Széles körben célzott anyagcsere-elemzés a Cistanche Deserticola aktív vegyületek átalakulási mechanizmusának feltárására a gőzölési és szárítási folyamatok során

A Cistanche deserticola az egyik legértékesebb növény, hagyományosan a kínai orvoslásban, és a közelmúltban a gyógyszeriparban és az egészséges élelmiszeriparban is használják. A gőzölés és a szárítás a Cistanche deserticola feldolgozásának két fontos lépése.

Sajnos a Cistanche deserticola termikus feldolgozás során bekövetkező kémiai összetételváltozásainak átfogó megértése korlátozott. Ebben a tanulmányban ultra-teljesítményű folyadékkromatográfiás-tandem tömegspektrometriás (UHPLC-MS/MS) alapú, széles körben célzott metabolomikai analízist alkalmaztunk a Cistanche deserticola hatóanyagok átalakulási mechanizmusának vizsgálatára a gőzölési és szárítási folyamatok során. Összesen 776 metabolitot azonosítottak a Cistanche deserticolában a termikus feldolgozás során, amelyek közül 77 metabolit volt eltérően szabályozott (p < 0,05), amelyből 39 volt szabályozott (UR) és 38 csökkent (DR). Gőzölés és szárítás során 47 (17 UR, 30 DR) és 30 (22 UR, 8 DR) eltérő metabolitot azonosítottunk.

A gőzölés során volt megfigyelhető a vegyszerek legnagyobb eltérése. Az anyagcsereút elemzése azt mutatta, hogy a gőzölés során fenilpropanoid, flavonoid bioszintézis és alanin metabolizmus, míg szárítás során glicin, szerin és treonin metabolizmus, tiamin anyagcsere és telítetlen zsírsav bioszintézis volt megfigyelhető. A hőfeldolgozás során bekövetkező kémiai változások lehetséges mechanizmusait a Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) útvonalelemzés is megadta. Ezenkívül a Cistanche deserticola megjelenésének megfeketedése főként a gőzölési szakaszban, nem pedig a szárítás szakaszában következett be, ami az aminosavak metabolizmusához kapcsolódik. Minden eredmény azt mutatta, hogy a Cistanche deserticola feldolgozása során a hatóanyagok képződése főként a gőzölési szakaszban történt.

kattintson a cistanche tubulosa kiegészítő hatások termékek

BEVEZETÉS

Az Orobanchaceae családba tartozó Cistanche deserticola az egyik leghíresebb erősítő gyógyszer, és főként a világ trópusi és szubtrópusi vidékein terjedt el, például Kínában, Iránban, Indiában, Mongóliában és így tovább (1–3). A Cistanche deserticola az egyik leggyakrabban használt gyógynövény veseelégtelenség, impotencia, női meddőség, kóros leucorrhoea, bőséges metrorrhagia és időskori kezelésére (4, 5). A modern farmakológiai kutatások kimutatták, hogy a Cistanche deserticola javítja az immunitást, csökkenti a fáradtságot, öregedésgátló, valamint javítja a tanulási és memorizálási képességet (6). Ezen egészségügyi előnyöknek köszönhetően a szárgumóiból készült Cistanche deserticola teát tápláló kiegészítőként fejlesztették ki, és a fogyasztók egyre inkább kedvelik. A Cistanche deserticola hatóanyagai felelősek gyógyászati ​​funkcióiért (7). A Cistanche deserticola egyes hatóanyagairól, például fenilpropanoidokról (például fenil-etanol-glikozidokról), flavonoidokról, poliszacharidokról, oligoszacharidokról, iridoidokról és lignánokról számoltak be korábbi vizsgálatokban (6, 8).

A romlandó és szezonális adottságok miatt a friss Cistanche deserticola egész éves kínálata nem áll rendelkezésre, ennek megfelelően a feldolgozott Cistanche deserticola válik a fő fogyasztási formává. A Cistanche deserticola minősége számos tényezőtől függ, például az éghajlattól, az élőhelyektől, a gazdaszervezetektől, a betakarítási időtől, a feldolgozási technológiától és a növény helyzetétől, amelyek közül a feldolgozási technológia különösen fontos (4). A gőzölés és a szárítás a Cistanche deserticola feldolgozásának két fontos lépése. Általában a betakarított Cistanche deserticola rizómát gőzölő kazánban 93 °C-on 30 percig gőzölték, majd 60 °C-on szárították, amíg a nedvességtartalom 10 százalékos volt (wb) (9).

Korábbi tanulmányok kimutatták, hogy a gőzölés elősegítheti a Cistanche deserticolában lévő hatóanyagok, például fenil-etanol-glikozidok, oldható cukrok és poliszacharidok felhalmozódását, amit a megjelenés színének elfeketedése kísér (9–11). A legtöbb korábbi tanulmány azonban bizonyos specifikus vegyületekre fókuszált, és nagyon ritka kutatások foglalkoznak az összes kémiai vegyület változásával és a metabolit átalakulási mechanizmussal a feldolgozás során. Ezért szükséges tisztázni a Cistanche deserticola metabolit változásait a különböző feldolgozási szakaszokban.

A metabolomikát általában a mintában kimutatott összes kis molekula (nevezetesen a célzott és nem célzott vegyületek) kvalitatív és kvantitatív elemzésére alkalmazzák (12). Az élelmiszer-feldolgozás során a különböző kémiai komponensekben bekövetkező változások elemzése elősegíti az élelmiszer-feldolgozás során a kémiai komponensek átalakulásának mechanizmusának megértését (12). Az elmúlt években a metabolomikát a Cistanche deserticola vizsgálatára is alkalmazták a különböző részek (11) és a különböző Cistanche deserticola fajok (13) megkülönböztetésére.

A metabolitok kimutatási módszerei ezekben a vizsgálatokban többnyire célzott és nem célzott metabolomikán alapultak. Közülük a célzott metabolomika standard termékeken alapul, nagy adatpontossággal és megbízhatósággal, azonban a metabolitok korlátozott lefedettségével. A célzott metabolomika a metabolomikai kutatások fontos része, nem a mintában lévő összes komponens, hanem konkrét metabolitcsoportok célzott és specifikus kimutatása és elemzése. A nem célzott metabolomikai technológia minőségileg képes meghatározni a metabolitokat a meglévő adatbázisok alapján, nagy lefedettséggel, de alacsony pontossággal. A kulcsfontosságú metabolitokat standard termékekkel kell megerősíteni (14). A széles körben célzott metabolomika egy új technológia, amely integrálja a nem célzott és célzott metabolit-detektálási technológiák előnyeit széles lefedettség, nagy áteresztőképesség és érzékenység elérése érdekében (15).

