Tizenhét komponens jellemzése termesztett cisztánokban Herba a Tarim-sivatagból HPLC-MS segítségével

[Absztrakt]Célkitűzés: A 60%-os metanolos kivonat kromatográfiás komponenseinek azonosításaCistanches deserticola Herbaa Tarim-sivatagban tenyésztették HPLC-MS-sel.

Módszer: A HPLC-MS analízist Agilent ZOＲBAX Eclipse Plus C18 oszlopon (6 mm × 250 mm, 5 μm) végeztük. A mozgófázis acetonitril -0. 1%-os hangyasav vizes oldat volt gradiens eluálással 1 ml·perc-1 áramlási sebesség mellett, és a detektálási hullámhossz 254 nm volt. Az oszlop hőmérsékletét 25 °C-ra állítottuk be, és az injektált térfogat 10 µl volt. Eredmény: Tizenhat kromatográfiás csúcsot/tizenhét komponenst azonosítottunk pontosan az általunk izolált és azonosított vegyületek retenciós idejének, molekulatömegének és fragmensionjainak összehasonlításával. Ezeket a kromatográfiás komponenseket a következőképpen határozták meg: coniferin, demetil-siringin, syringin, echinacozid, cisztanozid A, verbaszkozid (tubulozid A), cisztanozid B, izoverbaszkozid, 2'-acetil-cisztanozid A, cisztanozid C, izocisztanozid C, 2'-acetil-verbaszkozid, cisztanozid B, cisztanozid és tubulozid B. J.

Következtetés: A HPLC-MS módszer alkalmas a 60%-os metanolos kivonat kromatográfiás komponenseinek azonosítására Cistanches Herba-ban. Ez a tanulmány tudományos bizonyítékot szolgáltat e gyógynövény kémiai összetevőinek átfogó elemzéséhez.

［Kulcsszavak］ Cistanches deserticolaHerba; Cistanche; HPLC-MS; metanolos kivonat

Cistanche deserticola YCMa

Cistanche deserticola, más néven "sivatagi ginzeng",egy híres tonik kínai orvoslás, amelyet Belső-Mongóliában, Ningxiában, Gansuban és Kína Hszincsiangban terjesztenek [1].Tonizálja a vese-jangot, javítja a véresszenciát, nedvesíti a beleket és ürít. Általában a klinikákon használják férfi impotencia, női meddőség, derék- és térdfájdalom, vérpangásos székrekedés kezelésére.stb. [2-3].Cistanche deserticola, amely aza Kínai Gyógyszerkönyv első részében (2015-ös kiadás) szerepel a Cistanche deserticola és a Cistanche tubulosa szárított húsos szára (4). Kutatócsoportunk évek óta szisztematikus és alapos kutatást végzett a Cistanche növényeken.A Cistanche növények kémiai komponensei főként feniletanoid-glikozidok, az iridoidok és glikozidjaik mellett lignánok és glikozidjaik, benzil-alkohol-glikozidok stb.[5]. A modern farmakológiai vizsgálatok azt mutatják, hogy a fenil-etanol-glikozidok, a nemzetség fő összetevői neuroprotektív, antioxidáns, májvédő, antibakteriális, vírusellenes, daganatellenes, gyulladásgátló és egyéb hatásokkal rendelkeznek [6-11].

