A Cistanche Tubulosa összetételének elemzése: A fenil-etanol-glikozid és a neolignán-glikozid szétválasztása és szerkezete
Mar 14, 2022
Kapcsolatba lépni:joanna.jia@wecistanche.com
A Cistanche Tubulosa (Schrenk) horog összetevői. F. II.1) Egy új fenil-etanol-glikozid és egy új neolignán-glikozid izolálása és szerkezete
Fumio Yoshizawa,* egy Takeshi Deyama/Nobuo Takizawa/Khan UsmanghaniJ és Mansoor Ahmad6
Central Research Laboratories, Yomeishu Seizo Co., Ltd., a 2132-37 Nakaminowa, Minowa-machi, Kamiina-gun, Nagano 399-46, Japán és Farmakognóziai Tanszék, Gyógyszerészeti Kar, Karacsi Egyetem? Karacsi-32, Pakisztán. 1989. november 9-én érkezett
Egy újfeniletanoid glikozidtubulozid E (I), és egy újneolignán glikozid, dehidrodikoniferil-alkohol yO-0-D-glükopiranozidot (II) izoláltunk az egész növényből.Cistanche tubulosa (Schrenk) Hook. f. (Orobanchaceae), together with dehydrodiconiferyl alcohol 4-O-^-D-glucopyranoside (III), syringalide A 3'-a-L- rhamnopyranoside (IV), isosyringalide S'-a-L-rhamnopyranoside (V), (+ )-syringaresinol O-^-D-glucopyranoside (VI), ( + )-pinoresinol O-^-D-glucopyranoside (VII), liriodendron (VIII), 6-deoxycatalpol (IX), 8-epiIoganic acid (X), 20-hydroxyecdysone (XI), 8-hydroxygeraniol l-j?-D-glucopyranoside (XII) and syringin (XIII). The structure of tubuloside E (I) was established as 2-(3,4-dihydroxy phenyl)ethyl O-a-L-rhamnopyranosyl-(l ->3) -2-O-acetil-4-Opkumaroil-^-D-glükopiranozid kémiai bizonyítékok és spektrális adatok alapján.
Kulcsszavak Cistanche tubulosa-, Orobanchaceae;fenil-etanol-glikozid;iridoid; tubulozid E; dehidrodikoniferil-alkohol-glikozid; sziringalid ramnozid;neolignán glikozid; 13C-NMRMOE
feniletanoid-glikozid a cistanchában
Egy korábbi cikkünkben beszámoltunk az újak izolálásáról és szerkezeti meghatározásárólfeniletanoid glikozidok, tubulosides A一D az egész növénybőlCistanche tubulosa(Schrenk) Horog. f. (Orobanchaceae) Pakisztánban.
Ez a cikk egy új izolálásával és szerkezeti feltárásával foglalkozikfeniletanoid glikozid, tubulozid E (I), és egy újneolignán glikozid, dehidrodikoniferil-alkohol ■/-QgD-glükopiranozid (II), valamint 11 ismert vegyület izolálása, dehidrodikoniferil-alkohol 4-OgD-glükopiranozid (III), sziringalid A 3'-aL-ramnopiranozid (IV), izosiringalid 3'-aL-ramnopiranozid (V), ( plusz )-sziringarezinol OgD- glükopiranozid (VI), ( plusz )-pinorezinol OgD-glükopiranozid (VII), liriodendron (VIII), 6-dezoxikatalpol (IX) , 8- epilogánsav (X), 20-hidroxi-ekdizon (XI), 8-hidroxi-geraniol 1-gD-glükopiranozid (XII) és sziringin (XIII). A VI., VIII一X., XII. és XIII. vegyületeket korábban a Cistanche salsa-ból izolálták.
