A Cistanche Deserticola kivonat, amely szabályozza az M2-t, mint a makrofágok polarizációját a sejtmigráció és a kolóniaképződés csökkentésére az emlőrákban

Kivonat: Cél A Cistanche deserticola epimedium brevican etanolos kivonatának szabályozó mechanizmusának feltárása a makrofágok polarizációjára in vitro, valamint a M{{0}}szerű makrofágokra gyakorolt ​​hatásának feltárása, elősegítve a 4T1 sejtmigrációt és a kolóniaképződést. Módszerek A CCK-8 módszert alkalmaztuk a Cistanche deserticola deserticola etanolos kivonatának különböző koncentrációinak a csontvelőből származó makrofágok (BMDM) aktivitására gyakorolt ​​hatásának kimutatására, valamint a Cistanche deserticola deserticola deserticola deserticola etanolos kivonat biztonságos koncentrációjának meghatározására; Western blotting és qRT PCR módszert alkalmaztunk a Cistanche deserticola deserticola etanolos kivonatának az argináz-1 (Arg-1) és a CD163, az M2-szerű makrofágok markerei expressziójára gyakorolt ​​hatásának kimutatására; QRT PCR-t használtunk a Cistanche deserticola deserticola alkoholkivonatának az 1. gyulladásos zónára (Fizz1) és az M2 tumorral asszociált makrofágokkal (TAM) kapcsolatos gének peroxiszóma proliferátor aktivált receptorára (PPAR) (peroxiszóma-proliferátor-aktivált vevő, PPAR) kifejtett hatásának kimutatására. ）, A kitináz 3-mint 3 (Ym1), kemokin 24 (CCL24), makrofág galaktóz típusú C-típusú lektin 2 (MGL2) és interferon szabályozó faktor 4 (IRF4) mRNS expressziójának hatása; Az etanolos kivonat hatása A Cistanche deserticola deserticola 4T1 sejtek migrációját elősegítő M2 TAM-jait karcolási teszttel mutattuk ki, a Cistanche deserticola deserticola etanolos kivonatának hatását a 4T1 sejtek M2 TAM-ok által stimulált növekedésére kolóniakísérletekkel mutattuk ki. Az epimediumnak nem volt toxikus vagy mellékhatása a BMDM-sejtekre 0.015 625-2.000 000 mg/mL koncentrációban; A Cistanche deserticola etanolos kivonata jelentősen gátolja az M2 TAM-okkal kapcsolatos Arg{{ géneket. 36}}, CD163, Fizz1, PPAR , A CCL24, Ym1, MGL2 és IRF4 kifejeződése (P<0.05, 0.01, 0.001) inhibited the migration and colony formation ability of M2-TAMs in 4T1 cells (P<0.05, 0.001). Conclusion The ethanol extract of Cistanche deserticola can weaken the promotion of M2-like macrophages on 4T1 Cell migration and colony formation, and its mechanism may be related to the inhibition of M2-type polarization of macrophages.

Kulcsszavak: Cistanche deserticola; Makrofágok; M2 polarizáció; Mellrák; migráció; Kolóniaképződés; benzoinsav; koniferil-aldehid; Emodin; Vanillinsav

A Cistanche-tumorellenes hatásai

Az emlőrák a nők egészségét veszélyeztető fő rosszindulatú daganat, és a rákos halálozás második leggyakoribb oka a világon [1-2]. Az emlőrák késői szakaszában tüdő- és májmetasztázisok vannak. Amikor szervi metasztázisok lépnek fel, a betegek túlélési aránya és életminősége jelentősen csökken [3]. Az emlőrák első vonalbeli kezelése főként antraciklin, paklitaxel és más citotoxikus gyógyszerek kemoterápiáján alapul, de a kezelés során gyakran előfordul gyógyszerrezisztencia. Ezért nagyon fontos az emlőrák kóros mechanizmusának feltárása és hatékony kezelési módszerek megtalálása. A makrofágok kulcsfontosságúak a különböző daganatok előfordulásában és fejlődésében [4-5], és a makrofágok biomarkerei prognosztikai indikátorként szolgálhatnak. A makrofág-infiltráció magas aránya összefügg az emlőrák rossz prognózisával. A tumor-asszociált makrofágok (TAM) a tumorba infiltráló immunsejtek legjellemzőbb típusai. Fontos szerepet játszanak az emlőrák korai daganatos megbetegedéseitől a progresszióig, különösen a metasztázisig [6]. A TAM-ok részt vesznek az emlőrák metasztázisában, angiogenezisében, mátrix-átalakításában, inváziójában és immunszuppressziójában. A hagyományos kínai orvoslás fontos szerepet játszik a mellrák teljes kezelésében. A hagyományos kínai orvoslás több összetevőből, útvonalból és célpontból áll, amelyek csökkenthetik a daganatos betegek kiújulását és metasztázisát, javíthatják életminőségüket és meghosszabbíthatják túlélési idejüket. Cistanche deserticola deserticornu Maxim. A Ranunculales Berberidaceae növénye. Édes és édes ízű, meleg természetű, a máj és a vese két csatornáját követi. Erősíti az izmokat és a csontokat, tonizálja a vese yang-ot, védi a szív- és érrendszert [7], elősegíti a csontképződést [8], szabályozza az immunkapacitást [9] és gátolja a rákot [10]. A kutatások azt mutatják, hogy a Cistanche deserticola alkoholos kivonata gátolja a mellráksejtek proliferációját [11], de nem számoltak be arról a kutatásról, hogy az Epimedium alkoholos kivonata hogyan befolyásolja a mellrák tumoros immunmikrokörnyezetét. Ezért ez a tanulmány a Cistanche deserticola deserticola alkoholkivonatának M2-szerű makrofágokra gyakorolt ​​hatását, valamint a 4T1 mellrákra gyakorolt ​​​​szabályozását kívánja feltárni. Az Epimedium klinikai alkalmazása.

