Tanulmány a Herba Cistanches Fuju darabok optimális specifikációjáról

A Cistanche deserticolát először Shennong Herbal Classic című művében vették fel. Ennek megvannak a hatásaitápláló vese yang, esszencia és vér pótlása, valamint a belek nedvesítése ésa székrekedés enyhítése. A klinikai gyakorlatban atonik kínai orvoslás. A Kínai Népköztársaság Gyógyszerkönyvének (a továbbiakban: "Kínai Gyógyszerkönyv") 2020-as kiadása előírja, hogy a Cistanche deserticola a Cistanche deserticola vagy Cistanche tubulosa, az Oroobanchacea családba tartozó növények szárított, húsos szárából, pikkelyes levelekkel származik. A Cistanche deserticola gyógyászati ​​anyagok jellemzői általában 2–8 cm átmérőjűek és 3–15 cm hosszúak.

A Kínai Gyógyszerkönyv „0213 általános feldolgozási szabályai” szerint a Cistanche deserticola a feldolgozás során szabálytalan vastag szeletekre formálódik, amelyek vastagsága 2–4 ​​mm. A vágott Cistanche deserticola szeletek többsége nagy vastag, 2–8 cm átmérőjű és 2–4 mm vastag szelet [1].

KIVÁLÓ MINŐSÉGŰ CISTANCHE TUBULOSA KIVONAT ELADÓ

Ez a hagyományos főzetdarab egyenetlen méretű, és nagy a minőségi különbség. A klinikai alkalmazkodás során nehéz ellenőrizni. Ráadásul a hatásos összetevők nehezen oldódnak fel egyenletesen a főzés során, ami az egyes főzetek minőségében nagy különbséget eredményez.

Ezenkívül releváns tanulmányok beszámoltak arról, hogy a Cistanche deserticola különböző részeinek kémiai összetétele meglehetősen eltérő, és a különböző részek azon képessége, hogy megkötik az 1,1-difenil-2-trinitrofenilhidrazin (DPPH) szabad gyököket a vitro is más [2], ami megnehezíti a hagyományos Cistanche deserticola szeletek klinikai hatékonyságának garantálását. A klinikai hatékonyságot javító módszerek közül a kínai orvoslás szeletek egyfajta öröklött és innovatív szeletek, amelyek a hagyományos kínai orvoslás elméletét és a hagyományos kínai orvoslás feldolgozási módszereit követik, a forrásból válogatják ki a kiváló minőségű gyógyászati ​​anyagokat, és feldolgozásuk és feldolgozásuk. speciális jellemzők. Magas kihasználtsággal, egyenletes minőséggel, stabil hatásfokkal rendelkeznek, könnyen beállíthatók és előkészíthetők. Megőrzik a hagyományos szeletek azonosítási jellemzőit.

A kínai orvoslás szeleteinek méretét főként a gyógyászati ​​anyag gyógyászati ​​része, a textúra jellemzői és a klinikai alkalmazás alapján osztályozzák [3]. Például a hagyományos szeletek specifikációit a következőképpen írják le: "mint a szójabab", "mint a bab", "durva por" stb. [4].

A Cistanche deserticola egy különleges, húsos szárú gyógyanyag. Száradás után a gyógyászati ​​anyag nagy és hosszú. Korszerű vágási technológiával szeletekre vagy kockákra vágható, amellyel nemcsak a Cistanche deserticola hasznosulási aránya javítható, minősége egységes lesz, hanem megőrzi a hagyományos gyógyászati ​​darabok azonosító tulajdonságait. Ez a tanulmány a hagyományos Cistanche deserticola gyógyászati ​​​​darabokat használja hídként, és a Cistanche deserticola különböző specifikációjú kockákra és kockákra rágja. A megrágott Cistanche deserticola gyógyszerdarabok legjobb specifikációit a gyógyszerdarab tulajdonságai, a nyugalmi szög, a főzési sebesség, valamint a verbaszkozid és echinakozid átviteli sebessége alapján optimalizálták. Ezzel egyidejűleg a hagyományos gyógyászati ​​darabok és a rágott gyógyszerdarabok minőségi jellemzőinek egységességét és konzisztenciáját hasonlítják össze, hogy referenciaként szolgáljanak a rágott Cistanche deserticola gyógydarabok specifikációi kiválasztásához, feldolgozásához és előállításához.

