A cistanche összglikozidnak van hatása a szaglásra?

Kapcsolatba lépni:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

A cistanche összglikozidok hatása a patkányok szaglóburkoló sejtjére és neurotróf faktorok szekréciójára

Li Chuangfeng, Guo Jinyu, Zhang Xu, Liu Yunnan

A gerincvelő sérülése (SCI) a központi idegrendszer súlyos sérüléseidegrendszer, ami a teljes trauma {{0}},2 százalékát – 0,5 százalékát teszi ki. A gerinctörések 16–40 százalékát gerincvelő-sérülés bonyolítja, gyakran súlyos rokkantságot okozva, ami a mindennapi élet nehézségeihez vezet, amelyek befolyásolják a betegek életminőségét, és nagy terhet rónak a családra és a társadalomra.SzaglószerviAz ensheathing cell (OEC) az idegragasztó egy speciális típusa. A plazmasejtek az agyba vándorolhatnakszaglószerviidegi axonok, és számos növekedési faktort, például NGF-et, GDNF-et, BDNF-et, NT-3-t, neuropeptid-Y-t és S-100-t választanak ki. Ezen jellemzői miattszaglószerviensheaching sejtek, az OEC-ket az egyik ígéretes magsejteknek tekintik az SCI helyreállítására szolgáló sejttranszplantációhoz. Jelenleg az SCI kezelése a rehabilitációs medicina területén elsősorban az átfogó rehabilitáción alapul. A hatékonyabb módszer megtalálása érdekében az alábbi kutatásokat végeztük a hatásárólcistancheteljesglikozidokaz OEC-eken:

Cistanche teljes glikozid a szaglóburkoló sejtek számára

1 Anyag és módszer

1.1 Kísérleti anyagok

Wistar patkány (a Belső-Mongóliai Egyetem Állatközpontja biztosítja);cistancheteljesglikozidok, DMEM/F12 táptalaj, magzati borjúszérum (FCS), poli-D-lizin, arabinozid (Ara-C), tripszin, D-Hanks oldat, nyúl anti-p75NGFR (Santa Cruz), ELISA kit (Promega), sejtinkubátor (Thermo-HEPA Class 100), fordított fáziskontraszt mikroszkóp (Olympus CKX41, Japán), ultra-tiszta munkaasztal (Suzhou Antai Air Technology Co., Ltd.) A cég, SW-CJ-2FD), enzim címkeanalizátor (Wellscan MKH), áramlási citométer stb.

1.2 Kutatási módszerek

1.2.1 OEC-tenyésztés, tisztítás és azonosítás: A Wistar patkányokat lefejeztük, és 5 percig borban áztattuk. Az elülső koponyát kinyitották, hogy feltárják aszaglószerviizzó. A kétszaglószervihagymákat teljesen eltávolítottuk preparáló mikroszkóp alatt. Mossa meg D-Hanks oldatban; vágja aszaglószervimikrosebészeti ollóval, adjunk hozzá 2 ml 0,25 százalékos pankreatint, és inkubáljuk 37 fokon 20 percig; adjunk hozzá 10% borjúszérumot tartalmazó D MEM/F12 táptalajt egy 2 ml-es centrifugacsőhöz. Az emésztés középen megszakadt; a busz pipetta felszívta a nem teljesen emésztett szövetet 800 fordulat/perc sebességgel, és 5 percig centrifugáltuk, majd a felülúszót eldobtuk; végül felhasználta a kondicionált táptalajt (20% FCS plusz 20|i, mol/LForskolin plus 20|ig/mlBPE plus DMEM/F12) Készítsd belőle lx 107 ml-es egysejtű szuszpenziót, oltsd be egy polilizinnel bevont sejttenyésztő lombikba, helyezd 37 fokos, 5 százalékos CO2 inkubátorban, majd adjunk hozzá Arac A tisztítást 36 óránál végeztük. Használjon nyúl anti-p75E és FITC-jelölt kecske anti-nyúl IgG másodlagos antitestet immunhisztokémiai sejtazonosításhoz és fluoreszcens mikroszkópos megfigyeléshez.

1.2.2 Használjon MTT-t és áramlási citometriát a hatás meghatározásáhozcistanche összes glikozidtovábbszaglószervisejtek burkolása: oltsa be a tenyésztett és tisztítottszaglószerviburkoljuk be a sejteket egy 96-lyuklemezbe 1X106-on, és adjuk hozzácistanche összes glikozid(a hatáskoncentráció Ijig/ml, 10mg/ml, 100mg/ml), mérje meg az OD értéket és mérje meg a sejtáramlási citometriát 24 órás hatás után. Állítsa be a Vezérlőcsoportot ésCistanche összglikozidokkülönböző koncentrációs csoportok: A csoport (kontroll csoport): Negatív kontrollként szérumtartalmú táptalajt használunk; B csoport (cistanche összes glikozidalacsony koncentrációjú csoport: llig/ml); C csoport (cistanche összes glikozid közepes koncentrációjú csoport: L10jxg/MK); D csoport (cistanche összes glikozidmagas koncentrációjú csoport: 100|xg/ml: 15 patkány minden csoportban.

