Az echinakozid modulálja a CGAS–STING útvonalat, hogy enyhítse az LPS által kiváltott gyulladásos sérüléseket az alveoláris epiteliális sejtekben (A549)

 

Szerzői:Jianfeng Luo; Tao Bai
Kapcsolat:Ward 1, Department of Infectious Diseases, Wuhan Jinyintan Hospital, Wuhan 430000, Hubei, Kína

 

Kulcsfontosságú információk (természetes összetevőket tartalmazó és kiegészítő K+F olvasóknak)

Az LPS-expozíció megsértette az A549 alveoláris epiteliális sejteket, csökkenti a proliferációs markereket és növeli az apoptózist és a gyulladásos citokineket.

Az echinakozid (ECH) dózisfüggő védelmet mutatott: javult a sejtek életképessége/proliferációja és csökkent az apoptózis és a gyulladásos mediátorok.

Mechanikailag az előnyökhöz társultaka cGAS–STING–TBK1–IRF3 jelzőtengely leszabályozásamRNS és fehérje szinten egyaránt.

Egy cGAS-STING útvonal aktivátor (RocA) gyengítette/antagonizálta az ECH védő hatásait, az útvonal bevonásának támogatása.

Relevancia a botanikai fejlődés szempontjából: CistancheA (肉苁蓉) széles körben elismert, mint echinakozidban gazdag botanikai, így praktikus, a termékkel kapcsolatos kutatás és fejlesztés során figyelembe vehető alapanyag – emlékezve erre a tanulmányrain vitroés tisztított ECH-t használ.

1. táblázat: Az ECH és a RocA különböző koncentrációinak hatásai A549-sejtekre (OD570_{570}570​, xˉ±s\\bar{x}\\pm sxˉ±s, n=6n=6n=6)

Koncentráció (μmol/L)	ECH (OD570_{570}570​)	RocA (OD570_{570}570​)
0	0.45 ± 0.03	0.43 ± 0.04
3	0.42 ± 0.05	0.45 ± 0.06
6	0.43 ± 0.04	0.42 ± 0.05
9	0.46 ± 0.06	0.46 ± 0.07
12	0.44 ± 0.05	0.44 ± 0.05
24	0.47 ± 0.06	0.20 ± 0.03¹

F / P érték:ECH: 0,857/0,521; RocA: 22.050 /<0.001
Jegyzet:0 μmol/L-hez képest: ¹ P<0.05P<0.05P<0.05.

 

Absztrakt (újraírva angolul, pontról pontra)

Célkitűzés

Annak értékelésére, hogy vajonechinakozid (ECH)megvédi az emberi alveoláris hámsejteket alipopoliszacharid (LPS) által kiváltott gyulladásos sérülés, és hogy ez a védelem kapcsolódik-e a szabályozáshozcGAS–STINGjelzőútvonal.

Módszerek (tanulmánytervezés)

Sejtmodell:Humán alveoláris epitél sejtvonalA549.

Citotoxicitás/életképesség szűrés:MTT vizsgálat az ECH és a cGAS-STING útvonal aktivátorának tesztelésére (RocA) toxicitásra.

Csoportosítás:

Kontroll (standard tenyészet)

LPS (30 mg/L)

LPS + ECH alacsony/közepes/magas dózis (9, 12, 24 μmol/L)

LPS + ECH (24 μmol/L) + RocA (12 nmol/l)

Végpontok:

Elterjedése:EdU festésésPCNA(Western blot)

Apoptózis:Áramlási citometria (Annexin V-FITC/PI); Bax/Bcl‑2(Western blot)

Gyulladás:TNF-, IL-6felülúszóban (ELISA)

Az útvonal kijelzései:cGAS, STING mRNS(qRT-PCR);cGAS, STING, TBK1, IRF3 fehérjék(Western blot)

 

2. táblázat: Az EdU-pozitív arány, a PCNA expresszió, az apoptózis aránya, a Bax/Bcl-2 expresszió és a TNF-/IL-6 szintjei A549 sejtekben csoportonként (xˉ±s\\bar{x}\\pm sxˉ±s, n=6n=6n=6)

