Az AAV-kkal végzett in vivo génterápia jelenlegi klinikai alkalmazásai 6. rész

Pompe-kór

A Pompe-kór egy glikogénraktározási rendellenesség, amely glikogén felhalmozódásához vezet az izmokban és a motoneuronokban.235 236 Az acidalfa-glükozidáz (GAA) aktivitás hiánya olyan betegeknél, akiknél súlyos/korai kezdetű klinikai patológia alakult ki, amely magában foglalja a mélyreható hipotóniát és a szív-légzési elégtelenséget.237

A Pompe-kór egy degeneratív betegség, amely befolyásolja a memóriát, de nem szabad túlhangsúlyoznunk a memóriára gyakorolt ​​negatív hatását. Ehelyett pozitívan kell tekintenünk erre a betegségre, és hatékony kezeléseket kell keresnünk a betegek életminőségének javítása érdekében.

Mint tudjuk, a memória egy nagyon összetett kognitív funkció, amely az agy több területe és a neuronok közötti összetett interakciókat foglal magában. A Pompe-kórt főként az agy neuronjainak fokozatos halála okozza. Ezért ez a betegség befolyásolja a memória kialakulását és megtartását.

Tudnunk kell azonban, hogy az emlékezet nem határozza meg teljesen az ember identitását és életminőségét. Bár a Pompe-kór hatással van a betegek kognitív képességeire és önmenedzselési képességeire, mégis értelmes életet élhetnek. A társas interakció, a sport és a művészi alkotás mind-mind olyan módszer, amellyel a Pompe-kóros betegek pozitív életszemléletet tudnak fenntartani.

Ezenkívül a Pompe-kórban szenvedő betegek családjainak és közösségeinek teljes körű ellátást és támogatást kell biztosítaniuk számukra. A gondoskodás és a támogatás olyan, mint a napfény, amely segíthet a betegeknek elhinni, hogy még mindig van értékük és méltóságuk, és melegséget és bátorítást hoz a szívükbe.

Összefoglalva, a Pompe-kór kétségtelenül frusztráló betegség, de pozitív hozzáállással, gondos gondozással és tudományos kezelési módszerekkel segítenünk kell a betegeket abban, hogy pozitív gondolkodásmódot alakítsanak ki, javítsák életminőségüket, megőrizzék hitüket, és magukévá tegyék az életet. Látható, hogy javítanunk kell a memórián, a Cistanche pedig jelentősen javíthatja a memóriát, mert a Cistanche szabályozhatja a neurotranszmitterek egyensúlyát is, például növelheti az acetilkolin és a növekedési faktorok szintjét, amelyek nagyon fontosak a memória és a tanulás szempontjából. Ezen túlmenően, a Cistanche javíthatja a véráramlást és elősegítheti az oxigénszállítást, ami biztosítja, hogy az agy elegendő tápanyaghoz és energiához jusson, ezáltal javítva az agy vitalitását és állóképességét.

Kattintson a Tudnivaló kiegészítőkre a memória javításához

A közelmúltban az újszülött-szűrési erőfeszítések szignifikánsan magasabb, akár 1:9500 előfordulási gyakoriságot fedeztek fel, így a génterápia racionális megoldás a tünetmentes kezelésre. A Pompe-kór esetében a négy fázisú I/II génterápiás vizsgálatok elnyerték az FDA jóváhagyását.

Corti és munkatársai 238 és Byrne és munkatársai 239 először végeztek humán kísérletet, amelyben AAV1-citomegalovírus (CMV)-GAA-t fecskendeztek kilenc lélegeztetési elégtelenségben szenvedő beteg rekeszizomjába, hogy kijavítsák a korai megjelenésű Pompe-ra jellemző légzési diszfunkciót. betegség (EOPD).

Az eredmények azt mutatták, hogy a vektor használata biztonságos és hatékony a lélegeztetési teljesítmény javításában minden alanynál.238 240 241 A Floridai Egyetem másik klinikai vizsgálata jelenleg is folyamatban van késői megjelenésű Pompe-kórban (LOPD) szenvedő betegeken.