Az E (I) tubulozidot amorf por formájában izoláltuk, C31H38O15 -3/2H2O, [a】D -134.0 fok (MeOH). Az infravörös (IR) spektrum hidroxilcsoportok (3430cm-1), konjugált észter (1734 cm-x), kettős kötés (1634 cm-1) és aromás gyűrűk jelenlétére utalt. 1608 és 1518 cm-1). Az I proton mágneses magrezonancia 0H-NMR) spektruma a ramnóz metilcsoportjának 0 1,07 (3H, d, J= 6 Hz)], acetoxilcsoportjának {{22} jeleit mutatta. },98 (3H, s)], benzil-metilén-protonok 0 2,72 (2H, t, J-1 Hz)], glükóz-anomer proton 0 4,54 (1H, d, J{{ 32}} Hz)], egy ramnózanomer proton 0 5.00 (1H, br s)], két olefin proton [<5 6.34,="" 7.66="" (1h="" each,="" d,="" j="16" hz)]="" and="" aromatic="" protons="" 0="" 6.50—7.46="">
Az acetilezés során az I. vegyület (la) oktaacetátot eredményezett, amelynek 】H-NMR spektruma öt alifás acetoxilcsoportot mutatott 0 1,87, 1,95, 2,02 (mindegyik 3H, s), 2,10x2 (6H, s)] és három aromás acetoxilcsoport [<5 2.27,="" 2.28,="" 2.31="" (3h="" each,="" s)].="" as="" shown="" in="" table="" i,="" the="" carbon="" nuclear="" magnetic="" resonance="" (13c-nmr)="" spectrum="" of="" i="" was="" almost="" identical="" with="" that="" of="" 2'-acetylacteoside="" (ib)「)except="" for="" the="" signals="" due="" to="" the="" ^-coumaric="" acid="">
Az I acetil-kloriddal metanolos metanollal végzett metanolosítása során vékonyréteg-kromatográfiával (TLC) és nagy teljesítményű folyadékkromatográfiával (HPLC) metil-p-kumarátot és 3,{2}}dihidroxi-fenetil-alkoholt mutattunk ki.
Az I vegyület 10%-os kénsavval végzett savas hidrolízise 1:1 arányú glükózt és ramnózt eredményezett.
From the above results, the structure of tubuloside E (I) was established as 2-(3,4-dihydroxy phenyl)ethy 1 O-a-L- rhamnopyranosyl-( 1 -^3)-2-(?-acetyl-4-O-/>-kumaroil-^-D-glükopiranozid.
A (III) vegyületet amorf por formájában izoláljuk, [a]D-56,4 fok (MeOH). A (III) vegyület enzimatikus hidrolízise amorf por formájában aglikont (Illb), [0]270-11300, [a]D-31,6 fok (MeOH) és glükózt eredményez. A IIIb és III vegyületet dehidrodikoniferil-alkoholként3,4) és ennek 4-O-#-D-glükopiranozidját,3,4) azonosítottuk, a hiteles mintákkal (TR,】H- és 13C-NMR spektrumok) összehasonlítva. .
A (II) vegyületet amorf por formájában izoláltuk, [a]D 一 7,4 fok (MeOH), amelynek IR-spektruma hidroxilcsoport (3430 cm{3}}) és aromás gyűrű (1614, 1522, 1502 cm) jelenlétére utalt. T). A II 〔H-NMR-je két aromás metoxicsoport 0 3,74, 3,80 (3H, s)], egy benziles proton 0 5,45 (1H, d, J{{) jeleit mutatta. 16}}Hz)], két transz olefin proton 0 6,17 (1H, dt, J= 16, 7 Hz), d: 6,58 (1H, d, J= 16 Hz)] és öt aromás proton 0 6,7一7,1 (5H, m)]. Acetilezéskor a (II) képletű vegyület hexaacetátot (Ila) eredményezett, amelynek 'H-NMR-spektruma öt alifás acetil-szignált mutatott 0 2,01, 2,03, 2,09, 2,06 (3H, 3H, 3H, 6H)]. A (II) általános képletű vegyület enzimatikus hidrolízise aglikont (lib) és glükózt eredményez. A lib vegyületet amorf por formájában izoláltuk, [a]D plusz 34,8 fok (MeOH), amelynek IR-, iH- és 13C-NMR-spektrumai majdnem megegyeztek a Illb spektrumaival, kivéve [a]D-értékeket és cirkuláris dikroizmust (CD). ) spektrum.
A lib abszolút konfigurációját a CD spektrumának az Illb és III spektrumának összehasonlításával tisztáztuk, amelyek sztereokémiáját publikált adatok igazolták.4) A lib CD spektruma A& plusz 14100 (270) és plusz 15200 (283) értéket mutatott. Ezzel szemben az Illb pozitív maximuma A& -11300 (270) és -10990 (283) negatív maximumot mutatott. Ezek a tények arra utalnak, hogy a lib és az Illb egymás enantiomerjei. A lib sztereokémiájának meg kell egyeznie az 1. diagramon láthatóval.
Így a (II) általános képletű vegyület dehidrodiko-niferil-alkohol-monoglükozid. A glükóz helyzete
illetőleg. A megfelelő szénatomok eltolódása a lib-ből a II-be jutva -4,4 és plusz 7,3 ppm volt, ami azt jelzi, hogy a II-ben lévő glükozilcsoport a Cy' atomnál lévő hidroxilcsoporthoz kapcsolódik.5)
A fenti eredmények alapján a (II) általános képletű vegyületet dehidrodikoniferil-alkohol-y'-O-^-D-glükopiranozidként határoztuk meg.