Csoport	EdU-pozitív arány	PCNA/GAPDH	Apoptózis aránya (%)	Bax/GAPDH	Bcl-2/GAPDH	TNF- (ug/ml)	IL-6 (ng/ml)
Ellenőrzés	57.38 ± 3.24	1.67 ± 0.15	4.38 ± 1.09	0.37 ± 0.06	1.63 ± 0.12	4.65 ± 1.08	18.47 ± 1.19
LPS	27.51 ± 1.68¹	0.49 ± 0.08¹	36.75 ± 2.31¹	1.59 ± 0.13¹	0.28 ± 0.06¹	30.71 ± 1.68¹	49.23 ± 2.75¹
ECH-L	33.72 ± 1.96²	0.86 ± 0.10²	29.16 ± 2.27²	1.24 ± 0.11²	0.67 ± 0.08²	22.58 ± 1.52²	41.78 ± 2.46²
ECH-M	40.59 ± 2.40²,³	1.27 ± 0.13²,³	21.93 ± 1.64²,³	0.85 ± 0.09²,³	1.08 ± 0.10²,³	15.83 ± 1.16²,³	32.64 ± 2.18²,³
ECH-H	48.21 ± 2.57²,³,⁴	1.58 ± 0.14²,³,⁴	13.86 ± 1.45²,³,⁴	0.49 ± 0.08²,³,⁴	1.35 ± 0.11²,³,⁴	7.91 ± 1.13²,³,⁴	23.59 ± 1.57²,³,⁴
RocA	35.79 ± 2.38⁵	0.92 ± 0.11⁵	25.74 ± 1.69⁵	0.93 ± 0.10⁵	0.74 ± 0.09⁵	19.76 ± 1.20⁵	36.78 ± 2.61⁵

F érték: 118.927; 85.600; 245.724; 131.552; 159.598; 321.852; 161.353
P érték:minden<0.001

Megjegyzések (többszöri összehasonlítás):
ÖsszehasonlítvaEllenőrzés: ¹ P<0.05P<0.05P<0.05
ÖsszehasonlítvaLPS: ² P<0.05P<0.05P<0.05
ÖsszehasonlítvaECH-L: ³ P<0.05P<0.05P<0.05
ÖsszehasonlítvaECH-M: ⁴ P<0.05P<0.05P<0.05
ÖsszehasonlítvaECH-H: ⁵ P<0.05P<0.05P<0.05

 

 

Eredmények (főbb megállapítások)

A Controlhoz képestLPS:

CsökkentEdU-pozitív arány,PCNA, ésBcl-2

Fokozottapoptózis aránya,TNF-, IL-6

FelszabályozottcGAS és STING mRNS szinten

FokozottBax és cGAS-STING útvonal fehérjék (cGAS, STING, TBK1, IRF3)
(Minden statisztikailag szignifikáns, P<0.05P<0.05P<0.05.)

Egyedül az LPS-hez képestECH (9→12→24 μmol/L)dózistól függően:

Helyreállított proliferáció(magasabb EdU-pozitív arány és PCNA)

Csökkentett apoptózis(alacsonyabb apoptózis arány, alacsonyabb Bax, magasabb Bcl-2)

Elfojtott gyulladás(alacsonyabb TNF- és IL-6)

Alulszabályozott cGAS–STING jelzés(alacsonyabb cGAS/STING mRNS; alacsonyabb cGAS, STING, TBK1, IRF3 fehérjék)
(Dózisfüggő, P<0.05P<0.05P<0.05.)

RocA ellentmondottAz ECH védelme LPS sérülési körülmények között (P<0.05P<0.05P<0.05), consistent with cGAS–STING pathway involvement.

Következtetés

ECHfokozott életképesség és proliferatív aktivitásLPS-fertőzött alveoláris epiteliális sejtek éselnyomta az apoptózist és a gyulladásos válaszokat. A védelmi mechanizmus valószínűleg összefügga túlaktivált cGAS-STING jelzés gátlása/blokkolása.

 

Háttér (miért számít ez)

LPS-nek (egy fő Gram-negatív bakteriális komponens) kitett vagy azzal fertőzött betegeknél,akut tüdőkárosodás (ALI)és súlyos formájaARDSa morbiditás és a halálozás kulcsfontosságú tényezői. Jellemző patológia magában foglalja a diffúz sérüléstalveoláris háméskapilláris endotélium, ami gát szivárgásához és tüdőödémához vezet.

A szupportív ellátás terén elért haladás ellenére,a hatékony célzott terápiák korlátozottak, ezért fontos az új gyógyszerjelöltek és célpontok azonosítása.