1 Anyag

1.1 Műszerek

Thermo U3000 HPLC; XBridge C18 (250,0 mm × 4,6 mm, 5 μm) kromatográfiás oszlop; SQW sorozatú CNC dugattyús gyógyszervágó (Kanghua Pharmaceutical Machinery Co., Ltd.); AM300S típusú forgácsoló malom (Ant Source Scientific Instrument Co., Ltd.); DL-60J típusú intelligens ultrahangos tisztító (Shanghai May Instrument Co., Ltd.); QM-Q5-H30DW típusú elektromos gőzölő (Changsha Quanmin Electric Co., Ltd.); MS204S típusú egy tízezres elektronikus analitikai mérleg (Mettler Toledo); XPE26 típusú egymilliomodik elektronikus mérleg (Mettler Toledo).

1.2 Teszt gyógyszerek

Echinakozid referenciaanyag (China Food and Drug Inspection Institute, tételszám 111670-201907, tisztaság 91,80%), verbakozid referenciaanyag (China Food and Drug Inspection Institute, tételszám 111530-201914, tisztaság 95,2%), metanol ( kromatográfiás minőség); Wahaha tisztított víz; a többi reagens analitikai minőségű.

A Cistanche deserticola gyógyászati ​​anyagokat az Alxa, Belső-Mongólia, Bayannur, Belső-Mongólia és Jiuquan, Gansu kutatócsoportja gyűjtötte össze, és Liu Shoujin professzor, az Anhui Hagyományos Kínai Egyetem professzora a Cistanche deserticola pikkelylevelével ellátott szárított, húsos szárként azonosította. Gyógyszer.

2 Módszerek

2.1 Minta-előkészítési módszer

A Cistanche deserticolát 7 részre osztották, mindegyik körülbelül 500 g tömegű. A szennyeződéseket eltávolítottuk, a szeleteket megmostuk, és a keveréket beáztattuk. A szeleteket hagyományos szeletekre és 2-–4- mm vastag szeletekre vágtuk. A 2-–4- mm vastag szeleteket 2 mm × 2 mm, 2 mm × 4 mm és 4 mm × 4 mm széles szálakra, valamint 5 mm oldalhosszúságú kockákra vágtuk. , 8 mm, illetve 10 mm.

2.2 A fő összetevők meghatározása

A kínai gyógyszerkönyv szerint a reprezentatív fenil-etanol-glikozidok két komponensét, a verbaszkozidot és az echinakozidot használták indikátorként a meghatározáshoz [1].

2.2.1 Kromatográfiás körülmények és rendszeralkalmassági vizsgálat

Töltőanyagként oktadecil-szilán kötésű szilikagélt használtunk; A mozgófázisként metanolt, B mozgófázisként 0,1%-os hangyasavoldatot használtunk. A gradiens elúciót az 1. táblázat követelményei szerint végeztük; a detektálási hullámhossz 330 nm volt. Az echinakozid csúcs alapján számított elméleti lemezek száma nem lehet kevesebb, mint 3000. A HPLC spektrumot az 1. ábra mutatja.

2 Módszerek

2.1 Minta-előkészítési módszer

A Cistanche deserticola gyógyászati ​​anyagot 7, egyenként körülbelül 500 g-os részre osztjuk, és eltávolítjuk a szennyeződéseket. Az anyagot megmostuk és megnedvesítettük, majd hagyományos szeletekre és szeletekre vágtuk. A hagyományos szeletek főként 2-4 mm vastagságú szeletek voltak, a szeletelt szeleteket pedig 2 mm × 2 mm, 2 mm × 4 mm és 4 mm × 4 mm méretű szálakra, valamint kockákra vágták. oldalhossza 5 mm, 8 mm, illetve 10 mm.