A (IV) és (V) vegyületet amorf por formájában izoláltuk (IV, C29H36O14 • 5/2H2O; V, C29H36O14- 1/2H2O). Az IR-spektrumok hidroxilcsoportok (3400 cm7), kettős kötés (1634 cm-1) és aromás gyűrűk (1606 és 1518 cm-1) jelenlétére utaltak. Acetilezéskor a IV. és V. vegyület oktaacetátokat eredményezett ( IVa, Va), amelynek 1H-NMR spektruma öt alifás acetoxil és három aromás acetoxil jelet mutatott. A IVa és Va vegyületet sziringalid-A-3'-aL-ramnopiranozid-oktaacetátként és izosyringalid-3'-aL-ramnopiranozid-oktaacetátként azonosítottuk, az (以 IR és 】H-NMR) hiteles mintákkal való összehasonlításával.6) A 'H- és A IV és V13C-NMR spektruma alátámasztotta ezeket a szerkezeteket (lásd Kísérleti rész). A VI-XIII. vegyületeket (plusz )-fecskendő-eszinol O-少-D-glükopiranozid (VI),2c) (plusz)-pinorezinol O-ként azonosítottuk. jS-D-glükopiranozid (VII),7) liriodendrin (VIII),2Z,) 6-dezoxikatalpol (IX),2c) 8-epilogánsav (X),2fl) {{50} }hidroxiekdizon (XI),8) 8-hidroxigeraniol 1-0-D-glükopirano-szid (XII) és sziringin (XIII),2d), összehasonlítva az autentikus mintákkal
Kísérleti
Az olvadáspontokat Mitamura mikroolvadáspont-mérőkészülékkel határoztuk meg, és nem korrigáltuk. Az optikai elfordulásokat JASCO DIP{1}} digitális polariméterrel mértük. Az IR spektrumokat Hitachi 279-30 IR spektrofotométerrel, az ultraibolya (UV) spektrumot pedig Hitachi 200-20 spektrofotométerrel vettük fel. A CD-spektrumokat JASCO J-20A CD spektrofotométerrel, a tömegspektrumokat (MS) pedig JEOL JMS-100-vel vettük fel. Az 'H-NMR és 13C-NMR spektrumokat JEOL FX-90Q géppel vettük fel (89,55 és 22,5 MHz).
A kémiai eltolódásokat a d (ppm) skálán adjuk meg, belső standardként tetrametil-szilánt (TMS). A mágneses magrezonancia (NMR) adatokhoz használt rövidítések a következők; s, szingulett; d, dublett; t, triplett; q, kvartett; br, széles. A gázkromatográfiát (GC) egy Shimadzu GC{0}}CM készüléken, lángionizációs detektorral végeztük. A HPLC-t Hitachi 655A-11 gépen végeztük. Az oszlopkromatográfiához szilikagélt (Wako gel C-300) használtunk. Szilikagél 60 F254 (Merck) előbevonatú lemezeket használtunk a vékonyréteg-kromatográfiához, és a detektálást 10%-os H2SO4 permetezéssel, majd melegítéssel végeztük.
Elkülönítés
Egész növényeicistanche tubulosaAz 1986 decemberében a pakisztáni Karacsiban gyűjtött 7 kg-ot MeOH-val (20 1 x 2) extraháltuk visszafolyató hűtő alatt. Az extraktumot csökkentett nyomáson bepároljuk, és a maradékot vízben szuszpendáljuk. Ezt a szuszpenziót vízzel telített EtOAc-tal extraháltuk. A vizes réteget Diaion HP-20 (Nippon Rensui Co.) oszlopnak vetjük alá, vízzel mossuk, majd MeOH-val eluáljuk. A MeOH eluátumot (140 g) poliamid C-200 (Wako Pure Chemical) oszlopon kromatografáltuk H2O, majd MeOH alkalmazásával, így két frakciót kaptunk (1. frakció, H2O eluátum; 2. frakció, MeOH eluátum). Az 1. frakciót bepároljuk, így egy maradékot kapunk. A maradékot szilikagél oszlopon CHCl{13}}MeOH-H2O ismételten kromatografáltuk. A HPLC ismételt kromatográfiája (oszlop, Develosil ODS-10, 20 x 250 mm; oldószer; H2O-CH3CN vagy H2O-MeOH) 10 vegyületet izoláltunk [II (45 mg), III (40 mg), VI (35 mg). ), VII (43 mg), VIII (12 mg), IX (8 mg), X (10 mg), XI (20 mg), XII (10 mg) és XIII (3,6 mg)]. A 2. frakciót ugyanúgy kezeltük, mint az 1. frakciót, és így az I (150 mg), IV (10 mg) és V (10 mg) vegyületet kaptuk.
