Az RNA M6 A Reader YTHDF2 vezérli az NK sejtes daganatellenes és vírusellenes immunitást, 6. rész

Metasztatikus melanoma modell és MCMV kihívás

B16F10 sejteket (105) intravénásan injektáltunk egerekbe. 14 nappal az injekció beadása után az egereket leöltük a posztmortem elemzés céljából. A tüdőben lévő metasztatikus csomókat makroszkóposan elemeztük és megszámoltuk. A B16F10 sejtvonalat Hua Yu (City ofHope, Los Angeles, CA) biztosította. Az Ythdf2ΔNK és Ythdf2WT egereket az American Type Culture Collection-től (VR{11}}) vásárolt Smith MCMV törzs (2,5 × 104 PFU) ip injekciójával fertőztük meg. Perifériás vérmintákat vettünk szubmandibuláris punkcióval a fertőzést követő 0., 4. és 7. napon.

A tüdőmetasztázis csomók olyan csomókra utalnak, amelyeket más helyekről származó rosszindulatú daganatsejtek képeznek, amelyek a véren vagy a nyirokrendszeren keresztül a tüdőbe vándorolnak. Sok betegnél ez a tüdőrák gyakori megnyilvánulása.

Bár a tüdőmetasztázis csomók veszélyt jelentenek a betegek fizikai egészségére, nincs közvetlen kapcsolat a memória és a között. Ezért aktívan szembe kell néznünk a tüdőrák és a tüdőáttétek okozta csomók kihívásaival, és nem szabad hagynunk, hogy a negatív érzelmek és a szorongás befolyásolja testi és lelki egészségünket.

Ugyanakkor néhány pozitív módszerrel megőrizhetjük és javíthatjuk a memóriát. Például végezzen memóriaedzést, például matematikai számításokat, olvasást, zenehallgatást, játékokat stb. Ezen túlmenően a helyes életmód betartása, mint például a rendszeres testmozgás, elegendő alvás, egészséges táplálkozás stb. javítjuk a memóriánkat.

A legfontosabb a pozitív hozzáállás megőrzése. Nem számít, milyen nehézségekkel néz szembe, hinnie kell erejében és idegrendszerének rugalmasságában, és a pozitív kiigazítások és válaszok révén végül sikeresen leküzdheti a nehézségeket.

Röviden, bár a tüdőben lévő áttétes csomók veszélyt jelentenek a fizikai egészségre, nem kapcsolódnak közvetlenül a memóriához. Pozitívan kell szembenéznünk ezzel, és meg kell őriznünk és javítanunk kell a memóriánkat életmódunk megváltoztatásával és jó hozzáállással. Látható, hogy javítanunk kell a memórián, a Cistanche deserticola pedig jelentősen javíthatja a memóriát, mert a Cistanche deserticola szabályozhatja a neurotranszmitterek egyensúlyát is, például növelheti az acetilkolin és a növekedési faktorok szintjét. Ezek az anyagok nagyon fontosak a memória és a tanulás szempontjából. Ezenkívül a Cistanche deserticola javíthatja a véráramlást és elősegítheti az oxigénszállítást, ami biztosítja, hogy az agy elegendő tápanyagot és energiát kapjon, ezáltal javítva az agy vitalitását és állóképességét. Látható, hogy javítanunk kell a memórián, a Cistanche deserticola pedig jelentősen javíthatja a memóriát, mert a Cistanche deserticola szabályozhatja a neurotranszmitterek egyensúlyát is, például növelheti az acetilkolin és a növekedési faktorok szintjét. Ezek az anyagok nagyon fontosak a memória és a tanulás szempontjából. Ezenkívül a Cistanche deserticola javíthatja a véráramlást és elősegítheti az oxigénszállítást, ami biztosítja, hogy az agy elegendő tápanyagot és energiát kapjon, ezáltal javítva az agy vitalitását és állóképességét.

