rák immunterápiájához. Korábban felfedeztük, hogy az MVA-ban az E5R gén a cGAS/STING által közvetített citoszolikus DNS-érzékelő útvonal inhibitorát kódolja. Az E5R gént törlő és egy dendritesejtes (DC) növekedési faktort, az Flt3L-t expresszáló, módosított MVA az OX40L T-sejt-kostimulátorral együtt erős daganatellenes immunitást generál, ha intratumorálisan beadják. Azt is kimutattuk, hogy az 1. generációs rMVA intratumorális (IT) injekciója elősegíti a CD8+ aktiválódását cGAS/STING és STAT1/STAT2-függő módon, és kimeríti az OX40hi szabályozó T-sejteket (Tregs) az OX40L/-en keresztül. OX40 interakció és IFNAR jelzés. Az MVA-ból származó E3L gén a citoszolikus dsRNS-érzékelő útvonalak inhibitorát kódolja. Ennek a vizsgálatnak a célja annak vizsgálata, hogy az rMVADE3L az E3L rMVA-ból (MVADE5R-hFlt3LmOX40L) történő deléciójával tovább javítja-e daganatellenes hatásait. Arra is összpontosítottunk, hogy az egysejtű RNS-szekvenciát (scRNA-seq) használjuk az immunszuppresszív tumor mikrokörnyezetének rMVADE3L IT bejuttatása általi megváltozásának vizsgálatára.

A cistanche tubulosa-Antitumor előnyei

Mód

Az rMVADE3L-t úgy alakítottuk ki, hogy az rMVA-ból töröltük az E3L gént. Megvizsgáltuk a csontvelőből származó DC-k (BMDC-k) és tumorsejtvonalak rMVADE3L-re és rMVA-ra adott veleszületett immunválaszait. Összehasonlítottuk a két vírus daganatellenes hatékonyságát rágcsáló B16-F10 melanoma és MC38 vastagbélrák modellekben is. Ezen túlmenően elvégeztük a vad típusú, MDA5/STING-, STAT2- rMVADE3L-lel vagy PBS-sel történő IT-injekció után két nappal begyűjtött tumorokból származó, válogatott tumor-infiltráló CD45+ immunsejtek scRNS-seq-jét, vagy IFNAR{15}}hiányos egerek.

A cistanche tubulosa-Antitumor előnyei

Eredmények

Az rMVA-val összehasonlítva az rMVADE3L erősebben aktiválja mind a cGAS/STING-, mind az MDA5/MAVS-közvetített nukleinsav-érzékelő útvonalakat DC-kben és tumorsejtvonalakban. IT rMVADE3L erősebb daganatellenes hatást fejt ki, mint az rMVA. Eredményeink azt mutatták, hogy az rMVADE3L kezelés után gyulladásos monociták beáramlása volt a daganatokba WT egerekben, ami hiányzik a STAT2 vagy IFNAR knockout egerekben. A vírustranszkriptomok egysejtszintű értékelése feltárta, hogy a makrofágok és monociták érzékenyebbek az rMVA DE3L-re, mint más sejttípusok. Az egyenáramú részhalmazokon a transzkriptomikus változások nagymértékben az IFNAR/STAT2 jelátviteltől függenek. Ezzel szemben az MDA5/STING által közvetített útvonal meghatározza a gyulladásos monociták transzkriptomprofilját az rMVADE3L-re adott válaszként.

cistanche tubulosa – erősíti az immunrendszert

Kattintson ide a Cistanche Enhance Immunity termékek megtekintéséhez

【Kérjen többet】 E-mail:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Következtetések

Összességében eredményeink azt mutatják, hogy az scRNA-seq hatékony megközelítés a gazdaszervezet immunogén vírusokkal szembeni immunválaszának kikérdezésére, amely iránymutatást adna a hatékonyabb vírusalapú rák immunterápia jövőbeli terveihez.

cistanche tubulosa – erősíti az immunrendszert

Köszönetnyilvánítás

Ezt a munkát a Society of Memorial Sloan Kettering (MSK) kutatási ösztöndíja (LD), az MSK Technology Development Fund (LD), a Parker Institute for Cancer Immunotherapy Career Development Award (LD), az IMVAQ Therapeutics által támogatott kutatási díj támogatta. Ezt a munkát részben a Swim Across America (JDW, TM), a Ludwig Institute for Cancer Research (JDW, TM) és a National Cancer Institute R01 CA56821 (JDW) támogatása támogatta. Ezt a kutatást részben a NIH/NCI Cancer Center Support Grant P30 CA008748 támogatásán keresztül is finanszírozták.

A cistanche előnyei a férfiak számára – erősítik az immunrendszert