Tubulozid E (I)
Amorf por, [a]p3 -134.0 fok (c= 1.5, MeOH). Anális. Számított C31H38O15 -3/2H2O: C, 54,98; H 6,10. talált: C, 55,01; H 5,98. IR cm-1: 3430,1732, 1634, 1608,1518. ]H-NMR (MeOH{24}}) 3: 1,07 (3H, d, J=6 Hz, ramnóz CH3), 1,98 (3H, s, OAc), 2,72 (2H, t, J{ {37}}Hz, Ar-CH2~), 4,54 (1H, d, J=8Hz, glükóz Hl), 500 (1H, brs, ramnóz Hl), 6,34 ( 1H, d, J= 16Hz, Ar-CH=CH-), 6,5-6,8 (3H, aromás H), 6,80 (2H, d, J-9Hz, H{ {65}}; H-5'), 7,46 (2H, d, J=9Hz, H-2; H-6Z), 7,66 (1H, d, J= 16 Hz, Ar—CH=CH—). 13C-NMR: L táblázat
Dehidrodikoniferil-alkohol y^-O-^-D-GIukopiranozid (II)
Amorf por, [a]^5 -7,4 fok (c= 1,6, MeOH). IR cm"1: 3430, 1614, 1522, 1502. UV h nm: 227 (sh), 280. H・NMR (DMSO-rf6) J: 3,74, 3,80 (mindegyik 3H, s, OCH3), 5,45 (1H, d, 丿=6 Hz, Ha), 6,17 (1H, dt, 丿=16, 7 Hz, H-#), 6,58 (1H, d〃= 16Hz; H-az) 6,7-7,1 (5H, m, aromás H).13C-NMR: I. táblázat.
Dehidrodikoniferil-alkohol 4-Oj8-D-glükopiranozid (III)
Amorf por, [a]^5 -56.4.(c= 1.1, MeOH). IR cm-1: 3400, 1604, 1566, 1502. UV 11 nm; 222, 277. XH-NMR (DMSO-(76) 5: 3,76, 3,82 (mindegyik 3H, s, OCH3), 5,52 (1H, d, J-7 Hz, Ha), 6,18 (1H, dt, J=16, 7 Hz, H-^), 6,49 (1H, d,<7=16 hz,="" h-"),="" 6.7—7.2="" (5h,="" m,="" aromatic="" h).="" 13c-nmr:="" table="">
Sziringalid A 3'-(xL-ramnopiranozid (IV)
Amorf por, Anal. C29H36O14 • 5/2H2O képletre számított: C, 56,11; H 5,94. talált: C, 56,4{{107}}; H 6,04. IR cm- százalék 3400, 1606, 1518. 】H・NMR (MeOH-J4) d: 1,15 (3H, d, J-6 Hz, ramnóz CH3), 2,90 (2H, t, J{{27) }} Hz, Ar-CH2-), 4,46 (1H, d, J=8Hz, glükóz Hl), 5,27 (1H, brs, ramnóz Hl), 6,35 (1H, d, J-16Hz, Ar-CH =CH-), 6,6-7,3 (3H, aromás H), 7,68 (1H, d, J=16Hz, Ar-CH {{54) }} CH-). 13C-NMR (CD3OD) 8: 130,6 (Cl), 116,1 (C{65}}), 130,8 (C{68}}, 156,6 (C{71}}), 116,1 (C{74}}). ), 72,1 (Ca, rham-2, 3), 36,2 (C-8), 127,6 (Cr), 114,6 (C2), 149,6 (C・3'), 146,6 (C{{94) }}'), 116,4 (C-5'), 123,1 (C-6'), 168,2 (C・a'), 115,2 (C书), 147.{106}},0 (glu-1), 76.0
(glu-2), 81,5 (glu-3), 70,3 (glu-4), 75,9 (glu-5), 62,3 (glu-6), 102,8 (rham-1), 73,7 (rham-4), 70,5 (rham-5), 18,3 (rham-6).