Kattintson a Tudnivaló kiegészítőkre a memória javításához

A perifériás vérben, a lépben és a májban lévő vírusterhelés mérése érdekében a DNS-t QIAGEN DNeasy Blood and Tissue Kit for qPCR elemzéssel izoláltuk. A következő primereket használtuk: MCMV-IE1, 59-AGCCACCAACATTGACCACGCAC-39 (előre) és MCMVIE1, ​​59-GCCCCAACCAGGACACACAACTC-39 (fordított).

In vivo egérkezelés IL-vel-15

Az IL-15 in vivo egérkezeléshez az Ythdf2ΔNK és Ythdf2WT egereket 2 µg ip rekombináns humán IL-15-val (kat. szám: 745101; National Cancer Institute) fecskendeztünk 5 napon keresztül. A kezelt és kontroll egereket ezután áramlási citometriás analízis céljából elaltattuk.

Áramlási citometria

Az egysejtű szuszpenziókat Ythdf2ΔNK és Ythdf2WT egerek csontszövetéből, véréből, lépéből, májából és tüdejéből készítettük a korábban leírtak szerint (Wang és mtsai, 2018b). Az áramlási citometriás elemzést és a sejtválogatást egy LSRFortessa X-20 és egy FACSAriaFusion Flow Cytometer (BD Biosciences) készüléken végeztük.

Az adatok elemzése NovoExpress szoftverrel (Agilent Technologies) történt.

A következő fluoreszcens festékkel jelölt antitesteket használták a BD Biosciences, BioLegend, Invitrogen vagy Cell Signaling Technology cégektől: CD3ε (145-2C11), CD19 (1D3), Gr-1 (RB6-8C5) ),TER-119 (TER-119), CD11c (N418), CD4 (GK1.5), CD8 (53-6.7), CD122 (5H4), CD132 (TUGm2), NK1.1 (PK136), CD11b (M1/70), CD27 (LG.3A10), CD117 (2B8), CD127 (SB/199), CD135 (A2F10.1), KLRG1 (2F1), CD45 ({{46) }}F11), CD45.1 (A20), CD45.2 (104), IFN- (XMG1.2), 2B4 (m2B4), granzim B (QA16A02), perforin (S16009A), Ly49H (3D10), Ly49D ( 4e5), CD69 (H1.2F3), CD226(TX42.1), NKG2D (CX5), NKG2A (16A11), NKp46 (29A1.4), TIGIT(1G9), PD-1 (J43), annexin V, Ki67 (b56), Tbet (4b10) és Eomes (WD1928), foszfo-p44/42 Erk1/2 (Thr202/Tyr204, #9101), foszfo-Akt (Ser473, #5315), foszfo-S6 fehérje ribosz ,phospho-Stat3 (Tyr705, #9145) és phospho-Stat5 (Tyr694, #9539).

Az NK-sejtek proliferációjának értékeléséhez a sejteket 5 µM CTV-vel (Invitrogen) jelöltük a gyártó protokollja szerint, mielőtt átvittük őket a recipiens egerekbe. A Ki67, Tbet és Eomes intracelluláris festését a Foxp3/Transcription Factor Staining Kit (eBioscience) rögzítésével és permeabilizálásával végeztük.

A foszforilált fehérjék kimutatására tisztított lép NK-sejteket rekombináns humán IL-15-vel (50 ng/ml) 1 órán át előkezeltünk, majd Phosflow Fix Buffer I-gyel fixáltuk, majd Phosflow Perm Buffer III-mal (BD Biosciences) permeabilizáltuk, majd festettük. antitestek.

Adoptív sejttranszfer

Az Ythdf2-hiány NK-sejtek érésére gyakorolt ​​hatásának felmérésére 5 × 106 BM sejt keverékét 1:1 arányban CD45.1 vagy Ythdf2ΔNK CD45.2 egerekből Rag2-/-Il2rg-/-egerekbe vittük át. A recipiensek helyreállását áramlási citometriával értékeltük 8 héttel a transzplantáció után.