1.2.3. A felülúszó neurotróf faktor tartalmának meghatározása ELISA-val: oltsa be a tenyésztett és tisztítottszaglószervicellák beburkolása egy 6-lyuklemezbe 1x106 méretben, add hozzácistanche összes glikozid(ugyanaz a koncentráció, mint fent) 24 óra elteltével, és 24 órán át hatni, és a felülúszót külön gyűjtsük össze. Mentés dátuma: -80 Long. A folyadék idegnövekedési faktorainak tartalmát ELISA módszerrel határoztuk meg.

1.3 Statisztikai elemzés

A jelen tanulmány adatait mérési adatokként kezeljük, és a kapott adatokat átlag ± szórásban fejezzük ki, a statisztikai elemzéshez pedig SPSS 11.{1}} statisztikai szoftvert használunk. A kapott adatokat varianciaanalízissel elemezzük, és P<0.05 indicates="" that="" there="" is="" a="" significant="">

2 Eredmények

2.1 A hatásacistancheösszes glikozid beszaglószervibeburkoló sejtek

2.1.1 A metil-oxazolil-tetrazol módszerrel (MT) végzett meghatározási eredmények: A csoport: 0,617±0,149; B csoport: 0,589±0,147; C csoport: 0,761±0,138; D csoport: 0.732±0.234. ÖsszehasonlitásCistanche összglikozidok group (B) and Control group (A), P>0.05, a különbség nem volt szignifikáns;Cistanche összglikozidok10 mg/ml, 100 mg/ml koncentrációs csoport (C, D) összehasonlítva a kontrollcsoporttal (A) P<0.05, the="" difference="" is="">

2.1.2 Az áramlási citometriás meghatározás eredménye az 1. ábrán látható. A Kontroll csoporthoz képest acistanche összes glikozidcsoport magasabb volt, mint a kontrollcsoport, és az apoptotikus sejtek százalékos aránya alacsonyabb volt, mint a kontrollcsoportban.

2.2 Enzim-kapcsolt immunszorbens vizsgálat (ELISA) eredményei

A vizsgálati eredmények azt mutatták, hogy a glia sejtvonalból származó neurotróf faktor (GDNF) tartalma: adagolás előtt: 302,1±16,6 pg/ml, A csoport: 340,5±13,2 pg/ml; B csoport: 333,2±23,6 pg/ml; C csoport: 355,2±17,6 pg/ml; D csoport; 379,2±15,3 pg/ml. Az előkezeléshez képest a GDNF-tartalom jelentősen megnőtt; a Kontroll csoporthoz (A) képest a GDNF tartalma aCistanche összglikozidokA 100 mg/ml koncentrációjú csoport (D) szignifikánsan megemelkedett.

3 Vita

Az axonok regenerációjának nehézsége az egyik fő oka annak, hogy a gerincvelő sérülése után nehéz felépülni. Az OEC-k szerepet játszanak a központi idegsejtek axonjainak regenerációjában, amelyeket más típusú sejteket nehéz pótolni. Az elmúlt években a kutatások aszaglószervia beburkoló sejtek forró ponttá váltak.SzaglószerviA burkolósejtek a gliasejtek egy speciális típusa, amelyek a Schwann-sejtek és az asztrociták jellemzőivel rendelkeznek. Eredetileg aszaglószervibazális membrán és széles körben elterjedt a felületénszaglószervinyálkahártya,szaglószerviideg, ésszaglószerviizzó. Képes megosztani és regenerálódni egy életre, és kísérheti aszaglószerviidegaxonok az agyba vándorolnak. Az axonok aszaglószerviAz ideg 30-60 naponként átjuthat a perifériás idegrendszer és a központi idegrendszer közötti csomóponton, újra nőhet aszaglószerviburkolni és szinaptikus kapcsolatokat létesíteni4.Szaglószervia burkoló sejtek számos növekedési faktort, például NGF-et, BDNF-et, GDNF-et, NT-3-t, neuropeptid-Y-t és S-100-t szekretálhatnak. Tanulmányok kimutatták, hogy az idegnövekedési faktor (NGF) megakadályozhatja a gerincvelő vörös magjának neuronjainak sorvadását, és erősítheti a corticospinalis traktust. az agyból származó neurotróf faktor (BDNF) és a neurotropin-3 (NT-3) egyaránt képes megakadályozni a vörös mag gerincvelősejt-apoptózisát felnőtt patkányokban axotomizált sérüléssel és megmenteni a haldokló idegsejteket, és elősegíti az axonális regenerációt P. Továbbá,szaglószerviA burkoló sejtek más faktorokat is expresszálnak a sejtmembránjukon, például az idegsejt adhéziós faktort (N-CAM), amelyek részt vesznek a sejtadhézióban és az axonnövekedésben. Ezen jellemzői miattszaglószerviensheaching sejtek, az OEC-ket az egyik ígéretes magsejteknek tekintik az SCI helyreállítására szolgáló sejttranszplantációhoz.