A Cistanche por egészségügyi előnyei – daganatellenes

Kattintson ide a Cistanche termékek megtekintéséhez

【Kérjen többet】 E-mail:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

1. Anyag

1.1 Állat és sejt

SPF Grade nőstény C57BL/6 egér, 8 hetes, a Sibeifu (Beijing) Biotechnology Co., Ltd.-től vásárolva, állattanúsítvány száma 110324210105240115. Az egereket a General Hospital Fifth Medical Center Állatkísérleti Központjában nevelték fel. a Népi Felszabadító Hadsereg. A teljes kísérleti időszak alatt az egerek ingyen élelmet és vizet kaptak, és egy 12-óra világos/12-óra sötét ciklust kaptak. Az állatkísérleteket a kísérleti állatok gondozására és felhasználására vonatkozó irányelvek alapján végezték, és a Népi Felszabadító Hadsereg Általános Kórházának Ötödik Egészségügyi Központja hagyta jóvá. Az állatkísérletek etikai engedélyezési száma az IACUC-2021-0007. A 4T1 sejteket a Shanghai Fuheng Biotechnology Co., Ltd.-től vásároltuk.

Kísérleti tanulmány a Cistanche deserticoláról

1.2 A gyógyszer

A Cistanche deserticola-t Xiao Xiaohe kutató Epimedium E. néven azonosította, amely a Berberidaceae száraz leveleinek növénye a Brevicornum Maximból. Vegyük a Cistanche deserticola deserticola leveleit, törjük össze, és nyomjuk át a 4-es szitán, pontosan mérjük le, adjunk hozzá híg etanolt, végezzük el az ultrahangos kezelést (teljesítmény 400 W, frekvencia 50 kHz) 1 órán keresztül, hűtsük le, mérjük meg újra, használjon híg etanolt az elvesztett súly pótlására, rázza fel, szűrje le, vegye ki a szűrletet, fagyassza le és szárítsa meg, hogy Cistanche deserticola deserticola kivonatot kapjon. 1.3 Gyógyszerek és reagensek Az argináz-1 (Arg-1) antitestet (tételszám: 93668) az Egyesült Államok CST Company-tól vásárolták; - Az aktin antitestet (gyártási szám: 20536 1-AP) a Protentech Company-tól vásárolták; A HRP-vel jelölt kecske anti-nyúl IgG másodlagos antitestet (sz. J{12}}) a Jackson Immuno Research cégtől vásároltuk; A Trizol reagenst (tételszám: BSC51M1) a Biolux cégtől vásároltuk; A CCK-8 reagenst (a tételszám: KTA1020-1000T) az Abbkine Company-tól vásároltuk; Az Interleukin 4 (IL-4) faktort (tételszám: 96-214-14-20) a Peprotech-től vásárolták.

1.4 Eszköz

QB-9002 Szeizmikus lemezes műszer (Haimen Qilin Bell Company); Epoch enzimhez kötött immunszorbens vizsgálat és P100 plusz nukleinsav koncentráció analizátor (Bio Tek Company, USA); Quantstudio 6 Flex fluoreszcens kvantitatív PCR készülék (Thermo Fisher Scientific, USA); MINI6K tenyércentrifuga (Hangzhou Aosheng Company); Vortex-Genie 2 vibrátor (Scientific Industries, USA).