A tanulmány értékeli az AAV(rAAV9-DES-hGAA) beadásának megismétlését egy bizonyos időszak után a GAA terápiás szintjének fenntartásához 242 felnőtt Pompe-betegeknél (ClinicalTrials.gov:NCT02240407).

Az előzetes eredmények arra utalnak, hogy az immunrendszer farmakológiai modulációja rituximabbal és szirolimusszal, az AAV adagolása előtt és alatt, megakadályozza az antitestek képződését, és lehetővé teszi az ismételt AAV adagolást. Az újszülöttek szűrése miatti korai beavatkozással ez fontos megfigyelés az izmot és a májat érintő LSD-k esetében, ahol a szomatikus növekedés a genom kópiaszámának csökkenését okozhatja.

A Floridateam Egyetem a Dr. Bönneman által vezetett NIH Klinikai Központ csapatával együttműködve tanulmányt is folytat az AAV-GAA intravénás dózisának biztonságosságának és hatékonyságának értékelésére EOPD-s gyermekeknél.

Az ebbe a vizsgálatba bevont betegek ugyanazt az immunmodulációs rendszert fogják kapni, mint a LOPD-vizsgálatban az AAV-ra és a GAA-ra adott immunválaszok kezelésére. A Floridai Egyetemen végzett munka mellett néhány más program is elindított klinikai programokat saját AAV-vektoraik tesztelésére olyan betegeknél, Pompe-kór.

A Spark Therapeutics engedélyt kapott arra, hogy részt vegyen az I/II. fázisú vektor-mediált májgéntranszferben a GAA esetében LOPD-ben. Ez a megközelítés a GAA stabil májban történő expresszióján alapul, amelyet AAV-vektor által közvetített géntranszfer révén érnek el, ami keresztkorrekciót eredményez a perifériás szervekben, és nincs nyilvánvaló immunogenitás a transzgénnel szemben (ClinicalTrials.gov: NCT04093349).

A preklinikai adatok ígéretes eredményeket mutattak, amelyek a GAA tartós plazmaszintjére utalnak.{0}} hónappal az adagolás után minden GAA-knockout (Gaa/) egér csökkent glikogén felhalmozódást mutatott; fokozott túlélés; és jobb szív-, légzés- és izomműködés a vad típusú egerekhez képest.

Az ERT-hez képest a Pompe-kór, az SPK{0}} jelenlegi ellátási standardja is hatékonyabb volt a túlzott glikogén felhalmozódás lebontásában és megszüntetésében a refrakter izomcsoportokban, amelyek jellemzően tompítják az ERT hatásait (Mendoza, 2018, International Congress of theWorld Muscle Society, konferencia).243

Az első humán klinikai vizsgálatok jelenleg folynak a Kaliforniai Egyetemen, az Irvine Health-en (ClinicalTrials.gov: NCT04093349). Az Asklepios Biopharmaceutical engedélyt kapott az afázis I/II. ACTUS-101 (AAV2/8LSPhGAA) két dózisszinten LOPD-ben szenvedő alanyoknál.

Májspecifikus promoter használatával ezt az AAV-vektort úgy állítottuk elő, hogy a GAA-t specifikusan expresszálja a májban, amit a szív- és vázizomzatban a GAA-szekréció és a receptor által közvetített GAA-felvétel kísér.

A központi hipotézis az, hogy a májraktárból történő folyamatos GAA-termelés több előnnyel jár, mint az ERT Pompe-kórban (ClinicalTrials.gov:NCT03533673). 2019. január 22-én az I/II. fázisú klinikai vizsgálat első betege kapott ACTUS-t-101.244

Gaucher-kór

A Gaucher-kór, az LSD-k közül a leggyakoribb, egy autoszomális recesszív LSD, amelyet a lizoszomális acidbéta-glükozidáz (glukocerebrozidáz) enzim hiánya okoz.

