Az Anastatica Hierochuntica etanolos és vizes kivonatainak antioxidáns aktivitása, fenolos profilja és nefroprotektív hatása a CCl{0}}indukált nefrotoxicitás ellen patkányokban

Kérlek keress feloscar.xiao@wecistanche.comtöbbért

Absztrakt:A Kaff-e-Maryam-ot (Anastatica hierochuntica L.) széles körben használják számos egészségügyi probléma kezelésére, különösen a szülés megkönnyítésére és a reproduktív rendszerrel kapcsolatos rendellenességek enyhítésére. Ennek a vizsgálatnak az volt a célja, hogy értékelje az A. hierophant etanolos (KEE) és vizes (KAE) extrakciós CCl4- által kiváltott oxidatív stressz és nefrotoxicitás hatását patkányokban a vesefunkciók és a biokémiai markerek segítségével.antioxidánsállapota valamint a veseszövet kórszövettani vizsgálatai.A. A hierophantic összesen 67,49 mg GAE g−1-et tartalmazottfenolos vegyületek(TPC), 3,51 µg g-1 az összes karotinoidból (TC), illetve 49,78 és 17,45 mg QE g-1 az összes flavonoidból (TF), illetve az összes flflavonolból (TFL). 128,71 µmol TE g-1 DPPH-RSA-t és 141,92 µmol ABTS-RSA TE g-1-et eredményezett. Az A. hierophantic kiváló antioxidáns aktivitást mutatott a linolsav gyökök gátlásával és az oxidációs fémek kelátképzésével. A HPLC analízis 9-et és 21-et eredményezettfenolsavakés 6. és 2flavonoidokKEE-ben és KAE-ben a szinapinsav, illetve a sziringinsav túlsúlyával. A vit intramuszkuláris injekciója. Az E plus Se és a KEE, KAE és KEE plus KAE orális adagolása 250 mg kg-1 testtömeg mellett szignifikánsan helyreállította a szérum kreatinin-, karbamid-, K-, összfehérje- és albuminszintjét. Ezenkívül csökkentették a malondialdehid (MOD), helyreállították a redukált glutation (GSH) és a szuperoxid-diszmutáz (SOD) szintjét. A KEE, KAE és a KEE plusz KAE megvédte a veséket a CCl4-nefrotoxicitástól, mivel főként az indukált oxidatív stresszt csillapították. A teljes nephroprotection körülbelül 83,27 százalék, 97,62 százalék és 78,85 százalék volt a KEE, a KAE és a KEE plusz KAE esetében. A vit.E plusz szelén és az A. hierofáns kivonat egyaránt gyengítette a kórszövettani változást CCl{10}}kezelt patkányokban. Összefoglalva, az A. hierophantic, különösen a KAE, potenciálisan jobban képes helyreállítani az oxidatív stabilitást és javítani a veseműködést CCl4 akut vesekárosodás után, mint a KEE. Ezért az A. hierophantic potenciálisan hasznos terápiás szer lehet a gyógyszer által kiváltott nefrotoxicitás kezelésében.

Kulcsszavak:Kaff-e-Maryam; polifenolok; bioaktivitás; másodlagos metabolitok; vese markerek;antioxidáns enzimek; veseműködési zavar

További információért kattintson ide

Bevezetés

A vesebetegség a 9. vezető halálok, a becslések szerint 7-ből több mint 1, azaz az amerikai felnőttek 15 százaléka vagy 37 millió ember szenved krónikus vesebetegségben (CKD) [1]. Figyelemre méltó, hogy a CKD leggyakoribb oka 2015-ben a diabetes mellitus, amelyet a magas vérnyomás és a glomerulonephritis követ [2]. A krónikus veseelégtelenség egyéb okai közé tartozik az idiopátiás (a vese ultrahangvizsgálata során gyakran kis vesékkel társul) [3]. Korábban a CCl4-et fémek zsírtalanítására, vegytisztításra, szövetfoltozásra, tűzoltó folyadékokra és szemcsék füstölésére használták [4]. Súlyos rendellenességeket okoz a májban, a tüdőben és a herékben, valamint a vérben azáltal, hogy aktív szabad gyököket termel [5]. Ogeturk et al. [6], ennek az oldószernek való kitettség akut és krónikus vesekárosodást okoz. A szabad gyökök által kiváltott lipid-peroxidációról úgy tartják, hogy a sejtmembrán károsodásának egyik elsődleges oka, amely számos kóros állapothoz vezet [7]. A reaktív gyökök képződése szerepet játszik a CCl4-indukált nefrotoxicitásban, amely részt vesz a lipidperoxidációban és a diszfunkcionális fehérjék felhalmozódásában, ami vesekárosodáshoz vezet [8]. A gyógynövények elképesztő, hagyományos felhasználási módjai az elmúlt években elterjedtek, és számos vizsgálat igazolta terápiás szerepüket számos betegség ellen [9–12]. A Kaff-e-Maryam (Anastatica hierochuntica) egy sivatagi gyógynövény, amely a Brassicaceae családjába tartozik. A világ különböző régióiban nő, különösen az arab országokban (pl. Szaúd-Arábia, Egyiptom, Omán, Líbia, Irak, az Egyesült Arab Emírségek, Kuvait), valamint néhány ázsiai, európai és afrikai országban. Úgy gondolják, hogy az A. hierophantic kiváló egészségügyi potenciállal rendelkezik, és előnyösen különféle egészségügyi állapotok esetén fogyasztják [13]. Főleg a szülés folyamatának megkönnyítésére, valamint a reproduktív rendszerrel összefüggő rendellenességek és anyagcsere-rendellenességek, elsősorban a diabetes mellitus kezelésére használják [14]. Fájdalomcsillapítóként és epilepszia, gyomor-bélrendszeri betegségek, ízületi gyulladás, bronchiális asztma, szájfekély, malária és mentális depresszió kezelésére használják [15–17]. Az A. hierophantic jelentős mennyiségű ásványi anyagot, például Mg-t, Ca-t, Mn-t, Fe-t, Cu-t és Zn-t tartalmaz, amelyek hasonlóak vagy nagyobbak, mint sok gyógynövényé, amelyek kelátképző tulajdonságokat adhatnak a fémeknek [18]. Yoshikawa et al. [19] arra a következtetésre jutott, hogy a flavanonok, mint például az Anastasia A és B jelenléte erős hepatoprotektív hatást mutat azáltal, hogy gátolja a D-galaktózamin által kiváltott citotoxicitást az elsődleges tenyésztett egér hepatocitákban. A májban a Kupffer-sejtek reaktív oxigénfajták (ROS) és citokinek, például tumornekrózis faktor és interleukin{30}} termelése hozzájárul a hepatociták pusztulásához D-galaktózamin hepatotoxicitás esetén [20]. Az A. hierophhantic komponensek antioxidáns és gyulladásgátló tulajdonságai segíthetnek a D-galaktózamin által kiváltott hepatotoxicitás csökkentésében [21]. Az A. hierophantic megengedheti magának a kivonatot a CCl4-hepatotoxicitás elleni védelemtől függően [22]. Azonban annak ellenére, hogy az irodalom ígéretes lehetőségeket mutat az A. hierophantic használatával kapcsolatban, az A. hierophantic etanolos (KEE) és vizes (KAE) kivonatainak nefroprotektív potenciálját gondosan meg kell vizsgálni. Ezen túlmenően a szakirodalmi áttekintés elsősorban az A. hierophantic májvédő hatékonyságára hívta fel a figyelmet, de a nephroprotektív potenciált ez idáig nem vizsgálták, ez motiválja ezt a munkát. Ezért a jelen tanulmány célja az antioxidatív védekező enzimek változásainak megfigyelése, a vesemikroszkópos eltérések kimutatása patkányoknál a CCl4 beadása után, valamint az A. hierophantic kivonatok lehetséges védőhatásainak vizsgálata a CCl4-indukált vesekárosodás ellen.

