Thai növények magas antioxidáns szinttel, szabadgyökfogó aktivitással, tirozináz- és kollagenáz-ellenes aktivitással

Kapcsolatba lépni:

Kapcsolatba lépni:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Moragot Chatatikun1 és Anchalee Chiabchalard2

Absztrakt

Háttér:A napfény ultraibolya sugárzása a reaktív oxigénfajták (ROS) túltermelését idézi elő, ami a bőr fotoöregedéséhez és hiperpigmentációs rendellenességekhez vezet. A természetes termékekből származó új fehérítő és ránctalanító vegyületek az utóbbi időben egyre nagyobb érdeklődést váltanak ki. A tanulmány célja olyan termékek felkutatása volt, amelyek csökkentik a ROS-t 14 thaiföldi növényi kivonatban.

Mód:Az összfenol- ésflavonoidtartalom,antioxidánstevékenység,anti-tirozináz14 thaiföldi növény különböző oldószerekkel (petroléter, diklór-metán és etanol) készített kivonatát hasonlítottuk össze.Antioxidánsaktivitását DPPH és ABTS vizsgálatokkal határoztuk meg.

Eredmények:A 14 thaiföldi növénykivonat összes fenoltartalma az etanolban volt a legmagasabb, ezt követi a diklór-metán és a petroléter kivonat.flavonoidtartalom általában a diklór-metán frakcióban volt megtalálható. Az öblítési aktivitás 7 és 99 százalék között mozgott, DPPH és ABTS vizsgálatokkal meghatározva. Az Ardisia elliptica Thunb etanolos levélkivonata. a legmagasabb fenoltartalommal, antioxidáns aktivitással és kollagenáz gátlással rendelkezett, míg a Cassia alata (L.) Roxb. kivonat volt a leggazdagabbflavonoidtartalom. Érdekes módon három növényi kivonat, amelyek az Annona squamosa L., Ardisia elliptica Thunb etanolos frakciói voltak. és Senna alata (L.) Roxb. magas voltantioxidánstartalmat és aktivitást, és mindkettőt jelentősen gátoltatirozinázés kollagenáz.

Következtetés:Eredményeink azt mutatják, hogy az Annona squamosa L., Ardisia elliptica Thunb. és Senna alata(L.) Roxb. ígéretes kozmetikai termékek, például ránctalanító szerek és bőrfehérítő termékek potenciális összetevőjeként.

Kulcsszavak:Ardisia elliptica Thunb.,Antioxidánstartalom, tisztító tevékenység,Anti-tirozinázaktivitás, Kollagénáz ellenes aktivitás

A flavonoid az egyik elemecistanche

Háttér

A napfényből származó ultraibolya sugárzás (UVR) a legjelentősebb kockázati tényező a nem melanoma és a melanomaskin rákos megbetegedések esetében [1]. A túlzott napfénynek való kitettség, különösen az UVA és UVB, a reaktív oxigénfajták (ROS) túlzott expresszióját idézi elő, amelyek károsítják a lipideket, fehérjéket és dezoxiribonukleinsavakat. A kollagén az extracelluláris mátrix fő alapja a bőr dermiszrétegében. A túlzott ROS fokozza a kollagenáz expresszióját, egy proteázt, amely lebontja a kollagént, ami a bőr öregedését és ráncosodását okozhatja [2]. Ezenkívül az UV-expozíció melanintermelést indukál, ami hiperpigmentációt eredményez.Tirozináza bőr pigmentációját beindító kulcsenzim. Először is, az L-tirozint a tirozináz 3,4-dihidroxifenilalaninná (L-DOPA) hidroxilezi. Ezt követően a tirozináz az L-DOPA-t DOPA-kinonná oxidálja. A DOPA-kinon tovább alakul DOPA-krómmá, amely 5,6-dihidroxi-indollá (DHI) vagy 5,6-dihidroxi-indol-2-karbonsavvá (DHICA)[3] alakul. A bőröregedés elleni jelenlegi kezelési módok közé tartozik a hidroxilsav az epidermális réteg lefejtésére, a retinoidok a durva bőr csökkentésére, valamint a bőrfeltöltő kollagén befecskendezésével a bőrbe. Ezeknek a kezeléseknek azonban vannak káros hatásai, például hiperpigmentáció, gyulladás, citotoxicitás, irritáció és bakteriális fertőzés [4]. A legnépszerűbb bőrfehérítő szer a hidrokinon, amely gátoljatirozináz, de mellékhatásai közé tartozik a dermatitis, az ödéma, az allergiás reakciók és az ochronosis [5]. A közelmúltban a kutatók olyan természetes termékekre összpontosítottak, amelyek gátolják az UV-indukált ROS-t, elnyomják a enzimeket és csökkentik a melanin képződést, mint a jelenlegi kezelések alternatíváit. Például aktív fitovegyületek, például arbutin, aloezin, gentizinsav,flavonoidok, heszperidin, édesgyökér, niacinamid, élesztőszármazékok és polifenolok gátolják a melanogenezist anélkül, hogy citotoxicitást okoznának a tomelanociták [6]. Így a növények csökkenthetik a ráncok kialakulását és a napfény által okozott hiperpigmentációt.