2 Módszerek

2.1 A Cistanche deserticola alkoholkivonatának komponensanalízise

2.1.1 MintaElőkészítés Adjon metanolt a Cistanche deserticola alkoholos kivonatához, hogy 5 mg/ml-es szuszpenziót készítsen, extrahálja ultrahanggal 40 percig, vegyen belőle 1 ml-t és centrifugálja 12 000 fordulat/perc sebességgel 10 percig. , centrifugálás után vegyük ki a felülúszót, engedjük át 0,22 μM szűrőmembránt, és mintát UPLC-MS/MS-be. A Cistanche deserticola összetevőit a hagyományos kínai orvoslás rendszerek farmakológiai adatbázisán és elemzési platformján (TCMSP) gyűjtötték össze. Az MS eredményeket a Progression QI adatplatform segítségével elemezték (NPATLAS és GNPS adatbázisok alapján), és az eredményeket összehasonlították a Cistanche deserticola komponensek lekérésével a nem célzott komponenselemzés érdekében.

2.1.2 Kromatográfiás körülmények:

Gyűjtés UPLC BEH C18 kromatográfiás oszlop (100 mm × 2,1 mm, 1,7 µm), a mozgófázis kétszer desztillált víz (A) - acetonitril (B), gradiens elúció: 0-3 perc, 5 százalék B; 3-35 perc, 5-95 százalék B; 35-42 perc, 95 százalék -5 százalék B. A térfogati áramlási sebesség 0,3 ml/perc; a befecskendezési térfogat 5 μl; Az oszlophőmérséklet-doboz hőmérséklete 40 fok. 2.1.3 Tömegspektrometriás feltételek: pozitív ionos módban történő detektáláshoz elektropermet ionforrást (ESI) használnak, a kapilláris hőmérséklet 275 fok; Köpenygáz térfogatáram 20 Arb; Segédgáz térfogatáram 5 Arb; Az ionforrás feszültsége 5 kV. 2.2 Sejtkultúra Csontvelőből származó makrofágokat (BMDM) izoláltunk 8-hetes nőstény C57BL/6 egerek combcsontvelőjéből. 10% magzati szarvasmarha szérumot, 1% penicillint/sztreptomicint és egér makrofág telep-stimuláló M-CSF faktort (50 ng/ml) tartalmazó DMEM táptalajban tenyésztettük őket, majd inkubátorba helyezték 37 fokos és 5% CO2 mellett 6 percig. napok.

Emésztsük meg a sejteket 0,25 százalékos tripszin EDTA-val (2:1) 1,2 × sebességgel Oltsunk be 106/ml sűrűséget egy lyukas lemezen egy éjszakán át. A második napon a Cistanche deserticola alkoholos kivonatának 1 órás hozzáadása után a sejteket IL-4-val (20 ng/ml) stimuláltuk 24 órán keresztül.

2.3 CCK{{0}} módszert alkalmaztunk a Cistanche deserticola deserticola alkoholos kivonatának BMDM sejtekre gyakorolt ​​citotoxicitásának kimutatására × Oltsunk be 106/mL sűrűséget 96 lyukú lemezekre, tegyük az inkubátorba egy éjszakán át, kezelje a különböző tömegkoncentrációjú sejteket (0, 0.015 625, {{10}}.031 25, 0.{{ 9}}, 0,125, 0,25, 0,5, 1, 2, 4 mg/ml) alkoholos kivonat Cistanche deserticola 24 órán át. Dobja ki a táptalajt, adjon hozzá CCK-8-tenyésztő tápközeg (1:10) oldatot, inkubálja az inkubátorban 1 órán át, mérje meg az abszorbanciát (A) 450 nm-en mikrolemez-leolvasóval, és detektálja az alkoholos kivonat toxicitását. Cistanche deserticola deserticola a sejtekhez.

2.4Western blottingot használtunk az Arg{{0}} fehérje expressziójának kimutatására BMDM sejtekben. Felállítottuk a különböző tömegkoncentrációjú (0.062 5, 0.125, 0,25 mg/ml) Cistanche deserticola kontrollcsoportját, modellcsoportját és alkoholkivonat-csoportját. A gyógyszert a "2.2" alatti módszer szerint adtuk be. A sejteket összegyűjtöttük, és RIPA-lizátumot adtunk hozzá a fehérje extrakciójához. A fehérjemintát 10%-os nátrium-dodecil-szulfát-poliakrilamid gélelektroforézisnek vetettük alá, PVDF membránra vittük át, 5% sovány tejet tartalmazó TBST-be zártuk 1 órára, hozzáadtuk primer antitestet, és egy éjszakán át 4 °C-on inkubáltuk; TBST-vel történő mosás után inkubálja a másodlagos antitesttel, és javítsa a kemilumineszcenciás detektáló reagenst.