Cistanche a szexualitás javításáért

2. Anyagok és módszerek

2.1. Minta-előkészítés A Kaff-e-Maryam (A. hierophantic L.) növény mintáját a szaúd-arábiai Qassim régió Buraydah városának natív piacáról vásároltuk. A növényi anyagot a szaúd-arábiai Qassim Egyetem Mezőgazdasági és Állatorvosi Főiskola Növénytermesztési és Védelmi Tanszéke hitelesítette. A mintát tiszta csapvízzel mostuk, hogy eltávolítsuk a homokot és a szennyeződést a levelekről, majd a levegőn szárított növényi anyagot (28 ± 1 ◦ C-on 48 órán át) mechanikusan porítottuk, és átlátszatlan polietilén zacskókban tartottuk 4 ± 1 ◦ C-on. felhasználásig. 2.2. Etanolos és vizes kivonatok készítése Körülbelül 200 g szárított A. hierophantic-ot extraháltunk 3{{1{{106}}4}}0 ml 7{{150}} százalékos etanol Soxhlet-extraktorban az etanolos extrakció (KEE) elkészítéséhez. Az extraktumot rotációs bepárlóban 40 °C-on bepároljuk a maradék oldószer elpárologtatására, majd nitrogénáram alatt szárazra pároljuk. A vizes extrakciót (KAE) Asuzu [23] leírása szerint végeztük, kisebb módosításokkal. 200 gramm szárított növényi anyagot 500 ml forró steril desztillált vízhez adtunk. Az elegyet ezután jól összerázzuk, és 1 órán át állni hagyjuk. Ezután egy visszafolyató hűtőt csatlakoztattunk a lombikhoz, majd 10 percig enyhe forrásig melegítettük, lehűtöttük, jól összeráztuk, és Whatman No. 1 szűrőpapíron szűrtük. A szűrletet rotációs bepárlóban bepároljuk, majd nitrogénáramban szárazra pároljuk. Az alkoholos és vizes kivonatokat (250 mg ml-1 ) frissen desztillált vízben formulázzuk, hogy szájon át alkalmazzuk. 2.3. Összes fenoltartalom (TPC) Az A. hierophantic TPC-tartalmát Bettaieb és munkatársai által adaptált módszerrel határoztuk meg. [24]. Az eredményeket összevetettük egy ábrázolt galluszsav (GA) standard görbével, amely 50–500 mg ml-1 (R2=0.99) tartományban volt, és a TPC-t galluszsav-ekvivalens mg-ban (GAE) számítottuk ki. ) egy grammonként A. hierophantic (mg GAE g−1 ). 2.4. Összes karotinoid (TC), összes flavonoid (TF) és összes flavonol (TFL) Al-Qabba et al. [10], 5 g A. hierophanticot többször extraháltunk aceton és petroléter (1:1, v/v) eleggyel. Az összes karotinoid (TC) tartalmát spektrofotometriásan határoztuk meg 451 nm-en. A TC-t mg g-1 DW-ben fejeztük ki. Az A. hierophantic TF-tartalmát Mohdaly és munkatársai által leírt protokoll szerint határoztuk meg. [25]. A TF-tartalmat mg kvercetin-egyenértékben (QE) számítottuk 100 g-1 dw-re. Ugyanebben az összefüggésben a TFL-tartalom vizsgálatára is sor került [26]. Feljegyeztük a 440 nm-en mért abszorbanciát, és a TFL-t mg kvercetin-ekvivalensben (QE) számítottuk ki 100 g-1 DW-re. 2.5. Antioxidáns kapacitás meghatározása DPPH gyökfogó vizsgálat: Az RSA-t spektrofotometriásan tesztelték a DPPH lila színű oldat fehérítésétől függően Lu és munkatársai által módosított technikával. [27]. A gyökellenes kapacitást µmol Trolox-ekvivalens (TE) per gramm A. hierophantic (µmoL TE g-1 ) értékben adtuk meg. ABTS gyökfogó aktivitás: Az A. hierophantic RSA-ját az ABTS gyökök ellen Lu et al. adaptált módszerével teszteltük. [27]. Az eredményeket µmoL TE g-1-ben fejeztük ki. -karotin-linolsavas fehérítési vizsgálat: Az A. hierophantic antioxidáns százalékos arányát a -karotin fehérítés szempontjából határozták meg a butilezett hidroxi-anizollal (BHA) összehasonlítva, adaptált spektrofotometriás protokollt alkalmazva, amelyet Koleva et al. [28]; az eredményeket a BHA-hoz kapcsolódó százalékban adtuk meg. Az A. hierophantic kelátképző hatása vasionokra: Az A. hierophantic kelátképző aktivitását Zhao et al. [29]. Megmértük a ferrozin-Fe2 plusz fémkelátképző hatásként jelentkező komplex képződésének gátlási százalékát, és mg ml-1-ben adtuk meg, ha etilén-diamin-tetraecetsavat (EDTA) használtunk pozitív kontrollként. 2.6. Az A. hierofhantic vizes és etanolos kivonatok polifenolos vegyületfrakcionálása A polifenolok meghatározását etanolos és vizes kivonatokból egy HP1100 (Agilent Technologies, Palo Alto, CA, USA) HPLC rendszerrel végeztük, amely automatikus mintavevővel, kvaterner szivattyúval, és detektor (Hewlett Packard 1050) oszlopot (Altima C18 150 × 4,6 mm, 5 µm) használva 5 mm-es Altima C18 védőoszloppal (Alltech, Nettetal, Németország) Goupy és munkatársai szerint. [30]. Az alkalmazott oldószerrendszer az A (2,5%-os ecetsav), a B (8%-os ecetsav) és a C (acetonitril) gradiens volt. Az oldószer társsebessége 1 ml min-1 volt, és az elválasztást 35 ◦C-on végeztük. Az injektált térfogat 10 µl volt. A fenolos vegyületeket külső standard kalibrációval vizsgáltuk, és a flavan{85}}olok esetében ekvivalens (plusz)-katekin, a poláris aromás vegyületek ekvivalens kumarin mennyiségében fejeztük ki. Ugyanabból a mintából öt fenolos extrakciónál 8 százalékos variabilitást határoztunk meg. Minden érték a párhuzamos injekciók átlaga volt. A polifenolokat és származékaikat 280 és 320 nm-en, míg a flavonoidokat 360 nm-en azonosítottuk és mennyiségileg határoztuk meg. 2.7. Kísérleti tervezés Minden kísérletet jóváhagyott a QU (15-4-2017 számú) intézményi állatetikai bizottsága (IAEC), amelyet az állatokon végzett kísérletek ellenőrzési és felügyeleti bizottsága (CPCSEA) szabályoz. a Nemzeti Bioetikai Bizottság (NCBE), az élőlények kutatásának etikai törvényének végrehajtási előírásai. Összesen 36 hím albínó patkányt használtunk a jelenlegi vizsgálatban, és 6-6 állatból álló csoportra osztották őket, és a következőképpen kezeltük: Az I. csoport (kontroll) intraperitoneális injekciót (ip) kapott olívaolajból (1,0 ml kg-1 naponta kétszer). hét) és 0,5 ml desztillált vizet szájon át/naponta 21 egymást követő napon keresztül. A II. csoport azonos térfogatú CCl4 és