A Cistanche fajok kémiai összetevőinek elemzése

Kapcsolatba lépni:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Yong Jiang, Peng-Fei Tu és mások

Absztrakt

A nemzetség fajaiCistanche(kínaiul Rou Cong Rong) évelő parazita gyógynövények, és főleg száraz területeken és meleg sivatagokban terjesztik. Kiváló tonik veseelégtelenség, impotencia, női meddőség, kóros leucorrhoea, erős metrorrhagia és időskori székrekedés kezelésére,Cistanchegyógynövényekkiérdemelte a "sivatagi ginzeng" kitüntetést. A közelmúltban egyre nagyobb tudományos figyelem irányul a Herba Cistanche-ra figyelemre méltó bioaktivitásai miatt, beleértve az antioxidációt, a neuroprotektív és az öregedésgátló hatásokat. A kémiai összetevőkCistanchenövényekfőként illékony és nem illó olajokat tartalmaznakfeniletanoidglikozidok(PhG-k), iridoidok, lignánok, alditolok, oligoszacharidok és poliszacharidok. A farmakológiai vizsgálatok azt mutatják, hogy a PhG-k a fő aktív összetevők a vesehiány gyógyításában, az antioxidánsban és a neuroprotekcióban; A galaktitol és az oligoszacharidok a szenilis székrekedés kezelésének képviselői, míg a poliszacharidok a szervezet immunitásának javításáért felelősek. Ebben a cikkben a kémiai összetevők terén elért eredményeket ismertetjükCistanchenövényekés a hozzájuk tartozó elemzéseket áttekintjük.

Kulcsszavak:Cistanche Herba, Cistanches vegyi anyagok, összetevők elemzése, fenil-etanol-glikozidok

1. Bemutatkozás

CistancheHoffmg. Az Et Link, az Orobanchaceae család egyik nemzetsége, 22 fajjal a világon, főként az északi félteke száraz vidékein és sivatagaiban elterjedt, mint például Xinjiang, Belső-Mongólia, Ningxia autonóm régiók és Gansu, Qinghai tartományok. Kína, valamint Irán, India, Mongólia stb. [1]. Növekedési környezetük nagyon szigorú: szélsőséges száraz éghajlat, erős hőmérséklet-ingadozás, intenzív napsütés, évi 250 mm-nél kevesebb csapadék és elszegényedett talaj [2,3]. AzCistanchefajok az évelő parazita gyógynövények közé tartoznak, amelyek általában a homokkötő növények, például a Haloxylox ammodendron, a H. persicum, a Kalidium foliated és a Tamarix növények gyökereire tapadnak [3]. A kínai magasabb rendű növények taxonómiai indexe [4] szerint hat Cistanche faj található Kínában. Egy további tanulmány azonban megerősítette, hogy csak négy faj és egy változataCistanchelétezik Kínában, plCistanchedeserticolaYC Ma, C. tubulosa (Schenk) R. Wight, C. salsa (CA Mey.) G. Beck, C. salsa var. albiflflora PF Tu et ZC Lou és C. sinensis G. Beck [5].

Rou Cong Rong (HerbaCistanche), amelyet először Shen Nong kínai Materia Medica című művében rögzítettek, a szárított zamatos szárra utal.Cistanchenövények.HerbaCistanchekiváló toniknak tartották, és kiérdemelte a "sivatag ginzengje" kitüntetést. A Herba Cistanche tudományos értékei a veseelégtelenség, az impotencia, a női meddőség, a kóros leucorrhoea, a profusemetrorrhagia és az időskori székrekedés kezelésében rejlenek[6,7]. Ez volt a leggyakrabban felírt gyógyszer a veseelégtelenség ellen Kínában az egymást követő dinasztiákban. A Cistanche fajok közül csak a C. deserticola került átsorolásra a Kínai Gyógyszerkönyvben (2000-es kiadás) [8], a C. tubulosa pedig alternatívaként került a 2005-ös Kínai Gyógyszerkönyvbe hasonló kémiai összetevői, farmakológiai hatásai és viszonylagos tulajdonságai miatt. jómódú erőforrás a C. deserticolához képest [9–11]. Az utóbbi években azonban a vadon élő C. deserticola a túlzott betakarítás miatt a kihalás szélére került, és a védelemre szoruló II. osztályú növények egyikeként gyűjtötték be Kínában. A tisztviselő természeti erőforrásainak hiánya miattHerbaCistanche, e nemzetség más fajait, mint például a C. salsa és a C. Sinensis is számos területen helyettesítik [10].

