Tanulmány a Cistanche Deserticola Gouqi Jujuepian minőségi szabványáról

PU Hongli, ZHOU Bo, WEI Shuchang (Gansu Kínai Orvostudományi Egyetem Gyógyszerészeti Iskola, Lanzhou, Gansu, 730000, Kína)

Absztrakt:Cél A Ｒoucongrong Gouqi Jujuepian．Módszerek Az Ｒoucongrong (Cistanches Herba) és a Gouqizi(Lycii Fructus) azonosítására vékonyréteg-kromatográfiát használtunk.．HPLC-t használtunk a Ｒoucongrong Gouqi Jujuepian． tartalmának meghatározására, és az echinacoside．Analízist HPLC-vel végeztük. Hypersil BDS C18(25{2}}．0 mm×4 x 6 mm,5 μm) oszlop 25 fokon. Izokratikus elúciót használtunk metanollal és 0．1% hangyasavval 1 ml/perc áramlási sebességgel. A mintaoldat 20 μl-es aliquot részét injektáltuk az oszlopra, és a detektálási hullámhossz 330 nm volt. ＲEredményként az Ｒoucongrong (Cistanches Herba) és a Gouqizi (Lycii Fruc tus) TLC-foltjai világosak és erős specifitásúak voltak. Az echinacoside és a verbascoside lineáris tartománya 41,8 és 418,0 ug/mL között volt (r {16}}) {17}}) és 40-400 ug/mL (r=0． 999 9)). Az átlagos mintavisszanyerés 99 volt. 58 százalék (ＲSD=0．85 százalék ) és 99．31 százalék (ＲSD= 1．13 százalék) ．Következtetés Az ebben a cikkben ismertetett módszerek tudományosan és hatékonyan használhatók az egyezik Gouqi minőségének értékelésére Jujuepian.

Kulcsszavak: cistanche deserticola Gouqi Jujuepian; HPLC; TLC; echinakozid; verbascoside; Minőségi szabvány

Cistanche deserticola és goji bogyó

Cistanchedeserticolaés a goji rágótabletta Cistanche-ból és goji bogyóból áll, amelyek egészségügyi funkciókat töltenek be, például késleltetik a fáradtságot és felgyorsítják a fáradtság megszüntetését. Segítenek szabályozni a test funkcióit, erősítik az immunitást, és megszüntetik az alul-egészségügyi állapotokat.Jelenleg a hosszú munkaidő és a nagy munkaterhelés miatt Kína egyes iparágaiban sokan fáradtak és rosszul vannak [1-3]. Ezek az ipari csoportok jelentik az egészséges élelmiszer számára leginkább megfelelő populációt. Rágótablettaként fejlesztettük ki, amely víz hiányában is időben beadható. A tabletta rágása után könnyen lenyelhető, és felgyorsíthatja a gyógyszer oldódását, javítva a terápiás hatást [4]. Ez a cikk a rágótabletták minőségi előírásait tanulmányozza, és a kapott kvalitatív és kvantitatív elemzési módszerek objektíven tükrözhetik a rágótabletták belső minőségét, és a készítmény minőség-ellenőrzési standardjaként szolgálhatnak.

Kínai gyógyászati ​​anyagok, mint például a cistanche deserticola

1. Műszer és teszt gyógyszer

1.1 Műszerek

Agilent1260 nagy teljesítményű folyadékkromatográf (Agilent, USA), UV Bluestar B ultraibolya-látható spektrofotométer (Beijing Laibetai Technology Co., Ltd.), WFH-203 (ZF-1) háromutas ultraibolya analizátor ( Shanghai Jingke Industry Co., Ltd.), BT125D 1/100000 elektronikus mérleg (Sartorius Scientific Instrument Co., Ltd.), DZF-6090 vákuumszárító sütő (Shanghai New Scientific Instrument Co., Ltd.), SY{ {10}}T ultrahangos tisztítógép (Shanghai Shengyuan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.), poliamid fólia (Zhejiang Taizhou Luqiao Sijia Biochemical Plastic Factory).

1.2 Gyógyszerek és reagensek:

Echinacetinreferenciaanyag (tételszám: 111670-201505), medence melletti referenciaanyag (tételszám: 111530-201411), Cistanche deserticola referenciaanyag (tételszám: 121101-200402) és Lycium barbarum referenciaanyag (tételszám: {{3) }}) mindegyikét a Kínai Élelmiszer- és Gyógyszerellenőrző Intézettől vásárolták. A Cistanche deserticola ma és a Lycium barbarum rágótablettákat a Gansui Hagyományos Kínai Orvostudományi Egyetem Gyógyszerészeti Iskola Kínai Orvostudományi Laboratóriuma készítette, a metanol kromatográfiás tisztaságú volt. Minden más reagens analitikai tisztaságú.