olívaolaj friss keverékéből (hetente kétszer 1,0 ml kg-1 dózisban) és 0,5 ml desztillált vízből álló friss keveréket kapott szájon át/nap Al-Qabba és munkatársai szerint. [10] kisebb módosításokkal. A III. csoport (referenciacsoport) 50 mg kg-1 vit intramuszkuláris injekciót (im) kapott. E plus Se (Selepherol, Vetoquinol Co., Magny-Vernois, Franciaország) hetente kétszer Asuka és munkatársai szerint. [31] és El-Desoky et al. [32] és 0,5 ml desztillált víz szájon át/naponta. A IV. csoport tesztként szolgált, és hetente kétszer 250 mg kg-1 KEE-t kapott orálisan/napi CCl4-mal együtt. Az V. csoport hetente kétszer 250 mg kg-1 KAE-t kapott orálisan/napi CCl4 mellett. A VI. csoport hetente kétszer 250 mg kg-1 KEE plusz KAE-t (1:1) kapott orálisan/naponta CCl4 mellett. Huszonnégy órával az utolsó kezelés után (21. nap) a patkányokat elaltattuk a keverékkel (alkohol:kloroform:éter, 1:2:3). A szívpunkcióból származó vérmintákat minden állatról gyűjtöttük, és a szérumot centrifugálással 4000 fordulat/perc mellett 10 percig választottuk el, majd –20 ◦C-on tartottuk biokémiai vizsgálat céljából. 2.7.1. Vese biokémiai elemzése A szérum kreatinin-, karbamid-, összfehérje- és albuminkoncentrációit automatizált spektrofotometriás módszerekkel (BM/Hitachi autoanalyzer-911; Boehringer Mannheim, Németország) határoztuk meg a gyártó utasításai szerint. A káliumszinteket lángfotometriával határoztuk meg 766 nm-en. 2.7.2. A vese antioxidáns aktivitásának becslése A vérminták levétele után minden csoportba tartozó állatokat leöltük; a jobb veséket gyorsan izoláltuk és jéghideg sóoldattal öblítettük. A szövetet ezután levágjuk, hideg sóoldattal öblítjük, szárazra töröljük, és azonnal jégre helyezzük. Elektromos szövethomogenizátort használva a szövet egy részét (1,0 g) lemértük, és 9 térfogat jéghideg 0,05 M foszfátpufferrel homogenizáltuk pH 7,4-en. A sejttörmeléket 12 000 fordulat/perc (4 ◦C) 20 perces centrifugálással távolítottuk el, hogy a felülúszót összegyűjtsük a malondialdehid (MDA) koncentráció [33], a szuperoxid-diszmutáz (SOD) aktivitás [34] és a csökkentett glutation (GSH) tartalom meghatározásához [33]. 35]. A vesehomogenizátum fehérjekoncentrációját Bradford módszerrel határoztuk meg [36]. 2.7.3. Nephroprotection százalék A vit. nephroprotection (F) százalékos aránya. Az E plusz Se, KEE, KAE és KEE plus KAE minden biokémiai paraméterre külön számított Wakchaure et al. [37] a következő egyenlet felhasználásával: F százalék=[1 − (T − N) (C − N)] × 100 (1) ahol T=a kezelési csoport átlagértéke, C {{ 171}} a pozitív kontrollcsoport átlagértéke, és N= a negatív kontrollcsoport átlagértéke. Ezenkívül a teljes nephroprotection százalékot (TFP százalék) összehasonlították vele. E plusz Seas követi a TFP százalékát=Minden kivonat biokémiai paramétereinek F százalékának összege biokémiai paramétereinek F százalékának összege. E plusz Se × 100 (2) 2.7.4. Hisztopatológiai vizsgálatok A boncolási mintákat külön-külön patkánycsoportok bal veséjéből vettük, és 24 órán át 10%-os formalinos sóoldatban rögzítettük. A csapvizes mosást alkoholos sorozathígításokkal (metil, etil és abszolút etil) dehidratálás követte. A mintákat xilolban tisztítottuk és paraffinba ágyaztuk 24 órán keresztül 56 ◦C-on forró levegős kemencében. Paraffin méhviasz szövetblokkokat készítettünk elő 4-mikron vastagságú metszéshez szán mikrotom segítségével. A szövetszeleteket üveglapokra gyűjtöttük, paraffinmentesítettük, majd hematoxilinnel és eozinnal megfestettük, hogy rendszeresen ellenőrizzük fényelektromos mikroszkóp alatt [38]. 2.8. Statisztikai elemzés Az eredményeket átlag ± standard hiba (SE) formájában mutatjuk be. A különböző csoportokban az átlagok közötti különbségek szignifikanciáját egyutas varianciaanalízissel (ANOVA), majd Duncan-teszttel vizsgáltuk, és az átlagok közötti p-értéket p < 0,05="" szinten="" adtuk="" meg="" [39].="" 3.="" eredmények="" 3.1.="" az="" a.="" hierophantic="" fitokemikáliái="" és="" antioxidáns="" kapacitása="" az="" a.="" hierophantic="" fitokemikáliák="" és="" a="" kapcsolódó="" antioxidáns="" aktivitások="" kvantitatív="" elemzését="" dpph="" és="" abts="" gyökfogó,="" -karotin-linolsav="" fehérítő="" aktivitás="" és="" kelátképző="" képesség="" (ca)="" alkalmazásával="" végeztük.="" amint="" az="" 1.="" táblázatból="" jól="" látható,="" a="" tpc-tartalom="" 67,49="" mg="" gae="" g-1="" volt.="" a="" tc-tartalom="" 3,51="" µg="" g-1="" volt.="" a="" tf="" és="" tl="" tartalom="" 49,78="" és="" 17,45="" mg="" qe="" g-1="" volt.="" ezen="" túlmenően="" dpph-rsa="" és="" abts-rsa-t="" használtak="" az="" antioxidáns="" aktivitás="" előrehaladásának="" mérésére.="" az="" eredmények="" 128,71="" µmol="" te="" g-1-et="" és="" 141,92="" µmol="" te="" g-1-et="" mutattak="" a="" dpph-rsa="" és="" az="" abts-rsa="" esetében.="" ezenkívül="" az="" a.="" hierophantic="" antioxidáns="" aktivitását="" (aoa)="" az="" 1.="" táblázat="" mutatja="" be.="" a="" linolsav="" gyökök="" gátlási="" százalékát="" 45,74="" százalékban="" számoltuk="" ki="" a="" bha-val="" összehasonlítva="" -carotene="" bleaching="" (-cb)="" vizsgálattal.="" ezen="" túlmenően="" a="" fémkelátképző="" aktivitás="" értékelése="" 42,89="" mg="" g-1-et="" mutatott="" ki,="" amely="" úgy="" tűnik,="" jártas="" a="" fe2="" plusz-ferrozin="" komplex="" képződésének="" zavarásában,="" jelezve,="" hogy="" képes="" kelát="" oxidációs="" fémeket="" létrehozni.="" 1.="" táblázat.="" összes="" fenoltartalom,="" összes="" karotinoid,="" összes="" flavonoid,="" összes="" flflavonol="" és="" relatív="" potenciális="" antioxidáns="" aktivitása="" a.="" hierophantic="" (átlag="" ±="" se),="" n="">