Tudományos kutatás aCistanchenövényekaz 1980-as években kezdődött [12], és a kémiai elemzés azt mutatta, hogy különböző vegyületek, köztük az illóolajok,feniletanoidglikozidok(PhG-k), iridoidok, lignánok, alditolok, oligoszacharidok és poliszacharidok a fő alkotóelemeiCistanchenövények[13,14]. Farmakológiai kutatások kimutatták, hogy a kivonatok aCistanchea növények széles spektrummal rendelkeznek, mint például a veseelégtelenség és az időskori székrekedés gyógyítása, a tanulási és memorizálási képesség fejlesztése, az Alzheimer-kór kezelése, az immunitás fokozása, az öregedés elleni küzdelem és a fáradtság elleni küzdelem [14–21]. Az életszínvonal javulásával és az elöregedő társadalom közeledtével,Cistanchenövényekkitüntetett farmakológiai tevékenységük miatt egyre nagyobb figyelmet kaptak, és egyre szélesebb körben alkalmazzák.

Számos áttekintés született a kémiai összetevők és farmakológiai hatások vizsgálatárólCistanchenövények[13–15]. Ez a cikk ennek a nemzetségnek a kémiai elemzésére és a kémiai összetevők tanulmányozásában elért eredményekre összpontosít.

2. Illékony vegyületek

A TCM-ek illékony vegyületeinek általánosan használt extrakciós módszerei közé tartozik a gőzdesztilláció és a lipofil szerves oldószeres extrakció. Gőzdesztillációval a C. salsa és a C. tubulosa illóolajait extraháltuk, és GC–MS-sel 38, illetve 21 komponenst azonosítottunk (1. táblázat). A C. salsa illóolajainak fő összetevői alkánok, alkoholok, aldehidek és néhány heterociklusos vegyület, míg a palmitinsav és a linolsav a C. tubulosa összes olajának két fő alkotóeleme [22,23]. A C. deserticola illékony vegyületeit petroléterrel extraháltuk, és 25 összetevőt azonosítottunk GC–MS-sel. A három leggazdagabb összetevő a metil-14-metil-pentadekanoát (13,61 százalék), az etil-palmitát (12,39 százalék) és a 2,5,6-trimetil-oletán (7,60 százalék) [24]. Egy másik, a C. deserticola illékony komponenseiről szóló jelentés kimutatta, hogy az eugenol volt a fő komponens egyidejű desztillációs-extrakciós módszer alkalmazásakor [25]. A két cikk eltérő analitikai eredményeit [24,25] a különböző extrakciós módszerek és a GC–MS eltérő analitikai körülményei okozhatják.

Ezeken kívül Ma egy szuperkritikus flfluid extrakciós (SFE) módszerről számolt be a C. salsa nem poláris összetevőinek kinyerésére. A kivonat GC-MS analízise kimutatta, hogy az alkánok mellett oxigén- vagy nitrogéntartalmú észterek és kis molekulatömegű vegyületek is léteznek. Ez az eredmény azt mutatta, hogy poláris módosító hozzáadásával több poláris vegyületet is ki lehet vonni az SFE-vel [26].

3. Nem illékony vegyületek

A nem illékony vegyületekCistanchenövényekfőként feniletanoidokat, iridoidokat, lignánokat, alditolokat, oligoszacharidokat és poliszacharidokat tartalmaznak. Eddig több mint 100 nem illékony vegyületet izoláltakCistanche növény. Különböző típusú vegyületek eloszlásaCistanchenövények1995-ben Moriya [27,28] arról számolt be, hogy a C. salsa növényi anyagát korábban tévesen azonosították, amikor a Herba Cistanches japán gyógyászati ​​piacokról származó forrásait vizsgálta, tehát a C.-ből izolált kémiai összetevőket. A 80-as évek salsáját ebben a felülvizsgálatban a C. deserticolához rendelték át.

3.1. Fenil-etanol-glikozidok

3.1.1. PhG-k kémiai szerkezete

A PhG-ket a fő aktív összetevőknek tekintikCistanchefaj. Eddig 34 PhG(phenil-etanolglikozidok)től izoláltákCistanche növények, beleértve 22 diszacharid glikozidot, 10 triszacharid glikozidot és 2 monoszacharid glikozidot (3. táblázat). A PhG-k szerkezetének elemzésével inCistanche, a következő szerkezeti jellemzőket foglaltuk össze: a diszacharid glikozidok cukorrésze glükózból és ramnózból áll, Glc (3→1) Rha-kötéssel. A glükóz általában közvetlenül kapcsolódik az aglikonhoz, és a C4 vagy C6 pozíciójában, ahol általában egy kumaroil vagy koffeoil található. Ha a PhG-nek triszacharid-glikozidnak kell lennie, általában további glükóz vagy ramnóz jelenik meg a belső glükóz C6 pozíciójában. Azok között a PhG-k között (phenil-etanolglikozidok)tól tőlCistancheA krenatozid (34) kivételes, mivel szerkezetében egy étergyűrű található az aglikon pozíciója és a belső glükóz C-2 pozíciója között [34]. A közelmúltban először számoltak be a salidrosid (15) röntgensugaras egykristályos szerkezetéről, amely egy C. deserticolából izolált PhG [44].