Echinakozid (ECH)egy fenil-etanoid glikozid, amelynek antioxidáns, gyulladásgátló, citoprotektív és anti-apoptotikus hatásai vannak.
Természetes termékek fejlesztői számára:Cisztanche (肉苁蓉)egy hagyományos botanikai, amelyet gyakran kiemelnekechinakozidban gazdag, ami praktikus forrásanyaggá teszi az ECH-orientált készítmények feltárásakor – miközben a sejtteszteken túl gondos szabványosítást és fordítási munkát is igényel.

AcGAS–STING útvonalegy citoszolikus DNS-érzékelő tengely, amely elősegíti az I. típusú interferon és a gyulladásos mediátor termelését. A bizonyítékok arra utalnaktúlzott aktiválásA cGAS-STING hozzájárul a gyulladásos és autoimmun patológiához, és ennek a túlzott aktivációnak a visszaszorítása segíthet a gyulladásos tüdőkárosodás mérséklésében.

 

Anyagok és módszerek (K+F-barát összefoglaló)

Sejtvonal és tenyészet

Az A549 sejteket tenyésztjükalacsony glükóz DMEM-vel10% FBSés1% antibiotikum, közepes változtatásokkal 2 naponta. A kísérleteket a~80-90%-os összefolyás.

Reagensek (magas szintű)

ECH(az eredeti papíron feltüntetett szállítói adatok)

LPS

RocA(itt mint acGAS–STING útvonal aktivátor)

Assay készletek: MTT, EdU, apoptózis kit (Annexin V-FITC/PI), ELISA készletek TNF- és IL-6-hoz

Molekuláris vizsgálatok: RNS extrakció, reverz transzkripció, qRT-PCR reagensek; Western blot antitestek (PCNA, Bax, Bcl-2, cGAS, STING, TBK1, IRF3, GAPDH)

Dózis kiválasztása (életképességi szűrés)

ECH (0–24 μmol/L)mutattanincs jelentős citotoxicitásA549 sejtekben és ezért9/12/24 μmol/Lhasználtak.

RocAbelül nem volt mérgező0-12 nmol/L, míg a magasabb koncentráció csökkentette az életképességet;12 nmol/lkiválasztották.

LPS sérülés indukciója és csoportosítása

LPS sérülést okoztak30 mg/l LPS.

A kezelési ágak az Absztraktban leírtak voltak (kontroll; LPS; LPS+ECH alacsony/közepes/magas; LPS+ECH magas+RocA).

Eredménymérések

Elterjedése:EdU-pozitív sejtek fluoreszcens mikroszkóppal; PCNA Western blot módszerrel.

Apoptózis:Áramlási citometria (Annexin V-FITC/PI); Bax és Bcl-2 fehérjeszint.

Gyulladásközvetítők:TNF- és IL-6 a tenyészet felülúszójában ELISA-val.

Útvonal kifejezés:cGAS és STING mRNS qRT-PCR-rel, belső kontrollként GAPDH használatával; fehérjéket (cGAS, STING, TBK1, IRF3) Western-blottal.

Statisztika:ANOVA SNK-q post-hoc teszteléssel (GraphPad Prism 9.0), a szignifikancia beállítása P<0.05P<0.05P<0.05.

 

Eredmények (mi változott az LPS-sel, az ECH-val és a RocA-val)

1) A sejtek életképessége / toxicitási ablaka

Az ECH jól tolerálható volt a mechanikai vizsgálatokhoz használt tesztelt tartományig.

A RocA óvatos adagolást igényelt; nem mérgező munkakoncentrációt választottak.

1. ábra: A549 sejtproliferáció minden csoportban (EDU festés, × 200)

 

2) A proliferációt az LPS elnyomta, és az ECH helyreállította

LPS csökkentettEdu beépítéseésPCNAexpresszióját, ami csökkent proliferatív aktivitást jelez.

Az ECH növelte az Edu-pozitív arányt és a PCNA-tdózisfüggő módon.

A RocA hozzáadása csökkentette ezeket a nyereségeket, ami arra utal, hogy az útvonal hozzájárul az ECH túlélést/proliferációt elősegítő hatásához.

3) Az apoptózis fokozódott az LPS hatására, és az ECH gátolta

Az LPS növelte az apoptózis rátáját, növelteBax, és csökkentBcl-2.