Következésképpen ezt a technológiát széles körben alkalmazták a feldolgozás során a különböző anyagokban előforduló összetevő-változások vizsgálatában, mint például a funkcionális élelmiszerek különböző feldolgozási módszerekkel történő hatóanyagai (16), a különböző módszerekkel feldolgozott kínai vízi gesztenye flavonoidjai és fenilpropanoidjai (17). , a rizs sárgulási mechanizmusa a sárgulási folyamat során (18), valamint a jellegzetes nem illékony vegyszer képződési mechanizmusa az oolong tea gyártási folyamata során (19). Ezért elméletileg megvalósítható széles körben célzott metabolit technológia alkalmazása a Cistanche deserticola feldolgozása során a hatóanyagok átalakulásának mechanizmusának tanulmányozására.

A jelen tanulmány célja tehát az volt, hogy (1) hasznos információkat nyújtson a Cistanche deserticola kémiai változásairól a gőzölési és szárítási folyamatok során ultrateljesítményű folyadékkromatográfiás-tandem tömegspektrometria (UHPLC-MS/MS) és széles körben megcélzott metabolomikus módszer alkalmazásával. megközelítés; (2) azonosítsa a különböző metabolitokat és szabályozási szabályaikat, valamint feltárja a lehetséges átalakulási útvonalakat a Cistanche deserticolában a feldolgozás során. Ez a tanulmány ezért várhatóan elméleti referenciaként szolgál a kiváló minőségű Cistanche deserticola kialakulásának mechanizmusához.

ANYAGOK ÉS MÓDSZEREK Anyagok és vegyszerek

Nyersanyagok: A friss Cistanche deserticola mintákat a kínai Xinjiang tartomány Hetian régiójából szereztük be. A mintákat gondosan, azonos méretűre válogattuk ki (átlagos hosszúság, átmérő és tömeg: 11,7 ± 1,1 cm, 70 ± 1,1 cm, illetve 360 ​​± 8,9 g). A mintákat szobahőmérsékleten, sötét környezetben, körülbelül 78,56 ± 3,47 százalékos kezdeti nedvességtartalommal tároltuk. A kísérletek előtt a Cistanche deserticola mintákat csapvízzel mostuk, hogy eltávolítsuk a felületről a port. A felületén lévő felesleges vizet itatópapírral távolították el.

Vegyszerek: A metanol, az acetonitril és a hangyasav folyadékkromatográfiás tömegspektrometriás minőségű (LC-MS) volt, és a Mercktől (Sigma Aldrich, MO, USA) vásároltuk. A többi analitikai standard 98 százaléknál nagyobb tisztaságot mutatott (Sigma Aldrich, MO, USA).

Kísérleti terv

Korábbi tanulmányok kimutatták, hogy a kémiai vegyületek egyenetlenül oszlanak el a Cistanche deserticola hosszirányában (1). Ezért annak érdekében, hogy minden mintában azonos kezdeti kémiai vegyület-tartalmat kapjunk, a jelen kutatásban az összes kiválasztott Cistanche deserticolát három egyenlő részre vágtuk a friss csoporthoz (A), szárítás nélkül pároltuk (B), és gőzölés után szárítottuk. (C) hosszirányú szegmentálással, amelynek középpontja a hosszirányú szimmetriatengely (20).

A B csoport esetében az előzetes kísérleteknek megfelelően a mintákat egymás után 8 percig gőzöltük. A friss Cistanche deserticolák gőzölésére egy impulzusos vákuumgőzölő berendezést (a Kínai Mezőgazdasági Egyetem, Peking, Kína) fejlesztettek ki. A gőzölt mintákat vákuum-fagyasztva szárítóban szárítottuk (LGJ-25C, Si Huan Scientific Instrument Factory Co., Peking, Kína). A fűtőlemez és a hidegcsapda hőmérséklete 30, illetve -60 ◦C volt. A C csoport esetében a mintákat egymás után gőzölték impulzusos vákuumberendezéssel 8 percig, és a forró levegős becsapódásos szárítóban (a Kínai Mezőgazdasági Egyetem, Peking, Kína) szárították, amíg a végső nedvességtartalom 10 százalék (wb) nem lett. A légáramlási sebességet 6 m/s-ra, a hőmérsékletet pedig 60°C-ra állítottuk be Zou et al. kutatási eredményeire hivatkozva. (11). Minden mintát –20°C-on tároltunk legfeljebb 7 nappal a további elemzés előtt.

A Cistanche Deserticola megjelenési színének meghatározása

A Cistanche deserticola megjelenési színét minden hőkezelés előtt és után koloriméterrel (SMY2000SF, Shengming Yang Co., Peking, Kína) mértük, a feketeséget pedig L * értékkel jellemeztük.

Minta előkészítés és extrakció

A metabolit extrakciót a Chen és munkatársai által korábban leírt módszer szerint végeztük. (21) néhány kisebb módosítással. Röviden, a szárított mintákat keverőmalomban (MM 400, Retsch Company, Haan, Németország) cirkónium-gyöngyökkel 2 percig 60 Hz-en zúztuk. Ezután mindegyik mintából 50 mg port (65 mesh-es szitán átszitálva) pontosan lemértünk, egy Eppendorf-csőbe vittük, és 1 ml metanol/víz eleggyel (v:v=3:1) extraháltuk. 30 s vortex után az elegyet kétszer 35 Hz-en 4 percig homogenizáltuk, 15 percig ultrahanggal kezeltük jeges vízfürdőben, majd egy éjszakán át 4 °C-on ráztuk. 12, 000 fordulat/perc 15 perces, 4 °C-on végzett centrifugálás után a felülúszót összegyűjtöttük és 022-µm-es membránon szűrtük, majd a kapott kivonatot 2 ml-es üvegfiolákba töltöttük és tároltuk. -80°C-on az UHPLC-MS/MS analízisig.

Metabolitok elemzése UHPLC-MS segítségével UHPLC Feltételek

Az UHPLC elválasztást EXIONLC rendszerrel (Sciex Technologies, Framingham, MA, USA) hajtottuk végre. Az analitikai körülmények a következők voltak: oszlop: Waters ACQUITY UHPLC HSS T3 C18 (1,8 µm, 2,1 × 100 mm); oldószerrendszer: A-mozgófázis (0,1% hangyasav vízben) és B-mozgófázis (acetonitrilt tartalmazó). A gradiens program: 98 százalék A/2 százalék B 0 percnél, 50 százalék A/50 százalék B 10 percnél, 5 százalék A/95 százalék B 11 percnél, 98 százalék A/2 százalék B 13,1 percnél és 98 százalék százalék A/2 százalék B 15 percnél. Áramlási sebesség: 0,40 ml/perc; oszlophőmérséklet: 40◦C; injekció térfogata: 2 µl; automatikus befecskendezési hőmérséklet: 4◦C.

ESI-QTRAP-MS/MS feltételek

Három kvadrupól (QQQ) lineáris ioncsapda tömegspektrométert (QTRAP, API 6500 QTRAP UHPLC-MS/MS) és QQQ spektrométert alkalmaztunk ESI turbóion-spray interfésszel (Sciex Technologies, Framingham, MA, USA) az MS-hez. elemzés. Az analitikai feltételek a következők voltak: ionpermet feszültség: plusz 5500 V (pozitív ion üzemmód)/−4500 V (negatív ion üzemmód), függönygáz: 35 psi, forrás hőmérséklet: 400◦C, ionforrás gáz 1: 60 psi, 2. ionforrás gáz: 60 psi, deklaszterezési potenciál: ±100 V. A QQQ szkenneléseket többszörös reakciófigyelő (MRM) kísérletként gyűjtöttük össze ütközési gázzal (nitrogén) 5 psi nyomásra.