2.2 A fő összetevők meghatározása

Hivatkozás történt a Kínai Gyógyszerkönyvre, és a két komponenst, a verbaszkozidot és az echinakozidot, amelyek a fenil-etanol-glikozidok reprezentatív komponensei voltak, használták indikátorként a meghatározáshoz [1].

2.2.1 Kromatográfiás körülmények és rendszeralkalmassági vizsgálat

Töltőanyagként oktadecil-szilán kötésű szilikagélt használtunk; A-mozgófázisként metanolt, B-mozgófázisként 0,1%-os hangyasavoldatot használtunk. A gradiens elúciót az 1. táblázatban foglaltak szerint végeztük; a detektálási hullámhossz 330 nm volt. Az echinakozid-csúcs alapján számított elméleti lemezszám nem lehet kevesebb 3000-nél. A HPLC-spektrum az 1. ábrán látható.

1. ábra Az echinacoside és verbascoside referencia- és vizsgálati minták HPLC-kromatogramja

2.2.2. Összehasonlító oldat elkészítése

Vegyünk megfelelő mennyiségű echinakozid referencia- és verbaszkozid referenciaanyagot, mérjük le pontosan, és adjunk hozzá 50%-os metanolos oldatot, hogy 1 ml-es vegyes oldatot készítsünk, amely 0,2 mg echinakozidot, illetve verbaszkozidot tartalmaz.

2.2.3. Vizsgálati oldat elkészítése

Ennek a terméknek a porából (4-es számú szitán átpasszírozva) vegyünk kb. 1 g-ot, mérjük le pontosan, tegyük egy 100 ml-es barna mérőlombikba, adjunk hozzá pontosan 50 ml 50%-os metanolos oldatot, zárjuk le, jól rázzuk fel, lemérjük, áztatjuk 30 percig, ultrahanggal kezeljük 40 percig (teljesítmény: 250 W, frekvencia: 35 kHz), hagyjuk kihűlni, mérjük le újra, adjunk hozzá 50%-os metanol oldatot a fogyás pótlására, rázzuk fel Nos, hagyjuk állni, vegyük ki a felülúszót, szűrjük le, és vegyük a szűrletet, hogy megkapjuk.

2.2.4 Lineáris kapcsolat vizsgálata

Pontosan szívjon fel {{0}.1, 0.2, 0.5, 1.0, 2.0 ml verbaszkozid referenciaoldatot , helyezze {{10}} ml-es mérőlombikokba, és adjon hozzá metanolt a mérleghez. Szívjon le pontosan 0,1, 0.2, 0.5, 1,0, 2,0 ml echinakozid referenciaoldatot, tegyen 5 10 ml-es mérőlombikokba, és adjon hozzá 50%-ot metanol oldatot a skálára, mérjük meg a "2.2.1" módszer szerint, és jegyezzék fel a megfelelő csúcsterületet.

2.2.5 Precíziós vizsgálat

Pontosan szívja le a verbaszkozid és echinakozid referenciaoldatokat, fecskendezze be folyamatosan hatszor, és mérje meg a verbaszkozid és echinakozid csúcsterületeinek RSD-jét.

2.2.6 Stabilitási vizsgálat

Szívja le pontosan ugyanazt a vizsgálati oldatot, és mérje meg a "2.2.1" módszer szerint. Mérje meg 4 óránként, és tesztelje 24 órán keresztül. Számítsa ki a verbaszkozid és az echinacoside csúcsterületének RSD-jét!

