Az akteozid, a Stachys Sieboldii MIQ egyik összetevője, ígéretes vesegyulladás elleni szer lehet: Az akteozid hatása a félhold típusú anti-GBM nephritisre patkányokban

További információért:ali.ma@wecistanche.com

Kazumi Hayashi, Tadashi Nagamatsu, Mikio Ito, Tomohisa Hattori és Yoshio Suzuki

Farmakológiai Tanszék, Gyógyszerészeti Kar, Meijo Egyetem, 150 Yagotoyama, Tenpaku-Ku, Nagoya 468, Japán

ABSZTRAKT

Hatásaiakteozid(ACT) a félhold típusú anti-GBM-envesegyulladáspatkányokban vizsgálták. Amikor patkányokkal kezeltékActeozidaz anti-GBM szérum iv. injekcióját követő első naptól,Acteozidgátolta a fehérje vizeletbe történő kiválasztásának növekedését. Ban,-benActeozid- a kezelt patkányok koleszterin- és kreatinintartalma, valamint a nyúl r-globulin elleni antitest termelése a plazmában alacsonyabb volt, mint a nephritis kontroll patkányoké. A szövettani megfigyelések kimutatták, hogy ez a szer elnyomta a hipercellularitást és a félholdképződés előfordulását, a kapillárisfalnak a Bowman-kapszulához való tapadását és a fibrinoid nekrózist a glomerulusokban. Ezenkívül a GBM-en lévő patkány-IgG és C3 lerakódások jelentősen kisebbek voltak aActeozidkezelt csoportban, mint a kontroll nephritikus csoportban. Amikor a kezelést az anti-GBM szérum iv. injekcióját követő 20. napon kezdték, amellyel a betegséget megállapították,Acteozidhasonló hatást eredményezett avesebetegpatkányok, mint fentebb említettük. Ezek az eredmények arra utalnak, hogy az Acteoside hasznos gyógyszer lehet a gyorsan progresszív glomerulonephritis ellen, amelyet súlyos glomeruláris elváltozások és diffúz félholdak jellemeznek.

Kulcsszavak: Crescentic típusú anti-GBMvesegyulladás,Acteozid, Patkány-IgG, Patkány-C3

Click to Cistanche használ Acteoside

A Chyorogi Stachys sieboldii MIQ-t (Labiatae) számos betegségre írják fel, és ezt a gumót kínai, orosz és japán élelmiszerként használják. A közelmúltban végzett vizsgálatok kimutatták, hogy a chyrogi anoxia-ellenes hatással (1), a hialuronidáz aktivitást gátló hatással (2) és immunszuppresszív hatással (3) rendelkezik.

Másrészt megemlítették, hogy az immunválasz részt vesz a nephritis kialakulásában. Konkrétabban fogalmazva, a glomeruláris sérülést a glomerulusokban történő immunkomplex lerakódás közvetíti, amit immungyulladásos reakció követ, beleértve a komplement aktivációt és más gyulladásos mediátorok felszabadulását. A legújabb tanulmányok során nagy figyelmet fordítottak a sejt-mediált immunválasz hozzájárulására a glomerulonephritis kialakulásában (4, 5). Ezenkívül Neild et al. (6) arról számoltak be, hogy a T-sejtek működésének ciklosporin A (CyA) általi elnyomása gátolta a glomeruláris léziók későbbi kialakulását akut nephritisben. Beszámoltunk arról, hogy a mizoribin (7), az azatioprin (7), CyA (8), metilprednizolon (9) és egyes növényi összetevők (10) immunszuppresszív hatást fejtenek ki, és jótékony hatást mutattak az anti-GBM nephritisre. Bár ezek az immunszuppresszív szerek antinefritisz hatást fejtenek ki, mellékhatásaik miatt nehéz őket klinikai vizsgálatokban alkalmazni (11). Ezért a klinikai stádiumban lévő nephritis kezelésére új immunszuppresszív szer kifejlesztése várható.

Jelen tanulmány célja az volt, hogy tisztázza aaz akteozid nefritiszellenes hatása, a chyorogi összetevője, patkányok félholdas típusú anti-GBM nephritisében.