A metabolitok kvalitatív és kvantitatív elemzése

A metabolitok kvalitatív és kvantitatív analízisét Liu et al. módszerei szerint végeztük. (18). Az elsődleges és másodlagos tömegspektrometriás adatokat kvalitatívan elemeztük a saját készítésű emberi metabolom adatbázis (MWDB) (Metware Biotechnology Co., Ltd. Wuhan, Kína) és a nyilvános adatbázis alapján. Eközben egyes anyagok kvalitatív analízisének pontossága érdekében a Na plus , NH plus 4, K plus és ionok ismétlődő jeleiből adódó interferencia, valamint más, viszonylag nagy molekulákból származó fragmentionok ismétlődő jelei és izotópjelek eltávolításra kerültek. azonosítás. A publikus adatbázisok (Mass Bank, KNApSAcK, HMDB, MoTo DB és METLIN) metabolitszerkezeti elemzését végeztem.

A metabolitok mennyiségi meghatározását a QQQ tömegspektrometria MRM módszerével végeztük. Az MRM módban a célanyagok prekurzor ionjait (szülőionjait) és a más, eltérő molekulatömegű anyagoknak megfelelő kizárt ionokat először a kvadrupol rúd segítségével szűrtük az interferencia kiküszöbölésére. A prekurzor ionok ezután áttörnek az ütközési kamrán, és ionizáció után sok vasdarabot képeznek, amelyeket QQQ szűrt, hogy a kívánt jellemzőkkel rendelkező egyetlen fragmens ionokat válassza ki, miközben kiküszöböli a nem célionok interferenciáját. Végül a különböző minták metabolit tömegspektrometriai adatainak beszerzése után az összes anyag tömegspektrumcsúcsait integráltuk, és a különböző mintákban lévő ugyanazon metabolit tömegspektrumcsúcsait integráltuk és korrigáltuk a Multi Quant 3-as verziójával.0 .2 (ABSCIEX, Concord, Ontario, Kanada). A megfelelő relatív metabolit tartalmat kromatográfiás csúcsterület integrálokként ábrázoltuk.

Adatfeldolgozás és -elemzés

A metabolikus adatokat ortogonális részleges legkisebb négyzetek diszkriminancia analízissel (OPLS-DA) és hierarchikus klaszteranalízissel (HCA) dolgoztuk fel. Az OPLS-DA-t használták az egyes csoportok megkülönböztetésére; más statisztikai módszereknél érzékenyebb az alacsony korrelációjú változókra (17). Az OPLS-DA modelleket permutációs analízissel validáltuk (200 alkalommal). A modell akkor tekinthető stabilnak, ha a modell paraméterei (R2 és Q2 ) egyaránt 1-hez közelítettek.

Kiszámoltuk a metabolitok változó fontosságú projekciós (VIP) értékeit. Bármely metabolitot, amelynek VIP értéke nagyobb, mint 1.{1}} és p-értéke kisebb, mint 0,05, biomarkerként került kiválasztásra a Cistanche deserticola különböző termikus feldolgozási szakaszai közötti páros összehasonlításhoz. A különböző metabolitok szűrését vulkán-diagram formájában jelenítettük meg. A különböző minták közötti metabolit felhalmozódást az R csomag (www.rproject.org/) segítségével elemeztük. A Venn-diagram az R program webalapú intelligens diagramja (https://cloud.smartdraw.com/) szerint készült. Kereskedelmi adatbázisok, mint például a Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) (https://www.kegg.jp/kegg/), a Pub Chem (https://pubchem.ncbi.nlm. nih.gov/), A Small Molecule Pathway Database-t (SMPDB) (https://smpdb.ca/) és a HMDB-t (https://hmdb.ca/) használtuk a differenciális metabolitok dúsítási elemzésére és az anyagcsere-utak megtalálására.

EREDMÉNYEK ÉS MEGBESZÉLÉS A Cistanche Deserticola megjelenése színváltozásai a hőkezelés során

A Cistanche deserticola megjelenési színének különbségét a friss, párolt és szárított minták között reprezentatívan az 1. ábra mutatja. Frissről szárított mintára a feldolgozási szakaszban a minták megjelenési színe sárgásbarnáról sötétfeketére változott. , és a színek sötétsége egyre nyilvánvalóbbá vált (a megfelelő L ∗ érték 50,26-ról 24,90-re csökkent). A Cistanche deserticola megjelenési változásai elsősorban a gőzölés során következtek be. A Maillard-reakció, amelynek során a cukrok reakcióba lépnek az aminosavakkal termikus körülmények között (22), nagymértékben felelős a Cistanche deserticola feldolgozott rizómáinak sötét színű megjelenéséért. Korábbi kutatási tanulmányok kimutatták, hogy a prekurzorok a Maillard-reakció során színezőanyagokká alakultak, és sötét színű anyagokat hoztak létre (23). Hasonló eredményeket figyeltek meg korábbi vizsgálatokban a Polygonum multiflorum (24) és a Polygonatum cystoma rizómái (25) gőzölésére vonatkozóan is. A párolt minták sötétségét szárítás után tovább mélyítettük. Ezt a jelenséget valószínűleg a pigmentkoncentráció csökkenése okozta a szárítási folyamat során.

A nyers és termikusan feldolgozott Cistanche Deserticola minták metabolitjainak áttekintése

A minőség-ellenőrzési (QC) minta teljes ionkromatogramja (TIC) (az összes vizsgált minta keveréke) és a vegyi anyagok többcsúcsos kimutatási görbéje ugyanazon minta MRM üzemmódjában az 1. kiegészítő ábrán látható. A különböző színű csúcsok ábrázolása különböző komponensek a mintában. Amint az a 2. ábrán látható, a jelenlegi vizsgálatban (1. kiegészítő táblázat) összesen 776 metabolitot azonosítottak a friss Cistanche deserticola mintákban, amelyeket 15 osztályba osztottak, köztük 40 aminosavat és származékot, 33 fenilpropanoidot, 23 flavonoidot, 68 flavon, 67 terpén, 67 fenol, 87 alkaloid, 13 szénhidrát, 28 nukleotid és származékai, 5 alkohol és poliol, 3 purin nukleozid, 15

karbonsavak és származékai, 14 szerves sav és származéka, 12 fitohormon és 28 egyéb vegyi anyag. Közülük a legnagyobb csoportot az aminosavak és származékok alkották, amelyek relatív tartalma a teljes metabolit összetétel 30,26 százalékát tette ki. Ezenkívül 10 féle fenil-etanoid-glikozidot, például echinakozidot és verbakozidot mutattak ki és soroltak be a fenilpropanoidok csoportjába.