Izosyringalid S^aL-ramnopiranozid (V)
Amorf por, Anal. Számított C29H36O14-1/2H2O: C, 56,31; H 5,96. Megtalált; C, 56,4{{70}}; H 6,04. IR 唸cm{13}}: 3420, 1608, 1518. XH-NMR (MeOH-J4) d: 1,09 (3H, d, 丿=6 Hz, ramnóz CH3), 2,80 (2H, t, J-6 Hz, Ar-CH2-), 4,40 (1H, d, J=8Hz, glükóz Hl), 5,23 (1H, br s, ramnóz Hl), 6,37 (1H, d, J-18Hz, AsCH=C旦'一), 6,6-7,2 (3H, aromás H), 7,71 (1H, d, 丿=18Hz, Ar -CH=CH-y 13C-NMR (CD3OD) S: 131,4 (Cl), 116,3 (C{65}}), 144,5 (C-3 X 146,0 (C{71}}) ), 117,0 (C-5), 121,2 (C-6), 72,2 (Ca), 36,5 (C/), 127,1 (Cr), 116,8 (C-2\ 69, 131,2). (C-3\ 5'), 161,2 (C-4'), 168,2 (CH), 114,7 (C-^), 147,5 (Cy), 104,1 (glu-1), 76,1 (glu-2), 81,5 (glu-3),
70,2 (glu-4), 75,9 (glu-5), 62,3 (glu-6), 102,8 (rham-1), 72,1 (rham-2, 3 ), 73,7 (rham-4), 70,6 (rham-5), 18,4 (rham-6).
( plusz )-Syringaresinol Oj3-D-Glükopiranozid (VI)
Amorf por, [a]g5 -14,4.(c=0.1, MeOH). Anális. Elemanalízis a C28H36O13 összegképletre: számított: C, 57,93; H% 6,25. talált: C, 58,01; H% 6,26. IRv^cm{16}}: 3430, 1600, 1518. 】H・NMR (DMSO"6): 3,78 (12H, s2OCH3x4), 6,60, 6,66 (mindegyik 2H, s, aromás H).
(plusz)-Pinorezinol O-^-D-Glükopiranozid (VII)
Amorf por, [a]^5 plusz 38,9 fok (c=0,6, MeOH). Anális. Számított C26H32O11T/2H2O: C, 58,97; H 6,28. talált: 58,94; H% 6,29. IR cm{18}}: 3425, 1606, 1516. 】H-NMR (C5D5N) W: 3,77, 3,80 (mindegyik 3H, s, OCH3), 6,9-7,7 (6H, m, aromás H).
Liriodendron (VIII)
Színtelen tűk (MeOH), olvadáspont: 255 °C 257 °C, [a]p5 -9,2 fok (c=L3, piridin). IR cm-1: 3400, 1598, 1510. XH-NMR (DMSO/6)<5: 3.78="" (12h,="" s,="" och3x4),="" 6.67="" (4h,="" s,="" aromatic="">
6-Dezoxikatalpol (IX)
Színtelen tűk (MeOH), olvadáspont: 204-206 °C, [a]p5 -50,1 fok (c=0,7, MeOH). Elemanalízis a C15H22O9 összegképletre: számított: C, 52,02; H 6,40. talált: C, 52,12; H% 6,41. IR 唸cm{17}}: 3400, 1658. 】H・NMR (D2O) 3:
l. 3-1,9 (1H, m, H{4}}), 2,1-2,7 (3H, m, H{10}}, H{11}}, H{12}}), 3,65 (1H, s-szerű, H-7), 3,90, 4,35 (2H, ABrendszer, J=13Hz, H-10), 4,92 (1H, d, J=7 Hz, H aromer), 5,10 (1H, dd, J=6, 4 Hz, H-4), 5,12 (1H, d, J{-10Hz, Hl), 6,38 (1H, dd, 1 Hz, H-3).
{{0}}Epilogánsav (X) Színtelen tűk (MeOH), olvadáspont: 147 °C 149 °C, [a]p5 - 135.0 fok (c= 1.0, piridin) ). Anális. Számított C16H24O10H2O: C, 48,73; H 6,65. talált: C, 48,60; H 6,70. IR v;cm -1: 3400, 1680, 1640, 1430. 】H・NMR (C5D5N)<5: 1.18="" (3h,="" d,="" j="7Hz," ch3),="" 2.2—2.5="">
m, H-6), 2,60 (1H, m, H-8), 3,08 (1H, dt, J=3, 8,5 Hz, H-9), 3,58 ( 1H, m, H-5), 5,40 (1H, d, J=7,5 Hz, anomer H), 5,91 (1H, d〃=3Hz, Hl), 7,92 (1H) , s, H-3).