A tanulmány célja 14 thaiföldi növény, három különböző oldószerrel extrahált, ránctalanító és bőrfehérítő összetevőinek elemzése volt. Számaantioxidánsfenolok ésflavonoidokértékelték a szabad gyökfogó aktivitással, valamint az anti-kollagenáz- ésanti-tirozináztevékenységek. A kivonatoknak voltantioxidánsokamely megköti a szabadgyököket és gátolja a ráncok és pigmentek kialakulásában részt vevő enzimeket. Azonosítottuk az Ardisia elliptica Thunb., Annona squamosa L. és Senna alata (L.) Roxb fajokat, amelyek nagyon ígéretes jelöltek a kozmetikai termékekben való felhasználásra.

cistanche testépítés

Mód

Vegyszerek és reagensek

Folin Ciocalteu fenol reagens, nátrium-karbonát (Na2CO3), galluszsav, kvercetin, 10 százalékos alumínium-klorid, etanol, 2, 2-difenil-1- pikrilhidrazil (DPPH), aszkorbinsav, 2,2′-azino- bisz(3-etilbenztiazolin-6-szulfonsav)(ABTS), kálium-perszulfát, kojsav, gomba tirozináz (EC 1.14.18.1), 3,4-dihidroxi-L-fenilalanin (L- DOPA), N-[3-(2-furil)akriloil]-Leu-Gly-Pro-Ala (FALGPA), Clostridium histolyticumból származó kollagenáz (EC3.4.24.3), epigallocatechin-gallát (EGCG) A nátrium-kloridot, a kalcium-kloridot és a dimetil-szulfoxidot (DMSO) a Sigma-Aldrich Chemical Co.-tól (St. Louis, MO, USA) vásároltuk. A petrolétert, a diklór-metánt, az abszolút etanolt, a metanolt, a dinátrium-hidrogén-foszfátot és a nátrium-dihidrogén-foszfátot a Merck-től (Darmstadt, Németország) vásároltuk. Minden vegyszer és reagens analitikai minőségű volt.

Növényi anyagok és kitermelés

Tizenhárom fajta thai levelet gyűjtöttek a HRH Princess Sirindhorn Herb Gardenből, Rayong tartományból, Thaiföldről. A mangosztánokat a thaiföldi Chanthaburi tartományból szerezték be. Ezeket a növényeket hitelesítették és letétbe helyezték a thaiföldi Chulalongkorn Egyetem Természettudományi Karának Botanikai Tanszékének Herbáriumában. A tudományos neveket, utalványszámokat és növényi részeket az 1. táblázat tartalmazza. A növényeket Soxhlet készülékkel extraháltuk. Röviden, 10 g szárított növényt külön-külön petroléterrel, diklór-metánnal és etanollal extraháltunk. Az oldószereket vákuum rotációs bepárlóval, csökkentett nyomáson, MiVac Quattro koncentrátorral távolítottuk el. A koncentrált mintákat 100 mg/ml koncentrációjú DMSO-ban oldottuk fel, és felhasználásig -20 fokon tároltuk. A száraz extraktumok hozamát az 1. táblázatban adjuk meg a száraz növényi anyagok tömegszázalékában.

Az összes fenoltartalom meghatározása

A növényi kivonatok összes fenoltartalmát Folin-Ciocalteu módszerrel [7] értékeltük. Röviden, 50 ul 1 mg/ml koncentrációjú kivonatot desztillált vízben összekeverünk 50 ul 10%-os Folin-Ciocalteu reagenssel és 50 ul 0,1 M Na2CO3-mal. A reakcióelegyet 1 órán át szobahőmérsékleten, sötétben inkubáltuk. Az abszorbanciát 750 nm-en mikrolemez-leolvasóval (Biotek, USA) mértük. Standardként 1,56-100 ug/ml gallusavat használtunk. A kivonatok összes fenoltartalmát mg galluszsav-ekvivalensben (GAE) adjuk meg egy gramm száraz növényi anyagban. Minden mintát három párhuzamosban elemeztünk.

Flavonoid tartalom meghatározása

TeljesflavonoidA tartalom (TFC) meghatározása alumínium-klorid (AlCl3) kolorimetriás módszerrel történt [7]. Röviden, 50 ul 1 mg/ml koncentrációjú kivonatot 80%-os etanolban összekevertünk 50 ul 2%-os AlCl3-oldattal egy 96-os fallemez üregében. A lemezt 15 percig szobahőmérsékleten inkubáltuk. Az abszorbanciát 435 nm-en mikrolemez-leolvasóval mértük. Standardként 1,56-100 ug/ml kvercetin szolgált. A teljes flavonoidtartalom mg kvercetin-ekvivalensben (QE) van kifejezve egy gramm száraz növényi anyagban. A mintákat három párhuzamosban elemeztük.

DPPH tisztító tevékenység

A DPPH befogó aktivitási vizsgálatot Yamasaki és mtsai. [8]. A DPPH-oldatot frissen készítettük el minden vizsgálathoz. Röviden, 100 ug/ml kivonatokat vagy 1,56-100 ug/ml aszkorbinsav standard abszolút metanolban 180 ul DPPH-reagenssel összekevertük egy 96 lyukú lemezen. A reakcióelegyet 30 percig szobahőmérsékleten, sötétben inkubáltuk. Ezután az 517 nm-nél mért abszorbanciát mikrolemez-leolvasóval mértük. A kísérleteket három példányban végeztük. A DPPH 517 nm-en mért abszorbanciája 0,70 ± 0,02 volt, és a csökkent abszorbanciát mértük a befogó aktivitással. Az öblítési képességet a következőképpen számítottuk ki: tisztító aktivitás ( százalék )=100 százalék × [(훥A517 ofcontrol - 훥A517 of minta)/ 훥A517 of control]. A kivonatok DPPH-megkötő aktivitásának százalékos arányát az aszkorbinsavéval hasonlították össze, és mg C-vitamin-egyenértékben fejezték ki.antioxidánskapacitás (VCEAC) száraz növényi anyagonként. Az IC50-t a százalékos gátlás és a koncentráció grafikonjából határoztuk meg (0,78-100 ug/ml mindegyik kivonat esetében).