Sivatagi ginzeng

Kínában a Cistanche deserticola elterjedt Belső-Mongólia nyugati részén, Hszincsiang északi részén és Csinghajban a Qaidam-medencében, de a dél-hszincsiangi Tarim-medencében nem.. Az 1990-es évek végén a Tazhong olajmező védelme és a sivatag ellenőrzése érdekében az olajmező központja nagyszámú Haloxylon ammodendront vezetett be a Tazhong olajmező körül és a sivatagi autópálya mindkét oldalán, és beoltotta a Haloxylon ammodendront cisztanccal, ami már több mint 10 éve. A dél-hszincsiangi meleg éghajlat és az olajbázis jó csepegtető öntözési körülményei miatt a cistanche deserticola termése nagyon magas, a friss cistanche deserticola hozama pedig több mint 500 kg-ot is elérhet [8]. A Cistanche deserticola számos kémiai komponense nagyszámú izomert termelt a szubsztituensek eltérő kapcsolódási helyzete miatt. Ez nagy nehézségeket okoz ezen gyógyászati ​​anyag kromatográfiás csúcsának azonosításában. Nehéz pontosan azonosítani a kromatográfiás csúcs komponenseit, ha csak monomer vegyületek nélküli LC-MS-re támaszkodunk kontrollként. Ezért a korai szakaszban kevés irodalmi jelentés található erről a munkáról. A szerző számos monomer vegyületet [9-11] izolált a Tazhong-sivatagban korai stádiumban termesztett Cistanche deserticolából. Ezekkel a korai szakaszban kapott monomer vegyületekkel pontosan azonosították a Cistanche deserticola 60%-os metanolos kivonatának HPLC részleges kromatográfiás csúcsait. Ezzel nemcsak elkerülhető lesz néhány ismert vegyület ismételt azonosítása a Cistanche deserticola kémiai összetevőiben, hanem referenciaként szolgálhat a gyógyászati ​​anyag minőség-ellenőrzésével kapcsolatos további kutatásokhoz is. Ebben a cikkben a Cistanche deserticola 0%-os metanolos kivonatának 17 komponensét azonosították HPLC-MS-sel.

Cistanche deserticola szelet

Kattintson ide a Cistanche termékek megtekintéséhez

【Kérjen többet】 E-mail: xue122522@foxmail.com / WhatsApp: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

1.Anyag

Inova-500 mágneses magrezonancia műszer (Varian, USA); 6320IonTrap LC-MS tömegspektrométer, EclipseXDB-C18 oszlop (4,6 mm × 250 mm, 5 μm) (Agilent, USA); QUINTIX313-1CN típusú 1/10000 elektronikus mérleg (Sedaris Division); KQ-500DV ultrahangos tisztító (Jiangsu Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.); KMUP – Ⅰ Trace Analytical Ultra Pure Water Generation System (Chengdu Haochun Instrument Equipment Co., Ltd.).

A kísérletben felhasznált 39 kontrollanyagot a szerző a korai stádiumban izolálta a sivatagban tenyésztett Cistanche deserticola-ból Tazhongban, és szerkezetüket NMR és más spektroszkópiai technikákkal határozták meg. 39 kontrollminta szerkezetét a következőképpen azonosították: Cistanche deserticoside J, Cistanche deserticoside K, Cistanche deserticoside L, Cistanche deserticoside M, Cistanche deserticoside N, epimeridinosideA, Isocistancheside C, angiocyanin B, Cistanche heterophyllin, Cistanche deserticoside, Cistanche deserticoside, Cistanche deserticoside, Cistanche deserticoside, Cistanche deserticoside Cistanche cymosin, 2 '- acetil Cistanche deserticoside A, 2' - acetyl Cistanche deserticoside A, Cistanche deserticola B, Cistanche deserticola A, Echinoside A, Cistanche deserticola glycoside E, Salidroside, 6 '- acetil, acetilsin, salidroszid (2E, 6E) - 3, 7-dimetil-8-hidroxi-ktadién-1-O- - D-glükozid, (+) - syringin, (+) - syringin-4'- O- - D-glükopiranozid, (+) - izoeukominA, (+ ) metil -{0} rosin D-glükozid, lárvaölő-4 '- O- - D-glükozid, lárvaölő-4-O- - D-glükozid- - D-glükopiranozid, heszperidin A, területre A, 6-dezoxikatapol. Az összes fenti referenciaanyag tisztasága több mint 98,0%. Az acetonitril kromatográfiás tisztaságú (DikmaPure, USA), a víz ultratiszta víz, a vizsgálati eljárásban használt egyéb reagensek pedig analitikai tisztaságú reagensek, amelyeket a Pekingi Vegyi Üzem gyárt.