20-Hidroxiekdizon (XI)
Kristályos szilárd anyag, olvadáspont: 241 °C 242 °C, [a]p5 plusz 70.0 fok (c= LI, MeOH). Anális. Elemanalízis a C27H44O7 összegképletre: számított: C, 67,47; H 9,23. talált: C, 67,28; H 9,18. IR cm{17}}: 3440, 1646. XH-NMR (C5D5N) 1,06 (3H, s, H{26}}), 1,20 (3H, s, H{17}}), 1,36 (6H, s, H-26, H-27)? 1,58 (3H, s, H-21), 6,24 (1H, d, J=2Hz, H-7). 13C-NMR (C5D5N): 38,0 (Cl),
68,2 (C-2, C-3), 32,5 (C・4), 51,5 (C-5), 203,7 (C-6), 121,8 (C-7), 166,3 (C-8), 34,6 (C-9), 38,8 (C-10), 21,3 (C-ll), 31,9 (C) {{30}}, 48,2 (C-13), 84,4 (C-14), 32,1 (C-15), 21,6 (C-16 ), 50,2 (C-17), 18,0 (C-18), 24,6 (C-19), 77,0 (C-20), 21,8 (C-21 ), 77,7 (C-22), 27,6 (C-23), 42,7 (C-24), 69,8 (C-25), 30,1 (C-26 , 27).
8-Hidroxigeraniol 1-^-D-GIukopiranozid (XII)
Színtelen tűk (MeOH), olvadáspont: 58-60 °C, [a]^5-40,1 (c=L2, MeOH). Anális. Elemanalízis a C16H28O71/2H2O képlet alapján: számított: C, 56,29; H 8,56. talált: C, 56,40; H 8,50. IR cm"1: 3350, 1670, 1446. XH-NMR (C5D5N)<5: 1.72,="" 1.59="" (3h="" each,="" s,="" ch3),="" 2.04="" (4h,="" brm,="" h-4,="" h-5),="" 4.80="" (1h,="" d,="" j="7.5Hz," anomeric="" h),="" 5.56="" (2h,="" brt,="" j="7Hz,">
Syringin (XIII)
Színtelen tűk (MeOH), olvadáspont: 188-189 °C, [a]^5-15,3 fok (c=0,4, MeOH). Anális. C17H24O9 összegképletre számított: C, 55,13; H 6,53. talált: C, 54,83; H 6,50. IR cm{18}}: 3400, 1592, 1514. 'H-NMR (DMSO/6) W 3,78 (6H, s, OCH3 x 2), 6,3-6,5 (2H, m, -CH=CH-), 6,72 (2H, s, aromás H).
Az (I) képletű vegyület acetilezése 50 mg (I) vegyületet 1 ml piridinben és 1 ml ecetsavanhidridben oldunk, és egy éjszakán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk. A reakcióelegyet jeges vízbe öntjük, majd EtOAc-tal extraháljuk. Az etil-acetátos extraktumot vákuumban betöményítjük, és a maradékot szilikagél oszlopon kromatografáljuk, benzol-aceton (5:1) eleggyel eluálva az (la) képletű oktaacetátot (35 mg). IR cm"1: 1760, 1638, 1604, 1508. iH-NMR (CDC13) (5: 1,02 (3H, d, J=6 Hz, ramnóz CH3), 1,87, 1,95, 2,02 (mindegyik 3H, s, OAc), 2,10 (6H, s, OAc x 2), 2,27, 2,28, 2,31 (mindegyik 3H, s, Ar-OAc), 2,90 (2H, t, J=7Hz, Ar-CH{ {43}}), 6,38 (1H, d, J=16Hz, AR-CH=CH-), 6,80-7,15 (3H, m, aromás H), 7,24 (2H, d, J-9 Hz, H-3\ H・5'), 7,55 (2H, d, 丿=9Hz, H-2, H-6), 7,72 (1H, d, J1508 Hz, Ar-CH=CH-).
A II és III acetilezése
A (II) és (III) általános képletű vegyületeket (20 mg) az (I) vegyületnél leírt módon acetileztük, és hexaacetátokat kaptunk [Ila (12 mg), Illa (15 mg)]. Ila: IR 唸顋 cm{3}}: 1754, 1608, 1506. 】H・NMR (CDC13) 5: 2,01, 2,03, 2,09 (mindegyik 3H, s, OAc), 2,06 (0Ac, x2, s) ), 2,30 (3H, s, OAc), 3,84 (3,95 (mindegyik 3H, s, OCH3), 5,54 (1H, d, 丿=6 Hz, Ha), 6,05 (1H5 dt, J{38} }, 7 Hz, H-^), 6,53 (1H, d, «/= 16Hz, H-a'), 6,8一7,1 (5H, m, aromás H). Illa: IR v^cm1: 1760, 1604, 1516. 】H-NMR (CDC13)<5: 2.05="" (9h,="" s,="" oac="" x="" 3),="" 2.08="" (6h,="" s,="" oac="" x="" 2),="" 2.11="" (3h,="" s,="" oac),="" 3.80,="" 3.92="" (3h="" each,="" s,="" och3),="" 5.51="" (1h,="" d,="" j="7Hz," h-a),="" 6.14="" (1h,="" dt,="" j="16," 7hz,="" h-#),="" 6.62="" (1h,="" d,丿="16Hz,">
(5H, m, aromás H).