A metabolitok felhalmozódási mintázatát a különböző kezelési csoportok között HCA-val elemeztük. Amint a 3. ábrán látható, a Cistanche deserticola 107 azonosított metabolitját az euklideszi távolság-aritmetika alapján hőtérképeken csoportosították. A különböző termikus feldolgozási szakaszokban azonosított metabolitokat a dendrogram alapján három klaszterbe gyűjtöttük. A világosabb szín azt jelzi, hogy az adott mintában nagyobb az adott metabolit tartalma. A HCA hőtérképe nagyobb különbségeket mutatott a friss és a gőzölt minták között, mint a gőzölt és a szárított minták között, ami arra utal, hogy a Cistanche deserticola metabolitjai eltérő átalakulást mutathatnak a gőzölési és szárítási szakaszban, valamint a metabolitok típusai és mennyiségei. a gőzölési folyamat több, mint a szárítási folyamat.

A Cistanche Deserticola differenciális metabolitelemzése a különböző hőfeldolgozási szakaszokban

Az egyes feldolgozások Cistanche deserticolas metabolitjaira gyakorolt ​​hatásának jobb megértése érdekében a páronkénti összehasonlító csoportok OPLS-DA szóráspontszámait a 4A ábra mutatja, amely azt mutatja, hogy a friss, párolt és a gőzölés után szárított Cistanche deserticolas szignifikánsan különbözött egymástól. Ezenkívül a magas tesztértékekkel rendelkező R2Y és Q2 (ahogyan a 2. kiegészítő ábrán látható) azt mutatta, hogy ez a modell rendkívül megbízható volt túlillesztés nélkül.

A friss, párolt és a gőzölést követően szárított Cistanche deserticola közötti metabolitok expressziós szintjének szűrésére a vulkán diagram elemzését tovább alkalmaztuk mind a 776, a hajtásváltozás szerint azonosított metabolit esetében, kombinálva a VIP-értékekkel a differenciálisan kifejeződő szűrésére. metabolitok. A szignifikánsan eltérő metabolitokat annak a kritériumnak megfelelően választottuk ki, hogy a többszörös változás pontszáma nagyobb vagy egyenlő, mint 2 vagy kisebb vagy egyenlő, mint 0,5, ha a VIP nagyobb vagy egyenlő, mint 1. A szűrési eredményeket a következő ábra szemlélteti: 4B. ábra. A vulkáni térképen minden pont egy metabolitot jelent, a szétszórt pontok színe pedig a végső szűrési eredményt. A piros a szignifikánsan felszabályozott (UR) metabolitokat, a zöld a szignifikánsan alulszabályozottakat (DR), a szürke pedig a jelentéktelen mértékben eltérő metabolitokat jelöli. Amint a 4B. ábra mutatja, 47 metabolit a friss és párolt csoportban (17 UR és 30 DR), 30 metabolit a párolt vs. szárított csoportban (22 UR és 8 DR), és 65 metabolit a friss és szárított csoportban (29 UR és 36 DR) szignifikáns különbséget választottunk. A szignifikánsan eltérő metabolitok száma a friss és a párolt csoportban magasabb volt, mint a párolt vs. szárított csoportban, ami azt jelzi, hogy a gőzölési folyamat metabolitokra gyakorolt ​​hatása nagyobb, mint a szárításé.

A Cistanche deserticola termikus feldolgozása során keletkező eltérő metabolitokat tovább osztályozták és összehasonlították. Ezeket a differenciáltan expresszálódó metabolitokat 21 osztályba sorolták, főként aminosavak és származékaik, flavonoidok és származékaik, fenilpropanoidok, alkaloidok, terpének, fenolok, valamint nukleotidok és származékaik (1. táblázat). A friss vs. párolt csoportban flavonoidok (például izoquercitrin, troxerutin, cianidin és fiszetin), fenilpropanoidok (például klorogénsav és 3-(3,4-dihidroxi{) A {5}}metoxi)-2-propénsav), valamint a nukleotidok és származékaik (uracil és béta-nikotinamid-mononukleotid) szignifikánsan DR, míg az aminosavak és származékaik (például N6-acetil-L-lizin) , 1- metil-L-hisztidin és L-fenilalanin) szignifikánsan UR volt.

A párolt vs. szárított csoportban azonban az ilyen típusú differenciált metabolitok expressziós tendenciája ellentétes volt. Egyes aminok és származékaik (például N, N-dimetil-glicin), nukleotidok és származékaik (például 2′-dezoxiuridin; dezoxiuridin) szignifikánsan DR-t mutattak, míg a legtöbb fenol (például metil-gallát és 4′-preniloxirezveratrol) A flavonoidok (például izoquercitrin és cianidin), a fenilpropanoidok (verbaszkozid) és a terpének (például a terpinolén és a furanon) jelentősen UR-t mutattak. Ezek az eredmények azt mutatták, hogy a Cistanche deserticola kémiai összetétele átalakuláson ment keresztül a termikus feldolgozás során, ami elsősorban a flavonoidok, fenilpropanoidok és aminosavak átalakulásában mutatkozik meg, és ezen komponensek átalakulási mechanizmusa a feldolgozás különböző szakaszaiban eltérő.

Korábban azt találták, hogy a gőzölési és szárítási folyamatok során a magas hőmérséklet elősegíti a metabolitok hidrolízisét, redoxát, izomerizációját, szubsztitúcióját és egyéb termofizikai és kémiai reakcióit (26). Ebben a tanulmányban azt találták, hogy a metabolitok, például a flavonoidok és a fenilpropanoidok jelentősen felhalmozódtak a párolt Cistanche deserticolában a megfelelő frissekhez képest, ami azt jelzi, hogy néhány kulcsfontosságú fiziológiai és metabolikus tevékenység, amely a flavonoidok és fenilpropanoidok szintéziséhez vezethet magas hőmérsékleten és páratartalom mellett aktiválódik. Ezt az eredményt Peng és munkatársai jelentése is alátámasztja. (10), akik azt találták, hogy a (fenilpropanoidokhoz tartozó) PhG-k tartalma megnőtt a gőzölés után. Ugyanakkor a gőzölést követően a szárított mintában ezen komponensek felhalmozódása szignifikáns csökkenést mutatott, ami a hosszú távú szárítási folyamat során ezeknek a hőérzékeny komponenseknek a hődegradációjára vezethető vissza. Korábbi tanulmányok kimutatták, hogy a flavonoid glikozidok termikus körülmények között cukortestekre és flavonoid aglikonokra bomlanak, és a szárítási folyamat során a flavonoid veszteséget szintetikusan befolyásolta a hőmérséklet és a szárítási idő (26, 27). Az aminosavak és származékaik (N6-acetil-L-lizin, 1-metil-L-hisztidin és fenilalanin) felpörgése a gőzölési feldolgozás során a magas hőmérsékletet elősegítő fehérjebomlásnak tulajdonítható. Ezenkívül azt is megfigyelték, hogy néhány más aminosav és származékaik az N, N-dimetilglicin, L-kinurenin, glicin, szerin és treonin DR. Ezen aminosavak tartalmának csökkenése összefüggésbe hozható egy hő által kiváltott Maillard-reakcióval, amelynek során a redukáló cukrok aminosavakkal reagálva 5-HMF-et hoznak létre, ami hozzájárul a Cistanche deserticola fekete megjelenéséhez (22). .