PhG-k farmakológiai aktivitásának vizsgálata(phenil-etanolglikozidok)bebizonyították, hogy különféle funkcióik vannak, mint például antioxidáns, neuroprotekció, immun- és szexuális funkciók fokozása, májvédelem, sugárzás elleni védelem stb. [15–17,40,48–50]. Közülük a neuroprotekció egyre forró téma. PhG-k egyes komponensei vagy frakciói(phenil-etanolglikozidok)beszámoltak arról, hogy gátolják a neuronális sejtek különféle vegyi anyagok által kiváltott apoptózisát [51–57], és in vitro neuroprotektív hatásukat több in vivo állatmodell is igazolta [58–64]. Ezek az eredmények azt mutatják, hogy a PhGs(phenil-etanolglikozidok)vonzó jelölt lehet a neurodegeneratív betegségek, például a demencia vagy a Parkinson-kór kezelésére.

3.1.2. PhG-k elemzése

Mivel a fő aktív komponensekCistanchenövények, PhGs(phenil-etanolglikozidok)általában markerekként használják a nyers gyógyszerek vagy a megfelelő készítmények minőségének értékeléséhez.

3.1.2.1. PhG-k elemzése vékonyréteg-kromatográfiával (TLC).

Zhang először az akteozid (2), az echinakozid (11) és a cisztanozid A (3) vékonyréteg-kromatográfiás azonosítási módszerét dolgozta ki.HerbaCistanchesszilikagéllel, etil-acetát–metanol–9 százalékos ecetsav (20:3:2) alkalmazásával előhívó oldószerként és FeCl3 oldattal színező reagensként [65]. Ezt a módszert a Kínai Gyógyszerkönyv (2000) is alkalmazta az akteozid azonosítására (2) [8]. A Kínai Gyógyszerkönyvben (2005) azonban a vékonyréteg-kromatográfia adszorbensét szilikagélről poliamidra cserélték a sokkal jobb elválasztási hatás elérése érdekében, és metanol-ecetsav-víz (2:1:7) elegyet alkalmaztak. mint fejlesztő oldószer. Két jelentős PhGHerbaCistanches, az echinacoside (11) és az akteozid (2) egyidejűleg azonosítható volt [9].

3.1.2.2. PhG-k elemzése ultraibolya spektrofotometriával (UV).

Mint fentebb említettük, a cinnamoilcsoport gyakran előfordul a PhG-k szerkezetében, így a PhG-k közvetlenül UV-sugárzással vagy színező reagensekkel való reakció után kolorimetriás módszerrel határozhatók meg [66–72]. Azonban, mint tudjuk, a kolorimetriás módszer instabilitása, rossz reprodukálhatósága és hatalmas vizsgálati hibája miatt nem ésszerű megközelítés a TCM-ekben lévő kémiai összetevők pontos meghatározására. Ráadásul az UV-sugárzással kimutatott minták előfeldolgozása unalmasabb, mint a többi módszerrel. Így az UV-módszert már nem a tiszta vegyület mennyiségi meghatározására használják, hanem csak alkalmanként a teljes PhG meghatározására.

3.1.2.3. PhG-k elemzése nagy teljesítményű folyadékkromatográfiával (HPLC). Az összes analitikai módszer közül a HPLC a leggyakrabban használt PhG-k kvalitatív és mennyiségi meghatározására, a 4. táblázat pedig összefoglalja a PhG-k HPLC-vel történő elemzésére vonatkozó szakirodalomban közölt módszereket, amelyeket az alábbiakban részletezünk.

3.1.2.3.1. PhG-k elemzése nyers gyógyszerekben, biológiai mintákban és komplex termékekben HPLC-vel.

1995-ben Xu összehasonlította a C. deserticola kémiai összetevőit a helyettesítő C. salsával. A HPLC elemzés kimutatta, hogy a PhG-k kémiai összetétele(phenil-etanolglikozidok)e két faj között hasonló volt, de mennyiségük eltérő [73]. Ugyanebben az évben Moriya összehasonlította a C. deserticola (Cd), C. tubulosa (Ct) és C. salsa (Cs) kémiai komponenseit, hét PhG-t használva markerként. Az eredmények azt mutatták, hogy a cisztanozid A (3), C (5) és nyomnyi mennyiségű tubulozid A (17) megtalálható a Cd-ben és a Cs-ben, míg a Ct-ban csak a tubulozid A (17), A (3) és C cisztanozid nélkül. (5). Ezenkívül a PhG-k teljes mennyisége a Ct- és Cs-növényekben több volt, mint a Cd-növényekben [28]. Értékes, hogy ez a tanulmány összehasonlította a különbségeket aCistanchenemzetség többkomponensű elemzése révén; sajnálatos azonban, hogy ennek a hét PhG-nek a mennyiségi meghatározása(phenil-etanolglikozidok)csak egypontos külső standard módszerrel, szisztematikus módszertani validáció nélkül történt.

