Mechanisztikus tanulmány a krónikus prosztatagyulladás javulásáról Cistanche tablettákkal a STAT3/HIF-1 /glikolízis tengelyen keresztül
Nov 11, 2025
Absztrakt
Ez a tanulmány a terápiás mechanizmust vizsgáljaCistanche tabletták (CT)krónikus prosztatagyulladás kezelésében keresztül aSTAT3/HIF-1 /glikolízis jelzőtengely. A kísérleti autoimmun prosztatagyulladás (EAP) patkánymodelljét hozták létre a Cistanche tabletták hatékonyságának értékelésére. A hím Wistar patkányokat véletlenszerűen hat csoportra osztották (n=7 csoportonként): kontroll, modell, alacsony, közepes és nagy dózisú CT-csoportok (197,2, 591,5 és 1774,4 mg/kg/nap), valamint pozitív kontrollcsoport (Pusitai, 34,2 mg/kg/nap). A modellindukciót követően az összes kezelést négy egymást követő héten keresztül adtuk.
A hematoxilin és eozin (HE) festéssel végzett szövettani elemzés a prosztatagyulladást és a mirigykárosodást értékelte. Az interleukin-8 (IL-8), az interleukin-1 (IL-1) és az immunglobulin G (IgG) szérumszintjét ELISA-val mérték. A foszforilált STAT3 (p-STAT3), HIF-1, többszörös inozit polifoszfát foszfatáz 1 (MINPP1) és hexokináz (HK) fehérje expresszióját prosztataszövetekben Western blottal és immunhisztokémiával értékeltük. A nem célzott metabolomikát a különböző metabolitok és a kapcsolódó metabolikus útvonalak azonosítására alkalmazták.
Az eredmények azt mutatták, hogy a CT szignifikánsan enyhítette a prosztata patológiás károsodását. Az ELISA csökkentett IL-8, IL-1 és IgG szérumszinteket mutatott ki. Western blot és immunhisztokémia kimutatta, hogy a CT csökkentette a p-STAT3-at, a HIF-1-t és a HK-t, míg a MINPP1-et felfelé szabályozta. A metabolomika 96 különböző metabolitot azonosított, és feltárta, hogy a CT a glikolízis és az arachidonsav metabolizmus modulálásával fejtheti ki terápiás hatását.
Következtetés:A Cistanche tabletták enyhíthetik a gyulladást és gátolhatják a krónikus prosztatagyulladás progresszióját azáltal, hogy megcélozzák a STAT3-at, elnyomják a HIF-1 jelátvitelt és szabályozzák a glikolitikus anyagcserét.
Kulcsszavak: Cistanche tabletták; ckrónikus prosztatagyulladás; metabolomika; HIF-1 jelzési útvonal; glikolízis
Cistanche Előnyök a prosztata és a vese számára
Tegye a kosárba a cisztanche pirulákat
Wecistanche támogató szolgáltatása – Kína legnagyobb cisztanche exportőre:
E-mail:wallence.suen@wecistanche.com
vagy
Bevezetés
A krónikus prosztatagyulladás gyakori urológiai betegség a férfiaknál, amelyet vizeletürítési zavar, fájdalmas vizelés, sürgősség és perineális kellemetlenség jellemez. Ez a prosztatagyulladás legelterjedtebb típusa, amely jelentősen befolyásolja a betegek életminőségét. A tanulmányok 6,0–32,9%-os prevalenciáról számolnak be kínai férfiaknál és 2,0–16,0%-ról nemzetközi szinten. A jelenlegi nyugati kezelések antibiotikumokra és NSAID-okra támaszkodnak, de a hosszú távú használat gyakran gyomor-bélrendszeri mellékhatásokhoz vezet.
A krónikus prosztatagyulladás etiológiája és patogenezise összetett, beleértve az immunrendszer diszregulációját, a neuroendokrin egyensúlyhiányt és az életmódbeli tényezőket. Az immunológiai rendellenességek és az anyagcserezavarok kulcsfontosságú aggodalomra okot adó területek.