3.2. Az A. hierofhantikus fenolos vegyületek mennyiségi meghatározása A fenolos vegyületek KEE-re és KAE-re vonatkozó kvantitatív analízisét HPLC-analízissel végeztük, és az adatokat a 2. táblázat tartalmazza. Kilenc elkülönített fenolosavat és hat flavonoidot azonosítottunk kimutatható mennyiségben A KEE-ből. hierofáns. A legnagyobb mennyiségben előforduló fenolsavak a hidroxi-fahéjsavak, például a szinapinsav (28,704 mg 1{{50}}0 g−1 ), majd a kávésav (6,621 mg 1{) {63}}0 g-1 ), rozmarinsav (2,884 mg 100 g-1 ), ferulsav (1,854 mg 10{{85} } g-1 ), és fahéjsav (0.094 mg 100 g-1 ); és hidroxi-benzoesavak, például p-hidroxi-benzoesav (3,440 mg 100 g-1), protokatekuinsav (1,811 mg 100 g-1), vanillinsav (3,326 mg 100 g-1) és sziringinsav (1,083 mg 100 g-1) −1). Flavonoidok, például miricetin (16,269 mg 100 g-1), D-katekin (2,410 mg 100 g-1), kaempferol (0,434 mg 100 g-1), rutin (0,539 mg 100 g-1), apigenin{{58} }glükozidot (0,192 mg 100 g-1 ), és kvercetint (0,184 mg 100 g-1 ) felbecsülhetetlen mennyiségben mutattak ki. Meghatároztuk az A. hierophantic KAE fenolos vegyületeit is, és az adatokat a 2. táblázat tartalmazza. A 21 azonosított fenol közül a sziringinsav volt a legmagasabb fenolsav. A katekol és a pirogallol 2,526 és 1,589 mg 100 g-1 volt. Az adatok azt mutatták, hogy egyes fenolsavakat, például kávé-, katechin-, klorogén-, epikatekin-, e-vaníliás-, p-hidroxi-benzoesavat és protokatekuinsavat mérsékelt mennyiségben (0,725, 0,256, 0,136, 0,193, 0,42204, 0,013, 0,193, 0,4204 és 40 mg) mutattak ki. g−1, ill. Ugyanebben az összefüggésben kis mennyiségű 3,4-5-trimetoxi-fahéj, 4-aminobenzoesav, benzoesav, fahéj, kumarin, ellagsav, ferulsav, gallusz, izoferulsav, -kumársav, p-kumársav és A szalicilsav mennyiségét az azonosítás után határoztuk meg. Az epikatechin és a D-katechin mint flavonoid mennyiségét az A. hierophantic KAE-jában is meghatároztuk.