A kísérletben használt gyógyászati ​​anyagot, a Cistanche deserticola-t a hszincsiangi Tazhong sivatagi területéről gyűjtötték be 2010 novemberében. Tu Pengfei professzor, a Pekingi Egyetem Gyógyszerészeti Karának munkatársa a Leobaceae Cistanche deserticola növény szárított, húsos szárát azonosította. A mintát a Pekingi Egyetem Hagyományos Kínai Orvoslás Modern Kutatóközpontjában tárolták (mintaszám: CD201011).

Cistanche deserticola szelet

2.Módszerek és eredmények

2.1. Összehasonlító oldat elkészítése

Vegyünk körülbelül 1 mg-ot a Cistanche deserticola korai stádiumában kapott 39 kontrollmintából, mérjük le pontosan, tegyük egy 5 ml-es mérőlombikba, oldjuk fel metanolban, mérjük be a mérlegre, majd kapjuk meg az egyetlen kontrolloldatot.

2.2 Vizsgálati oldat elkészítése

A Kínai Gyógyszerkönyv 2015-ös kiadására hivatkozva vegyünk ki kb. 1g termékport (a negyedik szitán keresztül), mérjük le pontosan, tegyük egy 100 ml-es barna üvegbe, adjunk hozzá pontosan 50 ml 60%-os metanolt, tömörítsük össze, rázzuk jól, mérjük ki a masszát, áztassuk hűtésre 30 percre, 40 percre hűtsük le, 40 50% metanolt a csökkentett tömeg pótlására, jól rázzuk fel, álljuk le, vegyük le a felülúszót, és használjunk 0,45 μM mikroporózus membránszűrést, vegyük ki a folyamatos szűrletet, hogy megkapjuk a tesztoldatot.

2.3 Kromatográfiás körülmények

AgilentEclipse XDB-C18 kromatográfiás oszlop (4,6 mm × 250 mm, 5 μm), detektálási hullámhossz 254 nm, oszlop hőmérséklete 25 fok; Acetonitril (A) - 0.1%-os hangyasav vizes oldata (B) mozgófázisként, gradiens elúció (0 - 20perc, 5% - 15% A; 20 - 50perc, 15% - 30% A; 50 - 60perc, 30% - 50% A}, - 50% A}; Áramlási sebesség: 1,0 ml · min-1, befecskendezési térfogat: 10 μL.

2.4 Tömegspektrum feltételei

Kapilláris hőmérséklet 350 fok; Kapilláris feszültség 3500V; Köpenygáz (nitrogén) áramlási sebessége 12,0L · min-1; Segédgáz (nitrogén) nyomása 206,8kPa; A tömegspektrometria teljes pásztázási tartománya m/z 50-1000; Ütközési gáz hélium, az ütközési energia automatikusan kiválasztásra kerül a teszt során; Gyűjts össze 1 tűt minden pozitív és negatív ion módhoz.

2.5 Referenciaanyag vizsgálata

A 2.1 szerint készített 39 referenciaoldatot 2,3 kromatográfiás és 2,4 tömegspektrometriás körülmények között vizsgáltuk, retenciós idejüket és relatív molekulatömegüket rögzítettük (1. táblázat).

2.6 A vizsgálati oldat meghatározása

Vegye ki a hszincsiangi Tazhong sivatagi területéről gyűjtött Cistanche deserticola gyógyászati ​​anyagot, és készítse el a vizsgálati oldatot a 2.2. pontban leírt módszer szerint. Ezután végezze el a meghatározást a 2.3. pontban leírt kromatográfiás és a 2.4. pontban leírt tömegspektrometriai feltételek szerint, és határozza meg annak HPLC kromatogramját és tömegspektrometriáját pozitív és negatív ion módban (1-3. ábra).