A limfopénia által kiváltott homeosztatikus proliferációs kísérletekhez azonos számú tisztított lépNK sejtet CD45.1 vagy Ythdf2ΔNK CD45.2 egerekből transzferáltunk Rag2−/−Il2rg−/− egerekbe, majd értékelték az átvitt WT és Ythdf2ΔNK NKleen NK-sejtek relatív százalékát. a Rag2−/−Il2rg−/− recipiensek áramlási citometriával a jelzett időpontokban.

A metasztatikus melanomamodell esetében az Ythdf2ΔNK vagy Ythdf2WTegerekből származó 106 IL-2-expandált NK sejtet injektáltunk iv. Rag2−/−Il2rg−/− egerekbe. 1 nappal később B16F10 sejteket (105) injektáltunk iv egerekbe. 14 nappal az injekció beadása után az egereket leöltük a posztmortem elemzés céljából. Egyes kísérletekben a sejteket CTV-vel (5 µM, Invitrogen) jelölték, hogy nyomon kövessék a sejtproliferációt az átvitel előtt.

In vivo kereskedési vizsgálat

A BM-ből a perifériás vérbe történő NK-sejt-forgalom kimutatására 1 µg iv APC-jelölt anti-CD45 antitestet injektáltunk C57BL/6 egerekbe. Két perccel az ellenanyag-injekció után az eutanát azonnal elaltattuk, és a BM sejteket áramlási citometriához gyűjtöttük, miután a sejteket CD3 és NK1.1 antitestekkel megfestettük. A parenchimális NK sejteket CD45 festés hiányával, míg a szinuszos NK sejteket a CD45 jelölés jelenléte alapján azonosították. Ezért a szinuszoidokban (CD45+) és a parenchymalis régiókban (CD45−) lévő NK-sejtek aránya azt jelzi, hogy az NK-sejtek a BM toperifériás véréből steady state állapotban vándorolnak.

Valós idejű RT-qPCR és immunblot

Az RNS-t RNeasy Mini Kit (QIAGEN) segítségével izoláltuk, majd PrimeScript RT Reagent Kit with gDNA Eraser (Takara Bio) segítségével cDNS-vé írtuk át a gyártó utasításai szerint. Az mRNS expressziós szintjeit SYBRGreen PCR Master Mix és QuantStudio 12K Flex Real-TimePCR System (mindkettő a Thermo Fisher Scientific cégtől) segítségével elemeztük. A primer szekvenciákat az S1 táblázat tartalmazza.

Az immunoblot-vizsgálatot standard eljárások szerint végeztük, a korábban leírtak szerint (Denget al., 2015; Yu és mtsai, 2006). A következő antitesteket használtuk: METTL3 (kat. sz. 15073-1-AP; Proteintech), METTL14 (kat. sz. 26158-1-AP; Proteintech), YTHDF1 (kat. sz. 17479-1-AP ; Proteintech), YTHDF2 (kat. sz. RN123PW; MBL), YTHDF3 (kat. sz.{11}}AP; Proteintech), ALKBH5 (kat. sz. ab195377; Abcam), FTO (kat. sz. ab124892; Abcam), MDM2 (kat. sz. 33-7100; Invitrogen), TDP-43 (kat. sz. PA5-29949; Invitrogen) és -aktin (kat. sz. {{20) }}Ig; Proteintech).

siRNS knockdown assay

IL-2–expanded NK cells were transfected with Accell mouse Tardbp siRNA (cat. no. E-040078-00-0005; Dharmacon) or Mdm2 siRNA (cat. no. E-041098-00-0005; Dharmacon) using Accell delivery media (Dharmacon) according to the manufacturer's instructions in the presence of IL-15 (50 ng/ml). The Accell eGFP control pool was used as siRNA control. The transfection efficiency was >90% áramlási citometriával mérve. A Geneknockdown hatékonyságát qPCR és immunblot módszerrel határoztuk meg. 3 nappal a transzfekció után a sejt apoptózisát és proliferációját áramlási citometriával elemeztük a fent leírtak szerint.