Echinozid, a Cistanche deserticola fő kémiai összetevője

2 Módszerek és eredmények

2.1 Vékonyréteg-kromatográfiás (TLC) azonosítás

2.1.1 A Cistanche deserticola vékonyréteg-kromatográfiás azonosítása

Vegyünk megfelelő mennyiségű Cistanche deserticola és goji bogyó rágótablettát, és őröljük porrá. Vegyünk 1,5 g finom port, és helyezzük Erlenmeyer-lombikba. Adjunk hozzá 20 ml metanolt, és kezeljük ultrahanggal (teljesítmény 250 W, frekvencia 40 kHz) 15 percig. Hűtsük le és szűrjük le. A szűrletet betöményítjük, hogy majdnem megszáradjon, és a maradékot feloldjuk 5 ml metanolban, mint vizsgálati oldatban. Vegyünk 1 g referencia gyógynövényt a Cistanche deserticola-ból, és készítsünk oldatot a referencia gyógynövényből ugyanezzel a módszerrel. Vegyünk 0,5 g negatív mintát Cistanche deserticola nélkül, és készítsünk negatív kontrolloldatot a vizsgálati oldattal azonos módszerrel. Vegyünk 0,5-0,5-t a tesztoldatból, a negatív kontrolloldatból és a referencia-gyógyszeroldatból μL. Helyezze a mintákat ugyanarra a poliamid filmre, előhívja metanolos jégecet-vízzel (2:1:7) előhívószerként, távolítsa el, szárítsa meg levegőn. és ultraibolya fényben (365 nm) vizsgáltuk. A vizsgálati minta kromatogramján 4 azonos színű folt található a referencia gyógyászati ​​anyag kromatogramjának megfelelő helyein, és a negatív kontrollnak nincs interferencia. A részletekért lásd az 1. ábrát.

A Cistanche deserticola fő kémiai összetevői

Kattintson ide a Cistanche termékek megtekintéséhez

【Ask for more】 Email: xue122522@foxmail.com /  Whats App:  0086 18599088692 /  Wechat:  18599088692

2.1.2 A goji bogyók vékonyréteg-kromatográfiás azonosítása

Vegyünk megfelelő mennyiségű Cistanche deserticola és goji bogyó rágótablettát, őröljük porrá, mérjünk be 2,5 g finom port egy centrifugacsőbe, oldjuk fel 35 ml vízben, centrifugáljuk, és a felülúszót extraháljuk 15 ml etil-acetáttal. Vegyünk egy réteg etil-acetátot és koncentráljuk 1 ml-re vizsgálati oldatként. Vegyünk 0,5 g goji bogyót referenciaanyagnak, vágjuk apró darabokra, adjunk hozzá 35 ml vizet, melegítsük és forraljuk 15 percig, hagyjuk kihűlni, centrifugáljuk, és extraháljuk a felülúszót 15 ml-rel. etil-acetát. Vegyünk egy réteg etil-acetátot, és koncentráljuk 1 ml-re referenciaanyag-oldatként. Vegyen 2 g negatív mintát goji bogyó nélkül, és készítsen negatív kontrolloldatot a vizsgálati oldat elkészítési módszerével. Vegyünk 2 mintát a tesztoldatból, 2 mintát a negatív kontrolloldatból és 2 mintát a μL referencia-gyógyszeroldatból. Pöttymintákat ugyanarra a poliamid filmre, előhívjuk etil-acetát kloroform hangyasavval (3:2:1) az előhívószert eltávolítjuk, levegőn szárítjuk, és ultraibolya fényben (365 nm) vizsgáljuk. A vizsgálati minta kromatogramján egy azonos színű folt található a referencia gyógyászati ​​anyag megfelelő helyén, és a negatív kontrollnak nincs interferencia. A részletekért lásd a 2. ábrát.