ANYAGOK ÉS METÓDUSOK

Állatok

Sprague-Dawley törzsű hím patkányok, súlyuk kb. 160 g-ot (Nihon SLC, Hamamatsu) használtunk minden kísérlethez. Ezeket az állatokat a kísérleti időszak alatt 23 ± 1 C-os, légkondicionált helyiségben tartottuk.

Kábítószer

Az akteozid (ACT) (Tsumura Co., Ltd., Tokió) kémiai szerkezete az 1. ábrán látható. Ezt a komponenst a chyorogi (Stachys sieboldii MIQ) légi részéből vonták ki. Az ACT tisztaságát HPLC-vel igazoltuk (oszlop: TSK gél ODS-80TM (4.0 id x 250 mm); Mozgófázis: 20% CH3CN/H2O, 10 pl. AcOH; Áramlási sebesség: 0,7 ml/perc; Hőmérséklet: szobahőmérséklet; Detektálás: UV 254 nm) a Tsumura Co., Ltd.-nél. Az ezekben a kísérletekben alkalmazott ACT tisztasága nagyobb, mint 9970. Az ACT-t desztillált vízben oldottuk. Dipiridamolt (Dip) (Boehringer Ingelheim, Németország) és azatioprin (Aza) (Sigma, St. Louis, MO, USA) is alkalmaztunk; Ezeket a gyógyszereket 1070 gumiarábikumban szuszpendáltuk.

Félhold típusú anti-GBM nephritis indukciója

A félholdas típusú anti-GBM nephritist úgy váltották ki, hogy a korábban közölt módszer enyhe módosításával nyúl r-globulinnal (rG) immunizálták azokat a patkányokat, amelyek nefritogén dózisú nyúl anti-patkány GBM (anti-GBM) szérumot kaptak. 12). Ebben a kísérletben a patkányok kb. 160 g állatonként 0,6 ml anti-GBM szérumot adtunk be a farokvénába.

A teszt gyógyszerek hatását úgy becsültük meg, hogy az anti-GBM szérum injekciót követő 1. naptól (heterológ fázis) vagy az antiGBM szérum injekciót követő 20. naptól (autológ fázisok) adták be őket. A kísérletek során 24-óra vizeletmintákat gyűjtöttek, majd a patkányokat 5 vagy 6, 8 patkányból álló csoportra osztották úgy, hogy az átlagos fehérjetartalom az 24-óra vizeletben minden csoportban hasonló szintű.

A vizsgált gyógyszerek antinefritisz hatásának értékelése

A heterológ fázis gyógyszeres kezelésének kísérletében négy csoport kapott orálisan 3, 10 vagy 30 mg/kg/nap ACT-t, illetve 100 mg/kg/nap Dip-et 1 ml/100 g mennyiségben. testtömegtől, naponta az 1. naptól vagy az anti-GBM szérum iv. injekcióját követő napon a 40. napig. Az autológ fázisból származó gyógyszeres kezelés kísérleteiben három vagy négy csoport kapott szájon át napi 3, 10 vagy 30 mg/kg ACT-t (A), vagy 30 mg/kg/nap ACT-t, 100 mg/ttkg/nap ACT-t. Mártás vagy 50 mg/ttkg/nap Aza (B), 1 ml/100 g testtömegben, naponta az anti-GBM szérum iv. injekcióját követő 20. naptól a 40. (A) vagy 45. napig (Szülinap. A fennmaradó csoportnak orálisan vivőanyagot (desztillált vizet) adtunk a tesztgyógyszerek helyett, és nephritis kontrollként szolgált. Ezenkívül egy nem kezelt (normál) csoportot használtunk a nefritisz csoportokkal való összehasonlításhoz.