Tu kvalitatív elemzést készített hat PhG-ről(phenil-etanolglikozidok)és a Cistanche nemzetségbe tartozó két PhG kvantitatív elemzése Rp-HPLC-vel. Az eredmények azt mutatták, hogy a C. deserticola, C. salsa, C. salsa var. albiflflora és C. tubulosa hasonló volt, míg a C. Sinensisé különbözött a többitől [10]. Wang kidolgozott egy módszert hét PhG vizsgálatára C. deserticolában, C. tubulosaban és C. salsában HPLC/MS/MS segítségével, és az eredmények azt mutatták, hogy a hét referencia PhG kémiai összetevőinek eloszlása ​​az egyes fajokban eltérő. 74]. A glikozidos kötések fragmentációs útvonalait, az észterkötést és a PhG-k néhány érdekes idegi veszteségét tárgyaltuk ebben a cikkben [74] és egy másikban [75]. A HPLC–MS technika előnyeit azonban ezekben az elemzésekben nem mutatták ki alaposan, mivel csak a PhG standardok fragmentációs mechanizmusát vizsgálták. Ezeket a mechanizmusokat az ismeretlen PhG-vegyületek tisztázása érdekében, hogy több kémiai információt kapjunk, és más vázvegyületek fragmentációs mechanizmusának vizsgálatát figyelmen kívül hagyták.

A kvalitatív elemzés mellett számos jelentés készült a mennyiségi elemzésről isHerbaCistanches, különösen két fő PhG(phenil-etanolglikozidok)echinakozid (11) és akteozid (2). 2000-ben Zhang minőségi szabványt hozott létre a C. deserticola számára, beleértve az akteozid (2) tartalom HPLC-vel történő meghatározását, valamint öt komponens TLC-vel történő minőségi azonosítását [65]. 2003-ban kidolgoztak egy Rp-HPLC módszert az echinacoside (11) és az akteozid (2) kimutatására különböző gazdanövényeken és élőhelyeken termesztett Herba Cistanches esetében. A szerző az echinakozid (11) és az akteozid (2) meghatározásához két különböző mobil fázist használt, azaz acetonitril-víz-jégecet (13:86:1) echinakozid és metanol-víz-jégecet meghatározására. (32:67:1) az akteozid esetében. Az előzetes eredmények azt mutatták, hogy az echinakozid és az akteozid tartalmát nyilvánvalóan különböző gazdaszervezetek befolyásolták, és e két vegyület tartalma a termesztett Tamalrix L.-ben tenyésztett C. tubulosa-ban volt a legmagasabb [76].

Tekintettel arra, hogy egy üzemben két összetevőt két különböző oldószerrel meghatározni kissé unalmas, egy egyszerűbb Rp-HPLC módszert dolgoztak ki az echinacoside (11) és az akteozid (2) egyidejű kimutatására [77]. Chen ezt a módszert alkalmazta az echinacoside (11) és az akteozid (2) tartalmának meghatározására a vadon élő és tenyésztett C. tubulosa-ban [78]. Az eredmények azt mutatták, hogy az echinacoside (11) tartalma minden mintában jelentősen magasabb volt, mint az akteozid (2) tartalma, és e két aktív komponens tartalma vadon magasabb volt, mint a termesztetté [78]. Érdemes megemlíteni, hogy a jelen cikkben szereplő minta-előkészítés a több tételes keverési módszert alkalmazta, ami azt jelenti, hogy a szerző figyelembe vette a nyilvánvaló egyedi minőségi különbségeketHerbaCistanches.