A kémiai összetevőkCistanchefőként feniletanoid-glikozidokat, iridoidokat, illékony komponenseket, lignánokat, poliszacharidokat és alkaloidokat tartalmaznak. A tanulmány megállapítottaCistancheés kémiai komponensei neuroprotektív hatásúak. Deng és mtsai. a tubulosa B hatását tanulmányozták az SH-SY5Y neuronok tumor nekrózis faktor (TNF ) által indukált apoptózisára. Az eredmények azt mutatták, hogy 100 ug/ után az SH-SY5Y neuronok 36 órás L-kezelést követően tipikus apoptózis jellemzőket mutattak, míg a tubulin B 2 órás kezelése jelentősen csökkentette a TNF által kiváltott apoptózist. Ezenkívül a vizsgálatok azt is kimutatták, hogy a fenil-etanoid glikozidok gátolhatják a patkány kisagy szemcsesejtek apoptózisát a kaszpáz-3 és a kaszpáz-8 gátlásával, valamint a metil-fenil-tetrahidropiridin (MPTP) által okozott C57 egérfekete ellen. A minőségi dopaminerg neuronok károsodása védő hatású. Nem csak azt, hanemCistancheenyhítheti a különféle károsodásokat is, mint például az idegrendszer ischaemia-reperfúziója. Az egerek agyi ischaemiás sérülésének kísérlete azt mutatja, hogy az agyi ischaemia-reperfúziós csoportban az iszkémia után 24 és 48 órás infarktus 72,98 százalék és átlagosan 60,45 százalék. Ezzel szemben acistancheaz összes glikozid nagy, közepes és alacsony dózisú csoportjai (250.0mg · kg/nap; 125,0 mg · kg/nap; 62,5 mg · kg/nap) képesek az egerek agyát létrehozni agyi ischaemia-reperfúzió után 24 óra Az infarktus mérete 25,94 százalékra, 25,81 százalékra és 31,13 százalékra, az agyi infarktus mérete pedig 22,14 százalékra, 20,06 százalékra és 22,27 százalékra csökkent 48 óra elteltével. A kettő között szignifikáns különbség volt, ami szignifikáns gátló hatást mutat a neuronális apoptózisra.

Ebben a tanulmányban különböző koncentrációjúcistanche összes glikozidalkalmazták az OEC-ekre. Az MTT módszer és az áramlási citometriás mérés megerősítette, hogy 10mg/ml100mg/mlcistanche összes glikozidelterjedését elősegíthetiszaglószervibeburkoló sejtek. Az áramlási citometria eredményei azt mutattákcistanche összes glikozidelterjedését elősegíthetiszaglószervisejtek beburkolása Elsősorban a G1 ciklus proliferációját segíti előszaglószervispermiumsejteket, és jelentősen csökkenti az apoptotikus sejteket. Ezért,Cistanche összglikozidoknemcsak elterjedését segítheti előszaglószervibeburkolják a sejteket, hanem növelik a sejtaktivitást és gátolják apoptózisukat. Az enzimhez kötött immunszorbens vizsgálat ezt bizonyítjaCistanche összglikozidokjelentősen elősegítheti a GDNF szekréciójátszaglószervibeburkoló sejtek. A fenti eredmények kísérleti alapot adnak a klinikai alkalmazáshozCistanche összglikozidok.

Hivatkozások

[1] Qiu Weihong, Zhu Hongxiang, Zhang Baixiang és mások. A rehabilitáció során gerincvelősérült betegek életminőségét befolyásoló tényezők [J]. Chinese Journal of Rehabilitation Medicine, 2009, 4(24): 313.

[2] Richter MW, Fletcher PA, Liu J et al. Lamina propria ésszaglószervia bikaburkoló sejtek differenciális integrációt és migrációt mutatnak, és elősegítik a deferenciális axonok kihajtását a sérült gerincvelőben [J]. J Neurosci, 2005.25(46):10700 -10711.

[3] Fairless R, Bamet SC. szaglóburkoló sejtek: szerepük a központi idegrendszer helyreállításában [J.Int J Biochem Cell Biol. 2005, 37(4):693-699.

[4] Chen X, Fang H. Schwob JE. A tisztított multipotencia. beültetett glükóz bazális sejteketszaglószerviepitélium[J]. J Comp Neurol, 2004, 46914):457-474.

[5] La P, Jones LL. Tuszynski MH. BDNF-et expresszáló marostroma sejt; támogatja a kiterjedt axonnövekedést a d gerincvelő-sérülés helyén [J]. Exp Neurol, 2005, 191(2):344-360.

[6] Deng M, Zhao JY, Ju XD és mások. A tubulosa B védő hatása a TNF-indukált apoptózisra neuronális sejtekben [J]. Acta Pharmacol Sin, 2004, 25(102 1276

[7] TianXue-Fei, PuXiao-Ping.Fenil-etanolglikozidoktól tőlCistanchessalsa gátolja a 1-metil-4-fenilpiridinium-ion által kiváltott apoptózist az idegsejtekben[J]. J Ethnopharmacol, 2005, 97 (1):59.

[8] Geng X, Song L.Pu X et al. Neuroprotektív hatás