ABTS tisztító tevékenység

Az ABTS szabadgyök-fogó aktivitást a korábban leírtak szerint végezték [9]. Az ABTS• plus munkareagenst 7 mM ABTS• és 2,45 mM kálium-perszulfát 8:12 térfogat/térfogat arányú összekeverésével állítottuk elő. A munkaoldatot 16-18 órán át szobahőmérsékleten, sötétben tartottuk. Az ABTS• plus oldatot abszolút etanollal hígítottuk, hogy 734 nm-en 0,70 ± 0,02 abszorbanciát kapjunk. Ezután 100 ug/ml-es kivonatokat vagy 1,56-100 ug/ml aszkorbinsav standard oldatot abszolút etanolban adtunk 180 ul ABTS• plusz munkareagenshez egy 96 lyukú lemez lyukaiban. A lemezt 45 percig szobahőmérsékleten inkubáltuk, és az abszorbanciát 734 nm-en mértük. A kísérleteket három példányban végezték. A kimoshatóságot az öblítési aktivitás (százalék) alakjában számítottuk ki=100 × [(a kontroll 훥A734 - minta 훥A734)/ 훥A734 a kontroll]. A kivonatok ABTS-megkötő aktivitásának százalékos arányát az aszkorbinsavéval hasonlították össze, és C-vitamin-egyenértékben adták meg.antioxidánskapacitás (VCEAC)/g száraz növényi anyag. Az IC50-et a százalékos gátlás és a koncentráció görbéjéből határoztuk meg (15,62-1000 ug/ml mindegyik kivonat esetében).

A gomba tirozináz gátlásának meghatározása

A dopakrom módszert enyhe módosítással végeztük [10]. Röviden, 20 ul növényi kivonatot vagy DMSO-t (kontrollként), 20 ul 203,3 egység/ml gomba tirozinázt és 140 ul 20 mM foszfátpuffert (pH 6,8) előinkubáltunk 10 percig 25 °C-on. Az előinkubálás után 20 ul 2,5 mM L-DOPA-t adtunk hozzá, majd a mintákat további 20 percig 25 °C-on inkubáltuk. A dopakróm mennyiségét 492 nm-en mértük mikrolemez-leolvasóval. A kojicsav (KA) a gátlás pozitív kontrolljaként szolgált. A tirozináz aktivitás százalékos gátlását (százalék) százalékban fejeztük kitirozinázgátlás {{0}} × [(kontroll 훥A492 – minta 훥A492)/ 훥A492 kontroll]. A kivonatok és a kojsav végső koncentrációja 1, illetve 0,1 mg/ml volt. Az IC50-et százalékos görbe alapján határoztuk megtirozinázkoncentráció elleni gátlás (15,62-1000 ug/ml minden kivonatnál).

cistanche testépítés

A kollagenáz gátlás meghatározása

A kollagenáz gátlást egy korábban leírt módszerrel határoztuk meg [11]. Röviden: 40 ul Clostridium histolyticumból származó kollagenázt 0,25 egység/ml koncentrációban 10 mM CaCl2-t és 400 mM NaCl-t tartalmazó 50 mM Tricine pufferben és 10 ul 50 mM Tricine puffert kevertünk össze 10 ul-hez. vagy DMSO-t (kontrollként). Pozitív kontrollként epigallocatechin-gallátot (EGCG) használtunk. 15-perc szobahőmérsékleten végzett inkubálás után 50 ul N-[3-(2-furil)akriloil]-Leu-Gly-Pro-Ala-t (FALGPA) adtunk hozzá. Az abszorbanciát 340 nm-en mértük azonnal és folyamatosan 20 percig. Az enzimaktivitást az időintervallum alatti abszorbancia csökkenése alapján értékelték. A kollagenáz aktivitás százalékos gátlását 100 × [(A kontroll aktivitása – a minta aktivitása)/ a kontroll aktivitása] értékkel számítottuk ki. A kivonatok és az epigallocatechin-gallát végső koncentrációja 1, illetve 0,1 mg/ml volt. Az IC50-et a kollagenáz-gátlás százalékos görbéjéből határoztuk meg a koncentráció függvényében (15,62-1000 ug/ml mindegyik kivonat esetében).

statisztikai elemzések

Minden kísérletet három párhuzamosban végeztünk, és az eredményeket átlag ± standard hibaként fejeztük ki. A korrelációs együttható (R2) közöttantioxidánstartalom és antioxidáns aktivitás meghatározása SigmaPlotversion 12.2 szoftverrel történt. A két átlag közötti különbséget Student-féle t-próbával értékeltük ki. A különbségeket akkor tekintettük szignifikánsnak, ha a P-érték kisebb volt, mint 0,05.