Vizelet- és vérgyűjtés

A {0}}órás vizeletmintákat úgy nyertük, hogy minden állatot egyéni metabolikus ketrecben tartottunk 24 órán keresztül. A vizeletgyűjtés kezdetén minden állat 8 ml desztillált vizet kapott szájon át etetés nélkül. A vizeletet ezután 3, 000 fordulat/perc sebességgel centrifugáltuk 15 percig 41 °C-on, és a felülúszót használtuk a fehérje meghatározására. A kísérlet utolsó napján minden elaltatott patkány vesevénájából 2.{9}} ml vért vettünk egy eldobható fecskendővel, és egy 0,125 ml heparint tartalmazó csőbe helyeztük. A vért 5,{12}} fordulat/perc sebességgel centrifugáltuk, hogy plazmát nyerjünk bizonyos paraméterek meghatározásához.

A vizelet fehérje- és plazma koleszterin- és kreatinintartalmának meghatározása

A vizelettel történő fehérje kiválasztását Kingsbury és munkatársai módszerével határoztuk meg. (13) és mg/24 órás vizeletben fejezzük ki. A koleszterintartalmat egy kereskedelmi forgalomban lévő vizsgálati készlettel (Determine TC-5; Kyouwa Medix Co., Ltd., Tokió) határoztuk meg (14), és mg/dl plazmában fejeztük ki. A kreatinintartalmat kreatinin-meghatározó készlettel (CRE-EN; Kainos, Inc., Tokió) határoztuk meg, és mg/dl plazma/100 g testtömeg-ben fejeztük ki.

A -G elleni plazma antitest titer mérése

Az rG elleni plazma antitest-titert indirekt hemagglutinációval határoztuk meg szenzitizált birka vörösvértestek felhasználásával (15).

A plazma komplement CH50 szintjének mérése

A plazma komplement CH50 szintjét Mayer módszerével határoztuk meg (16).

A kórszövettani paraméterek értékelése

A fénymikroszkópos vizsgálathoz pentobarbitállal érzéstelenített patkányok veséit izoláltuk, majd dehidratáltuk és rögzítettük, fokozatosan merítve a szöveteket az alacsonytól a magasig terjedő etil-alkohol különféle hagyományaiba. A szöveteket ezután paraffinba ágyaztuk, és 2-3 em vastag szeletekre vágtuk. A félhold típusú anti-GBM nephritis vizsgálata során a metszeteket hematoxilinnel és eozinnal, valamint Masson-féle trikrómmal festették. Fénymikroszkóp alatt megfigyeltük a sejtmagok számát (hipercellularitását), a félhold kialakulását, a Bowman-kapszula kapillárisfalhoz tapadását (adhézió), valamint a glomerulusokban a fibrinoid nekrózist. Ezen paraméterek értékeléséhez véletlenszerű mintavételi módszerekkel egy egyenlítői keresztmetszetet választottunk ki. Ötven glomerulust/keresztmetszetet figyeltek meg, és a félholdképződés, az adhézió és a fibrinoid nekrózis megjelenési arányát a korábban leírt morfológiai elváltozásokkal rendelkező glomerulusok százalékos arányában (incidenciája) fejeztük ki (17). Az értékelést más személy végezte, aki nem ismerte az egyes minták kilétét. A hipercellularitás felmérésére véletlenszerű mintavételi módszerrel ekvatoriális keresztmetszetet választottunk ki. A sejtmagok számát (beleértve a glomeruláris sejtek és az exudatív leukociták magjait) megszámoltuk, és a glomeruláris keresztmetszetenkénti átlagos számként fejeztük ki 10 glomerulus/metszetben.

Immunhisztokémia

A patkány-IgG immunenzimatikus festésére szolgáló szövetekben a paraffin metszeteket a fent leírtak szerint vágtuk, és a metszeteket 0,1 százalékos proteázzal kezeltük 0.05 M Trisz-ben. HCl puffer 7 percig, majd hűtött 0,01 M foszfáttal pufferelt sóoldattal (PBS), pH 7,4 mossuk. A metszeteket ezután 1:100 hígításban 90 percig inkubáltuk anti-patkány IgG egér monoklonális antitesttel (mAb) (Cappel, West Clester, PA, USA). A metszeteket ismét PBS-sel mostuk, 0,3%-os metanolos hidrogén-peroxiddal kezeltük 20 percig az endogén peroxidáz blokkolására, majd biotinilezett affinitástisztított antiegér IgG-vel és avidinált torma-peroxidázzal inkubáltuk 3,3'-diaminobenzidin-tetrahidrokloriddal (DAB) (Vecta festett ABC Kit; Vector intézmény, Burlingame, CA, USA). Minden lépést szobahőmérsékleten végeztünk.

