Az echinakozid elnyomja a dexametazon által kiváltott növekedésgátlást és apoptózist az oszteoblasztos MC3T3-E1 sejtekben
Mar 11, 2022
Kapcsolatfelvétel: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com
Absztrakt.
A glükokortikoidokat (GC) széles körben alkalmazzák krónikus betegségek kezelésére. A GC-k elhúzódó és/vagy túladagolása számos mellékhatással jár az emberi egészségre, beleértve a GC által kiváltott csontritkulást (GIOP). Ebben a vizsgálatban az volt a cél, hogy felmérjük, milyen hatással van azechinacoside a cistanche-ból(ECH) a dexametazonnal kezelt egér oszteoblaszt MC3T3-E1 sejtekre hat. Azt találtuk, hogy az ECH(echinacoside a cistanche-ból) (5, 10, 20, and 40 mg/l) inhibited dexamethasone (1,000 nM)-suppressed cell viability as demonstrated by Cell Counting Kit-8 (CCK-8) assay. The dose of 10 mg/l was selected for the following experiments because this dose had a better effect than the dose of 5 mg/l, and the doses >10 mg/l hasonló hatást fejtett ki, mint ez az adag. ECH(echinacoside a cistanche-ból)(10 mg/l) vagy pifitrin- (PFT-) (p53 inhibitor, 20 µM) elnyomta a dexametazon által kiváltott MC3T3-E1 apoptózist, amint azt az Annexin V/propidium-jodid (PI) kettős jelölésű áramlási citometria analízise illusztrálja . ECH(echinacoside a cistanche-ból)vagy a PFT-kezelés enyhítette a dexametazon Bcl-2 expressziót gátló hatását, valamint a dexametazon p53 és Bax expressziót stimuláló hatását. Ezenkívül a lentivírus által közvetített p53 túlzott expresszió megfordította az ECH hatásait(echinacoside a cistanche-ból)dexametazonnal kezelt MC3T3-E1 sejtekben, ami arra utal, hogy az ECH(echinacoside a cistanche-ból)dexametazonnal kezelt oszteoblasztokban az ap53-függő útvonalon keresztül indukált anti-apoptotikus hatásokat. Összefoglalva, ECH(echinacoside a cistanche-ból)védő hatást fejt ki a dexametazon által kiváltott oszteoblasztos sejt apoptózis ellen, ami arra utal, hogy az ECH(echinacoside a cistanche-ból)potenciálisan klinikai alkalmazásra kerülhet a GIOP kezelésében.
A Cistanche deserticolának számos hatása van, kattintson ide, ha többet szeretne megtudni
Bevezetés
GlükokortikoidokA GC-ket gyakran használják krónikus betegségek széles spektrumának kezelésére, beleértve a gyulladást, a rákot és az autoimmun betegségeket (1). A GC-k elhúzódó és/vagy túladagolása azonban számos mellékhatással jár, mint például magas vérnyomás, hiperglikémia, zöldhályog, oszteonekrózis és csontritkulás (2-4). Nyilvánvaló, hogy a GC használata növeli a csontvesztést és a törések kockázatát (3-6). A GC-k az oszteoblasztok apoptózisát indukálhatják, és ronthatják e sejtek működését. Például a dexametazon, egy GC hormon, képes felerősíteni a p53 expresszióját az oszteoblaszt MC3T3-E1 sejtekben, így sejtapoptózist okoz (7,8). Az oszteoblaszt apoptózis csökkent csontképződéshez vezet. A biszfoszfonátok (alendronát és rizedronát) (9,10) orális alkalmazását bevezették a GC által kiváltott csontritkulás (GIOP) kezelésére. Az alacsony tapadási arány azonban korlátozza az orális biszfoszfonátok hatékonyságát. Más gyógyszereknek is vannak korlátai, például a kényelmetlen adagolás [zoledronsav (11)] és a magas költség [PTH 1-34 (teriparatid) (12,13)]. Következésképpen új GIOP kezelési lehetőségek kidolgozására van szükség.