A vad ótaCistanchefajok a kihalás szélén állnak, a C. deserticola és a C. tubulosa telepítését Hszincsiangban és Belső-Mongóliában, Kínában végzik. Annak érdekében, hogy elméleti útmutatást adjunk a termesztéshez, különböző termesztett mintákat elemeztünk. Cao meghatározta a PhG-k tartalmát(phenil-etanolglikozidok)tavasszal és ősszel LC-MS-sel, a különböző évszakokban gyűjtött C. deserticola minták összehasonlítása céljából. Négy PhG(phenil-etanolglikozidok), azaz az echinakozidot (11), az akteozidot (2), a cisztanozid A-t (3) és az 2 -acetil-lakteozidot (1) választottuk ki markernek, amelyek össztartalma tavasszal magasabb volt, mint ősszel [79] . Wang tanulmányt végzett a kémiai összetevők változásairól a termesztett C. tubulosa különböző növekedési időpontjaiban és különböző részein, az ujjlenyomatot és az echinakozid (11) tartalmát indexként felhasználva. Megállapította, hogy a PhG-k kémiai eloszlása(phenil-etanolglikozidok)hasonló volt a különböző minták között, de az egyes PhG-k mennyisége, különösen az echinakozidé (11), szignifikánsan különbözött a különböző mintákban. Összehasonlítás után arra a következtetésre jutott, hogy a C. tubulosa tenyészidejének három évnél hosszabbnak kell lennie, és virágzás előtt szigorúan ellenőrizni kell a betakarítási idejét. Ebben a tanulmányban a termesztett növények minősége semmivel sem jobb, mint a vadon élőké, ezért a szerző javasolta a termesztéstechnológia népszerűsítését a hatóanyag-tartalom javítása érdekében [80]. Yang a C. tubulosa szárazanyag-felhalmozódását és echinakozid (11) tartalmát vizsgálta Huabei-síkságon. Az eredmény azt mutatta, hogy a C. tubulosa szárazanyag-felhalmozódása az "S" alakú változatban volt, és az echinacoside-tartalom (11) akkor volt a legmagasabb, amikor a C. tubulosa 5 hónapig nőtt [81].

Ezeken kívül az ujjlenyomat, az elemzett minták szisztémás és átfogó jellemzőire összpontosító új technikát is alkalmaztak a minőségértékeléshez.Cistanchenövények. Ahogy fentebb említettük, Wang ujjlenyomat és egyéb indikátorok segítségével elemezte a kémiai összetevőket és azok változását a termesztett C. tubulosa-ban [80]. Xie létrehozta a C. deserticola kromatográfiás ujjlenyomatát HPLC-vel (1. ábra), és ennek segítségével értékelte a különböző élőhelyekről származó minták inherens minőségének különbségét. Végül jelentős különbségeket találtak a különböző élőhelyekről származó minták minőségében [82]. Ugyanez a jelenség még a C. deserticola minőségértékelésével kapcsolatos kutatásaink során is megfigyelhető volt, így a későbbiekben komolyabb gondot kell fordítani a Cistanche fajok minőségi konzisztenciájára.

Az ültetés kivételével a sejtes vagy kalluszos termesztés egy másik vonzó alternatíva a Herba erőforráshiányának megoldására.Cistanche. A termesztési folyamat során számos analitikai módszert dolgoztak ki a termesztési eredmény elemzésére és a termesztési feltételek optimalizálására [83–88]. A megfelelő analitikai feltételeket szintén a 4. táblázat foglalja össze.

Ami az összetett termékekben előforduló PhG-k elemzését illeti, Zhang az izoakteozid (12) mennyiségi meghatározásáról számolt be a teljes mennyiségben.Cistancheglikozid kapszulák HPLC-vel [89]. Kidolgoztunk egy módszert a Shenqiyinao kapszulákban található akteozid (2) HPLC-vel [90] történő analízisére, Lei pedig az echinakozid (11) meghatározását Congrong spiritben HPLC-vel [91]. A PhG-k elemzésének kulcspontja(phenil-etanolglikozidok)A komplex termékekben a többi komponens zavarásának elkerülése, ezért általában szükséges a minta előkezelése és a kromatográfiás körülmények optimalizálása.

3.1.2.3.2. PhG-k metabolikus elemzése HPLC-vel.

Lei 2001-ben számolt be először a PhG-k anyagcsere folyamatáról(phenil-etanolglikozidok)Beagle kutyák gyomor-bélrendszerében, és négy metabolitot, az echinakozidot (11), az akteozidot (2), az izoakteozidot (12) és az 2 -acetil-lakteozidot (1) izoláltuk a székletből preparatív HPLC-vel [96]. 2006-ban az akteozid (2) és az echinakozid (11) metabolizmusa, amelyek fő aktív összetevőiHerbaCistanchesvizsgálták, és elemezték farmakokinetikáját és biohasznosulását patkányokban [97,98,134]. Egy egyszerű szilárd fázisú extrakcióval rendelkező érzékeny LC-MS/MS módszert dolgoztunk ki az akteozid (2) kimutatására patkányplazmában és szövethomogenizátumokban, a biológiai hozzáférhetőség és az agyi eloszlás vizsgálatára szabadon mozgó patkányokon [97,134]. Jia kifejlesztett egy gyors és egyszerű HPLC-kapcsolást UV-módszerrel a patkányszérum echinakozid (11) tartalmának meghatározására [98]. Az echinakozid és az akteozid biológiai hozzáférhetősége azonban csak {{10}},83, illetve 0,12 százalék volt, ami ellentmond a PhG-k jelentős biológiai hatásainak.(phenil-etanolglikozidok)állatoknál [58–64]. A jövőben további kutatások szükségesek a PhG-k metabolikus folyamatának és felszívódási mechanizmusának tisztázására(phenil-etanolglikozidok).