3.3. Szérum kreatinin-, karbamid-, K-, összfehérje- és albuminszintek A CCl4 injekció jelentősen megemelte a szérum kreatinin-, karbamid- és k-szinteket GII-patkányokban a kontroll patkányokhoz (GI) képest. Ezzel szemben a teljes fehérje- és albuminszint szignifikánsan csökkent a CCl4-kezelt patkányokban (3. táblázat). Vit. Az E plus Se és A. hierofhantic kivonatok (G III, IV, V és VI) jelentősen csökkentették a CCl4 injekció által okozott kreatinin- és karbamid-változásokat, míg az albumin- és összfehérjéket a normál értékekhez közelítették a GI-ben (3. táblázat). ). A szérum k-szint jelentősen megemelkedett a CCl4-kezelt patkányokban (GII) a GI-vel összehasonlítva (3. táblázat). A vit injekció beadása. Az E plus Se és az A. hierofhantic alkoholos és vizes kivonatok (G IV, V és VI) beadása szintén pozitívan javította a k szintet a GI-hez képest (3. táblázat).

3.4. Vese antioxidáns biomarkerek A 4. táblázatból látható, hogy a CCl4 beadása szignifikánsan csökkentette az SOD és a GSH szintet, és növelte az MDA szintet a GII vese homogenizátum szövetében. A GI-vel összehasonlítva azonban a patkányok mindkét vit. Az E plus Se és A. hierofhantic kivonatok (GIII, VI, V és VI) lényeges javulást mutattak az antioxidáns SOD és GSH enzimek aktivitásában, valamint csökkentették az MDA-szinteket (4. táblázat). Az A. hierofhantic alkoholos kivonat (GIV) felülmúlta az A. hierofhantic vizes kivonatot (GV) és az A. hierophant alkoholos és vizes kivonatokat kombinálva csökkentette az antioxidánsok szintjét, és az autooxidációs folyamat leküzdése alacsony MDA szintet eredményezett a GI-hez képest.

3.5. Nephroprotection százalék A vesefunkciók, például kreatinin, karbamid, k, TP és albumin, valamint a vese homogenizátum antioxidáns aktivitásának (MDA, SOD, GSH) veseműködésének százalékos aránya (a negatív kontroll (GI) és pozitív (GII) csoportokhoz viszonyítva) ) az 5. táblázatban látható. A nephroprotection százalékban a legmagasabb értéket a kreatinin, karbamid, k a GIII-ban, TP és albumin a GV-ben, MDA és GSH a GIII-ban és SOD a GV-ben (5. táblázat). A teljes nephroprotection százalék a vit. Az E plus Se kezelés a KAE-vel kezelt csoportban (GV, 97,62 százalék), majd a KEE (GIV, 83,27 százalék), majd a KEE plusz KAE (GVI, 78,85 százalék) maximális szintet regisztrált, amint az 5. táblázatban látható.