Bár a kezdetek típusa alapján heterogén, a fő klinikai hatások a hepatosplenomegalia, a neurodegeneráció, a csontbetegség és a tüdőszövődmények.245 Eddig két ex vivo génpótlási vizsgálatot végeztek Gaucher-kórra vonatkozóan.

A perifériás vér vagy CD{0}} sejtek retrovírus-transzdukciójával Dunbar és Kohn246 megvizsgálta egy olyan G1Gc vektor biztonságosságát, amely a virallong terminális ismétlés (LTR) promotert használja a humán glükocerebrozidáz cDNS expressziójára.247

A vizsgálat a korrigált sejtek átmeneti, alacsony szintű expresszióját eredményezte, azonban túl alacsony ahhoz, hogy bármilyen klinikai előnyt vagy megnövekedett glükocerebrozidáz enzimaktivitást eredményezzen.248

A második, jelenleg aktív génterápiás kísérletben az AVROBIO ex vivo lentivírus-alapú génterápiás megközelítést alkalmaz, amelynek célja a kívánt gének stabil integrációja a betegből származó hematopoetikus őssejtekbe (ClinicalTrials.gov:NCT04145037).

A preklinikai vizsgálatok pozitív eredményeket mutattak a lentivírus vektor szülői őssejtekbe történő integrációjában és az integrált utódsejtek hatékony replikációjában.249

Fabry-kór

A Fabry-kórt az a-galaktozidázA (a-Gal A) hiányos aktivitása jellemzi, ami glikolipidek (globotriaozilceramid [Gb3] és globotriaozil-szfingozin [LysoGb3]) felhalmozódását eredményezi a különböző szövetekben.

A klinikai megnyilvánulások közé tartozik a progresszív veseelégtelenség, szívbetegség, agyi érbetegség, bőrelváltozások és egyéb rendellenességek.250 251 Bár az ERT a jelenlegi standard a Fabry-betegek ellátásában, ennek megvannak a maga korlátai, ami fokozott érdeklődést vált ki a génpótló terápiák iránt. 252 253 közül kettő ex vivo megközelítést alkalmaz (AVROBIO és University Health Network, Toronto), míg másik kettő in vivo megközelítést alkalmaz (Sangamo Therapeutics és Freeline Therapeutics).

Az AVROBIO vektora (AVR-RD-01) hemopoetikus őssejtekből származik, amelyekhez az AGA-t kódoló gént ex vivo folyamatban, lentivírus vektort használva adják hozzá. A folyamatban lévő I/II. fázisú klinikai vizsgálatban (ClinicalTrials.gov: NCT03454893) az időközi adatok azt mutatták, hogy mind a négy, az I. fázisban adagolt betegnél megnövekedett az AGA enzimaktivitás szintje, mint a klasszikus Fabry-ban szenvedő betegek szintje (ESGCT AnnualMeeting abstract, Lausanne, 2018). .251 254 Az Egyetemi Egészségügyi Hálózat lentivírusos termékével kapcsolatos preklinikai vizsgálatok szintén ígéretes eredményeket mutattak.255

A University Health Network lentivirális a-Gal A transzdukált őssejtterápiáját jelenleg több kanadai klinikai vizsgálati helyen tesztelik (ClinicalTrials.gov: NCT02800070) (ASGCTAnnual Meeting abstract, San Diego, 2010).

Egy másik, a SangamoTherapeutics által szponzorált, első emberben végzett I/II-es fázisú vizsgálat egy AAV-vektort (rAAV2/6) használ a hiányos enzim előállítására klinikailag jelentős mértékben. Az ST-920 egy AAVvektor, amely a humán a-Gal A cDNS-ét kódolja egy májspecifikus promóterrel, amelyet arra terveztek, hogy lehetővé tegye a páciens májában az a-Gal A enzim folyamatos ellátását (ClinicalTrials.gov:NCT04046224).

Az állandó termelés várhatóan csökkenti a Gb3-at és a LysoGb3-at.251,256 Hasonlóképpen, a Freeline Therapeutics egy AAV-vektort (rAAV8) használ májspecifikus promoterrel az a-Gal A tartós magas szintjének előállítására.