Echinakozid a cistanche-ból (ECH)A hagyományos kínai orvoslásból izolált fenil-etanol-glikozidHerbaCistanches(14). ECH(echinacoside a cistanche-ból)védő hatást fejt ki a neuronrendszerre (15-20), a májra (21, 22) és a tüdőre (23), mivel elősegíti a sejtproliferációt, gátolja a gyulladásos választ, a reaktív oxigénfajták (ROS) termelését és a sejt apoptózisát. Bár az ECH(echinacoside a cistanche-ból)elősegítheti az oszteoblasztos csontregenerációt és rendkívüli antiosteoporotikus aktivitással rendelkezik a patkánymodellekben (24, 25), az ECH hatásait leíró feljegyzések nem állnak rendelkezésre(echinacoside a cistanche-ból)GC-indukált oszteoblaszt sejt apoptózison. Így megvizsgáltuk az ECH hatását(echinacoside a cistanche-ból)kifejti a dexametazon által kiváltott oszteoblasztos sejt apoptózist, és feltárta az előzetes mechanizmust az MC3T3-E1 sejtekben.
Anyagok és metódusok
Termesztés nak,-nek sejteket. A Kínai Tudományos Akadémia Sejtbankja (Sanghaj, Kína) biztosította az egér oszteoblaszt MC3T3-E1 sejteket. A sejtek növekedése minimális esszenciális tápközegben (-MEM) történt (Hyclone; GE Healthcare, Logan, UT, USA), amely 10% magzati szarvasmarha-szérumot (FBS; Gibco; Thermo Fisher Scientific, Inc., Grand Island, NY, USA) tartalmazott. ) és a penicillin/sztreptomicin (Beijing Solar Science and Technology Co., Ltd., Peking, Kína). A sejtek karbantartását 95 százalék levegőt és 5 százalék szén-dioxidot tartalmazó környezetben, 37 °C hőmérsékleten végeztük.
AzTermelésnak,-neklentivírustúlzottan kifejezve a p53-at. A p53 expressziós konstrukció létrehozásához az egér p53 gén fehérjét kódoló szekvencia (CDS) régióját szintetizáltuk és inszertáltukEcoRI/BamA pLVX-puro lentivírus expressziós vektor (Clontech Laboratories, Inc., Palo Alto, CA, USA) HI restrikciós helyei (Genewiz, Inc. (Peking, Kína). A konstrukciót DNS-szekvenálással igazoltuk. A 293T sejteket (Shanghai GeneChem Co., Ltd., Shanghai, Kína) plazmidok keverékével transzfektáltuk, beleértve a víruscsomagoló plazmidokat és a p53 expressziós plazmidot (pLVX-p53) vagy a kontrollplazmidot (pLVX) Lipofectamine 2000 (Invitrogen: Thermo Fisher) segítségével. Scientific, Inc., Carlsbad, CA, USA) a gyártó utasításai alapján. A vírus felülúszóját a transzfekció után 48 órával összegyűjtöttük, és MC3T3-E1 sejtek fertőzésére használtuk. A p53 expresszió értékelését 48 órával a vírusfertőzés után végeztük.
Mennyiségipolimerázláncreakció(qPCR). TRIzol reagenst (Invitrogen: Thermo Fisher Scientific, Inc.) használtunk a teljes RNS és MC3T3-E1 sejtek elkülönítésére, valamint a RevertAid™ First Strand cDNS szintézis készletet (Thermo Fisher Scientific, Inc., Rockford, IL, USA) a gyártó utasításai szerint a teljes RNS reverz átírására. A p53 mRNS szintjét qPCR-rel detektáltuk ABI Prism 7300 Sequence Detection System rendszeren (Applied Biosystems: Thermo Fisher Scientific, Inc., Foster City, CA, USA). A primerek a következők voltak: 5'-CCC CTGTCATCTTTTGTCCCT-3' és 5'-AGCTGGCAGAAT AGCTTATTGAG-3' p53, 5'-CTGCCCAGAACATCA TCC-3' és 5'-CTCAGACATG{{CCTGCTTCATG-3' 18}}” a GAPDH számára.
