Irritációgátló stratégia a retinol ellen a koreai populáció genetikai elemzése alapján: genetikailag irányított felülről-lefelé megközelítés Ⅱ

3.3. A formula irritáció elleni hatékonysága; Emberi tesztek

Alapjánirritációt gátló anyagoka genetikai elemzéssel irányított in vitro kísérletből igazolva elkészítettük az AF (Irritációgátló formula) retinol által kiváltott irritáció ellen, amely glükózamin 0,1 százalék, trehalóz 2 százalék, ektoin 2 százalék, szukralfát 0,1 százalék, omega-9 1 százalék és {{8 }}t-butil-ciklohexanol 0,7 százalék retinollal. (aktív koncentrációként standardizálva) Először egy pilot vizsgálatot végeztünk hét személlyel, hogy kvantitatívan ellenőrizzük az AF hatékonyságát. Az egyes irritációtípusok irritációs pontszámának összeadásakor a tesztidőszak során kiderült, hogy a kontroll retinol krémhez képest az AF hatékonyan csökkentette a retinol által kiváltott irritációt, különösen a hámlást (66,67 százalékos csökkenés), az égést (68,42 százalék). ), és a csípés (68,97 százalék), és ez a tünetek enyhülése statisztikailag szignifikáns volt (ábra4a) Érdekes módon a kísérleti alanyok azt állították, hogy nem tapasztaltak kiszáradást a tesztidőszak alatt, bár 10 nap után jelentős hámláson és kiszáradáson mentek keresztül, még 2 hét alatt is. Ez a megfigyelés összhangban van egy korábbi vizsgálattal, amely azt állította, hogy a retinsav 9 napos kezelés után a bőr kiszáradását okozza, és 18 napig fennmarad, mivel a stratum corneum cserearánya csökkent (15,8 nap) a placebóhoz képest (18 nap).56]

4. ábra. Az AF irritáló hatását ábrázoló vázlatok és diagramok. A panel (hirdetés) a kisméretű kísérleti vizsgálat eredményeit jelzi (n=7). A bal oldali sematikus diagram a TEWL és a bőrpír mérésére kiértékelt arc vizsgálati ütemtervét és eljárását, valamint a vizsgálati terület (piros pontozott) eredményeit mutatja. a) A vizsgálati alany által a vizsgálati időszak alatt tapasztalt irritációs pontszámok átlaga. (b) Az irritáció általános pontszáma minden időpontban. A túlzott irritációs pontszám az egyének által tapasztalt irritáció összes típusának pontszámainak összegére utal. (C) Az egyének teljes irritációs pontszáma. Az egyén által a tesztidőszak során tapasztalt irritáció egyes típusainak összpontszámát átlagoltuk. Összesített pontszámok " minden időpontban összeadták. (d) Bőrvörösség és transepidermális vízveszteség (IEWL ) kromaméterrel és tewameteivel mérve. Az egyénekre vonatkozó megnövekedett arányokat (százalék) átlagoltuk, (e) Retinol által kiváltott irritáció előfordulási aránya. A kísérleti alanyoknak egy dichotóm kérdést tettek fel, hogy „a retinol alapú krém irritáló-e vagy sem” saját alanyuk öt kritériuma alapján. A statisztikai szignifikancia vizsgálatára khi-négyzet tesztet végeztünk. (p-érték: 2,17906E-10): * p-érték < 0,05** p-érték< 0.001, AF,Irritációgátló formula retinol által kiváltott irritáció ellen; hibasávok jelennek meg.

Szerezzen be irritációgátló anyagotCistanche kozmetikai anyag

Ezután az általános irritációs pontszámot vizsgáltuk az idő függvényében (4b. ábra). Amint az várható volt, az irritáció a retinol krém felvitele után néhány percen belül megfigyelhető volt, és néhány óra múlva csökkent. Azt találtuk, hogy az AF hatékonyan csökkentette az irritációt, különösen a krém harmadik felvitele után. Míg az irritáció mértéke a retinol krém alkalmazásának abbahagyása után is nőtt, az AF irritációt gátló hatása megmaradt, és enyhítette a retinol által kiváltott irritációt a beavatkozás után. Összességében az AF 58,3 százalékkal csökkentette az egyének teljes irritációs pontszámát a tesztidőszak alatt (4c. ábra).

A 7. napon megmértük a TEWL-t és a vörösséget (4d. ábra). Az AF csökkentette mind a TEWL növekedését, mind a retinol által kiváltott vörösséget. A vörösség (a*) átlagos növekedése 8,31 százalék volt az AF-nél és 8,31 százalék a kontrollnál. A bőrpír, a bőr értágulatának klinikai jellemzője, a gyulladás indikátora [57]. Korábbi tanulmányok kimutatták, hogy a retinoidok bőrgyulladást váltanak ki az MCP-1 és az IL-8 fibroblasztokból történő felszabadulása által. Figyelemre méltó, hogy amint az előző részben bemutattuk, a retinol aktiválja a makrofágokat (az IL-4R túlzott expressziója), ami a bőr értágulatának fő mozgatórugója [9].