A dózis-eszkalációs vizsgálatban a kezdő dózisra vonatkozó előzetes adatok a plazma-Gal A aktivitás 3--4--szeres növekedéséről számoltak be az adagolást követő 4. hétre, és ez az adatok határértékéig fennmaradt.251

2020. március 10-én az Európai Bizottság az Európai Gyógyszerügynökség Ritka Betegségek Gyógyszereivel Foglalkozó Bizottságának pozitív véleménye alapján az FLT190-es gyógyszert ritka betegségek gyógyszereként minősítette a Fabry-kór kezelésére.{3}}D Molecular Therapeutics génterápiás vizsgálatot is folytat. amelyre a közelmúltban nyitott az előjelentkezés.

MPS III típusú (MPS III)-Sanfilippo szindróma

Az MPS III, más néven Sanfilippo-szindróma, egy progresszív rendellenesség, amelyet a glükózaminoglikán idegsejtekben történő felhalmozódása jellemez.254 Az MPS III elsősorban a központi idegrendszert érinti, ami neurodegenerációhoz, progresszív értelmi fogyatékossághoz és fejlődési regresszióhoz vezet.

Mivel az agy az MPS III által leginkább érintett szerv, az agy-célzott génpótló terápiákat mind az MPS IIIA, mind az MPS IIIB esetében egyre inkább tanulmányozták különböző szponzorok, hasonló megközelítések alkalmazásával. A LYSOGENE, egy francia biotechnológiai cég az AAVrh.10-t használta az emberi SGSH hordozására. és SUMF1 cDNS-ek az MPS II kezelésére.

Az AAVrh.{0}}hMPS3A terápiás vektort négy gyermeknek adták be az I. fázisú első humán vizsgálatban intracerebrális injekciókkal. Mind a négy beteget egy évig követték az adagolás után.

A kísérlet eredményei azt bizonyították, hogy a beadás módja biztonságos a közvetlen AAV-vektor központi idegrendszerbe történő bejuttatására. A neurokognitív kiértékelések a legfiatalabb gyermeknél kognitív előnyökre utaltak, míg a három idősebb betegnél korlátozottabb.254,258uniQure Biopharma BV, intrakraniálisan is injekciók, humán aN-acetil-glükózaminidázt (NAGLU) kódoló rAAV2/5 vektort adtak be hét gyermeknek MPS IB kezelésére.

A beadást követően a NAGLU-aktivitás a központi idegrendszerben a kiindulási értékhez képest megemelkedett, az agysejtek enzimtermelése folyamatos. Valamennyi betegnél javult a neurokognitív értékelése, a legfiatalabb funkcionális közel volt az egészséges gyermekéhez.

Ezek az eredmények arra utalnak, hogy ez a megközelítés lassíthatja a kognitív hanyatlást MPS IB-ben szenvedő gyermekeknél.259 Az MPS-re vonatkozó további in vivo és ex vivo fázisú I/II génterápiás klinikai vizsgálatokat az 1. táblázat sorolja fel.

NCL-ek

Az NCL-ek öröklött, autoszomális, progresszív gyermekkori neurodegeneratív rendellenességek csoportja, amelyeket klinikailag demencia, epilepszia és a retina degenerációja miatti látásvesztés jellemez.

Az NCL-eket a ceroid lipofuscin felhalmozódása okozza az agy és a retina idegsejtjeiben. Napjainkig az NCL-nek 13 formája létezik, amelyek mindegyike a lizoszómális rendszerben lévő fehérjéket kódoló génekben eltérő hibával rendelkezik.260–262 Jelenleg az NCL-ekre nincs jóváhagyott kezelés.