2.2.7 Ismételhetőségi vizsgálat

A tesztoldat elkészítési módjának megfelelően készítsen 6 tesztoldatot, mérje meg azokat a "2.2.1" módszer szerint, és számítsa ki RSD-jüket a verbaszkozid és az echinacoside csúcsterülete alapján.

2.2.8 Minta-helyreállítási teszt

Pontosan mérjünk be 6 ismert verbakozid- és echinakozid-tartalmú vizsgálati oldatot, adjunk hozzá 1 ml verbaszkozid referenciaoldatot és echinakozid referenciaoldatot, mérjük meg a „2.2.1” módszer szerint, és számítsuk ki a visszanyerési arányt.

2.2.9 A nyugalmi szög meghatározása

Használja a billenési módszert. Töltsön meg egy téglalap alakú dobozt a gyógyászati ​​anyaggal közepes lazaságig, és fokozatosan döntse meg a dobozt, amíg a por el nem kezd kifolyni. A dőlésszög a nyugalmi szög. Legyen a dőlésszög magassága H, az alsó pedig L. A θ nyugalmi szög kiszámításának képlete a következő:

tanθ=H/L

2.2.10 A főzet arányának meghatározása

Vegyünk 50 g Cistanche deserticola szeletet, tegyük egy 1000 ml-es gömblombikba, adjunk hozzá 10-szeres mennyiségű vizet, áztassuk 30 percig, főzzük le 45 percig, szűrjük le 200 mesh-es szűrőkendővel forrón, adjunk hozzá 8-szoros mennyiséget. vizet a maradékhoz, főzzük 30 percig, szűrjük le 200 lyukbőségű szűrőkendővel, amíg meleg, és keverjük össze a szűrletet; csökkentett nyomáson (60 fok) koncentráljuk az extrakcióhoz, liofilizáljuk, hogy megkapjuk a Cistanche deserticola liofilizált port, és számítsuk ki a főzési sebességet a következő képlet szerint [5]:

ahol Y a főzet aránya; Wa a fagyasztva szárított por tömege; Wb a szeletek súlya.

2.2.11 Átviteli sebesség meghatározása

A "2.1.1" pont szerinti kromatográfiás körülmények alapján meghatározták a verbaszkozid és echinakozid tömeghányadát a Cistanche deserticola szeleteiben és fagyasztva szárított porában, és az átviteli sebességet a következő képlet szerint számítottuk ki:

ahol Z az átviteli sebesség; Wc a verbaszkozid és echinakozid tömeghányada fagyasztva szárított porban; Wd a verbaszkozid és echinakozid tömeghányada a szeletekben.

2.2.12 Megfigyelési mutatók

A különböző specifikációjú 㕮 抽 szeletek és hagyományos szeletek kivonathozamát, verbaszkozid és echinakozid teljes átviteli sebességét rögzítettem, valamint súlyozott pontozásos módszerrel értékelték a főzési sebességet, a verbaszkozid és az echinacoside teljes átviteli sebességét. A főzési sebesség meghatározásának tömegegyütthatója {{0}},5, a verbaszkozid és az echinakozid teljes átviteli sebességének súlytényezője 0,5 volt.

3 Eredmények és elemzések

3.1 A főkomponens-meghatározás módszertani vizsgálatának eredményei

A „2.2.1” kromatográfiás körülményeket alkalmazva a verbaszkozid és az echinakozid kromatográfiás elválasztása nagyobb volt, mint 1,5. A módszertani vizsgálat eredményeit a 2. táblázat mutatja be. Ez a módszer jó pontossággal, stabilitással, ismételhetőséggel, visszanyerési sebességgel és elválasztási hatással rendelkezik, és Cistanche deserticola szeletek és fagyasztva szárított por echinakozid és verbaszkozid tartalmának meghatározására használható.