3.1.2.4. PhG-k elemzése(phenil-etanolglikozidok)nagy sebességű ellenáramú kromatográfiával (HSCCC).

A HSCCC, egy hordozómentes folyadék-folyadék megoszlási kromatográfia, amely kiküszöböli a minta irreverzibilis adszorpcióját az állófázisban, és széles körben alkalmazzák természetes termékek preparatív elválasztására. A hagyományos szilárd-folyadék oszlopkromatográfiához képest nagyobb kinyerést és hatékonyságot eredményez. Lei a HSCCC-t alkalmazta akteozid (2) és 2-acetil-lakteozid (1) elválasztására és tisztítására C. salsa-ból etil-acetát–n-butanol–etanol–víz kvaterner kétfázisú oldószerrendszerrel ( 4:0.6:0.6:5, v/v). A CCC-frakciók HPLC-analízise kimutatta, hogy a két PhG(phenil-etanolglikozidok)98 százalék feletti tisztaságúak voltak [99]. Később Li kidolgozott egy módszert két oldószerrendszerrel, az egyik etil-acetát–etanol–víz (5:0.5:4,5, v/v/v), a másik pedig etil-acetát–n-butanol. –etanol-víz ({{10}}.5:0.5:0.1:1, v/v/v/v) a PhG-k izolálására(phenil-etanolglikozidok)a C. deserticolától. Öt PhG(phenil-etanolglikozidok)echinakozidot (11), cisztanozidot (3), akteozidot (2), izoakteozidot (12) és 2 -acetil-lakteozidot (1) izoláltuk és tisztítottuk, és ezen izolált vegyületek tisztasága 92,5 százalék felett volt. HPLC-vel [100] határoztuk meg. Ezek a módszerek jó referenciaként szolgáltak a PhG-k standardjainak jövőbeni izolálásához és tisztításához.

3.2. Benzil-glikozidok

A közelmúltban Lei három új benzil-glikozid, az A–C salsazid (35–37, 2. ábra) izolálásáról és szerkezetének feltárásáról számolt be C. salsa-ból, amely szintén benzil-glikozid volt, amelyet a C. salsa-ból izoláltak.Cistanchenövényekelőször [47]. Ezeknek a benzil-glikozidoknak a szerkezeti jellemzői hasonlóak az ebből a nemzetségből izolált fenil-etanolokéhoz, kivéve, hogy a benzil-alkohol az aglikonban fenetilolt helyettesített.

3.3. Iridoidok

Eddig három iridoid aglikont és tizennégy iridoid glikozidot izoláltakCistanchenövények(38–54, 5. táblázat) [102–109]. Az iridoid glikozidok szerkezeti jellemzői aCistanchenövényeka következőképpen foglaljuk össze: a glükóz az aglikon C1 pozíciójában fordul elő, H5 és H9 konfigurációval; a hidroxilezés gyakran C8 és C10 helyzetben történik; néha a 10 szénatomos hidroxilcsoportok és 1 vagy 3 szénatomos hidroxilcsoportok között dehidratáció történhet, és így epoxicsoport keletkezik.

3.4. Lignans

Egy lignán aglikont és öt lignán glikozidot izoláltak C. deserticola és C. tubulosa növényekből (55–60, 6. táblázat). Ezeknek a vegyületeknek az alapvázát a tetrahidrofurán és a benzofurán lignánok alkotják. A C. tubulosa forrása, amelyből több lignánt izoláltak, főként Pakisztánból származik, míg a Kínában gyűjtött C. tubulosa-ból kevés lignánt izoláltak. Ez tovább igazolta, hogy a Kínából és Pakisztánból származó C. tubulosa között léteznek kémiai különbségek [27,28].

3.5. Szacharidok és származékaik

3.5.1. Szacharidok és származékaik kémiai vizsgálata

A szénhidrátok a Cistanche fajok száraz tömegének nagy részét teszik ki [110]. Közülük az egyik monoszacharidról, a galaktitolról számoltak be a Herba Cistanches hashajtó hatású fő hatóanyagaként [18,19,103,104]. Míg a poliszacharidokat a szervezet immunitását fokozó, öregedésgátló és rákellenes hatású aktív összetevőknek tekintik.HerbaCistanches[20,21,111–113].