Füge. 1 HPLC kromatogram a Cistanches Herba 60%-os metanolos kivonatáról

Füge. 2 Cistanches Herba 60%-os metanolos kivonatának pozitív TIC MS kromatogramja

Füge. 3 Cistanches Herba 60%-os metanolos kivonatának negatív TIC MS kromatogramja

2.7 Gyógyászati ​​anyagok HPLC kromatogramjának azonosítása

Ugyanilyen körülmények között (2,3 kromatográfiás körülmények és 2,4 tömegspektrometriás körülmények) a komponenseket a vizsgálati minta és a kontroll minta retenciós idejének és relatív molekulatömegének összehasonlításával azonosítottuk. A vizsgálati minta kromatogram csúcsának specifikus azonosítási folyamata (1. ábra) a következő.

2.7.1 Az 1. kromatográfiás csúcs azonosítása

Az 1. kromatográfiás csúcs retenciós ideje 16,67 perc. Pozitív ion módban az m/z365 excimer ion csúcsot [M+Na]+, míg negatív ion módban az m/z387 [M+COOH] - excimer ion csúcsot adjuk meg. Az 1. csúcs relatív molekulatömege 342. Meg van adva az m/z179 fragmens ion is, amely 1 glükózmolekula, 163 D elvesztéséből származik a glikozid kötés felszakadása miatt. A referenciaanyag retenciós ideje és relatív molekulatömege alapján az 1. kromatográfiás csúcsot tűlevelűnek azonosították.

2.7.2 A 2. kromatográfiás csúcs azonosítása

A 2. kromatográfiás csúcs retenciós ideje 17,36 perc. Negatív ion mód esetén az excimer ion csúcsokat m/z357 [M – H] -, 393 [M+Cl] - adjuk meg, és a 2. csúcs relatív molekulatömege 358. Ugyanakkor az m/z195 fragmens ion 1 molekula glükóz-dazid, 16 felbomlása miatti elvesztéséből származik. A 2. kromatográfiás csúcsot demetil-sziringinként azonosítottuk a referenciaanyag retenciós ideje és relatív molekulatömege alapján.

2.7.3 A 3. kromatográfiás csúcs azonosítása

A 3. kromatográfiás csúcs retenciós ideje 19,04 perc, pozitív ion módban az m/z395 [M+Na] excimer ioncsúcs, negatív ion módban pedig az m/z417 [M+HCOO] - excimer ioncsúcs, és a 3. csúcs 27 fragmentumának relatív molekulatömege a 3. csúcs időpontjában kerül meghatározásra. Az m/z209 1 glükózmolekula (163 Da) elvesztéséből származik a glikozidkötés felszakadása miatt. A 3. kromatográfiás csúcsot a referenciaanyag retenciós ideje és relatív molekulatömege alapján sziringinként azonosítottuk.

2.7.4 A kromatográfiás csúcs azonosítása 4

A 4. kromatográfiás csúcs retenciós ideje 27,66 perc. Az excimer ion csúcs m/z804 [M+NH4] pozitív ion módban, az excimer ion csúcs m/z785 [M–H] - pedig negatív ion módban van megadva. A 4. csúcs relatív molekulatömege 786. Ugyanakkor az m/z623 fragmens ion 1 molekula, 163 Da koffein észterkötés-szakadásából származik. A referenciaanyag retenciós idejével és relatív molekulatömegével kombinálva a 4. kromatográfiás csúcsot echinaceaként azonosítottuk.

2.7.5 Az 5. kromatográfiás csúcs azonosítása

Az 5. kromatográfiás csúcs retenciós ideje 31,48 perc, az excimer ion csúcs m/z818 [M+NH4 pozitív ion módban, az excimer ion csúcs m/z799 [M–H] - pedig negatív ion módban van megadva, és az 5. csúcs relatív molekulatömege azonos időpontban, 6 m3 csúcs 800 ionként kerül meghatározásra. 1 molekula, 163 Da koffein észterkötés-megszakító elvesztéséből származik. A referenciaanyag retenciós idejét és relatív molekulatömegét kombinálva bebizonyosodott, hogy az 5. kromatográfiás csúcs a cisztanche-glikozid A.