3. táblázat A különböző specifikációjú Cistanche deserticola (Cistanche deserticola) szeletek tulajdonságainak vizsgálati eredményei

3.3 A hagyományos főzetdarabok és Yuzui főzetdarabok különböző specifikációinak eredményeinek elemzése és a Yuzui specifikációk kiválasztása

A 4. táblázatból látható, hogy a különböző méretű rágott darabok nyugalmi szögei kisebbek, mint a hagyományos daraboké. Minél kisebb a rágott darabok mérete, annál kisebb a nyugalmi szög. Az 5 mm-es kockának van a legkisebb nyugalmi szöge 30 fokban, ezt követi a 8 mm-es kocka 31,2 fokos szögben, és egyéb specifikációk nagyobbak, mint 35 fok.

A hagyományos darabokhoz képest minél kisebb a darabok mérete, annál nagyobb a főzési arány. Amikor a méret 2 mm × 2 mm, a főzési arány a legmagasabb, 63,61%, 2 mm × 4 mm, 60,33%, ezt követi az 5 mm-es kockák. Daraboknál ez 60,18%, az egyéb előírások pedig 60%-nál alacsonyabbak. Ha a rágó mérete 8 mm-es kocka, akkor az alapvetően megegyezik a hagyományos darabokkal. Nem volt szignifikáns mintázat a főzetdarabok verbaszkozid és echinacea össztartalmában, a fagyasztva szárított por összes verbaszkozid- és echinacea-tartalmában, valamint az átadási sebességben.

Eltérően a főtt és porított főzetdarabokban a nagyobb száraztészta-arányra és a főzött hatóanyagmennyiségre való törekvéstől [6], az Erzui főzetdarabok főzési sebességének és átadási sebességének megtartásának elve megegyezik a hagyományos főzetdarabokéval. A súlyozott pontozási módszert alkalmaztuk a verbascoside és az echinacea főzési sebességének és teljes átviteli sebességének összehasonlítására a különböző specifikációk között. Az eredmények azt mutatták, hogy a 8 mm-es kockaméretű darabok összpontszáma megfelelt a hagyományos darabokénak. Ezért ez a specifikáció a legjobb specifikációként használható a Cistanche deserticola nuzui darabokhoz.

3.4 A hagyományos és a 㕮嘴 szeletek minőségi egységességének összehasonlító elemzése

Ugyanabból a tételből a hagyományos és a 㕮嘴 szeletekből véletlenszerűen 7 alkalommal vettünk mintát 7 szett klinikai beállításának megfelelően, kezelésként, és összehasonlítottuk a 7 szelet nedvességtartalmát, főzési sebességét, összes verbaszkozid és echinakozid tartalmát és transzfer sebességét. . Amint az 5. táblázatban látható, a 7 hagyományos szelet nedvességtartalmának, főzési sebességének, verbaszkozid- és echinakozid-tartalmának, valamint a transzfer sebességének RSD értékei nagyobbak voltak, mint a 㕮嘴 szeleteké, és a 㕮嘴 szeletek RSD értékei mind kevesebb, mint 2%. Látható, hogy a Cistanche deserticola 㕮嘴 8 mm-es köbméteres darabjainak egyenletessége jobb, mint a hagyományos szeleteknél.

3.5 A hagyományos és a 㕮嘴 szeletek minőségi konzisztenciájának összehasonlítása

Annak érdekében, hogy a 㕮嘴 szeletek hordozzák a kínai orvoslás szeletek minőségi jellemzőit, például a biztonságot és a hatékonyságot, a hagyományos szeletekből készített standard főzetet használták áthidalóként a 㕮嘴 szeletek és hagyományos szeletek minőségi konzisztenciájának értékeléséhez. Gyógynövény-szövegkutatással, szakirodalmi kutatással, termőhely- és piackutatással meghatározták a Cistanche deserticola autentikus termőhelyét és fő termőhelyét, majd mintagyűjtést végeztek. Minden egyes termelési területen nem kevesebb, mint 3 tétel, összesen 15 tétel került begyűjtésre. A Cistanche deserticola különböző tételeit hagyományos szeletekre és 㕮 jiu szeletekre dolgoztuk fel, és meghatároztuk a szelethozamot, a főzési sebességet és a verbaszkozid és echinakozid átviteli sebességét.

