Mi az echinacoside, a Cistanche Deserticola hatékony összetevője, a hasnyálmirigy adenokarcinóma sejtnövekedésének módja?

Kapcsolatba lépni:joanna.jia@wecistanche.com

Az echinakozid gátolja a hasnyálmirigy-adenokarcinóma sejtek növekedését azáltal, hogy a mitogén által aktivált protein kináz útvonalon keresztül apoptózist indukál

WEI WANG, JINBIN LUO, YINGHUI LIANG és XINFENG LI

Absztrakt.

A hagyományos kínai orvoslásból származó természetes termékek klinikai alkalmazása a rák kemoterápiájában kapott figyelmet.Echinakozid(ECH), az egyik feniletanoid, amelyet a szárából izolálnakCistanchea salsa (kínai gyógynövény) szövetvédő és apoptotikus hatást fejt ki a központi idegrendszerre. Az azonban nagyrészt megfoghatatlan, hogy vajonEchinakozid tumorszuppresszív aktivitással rendelkezik. Jelen tanulmányban bebizonyosodott, hogyEchinakozidjelentősen gátolhatja a hasnyálmirigy-adenokarcinóma sejtek proliferációját azáltal, hogy indukálja a reaktív oxigénfajták termelődését és a mitokondriális membránpotenciál megzavarását, és ezáltal kiváltjaapoptózis. Továbbá kiderült, hogyEchinakozidgátolja a tumorsejtek növekedését a MAPK aktivitás modulálásával. Összefoglalva, ez a tanulmány feltárja az ECH új funkcióját a rák kialakulásának megelőzésében, és arra utal, hogy aEchinakozid potenciális kemoterápiás stratégia lehet a rák kezelésére.

Az echinakozid a cistanche-ban csökkentihasnyálmirigy-adenokarcinóma sejtek növekedése

Bevezetés

A rák életveszélyes betegség, és világszerte az egyik vezető halálok. A rákos sejteket a gátoltapoptózis, ellenőrizetlen növekedés és proliferáció, valamint metasztázis (1). A rák kialakulása, amelyet gyakran genetikai elváltozások indítanak el, összetett folyamat, amelyben az onkogén fehérjék és a tumorszuppresszorok közötti kölcsönhatások bonyolult jelátviteli hálózatot alkotnak. Például azt találták, hogy a Myc onkogén amplifikálódik vagy túlzottan expresszálódik különféle ráktípusokban, és a Myc által kódolt onkoprotein elősegítheti a daganatképződést azáltal, hogy elősegíti a sejtciklus progresszióját, serkenti a sejtnövekedést és indukálja az angiogenezist (2). A Myc által kiváltott onkogén jelek azonban aktiválhatják a p53 tumorszuppresszor útvonalat a tumorszuppresszor, az ARF indukcióján keresztül, amely mérsékli az onkogén E3-ligáz egér double minute (MDM)2- által közvetített p53 degradációt ( 3). Ez egy automatikusan szabályozott, önvédő mechanizmus, amely megakadályozza a sejtek rosszindulatú átalakulását. Nevezetesen, a p53 képes elnyomni a Myc aktivitást azáltal, hogy transzkripciósan aktiválja például a miR-145-t, amely a Myc mRNS-t célozza meg a transzláció elnémítására (4,5), így negatív visszacsatolású szabályozó hurkot képez.