A sejtproliferáció markerejének számító proliferáló sejtmagi antigén (PCNA) immunenzimatikus festésére szolgáló szöveteket 10 százalékos formalinban fixáltuk PBS-ben, és a paraffinba ágyazott szöveteket ugyanazzal az eljárással festettük meg, mint a patkány-IgG esetében, kivéve: mAb (19A2; Coulter Immunology, Hialeah, FL, USA) alkalmazása a PCNA-hoz.

A patkány-IgG, C3 és PCNA mennyiségi meghatározása szövetmetszeteken

A glomerulusban az immunreaktív patkány-IgG és C3 összterületét metszetenként 30 glomerulusban mérték meg képanalizátor segítségével (Toyobo Image Analyzer V1; Toyobo Co., Ltd., Tokió), és mm2/glomeruláris keresztmetszetben (GCS) adtuk meg. ). A glomerulusban lévő PCNA-pozitív sejteket a képanalizátorral megszámoltuk, és az eredményeket sejtek/GCS számban fejeztük ki.

statisztikai elemzések

Az adatok az átlagot ± SD-t jelentik, és az eredményeket statisztikailag ANOVA-val értékeltük ki. Amikor ezek az eredmények parametrikusak voltak, ezeket statisztikailag Duncan-teszttel értékelték ki. Ha az eredmények nem paraméteresek voltak, azokat statisztikailag a Kruskal-Wallis teszttel értékelték ki. A gátlási százalékot a következőképpen számítottuk ki:

Gátlási százalék ( százalék )=(kontroll – teszt gyógyszer) x 100 / (kontroll – normál)

EREDMÉNYEK

Az akteozid hatása félhold típusú anti-GBM nephritisben

A vizeletfehérje kiválasztás (2. és 3. ábra): Amikor az ACT-kezelést az anti-GBM széruminjekciót követő napon kezdték (heterológ fázis), az 5. napon figyelték meg a vizeletfehérje első jelentős szuppresszióját 30 mg-os adagnál. /kg, po; a 20. napon 3 és 10 mg/kg, po; és a 40. napon 100 mg/kg Dip-vel, po

Amikor az ACT-t az antiGBM szérum injekciót követő 20. naptól kezdődően adták be (autológ fázis), az ACT 10 és 30 mg/nap dózisban gátolta a fehérje vizeletbe történő kiválasztódásának növekedését a 30. napra. Másrészt az 50 mg/kg-os Aza gyengébb volt, mint a 30 mg/kg-os ACT, bár nem szignifikánsan, és a Dip-nek nem volt hatása.

Plazma koleszterin és kreatinin tartalom (1. táblázat): A plazma koleszterin és kreatinin tartalmat a 40. vagy 45. napon határoztuk meg. A vesegyulladásos kontroll patkányokban a plazma koleszterin tartalma jelentősen megemelkedett. Ezzel szemben a koleszterintartalom emelkedése a heterológ fázisból származó ACT-vel (30 mg/kg) a kontroll szint 60%-ával, az autológ fázisból származó ACT-vel (30 mg/kg) pedig a kontroll szint 62%-ával csökkent. szint. A vesebetegségben szenvedő patkányok plazma kreatinintartalma szintén megemelkedett. Másrészt mindkét fázissal kezelt patkány ACT-értékében (30 mg/kg) a plazma kreatinin tartalma hasonló volt a normál patkányokéhoz.

Az rG elleni plazma antitest-titer: Nefritisz patkányok jelentősen felgyorsult antitesttermelést mutattak. A felgyorsult ellenanyag-termelést a kontroll szint 72 százalékára csökkentette a heterológ fázisból ACT-vel (10 és 30 mg/kg), az autológ fázisból ACT-vel (30 mg/kg) és az Aza-val végzett kezeléssel (2. táblázat). A kontroll szint 70 és 51 százaléka (az adatok nem láthatók), és a Dip nem befolyásolta.

