A Cistanche alapú kapszulák enyhítik a krónikus, nem bakteriális prosztatagyulladást patkányokban azáltal, hogy modulálják a bélmikrobiótát, a szérum metabolitokat és az SPHK1/S1P1/PI3K/Akt jelátviteli útvonalat

3.5 A CBC szérum metabolizmusának elemzése EAP patkányokban

3.5.1 A széklet metabolizmusának többváltozós statisztikai elemzése

A főkomponens-analízis (PCA) egyértelmű csoportszétválást mutatott ki pozitív ion üzemmódban a csoportok közöttnormál, modell és nagy dózisú CBC csoportok, aA normál csoporthoz közelebb álló CBC csoport klaszterezikés távolabb a modellcsoporttól. Negatív ion módban részleges átfedés volt megfigyelhető a normál és a modellcsoport között, míg a CBC-kezelt minták továbbra is jó diszkriminációt mutattak (5. ábra).

A részleges legkisebb négyzetek diszkriminancia analízise (PLS-DA) erős osztályozási hatást igazolt mindhárom csoportban mindkét ionizációs módban. A200-szoros permutációs tesztvalidálta a modell megbízhatóságát, aQ² metszéspont 0,05 alatt, ami azt jelzi, hogy nincs túlillesztés. Csökkenő tendenciaR² és Q² értékekaz X tengely mentén tovább erősítette a modell stabilitását (6. ábra).

CISTANCHE ALAPÚ FORMULA TEA

Vásároljon most

 

 

 

 

 

3.5.2 A CBC által érintett differenciális metabolitok azonosítása

Az eltérő szérum metabolitokat szűrtük alapjánVIP > 1a PLS-DA-tól,szoros változás 1-nél nagyobb vagy egyenlő, ésp < 0,05. Az exogén vegyületek kizárása után10 jelentős endogén metabolitazonosították (9. táblázat).

 

3.5.3 KEGG-útvonal-dúsítási elemzés

A differenciális metabolitok KEGG-dúsítási analízise azt mutattaA CBC-kezelés módosíthatja a kulcsfontosságú metabolikus útvonalakatrészt vesz a krónikus prosztatagyulladásban. A gazdagított utak a következőket tartalmazták:

Szfingolipid anyagcsere

Retinol anyagcsere

A glicin, szerin és treonin metabolizmusa

Glicerofoszfolipid anyagcsere

Az arachidonsav metabolizmusa(7. ábra)

Ezek az utak köztudottan fontos szerepet játszanakimmunszabályozás, oxidatív stressz és gyulladás.

3.5.4. Összefüggés a differenciális metabolitok és a bélmikrobióta között

Spearman korrelációs analízist végeztünk a 10 különböző metabolit és a szignifikánsan megváltozott baktérium taxon között. A figyelemre méltó összefüggések a következők voltak:

PA(6-keto-PGF1 /i-20:0): pozitívan korrelál aLactobacillusésRomboutsia ilealis, negatívan -valNeglectibacter timonensis

SM[d16:2/20:4-2OH]: pozitívan korrelál aParaprevotella claraésRomboutsia ilealis

PS[18:1/20:0]: pozitívan korrelál aRomboutsia ilealis, negatívan -valOscillospiraceae

lysoPA(0:0/18:0): negatívan korrelál aLactobacillusésRomboutsia ilealis, pozitívan aNeglectibacter timonensis

Ureidoizovajsav: negatívan korrelál aParaprevotella clara

16(R)-HETEés(2R,3R)-2-aminooktadekán-1,3-diol: pozitívan korrelál aNeglectibacter timonensis

Szfingozin: negatívan korrelál aRomboutsia ilealis, pozitívan aNeglectibacter timonensis

lysoPA(18:0/0:0)ésRetinoil-glükuronid: negatívan korrelál aBifidobacterium animalisésRomboutsia ilealis(8. ábra)

Ezek az összefüggések arra utalnakszoros kapcsolat a CBC által kiváltott metabolomikus változások és a bél mikrobiota modulációja között.

 

3.6 Az SPHK1/S1P1/PI3K/Akt útvonal szabályozása a CBC által

A Western blot analízis azt mutattaAz SPHK1 és S1P1 fehérje expressziója szignifikánsan emelkedett a modellcsoportbana normál csoporthoz képest. CBC (nagy dózisú) szignifikánsancsökkentette az SPHK1 és S1P1 fehérjeszinteket. Nem volt szignifikáns különbség az SPHK2 expressziójában a csoportok között (9. ábra, 10. táblázat).

EzenkívülPI3K és AktAz expressziós szintek szignifikánsan csökkentek a modellcsoportban, mígp-PI3K és p-Aktszignifikánsan megemelkedett, ami az útvonal aktivációját jelzi. CBC kezelésvisszaállította a PI3K és Akt szintetésgátolta a foszforilációjukat, csökkenti ap-Akt/Akt és p-PI3K/PI3K arányok.

Ezek az eredmények arra utalnakA CBC gátolja az SPHK1/S1P1/PI3K/Akt jelátviteli útvonalat, hozzájárulva gyulladáscsökkentő hatásához.