Ezután a p53 mRNS szintjét a 2-ΔΔCT módszer (26) belső kontrollként GAPDH-val.
Western blot. Az MC3T3-E1 sejtek lízise proteázgátlókat tartalmazó radioimmunprecipitációs vizsgálati pufferben (Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd.) ment végbe, és a lizátumok centrifugálása 15 percig folytatódott 4 °C-on 9600 xg-vel. hogy a csapadék eltávolítható legyen. Ezt követően a BCA vizsgálati készlettel (Thermo Fisher Scientific, Inc.) megmértük a fehérje mennyiségét. Egyenlő mennyiségű fehérjét 10 vagy 15%-os SDS-PAGE-ra adtunk, és nitrocellulóz membránra vittük (EMD Millipore, Bradford, MA, USA). A membránokat 5 százalékos sovány tejjel blokkoltuk, és elsődleges antitestekkel vizsgáltuk. Háromszori foszfáttal pufferolt sóoldattal (PBS) történő mosás után a membránokat torma-peroxidázzal konjugált másodlagos antitesttel (1:1,000; kat. sz. A0208; Beyotime Biotechnológiai Intézet, Sanghaj, Kína) inkubáltuk. . Western blotting teszteket végeztünk egy fokozott kemilumineszcenciás (ECL) kit (EMD Millipore) segítségével. Belső standardként GAPDH-t használtunk. Az elsődleges antitestek forrásai a következők voltak: Bax (Sc-493) és Bcl-2 (Sc-492), mindkettő a Santa Cruz Biotechnology, Inc.-től (Santa Cruz, CA, USA); p53 (no. 2524) és GAPDH (no. 5174) egyaránt a Cell Signaling Technology, Inc.-től (Danvers, MA, USA).
Kísérleti csoportosítás. A dexametazon megfelelő dózisának meghatározásához az MC3T3-E1 sejteket sorozatmennyiségű dexametazonnal (0, 1, 10, 100 és 1, 000 nM; Sigma) kezeltük. -Aldrich; Merck KGaA, St. Louis, MO, USA). A sejtek inkubálása után 48 órával Cell Counting Kit-8 (CCK-8) vizsgálatokat végeztek a sejtproliferáció kimutatására.
Az ECH megfelelő dózisának kiválasztásához(echinacoside a cistanche-ból), az MC3T3-E1 sejtek kezelését 1,000 nM dexametazonnal és különböző dózisú ECH-val (0, 2,5, 5, 10, 20 és 40 mg/l; Shanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd., Shanghai, Kína). Kontrollként normál körülmények között növesztett sejteket (ál) használtunk. A CCK-8 vizsgálatot 48 órás tenyésztés után végeztük.
Az összes többi kísérletben az MC3T3-E1 sejteket öt csoportra osztottuk: 1. csoport (ál), a sejteket normál körülmények között tenyésztettük; a 2. csoport sejtjeit pLVX lentivírussal transzdukáltuk; 3. csoport, 10 mg/l ECH-val tenyésztett sejtek(echinacoside a cistanche-ból); 4. csoport, sejtek 20 uM pifitrinnel (PFT-; Selleck Chemicals, Houston, TX, USA); 5. csoport: pLVX-p53 lentivírussal transzdukált és 10 mg/l ECH-val kezelt sejtek(echinacoside a cistanche-ból). A 2-5 csoport sejtjeit 1,000 nM dexametazonnal kezeltük. A sejt apoptózisát és fehérje expresszióját 48 órás tenyésztés után mértük.
Sejtproliferációs vizsgálat.MC3T3-E1 sejteket oltottunk be 96-lyuklemezekre 3x10 méretben3sejt/lyuk, és normál körülmények között tenyésztettük őket egy éjszakán át. A sejteket a jelzett módon kezeltük. 48 órás tenyésztés után a CCK8 (Signalway Antibody LLC, College Park, MD, USA) vizsgálatot a gyártó utasításai szerint végeztük el. Röviden, az egyes üregekben lévő tápközeget 100 µl 10%-os CCK-8-oldattal helyettesítettük a táptalajban. Miután a sejteket 1 órán át 37°C-on inkubáltuk, 450 nm-es hullámhosszon mértük meg az abszorbanciát mikrolemez-leolvasóval. Kiszámoltuk a relatív sejtéletképességet (százalék) a kontroll lyukakhoz való csatlakozásokkal.