A termikus feldolgozás során a cistanche deserticola metszet megjelenési színváltozásának eredményei tovább igazolták ezt a hipotézist. Ezért a Cistanche deserticola gőzölés közbeni megfeketedése valószínűleg az aminosavak metabolizmusával függött össze. Venn-diagramot használtunk a Cistanche deserticola közös és kizárólagos metabolitjainak megkülönböztetésére a különböző termikus feldolgozási szakaszokban. Amint a 4C. ábra mutatja, a különböző összehasonlító csoportok között közös és egyedi metabolitok is léteznek. Huszonegy közös metabolitot figyeltek meg a friss és a párolt csoport között, míg csak 5 és 1 0 metabolitot találtunk közösen a friss és szárított, illetve a gőzölt és a szárított csoport között. Így összesen 23 és 17 kizárólagos metabolitot (p < 0,05) figyeltek meg a Cistanche deserticolában a gőzölés, illetve a szárítás hőfeldolgozási szakaszában. Ez az eredmény megerősítette, hogy a gőzölés különösen kritikus volt a metabolitok átalakulása szempontjából a Cistanche deserticola feldolgozása során.

Differenciális metabolitok dúsítási elemzése és KEGG útvonal hatáselemzése

A friss és feldolgozott mintákban található differenciális metabolitokat (p < 0.05) a KEGG, HMDB és PubChem online adatbázisaiba térképeztük fel, amelyek a molekuláris kölcsönhatások, reakciók és relációs hálózatok ismereteit, valamint a dúsítási eredményeket tartalmazzák. és a részletes metabolikus útvonalak a 2. kiegészítő táblázatban és az 5. ábrán láthatók. Amint az 5a1. és a2. ábrákon látható, az útvonal hatása feltárta a fenilpropanoid bioszintézis, a flavonoid bioszintézis, az alanin metabolizmus, a riboflavin metabolizmus, a taurin és a hipotaurin metabolizmus, valamint a nikotinamid metabolizmusának feldúsulását. anyagcsere a Cistanche deserticola gőzölése során. Míg a gőzölést követő szárítás során a differenciális metabolitok metabolikus útjai főként glicin-, szerin- és treonin-anyagcserét, tiamin-anyagcserét, pirimidin-anyagcserét és telítetlen zsírsavak bioszintézisét tartalmazták.

Ezenkívül a két páronkénti összehasonlítás között néhány metabolikus útvonal átfedésben volt, például a nikotinát és a nikotinamid metabolizmusa, a fenilpropanoid bioszintézis és a flavonoid bioszintézis, de ezek dúsítási szintjei nagyon eltérőek voltak a két páronkénti összehasonlításban. Ezek az eredmények arra utaltak, hogy a Cistanche deserticola gőzölési és szárítási folyamatai között a metabolitok konverziós útvonala eltérő volt, és az anyagcsere-útvonalak különbségei magyarázhatják a különböző módon kizáró metabolitok jelenlétében mutatkozó különbségeket a termikus feldolgozás során. Ezek a biokémiai változások felhasználhatók a termikus feldolgozási szakaszok Cistanche deserticola összetételére gyakorolt ​​hatásának megértésére.

négy metabolikus utat (fenilpropanoid bioszintézis, flavonoid bioszintézis, alanin metabolizmus és glicin, szerin és treonin metabolizmus) választottak kulcsfontosságú metabolitokként a Cistanche deserticola fő aktív komponenseinek átalakulásának jellemzésére a hőfeldolgozás során (5b1, b2 ábra). A jelenlegi tanulmány kimutatta, hogy a fenilpropanoidok és flavonoidok felhalmozódtak, de az aminosavak lebomlanak a párolt Cistanche deserticolában a friss és szárított mintákhoz képest. A fenilpropanoid bioszintetikus útja a flavonoidok bioszintetikus útja előtt van. Hasonló következtetéseket tettek közzé Liu et al. (18), akik arról számoltak be, hogy a fenilpropanoidok felhalmozódási szintje a rizs sárgulása során jelentősen megnőtt a normál rizshez képest. A fenilpropanoidok fahéjsavból származnak, és előanyaguk a fenilalanin, amely a fenilalanin ammónia-liáz (PAL) aktivitásának hevítés hatására történő aktiválásával állítható elő (28).

Korábbi tanulmányok arról számoltak be, hogy a fenilpropanoid útvonal a kumarinok, flavonok, izoflavonok és flavonolok bioszintéziséhez vezet, amelyek fontos fegyverei a növényvédelemnek (29), és megakadályozzák a gőzölési folyamatban fellépő erős hőstressz okozta sejthalált, a fenilpropanoidot. Az útvonal fokozódhat a magas hőmérséklet okozta biológiai stressz miatt (30, 31). A flavonoidok a fenilpropanoidokból származó fő másodlagos metabolitok (32), és felhalmozódásuk megvédheti a növényeket a szabad gyökök megkötése által okozott oxidatív károsodástól (33). A friss és szárított Cistanche deserticolához képest a párolt Cistanche deserticolában a flavonoidok magasabb bioszintézise összefüggésbe hozható a gőzölési folyamat során fellépő fokozott hőstresszsel, amely megvédi a reaktív oxigénfajtákat (ROS) (34, 35). Amint az 5b3. és b4. ábrán látható, az aminosav-anyagcsere fontos szerepet játszott a Cistanche deserticola termikus feldolgozásában. Az alanin, glicin, szerin és treonin tartalom párolás utáni gyógynövényekben tapasztalt változásait a Maillard-reakció előfordulásának jelzésére használták (36).

Mindazonáltal, a Cistanche deserticola gőzölésének bonyolult folyamata miatt, a Cistanche deserticola gőzölésének átfogó értékelését, mint például a megjelenés, a hatóanyagok és a metabolikus biomarkerek, további vizsgálatokat kell végezni.

KÖVETKEZTETÉSEK

Jelen tanulmányban UHPLC-MS/MS alapú, széles körben célzott metabolomikai megközelítést alkalmaztunk a Cistanche deserticola különböző termikus feldolgozási szakaszaiban az aktív vegyületek képződési mechanizmusának tanulmányozására. A jelenlegi eredmények azt mutatták, hogy egyes kulcsfontosságú metabolitok, mint például a fenilpropanoidok és flavonoidok bioszintézise jelentősen javult a gőzölési folyamat során. A párolt Cistanche deserticolában az aminosavak expressziós szintje megnövekedett, jelezve az elsődleges és másodlagos metabolitok közötti átalakulást. Ráadásul a Cistanche deserticola megjelenésének megfeketedése elsősorban a gőzölési, nem pedig a szárítási szakaszban fordult elő, ez a jellemző az aminosav-anyagcsere-útvonalhoz kapcsolódik. A fenti metabolitok szintje azonban jelentősen csökkent a szárítási folyamat során, ami arra utal, hogy a Cistanche deserticola termikus feldolgozása során főként a gőzölési szakaszban keletkeztek a hatóanyagok. Legjobb tudomásunk szerint ez az első alkalom, hogy a széles körben célzott metabolomikus módszerrel feltárják a termikus feldolgozás során bekövetkező aktív vegyületváltozások mechanizmusát és ezek döntő szerepét a Cistanche deserticola elfeketedésében. Azonban további vizsgálatok szükségesek a hatóanyagok bioszintézise és a termikus feldolgozás során bekövetkező feketedés közötti kapcsolat jobb megértéséhez.