Luciferáz riporter vizsgálat

A –2,000 bp és +100 bp TSS közötti Ythdf2 promoter régiót rágcsáló NK-sejtekből amplifikáltuk, és apGL4-Basic Luciferase Reporter Vector-ba (Promega) klónoztuk, hogy apGL-t generáljunk. {5}}Ythdf2 riporterplazmid. Az ATCC-től vásárolt HEK293T sejteket pGL4-Ythdf2 riporter plazmidokkal, valamint STAT5a vagy STAT5b overexpressziós plazmidokkal vagy anempty vektorral együtt transzfektáltuk a pRL-TK Renilla riporter plazmiddal (Promega) a transzfekció hatékonyságának normalizálása érdekében. A sejteket a transzfekció után 24 órával lízis céljából összegyűjtöttük, és a luciferázaktivitást fluorimetriásan kvantifikáltuk a Dual-LuciferaseSystem (Promega) segítségével. Az Ythdf2 promoter és a STAT5a és STAT5b túlexpressziós plazmidok klónozására szolgáló primer szekvenciákat az S1 táblázat tartalmazza.

ChIP vizsgálatok

A ChIP vizsgálatokat Pierce Magnetic ChIP Kittel (kat. szám: 26157; Thermo Fisher Scientific) végeztük a gyártó utasításai szerint. Röviden, azonos mennyiségű ananti-anti-foszfo-Stat5-öt (Tyr694, katalógusszám: 9351; Cell Signaling Technologies) vagy a megfelelő kontroll normál nyúl IgG-t külön-külön alkalmaztuk az 5 × 5-ből származó, térhálósított DNS-protein komplexek kicsapására. 106 tisztított egér primer NK-sejt, amelyeket IL-15-val (50 ng/ml) 1 órán át előkezeltünk. A térhálósodás megfordítását követően a jelzett antitesttel immunprecipitált DNS-t qPCR-rel teszteltük. Az összes primer szekvenciáját az S1 táblázat tartalmazza.

Ex vivo citotoxicitási vizsgálat

Az NK-sejtek ex vivo citotoxicitását standard 51Crrrease assay-vel értékeltük. Az Andre´Veillette (McGill Egyetem, Montreal, Kanada) ajándékaként az RMA-S (MHC osztály Ideficient) és RMA (MHC I. osztályú elégséges) egér limfóma sejtvonalakat használtuk astarget sejteket. Az egereket poliinozin:policitidilsav [poli(I:C); 200 µg/egér] 18 órán át. A poli(I:C)-aktivált NK sejteket EasySepMouse NK Cell Isolation Kit (STEMCELL Technologies) segítségével izoláltuk a lépből. A tisztított NK sejteket célsejtekkel együtt tenyésztettük 5:1, 2,5:1 és 1,25:1 arányban IL-2 (50 U/ml) jelenlétében.

m6A-szek

A tisztított lép NK sejteket IL-2 (1,000 U/ml, kat. sz. Bulk Ro 23-6019; National Cancer Institute) in vitro szaporítottuk 7 napon keresztül. A teljes RNS-t TRIzol reagenssel (Thermo FisherScientific) izoláltuk 50 millió IL-2-el kiterjesztett NK sejtből. A poliadenilezett RNS-t tovább dúsítottuk a teljes RNS-ből Dynabeads mRNS Purification Kit (Invitrogen) segítségével. Az mRNS-mintákat RNS-fragmentáló reagensekkel (Invitrogen) 100-nt hosszúságú fragmensekre fragmentáltuk.

