Mit tehet a Cistanche-ban található akteozid a jóindulatú prosztata hiperpláziával?
Mar 17, 2022
Az akteozid hatásának kutatása gátolta a jóindulatú prosztata hiperpláziát patkányokban
KULCSSZAVAK: Cistanche, akteozid, jóindulatú prosztata hiperplázia, apoptózis.
Kapcsolatba lépni:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
ABSZTRAKT:
A beg nin prosztata hiperplázia patkánymodelljét és három dóziscsoportját hozták létreakteozid4 héten keresztül szájon át adták, hogy tanulmányozzák a hatásátakteoziddesztillálvaCistanchetubulosa onapoptózisés ultramikro szerkezetű prosztata patkányokbanjóindulatú prosztata hiperplázia. A prosztata ultrastrukturális változását transzmissziós elektronmikroszkóppal figyeltük meg. Az eredmények ezt mutattákApoptózisnormál patkány prosztata nem volt nyilvánvaló, alacsony volt
a prosztata arányaapoptózisa modellcsoportban, a nagy dózisbanakteozidtól tőlCistanchetubulosa kezelés, patkány prosztataapoptózisjelentősen magasabb volt, mint a modellé.
A jóindulatú prosztata hiperplázia folyamatában sejtapoptózisaz egyik olyan mechanizmus, amely jelenleg felkelti a figyelmet. A génkódolás határozza meg, és lehetővé teszi a sejteknek, hogy specifikus jelekre reagálva szabályozzák a programozott sejthalált.
Miután a prosztata felnőtt méretűvé fejlődik, a prosztatasejtek proliferációs rátája 1-2 százalékon marad az átlagos prosztata arány egyensúlyán keresztül.apoptózis. Ha az egyensúly megbomlik, akkor az okának tekinthetőjóindulatú prosztata hiperplázia. Normál körülmények között az ösztrogén és androgén szintje, valamint a prosztata normális keringése egyfajta önkiegyensúlyozott állapot, amely a proliferáció ésapoptózis. Amikor az egyensúly a proliferáció ésapoptóziskiegyensúlyozatlan, a mirigy további növekedéséhez és tágulásához vezet, ami főként a hámsejt rekesz tágulását okozza [1].
Ebben a kísérletben egy patkány prosztata hiperplázia modellt hoztunk létre a hatás megfigyelésére és elemzéséreakteozid(koakciószerű glikozid), az egyik kémiai összetevőjeCistancheaapoptózisés a patkány prosztatasejtek ultrastrukturális változásai, hatásának értékeléséreakteozidA prosztata hiperplázia gátló hatása tudományos alapot ad a kínai orvoslás új felhasználási módjainak kifejlesztéséhez és hasznosításáhozCistanche.
AzakteoziddesztillálvaCistanchebefolyásolhatjajóindulatúprosztatahiperplázia.
Anyag és módszerek
Kísérleti Állat
Ötven, 6-7 hetes, tiszta osztályú, 80-100 g tömegű hím SD patkányt a Yangzhou Egyetem Összehasonlító Orvostudományi Központja biztosított.
Reagensek és gyógyszerek
A tesztoszteron-propionát injekció a Shanghai General Pharmaceutical Co., Ltd.-től származik, a specifikáció 25 mg·mL-1, a tételszám pedig 060708. A PI festékoldat a Yangzhou University Testing Centertől származik. Az Aktiside tartalma 945 g·kg-1, amelyet a Kínai Gyógyszerészeti Egyetem Kínai Orvostudományi Elemző Tanszéke készített.
Kísérleti berendezések
A Philips Tecnai 12 transzmissziós elektronmikroszkóp a holland Philips cégtől származik; A FACSAria áramlási citométer az egyesült államokbeli BD-ből származik.
Csoportosítások és modellezés
Az irodalmi módszer szerint [3] végzett kasztrálás után a patkányok 5 mg·(kg·d) injekciót kaptak.-1tesztoszteron-propionátot a patkányok hátára 4 hétig, hogy létrehozzuk a prosztata hiperplázia modelljét. A modellpatkányokat véletlenszerűen modellcsoportokra osztották: modell pluszakteozidnagy dózisú csoport, modell pluszakteozidközepes dózisú csoport, modell pluszakteozidalacsony dózisú csoport, minden csoportban tíz patkány; további tíz normál patkány volt a kontrollcsoport.
Beadási mód
Egy héttel a modellkedés után,akteozida magas, közepes és alacsony dózisú csoportok 60, 30, 15 mg·(kg·d)-t kaptak.-1szondával, ill. A modellcsoport és a kontrollcsoport azonos térfogatú normál sóoldatot kapott naponta egyszer négy héten keresztül, hetente egyszer megmértük, és az adagolást a testtömegükhöz igazították.