2.5 qRT PCR-t használtunk a BMDM sejt kemotaktikus faktor 24 (CCL24), gyulladásos zóna 1 (Fizz1), kitináz 3-like 3 (Ym1), makrofág galaktóz típusú C típusú lectin 2 (MGL2) és peroxiszóma proliferátor kimutatására. aktivált receptor (peroxiszóma-proliferátor-aktivált vevő , PPAR ）, Interferon regulatory factor 4 (IRF4), Arg-1 és CD163 mRNS expressziója a kontrollcsoportban, a modellcsoportban és a különböző tömegkoncentrációkban ({{17}) }.062 5, 0.125, 0.25 mg/mL) Cistanche deserticola alkoholkivonat a "2.2" szerint

2.6Kondicionált táptalaj készítése Referencia módszer [12]: A BMDM-et a "2.2" pontban leírt módszer szerint tenyésztettük. A sejtmaglemez rögzítése után Cistanche deserticola alkoholkivonatot (0,25 mg/ml) és IL-4-ot (20 ng/ml) tartalmazó szérummentes táptalajt adtunk hozzá. ) 1 órával később került hozzáadásra. 24 óra elteltével gyűjtsük össze a felülúszót kondicionált táptalajként. A kondicionált tápközeget 2000 fordulat/perc sebességgel centrifugáltuk a fragmentumok kicsapása érdekében, leszívtuk, és -80 fokon tároltuk a sejtmigrációs kísérletekhez. A BMDM-et a "2.2" alatti módszer szerint tenyésztettük, és Cistanche deserticola alkoholos kivonatát (0,25 mg/ml) tartalmazó DMEM táptalajt adtunk hozzá, miután a sejtmag lemezt a falhoz rögzítettük, és IL-4-t (20 ng) Egy órával később adtunk hozzá. 24 óra elteltével gyűjtsük össze a felülúszót kondicionált táptalajként. Centrifugálja a kondicionált tápközeget 2000-ben a fragmentumok kicsapásához, szívja le a felülúszót, és tárolja -80 fokon a sejtkolónia-kísérletekhez.2.7 Sejtmigrációs kísérlet Helyezze a {{0}}lyuk beépülő modult a sebgyógyuláshoz egy 12-lyuklemezre, és a 4T1 sejteket 3,6 × 105/ml vakcinával kezeljük. . Miután a sejtek egy éjszakán át a falhoz tapadtak, távolítsa el a bővítményt, és mossa le a lebegő elhalt sejteket PBS-sel. Adjon hozzá szérummentes tápközeget, amely 50 százalék kondicionált táptalajt tartalmaz. Inkubátorban inkubáljuk 24 órán keresztül. 0 és 24 óránál készítsen fényképeket fordított mikroszkóppal, elemezze a képeket a J képpel, és számítsa ki a sejtvándorlási sebességet. Sejtvándorlási sebesség=(0 óra sebterület -24 óra sebterület)/0 óra sebterület

2.8Sejtkolóniakísérlet 1000 4T1 sejteket oltottunk be 6 lyukú lemezek minden egyes lyukába, és 8 napon keresztül inkubáltuk 50%-os kondicionált tápközeget tartalmazó tápközeggel. Rögzítse 2 százalékos paraformaldehiddel, festse 1 százalék kristályibolyával, készítsen fényképeket és elemezze a képeket az Image J segítségével.

2.9A statisztikai elemzéshez GraphPad Prism 8 szoftvert használtunk, a mérési adatokat xs ±-ben fejeztük ki, a csoportok közötti összehasonlításokat pedig egyutas ANOVA segítségével.

3 Eredmények

3.1 A Cistanche deserticola deserticola alkoholkivonatának összetétel-elemzését az 1. ábra és a 2. táblázat mutatja be. A Cistanche deserticola deserticola alkoholkivonata benzoesavat, coniferyl aldehidet, Emodint, vanillinsavat, hialint és lepirudin A-t tartalmaz.

1. táblázat Primer szekvenciák

1. ábra A Cistanche deserticola deserticola alkoholos kivonatainak elemzése

2. táblázat A Cistanche deserticola deserticola alkoholkivonatának komponensanalízise

3.2A Cistanche deserticola alkoholkivonat citotoxicitása BMDM-en Az eredmények azt mutatták, hogy a 0.015 625 - 2 mg/ml Cistanche deserticola alkoholkivonatnak nem volt toxikus hatása a BMDM-sejtekre, miután a BMDM-sejteket különböző koncentrációjú Cistanche deserticola alkoholkivonattal kezelték. 24 órán keresztül (2. ábra).

2. ábra A Cistanche deserticola deserticola alkoholkivonatának citotoxicitása a BMDM-re (xs ±, n=3)