1. táblázat 39 standard vegyület molekulatömege és retenciós ideje (tＲ)

2.7.6 A 6. kromatográfiás csúcs azonosítása

A 6. kromatográfiás csúcs retenciós ideje 34,17 perc. Két m/z846642 [M+NH4] + excimer ion csúcsot adunk meg pozitív ion módban, és két excimer ion csúcsot m/z827623 [M–H] - szintén a negatív ion módban. Feltételezik, hogy a 6. csúcs két 828624 relatív molekulatömegű vegyületet tartalmazhat. Ugyanakkor az m/z665461 fragmension 1 molekula 163 Da koffein észterkötés-szakadásából származik, az m/z622 fragmension pedig a bond acetil-észterből származik. Ezt a két vegyületet izoláltuk és kombináltuk a referenciaanyag retenciós idejével és relatív molekulatömegével; a 6. kromatográfiás csúcs Cimicifugarin és antocianin A keveréke volt.

2.7.7 A 7. kromatográfiás csúcs azonosítása

A 7. kromatográfiás csúcs retenciós ideje 35,34 perc. Az m/z832 [M+NH4]+, 837 [M+Na]+ excimer ioncsúcs pozitív ion módban, az m/z813 [M–H] - excimer ioncsúcs pedig negatív ion módban van megadva, a 7. csúcs relatív molekulatömege pedig 814. Ugyanakkor a 7-es észterezés m/z6-ból származik. 1 molekula ferulinsav elvesztése, 177Da. A referenciaanyag retenciós idejével és relatív molekulatömegével kombinálva a 7. kromatográfiás csúcsot Cisztanche glikozid B-ként azonosították.

2.7.8 A 8. kromatográfiás csúcs azonosítása

A 8. kromatográfiás csúcs retenciós ideje 36,17 perc, pozitív ion módban az m/z647 [M+Na] excimer ioncsúcs, negatív ion módban pedig az m/z623 [M–H] - excimer ioncsúcs, a 8. csúcs relatív molekulatömege pedig azonos időpontban 6/2 ion 6/2. adott, ami az észterkötés felszakadásából és 1 molekula koffeincsoport elvesztéséből származik, 163 Da. A referenciaanyag retenciós idejével és relatív molekulatömegével kombinálva a 8. kromatográfiás csúcsot heterocénozidként azonosítottuk.

2.7.9 A 9. kromatográfiás csúcs azonosítása

A 9. kromatográfiás csúcs retenciós ideje 38,20 perc. Az excimer ion csúcsok m/z860 [M+NH4]+, 865 [M+Na] pozitív ion módban, az excimer ion csúcsok m/z841 [M–H] -, 877 [M+Cl] - negatív ion módban adhatók meg. A 9. csúcs relatív molekulatömege 842. Ugyanakkor az m/z679636 fragmension 1 molekula koffein (163 Da) és 1 molekula acetil (43 Da) észterkötés-megszakításából származik. A referenciaanyag retenciós ideje és relatív molekulatömege konzisztens, és a 9. azonosítási csúcs az 2- 2'-acetil-cisztanche-glikozid A.

2.7.10 A színárnyalat azonosításatográfia peak 10

A 10. kromatográfiás csúcs retenciós ideje 39,04 perc. Az excimer ion csúcs m/z656 [M+NH4]+, 661 [M+Na] pozitív ion módban, az excimer ion csúcs m/z637 [M–H] -, 673 [M+Cl] - pedig negatív ion módban van megadva. A 10. csúcs relatív molekulatömege 638. Ugyanakkor az m/z475 fragmension 1 molekula, 163 Da koffein észterkötés-szakadásából származik. A referenciaanyag retenciós ideje és relatív molekulatömege konzisztens, és a 10. azonosítási csúcs a Cistanche C.