A TEWL-elemzésben az AF-en alapuló retinol krém 19,07 százalékkal növelte a TEWL-t a kísérleti alanyok esetében, míg a kontroll retinol krém 42,54 százalékkal növelte a TEWL-t. Ez a klinikai megfigyelés hasonló egy korábbi jelentéshez, amely azt jelzi, hogy a retinoidok átmenetileg indukálják a TEWL növekedését in vivo egerekben és emberekben [42,58]. Bár a statisztikai szignifikancia alacsony volt, az AF enyhítő hatása a TEWL növekedésére és a bőrpírra várható.

Megmértük a nyomás-fájdalom küszöböt is egy 1 mm sugarú hegyű algométerrel (S2 ábra, lásd a kiegészítő anyagokat). A pszoriázisos betegek érzékeny bőréről azt számolták be, hogy a normál egyénekhez képest alacsonyabb nyomás-fájdalomküszöböt mutattak [59]. A retinol krémmel végzett kezelés előtt és után az egyének küszöbértékeinek különbségeit átlagoltuk. Megfigyelték, hogy a retinol csökkentette a nyomás-fájdalomküszöböt (PPT), az AF pedig szignifikánsan növelte a csökkent PPT-t a kontrollhoz képest. Úgy tűnik, hogy az AF gyulladáscsökkentő és antagonista hatása a TRPV1-re. Korábbi tanulmányok kimutatták, hogy a neurogén gyulladás nagymértékben összefügg a bőr nociceptorainak mechanikai szenzibilizációjával [60], és a működőképes TRPV1-et nem tartalmazó egerek gyengítették a mechanikai hiperalgéziát a káros mechanikai ingerekre [61]. Egy humán klinikai vizsgálat azt is kimutatta, hogy a TRPV1 antagonista (V116517) szignifikánsan növelte a bőr PPT-jét különböző körülmények között [62].

Az AF irritációt gátló hatásának igazolására a független csoportban az összes embert csoportosítottuk, amely 44 férfiból és 47 nőből állt, életkoruk 27 és 50 év között volt. A kísérleti alanyoknak egy dichotóm kérdést tettek fel, hogy „a retinol alapú krém irritáló-e vagy sem”, saját szubjektív kritériumaik alapján. Ezt a válaszarányt összehasonlították az első nagyszabású klinikai értékelésével, amelyben 173 olyan személy vett részt, akik normál retinol krémet használtak az AF irritációt gátló hatásának megállapítása érdekében. Kiszámoltuk és összehasonlítottuk a retinol által kiváltott irritáció előfordulási arányát (4e. ábra).

A normál retinol krémet használó csoportban 64,43 százalékos előfordulási arányt figyeltek meg, míg az AF-retinol krémet használó csoportban csak 21,35 százalékos előfordulási arányt figyeltek meg, ami 65,80 százalékos csökkenést jelez.

3.4. Poligén kockázat-előrejelző modell a retinol által kiváltott irritációhoz

Mivel az AF-ben az irritációt gátló szereket a kapcsolódó génekből szűrtük, poligén kockázat-előrejelzési modellt hoztunk létre a többszörösen előforduló retinol által kiváltott irritáció kumulatív genetikai hatásának értékelésére. A |D'| és r2 értékek (együtthatók annak mértékére, hogy egy SNP allélja öröklődik vagy korrelál egy másik SNP alléljával) az SNP-k között.

Then, the risk scores of all 159 samples were visualized. The test subjects of the second large-scale clinical test were arbitrarily categorized into three groups: high (>75, 31 fő, közepes (65-75, 33 fő) és alacsony kockázatú pontszám (<65, 27 individuals) (Figure S3, see Supplementary Materials). As characteristics of retinol-induced irritation in each group, the high-risk score group exhibited dryness and desquamation after the last third treatment of retinol compared to the other groups (Figure S4, see Supplementary Materials). This result supports our hypothesis that skin barrier disruption with increased TEWL plays an important role in retinoid-induced irritation, as SLS exhibited similar clinical features and anatomical changes [63].

Amint az 5a. ábrán látható, a magas kockázati pontszámmal rendelkező csoport a többi csoport közül a legtöbb irritációt tapasztalt résztvevőből állt. A "pruritus" volt a legdominánsabb irritációtípus a magas kockázatú csoportban a többi csoporthoz képest. A magas kockázatú csoport résztvevői a retinol kezelés első napján tapasztaltak leggyakrabban viszketést, és a viszketés mértéke az idő múlásával fokozatosan csökkent. Úgy tűnt, hogy a magas kockázatú pontszámú csoport allergiaszerű tüneteket tapasztal a hisztamin és a hízósejtek által közvetített rendszerekkel kapcsolatban (S4 ábra, lásd a kiegészítő anyagokat).