Az ECH ezeket a változásokat dózisfüggően megfordította (alacsonyabb apoptózis arány és Bax, magasabb Bcl-2).

A RocA a fenotípust az apoptózis felé tolja vissza, gyengítve az ECH-védelmet.

2. ábra: A PCNA, Bax és Bcl-2 expresszió Western-blot analízise az egyes csoportokban

 

4) A gyulladásos citokinek (TNF-, IL-6) mennyiségét csökkentette az ECH

Az LPS megemelte a TNF- és IL-6-szintet a felülúszókban.

Az ECH mindkét citokint dózisfüggően csökkentette.

A RocA növelte ezeket a nagy dózisú ECH-hoz képest, ami összhangban van a gyulladást felerősítő útvonal reaktivációjával.

5) A cGAS és STING transzkripciót az LPS indukálta, és az ECH elnyomta

Az LPS nőttcGAS és STING mRNS.

Az ECH csökkentette expressziójukat (dózisfüggő).

A RocA növelte az expressziót az ECH magas dózisához képest.

3. ábra: Az A549 sejt apoptózisának összehasonlítása az egyes csoportokban

 

6) A cGAS–STING útvonal fehérjéket az ECH csökkentette

Az LPS nőttcGAS, STING, TBK1 és IRF3fehérje expresszió.

Az ECH dózisfüggően csökkentette ezeket a fehérjéket.

A RocA növelte az útvonal fehérjeszintjét, szemben az egyedüli nagy dózisú ECH-val.

 

3. táblázat. A cGAS/STING mRNS és a cGAS–STING útvonal fehérje expressziójának összehasonlítása A549 sejtekben a csoportok között (xˉ±s\\bar{x}\\pm sxˉ±s, n=6n=6n=6)

Csoport	cGAS mRNS	STING mRNS	cGAS/GAPDH	STING/GAPDH	TBK1/GAPDH	IRF3/GAPDH
Ellenőrzés	1.00 ± 0.12	1.00 ± 0.11	0.32 ± 0.07	0.36 ± 0.08	0.29 ± 0.05	0.25 ± 0.06
LPS	2.15 ± 0.16¹	2.28 ± 0.17¹	1.68 ± 0.13¹	1.85 ± 0.16¹	1.57 ± 0.13¹	1.62 ± 0.14¹
ECH-L	1.74 ± 0.13²	1.83 ± 0.14²	1.34 ± 0.12²	1.42 ± 0.13²	1.24 ± 0.11²	1.23 ± 0.12²
ECH-M	1.36 ± 0.11²,³	1.31 ± 0.12²,³	0.82 ± 0.09²,³	1.03 ± 0.11²,³	0.86 ± 0.09²,³	0.78 ± 0.09²,³
ECH-H	0.73 ± 0.09²,³,⁴	0.62 ± 0.08²,³,⁴	0.45 ± 0.08²,³,⁴	0.57 ± 0.09²,³,⁴	0.47 ± 0.08²,³,⁴	0.38 ± 0.07²,³,⁴
RocA	1.58 ± 0.12⁵	1.69 ± 0.15⁵	1.17 ± 0.11⁵	1.28 ± 0.14⁵	1.12 ± 0.10⁵	0.97 ± 0.10⁵

F / P értékek:

cGAS mRNS: 103,612 /<0.001

STING mRNS: 124,857 /<0.001

cGAS/GAPDH: 160.066 /<0.001

STING/GAPDH: 124.141 /<0.001

TBK1/GAPDH: 150.139 /<0.001

IRF3/GAPDH: 158.576 /<0.001

 

4. ábra: cGAS-STING útvonal fehérje expressziója az egyes csoportok sejtjeiben

 

Beszélgetés (értelmezés a termék és a mechanizmus olvasói számára)

Az LPS-t általában a gyulladásos tüdőkárosodás modellezésére használják. Itt az LPS közvetlenül károsította az alveoláris epiteliális sejtek proliferációs kapacitását és elősegítette az apoptózist, amelyet megemelkedett TNF- és IL-6-két citokin kísért, amelyek széles körben kapcsolódnak a gyulladásos tüdőkárosodáshoz.

Az ECH úgy járt el, mint acitoprotektív és gyulladásgátló szerebben az in vitro környezetben, összhangban azokkal a korábbi jelentésekkel, amelyek szerint az ECH enyhítheti az oxidatív stresszt, a gyulladást és az apoptózist tüdősérülések esetén.