A hagyományos kínai orvoslás (TCM) szemszögéből a krónikus prosztatagyulladás a vese-qi-hiányhoz, a nedves-hő felhalmozódásához és a vér pangásához kapcsolódik.Cistanche tablettákHagyományos kórházi készítményből származnak [jóváhagyási szám: Z04000524], a "Cheng's Bi Xie Fen Qing Yin" és a "Cuscuta tabletta" klasszikus formulán alapulnak. Ez a képlet tíz gyógynövényt tartalmaz, mint plCistanche deserticola, Dioscorea, ésPolyporus umbellatus, és hagyományosan a vese tonizálására, az esszencia biztosítására, a vizeletürítés elősegítésére és a zavarosság megszüntetésére használják.
Klinikai vizsgálatok megerősítették, hogy a Cistanche tabletták hatékonyan csökkentik a prosztatagyulladás tüneteit, és jó biztonsági profillal javítják az életminőséget. A legtöbb létező kutatás azonban a klinikai megfigyelésekre összpontosít, és a pontos terápiás mechanizmusok továbbra is tisztázatlanok.
A legújabb bizonyítékok arra utalnak, hogy a krónikus prosztatagyulladás abnormális glikolízissel és a hipoxia által indukálható 1-es faktor (HIF-1) túlzott expressziójával jár, így a kezelés potenciális célpontja. Ezenkívül a STAT3 útvonal szabályozása új stratégiaként jelent meg a krónikus gyulladás és az autoimmun válaszok szabályozásában. Ez a tanulmány a Cistanche tabletták terápiás mechanizmusát tárja fel in vivo kísérleteken és metabolomikán alapulva, és új bizonyítékot kíván nyújtani a gyógynövénykészítmények krónikus prosztatagyulladásban való alkalmazására.
Anyagok és módszerek
1. Anyagok
Állatok:42 SPF-minőségű hím Wistar patkányt (190–210 g) a Suzhou SPF Biotechnology Co., Ltd.-től vásároltunk. Az állatokat standard körülmények között (20±3 fok, 55%±5% páratartalom, 12 órás világos/sötét ciklus) tartottuk, és ad libitum táplálékkal és vízzel láttuk el. A vizsgálatot az intézményi állatetikai bizottság hagyta jóvá (jóváhagyási szám:. 2023112001).
Gyógyszerek és reagensek:
Cistanche tabletták
Pusitai tabletták (pozitív kontroll)
Sóoldat, PBS puffer, komplett Freund-adjuváns
ELISA készletek IL-8, IL-1 és IgG számára
Antitestek: p-STAT3, HIF-1, MINPP1, HK
Másodlagos antitestek és immunhisztokémiai reagensek
Hangszerek:
LC-MS rendszerek (Triple TOF 6600, Agilent 1290 Infinity LC)
Nagy sebességű centrifuga, homogenizátor, mikrolemez-leolvasó és precíziós mérleg
2. Módszerek
2.1 In vivo vizsgálat
2.1.1 Krónikus prosztatagyulladás modellje
Kísérleti autoimmun prosztatagyulladás (EAP) modellt indukáltunk komplett Freund-adjuvánssal emulgeált homogenizált prosztataszövet felhasználásával. A patkányok szubkután injekciót kaptak az 1. és 28. napon több helyre (tarkó, lágyék és hátsó mancsok). A kontroll patkányok sóoldat injekciót kaptak. A modell sikerét viselkedési jelek és kórszövettani vizsgálatok igazolták.
2.1.2 Csoportosítás és kezelés
A modell megerősítése után a patkányokat véletlenszerűen hat csoportra osztották: kontroll, modell, alacsony, közepes, nagy dózisú CT és Pusitai csoport. A CT tápközeg dózisát a klinikai ekvivalens adagolás szerint állítottuk be. A kezeléseket szájon át naponta egyszer adták 28 napon keresztül.