Eredmények

Az extrakciós hozamok

Az 1. táblázat tartalmazza a tanulmányban felhasznált 14 thaiföldi növény tudományos nevét, utalványszámait és növényi részeit. A kivonatok százalékos hozama 0,73 és 31,11 tömegszázalék között változott (1. táblázat). Ardisia elliptica Thunb. A legmagasabb hozam a petroléteres (19,89 százalék) és az etanolos kivonatnál (31,11 százalék), míg a Garcinia mangostanaL. a legmagasabb százalékos hozam a diklór-metános extrakcióból származott (11,07 százalék).

14 thaiföldi növény fenoltartalma

Ezért a növények összes fenoltartalmát Folin-Ciocalteu módszerrel határoztuk meg. A kivonatokban a fenolok száma széles tartományban volt, amint azt a 2. táblázat mutatja, és az értékek 33--szeresére változtak a kivonatok között. Ardisiaelliptica Thunb. mindhárom típusú kivonatban a legmagasabb fenoltartalommal rendelkezett, míg a legalacsonyabb fenoltartalom a Stemona curtissi Hook-ban volt jelen. f. petroléter-kivonat.

14 thai növény flavonoid tartalma

Hasonló a fenolokhoz, összesenflavonoidtartalom jelentősen változott a növényfajok között, 2.04 ± 0,16 és 31,38 ± 0,81 mg QE/g szárazanyag között (2. táblázat). Általában a diklór-metános extrakció a legmagasabbflavonoidszintje a többi oldószerhez képest. Az összes kivonat közül a legnagyobb flavonoid mennyiséget a Senna alata (L.) Roxb levelek etanolos kivonatában találtuk (31,38 ± 0,81 mg QE perg szárazanyag). Másrészt az Ardisia elliptica Thunb. (23,14 ± 1,10 mg QE/g szárazanyag). a diklór-metán frakcióban volt a leggazdagabb flavonoid tartalma. Ezenkívül az Ipomoea pes-caprae (L.) R.br. a petroléteres kivonatok közül a legmagasabb flavonoid tartalommal rendelkezett (27,48 ± 2,59 mg QE/g szárazanyag). A legalacsonyabb kimutatható flavonoid szint a Daturametel L etanolos kivonatában volt. Ezzel éles ellentétbenflavonoidoknem találtak a Stemona curtisii Hook.f. petroléteres és diklór-metános kivonataiban, valamint a Streblus asper Lour petroléteres kivonataiban. és Phyllanthus acidus (L.) Skeels. A teljes flavonoidtartalom nem korrelált az összes fenoltartalommal (R2=0.0284, 1a. ábra).

DPPH gyökfogó aktivitás 14 thaiföldi növény különböző kivonataiban

A DPPH indikátort használó szabad gyökfogó tevékenység alapvetőantioxidánsvizsgálat [12]. Amint a 3. táblázat mutatja, a kivonatok tisztító aktivitása nagymértékben változott, 7,11 ± 0,59 százalék és 96,17 ± 0,05 százalék között. Az Ardisia ellipticaThunb etanolos kivonat volt a legmagasabb, 96 százalékos tisztító aktivitással. Ráadásul a következő legerősebbantioxidáns activities (>90 százaléka ) volt megfigyelhető a Stemonacurtisii Hook.f., Annona squamosa L., Phyllanthus acidus(L.) Skeels etanolos frakcióiban. és Garcinia mangostana Linn. A többi oldószert tekintve a petroléter frakciók közül is az Ardisia elliptica Thunb volt a leggazdagabb tisztító aktivitással, a diklór-metán frakciók közül pedig a Garcinia mangostana L. rendelkezett a legmagasabb antioxidáns aktivitással. A legalacsonyabb tisztító képességet a Croton sublyratus Kurzban mutattuk ki a petroléter frakcióban. 7 petroléteres kivonatnál és 2 diklór-metános kivonatnál nem észleltünk tisztító aktivitást.

ABTS gyökfogó aktivitás 14 thaiföldi növény különböző kivonataiban

AntioxidánsA vizes és lipidfázisok aktivitását a növényekben ABTS-t alkalmazó színtelenítési vizsgálattal is értékelték [13]. Ismét az aszkorbinsav szolgált standardkéntantioxidáns. As with the DPPH assay, scavenging activity in the ABTS assay varied greatly among the plant preparations with a similarly broad range from 8.03 ± 0.54% to 99.84 ± 0.07% (Table 4). Furthermore, the next strongest scavenging activities (> 90%) were observed in the same 4 ethanol fractions as shown by the DPPH assay. In addition, no scavenging activity was found in the same 5 petroleum ether extracts. In general, the values obtained with the ABTS assay were higher than the DPPH values. Hence, activity in the ethanol extract from Senna alata (L.) Roxb. was now observed as >Az Annona squamosa L. és Ipomoea pes-caprae(L.) R.br összes diklór-metános kivonatában és petroléteres kivonatában scavenger aktivitást mutattak ki. amelyet a DPPH vizsgálat nem mutatott ki.