Sejtapoptózis értékelése. Az Annexin V-FITC sejt apoptózis készletet (Beyotime Institute of Biotechnology) használtuk a korai apoptózison áteső sejtek mennyiségi meghatározására a gyártó utasításait követve. Röviden, a kezelt sejtek összegyűjtése tripszinezéssel történt. A sejteket PBS-sel mostuk, és annexiinkötő pufferrel újraszuszpendáltuk. A sejtek inkubálását Annexin V-FITC segítségével végeztük 15 percig 4 °C hőmérsékleten, majd propidium-jodiddal (PI) 5 percig 4 °C-on inkubáltuk. A jobb alsó negyedben lévő sejtek (Annexin V-FITC pozitív és PI negatív) aktívan korai apoptózison mennek keresztül.
Statisztikaielemzés. Az adatok mindhárom független kísérlet átlagai ± SD. Tukey többszörös összehasonlítási tesztjét és egyirányú varianciaanalízisét végezték el a csoportok közötti különbségek elemzésére a GraphPad Prism szoftverrel (6-os verzió.{2}}; GraphPad Software, Inc., San Diego, CA, USA). P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">
Eredmények
Létrehozásnak,-neka megfelelő adagnak,-nekdexametazon.A dexametazon megfelelő dózisának meghatározásához az MC3T3-E1 sejteket növekvő mennyiségű dexametazon hatásának (0, 1, 10, 100 és 1,000 nM) tették ki 48 órán keresztül. . Amint az 1. ábrán látható, a relatív sejtek életképességét a CCK-8 vizsgálattal határoztuk meg, az alacsony koncentrációjú dexametazonnal (1 és 10 nM) kezelt sejtekben megnövekedett, és jelentősen csökkent a magas koncentrációjú dexametazonnak kitett sejtekben (100 és 1,000 nM).
A legjelentősebb csökkenést az 1,000 nM dexametazont tartalmazó sejtekben figyelték meg. Így a következő vizsgálatok során 1,000 nM dexametazont választottunk ki.
Az ECH hatása(echinacoside a cistanche-ból)a dexametazon által kiváltott sejtnövekedés-gátlásra. Ezután megvizsgáltuk az ECH hatását(echinacoside a cistanche-ból)a dexametazon által kiváltott sejtnövekedés gátlásán. Az MC3T3-E1 sejtek kezelését 1,000 nM dexametazonnal és különböző dózisú ECH-val végeztük.(echinacoside a cistanche-ból)(0, 2,5, 5, 10, 20 és 40 mg/l; 2. ábra). 48 órával a kezelés után ECH hozzáadása(echinacoside a cistanche-ból)5, 10, 20 és 40 mg/l dózisban jelentősen csökkentette a dexametazon által kiváltott sejtkárosodást. ECH(echinacoside a cistanche-ból)10 mg/l dózisban nyilvánvalóbb a hatása, mint az 5 mg/l dózisnál. A sejtek életképessége hasonló volt a 10, 20 és 40 mg/l ECH-val kezelt sejtekben(echinacoside a cistanche-ból). Ezért 10 mg/l ECH(echinacoside a cistanche-ból)használtuk a következő kísérletekben.