Mintagyűjtés és feldolgozás
Anyag- és minta-előkészítés: 24 órával az utolsó adagolás után mérjük le az éheztetett patkányokat, és öljük le a patkányokat nyaki diszlokációval. Azonnal nyissa ki az alsó hasat, húzza le a prosztata körüli szöveteket, szabadítsa fel a prosztatát, és vegye ki a prosztata egy részét jeges fürdőben való használatra. Szövet homogenizátorral homogenizált, prosztata egysejtes szuszpenziót készített, és propidium-jodiddal festett egylépéses módszerrel [4]; a prosztataszövet egy másik részét 25 g·l-ben rögzítettük-1glutáraldehid az ultravékony metszetek elkészítéséhez.
Készítsen egysejt-szuszpenziót: Aszeptikus körülmények között távolítsa el teljesen a patkány prosztatát, és helyezze át egy Petri-csészébe, mossa le a vért és a vérrögöket a prosztataszövet felszínén PBS-sel, és távolítsa el a környező zsírt, a felesleges rostokat és a sejtet. membránok. Ugyanabból a patkány prosztatából kb. {{0}},5 cm3 méretű friss prosztataszövetet vettünk ki, és darabokra vágtuk, hogy prosztata sejtszuszpenziót készítsünk [5]. Helyezze a prosztata szövetblokkot egy Petri-csészébe, és adjon hozzá egy kis mennyiségű PBS-t; szemészeti ollóval vágja le a szövetet jeges fürdőben, a homogenizátort őrölje szuszpenzióvá, adjon hozzá 10 ml PBS-t, pipettázzon a szövethomogenizátumból, majd 0,074 mm-es pórusméretű nylon hálót szűrt a kémcsőbe, centrifugált {{7} } r min-13 percig, és a csapadékot háromszor mostuk PBS-sel, minden alkalommal 500 fordulat/perc mellett.-1rövid távú alacsony sebességű centrifugálás a sejttörmelék eltávolítására, 0,037 mm-es pórusméretű nylon hálószűrőre a sejtcsomók eltávolítására. Számolja meg a sejteket, és állítsa be a sejtkoncentrációt 2×109 sejt·L-re-1. 1 ml PI festőoldattal megfestjük, fénytől védve 4 fokon 10 percig.
Ultravékony metszet előkészítése: Az ultravékony szövetmetszet elkészítéséhez lásd a szakirodalmat [6].
Eredmények és elemzések
A hatásaakteozidpatkány prosztata apoptózisára
Az 1. ábra a csúcsát mutatjaapoptózisáramlási citometriával kimutatható, ami azt mutatjaakteozidpro-apoptotikus hatása van. A sejt statisztikai elemzéseapoptóziseredmények azt mutatták, hogy a patkánysejtapoptózisaránya szignifikánsan (24,7±1,85) és (16,1±1,04) százalékkal nőtt a magas, közepes és alacsony dózisú kezelés után.akteozid. , (14,5±0.68) százalék , és a normál csoport (1,1±0.{{10}}6) százalék , modellcsoport (9,5±0,5) százalék , pozitív csoport (9,83±0,76) A százalékos összehasonlítás különbsége szignifikáns (P<0.01), indicating="" that="" aktidine="" can="" induce="" cell="">apoptózis, a hatás erősebb, mint a Qianliekang pozitív kontroll gyógyszeré (2. ábra).
A hatásaakteozida prosztata hiperplázia sejtek ultrastruktúrájáról.
Az elektronmikroszkópos megfigyelések azt mutatják, hogy a normál patkány prosztata teljes magokkal, nyilvánvalóan magvakkal és egyenletes magkromatineloszlással rendelkezik; a durva endoplazmatikus retikulum azonos méretű, szépen elrendezett, és nincs vakuolizációja. A hám felszínén nincsenek ujjszerű mikrobolyhok, mitokondriumok nem duzzadnak, és kevés váladék az üregben. A modellcsoportban a prosztata sejtmagjai deformálódtak és összezsugorodtak, a citoplazma pedig bőséges volt. A durva endoplazmatikus retikulumot cisztaszerű alakban kitágították, és a cisztát nagy sűrűségű fehérjerészecskékkel töltötték meg. A mitokondriumok enyhén megduzzadtak (vacuolák is voltak), Az üregben közepes sűrűségű váladék található, egyes sejtekben sűrű, kerek szekréciós szemcséket találtunk. A kezelt patkányokbanakteozid, a sejtmag ép volt a modellcsoporthoz képest. A sejtmag koncentrálódott, a magsűrűség megnőtt, a heterokromatin felhalmozódott, a citoplazmában vakuolák voltak, és a durva endoplazmatikus retikulum vakuolák csökkentek. Az alacsony dózisúakteozidcsoport enyhén ráncos sejtmagjai Zsugorodás, szabálytalan, gazdagabb citoplazma és csökkent érdes endoplazmatikus retikulum (3. ábra).