A rák kezelésének legegyszerűbb és leghatékonyabb stratégiája a rákos sejtek elpusztítása. Az általánosan használt rákellenes szerek, mint például a ciszplatin (6), az aktinomicin D (7) és az adriamicin (8) kimutatták, hogy gátolják a tumor növekedését az apoptózis elősegítésével. A közelmúltban egyre több bizonyíték támasztja alá, hogy számos természetes termék és növényi származék, különösen a hagyományos kínai gyógyászatban (TCM) használt gyógynövényekből, tumorszuppresszív funkciót mutat a rákos sejtek apoptózisának indukálásával, és klinikai alkalmazási lehetőségekkel rendelkezik. a rákterápiában (9). Például a TCM-ből izolált természetes antrakinon emodin, a Radix rhizome Rhei számos rákos sejttípus növekedését képes elnyomni (10,11). A kínai „boldogfából”, a Camptotheca acuminate-ból származó kamptotecin értékes természetes termék, amely gátolja a DNS ligálását a topo I által közvetített száltörést követően (12). Egy másik, összesen 729 előrehaladott emlőrákban szenvedő beteg bevonásával végzett retrospektív populációs kohorsz vizsgálatban azt javasolták, hogy a TCM-terápia hozzájárulhat a rák kezeléséhez. Ebből a csoportból 115 beteg volt TCM-használó, míg 614 beteg nem használt TCM-et. A többváltozós elemzés kimutatta, hogy a nem használókkal összehasonlítva a TCM használata jelentősen csökkentette a bármilyen okból bekövetkező halálozás kockázatát (13). Az összes fent említett megállapítás arra utal, hogy a TCM fontos kiegészítő és alternatív gyógyszer, amely felhasználható a rák kezelésében.

Echinakozid(ECH) egy feniletanoid, amelyet a szárából izolálnakCistanchessalsa, egy kínai gyógynövény, amely fontos nyers gyógyszer, amelyet antiszérumként és fáradtságcsökkentőként használnak (14). Megállapítást nyert, hogy számos feniletanoid szabad gyökfogó tulajdonságokkal rendelkezik, és véd az oxidatív stressz által kiváltott toxikus sérülésektől (15). Ezen túlmenően, több biológiai tulajdonságaitEchinakozidazóta tisztázták. Például az ECH megmentheti a gyulladásos citokinek megnövekedett szintjét, és javíthatja a tüdő kórszövettani rendellenességeit akut tüdősérülésben szenvedő egerekben (16, 17). Is,Echinakozid kimutatták, hogy védő hatást fejt ki az idegszövetre, és javítja a viselkedési zavarokat a Parkinson-kór egérmodelljeiben (18). Nevezetesen azt találták, hogy az ECH elősegíti a sejtproliferációt és gátoljaapoptózisaz egér bélhám MODE-K sejtjeiben (19). Mindeddig azonban kevesebb figyelmet fordítottak az ECH rákmegelőzésben betöltött lehetséges szerepére.

Ebben a tanulmányban azt vizsgálták, hogyEchinakozid kezelés befolyásolja a daganatsejtek növekedését és proliferációját és azt, hogyEchinakozidapoptózist indukál, növeli a reaktív oxigénfajták (ROS) termelését, csökkenti a mitokondriális membránpotenciált (MMP), következésképpen gátolja a tumorsejtek növekedését. Ezen túlmenően jelen tanulmány célja az ECH által közvetített sejtnövekedés gátlásáért felelős molekuláris mechanizmusok azonosítása volt.

Anyagok és metódusok

Sejtvonal, reagens és antitestek.

Az SW1990 hasnyálmirigy-adenokarcinóma sejteket (ATCC, Manassas, VA, USA) Dulbecco módosított Eagle táptalajban tenyésztettük, amelyet 10% magzati szarvasmarha szérummal, 50 U/ml penicillinnel és 0,1 mg/ml sztreptomicinnel egészítettek ki 37 ˚C-on. 5 százalékos CO2 párásítású légkör.Echinakozida Jrdun Biotechnology Corp.-tól (Sanghaj, Kína) vásárolták. Az AKT, P-AKT, ERK, P-ERK, JNK, p-JNK, P38, p-P38 és GAPDH elleni antitesteket a Cell Signaling Technology-tól (Danvers, MA, USA) vásároltuk; az anti-Bax és az anti-Bcl{8}} a Santa Cruz Biotechnology Inc.-től (Santa Cruz, CA, USA) vásárolt; és az anti-Caspase{10}} az Abcam-tól (Sanghaj, Kína) vásárolt.