A p53 túlzott expressziója lentivírus létrehozásával. A dexameta szon képes felszabályozni a p53-at, ezáltal az oszteoblasztok apoptózisát indukálja (8). Az ECH hatásainak tanulmányozása(echinacoside a cistanche-ból) on dexamethasone-induced p53 expression, we constructed a lentivirus encoding p53 (pLVX-p53) and transduced the virus into MC3T3-E1 cells. The expression of p53 was analyzed at 48 h after transduction. Fig. 3 shows that p53 mRNA and protein levels were increased to >2-szerese a pLVX-p53-transzdukált sejtekben a kontrollvírussal (pLVX) rendelkező sejtekhez képest. A p53 részt vett az ECH(echinacoside a cistanche-ból) a dexametazon által kiváltott apoptózison. Az MC3T3-E1 sejteket Plavix-szal vagy pLVX-p53-mal kezeltük, 10 mg/l ECH(echinacoside a cistanche-ból), 20 µM PFT- (egy p53 inhibitor) és 1,000 nM dexametazon, majd a sejt apoptózist mértük Annexin V-FITC apoptózis kit segítségével. Amint a 4A. ábrán látható, a dexametazon-kezelés figyelemreméltóan sejtapoptózist indukált a normál körülmények között tenyésztett sejtekhez képest (ál). ECH(echinacoside a cistanche-ból) és a PFT-kezelés szignifikánsan megvédte az MC3T3-E1 sejteket a dexametazon által kiváltott apoptózissal szemben. Ezenkívül a p53 túlzott expressziója megfordította az ECH (echinacoside a cistanche-ból).
A Bcl-2 és a Bax, mint fontos apoptózis szabályozókról ismert, hogy a p53 szabályozza (27). A Western blotting azt mutatta, hogy a p53 és a Bax fehérje expressziójának változásai összhangban vannak a sejt apoptózis változásaival, míg a Bcl-2 expressziója az ellenkező irányba változott (4B és C ábra). Nevezetesen, a p53 fehérjeszintjét szignifikánsan elnyomta az ECH(echinacoside a cistanche-ból)és PFT-kezelés a p53-at túlzottan expresszáló és dexametazonnal kezelt sejtekben (4C. ábra). Ezek az adatok arra utalnak, hogy az ECH(echinacoside a cistanche-ból)védő hatást fejthet ki a dexametazon által kiváltott apoptózisra a p53 expresszió gátlásán keresztül.
A cisztanche echinakozid hatásai
Vita
Az ECH apoptózis elleni funkciója(echinacoside a cistanche-ból)leírták a D-galaktózamin (D-GalN) és lipopoliszacharid (LPS) által indukált akut májkárosodás modelljében, valamint tumornekrózis faktor vagy 1-metil{{6 által indukált humán neuroblasztóma (SH-SY5Y) sejtekben. }}fenilpiridiniumion (MPP plusz ) (17,22,28). Beszámoltak arról, hogy a dexametazon kezelés gátolja a proliferációt és MC3T3-E1 sejt apoptózist indukál (8,29). A jelenlegi vizsgálatban a relatív sejtek életképessége szignifikánsan csökkent a dexametazon magas koncentrációjának (100 és 1,{10}} nM) kitett sejtekben, ami összhangban volt egy korábbi vizsgálattal (8). A további ECH-kezelés (5-40 mg/l) jelentősen gátolta a dexametazon-szuppresszált sejtek életképességét. Ezenkívül a dexametazon expozíció (1,000 nM) stimulálta az MC3T3-E1 sejt apoptózisát, amit az ECH kezelés jelentős mértékben visszafogott. A jelentés először bemutatta, hogyan védi az ECH-t a dexametazon által kiváltott oszteoblaszt sejt apoptózissal szemben, és azt sugallta, hogy az ECH klinikai alkalmazásának lehetősége lehet a GIOP-ban.