Szövettani megfigyelés (3. táblázat, 4. és 5. ábra): A nephritis glomerulusok fénymikroszkópos vizsgálata során súlyos félholdképződéssel, adhézióval, fibrinoid nekrózissal és a mesangialis sejtek proliferációjával jellemezhető elváltozásokat találtunk. A szövettani megfigyelések kimutatták, hogy az ACT (a heterológ és az autológ fázisból egyaránt) gátolta a hipercellularitást, valamint a félholdképződés, adhézió és a fibrinoid nekrózis előfordulását a glomerulusokban a 40. vagy 45. napon. A Dip- és Aza-kezelt nefritisz patkányok elváltozásai szintén kisebbek voltak, mint a nephritikus kontroll patkányoké. Ha azonban nefritisz patkányokat az autológ fázisból származó Dip-pel kezeltek, a szövettani változásokat a Dip nem befolyásolta (az adatokat nem mutatjuk be).

Glomeruláris sejtproliferációt, nevezetesen a PCNA-pozitív sejtek számának növekedését figyelték meg a glomerulusokbannefritisz patkányok. Ezzel szemben a 30. napon 52 százalékos csökkenéssejtproliferációt figyeltek meg, és ez összefüggésbe hozható wa glomeruláris sejtszám jelentős csökkenéselularitás a kontrollhoz képest (3. táblázat).

Az immunreagens lerakódása (2. táblázat és 6. ábra): Megfigyelhető volt a patkány-IgG és C3 lerakódások a GBM-en a nephritis kontroll patkányokban; normál patkányokban azonban nem találták őket. A heterológ fázisból származó ACT (30 mg/kg) a kontroll szint 72%-ával csökkentette a patkány-IgG lerakódását a GBM-en. Ezenkívül a heterológ fázisból származó ACT (3, 10 és 30 mg/kg) 60-69 százalékkal csökkentette a patkány-C3 lerakódását a GBM-en a 40. napra. Még akkor is, ha az ACT-t az autológ fázisból adták, a patkány-IgG és a C3 lerakódás gátlása hasonló volt a fenti eredményekhez. A bemerülés nem befolyásolta a patkány-IgG és C3 lerakódását. Az Aza azonban 67, illetve 68 százalékkal csökkentette a patkány-IgG és C3 lerakódását a GBM-en (az adatokat nem mutatjuk be).

Az ACT hatása a komplement aktivitásra és a C3 lerakódásokra a GBM-en eredeti típusú anti-GBM nephritisben (7. ábra)

Az eredeti típusú GBM-ellenes vesegyulladást patkányokban 0,6 ml anti-GBM szérum befecskendezésével a farokvénákba indukáltuk, a korábban leírtak szerint (18). Nefritisz patkányokat elő- és utókezeltünk 30 mg/kg ACT-vel, po és kobraméreg faktorral (CVF) (Sigma) 10 fig/patkány, ip, háromszor, 8 óránként. Az ACT és CVF kezelések kb. 35 fok, illetve 71 százalék. A nephritis kontroll patkányokban a CH50 jelentősen alacsonyabb volt, mint a normál patkányokban 24 órával a nephritis kiváltása után. Az ACT gátolta a csökkent CH50 és a megnövekedett C3 lerakódást a GBM-en nephritis kontroll patkányokban. A CVF eltörölte a CH50 és C3 leválasztást. Ezenkívül az in vitro kísérletben az ACT 37 százalékkal gátolta a komplement aktivációt. Amikor az ACT-t normál patkányoknak adták, az ex vivo kísérletben az ACT csökkentette a komplement aktivációt (az adatokat nem mutatjuk be).