A tirozináz aktivitás gátlása növényi kivonatokkal

A thaiföldi növényekből származó vegyületek gombagátló képességetirozinázAz aktivitást in vitro vizsgálattal értékeltük, szubsztrátként L-DOPA-val. A kojicsav ismert inhibitorként szolgált, és 93,38 ± 1,63 százalékos maximalenzimatikus gátlást okozott. Amint az 5. táblázatban látható, csak az etanolos kivonatok gátolták szignifikánsan a tirozináz aktivitást, az Ardisia elliptica Thunb esetében. az előkészületek kivételek. Az Ardisia elliptica Thunb. petroléter és diklór-metán frakciói. körülbelül 20 százalékkal gátolta a tirozináz aktivitást. A Rhinacanthus nasutus (L.) Kurz etanolfrakciója (IC 50-értéke 271,50 ug/ml) volt a legerősebb tirozináz inhibitor, ezt követték az Ardisia ellipticaThunb etanolos kivonatai. és Phyllanthus acidus (L.) Skeels. Más etanolfrakciók szignifikánsan, több mint 20%-kal csökkentették az enzimaktivitást (5. táblázat), míg a többi kivonat nem mutatott kimutatható gátló aktivitást (az adatokat nem mutatjuk be).

A kollagenáz aktivitás gátlása 14 növény által

A kivonatok anti-kollagenáz aktivitását Clostridium histolyticum kollagenázzal és szubsztrátként N-[3-(2-furil)akriloil]-Leu-Gly-Pro-Ala (FALGPA) alkalmazásával tesztelték. Az epigallát-katekin-gallát ismert kollagenáz inhibitort és 90,51 ± 2,79 százalékkal csökkentette az enzimaktivitást. Az 5. táblázatból látható, hogy csak 4 etanolos kivonat tartalmazott kimutatható kollagenáz gátló aktivitást. A gátlást okozók közül az Ardisia elliptica Thunb. (IC 50-értéke 157,78 ug/ml) mutatta a legmagasabb szintű kollagenáz-gátlást, ezt követi az Annona squamosa L. (426,67 ug/ml IC 50-érték), a Senna alata (L.) Roxb. és a Croton sublyratusKurz. rendelés. Más növényi kivonatok nem gátolták jelentősen a kollagenáz aktivitást az ebben a vizsgálatban alkalmazott reakciókörülmények között (az adatokat nem mutatjuk be).

Vita

A napsugárzás jelentős környezeti tényező a bőrkárosodásban, és bőrrákot válthat ki [14]. Az UV sugárzás gyulladást elősegítő választ, extracelluláris mátrix lebomlását ésantioxidánskimerülés [15, 16]. Az UV reaktív oxigénfajták (ROS) képződését idézi elő, amelyek hiperpigmentációt és kollagenáz expressziót váltanak ki [17, 18]. Vizsgálatunk során 14 thaiföldi növényt vizsgáltunk meg három különböző oldószerrel extrahált ránctalanító és bőrfehérítő összetevőként. Ebben a tanulmányban petrolétert, diklór-metánt és etanolt használtunk növényi extrakcióhoz a Soxhlet készülékkel. Ardisia elliptica Thunb. a legnagyobb hozamot a petroléteres és etanolos kivonatban érte el, míg a Garcinia mangostana L.-nek volt a legmagasabb a diklór-metános extrakció hozama. Ezek az oldószerek növekvő polaritású szerves oldószerek sorozatát jelentik. A százalékos hozamok eltérése a növényfajtól függött, és valószínűleg a növények kémiai összetételében mutatkozó különbségeket tükrözte.

A fenolok a növényekben található fitokemikáliák legnagyobb csoportját alkotják, és különféle biológiai aktivitásaik vannak állatokban, beleértve az embert is [19]. A növények összes fenoltartalmát Folin Ciocalteu módszerrel határoztuk meg. Összességében az etanol frakció volt a leggazdagabb fenoltartalommal, ezt követi a diklór-metán, míg az alacsony polaritású petroléter a legalacsonyabb fenoltartalmú a többi oldószerhez képest. Ebben a vizsgálatban az Ardisia elliptica Thunb. mindhárom típusú kivonatban a legmagasabb fenoltartalommal rendelkezett. Korábbi vizsgálatokban az Ardisia elliptica Thunb. diklór-metán levélkivonatának fenoltartalma 101 ± 1,3 mg GAE/g száraz növényi anyag, ami több, mint egy gallykivonat tartalma [20]. Ezenkívül az érett Ardisia gyümölcs metanolos kivonata 5,64 ± 0,37 g GAE-t tartalmazott 100 g kivonatban [21]. Ezért az Ardisia ellipticaThunb levelei és termései. magas fenoltartalommal rendelkeznek, amely könnyen extrahálható metanollal, diklór-metánnal és etanollal.

Flavonoidokpigmentek a virágokban, levelekben, gyümölcsökben és magvakban. Ezek a vegyületek a növények másodlagos metabolitjai, és széles körben elterjedtek a növényfajok között [22]. Ezt követően a thaiföldi növények flavonoidtartalmát alumínium-klorid kolorimetriás vizsgálattal értékelték. Eredményeink azt mutatták, hogy a legnagyobb flavonoid mennyiséget a Senna alata (L.) Roxbleaves etanolos kivonatában találtuk. Egy korábbi tanulmányban a Senna alata (L.) Roxb vízben (4,25 mg QE/100 g) és metanolfrakciókban (3,97 mg QE/100 g) magas flavonoid tartalmat találtak.[23] Így a Senna alata (L.) Roxb készítményeknek magas a flavonoid tartalma, ha nagy polaritású oldószerekkel, például etanollal, metanollal és vízzel extrahálják. Ardisiaelliptica Thunb. a diklór-metán frakcióban volt a leggazdagabb flavonoid tartalma. Ennek a növénynek a gyümölcse magas flavonoid-tartalommal is rendelkezik, 36,91 ± 2,37 mg QE per gramm kivonat [24]. Így az Ardisia elliptica Thunb termése és levelei. gazdag flavonoidok. Az összes flavonoid tartalom nem korrelált az összes fenoltartalommal. Azonban,flavonoidokszámos biológiai aktivitással rendelkeznek, például UVB-védelem [25], gyulladáscsökkentő [26], anti-hepatotoxicitás [27] és rákellenes [28].