Fragmentált mRNS-t (5 µgmRNS) használtunk az m6A immunprecipitációhoz m6Aantitest (202003; Synaptic) alkalmazásával, a Magna MeRIP m6A Kit (Merck Millipore) standard protokollja szerint. Az RNS-t az RNA Clean & Concentrator-5 (Zymo Research) segítségével dúsították fel a könyvtár létrehozásához egy KAPA RNA HyperPrep Kit (Roche) segítségével. A szekvenálást a City of Hope genomikai létesítményében végezték el egy Illumina HiSeq 2500 gépen, egyszeri leolvasási 50-bp móddal. A szekvenálási leolvasásokat a HISAT2 v101 szoftverrel képeztük le az egérgenomra (Kim és mtsai, 2015).

Az immunprecipitáció és a bemeneti könyvtárak térképezett leolvasásait az exomePeak R csomag segítségével biztosítottuk (Meng és mtsai, 2014). Az m6Apeak-eket az Integrative Genomics Viewersoftware (http://www.igv.org) segítségével vizualizáltuk. Az m6A-kötő motívumot a MEME (https://meme-suite.org) és a HOMER (http://homer.ucsd.edu/homer/motif) elemezte. A nevezett csúcsokat a génarchitektúrával való metszéspontokkal annotáltuk az Rpackage ChIPseeker segítségével (Yu et al., 2015).

StringTie was used to assess expression levels for mRNAs from input libraries by calculating the total exon fragments/mapped reads in millions × exon length in kb (Pertea et al., 2015). The differentially expressed mRNAs were selected with log2(fold change) >1 orlog2 (szeres változás)<−1 and P < 0.05 using the R package edgeR (Robinson et al., 2010).

YTHDF2 RIP-szek

50 millió IL-2-kibővített NK-sejtet gyűjtöttünk össze, és kétszer mostuk hideg PBS-sel, majd a sejtpelletet 2 térfogatnyi lízispufferrel (10 mM Hepes, pH 7,6, 150) lizáltuk. mM KCl, 2 mM EDTA, 0,5% NP-40, 0,5 mM ditiotreitol, 1:100 proteáz inhibitor koktél [Thermo Fisher Scientific] és 400 U/ml SUPERase-In RNase Inhibitor [Thermo Fisher Scientific]).

A lizátumot jégen 5 percig inkubáltuk, majd 15 percig centrifugáltuk, hogy a lizátumot kitisztítsuk. A sejtlizátum egytizedét mentettük bemenetként. A sejtlizátum fennmaradó részét 5 µg anti-YTHDF2-vel (kat. szám RN123PW; MBL) inkubáltuk, amelyet Protein A mágneses gyöngyökkel (kat. sz. 10001D; Invitrogen) kapcsoltunk. 4 fokon 2 órán keresztül, finom forgatás mellett. Ezt követően a gyöngyöket ötször mostuk 1 ml jéghideg mosópufferrel (50 mM HEPES, pH 7,6, 200 mM NaCl, 2 mM EDTA, 0,05% NP-40, 0,5 mM ditiotreitol és 200 U/ml RNáz). inhibitor).

Az immunprecipitált mintákat Proteinase K-vel emésztettük 1% SDS-sel és 2 mg/ml proteináz K-vel (ThermoFisher Scientific) kiegészített mosópufferben, rázatással 1200 fordulat/perc sebességgel 55 fokon 1 órán át. A teljes RNS-t mind a bemeneti, mind az immunprecipitált RNS-ből extraháltuk 5 térfogatnyi TRIzol reagens hozzáadásával, majd Direct-zol RNA Miniprep (Zymo Research) hozzáadásával.

A cDNS könyvtárat KAPA RNA HyperPrep Kit-tel (Roche) hoztuk létre, és Illumina HiSeq 2500 platformon szekvenáltuk. A csúcshívási eredményeket immunprecipitációval és bemeneti könyvtárakkal a RIPSeeker R csomag hozta létre (Li et al., 2013). A HOMER-t arra használták, hogy megtalálják az adatok eloszlásának motívumait a csúcsrégiókban. Az úgynevezett csúcsokat a ChIPpeakAnno segítségével a gén- és transzkriptarchitektúrával való metszésponttal annotáltuk (Zhu et al., 2010).