Differenciális metabolitok dúsítási elemzése és KEGG útvonal hatáselemzése

A friss és feldolgozott mintákban található differenciális metabolitokat (p < 0.05) a KEGG, HMDB és PubChem online adatbázisaiba térképeztük fel, amelyek a molekuláris kölcsönhatások, reakciók és relációs hálózatok ismereteit, valamint a dúsítási eredményeket tartalmazzák. és a részletes metabolikus útvonalak a 2. kiegészítő táblázatban és az 5. ábrán láthatók. Amint az 5a1. és a2. ábrákon látható, az útvonal hatása feltárta a fenilpropanoid bioszintézis, a flavonoid bioszintézis, az alanin metabolizmus, a riboflavin metabolizmus, a taurin és a hipotaurin metabolizmus, valamint a nikotinamid metabolizmusának feldúsulását. anyagcsere a Cistanche deserticola gőzölése során. Míg a gőzölést követő szárítás során a differenciális metabolitok metabolikus útjai főként glicin-, szerin- és treonin-anyagcserét, tiamin-anyagcserét, pirimidin-anyagcserét és telítetlen zsírsavak bioszintézisét tartalmazták. Ezenkívül a két páronkénti összehasonlítás között néhány metabolikus útvonal átfedésben volt, például a nikotinát és a nikotinamid metabolizmusa, a fenilpropanoid bioszintézis és a flavonoid bioszintézis, de ezek dúsítási szintjei nagyon eltérőek voltak a két páronkénti összehasonlításban. Ezek az eredmények arra utaltak, hogy a Cistanche deserticola gőzölési és szárítási folyamatai között a metabolitok konverziós útvonala eltérő volt, és az anyagcsere-útvonalak különbségei magyarázhatják a különböző módon kizáró metabolitok jelenlétében mutatkozó különbségeket a termikus feldolgozás során. Ezek a biokémiai változások felhasználhatók a termikus feldolgozási szakaszok Cistanche deserticola összetételére gyakorolt ​​hatásának megértésére.

A KEGG annotáció és dúsítási analízis alapján négy metabolikus útvonalat (fenilpropanoid bioszintézis, flavonoid bioszintézis, alanin metabolizmus, valamint glicin, szerin és treonin metabolizmus) választottak kulcsfontosságú metabolitokként a Cistanche deserticola fő aktív összetevőinek termikus folyamat során történő átalakulásának jellemzésére. feldolgozás (5b1,b2 ábra). A jelenlegi tanulmány kimutatta, hogy a fenilpropanoidok és flavonoidok felhalmozódtak, de az aminosavak lebomlanak a párolt Cistanche deserticolában a friss és szárított mintákhoz képest. A fenilpropanoid bioszintetikus útja a flavonoidok bioszintetikus útja előtt van. Hasonló következtetéseket tettek közzé Liu et al. (18), akik arról számoltak be, hogy a fenilpropanoidok felhalmozódási szintje a rizs sárgulása során jelentősen megnőtt a normál rizshez képest. A fenilpropanoidok fahéjsavból származnak, és előanyaguk a fenilalanin, amely a fenilalanin ammónia-liáz (PAL) aktivitásának hevítés hatására történő aktiválásával állítható elő (28).

Korábbi tanulmányok arról számoltak be, hogy a fenilpropanoid útvonal a kumarinok, flavonok, izoflavonok és flavonolok bioszintéziséhez vezet, amelyek fontos fegyverei a növényvédelemnek (29), és megakadályozzák a gőzölési folyamatban fellépő erős hőstressz okozta sejthalált, a fenilpropanoidot. Az útvonal fokozódhat a magas hőmérséklet okozta biológiai stressz miatt (30, 31). A flavonoidok a fenilpropanoidokból származó fő másodlagos metabolitok (32), és felhalmozódásuk megvédheti a növényeket a szabad gyökök megkötése által okozott oxidatív károsodástól (33).

A friss és szárított Cistanche deserticolához képest a párolt Cistanche deserticolában a flavonoidok magasabb bioszintézise összefüggésbe hozható a gőzölési folyamat során fellépő fokozott hőstresszsel, amely megvédi a reaktív oxigénfajtákat (ROS) (34, 35). Amint az 5b3. és b4. ábrán látható, az aminosav-anyagcsere fontos szerepet játszott a Cistanche deserticola termikus feldolgozásában. Az alanin, glicin, szerin és treonin tartalom párolás utáni gyógynövényekben tapasztalt változásait a Maillard-reakció előfordulásának jelzésére használták (36). Mindazonáltal, a Cistanche deserticola gőzölésének bonyolult folyamata miatt, a Cistanche deserticola gőzölésének átfogó értékelését, mint például a megjelenés, a hatóanyagok és a metabolikus biomarkerek, további vizsgálatokat kell végezni.

KÖVETKEZTETÉSEK

Jelen tanulmányban UHPLC-MS/MS alapú, széles körben célzott metabolomikai megközelítést alkalmaztunk a Cistanche deserticola különböző termikus feldolgozási szakaszaiban az aktív vegyületek képződési mechanizmusának tanulmányozására. A jelenlegi eredmények azt mutatták, hogy egyes kulcsfontosságú metabolitok, mint például a fenilpropanoidok és flavonoidok bioszintézise jelentősen javult a gőzölési folyamat során. A párolt Cistanche deserticolában az aminosavak expressziós szintje megnövekedett, jelezve az elsődleges és másodlagos metabolitok közötti átalakulást. Ráadásul a Cistanche deserticola megjelenésének megfeketedése elsősorban a gőzölési, nem pedig a szárítási szakaszban fordult elő, ez a jellemző az aminosav-anyagcsere-útvonalhoz kapcsolódik. A fenti metabolitok szintje azonban jelentősen csökkent a szárítási folyamat során, ami arra utal, hogy a Cistanche deserticola termikus feldolgozása során főként a gőzölési szakaszban keletkeztek a hatóanyagok. Legjobb tudomásunk szerint ez az első alkalom, hogy a széles körben célzott metabolomikus módszerrel feltárják a termikus feldolgozás során bekövetkező aktív vegyületváltozások mechanizmusát és ezek döntő szerepét a Cistanche deserticola elfeketedésében. Azonban további vizsgálatok szükségesek a hatóanyagok bioszintézise és a termikus feldolgozás során bekövetkező feketedés közötti kapcsolat jobb megértéséhez.