Szabadgyökfogó tevékenység DPPH és ABTSassay segítségével. A DPPH vizsgálatban a DPPH egy hidrogénatomot kap egyantioxidáns[29]. Megállapítottuk, hogy az Ardisiaelliptica Thunb etanolos kivonat rendelkezik a legmagasabb tisztító aktivitással. Más kutatók az Ardisia elliptica Thunb diklór-metán frakcióiról is beszámoltak. A levelek és szárak magas szintűantioxidánsA DPPH vizsgálattal meghatározott aktivitást, és ezért ezt a növényt nagyon érdekes gyógynövényes kezelésként tovább vizsgálni [20]. A nagy polaritású etanolos frakció kivonatai egyértelműen jobban mutattakantioxidánsaktivitása, mint a diklór-metánt és petrolétert tartalmazó, alacsonyabb polaritású frakciók. Az etanolos kivonatok a többi kivonathoz képest a legmagasabb szintű szabad gyökfogó aktivitást mutatták, és minden etanolos kivonat aktív volt. Az ABTS vizsgálatban az ABTS-t kálium-perszulfát hozzáadásával gyökké alakítják. Antioxidáns jelenlétében a reaktív ABTS-kation (vagy ABTS• plus ) színtelen természetes formájává alakul [9]. A DPPH assay-vel összhangban az etanolos kivonatok tartalmazták a legmagasabb szintű scavenger aktivitást a többi kivonathoz képest. Ismételten a legmagasabb tisztítóaktivitású etanol-, diklór-metán- és petroléter-kivonat ugyanazon növényekből származott, amint azt a DPPH-vizsgálat is mutatja. A DPPH- és az ABTS-vizsgálatok eredményei a vártnak megfelelően erősen korreláltak (1f. ábra).

Azonban a teljesflavonoida növényi kivonatok tartalma nem korrelált a DPPH-vizsgálattal (1c. ábra) vagy az ABTSassay-vel (1e. ábra) kimutatott szabad gyökfogó aktivitással. Megállapításaink szerint nincs jelentős kapcsolat közöttflavonoidA tartalom és a scavenger aktivitás az ABTS vizsgálattal összhangban van más kutatók eredményeivel [30]. Ezzel szemben a növényi készítmény összes fenoltartalma pozitív korrelációt mutatott a mindkét teszttel mért scavengeraktivitással (1b. és d. ábra), ami nem ért egyet egy korábbi vizsgálattal [31]. Figyelemre méltó, hogy az öblítési aktivitás a teljes fenoltartalomtól és a nagy polaritású oldószerektől, például az etanoltól és a diklór-metántól függött. Ezek az eredmények arra utalnak, hogy a fenoltartalom a fő alkotóelemantioxidánstevékenység a 14 thaiföldi üzemben.

A melanint, a bőr- és hajszín fő pigmentjét a melanociták szintetizálják a melanoszómákban. A melanin túltermelése és felhalmozódása a bőrben topigmentális rendellenességekhez és esztétikai problémákhoz vezethet. Hiperpigmentáció a bőr napfénynek kitett területein fordul elő [32]. A melanogenezisbentirozináza kulcsenzim a sebesség-korlátozó lépésben, amelyben az L-tirozint L-DOPA-vá hidroxilálják, amely tovább oxidálódik DOPAkinonná. Ezt követően DOPAchrome-má alakul, amely a melaninszintézis szubsztrátja [3]. alszabályozásatirozinázaktivitást feltételezik, hogy felelős a csökkent melanintermelésért. Az új fehérítő fitokémiai vegyületek természetes termékekből történő kifejlesztése az utóbbi időben növekvő tendenciává vált. Eredményeink azt mutatták, hogy a Rhinacanthus nasutus (L.) Kurz etanolos frakciója volt a legerősebb tirozináz inhibitor, ezt követi az Ardisia elliptica Thunb etanolos kivonata. és Phyllanthus acidus (L.) Skeels. Nyilvánvaló, hogy 14 növényből 7 növény magas fenoltartalmú, különösen az Ardisiaelliptica Thunb. és Annona squamosa L. Sőt,Senna alata (L.) Roxb. volt a leggazdagabbflavonoidtartalom, amely gátolhatja a tirozináz aktivitást. A növényekből származó aktív vegyületek, mint az arbutin, aloezin, gentizinsav, flavonoidok, heszperidin, édesgyökér, niacinamid, élesztőszármazékok és polifenolok, gátolhatják a melanogenezist anélkül, hogy citotoxicitást okoznának a melanocitáknak [6].