A cGAS–STING tengely (és a lefelé irányuló TBK1/IRF3) mechanikus csomópontnak tűnik:Az ECH csökkentette a cGAS–STING útvonal markereket, ésA RocA tompította az ECH előnyeit, alátámasztva azt a hipotézist, hogy az ECH legalább részben megvédi a sejteketgátolja a túlzott cGAS-STING aktiválást.

Mit sugall ez a természetes botanikai fejlődésre (Cistanche kontextus)

MertCisztanche (肉苁蓉)az ismertmagas echinakozid tartalom, ez logikus botanikai jelölt az ECH-központú készítmények feltárása során, amelyek célja a gyulladásos egyensúly és a hámvédelem témaköre.

Ennek a kiegészítőkre történő lefordítása azonban óvatosságot igényel: ez a munka azsejtvonal alapú, használLPS sérüléséstisztított ECH, és nem állapít meg humán hatékonyságot, orális biohasznosulást, metabolizmust vagy klinikailag releváns adagolást.

Korlátozások és következő lépések (a szerzők szerint)

A megállapításokat hitelesíteni kellin vivo ALI/ARDS modellekfiziológiás körülmények között a cGAS-STING hatékonyságának és mechanikai kapcsolatának megerősítésére.

További munkára lenne szükség az upstream triggerek feltérképezésére és annak megerősítésére, hogy a hatások közvetlen útgátlást jelentenek-e, szemben a csökkent sejtstressz másodlagos hatásával.

 

Referenciák (megőrizve, hiánytalanul)

Li N, Liu B, Xiong R és mtsai. A HDAC3-hiány védelmet nyújt az akut tüdősérülés ellen azáltal, hogy fenntartja az epiteliális gát integritását a mitokondriális minőségellenőrzés megőrzésével.Redox Biol, 2023;63(1):102746-61.

Long ME, Mallampalli RK, Horowitz JC. A tüdőgyulladás és az akut tüdőkárosodás patogenezise.Clin Sci (londoni), 2022;136(10):747-69.

Mokrý Kr. u. Akut tüdősérülés – a patofiziológiától a kezelésig.Physiol Res, 2020;69 (3. melléklet): S353-66.

Wang W, Jiang S, Zhao Y és mások. Echinakozid: ígéretes aktív természetes termékek és farmakológiai hatóanyagok.Pharmacol Res, 2023;197(1):106951-66.

Pan Y, Liu Y. Az echinacoside enyhíti a légutak átépülését és a gyulladást az asztma ovalbumin-indukálta újszülött egérmodelljében a SIRT1-NF-κB útvonal modulálásával.Allergol Immunopathol (Madr), 2023;51(4):71-7.

Cui YH, Li KF, Jin B és mtsai. Az echinakozid gátolja a bleomicin által kiváltott tüdőepiteliális sejtkárosodást és a gyulladásos választ.Kínai kórélettani folyóirat, 2021;37(11):2024-30.

Xie W, Deng L, Lin M és mtsai. A Sirtuin1 a NOX4-Nrf2 tengely szabályozásán keresztül közvetíti az echinakozid védőhatását a szepszis által kiváltott akut tüdőkárosodás ellen.Antioxidánsok (Bázel), 2023;12(11):1925-45.

Alonso Paiva IM, Santos AR, Brito CB és mások. A cGAS/STING útvonal szerepe a szabályozásbanBrucella abortuslégúti úton szerzett fertőzés.Front Immunol, 2023;14:1116811.

Zhao J, Zhen N, Zhou Q és mtsai. A NET-ek elősegítik a gyulladásos sérülést azáltal, hogy aktiválják a cGAS-STING útvonalat akut tüdőkárosodásban.Int J Mol Sci, 2023;24(6):5125-45.

Wu X, Jiang Y, Li R és munkatársai. Az alveoláris makrofág exoszómák által kiválasztott ficolin B a cGAS-STING jelátviteli útvonalon keresztül ferroptózison keresztül súlyosbítja a bleomicin által kiváltott tüdőkárosodást.Cell Death Dis, 2023;14(8):577-92.

Zhang SW, Cheng SL, Xing QF. A pachiminsav a cGAS-STING jelátviteli útvonal gátlásával enyhíti a vastagbél epitélsejt sérülését fekélyes vastagbélgyulladásban patkányokban.Immunológiai folyóirat(Kína), 2023;39(8):672-80.