AZ ADATOK ELÉRHETŐSÉGÉRE VONATKOZÓ NYILATKOZAT

A tanulmányban bemutatott eredeti hozzászólásokat a cikk/kiegészítő anyag tartalmazza, további érdeklődők a megfelelő szerző(k)hez fordulhatnak.

A SZERZŐ HOZZÁJÁRULÁSAI

ZA kísérleti tervezést végzett, elvégezte a kísérleteket, előállította az adatokat, és megírta ezt a kéziratot. YZ elvégezte a metabolomikai elemzést. XL szolgáltatta a statisztikai elemzést. A WS adatfeldolgozást és vizsgálatot végzett. A finanszírozás beszerzését, az általános keretrendszert és az írás-ellenőrzést az YL fejezte be. Minden szerző hozzájárult a cikkhez, és jóváhagyta a benyújtott változatot.

FINANSZÍROZÁS

Ezt a munkát a Guangdong tartomány Tudományos és Technológiai Minisztériuma (2018B020241003) támogatta pénzügyileg.

KIEGÉSZÍTŐ ANYAG

A cikkhez tartozó kiegészítő anyag megtalálható online: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fnut.2021. 742511/teljes#kiegészítő-anyag

IRODALOM

1. Wang X, Wang J, Guan H, Xu R, Luo X, Su M és társai. A termesztett Cistanche deserticola különböző részei kémiai profiljának és antioxidáns aktivitásának összehasonlítása ultra-teljesítményű folyadékkromatográfiás-kvadrupól repülési idő tömegspektrometriával és 1,1-difenil-2-pikrilhidrazil-alapú vizsgálattal. Molekulák. (2017) 22:2011. doi: 10,3390/molecules22112011

2. Fu Z, Fan X, Wang X, Gao X. Cistanches Herba: kémiai, farmakológiai és farmakokinetikai tulajdonságainak áttekintése. J Ethnopharmacol. (2018) 219:233–47. doi: 10.1016/j.jep.2017.10.015

3. Piwowarczyk R, Carlón L, Kasinska J, Tofil S, Furma ´ nczyk P. ´ Mikromorfológiai intraspecifikus differenciáció a nektárvezetők és leszálló platform beporzók számára az ibériai Cistanche phelypæa (Orobanchaceae) parazita növényben. Bot Lett. (2016) 163:47–55. doi: 10.1080/12538078.2015.1124287

4. Jiang Y, Tu P. Cistanche fajok kémiai összetevőinek elemzése. J Chromatogr a. (2009) 1216:1970–9. doi: 10.1016/j.chroma.2008. 07.031

5. Li Z, Lin H, Gu L, Gao J, Tzeng C. Herba Cistanche (Rou Cong-Rong): A hagyományos kínai orvoslás egyik legjobb gyógyszerészeti ajándéka. Front Pharmacol. (2016) 7:41. doi: 10.3389/fphar.2016.00041

6. Song Y, Zeng K, Jiang Y, Tu P. Cistanches Herba, egy veszélyeztetett fajtól a kínai orvoslás nagy márkájáig. Med Res Rev. (2021) 5:1–39. doi: 10.1002/med.21768

7. Xiong Q, Kadota S, Tani T, Namba T. A Cistanche deserticola feniletanoidjainak antioxidáns hatásai. Biol Pharmac Bull. (1996) 19:1580–5. doi: 10.1248/bob.19.1580

8. Wang L, Ding H, Yu H, Han L, Lai Q, Zhang L és mások. Cistanches herba: kémiai összetevők és farmakológiai hatások. Chin Herbal Med. (2015) 7:135–42. doi: 10.1016/S1674-6384(15)60017-X

9. Peng F, Xu R, Wang X, Xu C, Liu T, Chen J. A gőzölési folyamat hatása a betakarítás utáni Cistanche deserticola gyógyászati ​​felhasználására a napon szárítás során. Biol Pharm Bull. (2016) 39:2066–70. doi: 10.1248/bob.b16- 00250

10. Peng F, Chen J, Wang X, Xu C, Liu T, Xu R. Változások a feniletanoid glikozidok szintjében, az antioxidáns aktivitásban és más minőségi jellemzőkben Cistanche deserticola szeletekben gőzfeldolgozással. Chem Pharm Bull. (2016) 64:1024–30. doi: 10.1248/CPB.c16-00033

11. Zou P, Song Y, Lei W, Li J, Tu P, Jiang Y. 1 H NMR-alapú metabolomika alkalmazása a különböző részek megkülönböztetésére és a Cistanche deserticola új feldolgozási munkafolyamatának kidolgozása. Acta Pharm Sin B. (2017) 7:647–56. doi: 10.1016/j.apsb.2017.07.003

12. Zheng J, Wu Z, Yang N, Zhou K, Hu W, Ou S et al. Széles körben célzott UHPLC-MS/MS metabolomikus elemzés az áfonyával töltött péksütemények feldolgozás közbeni kémiai változásairól. Határok a táplálkozásban. (2020) 7:569172. doi: 10.3389/fnut.2020.569172

13. Liu W, Song Q, Cao Y, Xie N, Li Z, Jiang Y és mások. Az 1H NMR-alapú nem célzotttól az LC-MS alapú célzott metabolomikai stratégiáig a kamilla mélyreható összehasonlításához négy Cistanche faj között. J Pharmaceut Biomed. (2019) 162:16–27. doi: 10.1016/j.jpba.2018.09.013

14. Wang H, Hua J, Yu Q, Li J, Wang J, Deng Y és mások. A széles körben célzott metabolomikus elemzés dinamikus változásokat tár fel a nem illékony és illékony metabolitokban a zöld tea feldolgozása során. Food Chem. (2021) 363:130131. doi: 10.1016/j.foodchem.2021.130131

15. Koistinen VM, Da Silva AB, Abrankó L, Low D, Villalba RG, Barberán FT, et al. Növényi élelmiszerek bioaktív vegyületeinek és metabolitjainak laboratóriumközi lefedettségi vizsgálata tömegspektrometriás alapú nem célzott metabolomikával. Metabolitok. (2018) 8:46. doi: 10.3390/metabo8030046

16. Santin M, Lucini L, Castagna A, Chiodelli G, Hauser M, Ranieri A. A betakarítás utáni UV-B sugárzás modulálja az őszibarack gyümölcs metabolitprofilját. Postharvest Biol Tec. (2018) 139:127–34. doi: 10.1016/j.postharvbio.2018.02.001

17. Nie H, Chen H, Li G, Su K, Song M, Duan Z és mások. Flavonoidok és fenilpropanoid vegyületek összehasonlítása különböző módszerekkel feldolgozott kínai vízi gesztenyében. Food Chem. (2021) 335:127662. doi: 10.1016/j.foodchem.2020.127662