Sejtéletképességi vizsgálat.

A tumorsejtek növekedési ütemének felmérésére Cell Counting kit{{0}} (CCK-8; Dojindo Molecular Technologies, Rockville, MD, USA) használtuk a gyártó utasításainak megfelelően. A sejtszuszpenziókat 5,000 sejt/lyuk mennyiségben oltottuk be ECH kezeléssel 0, 12, 24, 48 vagy 72 órán keresztül 96-lyukú tenyésztőlemezekre. A sejtnövekedés gátlását úgy határoztuk meg, hogy a CCK-8 készletből 10 százalékos végső koncentrációban WST{10}} reagenst adtunk minden egyes lyukhoz, és a minták abszorbanciáját 450 nm-en mértük mikrolemez-leolvasóval (Multiskan MK3; Thermo Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA, USA).

Hoechst 33342 festés.

A sejteket (60 százalékos összefolyás) Hoechst 33342-vel (Beyotime Institute of Biotechnology, Haimen, Kína) kezeltük 1 µg/ml végső koncentrációban, 37 °C-os inkubátorban 15 percig inkubáltuk, kétszer mostuk foszfáttal pufferolt sóoldattal, fixáltuk. 4 százalékos paraformaldehidben 30 percig szobahőmérsékleten, majd tárgylemezekre szereljük. A sejtmagok morfológiai változásait fluoreszcens mikroszkóp alatt (Olympus BX51, Melville, NY, USA) figyeltük meg. A normál magok kerekek voltak és világoskékre festettek, míg az apoptotikus sejtmagok összezsugorodtak és élénkkékre festettek.

Fluoreszcenciával aktivált sejtválogatás (FACS) elemzések.

Az értékeléshezapoptózis, a fluoreszcein-izotiocianát (FITC)-Annexin VApoptózisAz észlelőkészletet (BD Biosciences, Shanghai, Kína) a gyártó utasításai szerint használtuk. Röviden, 5x1{3}}4 sejtet jéghideg PBS-sel mostuk, 0,1 ml kötőpufferben (Beyotime Institute of Biotechnology) újraszuszpendáltuk, és 10 ml FITC-konjugált Annexin V-vel (10 mg/ml) és 10 nm. ml propidium-jodid (PI) (50 mg/ml). Sötétben, szobahőmérsékleten 15 percig tartó inkubálás és 400 ml kötőpuffer hozzáadása után a sejteket áramlási citométerrel (C6; BD Biosciences, Shanghai, Kína) analizáltuk.

Reaktív oxigénfajták (ROS) mérése.

A ROS termelésének értékeléséhez a Reactive Oxygen Species Assay Kit-et (Vigorous Biotechnology, Peking, Kína) használtuk a gyártó utasításai szerint. Röviden, a sejteket (80 százalékos összefolyás) összegyűjtöttük, és PBS-sel mostuk, mielőtt a dihidroetidium (DHE) oldattal megfestettük (Beyotime Institute of Biotechnology). A sejteket ezután áramlási citometriás analízissel elemeztük.

Mitokondriális membránpotenciál (MMP) mérése.

Az MMP változásainak kimutatására tetrametil-rodamin-metil-észter (TMRM) Assay kit (ImmunoChemistry Technologies, Bloomington, MN, USA) használtunk. Röviden, a sejteket (80 százalékos összefolyás) összegyűjtöttük, PBS-sel mostuk, és TMRM-mel festettük 15-20 percig 37 °C-os inkubátorban. A sejteket ezután egyszer mostuk PBS-sel, és áramlási citometriás analízisnek vetettük alá.

Immunblot elemzések.

A sejteket (8% konfluencia) összegyűjtöttük és RIPA pufferben (Jrdun Biotechnology) lizáltuk, amely 50 mM Tris-HCl-t tartalmazott, pH 7,4; 150 mM NaCl, 1 mM EDTA, 1% NP-40, 1% nátrium-dezoxikólsav és 0,1% SDS, valamint frissen hozzáadott proteaszóma inhibitorok. Az előzőekben leírtak szerint (20) azonos mennyiségű tiszta sejtlizátumot használtunk az immunblot analízishez.