2.7.11. A 11. kromatográfiás csúcs azonosítása

A 11. kromatográfiás csúcs retenciós ideje 40,82 perc. Az excimer ion csúcs m/z661 [M+Na]+, 677 [M+K + pozitív ion módban, az excimer ion csúcs m/z637 [M–H] -, 673 [M+Cl] - pedig negatív ion módban van megadva. Megállapítható, hogy a 11. csúcs relatív molekulatömege 638. Ugyanakkor az m/z475 fragmension 1 molekula, 163 Da koffein észterkötés-szakadásából származik. A referenciaanyag retenciós idejét és relatív molekulatömegét kombinálva a 11. kromatográfiás csúcsot C izocisztán-glikozidként azonosítottuk.

2.7.12 A 12. kromatográfiás csúcs azonosítása

A 12. kromatográfiás csúcs retenciós ideje 41,48 perc. A pozitív ion módban az m/z684 [M+NH4]+, 689 [M+Na +, az m/z665 [M–H] - excimer ioncsúcs a negatív ion módban adható meg. Megállapítható, hogy a 12. csúcs relatív molekulatömege 666. Ugyanakkor kimutatható, hogy az m/z503460 fragmension 1 molekula koffein (163 Da) és 1 molekula acetil (43 Da) észterkötés-szakadásából származik. A referenciaanyag retenciós ideje és relatív molekulatömege alapján a 12. kromatográfiás csúcsot a2'-acetil-céliaozidként azonosítottuk.

Cistanche deserticola kísérlet

2.7.13 A 13. kromatográfiás csúcs azonosítása

A 13. kromatográfiás csúcs retenciós ideje 44,29 perc, az excimer ion csúcs m/z689 [M+Na] pozitív ion módban, az excimer ion csúcs m/z665 [M–H] - pedig negatív ion módban van megadva, a 13. csúcs relatív molekulatömege pedig a 66 ion időpontja. Az m/z503460 1 molekula koffein (163 Da) és 1 molekula acetil (43 Da) észterkötés-szakadásából származik. A referenciaanyag retenciós idejével és relatív molekulatömegével kombinálva a 13. kromatográfiás csúcsot antocianin B-ként azonosították.

2.7.14 A 14. kromatográfiás csúcs azonosítása

A 14. kromatográfiás csúcs retenciós ideje 46,67 perc. Az excimer ion csúcs m/z675 [M+Na] pozitív ion módban, az excimer ion csúcs m/z651 [M–H] - pedig negatív ion módban van megadva. A 14. csúcs relatív molekulatömege 652. Ugyanakkor az m/z475 fragmension a ferulsavcsoport 1 molekulájának (177Da) észterkötés-megszakító veszteségéből származik. A referenciaanyag retenciós idejével és relatív molekulatömegével kombinálva a 14. kromatográfiás csúcsot epimeridinozid A-ként azonosítottuk.

2.7.15 A 15. kromatográfiás csúcs azonosítása

A 15. kromatográfiás csúcs retenciós ideje 49,90 perc. Pozitív ion módban az m/z698 [M+NH4]+, 703 [M+Na +, m/z679 [M–H] -, 715 [M+Cl] - excimer ioncsúcs a negatív ion módban van megadva. A 15. csúcs relatív molekulatömege 680. Ugyanakkor az m/z517474 fragmension 1 molekula koffein (163 Da) és 1 molekula acetil (43 Da) észterkötés-szakadásából származik. A 15. kromatográfiás csúcsot a referenciaanyag retenciós ideje és relatív molekulatömege alapján cisztanche glikozid K-ként azonosítottuk.