Amint a 6. táblázat mutatja, 15 tétel hagyományos szelet hozama 95,1% és 98% között volt.{5}}%, átlagosan 96,54%, a főzési arány 48,34% és 61,88% között volt, átlagosan 55,93%, az átviteli sebesség 43,5% és 84,30% között volt, átlagosan 65,88%. 15 tétel főzött szelet hozama 81,80-97,70%, átlagosan 91,40%, a főzési arány 52,20% és 59,39%, átlagosan 58,46%, az átviteli sebesség 60,5% és 60,5% között mozgott. 72,80%, átlagosan 8,15%. Látható, hogy a Cistanche deserticola decocolt szelet 8 mm-es köbméteres darabjainak minőségi tulajdonságai viszonylag megegyeznek a hagyományos szeletek minőségi jellemzőivel.

3.4 A hagyományos és a 㕮嘴 szeletek minőségi egységességének összehasonlító elemzése

Ugyanabból a tételből a hagyományos és a 㕮嘴 szeletekből véletlenszerűen 7 alkalommal vettünk mintát 7 szett klinikai beállításának megfelelően, kezelésként, és összehasonlítottuk a 7 szelet nedvességtartalmát, főzési sebességét, összes verbaszkozid és echinakozid tartalmát és transzfer sebességét. . Amint az 5. táblázatban látható, a 7 hagyományos szelet nedvességtartalmának, főzési sebességének, verbaszkozid- és echinakozid-tartalmának, valamint a transzfer sebességének RSD értékei nagyobbak voltak, mint a 㕮嘴 szeleteké, és a 㕮嘴 szeletek RSD értékei mind kevesebb, mint 2%. Látható, hogy a Cistanche deserticola 㕮嘴 8 mm-es köbméteres darabjainak egyenletessége jobb, mint a hagyományos szeleteknél.

3.5 A hagyományos és a 㕮嘴 szeletek minőségi konzisztenciájának összehasonlítása

Annak érdekében, hogy a 㕮嘴 szeletek hordozzák a kínai orvoslás szeletek minőségi jellemzőit, például a biztonságot és a hatékonyságot, a hagyományos szeletekből készített standard főzetet használták áthidalóként a 㕮嘴 szeletek és hagyományos szeletek minőségi konzisztenciájának értékeléséhez. Gyógynövény-szövegkutatással, szakirodalmi kutatással, termőhely- és piackutatással meghatározták a Cistanche deserticola autentikus termőhelyét és fő termőhelyét, majd mintagyűjtést végeztek. Minden egyes termelési területen nem kevesebb, mint 3 tétel, összesen 15 tétel került begyűjtésre. A Cistanche deserticola különböző tételeit hagyományos szeletekre és 㕮 jiu szeletekre dolgoztuk fel, és meghatároztuk a szelethozamot, a főzési sebességet és a verbaszkozid és echinakozid átviteli sebességét.

Amint a 6. táblázat mutatja, 15 tétel hagyományos szelet hozama 95,1% és 98% között volt.{5}}%, átlagosan 96,54%, a főzési arány 48,34% és 61,88% között volt, átlagosan 55,93%, az átviteli sebesség 43,5% és 84,30% között volt, átlagosan 65,88%. 15 tétel főzött szelet hozama 81,80-97,70%, átlagosan 91,40%, a főzési arány 52,20% és 59,39%, átlagosan 58,46%, az átviteli sebesség 60,5% és 60,5% között mozgott. 72,80%, átlagosan 8,15%. Látható, hogy a Cistanche deserticola decocolt szelet 8 mm-es köbméteres darabjainak minőségi tulajdonságai viszonylag megegyeznek a hagyományos szeletek minőségi jellemzőivel.