Statisztikai analízis.

A mennyiségi adatokat átlag ± szórásként fejezzük ki. A statisztikai különbségeket nem párosított Student-féle t-teszttel értékeltük ki statisztikai SPSS 15.0 szoftver segítségével. P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">

Eredmények

Echinakozid gátolja a tumorsejtek növekedését. Bár arról már beszámoltakEchinakozid gátlása révén védő szerepet tölt beapoptózisés gyulladásos jelek szomatikus sejtekben, például neuronális és bélhámsejtekben (16-19), továbbra is megfoghatatlan, hogy az ECH szabályozza-e a rákos sejtek növekedését és proliferációját. Ennek tesztelésére egy sejttúlélési vizsgálatot végeztek, oly módon, hogy a II. fokozatú hasnyálmirigy-adenokarcinómából származó SW1990 sejteket titrált ECH-dózisokkal kezelték, amint az az 1. ábrán látható. Nevezetesen, bebizonyosodott, hogy az ECH szignifikánsan késlelteti a tumorsejtek proliferációját egy dózisban. -függő módon egy 5-napos tenyésztési időszakban (1. ábra).

Echinakozid apoptózist vált ki. Veszteségkéntapoptózisa hasnyálmirigyráksejtek ellenőrizetlen proliferációjának hátterében álló egyik fő ok-okozati mechanizmus (21), a jelen tanulmány egy sor kísérletet végzett annak meghatározására, hogy az ECH kiváltja-e az apoptózist. Először is, a tumorsejtek magjának Hoechst 33342-vel való megfestésével kimutatták, hogy az ECHapoptózisdózisfüggő módon (2A. ábra). Ezenkívül FACS elemzéseket végeztek Annexin V/PI festéssel a ty apoptotikus hatásának további megerősítésére.Echinakozid (2B. ábra). Az apoptotikus sejtek átlagos százalékos aránya 1,1 százalék volt normál tenyésztési körülmények között, míg ez az arány szignifikánsan 10,6, 21,4 és 51,3 százalékra nőtt az ECH-kezelés hatására dózisfüggő módon (2C. ábra). Ezek az eredmények az 1. ábrán látható sejtéletképességi vizsgálattal együtt azt mutatják, hogyEchinakozidkezelés elnyomja a tumorsejtek szaporodását kiváltvaapoptózis.

Echinakozid reaktív oxigénfajták (ROS) termelését ösztönzi. Számos rákellenes kemoterápiás gyógyszerről, például a doxorubicinről és a ciszplatinról kimutatták, hogy erős ROS-generátorok, amelyek fiziológiás és patológiás körülmények között döntő szerepet játszanak az apoptózis indukciójában (22). Így azt vizsgálták, hogy az ECH kezelés szabályozhatja-e a ROS termelést is. Ennek tesztelésére a DHE-t, amely oxidálható a DNS-sel interkalálódó etídium előállítására, ebben a vizsgálatban használtuk a ROS termelés értékelésére. Kiderült, hogy a többi rákellenes szerhez hasonlóan,Echinakozid dózisfüggő módon serkenti a ROS termelést is, amint azt az ECH kezelés hatására megnövekedett fluoreszcencia intenzitás mutatja (3. ábra).

Echinakozidcsökkenti az MMP-t. Kimutatták, hogy a mitokondriális diszfunkció szerepet játszik az apoptózis kiváltásában. Kimutatták, hogy a mitokondriális permeabilitás átmeneti pórusának megnyílása a transzmembrán potenciál depolarizációját és pro-apoptotikus faktorok felszabadulását idézi elő (23). Ezért tesztelték, hogy vajonEchinakozid MMP-vesztést indukálhat a tumorsejtekben egy TMRM vizsgálat elvégzésével, ami egy jól bevált megközelítés, mivel a TMRM fluoreszcencia intenzitása arányos a membránpotenciáljával. Bebizonyosodott, hogyEchinakozid a kezelés dózisfüggő módon jelentősen csökkenti az MMP-t (4. ábra).