2.7.16 A 16. kromatográfiás csúcs azonosítása

A 16. kromatográfiás csúcs retenciós ideje 55,36 perc. Pozitív ion módban az excimer ion csúcs m/z717 [M+N, míg negatív ion módban az m/z693 [M–H] -, 729 [M+Cl] - excimer ion csúcsok adódnak, így a 16. csúcs relatív molekulatömege 694. Egyúttal az m/z fragmentum517,47 származik belőle. 177 Da molekula ferulsavcsoport és 1 acetilcsoport 1 molekula 43 Da molekula észterkötés megszakítása. A referenciaanyag retenciós idejével és relatív molekulatömegével kombinálva a 16. kromatográfiás csúcsot J. cistanche glikozidként azonosították. A Cistanche deserticola 60%-os metanolos kivonatának kromatográfiás csúcsait HPLC-MS-sel azonosították, kombinálva az elválasztott referenciaanyag relatív molekulatömegével, retenciós idejével és fragmensionjával. Az eredmények azt mutatták, hogy a 16 kromatográfiás csúcs 17 komponensét pontosan azonosították (2. táblázat).

2. táblázat: A Cistanches Herba és a referencia standard vegyületek azonosított kromatográfiás csúcsai

3  . Vita

3.1 A vizsgálati cikk elkészítési módszerének kiválasztása

A tanulmány fő célja a Cistanche deserticola HPLC csúcsainak azonosítása. Ezért az extrakciós oldószer és az extrakciós módszer kiválasztása azon a képességen alapul, hogy több HPLC-csúcsot lehet elérni. A kutatócsoport hosszú távú kutatásokat végzett a Cistanche deserticolával kapcsolatban, és rengeteg munkát végzett a minőségelemzés terén. Ebben a cikkben a Cistanche deserticola extrakciós oldószerét és extrakciós módszerét is a kutatócsoport korábbi elemző munkái és a Kínai Gyógyszerkönyv (2015-ös kiadás) alapján választottuk ki. Végül 60%-os metanolos oldószeres ultrahangos extrakciót választottunk 40 percig extrakciós módszerként.

3.2 HPLC-MS állapot kiválasztása

Ebben a cikkben a kromatográfiás oszlop kiválasztása a kutatócsoport korai szakaszában a Cistanche deserticola minőségelemzésén, valamint az AgilentZORBAXEclipsePlusC18 (4,6mm × 250mm,5 μm), DionexC18 (4,6mm × 250mm,5 μmm × 5 μmm, (4,5mm × 250mm,5 μmm × 5 μ5 m), (. μ m) Kromatográfiás oszlop, végül válassza ki az AgilentZORBAXEclipsePlusC18 kromatográfiás oszlopot (4,6 mm × 250 mm, 5 μ m) Jó elválasztó hatású a Cistanche deserticolára; A 39 referenciaanyag közé tartozik a feniletanoid, a lignánok és a fenilpropanoid, így a detektálási hullámhossz 254 nm; Ugyanakkor megvizsgáltuk a mozgófázisok, mint a metanol-víz, acetonitril-víz, metanol-0,1% foszforsav víz, acetonitril-0,1% hangyasav víz kromatográfiás elválasztásra és tömegspektrometriás detektálásra gyakorolt ​​hatását, és végül az acetonitril-0,1% hangyasav-vizet választottuk mozgófázisnak.

3.3 Összefoglalás

Az ebben a tanulmányban kialakított módszer pontosan azonosított 17 komponenst a 60%-os metanol 16 kromatográfiás csúcsából.kivonataCistanche deserticola.

A kutatási eredmények nemcsak a gyógyászati ​​anyag további minőségi elemzéséhez rendelkeznek bizonyos referenciaértékkel, hanem elkerülhetik az ismétlődő munkát a gyógyászati ​​anyag ismert vegyületeinek szerkezeti azonosítása terén. Általában azonban viszonylag kevés azonosított kromatográfiás csúcs létezik, és sok kromatográfiás csúcsot nem sikerült azonosítani, mert nincsenek hozzárendelve a referenciaanyaghoz. A legtöbb azonosított komponens fenil-etanoid-glikozid, míg a lignánok ritkák. Ennek oka az lehet, hogy a Kínai Gyógyszerkönyv 2015-ös kiadásában hivatkozott extrakciós módszer főként fenil-etanol-glikozidokra irányul, vagy azért, mert ennek a gyógyászati ​​anyagnak a kivonatában túl magas az echinakozid és a coliformszerű vegyületek tartalma, ami megnehezíti más, kis tartalmú vegyületek kimutatását. A konkrét okokat tovább kell tisztázni.