1. Gyógyászati ​​referenciaanyagok; 2, 3, vizsgálati minta; 4. Negatív kontroll.

1. ábra: Cistanche deserticola TLC diagramja

1. Gyógyászati ​​referenciaanyagok; 2. Negatív kontroll; 3. Tesztminta.

2. ábra Goji bogyók TLC diagramja

2.2 A Fructus Moringából és az Echinacetinből származó glikozidok mennyiségi elemzése

2.2.1. Összehasonlító oldat elkészítése Pontosan mérjen le megfelelő mennyiségű echinaceát, és biztosítson referenciaanyagokat, helyezze őket egy barna mérőlombikba, és adjon hozzá 50 százalékos metanolt, hogy vegyes referenciaoldatot készítsen, amely 0.836-ot tartalmaz. mg echinaceát és 0,799 mg medencepartot milliliterenként, és kapjunk [5].

2.2.2. Vizsgálati oldat elkészítése

Vegyünk megfelelő mennyiségű Cistanche deserticola naspolya rágótablettát, őröljük porrá (6{10}} lyukméretű szitán szűrjük át), mérjünk le pontosan 1,4 g-ot, helyezzük egy 50 ml-es barna mérőlombikba, adjunk hozzá 50 százalékos metanolt a mérleghez. , rázzuk fel, mérjük le, áztassuk 30 percig, kezeljük ultrahanggal (teljesítmény 250 W, frekvencia 40 kHz) 40 percig, hűtsük le, mérjük le, 50 százalékos metanolt használjunk a veszteségcsökkentéshez, rázzuk állítsa le, vegye ki a felülúszót, használjon 0,45 μ-es mikroporózus membrános szűrőt, és vegye ki a folytonos szűrletet, hogy megkapja [6].

A Cistanche deserticola fő kémiai összetevői

2.2.3 Negatív kontrolloldat elkészítése

Vegyünk megfelelő mennyiségű negatív mintát Cistanche deserticola nélkül, őröljük porrá (60 mesh szitán átszitáljuk), mérjünk le pontosan 1,4 g-ot, és készítsünk negatív kontrolloldatot a „2.2.2” módszer szerint.

2.2.4 Kromatográfiás körülmények

A kromatográfiás oszlop Hypersil BDS C18 (250.0 mm × 4 × 6 mm, 5 μm) A detektálási hullámhossz 330 nm, A mozgófázis metanol és 0,1% hangyasav. mint a B mozgófázis. A gradiens elúciót az 1. táblázat szerint végezzük; Áramlási sebesség 1 ml/perc; Az oszlop hőmérséklete 25 fok. A fenti kromatográfiás körülmények között extraháljuk a referenciaoldat 20 százalékát, a vizsgálati oldat 20 százalékát és a negatív kontrolloldat 20 százalékát, μ fecskendezzük be az L mintát, és rögzítsük a kromatogramot a 3. ábrán látható módon. kimutatta, hogy más komponensek nem zavarják a medence és az echinacea meghatározását, és a medenceparti és az echinacea elkülönítése jó volt.

1. táblázat Gradiens elúciós feltételek a metanolhoz (A) -0,1 százalék hangyasav (B) mozgófázis

2.2.5 Lineáris kapcsolat vizsgálata

Mérje meg pontosan a {{0}}.5, 1.0, 2.0, 3.0, 4.0 és 5.{101} {31}} ml echinacea és medencepart vegyes referenciaoldatát, helyezze 10 ml-es barna mérőlombikokba, hígítsa fel 50%-os metanollal a skálaig, és határozza meg a csúcsterületet a kromatográfiás körülményeknek megfelelően a "2.2.4" pontban. . Lineáris regressziót hajtottunk végre a csúcsterület integrál értékének ordinátaként (Y) és az injektált térfogatnak az abszcisszaként (X) történő felhasználásával. Az echinacoside és a poolside regressziós egyenleteit a következőképpen számítottuk ki: Y=1493,8X-8,0748 (r=0.999 9) és Y=1895,8X{{ 25}}.486 (r=0.999 9), ill. Az eredmények azt mutatták, hogy az Echinacea és a Moringa antocianinjai 41.8-418.0 és 40-400 között voltak, μ A g/mL tartományon belül jó lineáris kapcsolat van.

2.2.6 Precíziós vizsgálat

Mérje meg pontosan az echinacea-glikozid és a medenceparti 20 μL vegyes referenciaoldatát. Fecskendezzen be 5 egymást követő mintát, és jegyezze fel a csúcsterületet. Az eredmények azt mutatták, hogy a tobozmirigy és a medenceparti RSD értéke 0,62 százalék, illetve 0,51 százalék volt, ami a műszer jó pontosságát jelzi.