18. Liu Y, Liu J, Wang R, Sun H, Li M, Strappe P és mások. A sárgás folyamat által kiváltott másodlagos metabolitok elemzése a rizs sárgulási mechanizmusának megértéséhez. Food Chem. (2021) 342:128204. doi: 10.1016/j.foodchem.2020.128204

19. Wu L, Huang X, Liu S, Liu J, Guo Y, Sun Y és mások. Az oolong teára jellemző nem illékony vegyi anyagok képződési mechanizmusának megértése a gyártási folyamatok során integrált, széles körben célzott metabolom- és DIA proteomanalízis segítségével. Food Chem. (2020) 310:125941. doi: 10.1016/j.foodchem.2019.125941

20. Xie Y, Li X, Zhang Y, Zheng Z, Huang L, Liu D és mások. A magas páratartalmú forrólevegős gőzölés hatásai a Gastrodia elatára: gőzölés mértéke, súlycsökkenés, állag, szárítási kinetika, mikroszerkezet és aktív komponensek. Élelmiszer-biotermék-eljárás. (2021) 127:255–65. doi: 10.1016/j.fbp.2021.03.005

21. Chen W, Gong L, Guo Z, Wang W, Zhang H, Liu X és társai. Új, integrált módszer a széles körben célzott metabolitok nagy léptékű kimutatására, azonosítására és mennyiségi meghatározására: alkalmazás a rizs metabolomika tanulmányozásában. Mol üzem. (2013) 6:1769–80. doi: 10.1093/mp/sst080

22. Arena S, Renzone GD, Ambrosio C, Salzano AM, Scaloni A. Tejtermékek és a Maillard-reakció: ígéretes jövő az élelmiszerek kiterjedt jellemzésére integrált proteomikai tanulmányokkal. Food Chem. (2017) 219:477–89. doi: 10.1016/j.foodchem.2016.09.165

23. Rizzi G P. Színes Maillard-reakciótermékek kémiai szerkezete. Food Rev Int. (1997) 13:1–28. doi: 10.1080/87559129709541096

24. Liu Z, Chao Z, Liu Y, Song Z, Lu A. Maillard-reakció a Polygonum multiflorum gyökerének gőzölési folyamatában. Planta Med. (2009) 75:84–8. doi: 10,1055/s-0028-1088349

25. Jin J, Lao J, Zhou R, He W, Qin Y, Zhong C és társai. Szacharidok egyidejű azonosítása és dinamikus elemzése a Polygonatum cystoma rizómáinak gőzfeldolgozása során HPLC-QTOF-MS/MS módszerrel. Molekulák. (2018) 23:2855. doi: 10,3390/molekula23112855

26. Wan XC. Tea biokémiája (harmadik kiadás). Peking: Kínai Mezőgazdasági Kiadó (2003). p. 41–5.

27. Xu Y, Xiao Y, Lagnika C, Li D, Liu C, Jiang N és mások. Különböző szárítási módszereknek alávetett káposzta (Brassica oleracea var. Capitate var L) táplálkozási tulajdonságainak, antioxidáns kapacitásának és fizikai jellemzőinek összehasonlító értékelése. Food Chem. (2020) 309:124935. doi: 10.1016/j.foodchem.2019.06.002

28. Dixon RA, Paiva N L. Stressz által kiváltott fenilpropanoid metabolizmus. Növényi sejt. (1995) 7:1085–1097. doi: 10,1105/tpc.7.7.1085

29. Gupta R, Min CW, Kim SW, Wang Y, Agrawal GK, Rakwal R et al. Barna és sárga színű szója magvak maghéjának összehasonlító vizsgálata integrált proteomikai és metabolomikai megközelítéssel. Proteomika. (2015) 15:1706–16. doi: 10.1002/pmic.201400453

30. Commisso M, Toffali K, Strasser P, Stocchero M, Ceoldo S, Baldan B és mások. A fenilpropanoid vegyületek hatása a hőstressz toleranciára sárgarépa sejtkultúrákban. Front Plant Sci. (2016) 7:1439. doi: 10.3389/fpls.2016.01439

31. Wahid A, Gelani S, Ashraf M, Foolad M. Heat tolerance in növények: an overview. Environ Exp Bot. (2007) 61:199–223. doi: 10.1016/j.envexpbot.2007.05.011

32. Wu X, Yuan J, Luo A, Chen Y, Fan Y. Az aszályos stressz és az újralocsolás növeli a másodlagos metabolitokat és az enzimaktivitást a dendrobium moniliformban. Ind Crop Prod. (2016) 94:385–93. doi: 10.1016/j.indcrop.2016.08.041

33. Wang Y, Ren W, Li Y, Xu Y, Teng Y, Christie P és mások. Nem célzott metabolomikus elemzés a di(2-etil-hexil)-ftalát-stressznek a lucerna (Medicago sativa) gyökérváladékára gyakorolt ​​hatásának feltárására. Sci Total Environ. (2019) 646:212– 9. doi: 10.1016/j.scitotenv.2018.07.247

34. Jia X, Sun C, Li G, Li G, Chen G. A progresszív szárazságstressz hatásai a Radix Astragali fiziológiájára, antioxidáns enzimeire és másodlagos metabolitjaira. Acta Physiol Plant. (2015), 37:262. doi: 10,1007/s11738-015- 2015-4

35. Paupière MJ, Müller F, Li H, Rieu I, Tikunov YM, Visser R GF és társai. A paradicsom pollenfejlődésének és hőstressz-válaszának célzott metabolomikus elemzése. Növény reprod. (2017) 30:81–94. doi: 10,1007/s00497-017-0301-6

36. Chen J, Ho C. Az illékony anyagok képződésének összehasonlítása szerin/treonin/glutamin-ribóz/glükóz/fruktóz modellrendszerekben. J Agr Food Chem. (1999) 47:643–7. doi: 10.1021/jf980771a

Összeférhetetlenség:

A szerzők kijelentik, hogy a kutatást olyan kereskedelmi vagy pénzügyi kapcsolatok hiányában végezték, amelyek potenciális összeférhetetlenségnek tekinthetők.

Kiadói megjegyzés:

A cikkben megfogalmazott összes állítás kizárólag a szerzők állításaira vonatkozik, és nem feltétlenül jelenti a kapcsolt szervezeteik, illetve a kiadó, a szerkesztők és a lektorok állításait. A jelen cikkben értékelt termékekre vagy a gyártó által megfogalmazott állításokra a kiadó nem vállal garanciát és nem hagy jóvá.

Copyright © 2021 Ai, Zhang, Li, Sun és Liu. Ez egy nyílt hozzáférésű cikk, amelyet a Creative Commons Attribution License (CC BY) feltételei szerint terjesztenek. A felhasználás, terjesztés vagy más fórumokon történő sokszorosítás megengedett, feltéve, hogy az eredeti szerző(k) és a szerzői jog tulajdonosa(i) szerepelnek, és az elfogadott tudományos gyakorlat szerint hivatkoznak a folyóiratban megjelent eredeti publikációra. Tilos a jelen feltételeknek nem megfelelő felhasználás, terjesztés vagy sokszorosítás.

For more information:1950477648nn@gamil.com