Echinakozid szabályozza a tumorsejtek növekedését mitogén-aktivált protein-kináz (MAPK) segítségével, de nem AKT-jelek. A molekuláris alapok további vizsgálatáhozEchinakozid-mediált tumorsejthalál, számos létfontosságú jelátviteli útvonal, így a MAPK és az AKT (24,25) aktivitását vizsgáltuk, amelyek a sejttúlélést és -elhalást szabályozzák. A MAPK-k evolúciósan konzervált, prolin által irányított Ser/Thr protein kinázok, beleértve az extracelluláris szignál által szabályozott kinázokat (ERK), a c-Jun NH2- terminális kinázokat (JNK-k), valamint a p38 család tagjait, amelyek három génen keresztül aktiválódnak. -tier kináz jelátviteli kaszkádok (26,27). Ebben a vizsgálatban a MAPK-k és az AKT-k expresszióját, valamint ezek aktivált foszforilált formáit értékelték, és kiderült, hogyEchinakozid jelentősen elnyomja a JNK és ERK1/2 aktivitást, de fokozza a p38 aktivitást (5. ábra). Nevezetesen kimutatták, hogy az AKT-aktivitást, amely szintén kritikus fontosságú a sejtproliferáció szempontjából, nem befolyásolja az ECH-kezelés (5. ábra). Ezenkívül kimutatták, hogy az ECH-kezelés növeli a Bax és a Caspase{5}} expresszióját, miközben csökkenti a Bcl-2 expresszióját (5. ábra), ami összhangban van a 2. ábrával. Így az eredmények azt mutatják, hogyEchinakozidtumorsejt apoptózist vált ki a MAPK útvonalon keresztül.

cistancheechinakozidaz apoptózis elleni küzdelemre

Vita

Legjobb tudomásunk szerint ez az első tanulmány, amely ezt mutatjaEchinakozid kiváltásával tumorszuppresszív funkciója vanapoptózis(2. ábra), elősegíti a ROS termelést (3. ábra), és indukálja a mitokondriális membránpotenciál depolarizációját (4. ábra), következésképpen a tumorsejtek növekedésének gátlásához vezet (1. ábra). Továbbá kimutatták, hogy az ECH által közvetített tumorsejt-halál molekuláris alapja a MAPK jelátviteli útvonalak szabályozása révén következik be (5. ábra). Ezek az eredmények azt mutatják, hogy az ECH új funkciója van a daganatképződés megelőzésében, és így azt sugallják, hogy a rákterápia jelöltje lehet.