Az NCL hatékony terápiájának megtalálása érdekében új génpótló stratégiákat tártak fel. Worrall és munkatársai 263 kifejlesztettek egy 2-es szerotípusú AAV vektort, amely a humán CLN2 cDNS-t (AAV2CUhCLN2) expresszálja, és a vektort 10 késői csecsemőkori NCL-ben (LINCL) szenvedő gyermek központi idegrendszerébe juttatták be. .262

A kontroll alanyokhoz képest a CNS-képalkotással értékelt betegség progressziója lassabb volt, bár statisztikailag nem szignifikáns, csökkent szürkeállományt és kamratérfogatot mutatott.

Figyelemre méltó, hogy a módosított hamburgi skála adagolás utáni eredményei szignifikánsan lassabb funkcionális hanyatlást mutattak a kontrollcsoporthoz képest. 262 263 In vivo megközelítéssel is Cain et al.

264 kifejlesztette a hCLN6 gént expresszáló ascAAV9 vektort az aCB hibrid promoter irányítása alatt.262 scAAV9.CB.hCLN6-ot intratekálisan injektáltunk 4- éves NHP-k CSF-ébe és intracerebroventricularisan (icv) egerekbe.

Magas transzgénexpressziót találtak az NHP-k agyában és gerincvelőjében, nagyon kevés laboratóriumi eltéréssel. Az egereknek beadott icvinjekció szintén ígéretes eredményeket mutatott, beleértve a klasszikus CLN6 agybetegség patológiájának megelőzését, a viselkedési hiányosságok korrekcióját és a túlélés növekedését.

Összességében az eredmények az scAAV9.CB.hCLN6.262,264 hatékonyságát és biztonságosságát jelzik. Ezt a megközelítést az Amicus Therapeutics alkalmazta, és jelenleg klinikailag vizsgálják Batten-kórban szenvedő betegeken (ClinicalTrials.-gov: NCT02725580). Az NCL-ek további in vivo fázisú I/II génterápiás klinikai vizsgálatait a 4. táblázat sorolja fel.

Következtetések

A fejlett terápiák megjelenése a lizoszómális raktározási betegségekben új lehetőségeket és remélhetőleg átalakuló terápiás lehetőségeket kínál a betegek számára.

Reméljük, hogy a terület érlelődik, hogy további biztonságos és hatékony terápiás lehetőségek széles körben elérhetőek lesznek. A génterápiás gyógyszerkészítmények beadására képesített szolgáltatók hálózatának létrehozása továbbra is kihívások elé állítja.

KÖSZÖNETNYILVÁNÍTÁS

Ezt a munkát az Egyesült Államok Nemzeti Egészségügyi Intézetének K08 HL 146991-01 pályázata (LAG és a Kanadai Egészségkutatási Intézet 18059. számú pályázata (JPT) támogatta)

SZERZŐI HOZZÁJÁRULÁSOK

A cikk megírásához minden szerző hozzájárult.

ÉRDEKLŐDÉSI NYILATKOZAT

Az AveXis, az Amicus, a Neurogene, az AffiniaTherapeutics és a Novartis tanácsadói díjakat kaptam. Az SJG jogdíj- és/vagy tanácsadói bevételben részesült az Asklepios Biopharma, a Neurogene, az Abeona Therapeutics, a Sarepta Therapeutics, a Vertex Pharmaceuticals, a LYSOGENE és az Amicus Therapeutics cégektől. A LAG rendelkezik egy VIII-as faktor variáns fehérje génterápiás felhasználásával kapcsolatos szellemi tulajdonnal, a Pfizer tanácsadójaként szolgált, és a SparkTherapeutics/Roche, illetve a Pfizer által szponzorált hemofília A és B fázis I/II vizsgálatok klinikai vezető kutatója.

IRODALOM

1. Burghes, AH és Beattie, CE (2009). Spinalis izomsorvadás: miért betegíti meg a motoros neuronok túlélési fehérje alacsony szintje? Nat. Neurosci tiszteletes. 10.597–609.

2. Verhaart, IEC, Robertson, A., Wilson, IJ, Aartsma-Rus, A., Cameron, S., Jones, CC, Cook, SF és Lochmüller, H. (2017). Az 5q-hez kötött spinális izomsorvadás prevalenciája, előfordulása és hordozó gyakorisága – irodalmi áttekintés. Orphanet J. RareDis. 12, 124.