VITA

A Goodpasture-szindrómában a gyorsan progresszív glomerulonephritis és a vesebetegségek olyan rosszindulatú betegségek, amelyek a betegség kialakulását követően 2-3 hónappal veseelégtelenséggé válnak (19). Ennek a nephritisnek a jellemzői a hipercellularitással, a neutrofilek és monociták jelentős infiltrációjával, valamint a félhold képződésével a glomerulusokban. Az immunszuppresszív szerekkel, vérlemezke-ellenes szerekkel és szteroidokkal végzett koktélterápiát főként erre a betegségre alkalmazták. Másrészt, bár a CyA felülmúlhatatlan immunszuppresszáns, amely jótékony hatással van a kísérleti nephritisre (6, 8), beszámoltak arról, hogy a CyA veseműködési zavarokat okoz, és visszafordíthatatlan szövettani elváltozásokat okoz a glomerulusokban (11). A metilprednizolonnak számos mellékhatása van. Ezen túlmenően, a rebound jelenség és az elvonási szindróma a gyógyszerrel való hosszas kezelést követően a két probléma. Ezért a nephritis kezelésére új, kevesebb mellékhatással járó immunszuppresszív szert kell kifejleszteni.

A félholdas típusú anti-GBM nephritis egy kísérleti modell, amely a gyorsan progresszív glomerulonephritisben és a Goodpasture-szindrómás vesebetegségben tapasztaltakhoz hasonló szövettani és kóros elváltozásokat mutat (20). Ennek a nephritisnek a kialakulása és progressziója 2 fázisból áll, amelyeket immunválaszok közvetítenek. A korai reakció, az úgynevezett heterológ fázis az anti-GBM antitestek lerakódásának köszönhető, amelyet a polimorfonukleáris granulociták komplementfüggő felhalmozódása követ (21, 22). A késői fázis (autológ fázis) a GBM mentén lerakódott autológ antitestek kötődésével és a monociták/makrofágok glomerulusokba való beáramlásával alakul ki ezt a reakciót követően (22, 23). Ezt a nephritist a kétfázisú vizeletfehérje és a hipercellulitás jellemzi, amely magában foglalja a félhold képződését és a fibrinoid nekrózist. Úgy gondolják, hogy a félhold kialakulását migrált makrofágok és elszaporodott hámsejtek közvetítik (22, 24).

Korábban már beszámoltunk arról, hogy a mizoribin és az Aza, egy immunszuppresszív szer (7) gátolták a nyúl IgG és a Poria cocos fő összetevője, a Pachyman elleni plazma antitestek emelkedését (18), csökkentették a C3 lerakódásának mértékét a GBM-en, és mindkettő kifejezetten hatékony az anti-GBM nephritis ellen.

Az ACT-kezelések elnyomták az anti-GBM glomerulonephritis kialakulását, amelyet a proteinuria és a plazma koleszterinszintjének csökkenése, a vesefunkció károsodásának megelőzése, valamint a progresszív szövettani változások, köztük a glomeruláris félhold kialakulásának és a hipercellularitásának megakadályozása alapján értékeltek. A 40. napon a 30 mg/kg ACT önmagában szignifikánsan csökkentette a patkány-IgG lerakódását a GBM-en, amelyet az antitesttermelés elnyomása közvetít ebben a nefritisz modellben. Másrészt a GBM-en lévő C3 lerakódások mennyiségét az ACT 3, 10 vagy 30 mg/kg-ra csökkentette. Ezenkívül az ACT szignifikánsan gátolta a komplement aktivációt mind in vitro, mind ex vivo kísérletekben. A CH50 csökkenését nephritis kontroll patkányokban az ACT gátolta. A fenti adatok arra utalnak, hogy az ACT gátolja a vesekárosodást azáltal, hogy gátolja a komplement aktivációt, mivel a komplement membrán támadó komplex (MAC) részt vesz a glomeruláris károsodás patogenezisében (25), és a szublitikus MAC potenciális gyulladásos mediátorokat tartalmaz, amelyek összefüggésbe hozhatók glomeruláris károsodással. mezangiális sejtproliferáció és extracelluláris mátrix diffúziók, például reaktív oxigénfajták (26), proteázok (27), prosztaglandinok (28) és interleukin-1, mint a citokinek (29), valamint a kollagén (30).