4. Vita

A krónikus, nem bakteriális prosztatagyulladás (CNP) több mint okot jelentAz összes prosztatagyulladás 90%-aés összetett etiológiához kapcsolódik, beleértvepatogén mikrobiális fertőzés, oxidatív stressz, immunrendszeri zavarok és autoimmun válaszok [20–21].

A legújabb bizonyítékok arra utalnakgyulladás és autoimmunitásközponti szerepet játszanak a CNP patogenezisében [22–24]. Akísérleti autoimmun prosztatagyulladás (EAP) patkánymodellEzért választották ki a humán CNP-t a hisztopatológiában és az immunválaszban utánzót [25].

Korábbi szérumfarmakokémiai vizsgálataink során CBC komponenseket találtak anagyobb bőség a székletben, mint a szérumban, arra utalvaaz intesztinális interakció, mint elsődleges hatásút(lásd a CNKI továbbfejlesztett kiadványanyagait).

A CBC javítja a prosztata patológiáját és a gyulladásos indexeket

A HE festés azt mutatta, hogy a CBC enyhültlimfocita infiltráció, felújítottacinus szerkezet, és növekedettmirigyváladék. CBC jelentősencsökkent leukocitaszámprosztata homogenizátumokban és helyreállítottáklecitin testsűrűsége-mindkét kulcsfontosságú CNP diagnosztikai marker [26–28]. A gyulladás hámkárosodáshoz és csökkent lecitinkiválasztáshoz vezet, míg az aktivált makrofágok elnyelik a lecitintesteket [29]. A CBC hatékonyan visszafordította ezeket a kóros elváltozásokat.

CBC iscsökkent gyulladást elősegítő citokinek(TNF-, IL-1, IL-6, IL-8, IL-2, iNOS) ésemelkedett gyulladáscsökkentő IL-10, támogatja erős gyulladáscsökkentő hatását.

 

A CBC szabályozza a bélmikrobióta diszbiózist

A CNP szorosan kapcsolódika bél mikrobiota egyensúlyhiánya, ami csökkenthetirövid szénláncú zsírsavak (SCFA-k)és veszélyeztetik a bélgátat, lehetővé téveLPS transzlokációés prosztatagyulladás kiváltása révénmikrobiális eredetű molekuláris minták (MAMP) [30].

Tanulmányok azt mutatjákCistanche polifenolokjavítja a mikrobiota kiegyensúlyozatlanságát és modulálja az érintett kulcsfontosságú taxonokatgyulladásos bélbetegség (IBD)[31]. Ebben a tanulmánybanLactobacillus és Bifidobacterium animalisEAP patkányokban kimerültek, de a CBC kezelést követően helyreálltak. Ezekről a probiotikumokról ismert, hogy enyhítik az urogenitális gyulladást [32–33]. Ezzel szembenVeillonella, gyakran autoimmun állapotokban [34], emelkedett EAP patkányokban, és csökkent a CBC beadása után. Hasonlóképpen,Prevotellaceae, amely prosztatarákhoz társul [35], az EAP csoportban gazdagodott, és a CBC csökkentette.

 

A CBC modulálja a kulcsfontosságú metabolikus útvonalakat

Kiderült az anyagcsereszfingozin emelkedésEAP patkányokban a CBC jelentősen csökkentette, ami arra utal, hogy részt vesznek aszfingolipid anyagcsere. A szfingolipidek kulcsfontosságú szerkezeti és jelzőmolekulák, amelyek részt veszneksejtnövekedés, apoptózis és immunszabályozás [36].

Szfingozin-1-foszfát (S1P)által szintetizáltSPHK1/2, egy erős lipid közvetítő, amely kötődikS1P receptorok (S1PR-ek)szabályozza az immunsejtek kereskedelmét, és részt vesz agyulladásos és autoimmun betegségek[37–39]. Az S1PR modulátorFTY720 (fingolimod)kimutatták, hogy csökkenti a gyulladást és a szövetkárosodást az EAP modellekben [40].

Az S1P olyan downstream útvonalakat is aktivál, mint plPI3K/Akt, amelyek krónikus gyulladással járnak. Tanulmányunkban a CBCleszabályozott SPHK1 és S1P1, és gátoltPI3K és Akt foszforiláció, ami arra utal, hogy szabályozó hatása van ezen a kritikus tengelyen.

 

Következtetés

Ez a tanulmány, integrálvaa bél mikrobióta szekvenálása és a nem célzott metabolomika, ezt bizonyítjaCistanche-alapú kapszulák (CBC)hatékonyan:

Javítaniprosztata szövetkárosodás

Elnyomnigyulladásos citokinek

Visszaállításjótékony bélflóra

Szabályozzaszfingolipid anyagcsere

GátlásSPHK1/S1P1/PI3K/Akt jelzés

Ezek a megállapítások biztosítjákmeggyőző bizonyítékoka CBC potenciáljára, mint atöbbcélú gyógynövényterápia krónikus nem bakteriális prosztatagyulladás kezelésére, és ajánlat atudományos alapja kiterjesztett klinikai alkalmazásának.