3.3 A Cistanche deserticola etanolos kivonata in vitro gátolja a makrofágok M2 polarizációját. A BMDM M0 makrofágokban az M2-szerű makrofágok Arg-1 és CD163 markerei alacsony mértékben expresszálódnak, és az expresszió szignifikánsan megnő az IL-4 indukciója után, ami azt jelzi, hogy hogy a BMDM sikeresen polarizálódik M2-szerű makrofágokká. Western blot és qRT PCR technikákkal ellenőrizték, hogy a Cistanche deserticola alkoholos kivonata képes-e dózisfüggő módon módosítani az IL-4 által indukált Arg-1 és CD163 expresszióját (3. ábra). hogy a Cistanche deserticola alkoholos kivonata közvetlenül gátolja a makrofágok M2-szerű polarizációját. A Cistanche deserticola deserticola alkoholkivonatának a makrofágok M2 polarizációjára gyakorolt ​​hatásának további feltárására qRT PCR-t használtunk az M2-hez hasonló makrofágokhoz kapcsolódó Fizz1 és PPAR gének tanulmányozására. Az Ym1, CCL24, MGL2 és IRF4 transzkripciós szintjeit az ábra mutatja. 4. A modellcsoporttal összehasonlítva a Fizz1, Ym1, CCL24 és IRF4 mRNS expressziós szintjei a Cistanche deserticola alkoholkivonatában (0.062 5, 0.125, { {29}},25 mg/ml) csoport szignifikánsan csökkent (P<0.05, 0.01, 0.001), and the PPAR in the alcohol extract of Cistanche deserticola (0.125, 0.25 mg/mL) group γ The mRNA expression level decreased significantly (P<0.01, 0.001), and the MGL2 mRNA expression level in the alcohol extract of Cistanche deserticola deserticola (0.25 mg/mL) group decreased significantly (P<0.001).

3.4 A Cistanche deserticola etanolos kivonata gyengíti az M2-szerű makrofágok előmozdítását a 4T1 sejtvándorlás során. A karcolási tesztet a Cistanche deserticola etanolos kivonat felülúszójának az emlőráksejtek migrációs képességére gyakorolt ​​hatásának megfigyelésére használták. A BMDM-et szérummentes tápközegben inkubáltuk, amely IL-4-ot és Cistanche deserticola deserticola alkoholos kivonatát tartalmazta 24 órán át, majd a felülúszót kondicionált táptalajként gyűjtöttük össze. A 4T1-et szérummentes tápközegben tenyésztettük, amely 50%-ban kondicionált tápközeget tartalmazott, amint az 5. ábrán látható, a csak IL-4-mal kezelt BMDM-mel gyűjtött kondicionált tápközeg jelentősen elősegítette a 4T1 sejtek migrációját (P<0.05), while the conditioned medium of BMDM treated with alcohol extract of Cistanche deserticola significantly inhibited the migration of 4T1 cells (P<0.05). 3.5 Cistanche deserticola alcohol extract weakens the promotion of M2-like macrophages on 4T1 cell colony formation Use colony formation experiment to evaluate the effect of Cistanche deserticola alcohol extract on M2-like macrophages promoting 4T1 cell colony formation. As shown in Figure 6, the conditioned medium treated with IL-4 significantly promoted the colony formation of 4T1 cells (P<0.05), while the conditioned medium treated with alcohol extract of Cistanche deserticola significantly inhibited the colony formation of cells (P<0.001)

4. Megbeszélés

A cistanche tubulosa-Antitumor előnyei

Jelenleg a mellrák még mindig globális közegészségügyi probléma. Az emlőrák előfordulási aránya évről évre nő, és fiatalkorban, ami komolyan veszélyezteti a nők egészségét [13]. A hagyományos kínai orvoslás úgy véli, hogy a daganatok korai stádiumában, mivel a szervezet nem képes eloszlatni a qi-t a yang-hiány miatt, a yin qi nem elegendő, és nem képes normális spermium-felhalmozódást kialakítani. A kóros felhalmozódás azonban olyan kóros termékekhez vezet, mint a váladék zavarossága és a vér pangása, ami a toxinok daganatokká való átalakulásához vezet [14]. A Cistanche deserticola deserticola, mint a yang tonizálásának alapvető gyógyszere, életenergiát és vese yangot tonizál, és szabályozhatja az immunitást. A klinikai gyakorlatban általánosan használt veseerősítő kínai orvoslás. Manapság gyakran használják mellrák kezelésére, és gyakran használják magas frekvenciájú összetett gyógyszerként. A rák egyik jellemzője az immunrendszer diszfunkciója. Az immunsejtek, amelyeknek meg kell küzdeniük a daganatok ellen, kifejezetten a környező szövetek és a tumor mikrokörnyezet általi szexuális gátlás, ami a daganatok ellenőrizetlen növekedéséhez és terjedéséhez vezet [15]. Egyre több bizonyíték bizonyítja, hogy ha a tumor mikrokörnyezetében létezik, akkor a veleszületett immunsejtek (makrofágok, neutrofilek, dendritikus sejtek, veleszületett limfoid sejtek, csontvelőből származó szexuális gátló sejtek és NK-sejtek) és adaptív immunsejtek (T- és B-sejtek) ) hozzájárulnak a tumor progressziójához [16]. A makrofágok a szöveti homeosztázis nélkülözhetetlen mediátorai, és az alternatív aktivált makrofágok (M2 típus) felé történő polarizációjuk elősegítheti a rákos sejtek proliferációját, angiogenezist és metasztázisokat. Ezért a TAM-ok szabályozása és homeosztázisuk fenntartása a daganatkezelés középpontjába került [17]. A TAM-ok részt vesznek az emlőrák metasztázisában, angiogenezisében, mátrix-átalakításában, inváziójában és immunszuppressziójában. A TAM-ok alapvetően két különböző fenotípusra oszlanak, nevezetesen a klasszikus aktivált M1-szerű makrofágokra és az alternatív aktivált M2-szerű makrofágokra [18]. Jóindulatú vagy nem funkcionális daganatokban a legtöbb TAM klasszikusan aktivált M1-szerű makrofág, amelyek interferon-, IFN-） vagy lipopoliszacharid (LPS) aktiválás, így elősegítik a TAM-ok gyulladásos faktorok termelését és a tumorsejtek fagocitózisát. Az M2-szerű makrofágokat Th2 citokinek, például IL-4 aktiválhatják, hogy nagyszámú gyulladásgátló faktort termeljenek, amelyek közvetlenül elősegítik az emlőrák kialakulását [19]. Ezért az M2-szerű makrofágok polarizációjának megfordítása vagy gátlása a mellrák immunterápiájának stratégiája. Az Arg-1 az M2-szerű makrofágok markere, és túlzott expressziója rossz prognózissal jár a rákos betegeknél [20].