A kollagenáz egy transzmembrán cink-peptidáz, amely elhasítja a kollagén X-Gly kötését. A kollagén bőséges szerkezeti fehérje és extracelluláris mátrix komponens [33]. A kollagén és elasztin rostok csökkenése az életkorral és az UV sugárzás okozta károsodások növekedésével ráncos bőrt okoz[34]. A kollagenáz gátlást a bőröregedés megelőzésére javasolták. A vizsgálatunkban gátlást okozók közül az Ardisiaelliptica Thunb. a legmagasabb szintű kollagenáz-gátlást mutatta, ezt követi az Annona squamosa L., a Senna alata(L.) Roxb. és a Croton sublyratus Kurz a rangsorban. Egy korábbi tanulmányban a kakaóhüvely-kivonat fenolsavat ésflavonoidokamely gátolta az elasztáz és kollagenáz aktivitást [35]. Nevezetesen három etanolos kivonat (Ardisia elliptica Thunb., Annona squamosa L. és Senna alata (L.) Roxb.) gátolta mindkettőttirozinázés kollagenáz. Ezek a növények magas fenol- és flavonoidszinttel is rendelkeztek, illantioxidánsÉrdekes módon ezek a kivonatok felhasználhatók kozmetikai termékek összetevőjeként.

Következtetés

Eredményeink azt mutatják, hogy 14 thaiföldi növény kivonatai különböző mértékű összes fenolos ésflavonoidtartalom, valamint szabad gyökfogó tevékenység, az extrakciós oldószerektől függően. A teljes fenoltartalom és a szabad gyökfogó aktivitás között a DPPH és az ABTS vizsgálatok alapján nagy korreláció volt kimutatható. Az Ardisia ellipticaThunb etanolos frakciója. a legmagasabb fenoltartalommal rendelkezett, ezt követte az Annona squamosa L. Mindkét növény szignifikánsan gátolta a tirozináz és kollagenáz aktivitást, míg a Rhinacanthusnasutus (L.) Kurz mutatta a legmagasabb tirozináz gátlást. Sőt, Senna alata (L.) Roxb. flavonoid tartalomban volt a leggazdagabb, és kiállították istirozinázés a kollagenáz gátló viselkedés. A három növény etanolos frakciója, nevezetesen az Annona squamosa L., az Ardisia elliptica Thunb és a Senna alata (L.) Roxb., potenciálisan ránctalanító és bőrfehérítő kozmetikai termékek összetevője lehet. További vizsgálatok szükségesek ezen kivonatok aktív komponenseinek és biztonságosságának vizsgálatához.

cistanche testépítés

Hivatkozások

1. Moehrle M. Szabadtéri sportok és bőrrák. Clin Dermatol. 2008;26(1):12–5.

2. Lopez-Camarillo C, Ocampo EA, Casamichana ML, Perez-Plasencia C, Alvarez-Sanchez E, Marchat LA. Protein kinázok és transzkripciós faktorok aktiválása a bőr UV-sugárzására adott válaszként: implikációk a karcinogenezisre. Int J Mol Sci. 2012;13(1):142–72.

3. Iwata M, Corn T, Iwata S, Everett MA, Fuller BB. A tirozináz aktivitás és a bőrszín közötti kapcsolat az emberi fitymákban. J Investig Dermatol.1990;95(1):9–15.

4. Stern RS. Photoaging kezelése. N Engl J Med. 2004;350(15):1526–34.

5. Levin CY, Maibach H. Exogenous ochronosis. Frissítés a klinikai jellemzőkről, a kórokozókról és a kezelési lehetőségekről. Am J Clin Dermatol. 2001;2(4):213–7.

6. Zhu W, Gao J. Botanikai kivonatok használata helyi bőrvilágosító szerekként a bőr pigmentációs rendellenességeinek javítására. J Investig DermatolSymp Proc. 2008;13(1):20–4.

7. Zongo C, Savadogo A, Ouattara L, Bassole IHN, Ouattara CAT, Ouattara AS, Barro N, Koudou J, TraoreI AS. Az Ampelocissus grantii (baker) Planch polifenoltartalma, antioxidáns és antimikrobiális hatása. (Vitaceae): Burkina Fasóból származó gyógynövény. Int J Pharmacol. 2010; 6 (880–887)

8. Yamasaki K, Hashimoto A, Kokusenya Y, Miyamoto T, Sato T. Elektrokémiai módszer a nyers gyógyszerek metanolos kivonatainak antioxidáns hatásainak becslésére. Chem Pharm Bull (Tokió). 1994;42(8):1663–5.

9. Re R, Pellegrini N, Proteggente A, Pannala A, Yang M, Rice-Evans, C. Antioxidáns aktivitás javított ABTS gyökkation-elszíntelenítési vizsgálattal. Ingyenes Radic Biol Med. 1999;26(9–10):1231–7.

10. Nithitanakool S, Pithayanukul P, Bavovada R, Saparpakorn P. Moleculardocking studies and anti-tyrosinase activity of Thai mango seed kernelextract. Molekulák. 2009;14(1):257–65.

11. Bonvicini F, Antognoni F, Iannello C, Maxia A, Poli F, Gentilomi GA. A Pancratium Illyricum L. releváns és szelektív aktivitása Candida Albicansclinical izolátumokkal szemben: kombinált hatás az élesztő növekedésére és virulenciájára. BMCComplement Altern Med. 2014;14(1):409.