A rákellenes gyógyszerek többsége tumorsejt apoptózist, öregedést és/vagy sejtciklus leállást válthat ki, ami a tumorsejtek növekedésének és proliferációjának gátlásához vezet. A sejtciklus leállása egy sejtválasz enyhe stresszjelekre, amelyek lehetővé teszik a sejtek számára, hogy helyrehozzák a sérült DNS-t a replikatív DNS-szintézis vagy mitózis megkezdése előtt, míg az apoptózis és az öregedés (permanens sejtciklus-leállás) olyan stresszjelekre adott válaszként következik be, amelyek megszüntetik a helyrehozhatatlan vagy rosszindulatú sejteket. 28,29). Ezért csak az apoptotikus hatásaEchinakozid Ebben a vizsgálatban a tumorsejtekre gyakorolt ​​hatást értékelték, mivel a rákos sejtek elpusztítása a rákellenes szerek hatékonyságának értékelésének fő kritériuma. Nevezetesen kimutatták, hogy az ECH indukálja a Bax expresszióját (5. ábra), egy pro-apoptotikus gén, amelyet a p53 tumorszuppresszor transzkripciósan aktivál (30). Ezért érdemes kipróbálni, hogy vajonEchinakozid aktiválhatja a p53 jelátviteli útvonalat. Ha igen, az ECH p53-függő sejtciklus-leállást, öregedést, apoptózist vagy autofágiát is kiválthat. Ebben a vizsgálatban az ECH tumorszuppresszív funkcióját vizsgálták az SW1990 hasnyálmirigy-adenokarcinóma sejtvonalban. Azonban további vizsgálatokra van szükség több hasnyálmirigyrák sejtvonal megfigyelésére. Kimutatták, hogy a RAS onkogén fehérje és a p53 tumorszuppresszor mutációi összefüggenek a hasnyálmirigyrák kialakulásával (31); azonban az SW1990 sejtvonal az IARC p53 adatbázisa szerint nem tartalmaz p53 mutációt, ezért fontos megvizsgálni, hogyEchinakozid befolyásolhatja más hasnyálmirigyrák sejtvonalak növekedését és proliferációját, amelyek különböző p53 mutációkkal rendelkeznek. Ezenkívül érdekes lenne meghatározni, hogy az ECH képes-e elősegíteni az apoptózist és gátolni más típusú daganatok növekedését.

ROS emelkedés és MMP csökkenés, amelyeket aEchinakozid kezelésében elengedhetetlennek bizonyultapoptózisindukció (22). Ezenkívül azt találták, hogy a ROS indukálhatja a mitokondriális pórusok oxidációját, hozzájárulva a citokróm c, az apoptózis közbenső termék felszabadulásához, az MMP megzavarása miatt (22). Így még meg kell határozni, hogy az ECH megzavarja-e az MMP-t közvetetten a ROS indukcióján keresztül. Ezenkívül kimutatták, hogy a ROS által kiváltott oxidatív stressz számtalan sejtnövekedést szabályozó szignál modulálásában is szerepet játszik, beleértve a p53-at, NF-κB-t, HIF-eket és PI3K-t (32). Azt még meg kell határozni, hogy az ECH szabályozza-e ezeket a fontos jelátviteli útvonalakat, és ha igen, hogyan. Nevezetesen, az oxidatív stressz különböző neurodegeneratív betegségeket okoz a magas oxigénfogyasztás, a gyenge antioxidáns rendszer és a központi idegrendszer terminális differenciálódási jellemzői miatt (33). Ezt azonban több tanulmány is kimutattaEchinakozidvédő és antiapoptotikus hatása van az idegszövetre. Ebben a tekintetben ésszerű feltételezni, hogy az ECH csökkentheti a ROS termelést a terminálisan differenciált idegsejtekben. Ezért azt is meg kell határozni, hogy a ROS termelés ECH általi szabályozása függ-e a sejt differenciálódási állapotától. Ezért a jelen eredmények és más tanulmányok azt mutatják, hogy az ECH, a széles körben használt TCM, nemcsak a neurodegeneratív betegségek, hanem a rosszindulatú karcinómák kezelésében is fontos kemoterápiás stratégia lehet.

Az utóbbi időben a TCM alkalmazása a rákterápiában egyre nagyobb figyelmet kapott. A TCM-ben használt gyógynövényekből készült természetes termékekben rejlő lehetőségeket a tudományos közösség még a nyugati világban is felismerte (9). Erőfeszítésekre van szükség e természetes termékek mögött meghúzódó hatásmechanizmusok tisztázása érdekében, ami végül hatékony és biztonságos rákterápiás gyógyszerek kifejlesztéséhez vezethet.

Összefoglalva, jelen tanulmány kimutatta a tumorgátló funkciójátEchinakozid és kidolgozza annak molekuláris alapját isEchinakozid-mediált tumorszuppresszió, ami a lehetséges klinikai alkalmazására utalEchinakozid a rákterápiában.

echinakozidin cistanche

Köszönetnyilvánítás

Ezt a tanulmányt az FMU Tudományos Kutatási Kulcsprogramja (09ZD014 sz. támogatás) finanszírozta és támogatta. A szerzők köszönetet mondanak a Biomedworldnek (Sanghaj, Kína) a kézirat szerkesztésében nyújtott segítségért.