Továbbá megpróbáltuk feltárni az ECH védő hatásának előzetes mechanizmusát(echinacoside a cistanche-ból). A dexametazon fokozhatja a p53 transzkripcióját, ezáltal indukálja az oszteoblasztok apoptózisát és a sejtciklus leállását (8). A p53-at az ECH csökkenti az SH-SY5Y sejtekben (28). Itt a PFT- (egy p53 inhibitor) hasonló protektív hatást fejtett ki, mint az ECH, míg a p53 túlzott expressziója megfordította az ECH védő hatását. A p53 fehérje expressziójának változásai különböző körülmények között összhangban voltak a sejt apoptózis változásaival. Ezek az eredmények azt mutatják, hogy az ECH védő hatást fejthet ki a dexametazon által kiváltott oszteoblaszt sejt apoptózisra a p53 expresszió gátlásán keresztül. A Bcl-2 családba tartozó fehérjék, mint például a Bcl-2 és a Bax, megváltoztathatják a mitokondriális membrán permeabilitását, aktiválhatják az effektor kaszpázokat, és sejtapoptózist okozhatnak (30). Köztudott, hogy a p53 képes szabályozni a Bcl-2-ot és a Bax-ot (27). Itt kezelés PFT- vagy ECH(echinacoside a cistanche-ból) gyengítette a dexametazon gátló hatását az apoptózis elleni fehérje Bcl-2 szintjére, valamint a dexametazon stimuláló hatását a pro-apoptózis fehérje Bax szintjére, míg a p53 túlzott expressziója megfordította az ECH hatásait. Ezek az eredmények tovább igazolták a p53 szerepét az ECH védő funkciójában.
Összefoglalva bemutattuk, hogy az ECH(echinacoside a cistanche-ból)ígéretes védőhatást fejt ki a dexametazon által kiváltott oszteoblasztos sejt apoptózisra, ami arra utal, hogy az ECH klinikai alkalmazási lehetőséggel bírhat a GIOP kezelésében.
A cisztanchából származó echinakozid hatásai
Hivatkozások
Buttgereit F, Burmester GR és Lipworth BJ: Optimalizált glükokortikoid terápia: Egy régi lándzsa élezése. Lancet 365: 801-803, 2005.
Schäcke H, Döcke WD és Asadullah K: A glükokortikoidok mellékhatásaiban szerepet játszó mechanizmusok. Pharmacol Ther 96: 23-43, 2002.
Fukushima W, Fujioka M, Kubo T, Tamakoshi A, Nagai M és Hirota Y: Országos epidemiológiai felmérés a combfej idiopátiás osteonecrosisáról. Clin Orthop Relat Res 468: 2715-2724, 2010.
Civitelli R és Ziambaras K: A glükokorti-hideg okozta osteoporosis epidemiológiája. J Endocrinol Invest 31 (Kiegészítő): 2-6, 2008.
Gudbjornsson B, Juliusson UI és Gudjonsson FV: A hosszú távú szteroidkezelés prevalenciája és a szteroidok által kiváltott csontritkulás megelőzésére irányuló döntéshozatal gyakorisága a napi klinikai gyakorlatban. Ann Rheum Dis 61: 32-36, 2002.
van Staa TP, Geusens P, Pols HA, de Laet C, Leufkens HG és Cooper C: Egyszerű pontszám a csonttörések hosszú távú kockázatának becslésére orális glükokortikoidokat szedő betegeknél. QJM 98: 191-198, 2005.
Rickard DJ, Sullivan TA, Shenker BJ, Leboy PS és Kazhdan I: Gyors oszteoblaszt-differenciálódás indukálása patkány csontvelői stroma sejttenyészetekben dexametazonnal és BMP-vel{0}}. Dev Biol 161: 218-228, 1994.
Li H, Qian W, Weng X, Wu Z, Li H, Zhuang Q, Feng B és Bian Y: A glükokortikoid receptor és a dexametazon általi szekvenciális P53 aktiváció közvetíti az oszteoblaszt MC3T3-E1 sejtek apoptózisát és sejtciklus-leállását. PLoS One 7: e37030, 2012.
Stoch SA, Saag KG, Greenwald M, Sebba AI, Cohen S, Verbruggen N, Giezek H, West J és Schnitzer TJ: Hetente egyszeri 70 mg orális alendronát glükokortikoidok által kiváltott csontvesztésben szenvedő betegeknél: A 12- hónapos randomizált, placebo-kontrollos klinikai vizsgálat. J Rheumatol 36: 1705-1714, 2009.
Wallach S, Cohen S, Reid DM, Hughes RA, Hosking DJ, Laan RF, Doherty SM, Maricic M, Rosen C, Brown J és munkatársai: A risedronátos kezelés hatása a csontsűrűségre és a csigolyatörésre kortikoszteroid-terápiában részesülő betegeknél. Calcif Tissue Int 67: 277-285, 2000.