2.2.7 Stabilitási vizsgálat

Vegye ki ugyanazt a tételt a tesztoldatból, és fecskendezze be 0, 4, 8, 16 és 32 óra elteltével, rögzítve a csúcsterületet. Az eredmények azt mutatták, hogy a tobozmirigy és a medenceparti RSD 1,30%, illetve 1,35% volt, ami azt jelzi, hogy a tesztoldat 32 órán belül stabil volt.

1. Vegyes referenciaanyag; 2. Tesztminta; 3. Negatív kontroll;

A. Echinacetin; B. Maorui virágglikozid.

3. ábra: Echinacetin és Fructus Moringae glikozid HPLC diagramja

2.2.8 Ismételhetőségi vizsgálat

Vegyünk 5 mintát ugyanabból a tételből, és készítsük elő és mérjük őket sorrendben a vizsgálati oldat elkészítési módszere szerint. Az eredmények azt mutatták, hogy a tobozmirigy és a medenceparti RSD értéke 0,82 százalék, illetve 0,75 százalék volt, ami ennek a módszernek a jó ismételhetőségét jelzi.

2.2.9 Minta-visszanyerési teszt

Vegyünk 5 ismert antocianin- és antocianintartalmú mintát, adjuk hozzá az antocianin és antocianin kontroll mintáihoz, készítsük el a vizsgálati oldatot a „2.2.2.” módszer szerint, és határozzuk meg a visszanyerési sebességet a „2.2. .4" Az eredmények azt mutatták, hogy az echinacea-glikozid átlagos visszanyerése 99,58%, illetve 99,31% volt, az RSD 0,85% és 1,13% volt. A részletekért lásd a 2. és 3. táblázatot.

2.2.10 Mintatartalom meghatározása

A fenti meghatározási módszerrel határozza meg az echinakozid és a medencepart tartalmát három mintatételben. Az eredményeket a 4. táblázat tartalmazza.

2. táblázat Az echinacea glikozid hozzáadásának visszanyerési arányának vizsgálatának eredményei

3. táblázat A visszanyerési arány vizsgálatának eredményei a maorui virágglikozidok hozzáadására

4. táblázat Három mintatétel tartalommeghatározási eredményei

3 Vita

Mivel a Cistanche deserticola és a Lycium barbarum rágótabletták receptjében a Cistanche deserticola a domináns gyógyszer, a készítmény nagy részét ez teszi ki. Ezért minőségi és mennyiségi elemzést végeztünk a Cistanche deserticola, és kvalitatív elemzést Lycium barbarum magvakon. Az alkalmazott módszer egyszerű, érzékeny, erős specificitású, ami jó minőségellenőrző szerepet tölthet be.

Cistanche kiegészítő a közelemben

A kvantitatív elemzés során az echinakozid és a medencepart jobb oldódása érdekében a mintaport először 30 percig 50 százalékos metanolban áztatták, majd ultrahangos kezelésnek vetették alá. A rágótabletták echinacoside és poolside tartalmának pontos meghatározásához ultrahangos extrakciós időt vizsgáltunk. A 30, 40 és 50 percig extrahált mintákkal összehasonlítva azt találtuk, hogy az echinakozid és a medencepart 40 perc után teljesen extrahálható.. Az ebben a cikkben bemutatott módszer hatékonyan szabályozhatja a rágótabletták minőségét.

referencia:

[1] Gao Mingyou. Vizsgálat a mezőgazdasági bankok alkalmazottainak egészségügyi és sporttevékenységéről Yulin város városi területein [J]. A Yulin Egyetem folyóirata, 2015 (4): 60-64

[2] Li Huishang, Chen Minghai, Dong Xiaoxia és mások. A taxisok egészségi állapotának és befolyásoló tényezőinek elemzése [J]. China Food and Nutrition Journal, 2009 (11): 62-64

[3] Ruan Huili, Ruan Ying, Li Yonghong. Sürgősségi osztályos ápolónők fáradtsági állapotának vizsgálata, elemzése [J]. Contemporary Journal of Nurses, 2015 (4): 98-100

[4] Shi Xinlei, Huang Shengwu. A rágótablettákkal kapcsolatos kutatási eredmények [J]. China Pharmaceutical, 2008, 17 (14): 17-19

[5] Nemzeti Gyógyszerkönyvi Bizottság. A Kínai Népköztársaság Gyógyszerkönyve (1. rész) [M]. Peking: China Medical Science and Technology Press, 2015:135

[6] Zhang Siju, Liu Li, Zhang Shuyun és mások. Tanulmány a Cistanche deserticola gyógyászati ​​anyagok minőségi előírásairól [J]. Chinese Journal of Traditional Chinese Medicine, 2000, 25 (6): 359