Tól tőlEchinakozidgátolja a hasnyálmirigy adenokarcinóma sejtek növekedését indukálásávalapoptózisa WEI WANG, a JINBIN LUO, a YING HUI LIANG és a XINFENG LI mitogén által aktivált protein kináz útvonalán keresztül

---MOLEKULÁRIS GYÓGYÁSZATI JELENTÉSEK 13: 2613-2618, 2016 DOI: 10.3892/mmr.2016.4867

Hivatkozások

1. Hanahan D és Weinberg RA: A rák jellemzői: A következő generáció. 144. cella: 646-674, 2011.

2. Alderton GK: Transzkripció: A MYC transzkripciós hatásai. Nat Rev Cancer 14: 513, 2014.

3. Zindy F, Eischen CM, Randle DH, Kamijo T, Cleveland JL, Sherr CJ és Roussel MF: A Myc jelátvitel az ARF tumorszuppresszoron keresztül szabályozza a p53- függőapoptózisés a halhatatlanság. Genes Dev 12: 2424-2433, 1998.

4. Sachdeva M, Zhu S, Wu F, Wu H, Walia V, Kumar S, Elble R, Watabe K és Mo YY: a p53 elnyomja a c-Myc-et a miR-145 tumorszuppresszor indukciójával. Proc Natl Acad Sci USA 106: 3207-3212, 2009.

5. Liao JM, Cao B, Zhou X és Lu H: Új betekintés a p53 funkcióiba a megcélzott mikroRNS-eken keresztül. J Mol Cell Biol 6: 206-213, 2014.

6. Zamble DB és Lippard SJ: Ciszplatin és DNS-javítás a rák kemoterápiájában. Trends Biochem Sci 20: 435-439, 1995.

7. Kleeff J, Kornmann M, Sawhney H és Korc M: Actinomycin D indukálapoptózisés gátolja a hasnyálmirigyrák sejtek növekedését. Int J Cancer 86 399-407, 2000.

8. Tacar O, Sriamornsak P és Dass CR: Doxorubicin: Frissítés a rákellenes molekuláris hatásról, a toxicitásról és az új gyógyszeradagoló rendszerekről. J Pharm Pharmacol 65: 157-170, 2013.

9. Efferth T, Li PC, Konkimalla VS és Kaina B: A hagyományos kínai orvoslástól a racionális rákterápiáig. Trends Mol Med 13: 353-361, 2007.

10. Yim H, Lee YH, Lee CH és Lee SK: Az emodin, a Rheum palmatum rizómáiból izolált antrakinon-származék, szelektíven gátolja a kazein-kináz II, mint kompetitív inhibitor aktivitását. Planta Med 65: 9-13, 1999.

11. Zhang L, Chang CJ, Bacus SS és Hung MC: Az emodin elnyomta a HER-2/neu-túlexpresszáló emlőráksejtek transzformációját és differenciálódását. Cancer Res 55: 3890-3896, 1995.

12. Pommier Y: Topoizomeráz I inhibitorok: kamptotecinek és azon túl. Nat Rev Cancer 6: 789-802, 2006.

13. Lee YW, Chen TL, Shih YR, Tsai CL, Chang CC, Liang HH, Tseng SH, Chien SC és Wang CC: A hagyományos kínai orvoslás kiegészítő terápiája javítja az előrehaladott emlőrákos betegek túlélését: populációs alapú vizsgálat. Rák 120: 1338-1344, 2014.

14. Xiong Q, Hase K, Tezuka Y, Namba T és Kadota S: Az akteozid gátoljaapoptózisD-galaktózamin és lipopoliszacharidok által kiváltott májkárosodásban. Life Sci 65: 421-430, 1999.