Reid DM, Devogelaer JP, Saag K, Roux C, Lau CS, Reginster JY, Papanastasiou P, Ferreira A, Hartl F, Fashola T és munkatársai; A HORIZON vizsgálói: Zoledronsav és rizedronát a glükokortikoidok által kiváltott csontritkulás megelőzésében és kezelésében (HORIZON): Multicentrikus, kettős vak, kettős hamis, randomizált, kontrollos vizsgálat. Lancet 373: 1253-1263, 2009.
Langdale BL, Rajzbaum G, Jakob F, Karras D, Ljunggren O, Lems WF, Fahrleitner-Pammer A, Walsh JB, Barker C, Kutahov A és munkatársai: A törési gyakoriság és a hátfájás csökkentése és az életminőség javítása posztmenopauzás nőknél teriparatiddal kezelve: 18-A European Forster Observational Study (EFOS) havi adatai. Calcif Tissue Int 85: 484-493, 2009.
Saag KG, Zanchetta JR, Devogelaer JP, Adler RA, Eastell R, See K, Krege JH, Krohn K és Warner MR: A teriparatid és az alendronát hatása a glükokortikoidok által kiváltott csontritkulás kezelésére: Harminchat hónap eredményei egy randomizált, kettős vak, kontrollált vizsgálat. Arthritis Rheum 60: 3346-3355, 2009.
Jia Y, Guan Q, Guo Y és Du C: Az echinakozid serkenti a sejtproliferációt és megakadályozza a sejt apoptózisát a bélhám MODE-K sejtjeiben a transzformáló növekedési faktor- 1 expressziójának fokozásával. J Pharmacol Sci 118: 99-108, 2012.
Kuang R, Sun Y, Yuan W, Lei L és Zheng X: Az echinacoside, az egyik feniletanoid glikozid védő hatása a H(2)O(2) által kiváltott citotoxicitásra PC12 sejtekben. Planta Med 75: 1499-1504, 2009.
Kuang R, Sun Y és Zheng X: A nitrogén-monoxid elnyomása, amely szerepet játszik az echinakozid H2O2-indukálta PC12 sejtkárosodásra gyakorolt védő hatásában. Nat Prod Commun 5: 571-574, 2010.
Deng M, Zhao JY, Tu PF, Jiang Y, Li ZB és Wang YH: Az echinacoside megmenti az SHSY5Y neuronális sejteket a TNFalpha által kiváltott apoptózistól. Eur J Pharmacol 505: 11-18, 2004.
Geng X, Tian X, Tu P és Pu X: Az echinakozid neuroprotektív hatásai a Parkinson-kór egér MPTP modelljében. Eur J Pharmacol 564: 66-74, 2007.
Zhao Q, Gao J, Li W és Cai D: Az echinacoside neurotróf és idegmentő hatásai a Parkinson-kór szubakut MPTP egérmodelljében. Brain Res 1346: 224-236, 2010.
Zhu M, Lu C és Li W: Az echinakozidnak való átmeneti expozíció elegendő a Trk jelátvitel aktiválásához és az idegsejtek rotenon elleni védelméhez. J Neurochem 124: 571-580, 2013.
Wu Y, Li L, Wen T és Li YQ: Az echinakozid védő hatása a szén-tetraklorid által kiváltott hepatotoxicitásra patkányokban. Toxicology 232: 50-56, 2007.
Li X, Gou C, Yang H, Qiu J, Gu T és Wen T: Az echinakozid az apoptózis és a gyulladás gátlásával javítja a D-galaktózamin és lipopoliszacharid által kiváltott akut májkárosodást egerekben. Scand J Gastroenterol 49: 993-1000, 2014.
Zhang Y, Xing J, Ai T, Wen T, Guan L és Zhao J: Az echinacoside védelme az olajsav által okozott akut tüdőkárosodás ellen patkányokban. Free Radic Res 41: 798-805, 2007.