Vita

kiváló antioxidáns szerek. A polifenolos anyagokról úgy gondolják, hogy emberekben karcinogén és antimutagén tulajdonságokkal rendelkeznek [40]. Az A. hierophantic értékes TPC-tartalma valamivel magasabb volt, mint a Mohamed és mtsai. [21] 51,97 mg GAE g-1-ként A. hierochuntica gyógynövényben és AlGamdi et al. [41], aki 4 mmol L−1 GAE-t talált az A. hierofhantikus magvakban. Nemrég Zin et al. [42] jelezte a tanninok jelenlétét az A. hierophanticban, mint bioaktív vegyületben, és javasolta annak bioaktivitását, amelyet alaposan meg kell vizsgálni. A karotintartalom az összes karotinoid részeként 2,27 µg g-1 volt, amint azt Mohamed et al. [21], és még a jelenlegi eredmények is 3,51 µg g-1-ben mutatták az összes karotinoidot. A flavonoid- és flavonoltartalomra vonatkozó hasonló megállapításokat Mohamed és mtsai. [21]. A biológiailag aktív komponensek, mint például a fenolos vegyületek, antioxidáns hatást fejtenek ki a lipidoxidációs láncreakciók lebontásaként azáltal, hogy hidrogént adnak az aktív szabad gyököknek. A fenolok gyököket gátló hatását fenolos hidroxilcsoportjaik világították meg [8,10,22]. Ezt a fenolsavat hatékony antioxidáns komponensként írták le, beleértve a hidrogén-peroxidot, a hidroxilgyököt és a szuperoxid aniont [43]. Úgy tűnik, hogy az A. hierofáns fémkelátképző tevékenysége jártas a "Fe2 plusz-ferrozin" komplex felépítésében, ami arra utal, hogy képes a "vas" ionokat a "ferrozin" előtt megfogni. A fenolvegyület-tartalmuk növekedése közötti pozitív összefüggést közvetlenül jelzi antioxidáns kapacitásuk [42]. Andjelković et al. [44] számos fenolsav aktivitását állapította meg, hogy komplexeket képezzen fémekkel. Az értékes TPC és a különböző mérési megközelítéseket alkalmazó releváns antioxidáns aktivitások tiszta táblát adnak az A. hierochuntica bioaktivitásához, és megerősítik az A. hierochuntica élelmiszer- és italhasználati gyógynövényként való bioaktivitását. A biológiailag aktív komponensek, mint például a fenolos vegyületek, antioxidáns hatást fejtenek ki a lipidoxidációs láncreakciók lebontásaként azáltal, hogy hidrogént adnak át az aktív szabad gyököknek [45]. Feltárták a fenolok gyököket gátló hatását