Kínai gyógynövény cistanche-Antitumor

A CD163 az M2-szerű makrofágok specifikus markere [21], amely a tumor metasztázisához kapcsolódik. A CD163 plusz TAM indukálja az epiteliális-mezenchimális átmenetet (EMT) és elősegíti a rákos sejtek migrációját [22]. A tanulmány eredményei azt mutatják, hogy a Cistanche deserticola deserticola kivonata bizonyos mértékig szerepet játszik az immunitás szabályozásában, gátolva az Arg-1 és CD163 expresszióját, amelyek az M2-szerű makrofágok felszíni markerei, és a makrofágok M2- típusú polarizációjának gátlása. PPAR Ez egy metabolikus érzékelő, amely szabályozza a lipid homeosztázist különböző zsírsavak és zsírsavszármazékok (például palmitinsav) aktiválása révén [23]. PPAR A makrofágok M2 polarizációjához kapcsolódóan a PPAR A makrofágok M2 polarizációjának fő szabályozójává vált [24], a PPAR ligandumokról kimutatták, hogy erősen gátolják a tumor növekedését in vivo [25]. A Fizz1 és az Ym1 egyaránt M2-szerű makrofág markergének, a Fizz1 és Ym1 pedig részt vesz a fibrózisban a szövetjavítás során [26]. Az M2-szerű makrofágok nagy mennyiségű CCL24-et termelnek in vitro [27], és a CCL24 fokozott expressziója elősegítheti a tumor proliferációját, migrációját és invázióját [28]. Az IRF4 az IRF család tagja. Részt vesz a makrofágok M2 polarizációs folyamatában, és a MyD88 adaptermolekulával kombinálva a Toll-szerű receptor jelek negatív szabályozójaként működik [29]. Az MGL2 a galaktóz C típusú lektin makrofágcsalád tagja, és más aktiválási körülmények között stimulált makrofágokban is expresszálódik [30]. A tanulmány eredményei azt mutatják, hogy a Cistanche deserticola deserticola kivonata gátolja az M2-szerű makrofágokhoz kapcsolódó PPAR gént, A Fizz1, Ym1, CCL24, IRF4 és MGL2 expressziója gátolja a makrofágok M2 típusú polarizációját, jelezve, hogy az Epimedium hatékonyan szolgálhat. az M2-szerű makrofágok inhibitora. Egyre több bizonyíték utal arra, hogy az M{41}}szerű makrofágok elősegíthetik a rák áttétét és növekedését [31]. Az M2-szerű makrofágokból származó kondicionált tápközeg képes szimulálni a tumor mikrokörnyezetét, és a tumor migrációját és növekedését indukálni, ami hasonló a rosszindulatú daganatokból izolált makrofágokhoz [12]. Az IL-4 elősegítheti a makrofágok M2 típus felé történő polarizációját, valamint elősegítheti a tumorproliferációt és az angiogenezist [18]. Ez a tanulmány kimutatta a makrofág polarizáció és a Cistanche deserticola deserticola daganatellenes hatása közötti összefüggést. Az IL-4-aktivált makrofágokból származó kondicionált táptalaj elősegítette a 4T1 sejtek migrációját és növekedését, majd a Cistanche deserticolával való együttes beavatkozás után megfordította ezt az M2-aktivált tumorpromotáló hatást, jelezve, hogy az IL{55} Az aktivált M2 polarizációt a Cistanche deserticola megszüntette.