12. Sharma OP, Bhat TK. A DPPH antioxidáns vizsgálatot felülvizsgálták. Food Chem. 2009;113(4):1202–5.

13. MacDonald-Wicks LK, Wood LG, Garg ML. A biológiai antioxidáns kapacitás in vitro meghatározásának módszertana: áttekintés. J Sci Food Agric. 2006;86(13):2046–56.

14. Armstrong BK, Kricker A. Az UV-indukált bőrrák epidemiológiája. JPhotochem Photobiol B Biol. 2001;63(1–3):8–18.

15. Bashir MM, Sharma MR, Werth alelnök. Az UVB és a gyulladást elősegítő citokiness-szinergikusan aktiválják a TNF-termelést a keratinocitákban a fokozott géntranszkripció révén. J Investig Dermatol. 2009;129(4):994–1001.

16. Watson RE, Gibbs NK, Griffiths CE, Sherratt MJ. A bőr extracelluláris mátrixának UV-sugárzás által okozott károsodása. Antioxid redox jel. 2014;21(7):1063–77.

17. D'Orazio J, Jarrett S, Amaro-Ortiz A, Scott T. UV-sugárzás és a bőr. Int JMol Sci. 2013;14(6):12222–48.

18. Pittayapruek P, Meephansan J, Prapapan O, Komine M, Ohtsuki M. Role ofmatrix Metalloproteinases in Photoaging and Photocarcinogenesis. Int J MolSci. 2016;17(6):868.

19. Sulaiman CT, Balachandran I. Összes fenol és összes flavonoid kiválogatott indiai gyógynövények. Indian J Pharm Sci. 2012;74(3):258–60.

20. Mamat N, Jamal JA, Jantan I, Husain K. Xanthine Oxidase inhibitor and DPPH gyökfogó tevékenység néhány Primulaceae fajnál. SainsMalaysiana. 2014;43(12):1827–33.

21. Wetwitayaklung P, Charoenteeraboon J, Limmatvapirat C, Phaechamud T. Egyes Thaiföldön termesztett thai és egzotikus gyümölcsök antioxidáns hatásai.Res J Pharm, Biol Chem Sci. 2012;3(1):12–21.

22. Falcone Ferreyra ML, Rius SP, Casati P. Flavonoidok: bioszintézis, biológiai funkciók és biotechnológiai alkalmazások. Front Plant Sci. 2012;3:222.

23. Devendra K, Kiran D, Ritesh V, Satyendra B, Abhishek K. To assessment of Total Phenolics and Flavonoids in different Plant of Chhattisgarh. JPharmacognosy Phytochem. 2013;2(4):116–8.

24. Siti-Azima AM, Northam A, Nurhuda M. A SyzygiumCumini és ArdisiaElliptica antioxidáns hatásai becsült fenolos összetételük és kromatikus tulajdonságaik vonatkozásában. Int J Biosci Biochem Bioinform. 2013;3(4):314–7.

25. Solovchenko A, Schmitz-Eiberger M. Bőrflavonoidok jelentősége az UV-B védelem szempontjából alma gyümölcsökben. J Exp Bot. 2003;54(389):1977–84.

26. Gonzalez-Gallego J, Sanchez-Campos S, Tunon MJ. Az étrendi flavonoidok gyulladásgátló tulajdonságai. Nutr Hosp. 2007;22(3):287–93.

27. Sudha A, Sumathi K, Manikandaselvi S, Prabhu NM, Srinivasan P. A Lippia Nodiflora L. nyers flavonoid frakciójának hepatotoxikus aktivitása, onethanol által kiváltott májkárosodás patkányokban. Ázsiai J Anim Sci. 2013;7(1):1–13.

28. Sak K. Diétás flavonoidok citotoxicitása különböző humán ráktípusokon.Pharmacogn Rev. 2014;8(16):122–46.

29. Kedare SB, Singh RP. Az antioxidáns vizsgálat DPPH módszerének keletkezése és fejlesztése. J Food Sci Technol. 2011;48(4):412–22.

30. Boo HO, Kim TS, Koshio K, Shin JH, Chon SU. Összes fenolszint és antioxidáns tulajdonságok több vietnami vadon élő növény metanolos kivonatában. Koreai J Plant Res. 2011;24(6):659–65.

31. Dudonne S, Vitrac X, Coutiere P, Woillez M, Merillon JM. 30 iparilag fontos növényi kivonat antioxidáns tulajdonságainak és összes fenoltartalmának összehasonlító vizsgálata DPPH, ABTS, FRAP, SOD és ORAC vizsgálatokkal. J AgricFood Chem. 2009;57(5):1768–74.

32. Slominski A, Tobin DJ, Shibahara S, Wortsman J. Melanin pigmentáció inmammalian skin and its hormonal Regulation. Physiol Rev. 2004;84(4):1155–228.

33. Vállak MD, Raines RT. A kollagén szerkezete és stabilitása. Annu RevBiochem. 2009;78:929–58.

34. Cua AB, Wilhelm KP, Maibach HI. Az emberi bőr rugalmas tulajdonságai: kor, nem és anatómiai régió viszonya. Arch Dermatol Res. 1990;282(5):283–8.

35. Karim AA, Azlan A, Ismail A, Hashim P, Gani SSA, Zainudin BH, Abdullah NA. A kakaóhüvely kivonat fenolos összetétele, antioxidáns, ránctalanító és tirozináz gátló hatása. BMC Complement Altern Med. 2014;14(381):1–13.