Zhang JJ, Li YY, Qin J. Az lncRNA LUCAT1 a miR-203a-3p-t célozza meg, hogy befolyásolja az apoptózist és a gyulladásos választ az LPS-indukált alveoláris II-es típusú epiteliális sejtekben.Immunológiai folyóirat(Kína), 2023;39(8):689-95.

Li J, Deng SH, Li J és mtsai. Az obakunon enyhíti a ferroptózist lipopoliszacharidok által kiváltott akut tüdőkárosodás során azáltal, hogy szabályozza az Nrf2-függő antioxidáns válaszokat.Cell Mol Biol Lett, 2022;27(1):29-48.

Hong H, Lou S, Zheng F és mtsai. A Hydnocarpin D gyengíti a lipopoliszacharidok által kiváltott akut tüdőkárosodást a MAPK/NF-κB és a Keap1/Nrf2/HO-1 útvonalon keresztül.Fitomedicina, 2022;101(1):154143-50.

Sasaki M, Kishimoto M, Itakura Y és mások. A levegő-folyadék interfázisos tenyészet a SARS-CoV-2 érzékenységét biztosítja az A549 alveoláris hámsejtekkel szemben.Biochem Biophys Res Commun, 2021;577:146-51.

Wang Y, Fan Y, Huang Y és mások. A TRIM28 szabályozza a SARS-CoV-2 sejtbejutást az ACE2 megcélzásával.Cell Signal, 2021;85:110064.

Yang X, Ma L. A propofollal végzett utókezelés gátolja a gyulladásos választ az LPS-indukált alveoláris II-es típusú epiteliális sejtekben.Exp Ther Med, 2022;23(4):249.

Duan XY, Sun Y, Zhao ZF és mások. A baicalin gyengíti az LPS-indukált alveoláris II-es típusú hámsejt A549 sérülését az FSTL1 jelátviteli útvonal gyengítésével a miR-200b-3p expresszió növelésével.Veleszületett immunitás, 2021;27(4):294-312.

Lei X, Liu X, Yu J és munkatársai . 3-metil-adenin az oxidatív károsodás és az apoptózis gátlásával javítja az akut tüdőkárosodást.Heliyon, 2024;10(13):e33996.

Li M, Song J, Tang X és mtsai. A PAI-1 kritikus szerepe a lipopoliszacharidok által kiváltott akut tüdőkárosodásban.Adv Med Sci, 2024;69(1):90-102.

Jiang T, Yuan D, Wang R és mások. Az echinakozid, egy ígéretes sortáz A inhibitor, vankomicinnel kombinálva az MRSA-indukált tüdőgyulladás egérmodelljei ellen.Med Microbiol Immunol, 2023;212(6):421-35.

Yang Y, Liu Y, Wang Y és mások. A SIRT1 szabályozása és szerepe a gyulladásban.Front Immunol, 2022;13(1):831168-83.

Jiang Z, Jiang Y, Fan J és mások. A cGAS gátlása javítja a cink-oxid nanorészecskék által kiváltott akut tüdőkárosodást.Toxicol Lett, 2023;373(1):62-75.

Domizio JD, Gulen MF, Saidoune F és munkatársai. A cGAS-STING útvonal az I-es típusú IFN immunpatológiáját irányítja a COVID-19-ben.Természet, 2022;603(7899):145-51.

Messaoud-nacer Y, Culerier E, Rose S és mások. A STING agonista diABZI PANoptosist és DNS-közvetített akut légzési distressz szindrómát (ARDS) indukál.Cell Death Dis, 2022;13(3):269-85.

Wen J, Qin S, Li Y és mtsai. Az édesgyökérből származó flavonoidok elnyomják az LPS által kiváltott akut tüdőkárosodást egerekben a cGAS-STING jelátviteli útvonal gátlásával.Food Chem Toxicol, 2023;175(1):113732.

 

A Cistanche (肉苁蓉) kivonatgyártóról (termékfejlesztőknek)

Felfedező csapatoknakCistanche alapútermészetes összetevők fejlesztése – különösen szabványosított kivonatokechinakozid- a gyártói háttérrel és képességekkel kapcsolatos információk itt találhatók:
https://www.xjcistanche.com/about-us