A IV és V acetilezése
A (IV) és (V) általános képletű vegyületeket az (I) vegyületnél leírt módon acetileztük, és oktaacetátokat kaptunk [IVa, Va]. IVa: IR 唸児 cmT: 1754, 1636, 1514. 】H・NMR (CDC,) W 1,03 (3H2 d, J=6 Hz, ramnóz CH3), 1,87, 1,94, mindegyik 1,99 (3H) s, OAc), 2,09 (6H, s, OAcx2), 2,28 (6H, s, OAcx2), 2,30 (3H, s, OAc), 2.{27}} (2H, t, J=6 0,6 Hz, Ar■-CH2-), 3,67 (2H, t, J=7,2 Hz Ar-CH2~CH2-), 6,35 (1H, d, J=16 Hz , AsCH=CU—), 6,87-7,35 (3H, m, Ar-7,09 (4H, q, J=8,6 Hz, A2/B2/típus), 7,65 (1H, d, J =16Hz, Ar CH=CH). Va: IR cm-1: 1750, 1636, 1608, 1514. ^-NMR (CDC13) 1,03 (3H, d,<7= 6="" hz,="" ch3="" for="" rhamnose),="" 1.87,="" 1.94,="" 2.02="" (3h="" each,="" s,="" oac),="" 2.09="" (6h,="" s,="" oac="" x="" 2),="" 2.28="" (6h,="" s,="" oac="" x="" 2),="" 2.31="" (3h,="" s,="" oac),="" 2.86="" (2h,="" t,="" j="6.6" hz,="" ar-ch2-),="" 3.73="" (2h,="" t,=""><7=6.6 hz,="" ar="" ch2-ch2-),="" 6.34="" (lh,d,="" j="16" hz,="" ar—ch="" —="" ch—),="" 6.78—7.20="" (3h,="" m,="" ar—h),="" 7.31="" (4h,="" q,=""><7=8.5>
A2zB/típus), 7,71 (1H, d, «/=16Hz, Ar-CH=CH ).
Az I. metanolízise
Az I. vegyületet (körülbelül 1 mg) 2 ml 5%-os metanolos CH3COC1-dal visszafolyató hűtő alatt forraljuk 3 percig, majd a reagenst vákuumban lepároljuk. A maradékban metil-p-kumarát és 3,{8}}dihidroxi-fenetil-alkohol jelenlétét TLC [CHCl3-MeOH (10:1)] és HPLC [oszlop, Develosil ODS] kimutatta. -7 (4,6 x 250 mm); oldószer, 55% MeOH; detektor (UV), 220 nm; áramlási sebesség, 1,0 ml/perc]. metil-p-kumarát; Rf 0,82, R (perc) 8,8, 3, 4- dihidroxi-fenetil-alkohol; 母0,31, tR (perc) 3,2.
Az IA savas hidrolízise
2 mg (I) vegyület 1 ml 1 0 százalékos kénsavval készült oldatát forrásban lévő vízfürdőben 30 percig melegítettük. Az oldatot Amberlite IR{6}} oszlopon engedjük át, és bepároljuk, így egy maradékot kapunk, amelyet nátrium-bór-hidriddel (kb. 3 mg) 1 órán át redukáltunk. A reakcióelegyet Amberlite IR-120 oszlopon engedjük át, és szárazra pároljuk. A bórsavat MeOH-val végzett desztillációval eltávolítjuk, és a maradékot ecetsavanhidriddel (1 csepp) és piridinnel (1 csepp) acetilezzük 100 °C-on 1 órán át. A reagenseket vákuumban elpárologtattuk. GC-vel a glucitol-acetátot és a ramnitol-acetátot 1:1 arányban mutattuk ki az (I) vegyületből. Állapot: oszlop, 1,5 százalék OV-17, 3 mm x 1,5 m; oszlophőmérséklet, 180 fok ; hordozógáz, N2 (30 ml/perc). tR (perc): 2,0 (ramnitol-acetát), 5,5 (glucitol-acetát).