hatékony antioxidáns komponens, beleértve a hidrogén-peroxidot, a hidroxilgyököt és a szuperoxid aniont [43,45,47]. Az A. hierophantic KAE-ben HPLC-vel azonosított és számszerűsített vegyületek száma magasabb volt, mint a KEE-ben azonosított vegyületek száma, de az A. hierophantic KEE-ben azonosított vegyületek nagyobb mennyiségben voltak jelen [22]. Az eredmények azt mutatják, hogy a fogyasztó A. hierophantic számos komponenst tartalmazhat poláris és nem poláris formában is. Ezeket az eredményeket hasonlóan mutatják be AlGamdi és munkatársai. [41], mivel azonosítottak és számszerűsítettek 20 polifenol vegyületet az A. hirerochuntica magjaiban. A kivonat klorogénsavakat és hidroxi-benzoesavat tartalmazott, de a fő komponensek a flavon C-glikozidok, C-glikozidok, O-glikozidok és O-glikozid-C-glikozidok voltak, amelyek túlnyomórészt luteolin konjugátumként fordulnak elő. Ezenkívül az A. hierophantic kivonat 20 vegyülete közül 14 antioxidáns aktivitást mutatott egy HPLC-on-line antioxidáns-detektáló rendszer alkalmazásával [41]. Érdekes módon a jelenlegi adatok megerősítették, hogy az A. hierophantic gazdag fitokémiai vegyületekben, és jó forrása a természetes antioxidánsoknak, amelyek potenciális egészségügyi előnyökkel járnak, amint azt korábban a magvak esetében alig hangsúlyozták [41]. Ezért a teljes növényi porból készült tea a hagyományos fogyasztási forma; adatok új azonosított bioaktív vegyületeket mutattak be az A. hirerochuntica KEE-ben és KAE-ben, amelyek különböztek az AlGamdi és mtsai. [41] Számos tanulmányban a CCl4-indukált nefrotoxicitást modellrendszerként használják a növényi kivonatok/gyógyszerek nefroprotektív hatásának tesztelésére [48,49]. A jelenlegi tanulmány az A. hierophantic kivonatoknak a CCl4-indukált vesekárosodásra gyakorolt ​​hatását, valamint a patkányok vesevédelmét és antioxidáns potenciálját vizsgálta. A jelenlegi vizsgálatban a CCl4-kezeléssel (GII) kezelt csoport szignifikánsan növelte a kreatinin-, karbamid- és k-szinteket, valamint csökkentette a teljes fehérje- és albuminkoncentrációt a GI-hez képest. Ennek oka az lehet, hogy a CCl4-mérgezés számos szervben, köztük a májban, a vesében, a tüdőben, az agyban és a vérben a szabad gyökök termelésének fő forrása [50]. Azt is megfigyelték, hogy patkányokban a CCl4 injekciót követően a CCl4 koncentrációja egyenletesebben oszlik el a vesében, mint a májban [51], mivel a vese nagy affinitást mutat a CCl4 iránt, és citokróm P450-et tartalmaz, túlnyomórészt a kéregben. A CCl4-ből származó leggyakoribb szabad gyökök a triklórmetil-gyök (CCl3• ) és a triklórmetil-peroxil gyök (CCl3O2• ) [52]. Ezek a gyökök egy intracelluláris fehérjéhez, sejtmembrán lipidekhez és DNS-hez kapcsolódnak, fehérje denaturációt, lipidperoxidációt és oxidatív DNS-károsodást okozva, ami sejthalálhoz vezet [53]. Ezzel szemben a CCl4-patkányok kezelése vele. Az E plus Se (GIII) és A. hierofhantic kivonatok (GVI: VI) hatékonyan csillapították a kreatinin- és karbamidszint emelkedését, valamint megnövelték a szérum albumin- és összfehérjék szintjét, hogy nagyon közel álljanak a GI-szintjükhöz. Ennek oka lehet az A. hierophant kivonatok antioxidáns tulajdonságai és gazdag fenoltartalma, valamint antioxidáns képessége és kelátképző aktivitása. E plusz Se, amely megköti a szabad gyököket, ezáltal gátolja a vesekárosodást. A fitokemikáliák a leghatékonyabb szabadgyök-fogók, és a növényekből származó kiváló antioxidánsokként tartják számon [54]. A legnagyobb mennyiségben előforduló fenolos vegyületek a hidroxifahéjsavak, például a szinapinsav voltak a KEE-ben azonosított kilenc fenolos vegyület közül, míg a sziringinsav volt a legmagasabb fenolsav a KAE-ben azonosított 21 fenolsav közül. KEE-ben hat flflavonoidot, KAE-ben kettőt azonosítottak HPLC analízissel [55]. Továbbá antioxidánsként azt. Úgy gondolják, hogy az E megvédi a szöveteket a reaktív oxigén metabolitok által okozott károktól. A szelénről köztudott, hogy az emberi egészség nélkülözhetetlen nyomeleme, megvédi a sejteket a szabad gyökök káros hatásaitól [22]. A jelenlegi vizsgálatban a CCl4 beadása jelentősen csökkentette a GSH-t és az SOD-t, valamint növelte az MDA-szinteket a vesehomogenizátumokban a GI-hez képest. Vit. Az E plus Se és az A. hierofhantic kivonatok javították a CCl4 különböző hatásait azáltal, hogy helyreállították az antioxidáns szerek, például a SOD és a GSH megváltozott aktivitását, és deaktiválhatják az MDA termelődésének folyamatát, amint azt a közelmúltban közölték [15,21,40,41]. . A GSH egy nem enzimatikus antioxidáns, amely minden emlős sejtben megtalálható. Oxidált formájával, a GSSG-vel, a GSH számos méregtelenítő enzim (GPx, GST és mások) kofaktoraként működik az oxidatív stressz ellen, és fenntartja a sejtek redox egyensúlyát [47]. Ez a megállapítás összhangban van Khan és Siddique [56], valamint Makni et al. [57], akik arról számoltak be, hogy a CCl4 csökkentette a GSH szintjét patkányvesékben. Kezelés vele. Az E plus Se és A. hierofhantic kivonatok védelmet mutattak a CCl4 által kiváltott GSH-szint csökkenés ellen. Ugyanebben az összefüggésben az SOD katalizálja két szuperoxid-anion (*O2) molekula hidrogén-peroxiddá (H2O2) és molekuláris oxigénné (O2) való dismutációját, ennek következtében a potenciálisan káros szuperoxid-anion kevésbé veszélyes [58,59]. A CCl4-mérgezés megváltoztatja a génexpressziós szintet a renális SOD kimerítésével [60]. Az SOD aktivitás csökkenése a sejtkárosodás érzékeny indexe. A tesztelt A. hierophhantic kivonataink csökkentették a vesetoxicitást az SOD szintjének csökkentésével. Különféle enzimatikus folyamatokban vesz részt a savasodási reakciók koncentrációjának csökkentésében [61]. Az MDA a lipidperoxidáció első terméke, és az oxidatív stressz egyik fontos markere. Az A. hierofáns kivonatok csökkentették az MDA-szint növekedését, és helyreállították a teljes antioxidáns teljesítményt a CCl{65}}kezelt patkányvesékben. Ezek a védőhatások az A. hierophantic kivonatok erőteljes antioxidáns hatásának köszönhetők [15,21,40,41]. Ezek az eredmények arra is utalnak, hogy az A. hierofhantic kivonatok mérséklik az oxidatív stresszt azáltal, hogy csökkentik a lipid-peroxid szintjét a CCl{70}}kitett patkányvesékben, és megakadályozzák a vesekárosodást. Ezek az eredmények megegyeztek a Zn CCl4-indukált akut nefrotoxicitásra gyakorolt ​​antioxidáns hatásával [62,63]. Az A. hirerochuntica kivonatok értékes nephroprotection képességet mutattak a vesefunkciós tesztek (kreatinin, karbamid, K, TP és albumin) és a vese homogenátum antioxidáns aktivitása (GSH, SOD, MDA) tekintetében GIV, V és IV esetén. A teljes nephroprotection százalék a vit. Az E plus Se kezelés a KAE-vel kezelt csoportban (GV, 97,62 százalék), majd a KEE-ben (GIV, 83,27 százalék), majd a KEE plusz KAE-ben (GVI, 78,85 százalék) regisztrált maximális értékeket, csökkenő sorrendben. Ennek oka lehet az A. hirerochuntica kivonatok fenol- és antioxidáns-tartalmának mennyiségi és minőségi különbsége, amely összefüggésben van az antioxidáns kapacitással [15,19,22,40,42]. A vesék kórszövettani leletei összhangban vannak a vizsgált kísérleti csoportok biokémiai becsléseivel. A CCl4 beadása (GII) glomeruláris és tubuláris léziót okozott a vesékben vazokongeszióval. Dogukan et al. [64] hasonló szövettani mintázatot fedezett fel patkány veseszövetben a hosszan tartó CCl4-kezelés hatására. Azt is figyelembe veszik, hogy a szövettani elváltozásokat a nefronok funkcionális túlterhelése okozza, ami veseműködési zavarhoz vezet [65], és/vagy a CCl4 metabolizmuson keresztüli szabad gyökök képződése következtében előidézett szövetpusztulás [56,66]. . Ennek hatása. Figyelemre méltóak voltak az E plus Se és A. hierofhantic kivonatok a CCl4 vesepusztító hatásának javítására és helyreállítására. Ennek oka lehet. Az E plusz Se (mint erős antioxidáns) hat a CCl4 által indukált ROS-ra [67]. Az A. hierofáns kivonatok elnyomják a CCl4- által kiváltott akut nefrotoxicitást az A. hirerochuntica kivonatokban jelenlévő fenolos vegyületek antioxidáns szerepe és szabadgyökfogó tulajdonságai miatt [22]. Eredményeink összhangban vannak más kutatók eredményeivel, akik kimutatták, hogy a különféle növényi származékok farmakológiai hatást fejtenek ki azáltal, hogy kiküszöbölik a CCl4-visszaéléseket és helyreállítják a normális állapotot [6].