A 90-es években a poliszacharidok tanulmányozásaCistanchefajok a monoszacharidok izolálására/tisztítására és összetételének elemzésére összpontosítottak [110,112,114–116]. A poliszacharidok pontos szerkezete aCistancheA 7. táblázatban a Cistanche fajokból izolált poliszacharidok feltárt szerkezeti tulajdonságait soroltuk fel. Érdekes módon ezeket mind C. deserticolából izolálták, és más poliszacharidokat isCistanchenövényeknem tanulmányozták.

Ezeken kívül néhány oligoszacharid-származékot, például cisztanozid F-et, cisztanozid I-et, cisztanulózokat A1/A2 és cisztansinenzóz A1/A2-t is izoláltakHerbaCistanches(3. ábra), amelyek valójában a PhG-k maradványai(phenil-etanolglikozidok)a fenetilol-aglikon elvesztése után. Mivel a természetben léteznek konfigurációk a glükózban, néha ezek az oligoszacharid származékok is léteznek anomerként, és ez a jelenség a párosított NMR jelekből is megfigyelhető [37,39,40,11,45].

3.5.2. Szacharidok és származékaik elemzése

A minőség értékelése érdekébenHerba Cistanchesátfogóan a galaktitot, a fő hashajtó hatású aktív komponenst a Herba Cistanches [18,19,97,98]-ban, a közelmúltban választották ki indikátorként a gyógynövények minőségének értékelésére.HerbaCistanches, PhG-kkel kombinálva(phenil-etanolglikozidok). A különböző területekről származó C. tubulosa minőségének átfogó értékelése érdekében Cai kifejlesztett egy módszert az echinakoziddal (11) és akteoziddal (2) kapcsolt galaktitol mennyiségi meghatározására HPLC-vel. A galaktitol detektorának az ELSD-t választották, mivel gyenge terminális abszorpciója az UV-spektrumban, elválasztásához Prevail Carbohydrate ES polimer gél oszlopot használtak. Különböző élőhelyekről származó C. deserticola és C. tubulosa tételeket mértünk, és ezzel a módszerrel optimalizáltuk a friss C. tubulosa főzetdarabok feldolgozási módját is [92,93]. Eredményeik azt mutatták, hogy a leírt módszerrel a C. tubulosa főzetdarabban a galaktitol, echinakozid (11) és akteozid (2) tartalma többszöröse volt, mint az insolációval vagy hagyományos módszerrel szárítottaknak [93]. Ezenkívül Zhang valaha kifejlesztett egy vékonyréteg-kromatográfiás módszert a mannit azonosítására C. deserticolában, etil-acetát-piridin-víz (7:2:1) arányú kifejlesztő oldószerrel és 1 százalékos KMnO4 oldattal színezőanyagként [65].

Ami a poliszacharidok tartalmának meghatározását illetiCistanchefajok esetében a fenol-kénsav a leggyakrabban alkalmazott módszer, és a C. salsa poliszacharidtartalmát különböző extrakciós módszerekkel 11,61 és 13,22 százalék között határozták meg [123–125]. Ezek azonban csak néhány előzetes analitikai eredmény a kolorimetriás módszer korlátai miatt.

3.6. Alkaloidok és megfelelő elemzésük

Eddig csak két alkaloidot izoláltak belőleCistanchefaj, azaz a betain (65) és az N,N-dimetil-glicin-metil-észter (66) (3. ábra) [126]. A betain (65) a növényekben általánosan elterjedt alkaloid, ezért minőségi és mennyiségi elemzéséről több jelentés is született. Zhang összehasonlította a betain tartalom változását C. deserticolában a feldolgozás előtt és után, TLC azonosítással és kolorimetriás módszerrel kombinálva [127]. Ezt a vékonyréteg-kromatográfiás módszert a Chinese Pharmacopoeia 2000 [8] is összegyűjtötte, míg ezt a kolorimetriás kvantifikációs módszert később mások is átvették az extrakciós technológia optimalizálására.HerbaCistanches[128,129]. 2007-ben Gong beszámolt egy HPLC-módszerről a betain kimutatására Cistanche növényekben, ELSD-detektorral összekapcsolva, és a betain csak a C. deserticolában létezik, a C. tubulosa-ban azonban nem. Ezért a szerző azt javasolta, hogy a betaint markerként kell használni a kétféle Cistanche növény megkülönböztetésére [101]. Tekintettel azonban arra, hogy fajonként csak kettő mintatételből áll, és a C. tubulosa (Yunnan) egyik élőhelye bizonytalan, javasoltuk ennek a következtetésnek a további bizonyítását. Ezenkívül a Herba Cistanche betainjának vékonyréteg-kromatográfiás azonosítását nem specifikus tulajdonságai miatt 2005 óta eltávolították a Kínai Gyógyszerkönyvből. Így nem volt ésszerű a Herba Cistache extrakciós technológiájának optimalizálása érdekében egyedüli indikátorként használni [129].