3. Sugarman, E.A., Nagan, N., Zhu, H., Akmaev, V.R., Zhou, Z., Rohlfs, E.M., Flynn, K., Hendrickson, B.C., Scholl, T., Sirko-Osadsa, D.A., and Allitto, B.A. (2012). Panethnic carrier screening and prenatal diagnosis for spinal muscular atrophy: clinical laboratory analysis of >72 400 példány. Eur. J. Hum. Közönséges petymeg. 20, 27–32.

4. Lefebvre, S., Bürglen, L., Reboullet, S., Clermont, O., Burlet, P., Viollet, L., Benichou, B., Cruaud, C., Millasseau, P., Zeviani, M ., et al. (1995). A spinális izomsorvadást meghatározó gén azonosítása és jellemzése. 80. cella, 155–165.

5. Monani, UR, Lorson, CL, Parsons, DW, Prior, TW, Androphy, EJ, Burghes, AH, és McPherson, JD (1999). Egyetlen nukleotid különbség, amely megváltoztatja a splicing mintákat, megkülönbözteti az SMN1 SMA gént az SMN2 másolatgéntől. Zümmögés. Mol.Genet. 8, 1177–1183.

6. Lorson, CL, Hahnen, E., Androphy, EJ és Wirth, B. (1999). Az SMN gén egyetlen nukleotidja szabályozza az összeillesztést, és felelős a spinális izomsorvadásért.Proc. Natl. Acad. Sci. USA 96, 6307–6311.

7. Feldkötter, M., Schwarzer, V., Wirth, R., Wienker, TF, and Wirth, B. (2002). Az SMN1 és SMN2 kvantitatív elemzése valós idejű fényciklikus PCR alapján: gyors és nagyon megbízható hordozó a spinalis muscularatrophia súlyosságának vizsgálata és előrejelzése. Am. J. Hum. Közönséges petymeg. 70, 358–368.

8. Finkel, RS, McDermott, MP, Kaufmann, P., Darras, BT, Chung, WK, Sproule, DM, Kang, PB, Foley, AR, Yang, ML, Martens, WB és társai. (2014). Az I. típusú spinális izomsorvadás megfigyelési vizsgálata és a klinikai vizsgálatokra gyakorolt ​​következményei. Neurology 83, 810–817.

9. Foust, KD, Nurre, E., Montgomery, CL, Hernandez, A., Chan, CM és Kaspar, BK (2009). Az intravaszkuláris AAV9 elsősorban az újszülött idegsejteket és a felnőtt asztrocitákat célozza meg. Nat. Biotechnol. 27, 59–65.

10. Duque, S., Joussemet, B., Riviere, C., Marais, T., Dubreil, L., Douar, AM, Fyfe, J., Moullier, P., Colle, MA és Barkats, M. (2009). Az önkomplementer AAV9 intravénás beadása lehetővé teszi a transzgén eljuttatását a felnőtt motoros neuronokhoz.Mol. Ott. 17, 1187–1196.

11. Foust, KD, Wang, X., McGovern, VL, Braun, L., Bevan, AK, Haidet, AM, Le, TT, Morales, PR, Rich, MM, Burghes, AH és Kaspar, BK (2010) ). A spinális izomsorvadás fenotípus megmentése egérmodellben az SMN korai postnatális szállításával. Nat. Biotechnol. 28, 271–274.

12. Dominguez, E., Marais, T., Chatauret, N., Benkhelifa-Ziyyat, S., Duque, S., Ravassard, P., Carcenac, R., Astord, S., Pereira de Moura, A. , Voit, T. és Barkats, M. (2011). A kodonra optimalizált SMN1 szekvencia intravénás scAAV9 bejuttatása megmenti az SMA egereket. Zümmögés. Mol. Közönséges petymeg. 20, 681–693.

For more information:1950477648nn@gmail.com