Ez a tanulmány kimutatta a makrofág polarizáció és a Cistanche deserticola deserticola daganatellenes hatása közötti összefüggést. Az IL-4-aktivált makrofágokból származó kondicionált táptalaj elősegítette a 4T1 sejtek vándorlását és növekedését, és a Cistanche deserticolával való együttes beavatkozás után megfordította ezt az M2-aktivált daganatot elősegítő hatást, jelezve, hogy az IL{{7} }aktivált M2 polarizációt az Epimedium megszüntette. Ez a tanulmány megállapította, hogy a Cistanche deserticola kivonat gátolja az emlőrák sejtvándorlását és kolóniaképződését azáltal, hogy szabályozza a makrofágok in vitro polarizációját, ami azt jelzi, hogy a Cistanche deserticola mellrák kezelése összefüggésben lehet a tumor mikrokörnyezet szabályozásával, és az Epimedium a tumor mikrokörnyezetének szabályozója a metasztázis helyén a makrofágok befolyásolásával, amely új mechanizmusokkal látja el a Cistanche deserticola daganatellenes funkcióját. Felfedi a Cistanche deserticola új lehetséges mechanizmusát a rák kezelésében, amely segíthet csökkenteni a rák előfordulási arányát rák és a rákkal összefüggő halálozás. A jövőben a kutatócsoport tovább vizsgálja a Cistanche deserticola hatását az emlőrák növekedésére és metasztázisára, miután in vivo gátolta a makrofágok M2 polarizációját, hogy tovább magyarázza a Cistanche deserticola daganatellenes mechanizmusát és megalapozza a klinikai alkalmazást. Cistanche deserticola a daganatos betegségek kezelésében.

Hivatkozások

Hivatkozások

[1] A GBD 2019. évi rákkockázati tényezők munkatársai. A kockázati tényezőknek tulajdonítható rák globális terhe, 2010-19: A 2019-es globális betegségterh-tanulmány szisztematikus elemzése [J]. Lancet, 2022, 400(10352): 563-591.

[2] Yin L, Duan JJ, Bian XW és társai. A hármas negatív emlőrák molekuláris altípusa és a kezelés előrehaladása [J]. Breast Cancer Res, 2020, 22(1): 61.

[3] Medeiros B, Allan A L. A mellrák tüdőbe történő metasztázisának molekuláris mechanizmusai: Klinikai és kísérleti perspektívák [J]. Int. J. Mol. Sci., 2019, 20(9): 2272.

[4] Pathria P, Louis TL, Varner J A. Tumorral összefüggő makrofágok célzása rákban [J]. Trends Immunol, 2019, 40(4): 310-327.

[5] Shen MJ, Chen YB, Xu LJ és mások. A makrofágok fokozott infiltrációja a sugárrezisztens tüdőráksejtekbe hozzájárul a tumorsejtek további rezisztenciájának kialakulásához az NK-sejtek citotoxikus hatásaival szemben [J]. Int J Oncol, 2018, 53(1): 317-328.

[6] Tariq M, Zhang JQ, Liang GK és mások. Makrofág polarizáció: Rákellenes stratégiák a daganathoz kapcsolódó makrofágok megcélzására emlőrákban [J]. J Cell Biochem, 2017, 118(9): 2484-2501.

[7] Ma Li A Cistanche deserticola glikozid hatása a stromasejtekből származó faktorra-1 (SDF-1) és receptorára CXCR-4 akut középső agyi infarktusban szenvedő patkányokban [D] Nanjing : Nanjing Kínai Orvostudományi Egyetem, 2014

[8] Hao Fuliang A Cistanche deserticola glikozid hatása és mechanizmusa a nyúl koponyahibáinak javítására és gyógyulására [D] Shijiazhuang: Hebei Medical University, 2013

[9] He J, Zang SL, Liu N és társai. Az epimedium poliszacharidok az oxidatív stressz csökkentésével és az immunfunkció fokozásával csökkentik a hematotoxicitást a benzol által kiváltott csontvelő-elégtelenség egérmodelljében [J]. Biomed Pharmacother, 2020, 125: 109908.

[10] Hua Ciyi, Shi Youyang, Xie Ying és munkatársai Kutatási előrehaladás a Cistanche deserticola Aktív összetevője a mellrák kezelésében [J] Kínai gyógynövény, 2022, 53 (20): 6593-6600

[11] Chen Xiaolei, Tang Lijian, Li Qinglin Tanulmány a mellráksejtek Cistanche deserticola és frazil kivonatokkal történő in vitro proliferációját gátló hatásáról [J] China Pharmacy, 2007, 18 (15): 1124-1127

[12] Xu F, Cui WQ, Wei Y és mások. Az Astragaloside IV gátolja a tüdőrák progresszióját és metasztázisát azáltal, hogy modulálja a makrofágok polarizációját az AMPK jelátvitelen keresztül [J]. J Exp Clin Cancer Res, 2018, 37(1): 207.