3.7. Egyéb vegyületek

A Cistanche növényekben kis mennyiségben más vegyületek is előfordulnak, mint például fenolglikozidok, monoterpenoidok, szterolok vagy glikozidjaik, zsírsavak, aminosavak és egyes nyomelemek stb. [13,41,42,103,105,130–133].

4. Konklúziók

Ebben az áttekintésben a kémiai összetevőkCistanchefajokat és elemzési módszereiket ismertették. A létező elemzések közül a legtöbb a PhG-ekre összpontosult(phenil-etanolglikozidok), és a HPLC volt a legszélesebb körben alkalmazott módszer nagy hatékonysága és pontossága miatt. A korábbi kutatási munkák elemzése, valamint a Cistanche fajokról folytatott több éves tanulmányaink eredményeként néhány fő probléma merült fel aCistanchenövényeka következőképpen foglalták össze: az első a fajforrás vegyes használata: a C. deserticola és a C. tubulosa két hivatalos faj, amelyet a Kínai Gyógyszerkönyv gyűjtött. Ugyanakkor két másik Cistanche fajt, a C. salsa-t és a C. Sinensis-t is használják egyes területeken az erőforrások hiánya miatt. Bár több publikáció is megjelent a különböző fajok összehasonlításáról [6–8], ezek nem elég meggyőzőek a korlátozott mintatételek és markerek miatt. Ezért szükséges egy olyan átfogó módszer kidolgozása, mint például az ujjlenyomat-vételi technológia a különböző forrásokból származó nyers drogok összehasonlító elemzésére. A második az, hogy a Herba Cistanches minőségi inkonzisztenciájára nem fordítottak különös figyelmet. A Cistanche fajok parazita gyógynövények. A minőségüket számos tényező befolyásolja, például az éghajlat, az élőhelyek, a gazdák, a betakarítási idő, a feldolgozási mód és ugyanazon növény különböző részei. Vizsgálataink kimutatták, hogy a Cistanche fajok minősége nem stabil, különösen a vadon élő C. deserticoláé [80,82,92]. Ezt a problémát azonban néhány korábbi elemzés figyelmen kívül hagyta, és csak egy-két mintát használtak [74,76], ami pontatlan következtetésekhez vezethet. Tehát a jövőben sokkal több mintát kell gyűjteni és elemezni, hogy objektívebb következtetést lehessen levonni. A harmadik az, hogy a jelen elemzések főként két fő PhG-re koncentrálnak(phenil-etanolglikozidok), echinakozid (11) és akteozid (2), de mint tudjuk, a TCM farmakológiai hatása többkomponensű vagy különböző típusú összetevők együttműködése. Így a TCM minőségellenőrzése szempontjából értelmesebb az aktív többkomponensek egyidejű meghatározása. Mindeddig azonban nem készült kvantitatív elemzés háromnál több PhG-re vonatkozóanHerbaCistanches, még a benzil-glikozidok, iridoidok és lignánok elemzéséről sem érkezett jelentés. Ezután a jövőbeli kutatásoknak meg kell erősíteniük analitikai és farmakológiai vizsgálataikat. Összességében a jelenlegi, a Cistanche fajok elemzésével kapcsolatos kutatások még mindig alacsonyabb szintűek. A Herba Cistanches fontos tonizáló gyógyszerek, de valójában minőségüket csak két PhG képviselője nem tudta hatékonyan ellenőrizni.(phenil-etanolglikozidok)[9]. A többkomponensű meghatározás és az ujjlenyomat kombinációját a TCM-ek minőségellenőrzésének hatékony megközelítésének tekintették. A jövőben ezen a két területen tovább kell javítani a Cistanche fajok kutatási színvonalát. Olyan módszer kidolgozása, amely egyszerre képes a PhG-k, iridoidok és más aktív összetevők kvalitatív és kvantitatív elemzésére.HerbaCistanchesértelmes kutatási irány lesz.

Cistanchetubulosaszámos hatása van, kattintson ide, ha többet szeretne megtudni

Köszönetnyilvánítás

Ezt a munkát a Kínai Nemzeti Természettudományi Alapítvány (Nr. 30472070), valamint a New-Century Talent Program, a Kínai Oktatási Minisztérium (Nr. 985-2-102-113) támogatta, a szerzők pedig köszönetet mondanak Xiaoming Liu, Zhihong Song és LiLei a Pekingi Egyetemről szakértő technikai segítségükért.

Feladó: ' A kémiai összetevők elemzése inCistancheYong Jiang, Peng-Fei Tu

---Journal of Chromatography A, 1216 (2009) 1970–1979