Következtetések

A vizsgálat eredményei egyértelműen igazolták, hogy az A. hierophant növény gazdag poláris és nem poláris fenolos vegyületekben, amelyek kiváló antioxidáns kapacitással rendelkeznek, ami közvetlenül összefügg a fitokémiai tartalommal. Az A. hierofhantic (különösen vizes kivonat) megvédi a patkányokat a CCl4-indukálta oxidatív stressztől és az akut vesekárosodástól, amit az MDA-szint jelentős csökkenése, valamint a megnövekedett GSH és SOD aktivitás, valamint a biokémiai és szövettani folyamatok megszűnése bizonyít. elváltozások a vesékben. A védőhatékonyság az A. hierophantic kivonatokban jelenlévő fenolos vegyületek antioxidáns és szabadgyökfogó tulajdonságaiból fakadhat. Ezek a jellemzők segítenek megmagyarázni a növény gyógyászati ​​​​hatékonyságát gyógynövényes gyógyszerként. További kutatásokra van szükség az A. hierophantic hatóanyagainak teljes leírásához, és ennek a tanulmánynak az a célja, hogy ösztönözze az átfogóbb kapcsolódó kutatásokat, hogy elegendő adatot és ajánlásokat kínáljon a mechanizmusok és a biztonságos dózisok meghatározásához.

Hivatkozások

1. Statisztika, KD Krónikus vesebetegség az Egyesült Államokban. 2021. Elérhető online: https://www.cdc.gov/kidneydisease/pdf/ Chronic-Kidney-Disease-in-the-US-2021-h.pdf (Hozzáférés: 2021. július 20.).
2. Ku, E.; Glidden, DV; Johansen, KL; Sarnak, M.; Tighiouart, H.; Grimes, B.; Hsu, CY A krónikus vesebetegség alatti szigorú vérnyomásszabályozás és a végstádiumú vesebetegség kialakulása utáni alacsonyabb mortalitás közötti összefüggés. Kidney Int. 2015, 87, 1055–1060. [CrossRef] [PubMed]
3. Tumlin, JA; Madaio képviselő; Hennigar, R. Idiopathic IgA nephropathia: Patogenezis, hisztopatológia és terápiás lehetőségek. Clin. J. Am. Soc. Nephrol. 2007, 2, 1054–1061. [CrossRef] [PubMed]
4. Olah, G.; Reddy, alelnök; Prakash, GS; Reakciók, FC Kirk-Othmer kémiai technológia enciklopédiája. Kontaktlencsék 1978, 720–742.
5. Ozturk, F.; Ucar, M.; Ozturk, IC; Vardi, N.; Batcioglu, K. A betain szén-tetraklorid által kiváltott nefrotoxicitása és védő hatása Sprague-Dawley patkányokban. Urology 2003, 62, 353–356. [CrossRef]
6. Ogeturk, M.; Kus, I.; Colakoglu, N.; Zararsiz, I.; Ilhan, N.; Sarsilmaz, M. A kávésav-fenetil-észter védi a veséket a szén-tetraklorid toxicitástól patkányokban. J. Ethnopharmacol. 2005, 97, 273–280. [CrossRef]
7. Slater, TF Free Radical Mechanisms in Tissue Injury. Sejtfunkcióban és betegségben; Cañedo, LE, Todd, LE, Packer, L., Jaz, J., szerk.; Springer: Boston, MA, USA, 1988; 209–218. [CrossRef]
8. Khan, MR; Rizvi, W.; Khan, GN; Khan, RA; Shaheen, S. Szén-tetraklorid által kiváltott nephrotoxicitás patkányokban: A Digera muricata védő szerepe. J. Ethnopharmacol. 2009, 122, 91–99. [CrossRef]
9. Afsar, T.; Khan, MR; Razak, S.; Ullah, S.; Mirza, B. Az Acacia hydaspica R. Parker lázcsillapító, gyulladáscsökkentő és fájdalomcsillapító hatása és fitokémiai elemzése. BMC kiegészítés. Altern. Med. 2015, 15, 1–12. [CrossRef]
10. Al-Qabba, MM; El-Mowafy, MA; Althwab, SA; Alfheeaid, HA; Aljutaily, T.; Barakat, H. A Chenopodium quinoa csírák fenolos profilja, antioxidáns aktivitása és javító hatékonysága CCl4 -indukálta oxidatív stressz ellen patkányokban. Nutrients 2020, 12, 2904. [CrossRef]