Vita
Apoptózisa többsejtű szervezetek programozott sejthalálának folyamata, amely szabályozza a szervezet fejlődését és fenntartja a belső környezet stabilitását, és ezt genetikai kódok határozzák meg.
Az apoptotikus sejtek egyedi morfológiai és biológiai jellemzőkkel rendelkeznek: a magkromatin zsugorodása, a DNS kiterjedt lebomlása és fragmentációja, a sejtek teljes körű zsugorodása, a sejtmembránok és az organellumokat (például mitokondriumokat és riboszómákat) fedő külső kiemelkedések zsugorodása, valamint jellegzetes nukleáris sejtek kialakulása. fragmentumok Az apoptotikus testek, az apoptotikus sejtek nemcsak teljes sejtmembránszerkezetet és funkciót tartanak meg, hanem teljes organellum-szerkezettel is rendelkeznek, ami különbözik a sejtnekrózistól.
A sejt molekuláris mechanizmusaapoptóziseddig nem sikerült teljesen tisztázni. Tanulmányok [7] kimutatták, hogy számos gén vesz részt a sejt génszabályozásábanapoptózis.
Apoptózisaz a folyamatjóindulatúprosztatahiperpláziaami jelenleg nagyobb figyelmet vonz. A génkódolás határozza meg, és lehetővé teszi a sejteknek, hogy specifikus jelekre reagálva szabályozzák a sejthalált [1]. Miután a prosztata felnőtt méretűvé fejlődik, a prosztatasejtek proliferációs rátája 1-2 százalékon marad a prosztata egyensúlyának köszönhetően.apoptózismérték. Ennek az egyensúlynak a felbomlását mindig is okának tekintettékjóindulatúprosztatahiperplázia[8]. Normál körülmények között a prosztata ösztrogén és androgén szintje és a rendszeres keringés egyfajta önkiegyensúlyozott állapot, amely a proliferáció és a szaporodás folyamatában áll fenn.apoptózis. Amikor a burjánzás ésapoptóziskiegyensúlyozatlanok, ez a mirigyek növekedését és további terjeszkedését okozza, főként a hámsejt-rekesz tágulása miatt [9]. Ennek az egyensúlynak a megszakadása az androgénszintek vagy funkciók változásai miatt következhet be; ennek oka lehet a DHT AR-stimulációja által kiváltott bármely válasz vagy a DHT által közvetített növekedési faktor szintjének változása is [2]. Ebben a vizsgálatban az FCM sejtet észleltapoptózisés megállapította, hogy aapoptózisprosztata sejtek aránya nagy dózisú patkányokbanakteozidjelentősen megnőtt. Az elektronmikroszkópos eredmények azt mutatták, hogy a modellcsoportban a prosztata sejtmagjai deformálódtak, a durva endoplazmatikus retikulum cisztaszerű formában erősen kitágult, a ciszta nagy sűrűségű fehérjerészecskékkel telt meg, és vakuolizációt találtak. A mitokondriumok enyhén megduzzadtak, és a kapcsolódó vizsgálatok[ 10-11 ] A jelentés következetes.
Utánakteozidbeavatkozás, a prosztata hiperplázia mértéke patkányokban alacsonyabb volt. A nagy dózisú csoport korai jeleit is mutattaapoptózis: a prosztata sejtmagja ép maradt, az endoplazmatikus retikulum vakuólumok szignifikánsan alacsonyabbak voltak. Magok kondenzációja, megnövekedett magsűrűség, heterokromatin felhalmozódása, hasonlóan a patkányok prosztataszöveti sejtjeinek kasztráció utáni jellemzéséhez [12-13]. Ez azt mutatjaakteozidtólcistanchesejtet indukálhatjaapoptózisprosztata hiperpláziában szenvedő patkányokban szabályozza és helyreállítja a prosztatasejtek egyensúlyátapoptózisés proliferációt, és szerepet játszanak a prosztata sejtszaporodásának gátlásában. E tanulmány és a korábbi vizsgálatok eredményei [14] azt mutatják, hogy a gátló hatás aakteozid, kémiai összetevőjeCistanchetubulosa, prosztata hiperplázia esetén összefüggésbe hozható a sejt elősegítésévelapoptózis, az AR és a TGF-UR1 túlzott expressziójának csökkentése. A részletes hatásmechanizmust még tovább kell tanulmányozni.
Referenciák:
A forrás a szerzőktől származik: Sun Weidong1, Chen fei2, Sun yun2 (1. Yangzhou Hagyományos Kínai Orvostudományi Kórház, Yangzhou 225009, Jiangsu; 2. Orvostudományi Iskola, Yangzhou Egyetem, Yangzhou 225001, Jiangsu)