Úgy gondolják, hogy a komplement aktiváció szorosan összefügg a leukocita infiltrációval. A legújabb vizsgálatokban beszámoltak arról, hogy a C5a monociták és neutrofilek adhéziót váltott ki a mezangiális sejtekhez, illetve az endotélsejtekhez (31, 32). Ezért egy további vizsgálatban az ACT hatását vizsgáljuk a leukociták felhalmozódására a glomerulusokban.

IRODALOM

1 Yamahara J, Kitani T, Kobayashi H és Kawahara Y: Studies on Stachys sieboldii MIQ. II Anoxia ellenes hatás és az aktív összetevők. Yakugaku Zasshi 110, 932-935 (1990) (absztrin angol)

2 Takeda Y, Fujita T, Satoh T és Kakegawa H: A Stachys sieboldii MIQ glikozidos összetevőiről. és hatásuk a hialuronidáz aktivitásra. Yakugaku Zasshi 105, 955-959 (1985) (angol rövidítés)

3 Sasaki H, Nishimura H és Morita T: Immunosuppressive Principles of Rehmannia gluttons var. hueichingensis. Planta Med 55, 458-462 (1989)

4 Saito T és Atkins RC: A mononukleáris leukociták hozzájárulása a kísérleti fokális glomeruláris szklerózis progressziójához. Kidney Int 37, 1076-1083 (1990)

5 Tipp PG, Neale TJ és Holdsworth SR: T-limfociták részvétele antitest-indukált kísérleti glomerulonephritisben. Kidney Int 27, 530-537 (1985)

6 Neild GH, Ivory K és Williams DG: A ciklosporin A gátolja a nyulakban a sactus szérumbetegséget. Clin Exp Immunol 52, 586-594 (1983)

7 Okamoto K, Ito M és Suzuki Y: Vizsgálatok a mizoribin (p-INN, Bredinin®), egy új immunszuppresszív szer, valamint az azatioprin antinefritisz hatásáról (2): Hatás a félhold típusú anti-GBM nephritisre patkányokban. Jpn J Pharmacol 34, 33-41 (1984)

8 Nagamatsu T, Kojima N, Kondo N, Hattori T, Kojima R, Ito M és Suzuki Y: Az anti-GBM nephritis ciklosporin A szuppressziója patkányokban. Jpn J Pharmacol 58, 27-36 (1992)

9 Taniguchi H, Nagamatsu T, Kojima R, Ito M és Suzuki Y: A metilprednizolon-szultanát markáns antinefritisz hatása és kevésbé káros hatásai időszakos adagolás esetén patkányokban. Jpn J Pharmacol 64, 79-88 (1994)

10 Hattori T, Furuta K, Hayashi K, Nagamatsu T, Ito N és Suzuki Y: Tanulmányok a növényi komponensek antinefritisz hatásairól (6): A phellogen drine (OB-5) antinefritisz hatásai és mechanizmusai a félhold- típusú anti-GBM nephritis patkányokban (2). Jpn J Pharmacol 60, 187-195 (1992)

11 Mason J: A Sandimmune hatásai a vesére. Clin Res Bull 6, 47-51 (1989)

12 Ito M, Yamada H, Okamoto Y és Suzuki Y: Antiglomeruláris bazális membrán (GBM) szérum által kiváltott félholdas típusú nephritis patkányokban. Jpn J Pharmacol 33, 1145-1154 (1983)

13 Kingsbury FB, Clark CP, Williams G és Post AL: Az albumin gyors meghatározása a vizeletben. J Lab Clin Med 11, 981-989 (1926)

14 Zurkowski P: Gyors módszer a koleszterin meghatározására egyetlen reagenssel. Clin Chem 10, 451-453 (1964)

15 Mcleish KR, Clark CP, Williams G és Post AL: Az antitestszintézis szuppressziója a prosztaglandin E által, mint az egér immunkomplex glomerulonephritis megelőzésének mechanizmusa. Lab Invest 47, 147-152 (1982)

16 Mayer MM: Komplement és komplement rögzítés. In Experimental Immunochemistry, pp 133-240, Charles C. Thomas, Springfield (1961)