15. Gao JJ, Igarashi K és Nukina M: Fenilpropanoid glikozidok gyökfogó aktivitása Caryopteris incanában. Biosci Biotechnol Biochem 63: 983-988, 1999.

16. Zhang Y, Xing J, Ai T, Wen T, Guan L és Zhao J: Protection ofechinakozidolajsav okozta akut tüdőkárosodás ellen patkányokban. Free Radic Res 41: 798-805, 2007.

17. Li X, Gou C, Yang H, Qiu J, Gu T és Wen T:Echinakozidgátolja a D-galaktózamin és lipopoliszacharidok által kiváltott akut májkárosodást egerekbenapoptózisés gyulladás. Scand J Gastroenterol 49: 993-1000, 2014.

18. Zhao Q, Gao J, Li W és Cai D: Neurotróf és idegmentő hatásaiEchinakozida Parkinson-kór szubakut MPTP egérmodelljében. Brain Res 1346: 224-236, 2010.

19. Jia Y, Guan Q, Guo Y és Du C:Echinakozidserkenti a sejtproliferációt és megakadályozza a sejt apoptózist a bélhám MODE-K sejtjeiben a transzformáló növekedési faktor-1 expressziójának fokozásával. J Pharmacol Sci 118: 99–108, 2012.

20. Liao P, Wang W, Shen M, Pan W, Zhang K, Wang R, Chen T, Chen Y, Chen H és Wang P: Az EBP2 és a c-Myc közötti pozitív visszacsatolási hurok szabályozza az rDNS transzkripcióját, a sejtproliferációt, és tumorigenezis. Cell Death Dis 5: e1032, 2014.

21. Westphal S és Kalthoff H: Apoptosis: Célpontok hasnyálmirigyrákban. Mol Cancer 2: 6, 2003.

22. Simon HU, Haj-Yehia A és Levi-Schaffer F: Reaktív oxigénfajták (ROS) szerepe aapoptózisindukció.Apoptózis5: 415-418, 2000.

23. Ly JD, Grubb DR és Lawen A: A mitokondriális membránpotenciál (delta psi(m)) apoptózisban; egy frissítés.Apoptózis8: 115-128, 2003.

24. Munshi A és Ramesh R: Mitogén-aktivált protein kinázok és szerepük a sugárválaszban. Genes Cancer 4: 401-408, 2013.

25. Abraham AG és O'Neill E: A p53 PI3K/Akt által közvetített szabályozása rákban. Biochem Soc Trans 42: 798-803, 2014.

26. Tournier C: A JNK Signaling 2 arca a rákban. Genes Cancer 4: 397-400, 2013.

27. Koul HK, Pal M és Koul S: A p38 MAP kináz jelátvitel szerepe szolid tumorokban. Genes Cancer 4: 342-359, 2013.

28. Brady CA és Attardi LD: p53 egy pillantásra. J Cell Sci 123: 2527-2532, 2010.

29. Carvajal LA és Manfredi JJ: Újabb elágazás a p53 tumorszuppresszor út-élet vagy halál döntéseiben. EMBO Rep 14: 414-421, 2013.

30. Miyashita T és Reed JC: A p53 tumorszuppresszor a humán Bax gén közvetlen transzkripciós aktivátora. 80. cella: 293-299, 1995.

31. Morton JP, Timpson P, Karim SA, Ridgway RA, Athineos D, Doyle B, Jamieson NB, Oien KA, Lowy AM, Brunton VG és munkatársai: A p53 mutáns metasztázisokat eredményez, és legyőzi a növekedés leállását/öregedését hasnyálmirigyrákban. Proc Natl Acad Sci USA 107: 246-251, 2010.

32. Schieber M és Chandel NS: ROS funkció a redox jelátvitelben és az oxidatív stresszben. Curr Biol 24: R453-R462, 2014.

33. Li J, OW, Li W, Jiang ZG és Ghanbari HA: Oxidatív stressz és neurodegeneratív rendellenességek. Int J Mol Sci 14: 24438-24475, 2013.