mRNS stabilitási vizsgálat

Ythdf2ΔNK és Ythdf2WT egerekből származó tisztított lép-NK sejteket IL-15-val (50 ng/ml) tenyésztettük. 3 nappal a tenyésztés után a sejteket aktinomicin D-vel (5 µg/ml, katalógusszám: A9415; Sigma) kezeltük a jelzett ideig. A kezelés nélküli sejteket 0 óra múlva használtuk fel. A sejteket a jelzett időpontban gyűjtöttük össze, és a teljes RNS-t extraháltuk a sejtekből qPCR-hez. Az mRNS felezési idejét Weng és munkatársai (2018) által korábban leírt módszerrel számítottuk ki. A primer szekvenciákat az S1 táblázat tartalmazza.

Online adatbázis elemzés

A BioGPS (http://biogps.org) online forrást használtuk az Ythdf2 szövetspecifikus expressziójának elemzésére. Az RNS-seqdata készletek a GEO-tól származtak, letárolási számon. GSE106138, GSE113214 és GSE25672. Az RNS-seq elemzésekből származó normalizált adatokat exportáltuk, és a génexpressziós z-pontszámot a Heatmap.2 funkcióval vizualizáltuk a gplots könyvtárban

Statisztika

A párosítatlan Student t-teszteket (kétvégű) GraphPad Prism szoftverrel végeztük. Egyirányú vagy kétirányú ANOVA-t végeztünk három vagy több független csoport összehasonlításakor. A P értékeket többszörös összehasonlításra a Holm-Sˇ´ıdak eljárással korrigáltuk. P < 0.05 szignifikánsnak számított. *, P < {{10}}.05; **, P < 0,01; és ***, P < 0,001.

Online kiegészítő anyag

Az S1. ábra az YTHDF2 fehérjeszintjét mutatja immunsejtekben, beleértve az IL-15 stimulációra, MCMV-fertőzésre és tumorprogresszióra adott válaszként az NK-sejteket is; az Ythdf2 NK-sejt-specifikus deléciójával rendelkező egerek létrehozása. Az S2. ábra mutatja az MCMV-vel fertőzött egerek lépében és májában lévő vírustitereket, valamint az MCMV-vel fertőzött egerekben a Ly49H+ és/vagy Ly49D+ NK-sejtek százalékos és abszolút számát. Az S3. ábra Ythdf2WT és Ythdf2ANK egerekből származó NK-sejtek aktiváló és gátló receptorainak proliferációját, túlélését, érését és expresszióját mutatja. Az S4. ábra az YTHDF2 expressziójának szabályozását mutatja IL-15-STAT5 jelátvitel által, valamint az IL-15 receptorok komponenseinek expresszióját, a PI3K–AKT útvonalat és a MEK–ERK útvonalat az Ythdf2WT és Ythdf2ΔNK NK sejtjeiben egerek. Az S5. ábra a transzkriptomra kiterjedő RNS-seq, m6A-seq és RIP-seq vizsgálatokat mutat be NK-sejtekben. Az S1 táblázat felsorolja a vizsgálatban használt primereket.

Az adatok elérhetősége

Az RNA-seq, m6A-seq és RIP-seq adatokat a National Center for Biotechnology Information GEO-ban letétbe helyezték a regisztrációs szám alatt. GSE174027. A fennmaradó adatok, amelyek alátámasztják a tanulmány megállapításait, kérésre elérhetők a megfelelő szerzőktől.

Köszönetnyilvánítás

Ezt a munkát a National Institutes of Health (NS106170, AI129582, CA247550, CA163205, CA223400, CA068458 és CA210087), a Leukemia and Lymphoma Society (1364-19), a California Institute for Regenerative Medicine ({{DISC2COVID) támogatta. 9}}), valamint a Breast Cancer Alliance 2021 Exceptional Project Award díját. Ezt a munkát részben USDA-díj is támogatta (USDA/NIFA 2020-67017-30843).