17 Hattori T, Ito M, Nagamatsu T és Suzuki Y: Tanulmányok a TJ-8014, egy új japán gyógynövényes gyógyszer vesegyulladás elleni hatásáról (3): Effects on crescentic-type anti-GBM nephritis in patkány. Jpn J Pharmacol 52, 131-140 (1990)

18 Hattori T, Hayashi K, Nagao T, Furuta K, Ito M és Suzuki Y: Studies on antinephritic effects of plant ingredients (3): A pachyman, a Poria cocos Wolf fő komponensének hatása a származási nal típusú anti-GBM-re nephritis patkányokban és annak mechanizmusai. JpnJ Pharmacol 59, 89-96 (1992)

19 Shibata S, Miyakawa Y, Naruse T, Nagasawa T és Takuma T: Nefrotoxikus antitestet indukáló glikoprotein: izolálása és tisztítása patkány glomeruláris alapmembránjából. J Immunol 102, 593 601 (1969)

20 Falk RJ: ANCA-asszociált vesebetegség. Kidney Int 38, 998-1010 (1990) 21 Mulligan MS, Johnson KJ, Todd RF III, Issekutz TB, Miyasaka M, Tamatani T, Smith CW, Anderson DC és Ward PA: Requirements for leukocyte adhesion molecules in nephrotoxic nephritis. J Clin Invest 91, 577-587 (1993)

22 Nahas AME: Növekedési faktorok és glomeruláris szklerózis. Kidney Int 41, Supp 36, S15-S20 (1992)

23 Boyce NW, Holdsworth SR, Dijkstra CD és Atkins RC: Intraglomeruláris mononukleáris fagociták mennyiségi meghatározása kísérleti glomerulonephritisben patkányban specifikus monoklonális antitestek felhasználásával. Pathology 19, 290-293 (1987)

24 Becker GJ, Hancock WW, Stow JL, Glasgow EF, Atkins RC és Thomson NM: Makrofágok részvétele kísérleti krónikus immunkomplex glomerulonephritisben. Nephron 32, 227-233 (1982) 25 Perkinson DT, Baker PT, Couser WG, Johnson BJ és Adler S: Membrán támadó komplex lerakódás kísérleti glomeruláris sérülésben. Am J Pathol 120, 121-128 (1985)

26 Alder S, Baker PJ, Johnson RJ, Ochi RF, Pritzl P és Couser WG: A komplement membrán támadó komplex serkenti a reaktív oxigén metabolitok termelését tenyésztett patkányok mezangiális sejtjeiben. J Clin Invest 77, 762-767 (1986)

27 Johnson RJ, Couser WG és Alpers CE: A humán neutrofilisztin proteáz, észteráz és katepszin G közvetítheti a glomeruláris sérülést in vivo. J Exp Med 168, 1169-1174 (1988)

28 Cybusky AV, Lieberthal W, Quigg RJ, Rennke HG és Salant DJ: A tromboxán szerepe a komplement által közvetített glomeruláris sérülésben. Am J Pathol 128, 45-51 (1987)

29 Lovett D, Hansch G, Resch K és Gemsa D: A glomeruláris mezangiális sejtek aktiválása terminális komplement komponensekkel. A prosztanoid és interleukin-l-szerű faktor felszabadulás stimulálása. Immunobiology 168, 34-35 (1986)

30 Torbohm I, Schonermark M, Wingen AM, Berger B, Rother K és Hansch GM: A C5b_8 és C5b_9 modulálja a humán glomeruláris epiteliális sejtek kollagénfelszabadulását. Kidney Int 37, 1098-1104 (1990)

31 Lo SK, Detmers PA, Levin SM és Wrigh SD: A neutrofilek átmeneti adhéziója az endotéliumhoz. J Exp Med 169, 1779 -1793 (1989) 32 Brady HR, Denton MD, Jimenez W, Takata S, Palliser D és Brenner BM: A kemoattraktánsok kiváltják a monociták adhézióját az emberi mezangiális sejtekhez és a mezangiális sejt sérülését. Kidney Int 42, 480-487 (1992)