Figure 5. Bar plots illustrating polygenic risk score model and validation. 3300 IU retinol cream with AF to 91 individuals lest subjects were categorized into three groups: high-risk score (>75, 31 fő, közepes kockázatú pontszám (65-75, 33 fő) és alacsony kockázatú pontszám (<65,27 individuals) (a) irritation score of each type of irritation for three risk score groups. The scores for types of irritation of individuals during the test period were summed and averaged by risk score groups. (b) The total score during the test period. (c) Comparison of the occurrence rate of irritation in each risk-score group. The dichotomous question of whether retinol cream is irritant: Y/N was asked to test subjects. In the first clinical evaluation, retinol without AF was given. Retinol with AF was given in the second clinical evaluation.

A tesztidőszakban elért összpontszám 6,370, illetve 10,161 volt az alacsony, közepes és magas kockázatú csoportoknál (5b. ábra). Az AF hatékonyságát a poligén kockázati pontszám modell alapján vizsgáltuk.

Az eredmények azt mutatták, hogy az AF enyhítette a retinol által kiváltott irritációt, és a hatékonyság megjósolható a poligén kockázati pontszám modell segítségével (5c. ábra).

Következésképpen ezek a kísérleti eredmények és megfigyelések nem csak az AF irritációt gátló hatását mutatják be, hanem arra is utalnak, hogy a retinol megfelelő dózisának javaslata az egyéni genetikai információk alapján a retinol által kiváltott irritációra való érzékenység becslésével alkalmazható, amely végül genetikailag kínál legjobban optimalizált használati protokoll a magasabb együttműködési képességű betegek számára.

3.5. További megfontolások; Akut vs. krónikus irritáció?

Mint korábban említettük, a retinolra érzékeny egyéneknél allergiaszerű reakciókat figyeltek meg, amelyek magukban foglalják a gyors égő és szúró érzést, viszketést, valamint gyors diffúz ödémát és bőrkiütést. Ezeket a néhány percen, néha akár néhány másodpercen belül fellépő reakciókat nem lehet egyértelműen megmagyarázni korábbi retinoid-mechanikai vizsgálatokkal, amelyek főként a keratinociták vagy fibroblasztok citokintermelésére [9], vagy arra az immunrendszerre összpontosítottak, amelyben a T-sejtek, Főleg a B-sejtek, vagy a komplementer aktiváció vesz részt. Bár tagadhatatlan, hogy az irritáció fő oka a bőrgát károsodása, ez nem magyarázza meg teljesen az azonnal fellépő akut irritációt.

Az első klinikai értékelés során azt figyelték meg, hogy a kísérleti alanyok körülbelül 5 százaléka tapasztalt heves és súlyos fent említett reakciókat, és kiesett a tesztből. A retinoidok fajtól, nemtől vagy életkortól függő intoleranciájával kapcsolatban azonban nem végeztek részletes vizsgálatokat, és arról számoltak be, hogy az ázsiai lakosság hajlamosabb ezekre a reakciókra, ami szükségessé teszi a gyorsan kiváltott irritáció figyelembevételét. a retinoid alapú termékek továbbfejlesztése. Humán teszteredményeink arra utalnak, hogy a retinol által kiváltott irritációban neurogén gyulladás vagy hasonló azonnali mechanizmus is szerepet játszik. Az égő és szúró érzést dominánsan megfigyelték minden retinollal történő kezelésnél néhány percen belül mindhárom csoportban, és idővel elnyomták.

Íme néhány szempont, amelyeket érdemes megfontolni.

1. Amint azt korábban közöltük, a retinol átalakulhat retinaldehiddé (retinál) és retinsavvá, hogy rendelkezzen azzal a biológiai hozzáférhetőséggel, amelynél a RAR vagy RXR kötődés részt vesz.

2. A bőrben a retinoidok homeosztázisát azonban nagyon szigorúan szabályozzák [64], és paradox módon kísérletileg nem bizonyították, hogy a retinol in vitro és ex vivo retinsavvá alakulna [65,66].

3. Retinol kezelés alatt a fibroblasztok vagy keratinociták néhány percen belül aktiválják a környező bőr immunrendszerét azáltal, hogy a RAR és a retinol kölcsönhatása révén IL-1 vagy IL-6 termelődik, amihez a retinol át kell alakítani.

Ezen megfontolások alapján ésszerűbbnek tűnik, hogy a néhány percen belüli akut irritációt a hisztamin-hízósejt-rendszer vagy azonnali neurogén gyulladás váltja ki, amely ezt követően kiterjedt és átható gyulladást vált ki, ami hosszú távú irritációhoz vezet.

4. Konklúziók