[Referenciák]

[1] A Flora of China szerkesztőbizottsága. Kína flórája [M]. Peking: Science Press, 1990: 86

[2] Yang Junshan. Sivatagi ginzeng -- Cistanche deserticola [J]. Chinese Journal of Pharmacy, 2011, 46(12): 881.

[3] Tu Pengfei, Jiang Yong, Guo Yuhai és mások. A Cistanche deserticola kutatása és ipari fejlődése[J]. Chinese Journal of Pharmacy, 2011, 46 (12): 882-887

[4]Nemzeti Gyógyszerkönyvi Bizottság. A Kínai Népköztársaság gyógyszerkönyve. I. rész [M]Peking: China Pharmaceutical Science and Technology Press, 2015: 135

[5] JIANG Y, TU PF. Kémiai összetevők elemzése Cistanche fajokban ［J］． J Chromatogr A, 2009, 1216 (11): 1970-1979.

[6] PAN J, YUAN CS, LIN CJ, et al. A természetes fenilpropanoid glikozidok farmakológiai hatásai és mechanizmusai［J］． Pharmazie, 2003, 58(11): 767-775.

[7] FU GM, PANG HH, Wong Y. A természetben előforduló fenil-etanoid-glikozidok: potenciális vezetők új terápiákhoz［J］． Curr Med Chem, 2008, 15 (25): 2592-2613.

[8] Rhode Mei, Long Mei, Du Wenjing és mások. A Cistanche deserticola kivonat csontritkulás elleni hatásának mechanizmusa M KOOPG egereken ［ J ］. Kínai kísérlet Journal of Prescriptions, 2016, 22 (10): 138-142

[9] Ma Hui, Yin Ruoxi, Guo Min és mások. A Cistanche deserticola poliszacharid hatása a D-galaktóz által kiváltott öregedésre. A CREB expresszió hatása régi modell egerekben ［ J ］. Chinese Experimental Prescriptions Journal, 2014, 20 (20): 137-141

[10] Tao Yicun, Li Jianying, Xu Yonghua és mások. A Cistanche deserticola fenil-etanozidjának hatása patkányokra: Nagy magasságban kialakuló tüdőödéma megelőzése és kezelése ［ J ］. Chinese Journal of Experimental Prescriptions, 2014, 20(15): 134-138.

[11] Zhou Haitao, Cao Jianmin, Lin Qiang. Cistanche deserticola a patkányok kimerült úszóképességéről és a szívizom mitokondriális antioxidáns kapacitásáról ［ J ］. Kínai kísérleti képlet Journal of Science, 2012, 18 (6): 229-233

[12] NAN ZD, ZHAO MB, ZENG KW stb. Gyulladáscsökkentő iridoidok a Tarim sivatagban tenyésztett Cistanche deserticola szárából ［J］． Chin J Nat Med, 2016, 14(1): 61-65.

[13] NAN ZD, ZENG KW, SHI SP stb. Gyulladáscsökkentő hatású fenil-etanol-glikozidok a Tarim-sivatagban tenyésztett Cistanche deserticola szárából ［J］． Fitoterápia, 2013, 89: 167-174.

[14] Nan Ce-tung, Zhao Mingbo, Jiang Yong és mások. A Tazhongban termesztett sivatagi cisztanch kémiája: Összetételtanulmány ［ J ］. Chinese Journal of Traditional Chinese Medicine, 2013, 38 (16): 2665-2670.

[15] Nan Ce-tung, Zhao Mingbo, Jiang Yong és mások Lignans [J]. Chinese Journal of Traditional Chinese Medicine, 2015, 40 (3): 463-468.