A szerzők közreműködése: S. Ma, J. Yu és MA Caligiuri kitalálta és megtervezte a projektet. S. Ma, J. Yan, J. Zhang és J. Yu kísérleteket és/vagy adatelemzéseket végzett. Z. Chen, L.-S.Wang, JC Sun és J. Chen hozzájárult a reagensekhez és az anyagi támogatáshoz. S. Ma, J. Yu, J. Chen és MA Caligiuri írta, ismertette és/vagy felülvizsgálta a dolgozatot. Minden szerző megvitatta az eredményeket és kommentálta a kéziratot.

Közzétételek: J. Chen "egyéb" jelentést küldött a Genovel BiotechCorp. a benyújtott munkán kívül, és a Genovel Biotech Corp. tudományos alapítója, valamint a faji onkológia tudományos tanácsadója. Más közzétételről nem számoltak be.

Hivatkozások

1.Arase, H., ES Mocarski, AE Campbell, AB Hill és LL Lanier. 2002. A citomegalovírus közvetlen felismerése az NK-sejt receptorok aktiválásával és gátlásával. Tudomány. 296:1323–1326.

2. Ayala, YM, T. Misteli és FE Baralle. 2008. A TDP-43 szabályozza a retinoblasztóma fehérje foszforilációját a ciklinfüggő kináz 6 expresszió visszaszorításán keresztül. Proc. Natl. Acad. Sci. EGYESÜLT ÁLLAMOK. 105:3785–3789.

3. Barbieri, I., K. Tzelepis, L. Pandolfini, J. Shi, G. Millan-Zambrano, SC Robson, ´D. Aspris, V. Migliori, AJ Bannister, N. Han és mtsai. 2017. A promóterhez kötött METTL3 fenntartja a mieloid leukémiát az m6A-függő transzlációs kontroll segítségével. Természet. 552:126–131.

4. Becknell, B. és MA Caligiuri. 2005. Interleukin-2, interleukin-15 és szerepük az emberi természetes ölősejtekben. Adv. Immunol. 86:209–239.

5.Bertoli, C., JM Skotheim és RA de Bruin. 2013. Sejtciklus-transzkripció szabályozása a G1 és S fázisban. Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 14:518–528.

6.Bezman, NA, CC Kim, JC Sun, G. Min-Oo, DW Hendricks, Y. Kamimura, JA Best, AW Goldrath és LL Lanier. Immunológiai Genom Projekt Konzorcium. 2012. A természetes ölősejtek azonosságának és aktiválásának molekuláris meghatározása. Nat. Immunol. 13:1000–1009.

7. Carson, WE, JG Giri, MJ Lindemann, ML Linett, M. Ahdieh, R. Paxton, D. Anderson, J. Eisenmann, K. Grabstein és MA Caligiuri. 1994. Az interleukin (IL) 15 egy új citokin, amely az IL-2 receptor komponensein keresztül aktiválja az emberi természetes ölősejteket. J. Exp. Med. 180:1395–1403.

8. Carson, WE, TA Fehniger, S. Haldar, K. Eckhert, MJ Lindemann, CF Lai, CM Croce, H. Baumann és MA Caligiuri. 1997. Az interleukin-15 lehetséges szerepe az emberi természetes ölősejtek túlélésének szabályozásában.J. Clin. Invest. 99:937–943.

9.Chan, CJ, MJ Smyth és L. Martinet. 2014. A természetes ölősejtek aktiválásának molekuláris mechanizmusai celluláris stresszre adott válaszként. Cell DeathDiffer. 21:5–14.

10. Chen, X., J. Han, J. Chu, L. Zhang, J. Zhang, C. Chen, L. Chen, Y. Wang, H. Wang, L. Yi és társai. 2016. Az EGFR-CAR NK sejtek és az onkolytikus herpes simplex vírus 1 kombinációs terápiája emlőrák agyi metasztázisainak kezelésére.Oncotarget. 7:27764–27777.

For more information:1950477648nn@gmail.com