[13] Britt KL, Cuzick J, Phillips K A. Kulcs lépések a hatékony mellrák megelőzésében [J]. Nat Rev Cancer, 2020, 20(8): 417-436.

[14] Hao Feifei, Tian Sisheng A "Yang domináló yin követés" feltárása a rosszindulatú daganat áttétben az elgázosítás elmélete alapján [J] Shi Zhen Guoyi Guoyao, 2021, 32 (1): 164-166

[15] Denk D, Petrocelli V, Conche C és társai. Kiváló daganatellenes immunitással rendelkező T-memória őssejtek expanziója urolitin A-indukált mitofagiával [J]. Immunity, 2022, 55(11): 2059-2073.

[16] Hinshaw DC, Shevde LA. A tumor mikrokörnyezete veleszületett modulálja a rák progresszióját [J]. Cancer Res, 2019, 79(18): 4557-4566.

[17] DeNardo DG, Ruffell B. Makrofágok, mint a tumorimmunitás és immunterápia szabályozói [J]. Nat Rev Immunol, 2019, 19(6): 369-382.

[18] Dong R, Gong YL, Meng W et al. Az M2 makrofág polarizáció gátlásának szerepe a fenretinidben a vastagbélrák kemopreventív hatásaiban [J]. Cancer Lett, 2017, 388: 43-53. [19] Jiménez-Garcia L, Herránz S, Luque A, et al. A p38 MAPK kritikus szerepe az IL-4-indukálta a peritoneális makrofágok alternatív aktiválását [J]. Eur J Immunol, 2015, 45(1): 273-286.

[20] Ma ZG, Lian J, Yang M és mtsai. Az arginase{1}} túlzott expressziója a rossz prognózis mutatója vastag- és végbélrákos betegeknél [J]. Pathol Res Pract, 2019, 215(6): 152383.

[21] Tao SF, Chen Q, Lin C és mtsai. A Linc00514 elősegíti a mellrák metasztázisát és a tumorhoz kapcsolódó makrofágok M2 polarizációját a Jagged{4}}közvetített Notch jelátviteli útvonalon [J]. J Exp Clin Cancer Res, 2020, 39(1): 191.

[22] Wei C, Yang CG, Wang SY és mások. A rákos sejtek és a daganathoz kapcsolódó makrofágok közötti áthallás szükséges a mezenchimális keringő tumorsejtek által közvetített vastag- és végbélrák metasztázisához [J]. Mol Cancer, 2019, 18(1): 64.

[23] Francque S, Szabó G, Abdelmalek MF, et al. Nem alkoholos steatohepatitis: A peroxiszóma proliferátor által aktivált receptorok szerepe [J]. Nat Rev Gastroenterol Hepatol, 2021, 18(1): 24-39.

[24] Tian Y, Yang CM, Yao QY és mások. A procianidin B2 aktiválja a PPAR-t, hogy M2 polarizációt indukáljon egér makrofágokban [J]. Front Immunol, 2019, 10: 1895.

[25] Takada I, Makishima M. Peroxiszóma proliferátor által aktivált receptor agonisták és antagonisták: szabadalmi áttekintés (2014- jelen van) [J]. Expert Opin Ther Pat, 2020, 30(1): 1-13.

[26] Okuzumi S, Miyata J, Kabata H, et al. A TLR7 agonista IL-27-termelő intersticiális makrofágokon keresztül elnyomja a 2. csoportba tartozó veleszületett limfoid sejt által közvetített gyulladást [J]. Am J Respir Cell Mol Biol, 2021, 65(3): 309-318.

[27] Makita N, Hizukuri Y, Yamashiro K et al. Az IL-10 fokozza az IL-4 által indukált M2 makrofágok fenotípusát, és képessé teszi az eozinofilek migrációját [J]. Int Immunol, 2015, 27(3): 131-141.

[28] Jin L, Liu WR, Tian MX és társai. A CCL24 a ​​RhoB-VEGFA-VEGFR2 angiogenezis útvonalon keresztül hozzájárul a HCC malignitás kialakulásához, és rossz prognózist jelez [J]. Oncotarget, 2017, 8(3): 5135-5148.

[29] Satoh T, Takeuchi O, Vandenbon A et al. A Jmjd3-Irf4 tengely szabályozza az M2 makrofág polarizációt és a gazdaszervezet válaszait a helminth fertőzéssel szemben [J]. Nat Immunol, 2010, 11(10): 936-944.

[30] Raes G, Brys L, Dahal BK és társai. Makrofág galaktóz C típusú lektinek, mint új markerek a parazita fertőzések és allergiás légúti gyulladások által kiváltott alternatív módon aktivált makrofágok számára [J]. J Leukoc Biol, 2005, 77(3): 321-327.

[31] Mantovani A, Allavena P, Sica A et al. Rákkal kapcsolatos gyulladás [J]. Nature, 2008, 454(7203): 436-444.