A II. és III. vegyület enzimatikus hidrolízise II
(13 mg) vagy III (40 mg) cellulázzal (40 mg) hidrolizáltunk vízben (1 ml) 2 órán át 37 °C-on. A reakcióelegyet EtOAc-tal extraháljuk. Az EtOAc-extraktumot vákuumban betöményítettük, így a maradékot kaptuk, amelyet HPLC-vel kromatografáltunk [oszlop, Develosil ODS-10 (20 x 250 mm); oldószer. II: H20-CH3CN (77,5:22,5); III: H20-CH3CN (80:20); detektor (UV), 205 nm; áramlási sebesség, 6,0 ml/perc], így lib (3,3 mg), Illb (5,7 mg) keletkezik. lib: [a]^5 plusz 34,8 fok (c=0,3, MeOH). CD (c=3.3mg/10ml, MeOH) [0]25 (nm): 1740 (330), 15200 (283), 14100 (270), 0 (247), - 16700 (232) ). IR 唸E; cm"1: 3380, 1606, 1520, 1500. UV-nm: 276. MS m/z (százalék): 358 (M plusz, 53), 340 (M plusz -H2O, 100), 338 (58), 325 ( 47), 310 (23), 162 (41), 151 (36), 137 (59). XH-NMR (aceton-J6)<5: 3.55="" (1h,="" brt,=""><7=6hz, h-g),="" 3.84,="" 3.87="" (3h="" each,="" s,="" och3),="" 4.19="" (2h,="" brd,="" j-5hz,="" h-yz),="" 5.56="" (1h,="" d,="" j="6," 5="" hz,="" h-a),="" 6.23="" (1h,="" dt,=""><7=16, 5="" hz,="" h-#),="" 6.56="" (1h,="" brd,="" j="16Hz," hh),="" 6.7—7.1="" (5h,="" m,="" aromatich).="" 13c-nmr:="" tablel.iiib:="" [a]-31.6°="" (c="0.6," meoh).="" cd="" (c="2.28mg/lOml," meoh)="" [0]25="" (nm):="" 2200="" (330),="" 0="" (310),="" -10990="" (283),="" -11300="" (270),="" 0="" (242),="" 5650="" (232).="" 0-nmr="" (acetone-j6)=""><5: 3.84,="" 3.87="" (3h="" each,="" s,="" och3="" x="" 2),="" 4.19="" (2h;="" brd,="" j="5Hz," h"'),5.56="" (1h,="" d,丿="6.5" hz,="" h-a),="" 6.23="" (1h,="" dt,丿="16," 5="" hz,="" h・#),="" 6.52="" (1h,="" d,="" j="16" hz,="" h-az),="" 6.7一7.1="" (5h,="" m,="" aromatic="" h).="" 13c-nmr:="" table="" i.="" the="" ir="" and="" uv="" spectra="" were="" similar="" with="" that="" of="">
ElismerésHálásak vagyunk Prof. A. Ueno-nak és Dr. T. Miyase-nek, a Shizuokai Egyetem NMR- és CD-spektrumának méréséért és értékes javaslataikért, valamint Dr. M. Kikuchi-nak, a Tohoku Gyógyszerészeti Főiskola munkatársának, hogy biztosították. hiteles minták.
Hivatkozások és jegyzetek
1) H. Kobayashi, H. Oguchi, N. Takizawa, T. Miyase, A. Ueno, K. Usmanghani és M. Ahmad, Chem. Pharm. Bull., 35, 3309 (1987).
2) a) H. Kobayashi és J. Komatsu, Yakugaku Zasshi, 103, 508 (1983); b) H. Kobayashi, H. Karasawa, T. Miyase és S. Fukushima, Chem. Pharm, Bull., 33, 1452 (1985); c) Ugyanott, 33, 3645 (1985); d) H. Karasawa, H. Kobayashi, N. Takizawa, T. Miyase és S. Fukushima, Yakugaku Zasshi. 106, 721 (1986)].
3) HD Ludemann és H. Nimz, Die Makromolekulare Chemie., 175, 2393 (1974).
4) a) H. Achenbach, J. Grob, XA Dominguez, G. Cano, JV Star, LC Brussolo, G. Munoz, F. Salgado és L. Lopez, Phytochemistry. 26, 1159 (1987); b) AN Binns, RN Chen, HN Wood és DG Lynn, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 84, 980 (1987); c) DG Lynn, RH Chen, KS Manning és HN Wood, uo., 84, 615 (1987).
5) T. Deyama, T. Ikawa, S. Kitagawa és S. Nishibe, Chem. Pharm. Bull., 35, 1803 (1987).
6) M. Kikuchi, Y. Yamauchi és F. Tanabe, Yakugaku Zasshi, 107, 350 (1987).
7) M. Chiba, S. Hisada, S. Nishibe és H. Thieme, Phytochemistry, 19, 335 (1980).
8) a) H. Hikino, Y. Hikino, Fortschritted. Chem. Org. Naturst., 28, 256 (1970); b) RW Miller, J. Clardy, J. Kozlowski, KL Mikolajczak, RD Plattner, RG Powell, CR Smith, D. Weisleder és Q.-T. Zheng, Planta Medica, 1985, 40.