2.1.3 Mintagyűjtés
Az utolsó napon 24 órás vizelet- és vízbevitelt rögzítettek. Az eutanázia után vért és prosztataszövetet vettünk. Kiszámoltuk a prosztata indexet (prosztata tömeg/testtömeg). A szöveteket vagy formalinban fixáltuk, vagy folyékony nitrogénben lefagyasztottuk további elemzés céljából.
2.1.4 Általános megjegyzések
A modellezés és a kezelés során a patkányok viselkedését, szőrzetének állapotát és általános egészségi állapotát figyelték.
2.1.5 ELISA a szérum citokinekhez
A szérum IL-8, IL-1 és IgG szintjét ELISA-val mértük a gyártó utasításait követve.
2.1.6. Szövetpatológia (HE-festés)
A formalinnal fixált prosztata szöveteket paraffinba ágyaztuk, és metszettek a HE festéshez. Mikroszkóp alatt gyulladást és szövetkárosodást figyeltek meg.
2.1.7 Immunhisztokémia a MINPP1-hez és a HK-hoz
A standard IHC-eljárásokat követték, beleértve a paraffinmentesítést, az antigén-visszakeresést, a blokkolást, az elsődleges és másodlagos antitest-inkubálást, a DAB-festést és a hematoxilin ellenfestést. A pozitív festődés számszerűsítésére ImageJ szoftvert használtunk.
2.1.8 Western Blot a p-STAT3 és HIF-1
A fagyasztott prosztataszöveteket lizáltuk, és meghatároztuk a fehérjekoncentrációkat. Az SDS-PAGE és PVDF membrántranszfert blokkolással, primer/szekunder antitest inkubációval, ECL fejlesztéssel és denzitometriával követtük ImageJ segítségével.
2.1.9 Statisztikai elemzés
Az adatokat GraphPad Prism 9.5.1 segítségével elemeztük. Az eredményeket átlag ± SD formában fejeztük ki. Egyutas ANOVA-t, majd LSD post hoc tesztet alkalmaztunk. P<0.05 was considered statistically significant.
2.2 A szérum metabolizmusa
2.2.1 Minta-előkészítés
A kontroll-, modell- és közepes dózisú CT-csoportokból származó szérumot felengedtük, hideg metanol-acetonitril-víz keverékkel kevertük össze, ultrahanggal kezeltük és centrifugáltuk. A felülúszókat szárítottuk, és az LC-MS analízishez helyreállítottuk.
2.2.2 LC-MS körülmények
A metabolitokat UPLC BEH Amide oszlop segítségével választottuk el, specifikus gradiens elúciós profillal. Az adatokat pozitív és negatív ion módban is gyűjtöttük nagy érzékenységű IDA móddal.
2.2.3 Adatfeldolgozás
Raw data were converted to .mzML format, processed using XCMS for peak identification, alignment, and normalization. Metabolites with >50% missing values were removed. PCA and PLS-DA were used for multivariate analysis. Significant metabolites were filtered based on VIP >1.0 és p<0.05, and KEGG pathway enrichment was performed.
Eredmények és megbeszélés
A Cistanche tabletták jelentősen javították a prosztata kórszövettani változásait, csökkentették a gyulladásos citokinek mennyiségét, és szabályozták a kulcsfontosságú fehérje expresszióját a STAT3/HIF-1 /glikolízis tengelyben. A metabolomika a glikolízis és az arachidonsav-anyagcsere modulációját tárta fel, ami mind gyulladásgátló, mind metabolikus szabályozó mechanizmusokra utal.
Ezek az eredmények alátámasztják a fejlesztéstCistanche alapú gyógynövény-kiegészítőka krónikus prosztatagyulladás ígéretes természetes terápiájaként, amely többcélú szabályozást kínál jó biztonsággal.
